精品解析：黑龙江省哈尔滨市第三中学校2024-2025学年高二下学期4月月考生物试卷

哈三中2024-2025学年度下学期高二学年月考考试 生物学试卷 Ⅰ卷（选择题） 一.单项选择题（本题共20道小题，每题只有一个选项符合题意，每题1.5分，共30分） 1. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ） A. 所用菌种是天然存在的微生物 B. 发酵所用的微生物均为原核生物 C. 通常规模较小，多为家庭式或作坊式的 D. 以混合菌种的固体发酵或半固体发酵为主 2. 传统发酵食品的制作离不开各种各样的微生物。例如醋酸菌常用于食醋的发酵，酵母菌常用于各种酒类的发酵。下列叙述中正确的是（ ） A. 食用醋的酸味主要来源于乳酸 B. 醋酸菌不适宜在无氧条件下生存 C. 酒的酿制过程中需要先密封后通气 D. 酒的酿制过程中需要保持30～35℃ 3. 下列关于微生物实验室培养的叙述，正确的是（ ） A. 配制培养基时，应先灭菌再调节pH B. 纯培养物就是不含代谢废物的微生物培养物 C. 培养乳酸杆菌时，培养基中需添加维生素 D. 微生物在液体培养基内部可形成菌落 4. 下列关于灭菌和消毒的理解，错误的是（ ） A. 灭菌和消毒能有效避免操作者被微生物感染 B. 接种环在使用前后均需要进行灼烧灭菌 C. 配制好的培养基通常用干热灭菌法灭菌 D. 除物理、化学方法外，还可用生物方法进行消毒 5. 下列有关微生物的分离、培养与计数的叙述，错误的是（ ） A. 倒平板时，应将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙 B. 等待培养基冷凝后，需要将平板倒置保存 C. 平板划线时，接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线 D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 6. 判断某种选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（ ） A. 未接种的该选择培养基 B. 接种了的该选择培养基 C. 未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 D. 接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 7. 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（ ） A. 菌落中的细菌数目是固定的 B. 平板上的一个菌落就是一个细菌 C. 通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 8. 下列关于发酵工程基本环节及应用的叙述，错误的是（ ） A. 发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节 B. 酵母菌生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂 C. 利用黑曲霉水解大豆中的蛋白质，经淋洗、调制成酱油产品 D. 为避免杂菌污染，发酵所需菌种和培养基都必须经严格灭菌 9. 植物组织培养的方法步骤是（ ） ①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽等器官③愈伤组织④再分化⑤脱分化⑥植物体 A. ①⑤③④②⑥ B. ①④③⑤②⑥ C. ①②⑤③④⑥ D. ①③⑤④②⑥ 10. 如图所示为植物体细胞杂交技术的部分过程，错误的是（ ） A. 该技术依据的原理之一是细胞膜具有一定的流动性 B. 从细胞A和B到C的过程中，可以用离心法诱导融合 C. 植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞 D. 该技术能打破生殖隔离，培育植物新品种 11. 下列有关细胞全能性的叙述正确的是（ ） A. 只有植物的分生区细胞具有全能性，其他细胞没有全能性 B. 花粉经离体培养发育成单倍体植株说明植物细胞有全能性 C. 用植物的种子繁殖后代说明植物细胞有全能性 D. 细胞分化程度越高，全能性越高，分裂能力越强 12. 为了防止某株名贵花卉用种子繁殖发生性状分离，并实现快速繁殖，可用该植株的部分器官或组织进行离体培养得到完整植株。进行离体培养时不应采用该植株的（ ） A. 花粉粒 B. 花瓣 C. 叶片 D. 茎尖 13. 马铃薯（4n＝48）是一种营养价值丰富的粮食和经济作物。植物细胞工程技术在马铃薯的繁殖、育种等方面有广泛的应用。下列叙述错误的是（　　） A. 微型繁殖技术可以保持优良马铃薯品种的遗传特性 B. 取马铃薯的花药进行离体培养得到的单倍体植株是可育的 C. 组织培养过程中，处于不断增殖状态的马铃薯细胞易发生突变 D. 采用茎尖组织培养技术可以获得具备抗病毒能力的幼苗 14. 下列动物细胞培养过程中，属于原代培养的是（ ） A. 把组织分散成单个细胞的过程 B. 哺乳动物细胞在培养液中的悬浮生长过程 C. 组织分散成细胞后的初次培养过程 D. 细胞分裂受阻后转入新培养液的培养过程 15. 研究人员取胰岛B细胞功能受损的糖尿病患者的成纤维细胞，在加入特殊诱导因子促进Sox2，Klf4，Oct4，c-Myc（简称SKOM）4种基因表达的孵化器中培养得到多能干细胞（iPS细胞），再定向诱导分化为可移植的正常胰岛B细胞。下列叙述正确的是（ ） A. SKOM中可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期 B. 孵化器中要加入动物血清来防止动物细胞受病原体侵染 C. 导入的SKOM使成纤维细胞具有衰老细胞的特征 D. iPS细胞分化为胰岛B细胞的过程体现了细胞的全能性 16. 下列有关植物体细胞杂交与动物细胞融合的叙述，正确的是（ ） A. 应用的原理都涉及细胞膜具有选择透过性 B. 都需要使用CO2培养箱 C. 都需要对融合后的细胞进行筛选 D. 成功标志都是得到具有双亲优良性状的杂种个体 17. 甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述错误的是（ ） A. 需要制备用PHT免疫的小鼠 B. 需要使用动物细胞核移植技术 C. 用特定的选择培养基将杂交瘤细胞筛选出来 D. 应筛选能分泌所需特定抗体的单个杂交瘤细胞 18. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如下图所示。ADC通常由抗体、接头和药物三部分构成。下列说法错误的是（ ） A. 给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞 B. 经步骤①所得到的细胞都能分泌所需的特定抗体 C. 杂交瘤细胞可通过注射到小鼠腹腔内的方式达到增殖 D. 使用ADC的目的是使药物精准作用于靶细胞，避免其他细胞受损 19. 下列有关核移植的说法，错误的是（ ） A. 可以通过显微操作法去掉卵母细胞的核 B. 该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作 C. 通常采用受精卵作为供体细胞 D. 利用体细胞核移植技术可加速家畜遗传改良进程 20. 下列有关动物细胞核移植技术和克隆动物的说法，错误的是（ ） A. 克隆动物的个体发育过程发生了细胞的增殖、分化、衰老和凋亡 B. 体细胞核移植技术发展到今天已相当成熟，成功率较高 C. 利用动物细胞核移植技术可以有选择地繁殖某一性别的动物个体 D. 绝大多数克隆动物存在健康问题，如体型过大、脏器缺陷等 二.不定项选择题（本题共5道小题，每题至少有一个选项符合题意。每题3分，全部选对得3分，选对但选不全得1分，有错选不1得分，共15分） 21. 某些微生物能合成几丁质酶，使几丁质降解。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。下列相关叙述正确的是（ ） A. 土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养 B. 除几丁质外培养基中还需添加氮源、无机盐、水等 C. 目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法 D. 水解圈直径与菌落直径的比值越小，则微生物降解几丁质能力越大 22. 人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用植物细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下，下列叙述正确的是（ ） A. 诱导得①的培养基中需添加细胞分裂素与生长素 B. 射线处理①可能会获得人参皂苷高产的细胞 C. 悬浮培养的培养基无需经过灭菌处理 D. 利用该技术生产人参皂苷可减少植物资源的消耗 23. 下图为利用正常的小鼠细胞进行动物细胞培养的过程，①～④表示相关过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程①可以使用机械法或胃蛋白酶等将组织分散成细胞 B. 过程②和过程④中细胞只能贴壁生长 C. 培养细胞2需要贴附于基质表面生长，可直接用离心法进行收集 D. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等 24. 某抗原有a～d四个抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由该抗原刺激产生的不同抗体统称为多克隆抗体。如图是某同学绘制的制备该抗原单克隆抗体（单抗）和多克隆抗体（多抗）的过程示意图，相关叙述正确的是（ ） A. 不同类型的淋巴细胞之间不可能发生动物细胞融合 B. 若该抗原部分结构改变，可能会出现原单抗失效而多抗仍有效 C. 多抗可以从血清中直接分离，但是不能大量制备且特异性差 D. 单克隆抗体可以制成诊断试剂，也可以用于疾病治疗 25. 某实验小组从母羊甲的体细胞中提取细胞核，注入到母羊乙的去核卵母细胞中，体外培养一段时间后移植到另一只母羊丙的子宫内，最终顺利产下丁羊。下列叙述错误的是（ ） A. 丁羊的性状与母羊甲完全相同 B. 母羊丙没有为丁羊提供遗传物质 C. 该生殖方式为有性生殖 D. 丁羊可作为动物细胞具有全能性的证据 Ⅱ卷（非选择题） 三.非选择题（本题共4道小题，共55分） 26. 合成塑料是一种非天然的石油基塑料，由于分子量过大而难以通过生物膜被微生物降解。研究发现，某些昆虫的肠道内存在PE（一种合成塑料）降解细菌。现欲从昆虫的肠道中筛选能够降解PE的菌株，过程如下图1所示。 （1）选择培养过程中，培养基中应加入______作为唯一碳源，选择培养的目的是_________________。 （2）采用平板划线法纯化培养过程中，接种环在固体培养基的表面连续划线的目的是________________________。某研究团队从昆虫肠道中筛选出能够降解PE的细菌通过如图2所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的稀释液0.1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器______后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，4个平板上菌落数分别为64个、58个、50个、60个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为__________个，该数据往往比活菌的实际数目______（填“多”或“少”），原因是_______________________。 27. 人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。如图是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答： （1）图中向小鼠注射的A是_____。与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是_____。 （2）图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，该细胞有_____的特点。筛选②需要进行克隆化培养和_____。 （3）从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞工程中的_____和_____两大技术。对应的原理分别是_____、_____。 （4）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而且绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这体现了单克隆抗体的优点是_____。 28. 2017年，我国科学家应用动物细胞核移植技术成功克隆出了猕猴“中中”和“华华”，该成果标志着中国体细胞克隆技术走向成熟，实验用疾病模型猴批量克隆成为现实。下图表示体细胞克隆猴的技术流程，据图回答问题： （1）“去核”实质上指去除_______________。将体细胞注射入去核的卵母细胞后，一般通过________（填方法）使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成___________。 （2）选择猕猴胚胎成纤维细胞进行体细胞核移植的难度要明显_________（填“高于”或“低于”）胚胎细胞，原因是___________。 （3）培养猕猴胚胎成纤维细胞时，必须保证环境是__________的，培养液需定期更换，目的是_________。将它们置于CO2培养箱中进行培养，其混合气体组成为__________，其中二氧化碳的作用是________________。 （4）同一个体的体细胞克隆猴作为实验用疾病模型猴的理想材料，便于比对不同实验条件对核遗传物质表达结果的影响，原因是_______________。 29. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图。 （1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70％乙醇和5％的次氯酸钠对其______，每次处理后用______冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 （2）上图①过程利用________酶处理获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合以及再生）。过程②利用化学诱导剂__________诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带_________________的原生质体。原生质体培养液中通常还需要加入适宜浓度的甘露醇，其作用是__________。 （3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤 组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接 混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①表格中C组的实验处理为____________。 ②若实验结果为______________，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 哈三中2024-2025学年度下学期高二学年月考考试 生物学试卷 Ⅰ卷（选择题） 一.单项选择题（本题共20道小题，每题只有一个选项符合题意，每题1.5分，共30分） 1. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ） A. 所用菌种是天然存在的微生物 B. 发酵所用的微生物均为原核生物 C. 通常规模较小，多为家庭式或作坊式的 D. 以混合菌种的固体发酵或半固体发酵为主 【答案】B 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、传统发酵技术是利用天然存在的微生物进行发酵的，例如制作果酒利用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌，A错误； B、发酵所用的微生物并不均为原核生物。例如，在果酒制作中起作用的酵母菌是真核生物，它具有以核膜为界限的细胞核；而制作泡菜用到的乳酸菌是原核生物。所以发酵所用微生物有原核生物也有真核生物，B错误； C、传统发酵技术通常规模较小，多在家庭或作坊中进行，比如家庭自制泡菜、腐乳等，C正确； D、传统发酵技术以混合菌种的固体发酵或半固体发酵为主，例如制作腐乳时，豆腐上生长的多种微生物形成混合菌种，且腐乳制作过程属于固体发酵，D正确。 故选B。 2. 传统发酵食品的制作离不开各种各样的微生物。例如醋酸菌常用于食醋的发酵，酵母菌常用于各种酒类的发酵。下列叙述中正确的是（ ） A. 食用醋的酸味主要来源于乳酸 B. 醋酸菌不适宜在无氧条件下生存 C. 酒的酿制过程中需要先密封后通气 D. 酒的酿制过程中需要保持30～35℃ 【答案】B 【解析】 【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。 2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。 【详解】A、食用醋的酸味主要来自醋酸，A错误； B、醋酸菌是严格需氧型细菌，不适宜在无氧的条件下生存，B正确； C、酿酒时，酵母菌需先在有氧条件下快速增殖，随后在无氧条件下进行酒精发酵，即应该先通气后密封，C错误； D、酒精发酵的最佳温度是在18~25℃，醋酸发酵的温度宜维持在30~35℃，D错误。 故选B。 3. 下列关于微生物实验室培养的叙述，正确的是（ ） A. 配制培养基时，应先灭菌再调节pH B. 纯培养物就是不含代谢废物的微生物培养物 C. 培养乳酸杆菌时，培养基中需添加维生素 D. 微生物在液体培养基内部可形成菌落 【答案】C 【解析】 【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，还需要满足微生物生长对pH、特殊的营养物质及氧气的需求。 【详解】A、配制培养基时应先调再灭菌，A错误； B、纯培养物是只含单一菌种的微生物培养物，存在代谢废物，B错误； C、培养乳酸杆菌时，培养基中需添加维生素，维生素是乳酸杆菌生长繁殖所必需的，但其自身不能合成，C正确； D、菌落是在固体培养基上生长的，液体培养基内部不能形成菌落，D错误。 故选C。 4. 下列关于灭菌和消毒的理解，错误的是（ ） A. 灭菌和消毒能有效避免操作者被微生物感染 B. 接种环在使用前后均需要进行灼烧灭菌 C. 配制好的培养基通常用干热灭菌法灭菌 D. 除物理、化学方法外，还可用生物方法进行消毒 【答案】C 【解析】 【分析】1、消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）。常用方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法。 2、灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）。常用方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 【详解】A、无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者被微生物感染，A正确； B、为了防止杂菌污染和感染操作者，每次接种前后，接种环在使用前后均需要进行灼烧灭菌，B正确； C、配制好的培养基通常用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误； D、除物理（如紫外线、高温）和化学（如酒精、消毒剂）方法外，某些生物方法（如噬菌体杀菌）也可用于消毒。生物消毒法指通过生物学手段，利用微生物、酶类或其他生物体来消灭病菌、病毒等有害物质得一种方法，D正确。 故选C。 5. 下列有关微生物的分离、培养与计数的叙述，错误的是（ ） A. 倒平板时，应将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙 B. 等待培养基冷凝后，需要将平板倒置保存 C. 平板划线时，接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线 D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 【答案】D 【解析】 【分析】微生物培养的计数过程中，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 【详解】A、倒平板时，应将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能完全打开，以免造成污染，A正确； B、等待培养基冷凝后，需要将平板倒置保存，以免冷凝水滴入培养基造成污染，同时可减少培养基水分的蒸发，B正确； C、平板划线时，接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线，防止划破培养基表面，影响实验结果的观察，C正确； D、在确定对照组无菌后，应选择菌落数在30～300间的实验组平板为代表进行计数，D错误。 故选D。 6. 判断某种选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（ ） A. 未接种的该选择培养基 B. 接种了的该选择培养基 C. 未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 D. 接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 【答案】D 【解析】 【分析】选择培养基：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。由于分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素为唯一氮源的培养基上，分解尿素的菌能以尿素为氮源生长，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而无法生长。 【详解】对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉育蛋白胨培养基属于对照组，取稀释相同倍数的菌液，分别接种在牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基上，则前者生长的菌落数目应明显多于后者生长的菌落数目，ABC错误，D正确。 故选D。 7. 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（ ） A. 菌落中的细菌数目是固定的 B. 平板上的一个菌落就是一个细菌 C. 通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 【答案】D 【解析】 【详解】A、菌落是单个或多个细菌繁殖形成的子细胞群体，菌落中的细菌数目受培养时间、菌种类型等因素影响，并不固定，A错误； B、单个细菌肉眼不可见，平板上的一个菌落是由单个或少数细菌繁殖形成的大量子细胞的集合，不是一个细菌，B错误； C、若两个或多个活菌连在一起，涂布后只会形成一个菌落，因此统计的菌落数通常低于活菌的实际数目，二者并不相同，C错误； D、当稀释度足够高时，平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，因此可通过统计菌落数推测活菌数，D正确。 8. 下列关于发酵工程基本环节及应用的叙述，错误的是（ ） A. 发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节 B. 酵母菌生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂 C. 利用黑曲霉水解大豆中的蛋白质，经淋洗、调制成酱油产品 D. 为避免杂菌污染，发酵所需菌种和培养基都必须经严格灭菌 【答案】D 【解析】 【分析】发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。 【详解】A、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，A正确； B、微生物含有丰富的蛋白质，以淀粉或纤维素的水解液，制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白，可作为食品添加剂，B正确； C、以大豆为主要原料，利用产生黑曲霉将大豆原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制可以制成酱油产品，C正确； D、菌种不需要灭菌，D错误。 故选D。 9. 植物组织培养的方法步骤是（ ） ①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽等器官③愈伤组织④再分化⑤脱分化⑥植物体 A. ①⑤③④②⑥ B. ①④③⑤②⑥ C. ①②⑤③④⑥ D. ①③⑤④②⑥ 【答案】A 【解析】 【分析】植物组织培养过程是先离体培养经脱分化形成愈伤组织，再分化成根芽，发育成植物体。 【详解】植物组织培养的过程是：①离体的植物器官、组织或细胞→⑤脱分化→③愈伤组织→④再分化→②根、芽等器官→⑥植物体，A正确，BCD错误。 故选A。 10. 如图所示为植物体细胞杂交技术的部分过程，错误的是（ ） A. 该技术依据的原理之一是细胞膜具有一定的流动性 B. 从细胞A和B到C的过程中，可以用离心法诱导融合 C. 植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞 D. 该技术能打破生殖隔离，培育植物新品种 【答案】C 【解析】 【详解】 植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。图中先用纤维素酶和果胶酶处理植物的体细胞得到原生质体，再诱导原生质体两两融合，利用植物组织培养技术可让融合的原生质体先脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成再生植株。人工诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。 【点睛】A、细胞膜具有一定流动性是进行原生质体融合的原理之一，A正确； B、获得原生质体后再用化学法(聚乙二醇)或物理法(振动、离心、电刺激)诱导原生质体融合，B正确; C、获得融合细胞后需利用植物的组织培养技术将细胞培育成植株，故植物体细胞杂交技术的最终目的是培育具有优良性状的杂种植株，C错误； D、植物体细胞杂交技术能打破生殖隔离，培育植物新品种，D正确。 故选C。 11. 下列有关细胞全能性的叙述正确的是（ ） A. 只有植物的分生区细胞具有全能性，其他细胞没有全能性 B. 花粉经离体培养发育成单倍体植株说明植物细胞有全能性 C. 用植物的种子繁殖后代说明植物细胞有全能性 D. 细胞分化程度越高，全能性越高，分裂能力越强 【答案】B 【解析】 【分析】关于细胞的“全能性”，可以从以下几方面把握： (1) 概念：细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。 (2)细胞具有全能性的原因是：细胞含有该生物全部的遗传物质。 (3)细胞全能性大小：受精卵>干细胞>生殖细胞>体细胞。 (4)细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件。 (5)全能性以细胞形成个体为标志。 【详解】A、细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能，原因是细胞中具有发育成完整个体的全套遗传物质，因此其他细胞也具有全能性，A错误； B、花粉经离体培养发育成单倍体植株说明植物细胞有全能性，B正确； C、种子是器官，用种子繁殖后代不能说明植物细胞具有全能性，C错误； D、细胞分化程度越高，全能性越低，分裂能力越弱，D错误。 故选B。 12. 为了防止某株名贵花卉用种子繁殖发生性状分离，并实现快速繁殖，可用该植株的部分器官或组织进行离体培养得到完整植株。进行离体培养时不应采用该植株的（ ） A. 花粉粒 B. 花瓣 C. 叶片 D. 茎尖 【答案】A 【解析】 【分析】植物的组织培养指的是在无菌的条件下，将植物的茎尖、茎段或是叶片等切成小块，培养在特制的培养基上，通过细胞的增殖和分化，使它逐渐发育成完整的植物体。 【详解】植物的组织培养指的是在无菌的条件下，将植物的茎尖、茎段或是叶片等切成小块，培养在特制的培养基上，通过细胞的增殖和分化，使它逐渐发育成完整的植物体。花粉粒是经减数分裂形成的，在此过程中发生了基因分离和基因重组，因而不一定能保持亲本的优良性状，故选择的材料不能是花粉粒，A正确，BCD错误。 故选A。 13. 马铃薯（4n＝48）是一种营养价值丰富的粮食和经济作物。植物细胞工程技术在马铃薯的繁殖、育种等方面有广泛的应用。下列叙述错误的是（　　） A. 微型繁殖技术可以保持优良马铃薯品种的遗传特性 B. 取马铃薯的花药进行离体培养得到的单倍体植株是可育的 C. 组织培养过程中，处于不断增殖状态的马铃薯细胞易发生突变 D. 采用茎尖组织培养技术可以获得具备抗病毒能力的幼苗 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖，因此人们形象的把用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，叫做植物的微型繁殖技术，也叫快速繁殖技术。 2、植物分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因此切去一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。 3、在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断增殖的状态，容易受到培养条件和外界压力的影响，在DNA复制的过程中发生突变，易获得突变体。 【详解】A、植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖，因此人们形象的把用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，叫做植物的微型繁殖技术，也叫快速繁殖技术，A正确； B、据题中所给信息马铃薯（4n=48）可知其体细胞中有4个染色体组，取马铃薯的花药进行离体培养得到的单倍体植株，是由其配子直接发育而来，即该单倍体细胞中含有2个染色体组，单倍体植株进行减数分裂时，染色体两两配对形成12对，能正常联会，可产生配子，即取马铃薯的花药进行离体培养得到的单倍体植株是可育的，B正确； C、在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断增殖的状态，容易受到培养条件和外界压力的影响，在DNA复制的过程中容易发生突变，C正确； D、植物分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因此切去一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，脱毒苗不具有抗病毒的能力，抗病毒苗通过基因工程获得，D错误。 故选D。 14. 下列动物细胞培养过程中，属于原代培养的是（ ） A. 把组织分散成单个细胞的过程 B. 哺乳动物细胞在培养液中的悬浮生长过程 C. 组织分散成细胞后的初次培养过程 D. 细胞分裂受阻后转入新培养液的培养过程 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】动物细胞培养中，原代培养是指将组织分散为单个细胞后的初次培养阶段，直至细胞增殖到相互接触（接触抑制）为止，C正确，ABD错误。 故选C。 15. 研究人员取胰岛B细胞功能受损的糖尿病患者的成纤维细胞，在加入特殊诱导因子促进Sox2，Klf4，Oct4，c-Myc（简称SKOM）4种基因表达的孵化器中培养得到多能干细胞（iPS细胞），再定向诱导分化为可移植的正常胰岛B细胞。下列叙述正确的是（ ） A. SKOM中可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期 B. 孵化器中要加入动物血清来防止动物细胞受病原体侵染 C. 导入的SKOM使成纤维细胞具有衰老细胞的特征 D. iPS细胞分化为胰岛B细胞的过程体现了细胞的全能性 【答案】A 【解析】 【分析】动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。 【详解】A、SKOM为特殊诱导因子，可能含有原癌基因或抑癌基因，参与调控细胞周期，A正确； B、孵化器中要加入动物血清，可保证细胞营养需要，B错误； C、导入SKOM基因的目的是将成纤维细胞重编程为多能干细胞（iPS细胞），此过程逆转了细胞分化状态，而非使其衰老，C错误； D、细胞全能性需发育为完整个体，而iPS细胞分化为胰岛B细胞仅体现细胞分化能力，D错误。 故选A。 16. 下列有关植物体细胞杂交与动物细胞融合的叙述，正确的是（ ） A. 应用的原理都涉及细胞膜具有选择透过性 B. 都需要使用CO2培养箱 C. 都需要对融合后的细胞进行筛选 D. 成功标志都是得到具有双亲优良性状的杂种个体 【答案】C 【解析】 【分析】诱导原生质体融合的方法物理法（离心、电融合法等）和化学法（聚乙二醇）；诱导动物细胞融合的方法：物理法（离心、电融合法等）、化学法（聚乙二醇（PEG））和生物法（灭活的病毒）。 【详解】A、动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，应用的原理都涉及细胞膜具有流动性，A错误； B、动物细胞融合后需要在CO2培养箱维持培养环境的pH，而植物体细胞杂交后的细胞培养通常不需要使用CO2培养箱，B错误； C、细胞融合具有随机性，且融合率不是100%，因此动物细胞融合和植物体细胞杂交的操作过程中都需要对得到的杂种（或杂交）细胞进行筛选，以获得两种不同细胞的融合体，C正确； D、植物体细胞杂交的成功标志是形成杂种植株，而动物细胞融合的成功标志是获得具有特定功能的融合细胞，并不形成新个体，D错误。 故选C。 17. 甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述错误的是（ ） A. 需要制备用PHT免疫的小鼠 B. 需要使用动物细胞核移植技术 C. 用特定的选择培养基将杂交瘤细胞筛选出来 D. 应筛选能分泌所需特定抗体的单个杂交瘤细胞 【答案】B 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、制备单克隆抗体时，需要先将抗原（PTH）注入小鼠体内，使小鼠产生免疫反应，进而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞。所以需要制备用PTH免疫的小鼠，A正确； B、单克隆抗体的制备过程不需要使用动物细胞核移植技术。单克隆抗体制备是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞，进而生产单克隆抗体，B错误； C、在细胞融合后，会得到多种类型的细胞，如B淋巴细胞 - B淋巴细胞融合细胞、骨髓瘤细胞 - 骨髓瘤细胞融合细胞以及B淋巴细胞 - 骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞。用特定的选择培养基可以筛选出杂交瘤细胞（只有杂交瘤细胞能在该培养基上生长），C正确； D、由于融合形成的杂交瘤细胞有多种，它们产生的抗体也不同，所以需要进一步筛选，选出能分泌所需特定抗体（针对PTH的抗体）的单个杂交瘤细胞，然后进行克隆化培养，以大量生产单克隆抗体，D正确。 故选B。 18. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如下图所示。ADC通常由抗体、接头和药物三部分构成。下列说法错误的是（ ） A. 给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞 B. 经步骤①所得到的细胞都能分泌所需的特定抗体 C. 杂交瘤细胞可通过注射到小鼠腹腔内的方式达到增殖 D. 使用ADC的目的是使药物精准作用于靶细胞，避免其他细胞受损 【答案】B 【解析】 【分析】由图可知，①表示动物细胞的融合，②表示筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测，④表示将单克隆抗体和治疗乳腺癌的药物结合形成ADC。 【详解】A、为了制备能针对人乳腺癌细胞的抗体，给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞，这样小鼠的免疫系统才会产生相应的免疫反应，进而产生能识别乳腺癌细胞的抗体，A正确； B、步骤①是将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，得到的融合细胞有多种类型，包括B - B融合细胞、B - 骨髓瘤融合细胞（即杂交瘤细胞）、骨髓瘤 - 骨髓瘤融合细胞等，只有特定的杂交瘤细胞才能分泌所需的特定抗体，并非所有步骤①得到的细胞都能分泌所需特定抗体，B错误； C、杂交瘤细胞可以通过注射到小鼠腹腔内的方式进行培养，在小鼠腹腔内适宜的环境中，杂交瘤细胞能够大量增殖，C正确； D、ADC由抗体、接头和药物三部分构成，其中抗体能特异性识别并结合靶细胞，从而使药物精准作用于靶细胞，减少对其他细胞的损伤，降低药物的副作用，D正确。 故选B。 19. 下列有关核移植的说法，错误的是（ ） A. 可以通过显微操作法去掉卵母细胞的核 B. 该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作 C. 通常采用受精卵作为供体细胞 D. 利用体细胞核移植技术可加速家畜遗传改良进程 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、核移植技术中，卵母细胞的去核通常采用显微操作法（如显微注射或吸出法），A正确； B、核移植技术需要以下步骤：供体细胞的培养（如体细胞培养）、卵母细胞的去核、供体细胞核的移植、重组胚胎的培养，B正确； C、核移植的供体细胞通常是体细胞（如皮肤细胞）或胚胎细胞，而非受精卵，C错误； D、体细胞核移植技术可以快速复制优良性状的家畜（如高产奶牛、优质肉牛），避免传统育种的时间成本，加速家畜遗传改良进程，D正确。 故选C。 20. 下列有关动物细胞核移植技术和克隆动物的说法，错误的是（ ） A. 克隆动物的个体发育过程发生了细胞的增殖、分化、衰老和凋亡 B. 体细胞核移植技术发展到今天已相当成熟，成功率较高 C. 利用动物细胞核移植技术可以有选择地繁殖某一性别的动物个体 D. 绝大多数克隆动物存在健康问题，如体型过大、脏器缺陷等 【答案】B 【解析】 【分析】体细胞核移植技术的应用： （1）畜牧业：可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。 （2）保护濒危物种：可望利用体细胞核移植技术增加濒危动物的存活数量。 （3）医药卫生：转基因克隆动物可作为生物反应器，生产珍贵医用蛋白；转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体；人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化，形成相应的组织、器官后，可用于组织器官的移植。 【详解】A、克隆动物的个体发育过程涉及正常的细胞增殖、分化、衰老和凋亡，这些是生物发育的基本生命活动，A正确； B、尽管通过体细胞核移植技术已经获得了多种克隆动物，但该技术的成功率仍然非常低，各个技术环节也有待进一步改进，B错误； C、在体细胞核移植技术中，供体细胞只提供细胞核，故利用动物细胞核移植技术可以有选择地繁殖某一性别的动物个体，C正确； D、目前绝大多数克隆动物存在健康问题，如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等，D正确。 故选B。 二.不定项选择题（本题共5道小题，每题至少有一个选项符合题意。每题3分，全部选对得3分，选对但选不全得1分，有错选不1得分，共15分） 21. 某些微生物能合成几丁质酶，使几丁质降解。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。下列相关叙述正确的是（ ） A. 土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养 B. 除几丁质外培养基中还需添加氮源、无机盐、水等 C. 目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法 D. 水解圈直径与菌落直径的比值越小，则微生物降解几丁质能力越大 【答案】AB 【解析】 【分析】1、要从土壤中分离出能合成几丁质酶的微生物，应以几丁质为唯一碳源，以淘汰不能产生几丁质酶的真菌达到筛选效果。 2、水解圈是产生几丁质酶的微生物产生相关酶水解几丁质产生的，水解圈直径/菌落直径越大，说明该菌降解能力越强。 【详解】A、据题意可知，要从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，那么应该用以几丁质为唯一碳源的选择培养基培养，A正确； B、微生物生长需要碳源、氮源、无机盐、水等基本营养物质，几丁质作为唯一碳源，其他成分（如氮源、无机盐等）也需要添加，B正确； C、平板划线法和稀释涂布平板法都是常用的微生物纯化方法，但平板划线法不能用于计数，C错误； D、水解圈直径与菌落直径的比值越大，说明微生物降解几丁质的能力越强，D错误。 故选AB。 22. 人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用植物细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下，下列叙述正确的是（ ） A. 诱导得①的培养基中需添加细胞分裂素与生长素 B. 射线处理①可能会获得人参皂苷高产的细胞 C. 悬浮培养的培养基无需经过灭菌处理 D. 利用该技术生产人参皂苷可减少植物资源的消耗 【答案】ABD 【解析】 【分析】脱分化：已经分化的细胞经过脱分化，失去其特有的结构和功能，转变为未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，即愈伤组织。 【详解】A、植物组织培养过程中，诱导脱分化形成愈伤组织（图中①）的培养基中需要添加细胞分裂素与生长素，且二者的比例会影响细胞的发育方向。当生长素与细胞分裂素的比值适中时，有利于愈伤组织的形成，A正确； B、射线处理①（愈伤组织），可诱发其发生基因突变，而基因突变具有不定向性，有可能会获得人参皂苷高产的细胞，B正确； C、悬浮培养的培养基必须经过灭菌处理，以防止杂菌污染，影响细胞的生长和代谢，C错误； D、利用植物细胞培养技术生产人参皂苷，只需培养少量的植物细胞，就可以通过细胞增殖和代谢产生大量的人参皂苷，相比传统从大量植物中提取的方式，可减少植物资源的消耗，D正确。 故选ABD。 23. 下图为利用正常的小鼠细胞进行动物细胞培养的过程，①～④表示相关过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程①可以使用机械法或胃蛋白酶等将组织分散成细胞 B. 过程②和过程④中细胞只能贴壁生长 C. 培养细胞2需要贴附于基质表面生长，可直接用离心法进行收集 D. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、过程①可以使用机械法或酶解法使细胞分散成单个细胞，所用酶为胰蛋白酶或胶原蛋白酶，A错误； B、过程②和过程④中某些细胞可悬浮生长；B错误； C、培养细胞2时，一般会出现接触抑制和贴壁生长现象，需先用胰蛋白酶等处理，后才能用离心法进行收集，C错误； D、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素、血清等，D正确。 故选D。 24. 某抗原有a～d四个抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由该抗原刺激产生的不同抗体统称为多克隆抗体。如图是某同学绘制的制备该抗原单克隆抗体（单抗）和多克隆抗体（多抗）的过程示意图，相关叙述正确的是（ ） A. 不同类型的淋巴细胞之间不可能发生动物细胞融合 B. 若该抗原部分结构改变，可能会出现原单抗失效而多抗仍有效 C. 多抗可以从血清中直接分离，但是不能大量制备且特异性差 D. 单克隆抗体可以制成诊断试剂，也可以用于疾病治疗 【答案】BCD 【解析】 【分析】根据题干信息“一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体”，每个抗原决定簇刺激产生的抗体是单抗，所以每个抗原可能刺激免疫系统产生多种抗体。 【详解】A、不同类型的淋巴细胞之间可发生动物细胞融合，A错误； B、单克隆抗体是针对单一抗原决定簇产生的，若抗原部分结构改变，对应的抗原决定簇可能改变，原来针对特定抗原决定簇的单抗就可能失效；而多抗是针对多个抗原决定簇产生的，即便部分结构改变，其他抗原决定簇仍可能刺激产生有效的抗体，所以多抗仍可能有效，B正确； C、多克隆抗体可以从血清中直接分离，由于血清中含有多种抗体，所以多抗不能大量制备且特异性差，C正确； D、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此可以制成诊断试剂用于疾病的快速诊断；也可利用其能特异性识别抗原的特性，用于疾病治疗，D正确。 故选BCD。 25. 某实验小组从母羊甲的体细胞中提取细胞核，注入到母羊乙的去核卵母细胞中，体外培养一段时间后移植到另一只母羊丙的子宫内，最终顺利产下丁羊。下列叙述错误的是（ ） A. 丁羊的性状与母羊甲完全相同 B. 母羊丙没有为丁羊提供遗传物质 C. 该生殖方式为有性生殖 D. 丁羊可作为动物细胞具有全能性的证据 【答案】ACD 【解析】 【分析】动物克隆是一项通过核移植过程进行无性繁殖的技术，不经过有性生殖，而是通过核移植生产遗传物质与细胞核供体基本相同的动物个体的技术；细胞核是细胞遗传与代谢的调控中心；动物细胞的细胞质中也含有遗传物质DNA，DNA存在于线粒体中，也可以控制生物的性状。 【详解】A、丁羊的遗传物质来自于甲和乙，其性状与母羊甲不完全相同， A错误； B、母羊丙没有为丁羊提供遗传物质，只是提供妊娠环境，B正确； C、该生殖方式没有经过精子和卵细胞的结合，为无性生殖，C错误； D、丁羊可作为动物细胞核具有全能性的证据，D错误。 故选ACD。 Ⅱ卷（非选择题） 三.非选择题（本题共4道小题，共55分） 26. 合成塑料是一种非天然的石油基塑料，由于分子量过大而难以通过生物膜被微生物降解。研究发现，某些昆虫的肠道内存在PE（一种合成塑料）降解细菌。现欲从昆虫的肠道中筛选能够降解PE的菌株，过程如下图1所示。 （1）选择培养过程中，培养基中应加入______作为唯一碳源，选择培养的目的是_________________。 （2）采用平板划线法纯化培养过程中，接种环在固体培养基的表面连续划线的目的是________________________。某研究团队从昆虫肠道中筛选出能够降解PE的细菌通过如图2所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的稀释液0.1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器______后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，4个平板上菌落数分别为64个、58个、50个、60个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为__________个，该数据往往比活菌的实际数目______（填“多”或“少”），原因是_______________________。 【答案】（1） ①. PE ②. 提高降解PE的微生物的比例 （2） ①. 将聚集的菌种逐步稀释（分散到培养基的表面）获得单菌落 ②. 灼烧灭菌 ③. 5.8×107 ④. 少 ⑤. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落； ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基，本实验要筛选出PE（一种合成塑料）降解细菌，因此所使用的培养基中应加入PE作为唯一碳源，选择培养的目的是提高降解PE的微生物的比例。 【小问2详解】 划线纯化过程中，接种环在固体培养基的表面连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释（分散到培养基的表面）获得单菌落。利用稀释涂布平板法进行接种时，需要对涂布器进行灼烧灭菌。涂布器灼烧灭菌冷却后再进行涂布。由图可知，菌液被稀释了105倍，4个平板上菌落数分别为64个、58个、50个、60个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为（64+58+50+60）÷4÷0.1×105=5.8×107，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法进行计数时，统计的数量往往比活菌的实际数目少。 27. 人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。如图是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答： （1）图中向小鼠注射的A是_____。与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是_____。 （2）图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，该细胞有_____的特点。筛选②需要进行克隆化培养和_____。 （3）从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞工程中的_____和_____两大技术。对应的原理分别是_____、_____。 （4）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而且绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这体现了单克隆抗体的优点是_____。 【答案】（1） ①. HPV衣壳蛋白 ②. 灭活病毒诱导法 （2） ①. 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 ②. 抗体检测 （3） ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合 ③. 细胞增殖 ④. 细胞膜的流动性 （4）能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合（特异性强、灵敏度高） 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应，从脾脏中获得相应的B淋巴细胞；将小鼠骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞诱导融合；（筛选①）再用特定的选择性培养基进行筛选，只有融合的杂种细胞才能生长；（筛选②）对上述杂种细胞进行克隆化培养和抗体检测，获得能产生专一抗体的杂交瘤细胞；将杂交瘤细胞在体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，最终获得单克隆抗体。 【小问1详解】 为获得抗HPV的单克隆抗体，图中向小鼠注射的A是HPV衣壳蛋白，诱导植物原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）；诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和生物法（灭活的病毒）。所以与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒诱导。 【小问2详解】 图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既有瘤细胞的特征又有B淋巴细胞的特征，即既能迅速大量增殖，又能产生抗体。筛选②需要进行克隆化培养和抗体检测，从而筛选出足够数量的能分泌抗HPV抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合两大技术。动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，因为在融合过程中，细胞的膜结构发生了融合等变化；动物细胞培养的原理是细胞增殖，通过细胞的不断分裂来实现细胞数量的增加和细胞的培养。 【小问4详解】 单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而且绝不攻击任何正常细胞，这体现了单克隆抗体特异性强的优点，即它能够准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合（特异性强、灵敏度高）。 28. 2017年，我国科学家应用动物细胞核移植技术成功克隆出了猕猴“中中”和“华华”，该成果标志着中国体细胞克隆技术走向成熟，实验用疾病模型猴批量克隆成为现实。下图表示体细胞克隆猴的技术流程，据图回答问题： （1）“去核”实质上指去除_______________。将体细胞注射入去核的卵母细胞后，一般通过________（填方法）使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成___________。 （2）选择猕猴胚胎成纤维细胞进行体细胞核移植的难度要明显_________（填“高于”或“低于”）胚胎细胞，原因是___________。 （3）培养猕猴胚胎成纤维细胞时，必须保证环境是__________的，培养液需定期更换，目的是_________。将它们置于CO2培养箱中进行培养，其混合气体组成为__________，其中二氧化碳的作用是________________。 （4）同一个体的体细胞克隆猴作为实验用疾病模型猴的理想材料，便于比对不同实验条件对核遗传物质表达结果的影响，原因是_______________。 【答案】（1） ①. 纺锤体—染色体复合物  ②. 电融合法 ③. 重构胚 （2） ①. 高于 ②. 动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易  （3） ①. 无菌、无毒 ②. 清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 ③. 95%空气和5% CO2 ④. 维持培养液的pH （4）动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易  【解析】 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【小问1详解】 减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期）卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，“去核”是去除该复合物；通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚。 【小问2详解】 体细胞核移植技术要将体细胞核的全能性表现出来，培育成动物个体，动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易；因此选择猕猴胚胎成纤维细胞进行体细胞核移植的难度要明显高于胚胎细胞。 【小问3详解】 培养猕猴胚胎成纤维细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，培养液需定期更换，目的是清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。将它们置于CO2培养箱中进行培养，其混合气体组成为95%空气和5% CO2，其中二氧化碳的作用是维持培养液的pH。 【小问4详解】 同一个体的体细胞克隆猴，用于探究不同实验条件对核遗传物质表达结果的影响时，可以保证无关变量几乎保持一致，原因是同一个体的体细胞克隆猴的核遗传物质理论上是一样的。 29. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图。 （1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70％乙醇和5％的次氯酸钠对其______，每次处理后用______冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 （2）上图①过程利用________酶处理获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合以及再生）。过程②利用化学诱导剂__________诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带_________________的原生质体。原生质体培养液中通常还需要加入适宜浓度的甘露醇，其作用是__________。 （3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤 组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接 混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①表格中C组的实验处理为____________。 ②若实验结果为______________，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 【答案】（1） ①. 消毒 ②. 无菌水 （2） ①. 纤维素酶和果胶 ②. PEG（或聚乙二醇） ③. 红、绿荧光色素 ④. 维持一定渗透压，防止原生质体吸水涨破 （3） ①. 等量的蒸馏水  ②. A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组 【解析】 【分析】1、植物体细胞杂交的原理主要是利用细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。在操作上，首先需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，得到原生质体，然后通过物理或化学方法诱导这些原生质体融合，形成杂种细胞。最后，利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。这种方法的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大杂交亲本范围，培育新优良品种。然而，它也有一些缺点，比如技术要求较高，不同植物的体细胞融合过程比较困难，而且杂交的后代高度不育； 2、分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。 【小问1详解】 为防止微生物污染，应取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其消毒；为防止消毒液对外植体造成伤害，每次处理后用无菌水冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂； 【小问2详解】 据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，需要用纤维素酶、果胶酶处理破坏细胞壁；过程②诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（聚乙二醇）诱导融合；由于三白草细胞酶解液中加入了红荧光色素，鱼腥草细胞酶解液中加入了绿荧光色素，在荧光显微镜下选择带带红、绿荧光色素的原生质体；原生质体培养液中加入适宜浓度甘露醇，其作用是维持一定渗透压，防止原生质体吸水涨破； 【小问3详解】 ①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周；②若实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $