山东省淄博市临淄区山东省淄博第七中学2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题

1 淄博第七中学 2024-2025 学年度第二学期高二 学分认定考试生物学 一、选择题：本题共 15 小题，每小题 2 分，共 30 分。每小题只有一个选项符合题目 要求。 1．有诗云“鱼在在藻，依于其蒲”。“藻”多指水中藻类，“蒲”为多年生草本，其实水中除“藻”“蒲” 外，还有色球蓝细菌、大肠杆菌等微生物，下列说法正确的是（ ） A．诗中提及的“藻”“蒲”、大肠杆菌及支原体、衣原体都有细胞壁 B．“藻”“蒲”和色球蓝细菌的核小体的主要成分是 DNA和蛋白质 C．上述生物都含细胞质、细胞膜、遗传物质，体现了细胞的多样性 D．色球蓝细菌和“藻”“蒲”都含叶绿素，是能进行光合作用的自养型生物 2．生命依赖于水，细胞也离不开水，细胞中的水以自由水和结合水两种形式存在。正常情况下， 细胞内自由水所占比例越大，细胞代谢越旺盛。在冬季来临过程中，为了增强抗寒能力，冬小麦 在不同时期的含水量发生了变化（如下图所示）。下列叙述错误的是（ ） A．冬季，冬小麦自由水的比例下降，可避免低温 时自由水过多导致结冰而损害自身 B．在冬季来临过程中，冬小麦的结合水含量升高， 但其水的主要存在形式始终是自由水 C．水分子是一种极性分子，带电分子或离子都易 与水结合，因此，水是良好的溶剂 D．细胞内结合水的存在形式主要是水与蛋白质、 多糖等物质结合，从而失去溶解性 3．对烟草花叶病发病机理的研究导致了病毒这一种新的生物类型的发现。细菌滤器是一种孔径小 于细菌的过滤装置，细菌及比细菌大的细胞都不能通过。下面是科学家所做的一系列相关实验。 实验一：将患病叶片研磨液注入正常烟草叶脉中，正常烟草患病。 实验二：将患病叶片研磨液高温处理后，则不能使正常烟草患病。 实验三：将患病叶片研磨液经过细菌滤器后得到滤液，能使正常烟草患病（这种滤液被称为感染 2 性滤液）。 实验四：在感染性滤液中加入大量蒸馏水稀释，也能使正常烟草患病。 实验五：将正常叶片研磨液经过细菌滤器得到无感染性滤液；在感染性滤液中加入与实验四所加 蒸馏水同体积的无感染性滤液，能使正常烟草患病，且患病程度与实验四相同。 综合上述实验分析，下列分析正确的是（ ） A．说明烟草花叶病可能由非生物因素引起 B．不能排除由细菌本身引起烟草花叶病的可能性 C．说明烟草花叶病很可能由细菌产生的毒素分子所引起 D．说明烟草花叶病的病原体在无细胞的滤液中不能增殖 4．海底往往形成富含氧化锰的锰结核矿，研究发现一种以锰为“食”的细菌，该细菌可以利用锰将 CO2转化成有机物，满足自身需要，下列有关该细菌的叙述正确的是（ ） A．细胞中的脱氧核糖核苷酸可控制酶的合成 B．通过无丝分裂增殖，不出现纺锤丝和染色体 C．从外界吸收的 N元素可用来合成 ATP、磷脂等 D．从锰结核矿富含氧化锰推断，该细菌属于分解者 5．黄酒是世界上最古老的酒类之一。源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大古酒。以糯米、黍 米、粟为原料。一般酒精含量为 14%~20%，酒的品质取决于菌种。下图表示酿制黄酒的一种工艺 流程。下列有关叙述正确的是（ ） A．菌种 a能产生淀粉酶，淀粉可作为菌种 a的碳源和氮源 B．菌种 b在增殖过程中，应保证发酵装置内严格的无氧环境 C．发酵后通过压榨过滤可以提高酒精产量 3 D．工艺 c表示灭菌，目的与“蒸煮”相同 6．“白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。草莓是无性繁殖 的植物，感染病毒后容易传染给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。 如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的过程。下列叙述正确的是（ ） 草莓→外植体→无病毒草莓苗 A．获得外植体时需要用纤维素酶和果胶酶处理草莓植株 B．选用茎尖做外植体是因为其含病毒极少甚至不含病毒 C．培育无病毒草莓苗时不用控制培养基中植物激素的比例 D．常需要用 95%的酒精对愈伤组织消毒后再诱导其再分化 7．科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加 速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A．细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 B．重组胚胎移植到代孕母牛体内之前不需要进行性别鉴定 C．可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D．将重组胚胎移到雌性奶牛体内，需要注射免疫抑制剂降低免疫排斥 8．下列关于 DNA的粗提取与鉴定实验的叙述错误的是（ ） A．以洋葱为实验材料进行 DNA的粗提取必须在无菌条件下进行 B．DNA可溶于 2mol/L的 NaCl溶液 C．在提取液中加入预冷的 95%的酒精溶液后 DNA会与蛋白质分离并析出 D．溶解后的 DNA遇二苯胺试剂在沸水中加热 5min冷却后会呈现蓝色 9．科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治 疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计，不合理的是（ ） A．用β-珠蛋白基因、启动子、终止子、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体 B．利用正常小鼠 DNA分子通过 PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列 4 C．用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌 D．将β-珠蛋白基因表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中 10．限制酶是基因工程中必需的工具之一，下图表示五种限制酶的识别序列及切割位点。下列关 于限制酶的叙述，错误的是（ ） 限 制 酶 EcoRI BamHI Sau3AI MfeI EcoRV 识 别 位 点 A．EcoRI和 EcoRV切割 DNA片段产生的末端分别为黏性末端和平末端 B．EcoRI和MfeI切割产生的 DNA片段能被 EcoliDNA连接酶相连在一起 C．BamHI和 Sau3AI切割产生的 DNA 片段，连接后一定能被 BamHI切割 D．以上五种限制酶均能识别双链 DNA的特定序列，并切开特定部位的磷酸二酯键 11．下列有关 PCR技术的实验过程叙述，正确的是（ ） A．PCR利用了 DNA的热变性原理，实际操作中为了提高循环效率，变性后要迅速冷却，以使引 物和模板链尽快结合 B．PCR操作中引物的添加量取决于模板 DNA的加入量，如果只加入一个模板 DNA进行 PCR扩 增，需要加入两个不同的引物。 C．延伸过程是溶液中的四种核糖核苷酸在 DNA聚合酶作用下，根据碱基互补配对原则合成新的 DNA链。 D．在循环过程中，引物Ⅰ延伸而成的 DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行 DNA的延伸 12．幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将 Hp的 Ipp20基因作 为目的基因，用限制酶 Xho I和 Xba I切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图 所示。下列相关叙述错误的是（ ） 5 A．Ipp20基因整合到大肠杆菌的 DNA 中属于基因重组 B．基因表达载体导入之前，可用 Ca2+处理大肠杆菌 C．培养基 A中添加了氯霉素，培养基 B中添加了潮霉素 D．能用来生产 Hp疫苗的大肠杆菌在菌落 3和 5中 13. 研究人员利用农杆菌侵染水稻叶片，经植物组织培养、筛选最终获得了一株水稻突变体。现 欲检测该突变体是否由 T-DNA 插入所致。下图是利用不同的限制酶处理突变体的总 DNA，经电 泳、核酸分子杂交的放射性自显影结果，并与野生型和 Ti质粒做对比（注：T-DNA 上没有所用限 制酶的酶切位点）。对该实验的分析错误的是 A. 检测结果时使用了放射性标记的 T-DNA片段做探针 B. 实验结果证明该突变体核 DNA中插入了 T-DNA C. 不同酶切显示的杂交带位置不同，说明 T-DNA 有不同的 插入位置 D. 若野生型也出现杂交带，则实验样本可能被污染，检测结 果不准确 14．将水稻耐盐碱基因 OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳 88中，培育耐盐碱海水稻新品种。 下图 PCR扩增 OsMYB56时需要添加引物，应选用的引物组合为（ ） A．5'—CTTGGATGAT一 3和 5'一 TCTGTTGAAT一 3' 6 B．5'一 CTTGGATGAT一 3和 5'一 TAAGTTGTCT 一 3' C．5'一 ATTCAACAGA 一 3'和 5'一 ATCATCCAAG一 3' D．5'一 ATTCAACAGA 一 3'和 5—GAACCTACTA—3' 15．人体内的蛋白 TPA能降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，但为心梗患者注射大剂量的 TPA会 诱发颅内出血。研究证实，通过蛋白质工程，将 TPA第 84位的半胱氨酸换成丝氨酸，可制造出 性能优异的改良 TPA，进而显著降低出血副作用。下列关于该蛋白质工程的叙述正确的是（ ） A．制造改良 TPA的过程不遵循中心法则 B．可利用 X射线衍射技术分析 TPA的晶体结构 C．该例中 TPA蛋白的基因增添碱基时可使用基因定点诱变技术 D．需要在分子水平上直接对 TPA进行定向改造 二、选择题：本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分。每小题有一个或多个选项符合 题目要求，全部选对的得 3 分，选对但不全的得 1 分，有选错的得 0 分。 16．桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，极大地满 足人们的需求。图 1为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图 2为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、 酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。下列相关叙述正确的是（ ） A．桑葚玫瑰酒发酵所用菌种的代谢类型与醋酸菌相同 B．图 1中排气口连接长而弯曲的胶管可避免其他微生物进入装置 C．由图 2可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大 D．花色苷含量随桑葚汁与玫瑰质量比的增大而降低，质量比为 4：1时酒的感官评分最高 17．下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） 7 A．①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B．②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化 C．③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D．⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 18．下列关于 DNA的提取和 DNA片段的扩增及电泳鉴定的叙述，错误的是（ ） A．利用 DNA和蛋白质在冷酒精中溶解性的差异可初步分离出 DNA B．电泳鉴定时，在带电量相同的情况下相对分子质量越大的 DNA片段距离加样孔越远 C．琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中含指示剂，可以在紫外灯下被检测出来 D．鉴定 DNA时，应将丝状物直接加入二苯胺试剂中进行沸水浴加热 19．胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射到人体中后，会堆积在皮下，要经过较长的 时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易被分解，因此治疗效果受到影响。如图是用蛋白 质工程设计速效胰岛素的生产过程，下列说法正确的是（ ） A．蛋白质工程是根据人们的特定需求，直接对蛋白质结构进行的设计或改造 B．蛋白质工程难度很大的主要原因是蛋白质的功能必须依赖复杂的空间结构 C．在将基因表达载体导入大肠杆菌时，一般要用 Ca2+处理该菌 D．在大肠杆菌中直接生产的胰岛素不具有生物活性 8 20. 为研究一种双链 DNA 分子 A的分子质量大小，用不同 的限制酶对 A进行切割，切割产物通过琼脂糖凝胶电泳进行 分离，用大小已知的 DNA片段的电泳结果作为分子质量大小 的标记。下列说法正确的是（ ） A. DNA 分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA 分子大小和构象 有关 B. 凝胶中加入 DNA 染色剂，电泳后将凝胶放在紫外灯下观 察 C. A为一个环状 DNA分子，有一个 NotⅠ酶切位点和两个 EcoRI酶切位点 D. A的分子质量大小为 10kb，NotI酶切位点与 EcoRI酶切位点的最大距离为 2kb 三、非选择题：本题共 5 小题，共 55 分。 21．脯氨酸是植物在盐胁迫条件下液泡中积累的重要氨基酸，在植物渗透调节中发挥关键作用。 为研究盐胁迫条件下，脯氨酸浸种对水稻幼苗形态相关指标的影响，研究者做了相关实验，结果 如下表所示。回答下列问题： 组别 处理方法 平均苗高/cm 平均根长/cm 平均根数/条 ① S0 6.42 3.30 8.80 ② S1 2.59 2.55 4.20 ③ S1+T1 4.99 3.54 5.67 ④ S1+T2 5.02 3.57 6.13 ⑤ S1+T3 6.11 4.14 6.47 注：S1指在水稻培养基中添加一定浓度的 NaCl；T1～T3添加的脯氨酸浓度依次升高。 (1)盐胁迫下水稻细胞中散失的水分主要是 。 (2)上述实验的处理方案中，S0的处理方式为 。实验结果表明，用 T1浓度的脯 氨酸浸种 （填“能”或“不能”）缓解盐胁迫对水稻性状的影响，依据是 。 9 (3)根据题意和实验结果推测，水稻积累脯氨酸可缓解盐胁迫对水稻生长抑制的机理是 ， （答出 2点）。 22. 聚羟基丁酸酯（PHB）是某些细菌在碳源充足，氮源缺乏状态下产生的一类颗粒状、可作为细 菌体内碳源和能量储备物的高分子化合物，能被苏丹染料染色，可溶于氯仿。PHB具有生物可降 解性和生物相容性，用于可降解包装材料及医药行业。天然菌中的 PHB产量较低，对天然菌进行 诱变和筛选可得到高产 PHB合成菌。 （1）PHB合成菌的分离培养基的成分为葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和琼脂，该培养基中氮 源主要来自______________，为使 PHB合成菌胞体内积聚更多 PHB，该培养基成分配比的特点是 _____________。 （2）将等浓度土壤稀释液接种在 PHB分离培养基上后，甲组用紫外线照射，乙组不作处理。培 养一段时间后，发现甲组的菌落数少于乙组，原因是____________。通过显微观察法初筛 PHB 合 成菌的方法是______________。复筛时需要提取胞体内的 PHB，方法是_____________。 （3）对复筛得到的 A~E五个菌株单独培养，检测 PHB产量，结果如下图。A~E 株菌中适于作工 程菌的是______________，其它菌株不适合作工程菌的原因是_______________。 （4）在发酵罐中连续发酵生产 PHB时，除控制发酵温度、pH并随时检测培养液中 PHB合成菌 的数量外，还应________________（答出 2条）。 23．EB病毒(EBV)可引发鼻咽癌等癌症。我国科研人员制备有效阻断 EBV感染的单克隆抗体，为 治疗鼻咽癌和研发疫苗提供帮助。回答下列问题。 (1)图 1中，EBV 表面的糖蛋白 gHgL 与上皮细胞表面受体(如 E2 等)结合后，导致 gB的________ 发生变化，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合。膜融合过程体现了膜具有________性。gHgL 可作为 制备有效阻断 EBV感染的单克隆抗体的________。 10 图 1 (2)为了获得可以特异性结合 gHgL的单克隆抗体，研究人员首先将荧光标记的 gHgL探针加入 EBV 感染恢复期的外周血中，筛选分离出有荧光标记的________细胞；然后提取该细胞中的 gHgL 抗 体 mRNA，通过________获得相应的 cDNA，再扩增出 gHgL 抗体基因，最后转入细胞成功表达 出单克隆抗体。 (3)科研人员已筛选出可以特异性结合 gHgL 的单抗 D8，与已报道的单抗 A1相比，两者都能显著 抑制 EBV病毒感染上皮细胞。将 gHgL 与 D8或 A1混合接触后，检测 gHgL 与上皮细胞表面受体 E2的结合能力，结果如图 2。 图 2 分析实验结果可知 D8与 A1作用的区别是________________________________；由此可见，制备 单抗 A1时所用的特定抗原__________(填“是”或“不是”)gHgL。 (4)为了更好地阻断 EBV 感染，研究人员提出采用单抗 D8和单抗 A1 联合用药，结合上述研究， 判 断 D8 、 A1 是 否 具 有 协 同 效 应 并 说 明 理 由 ： ________________________________ __________________________________________。 24．pBR322质粒是基因工程中较常用的运载体。如图所示为 pBR322质粒，其中 ampr（氨苄青霉 素抗性基因）和 tetr（四环素抗性基因）为标记基因，ori为复制原点，其他均为限制酶及其识别 位点，并且每种限制酶的识别位点都只有一个。回答下列问题： 11 (1)制备重组质粒，需要 酶和 酶。若制备重组质粒时，使用 PvuⅠ切割该质粒， 则检测目的基因是否导入受体细胞，需要在培养基中添加 。 (2)该质粒中的 BamHⅠ识别的核苷酸序列及切割位点为—G↓GATCC—，而 Sau3AⅠ识别的核苷酸序 列只有 4个碱基。若 BamHⅠ和 Sau3AⅠ分别切割 DNA所形成的 DNA片段能拼接成一条 DNA链， 则 Sau3AⅠ识别的核苷酸序列及切割位点为 。该拼接在一起的DNA片段， （填 “能”“不能”或“不一定能”）被 BamHⅠ识别。 (3)与图示质粒相比，完整的重组质粒中还应有 三种特殊的 DNA片段。若受体细胞为 大肠杆菌，则该菌经钙离子处理后，将具备的 特性。 (4)若要通过基因工程获得转基因莴苣，首先将构建好的目的基因表达载体导入土壤农杆菌，目的 是利用农杆菌的 ，使目的基因进入莴苣细胞，并将其插入到莴苣细胞中的 上， 使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣。要想检测获得的转基因莴苣中目 的基因是否表达，在分子水平上可用 法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经 表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功。 25. 黏膜免疫系统作为第一道免疫防御屏障，能够参与保护生物体免受病原体的感染。多聚免疫球 蛋白受体（pIgR）作为黏膜免疫防御的一个关键因子，能够介导免疫球蛋白跨过上皮细胞进行转 运和分泌，发挥免疫球蛋白在黏液中清除病原体和毒素的作用。研究人员从大菱鲆提取 pIgR 基因， 针对不同器官组织开展了 pIgR 基因研究（如下图），其中 DEPC物质可与 RNA酶结合使酶发生变 性。 12 （1）引物的作用是________________，提取过程加入 DEPC物质作用是_______________。 （2）为将 pIgR 基因以正确方向插入质粒需要双酶切，这就要求在设计引物时，需在引物的 5'端 加入相应的酶切位点。已知 a链为转录模板链，引物 1的 5'端酶切位点的碱基序列为 GAATTC， 则引物 2的 5'端酶切位点的碱基序列为_______________，理由是_______________。 （3）构建 pIgR 基因表达载体后，与处于感受态的大肠杆菌菌株混合，pIgR 基因表达载体进入菌 体内，此过程称为_______________。然后将菌液涂布在含有_______________的 LB固体培养基培 养，加入诱导剂诱导 pIgR 基因在大肠杆菌中表达，提取、纯化蛋白质。 （4）在整个实验过程中多次使用 PCR技术，如利用 PCR技术扩增 pIgR基因时，需要在反应体 系中加入______________、_____________、引物、耐高温的 DNA聚合酶、缓冲液等物质，缓冲 液中添加 Mg2的作用是+______________。 淄博第七中学 2024-2025 学年度第二学期高二学分认定考试生物学 一、选择题：本题共 15 小题，每小题 2 分，共 30 分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 有诗云“鱼在在藻，依于其蒲”。“藻”多指水中藻类，“蒲”为多年生草本，其实水中除“藻”“蒲” 外，还有色球蓝细菌、大肠杆菌等微生物，下列说法正确的是（ ） A．诗中提及的“藻”“蒲”、大肠杆菌及支原体、衣原体都有细胞壁B．“藻”“蒲”和色球蓝细菌的核小体的主要成分是 DNA 和蛋白质C．上述生物都含细胞质、细胞膜、遗传物质，体现了细胞的多样性 D．色球蓝细菌和“藻”“蒲”都含叶绿素，是能进行光合作用的自养型生物 2. 生命依赖于水，细胞也离不开水，细胞中的水以自由水和结合水两种形式存在。正常情况下， 细胞内自由水所占比例越大，细胞代谢越旺盛。在冬季来临过程中，为了增强抗寒能力，冬小麦在不同时期的含水量发生了变化（如下图所示）。下列叙述错误的是（ ） A. 冬季，冬小麦自由水的比例下降，可避免低温时自由水过多导致结冰而损害自身 B. 在冬季来临过程中，冬小麦的结合水含量升高但其水的主要存在形式始终是自由水 C. 水分子是一种极性分子，带电分子或离子都易与水结合，因此，水是良好的溶剂 D. 细胞内结合水的存在形式主要是水与蛋白质、 多糖等物质结合，从而失去溶解性 3. 对烟草花叶病发病机理的研究导致了病毒这一种新的生物类型的发现。细菌滤器是一种孔径小于细菌的过滤装置，细菌及比细菌大的细胞都不能通过。下面是科学家所做的一系列相关实验。实验一：将患病叶片研磨液注入正常烟草叶脉中，正常烟草患病。 实验二：将患病叶片研磨液高温处理后，则不能使正常烟草患病。 实验三：将患病叶片研磨液经过细菌滤器后得到滤液，能使正常烟草患病（这种滤液被称为感染 ( 10 ) 学科网（北京）股份有限公司 性滤液）。 实验四：在感染性滤液中加入大量蒸馏水稀释，也能使正常烟草患病。 实验五：将正常叶片研磨液经过细菌滤器得到无感染性滤液；在感染性滤液中加入与实验四所加蒸馏水同体积的无感染性滤液，能使正常烟草患病，且患病程度与实验四相同。 综合上述实验分析，下列分析正确的是（ ） A. 说明烟草花叶病可能由非生物因素引起 B. 不能排除由细菌本身引起烟草花叶病的可能性 C. 说明烟草花叶病很可能由细菌产生的毒素分子所引起D．说明烟草花叶病的病原体在无细胞的滤液中不能增殖 4. 海底往往形成富含氧化锰的锰结核矿，研究发现一种以锰为“食”的细菌，该细菌可以利用锰将 CO2 转化成有机物，满足自身需要，下列有关该细菌的叙述正确的是（ ） A. 细胞中的脱氧核糖核苷酸可控制酶的合成B．通过无丝分裂增殖，不出现纺锤丝和染色体 C．从外界吸收的 N 元素可用来合成 ATP、磷脂等D．从锰结核矿富含氧化锰推断，该细菌属于分解者 5. 黄酒是世界上最古老的酒类之一。源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大古酒。以糯米、黍 米、粟为原料。一般酒精含量为 14%~20%，酒的品质取决于菌种。下图表示酿制黄酒的一种工艺流程。下列有关叙述正确的是（ ） A. 菌种 a 能产生淀粉酶，淀粉可作为菌种 a 的碳源和氮源 B. 菌种 b 在增殖过程中，应保证发酵装置内严格的无氧环境 C. 发酵后通过压榨过滤可以提高酒精产量 D. 工艺 c 表示灭菌，目的与“蒸煮”相同 6. “白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。草莓是无性繁殖 的植物，感染病毒后容易传染给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的过程。下列叙述正确的是（ ） 草莓→外植体→无病毒草莓苗 A. 获得外植体时需要用纤维素酶和果胶酶处理草莓植株B．选用茎尖做外植体是因为其含病毒极少甚至不含病毒C．培育无病毒草莓苗时不用控制培养基中植物激素的比例D．常需要用 95%的酒精对愈伤组织消毒后再诱导其再分化 7. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加 速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞B．重组胚胎移植到代孕母牛体内之前不需要进行性别鉴定C．可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D．将重组胚胎移到雌性奶牛体内，需要注射免疫抑制剂降低免疫排斥 8．下列关于 DNA 的粗提取与鉴定实验的叙述错误的是（ ） A．以洋葱为实验材料进行 DNA 的粗提取必须在无菌条件下进行 B．DNA 可溶于 2mol/L 的 NaCl 溶液 C．在提取液中加入预冷的 95%的酒精溶液后 DNA 会与蛋白质分离并析出 D．溶解后的 DNA 遇二苯胺试剂在沸水中加热 5min 冷却后会呈现蓝色 9. 科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治 疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计，不合理的是（ ） A. 用β-珠蛋白基因、启动子、终止子、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体 B．利用正常小鼠 DNA 分子通过 PCR 克隆出β-珠蛋白基因的编码序列 C．用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌D．将β-珠蛋白基因表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中 10. ( 限制酶 EcoRI BamHI Sau3AI MfeI EcoRV 识别位点 )限制酶是基因工程中必需的工具之一，下图表示五种限制酶的识别序列及切割位点。下列关 于限制酶的叙述，错误的是（ ） A. EcoRI 和 EcoRV 切割 DNA 片段产生的末端分别为黏性末端和平末端 B. EcoRI 和 MfeI 切割产生的 DNA 片段能被 EcoliDNA 连接酶相连在一起 C. BamHI 和 Sau3AI 切割产生的 DNA 片段，连接后一定能被 BamHI 切割 D. 以上五种限制酶均能识别双链 DNA 的特定序列，并切开特定部位的磷酸二酯键 11. 下列有关 PCR 技术的实验过程叙述，正确的是（ ） A．PCR 利用了 DNA 的热变性原理，实际操作中为了提高循环效率，变性后要迅速冷却，以使引物和模板链尽快结合 B．PCR 操作中引物的添加量取决于模板 DNA 的加入量，如果只加入一个模板 DNA 进行 PCR 扩增，需要加入两个不同的引物。 C．延伸过程是溶液中的四种核糖核苷酸在 DNA 聚合酶作用下，根据碱基互补配对原则合成新的 DNA 链。 D．在循环过程中，引物Ⅰ延伸而成的 DNA 单链会与引物Ⅱ结合，进行 DNA 的延伸 12. 幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将 Hp 的 Ipp20 基因作为目的基因，用限制酶 Xho I 和 Xba I 切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. Ipp20 基因整合到大肠杆菌的 DNA 中属于基因重组 B. 基因表达载体导入之前，可用 Ca2+处理大肠杆菌 C. 培养基 A 中添加了氯霉素，培养基 B 中添加了潮霉素 D. 能用来生产 Hp 疫苗的大肠杆菌在菌落 3 和 5 中 13. 研究人员利用农杆菌侵染水稻叶片，经植物组织培养、筛选最终获得了一株水稻突变体。现 欲检测该突变体是否由 T-DNA 插入所致。下图是利用不同的限制酶处理突变体的总 DNA，经电泳、核酸分子杂交的放射性自显影结果，并与野生型和 Ti 质粒做对比（注：T-DNA 上没有所用限制酶的酶切位点）。对该实验的分析错误的是 A. 检测结果时使用了放射性标记的 T-DNA 片段做探针 B. 实验结果证明该突变体核 DNA 中插入了 T-DNA C. 不同酶切显示的杂交带位置不同，说明 T-DNA 有不同的插入位置 D. 若野生型也出现杂交带，则实验样本可能被污染，检测结 果不准确 14. 将水稻耐盐碱基因 OsMYB56 导入不耐盐碱水稻品种吉粳 88 中，培育耐盐碱海水稻新品种。 下图 PCR 扩增 OsMYB56 时需要添加引物，应选用的引物组合为（ ） A. 5'—CTTGGATGAT 一 3 和 5'一 TCTGTTGAAT 一 3' B. 5'一 CTTGGATGAT 一 3 和 5'一 TAAGTTGTCT 一 3' C. 5'一 ATTCAACAGA 一 3'和 5'一 ATCATCCAAG 一 3' D. 5'一 ATTCAACAGA 一 3'和 5—GAACCTACTA—3' 15. 人体内的蛋白 TPA 能降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，但为心梗患者注射大剂量的 TPA 会诱发颅内出血。研究证实，通过蛋白质工程，将 TPA 第 84 位的半胱氨酸换成丝氨酸，可制造出性能优异的改良 TPA，进而显著降低出血副作用。下列关于该蛋白质工程的叙述正确的是（ ） A．制造改良 TPA 的过程不遵循中心法则 B. 可利用 X 射线衍射技术分析 TPA 的晶体结构 C. 该例中 TPA 蛋白的基因增添碱基时可使用基因定点诱变技术 D. 需要在分子水平上直接对 TPA 进行定向改造 二、选择题：本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分。每小题有一个或多个选项符合 题目要求，全部选对的得 3 分，选对但不全的得 1 分，有选错的得 0 分。 16. 桑葚玫瑰酒既融合了桑葚和玫瑰的果香、花香，又使其营养价值和功能活性增加，极大地满足人们的需求。图 1 为制作桑葚玫瑰酒的装置图；图 2 为不同桑葚汁与玫瑰质量比对花色苷含量、酒精度和感官评分（感官评分越高，品质越好）的影响。下列相关叙述正确的是（ ） A. 桑葚玫瑰酒发酵所用菌种的代谢类型与醋酸菌相同 B. 图 1 中排气口连接长而弯曲的胶管可避免其他微生物进入装置 C. 由图 2 可知，桑葚汁与玫瑰质量比对酒精度影响不大 D. 花色苷含量随桑葚汁与玫瑰质量比的增大而降低，质量比为 4：1 时酒的感官评分最高 17. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） A．①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能B．②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化C．③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育D．⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 18. 下列关于 DNA 的提取和 DNA 片段的扩增及电泳鉴定的叙述，错误的是（ ） A. 利用 DNA 和蛋白质在冷酒精中溶解性的差异可初步分离出 DNA B. 电泳鉴定时，在带电量相同的情况下相对分子质量越大的 DNA 片段距离加样孔越远 C. 琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中含指示剂，可以在紫外灯下被检测出来D．鉴定 DNA 时，应将丝状物直接加入二苯胺试剂中进行沸水浴加热 19. 胰岛素可以用于治疗糖尿病，但是胰岛素被注射到人体中后，会堆积在皮下，要经过较长的 时间才能进入血液，而进入血液的胰岛素又容易被分解，因此治疗效果受到影响。如图是用蛋白 质工程设计速效胰岛素的生产过程，下列说法正确的是（ ） A. 蛋白质工程是根据人们的特定需求，直接对蛋白质结构进行的设计或改造B．蛋白质工程难度很大的主要原因是蛋白质的功能必须依赖复杂的空间结构C．在将基因表达载体导入大肠杆菌时，一般要用 Ca2+处理该菌 D．在大肠杆菌中直接生产的胰岛素不具有生物活性 20. 为研究一种双链 DNA 分子 A 的分子质量大小，用不同的限制酶对 A 进行切割，切割产物通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，用大小已知的 DNA 片段的电泳结果作为分子质量大小的标记。下列说法正确的是（ ） A. DNA 分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA 分子大小和构象有关 B. 凝胶中加入 DNA 染色剂，电泳后将凝胶放在紫外灯下观察 C. A 为一个环状 DNA 分子，有一个 NotⅠ酶切位点和两个EcoRI 酶切位点 D. A 的分子质量大小为 10kb，NotI 酶切位点与 EcoRI 酶切位点的最大距离为 2kb 三、非选择题：本题共 5 小题，共 55 分。 21. ( 组别 处理方法 平均苗高 /cm 平均根长 /cm 平均根数 / 条 ① S 0 6.42 3.30 8.80 ② S 1 2.59 2.55 4.20 ③ S 1 +T 1 4.99 3.54 5.67 ④ S 1 +T 2 5.02 3.57 6.13 ⑤ S 1 +T 3 6.11 4.14 6.47 )脯氨酸是植物在盐胁迫条件下液泡中积累的重要氨基酸，在植物渗透调节中发挥关键作用。 为研究盐胁迫条件下，脯氨酸浸种对水稻幼苗形态相关指标的影响，研究者做了相关实验，结果 如下表所示。回答下列问题： 注：S1 指在水稻培养基中添加一定浓度的 NaCl；T1～T3 添加的脯氨酸浓度依次升高。 (1) 盐胁迫下水稻细胞中散失的水分主要是 。 (2) 上述实验的处理方案中，S0 的处理方式为 。实验结果表明，用 T1 浓度的脯氨酸浸种 （填“能”或“不能”）缓解盐胁迫对水稻性状的影响，依据是 。 (3) 根据题意和实验结果推测，水稻积累脯氨酸可缓解盐胁迫对水稻生长抑制的机理是 ， （答出 2 点）。 22. 聚羟基丁酸酯（PHB）是某些细菌在碳源充足，氮源缺乏状态下产生的一类颗粒状、可作为细 菌体内碳源和能量储备物的高分子化合物，能被苏丹染料染色，可溶于氯仿。PHB 具有生物可降解性和生物相容性，用于可降解包装材料及医药行业。天然菌中的 PHB 产量较低，对天然菌进行诱变和筛选可得到高产 PHB 合成菌。 （1） PHB 合成菌的分离培养基的成分为葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl 和琼脂，该培养基中氮源主要来自 ，为使 PHB 合成菌胞体内积聚更多 PHB，该培养基成分配比的特点是 。 （2） 将等浓度土壤稀释液接种在 PHB 分离培养基上后，甲组用紫外线照射，乙组不作处理。培养一段时间后，发现甲组的菌落数少于乙组，原因是 。通过显微观察法初筛 PHB 合成菌的方法是 。复筛时需要提取胞体内的 PHB，方法是 。 （3） 对复筛得到的 A~E 五个菌株单独培养，检测 PHB 产量，结果如下图。A~E 株菌中适于作工程菌的是 ，其它菌株不适合作工程菌的原因是 。 （4） 在发酵罐中连续发酵生产 PHB 时，除控制发酵温度、pH 并随时检测培养液中 PHB 合成菌的数量外，还应 （答出 2 条）。 23. EB 病毒(EBV)可引发鼻咽癌等癌症。我国科研人员制备有效阻断 EBV 感染的单克隆抗体， 为治疗鼻咽癌和研发疫苗提供帮助。回答下列问题。 (1) 图 1 中，EBV 表面的糖蛋白 gHgL 与上皮细胞表面受体(如 E2 等)结合后，导致 gB 的 发生变化，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合。膜融合过程体现了膜具有 性。gHgL 可作为制备有效阻断 EBV 感染的单克隆抗体的 。 图 1 (2) 为了获得可以特异性结合gHgL 的单克隆抗体，研究人员首先将荧光标记的 gHgL 探针加入EBV 感染恢复期的外周血中，筛选分离出有荧光标记的 细胞；然后提取该细胞中的 gHgL 抗体 mRNA，通过 获得相应的 cDNA，再扩增出 gHgL 抗体基因，最后转入细胞成功表达出单克隆抗体。 (3) 科研人员已筛选出可以特异性结合 gHgL 的单抗 D8，与已报道的单抗 A1 相比，两者都能显著抑制 EBV 病毒感染上皮细胞。将 gHgL 与 D8 或 A1 混合接触后，检测 gHgL 与上皮细胞表面受体E2 的结合能力，结果如图 2。 图 2 分析实验结果可知 D8 与 A1 作用的区别是 ；由此可见，制备单抗 A1 时所用的特定抗原 (填“是”或“不是”)gHgL。 (4) 为了更好地阻断 EBV 感染，研究人员提出采用单抗 D8 和单抗 A1 联合用药，结合上述研究， 判 断 D8 、 A1 是 否 具 有 协 同 效 应 并 说 明 理 由 ： 。 24. pBR322 质粒是基因工程中较常用的运载体。如图所示为 pBR322 质粒，其中 ampr（氨苄青霉素抗性基因）和 tetr（四环素抗性基因）为标记基因，ori 为复制原点，其他均为限制酶及其识别位点，并且每种限制酶的识别位点都只有一个。回答下列问题： (1) 制备重组质粒，需要 酶和 酶。若制备重组质粒时，使用 PvuⅠ切割该质粒， 则检测目的基因是否导入受体细胞，需要在培养基中添加 。 (2) 该质粒中的 BamHⅠ识别的核苷酸序列及切割位点为—G↓GATCC—，而 Sau3AⅠ识别的核苷酸序列只有 4 个碱基。若 BamHⅠ和 Sau3AⅠ分别切割 DNA 所形成的 DNA 片段能拼接成一条 DNA 链， 则Sau3AⅠ识别的核苷酸序列及切割位点为 。该拼接在一起的 DNA 片段， （填“能”“不能”或“不一定能”）被 BamHⅠ识别。 (3) 与图示质粒相比，完整的重组质粒中还应有 三种特殊的 DNA 片段。若受体细胞为大肠杆菌，则该菌经钙离子处理后，将具备的 特性。 (4) 若要通过基因工程获得转基因莴苣，首先将构建好的目的基因表达载体导入土壤农杆菌，目的是利用农杆菌的 ，使目的基因进入莴苣细胞，并将其插入到莴苣细胞中的 上， 使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣。要想检测获得的转基因莴苣中目的基因是否表达，在分子水平上可用 法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功。 25. 黏膜免疫系统作为第一道免疫防御屏障，能够参与保护生物体免受病原体的感染。多聚免疫球蛋白受体（pIgR）作为黏膜免疫防御的一个关键因子，能够介导免疫球蛋白跨过上皮细胞进行转运和分泌，发挥免疫球蛋白在黏液中清除病原体和毒素的作用。研究人员从大菱鲆提取 pIgR 基因， 针对不同器官组织开展了 pIgR 基因研究（如下图），其中 DEPC 物质可与 RNA 酶结合使酶发生变性。 （1） 引物的作用是 ，提取过程加入 DEPC 物质作用是 。 （2） 为将 pIgR 基因以正确方向插入质粒需要双酶切，这就要求在设计引物时，需在引物的 5'端加入相应的酶切位点。已知 a 链为转录模板链，引物 1 的 5'端酶切位点的碱基序列为 GAATTC， 则引物 2 的 5'端酶切位点的碱基序列为 ，理由是 。 （3） 构建 pIgR 基因表达载体后，与处于感受态的大肠杆菌菌株混合，pIgR 基因表达载体进入菌体内，此过程称为 。然后将菌液涂布在含有 的 LB 固体培养基培养，加入诱导剂诱导 pIgR 基因在大肠杆菌中表达，提取、纯化蛋白质。 （4） 在整个实验过程中多次使用 PCR 技术，如利用 PCR 技术扩增 pIgR 基因时，需要在反应体系中加入 、 、引物、耐高温的 DNA 聚合酶、缓冲液等物质，缓冲液中添加 Mg2 的作用是+ 。 $$