福建省南平市顺昌县第一中学2024-2025学年高二下学期4月份考试生物试卷

顺昌一中2024-2025学年第二学期4月份考试 高二生物试卷 (考试范围:选必3第1章-第3章第2节 考试时间:75分钟 试卷满分:100分) 一、单择题(本题共20小题，每小题2分，共40分。) 1．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，无需进行碱基互补配对的步骤是（　　） A．PCR扩增目的基因 B．基因表达载体的构建 C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测与鉴定 【答案】C 【分析】DNA复制、转录和翻译过程，以及基因工程中表达载体的构建过程等均需要进行碱基互补配对。 【详解】A、PCR扩增目的基因的原理是DNA半保留复制，需要进行碱基互补配对，A不符合题意； B、基因表达载体的构建过程中，黏性末端之间的连接进行碱基互补配对，B不符合题意； C、将目的基因导入受体细胞过程中没有进行碱基互补配对，C符合题意； D、目的基因的检测与鉴定常用PCR技术，需进行碱基互补配对；目的基因表达包括转录和翻译过程，也要进行碱基互补配对，D不符合题意。 故选C。 2．某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（    ） A．培养基pH需偏碱性 B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C．需在无氧条件下培养 D．分离得到的微生物均为乳酸菌 【答案】C 【分析】泡菜是利用附生在蔬菜表面的植物乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等发酵制成的。这些微生物一般为厌氧、兼性厌氧或微好氧菌。它们的发酵产物不仅有乳酸，还会有醇、酯等，因而使泡菜具有特殊的风味。 【详解】A、因为乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸，故其生活的环境是酸性，培养基pH需偏酸性，A错误； B、平板划线接种时不需要稀释，B错误； C、乳酸菌是厌氧型微生物，所以需在无氧条件下培养，C正确； D、参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等，所以分离得到的微生物除了乳酸菌，还会有其他耐高盐的微生物，D错误。 故选C。 3．土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T－DNA片段转入植物的基因组。利用农杆菌以Ti质粒作为载体进行转基因，下列相关叙述正确的是(　　) A．目的基因应插入T－DNA片段外，以防止破坏T－DNA B．用Ca2＋处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞 C．Ti质粒是一种环状DNA分子，没有双螺旋结构 D．可以用PCR技术检测外源DNA是否整合到植物的染色体DNA上 【答案】 D 【详解】 在农杆菌转化法中，需要将目的基因插入到T－DNA片段上，有利于介导外源DNA整合到植物的染色体DNA上，A错误；农杆菌侵染植物细胞不需要用Ca2＋处理，B错误；Ti质粒是一种环状DNA分子，是存在于细菌细胞质中的DNA，具有双螺旋结构，C错误。 故选D。 4．下列关于细胞全能性的描述正确的是（    ） A．大麦种子萌发长成完整植株的过程体现了植物细胞的全能性 B．克隆猴中中、华华的培育体现了高度分化的动物体细胞也具有发育的全能性 C．胚胎干细胞来源于早期胚胎，体外培养得到各种类型组织细胞的过程体现了细胞的全能性 D．生殖细胞不具有控制该物种遗传特性的所有基因，所以不具备发育的全能性 【答案】C 【分析】关于细胞的“全能性”，可以从以下几方面把握：（1）概念：细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体或分化形成各种细胞的潜能。（2）细胞具有全能性的原因是：细胞含有该生物全部的遗传物质。（3）细胞全能性大小：受精卵＞干细胞＞生殖细胞＞体细胞。（4）细胞表现出全能性的条件：离体、适宜的营养条件、适宜的环境条件。 【详解】A、种子是植物的幼体，大麦种子萌发长成完整植株的过程不能体现植物细胞的全能性，A错误； B、克隆猴中中、华华的培育是细胞核移植的产物，体现了高度分化的动物体细胞核的全能性，B错误； C、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有发育成完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。胚胎干细胞来源于早期胚胎，体外培养得到各种类型组织细胞的过程体现了细胞的全能性，C正确； D、单倍体育种体现了生殖细胞也具有全能性，D错误。 故选C。 5．某一生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（    ） A．若为植物体细胞杂交技术，直接用聚乙二醇处理两种植物细胞后会出现膜融合 B．若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测就可得到大量的单克隆抗体 C．若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞可直接移植到受体母牛子宫内获得克隆牛 D．若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核 【答案】D 【分析】植物体细胞杂交技术中首先用酶解法去壁，一般使用纤维素酶和果胶酶处理；然后诱导原生质体融合，采用的方法一般包括物理法（离心、振荡、电激）、化学法（用聚乙二醇处理）；培养融合的原生质体再生出新的细胞壁，形成杂种细胞。然后杂种细胞经过植物组织培养技术可以培养形成杂种植株。 【详解】A、若甲、乙为植物细胞，首先用酶解法去壁，一般使用纤维素酶和果胶酶处理，A错误； B、若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测，然后将杂交瘤细胞大量培养，可得到大量的单克隆抗体，B错误； C、若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞需培养到桑椹胚或囊胚，然后移植到受体母牛子宫内获得克隆牛，C错误； D、若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核或透明带和卵细胞膜之间的两个极体，D正确。 故选D。 6．谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，发酵工程中通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述错误的是（    ） A．利用谷氨酸棒状杆菌进行发酵，其中心环节是发酵罐内发酵 B．发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L-谷氨酰胺产量 C．提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量 D．发酵结束后，采用适当的提取、分离和纯化措施可获得L-谷氨酰胺 【答案】C 【分析】1、发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。 2、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。 3、产品不同，分离提纯的方法一般不同。 （1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来。 （2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。 4、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。 5、发酵过程般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。 【详解】A、利用谷氨酸棒状杆菌进行发酵，其中心环节是发酵罐内发酵，A正确； B、谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，谷氨酰胺合成酶最适pH为5.6，因此发酵初期控制pH为7.0，有利于增加谷氨酸棒状杆菌的数量，后调为5.6，有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性，进而提高L-谷氨酰胺产量，B正确； C、由图可知，提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酰胺合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量，但谷氨酸合成酶会使L-谷氨酰胺再转化为L-谷氨酸，反而降低L-谷氨酰胺产量，C错误； D、L-谷氨酰胺是细胞代谢产物，对细胞代谢产物可通过提取、分离和纯化措施来获得产品，D正确。 故选C。 7．培育试管动物、克隆动物和转基因动物都要用到的生物技术有（    ） A．动物细胞培养技术、胚胎移植技术 B．体外受精技术、胚胎移植技术 C．核移植技术、动物细胞培养技术 D．目的基因的筛选技术、动物细胞培养技术 【答案】A 【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。 【详解】A、培育试管动物、克隆动物和转基因动物时，都要用到动物细胞培养技术（细胞工程和胚胎工程的基础）、胚胎移植技术（胚胎工程的最后一个环节），A正确； B、克隆动物属于无性繁殖，无须用到体外受精技术，B错误； C、试管动物和转基因动物不一定需要核移植技术，C错误； D、试管动物、克隆动物无须用到目的基因的筛选技术，D错误。 故选A。 8．下图是研究人员利用生物工程技术培育能产生人生长激素的转基因牛的过程。下列叙述正确的是（　　） A．①表示基因表达载体的构建，有时为了满足应用需要，会在载体中人工构建诱导性启动子 B．接受了重组DNA的受精卵，可直接移植到代孕母牛的子宫 C．若在②过程中培养到囊胚阶段，对胚胎进行酶处理，可培育出多头相同的转基因牛 D．胚胎干细胞具有全能性，故受体细胞可用胚胎干细胞代替受精卵 【答案】A 【分析】基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。转基因动物是指利用基因工程技术改变基因组成的动物，即基因组中增加外源基因的动物。 【详解】A、①过程是构建重组DNA，目的基因表达载体的构建是基因工程的核心环节，有时为了满足应用的需要，会在载体中人工构建诱导型启动子，当诱导物存在时，可以激活或抑制目的基因的表达，从而实现对目的基因表达的调控，A正确； B、接受了重组DNA的受精卵需要在体外进行早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚时期才可移植到代孕母牛的子宫，B错误； C、若在②过程中培养到囊胚阶段，应采用胚胎分割技术，可培育出多头相同的转基因牛，C错误； D、胚胎干细胞具有较高的全能性，但受精卵的全能性最高，受体细胞不可用胚胎干细胞代替受精卵，D错误。 故选A。 9．关于"琼脂糖凝胶电泳"实验，下列叙述正确的是（    ） A．根据待分离DNA片段的大小，需用无菌水配制0.8%～1.2%的琼脂糖溶液 B．向琼脂糖溶液中加入适量的核酸染料后，需在沸水浴内加热至琼脂糖熔化 C．将PCR产物和电泳缓冲液混合后，需用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔 D．待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，需及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察 【答案】D 【分析】PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来。 【详解】A、配制琼脂糖溶液时，应该用缓冲液而不是无菌水来配制，这样才能维持合适的离子强度和pH等条件，保证电泳效果，A错误； B、应该是先将琼脂糖加入缓冲液中，在沸水浴或微波炉中加热至琼脂糖熔化，冷却至50 - 60℃左右时再加入适量的核酸染料，而不是先加染料再加热熔化琼脂糖，B错误； C、PCR产物和上样缓冲液混合，而不是和电泳缓冲液混合，然后用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔，C错误； D、待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察，这样可以清晰地观察到DNA条带的位置和情况，D正确。 故选D。 10．研究表明，精子进入卵母细胞时带入的少量miRNA可促进早期胚胎发育。重构胚不能正常发育是限制核移植技术的重要因素，为探究其原因科学家进行相关实验，结果如图所示。下列说法正确的是（    ） A．重构胚需用电刺激等方法激活后才能完成细胞分裂和发育进程 B．精子miRNA可通过改变重构胚中的遗传信息促进其正常发育 C．精子miRNA可通过提高重构胚中组蛋白甲基化水平促进其正常发育 D．与正常胚胎相比，重构胚中甲基化水平异常主要发生在胚胎孵化时期 【答案】A 【分析】1、生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化的现象，叫作表观遗传。除了DNA甲基化，构成染色体的组蛋白发生甲基化、乙酰化等修饰也会影响基因的表达。 2、用电刺激、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 【详解】A、用电刺激、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，A正确； B、精子 miRNA不会改变重构胚中的遗传信息，B错误； C、据图判断，精子 miRNA 可通过降低重构胚中组蛋白甲基化水平促进其正常发育，C错误； D、孵化发生在囊胚期，但是图中重构胚的甲基化水平最高的实在8细胞时期，D错误。 故选A。 11．用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，假设限制酶对应切点一定能切开。两种酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述错误的是（    ） A．用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段得到6个游离的磷酸基团 B．图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点 C．电泳凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子大小和构象等有关 D．利用PCR技术从图1DNA中扩增出等长的X片段，至少需要3次循环 【答案】A 【分析】PCR扩增的过程 （1）变形：加热超过90℃时，双链DNA解旋为单链。 （2）复性：当温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 （3）延伸：当温度上升到72℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，通过碱基互补配对原则合成新的DNA链。 【详解】A、由图2可知，用限制酶A和B同时切割DNA分子，会形成4种长度的片段，DNA单链的一端具有1个游离的磷酸基团，则DNA双链具有2个磷酸基团。因此用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段最终得到8个游离的磷酸基团，A错误； B、结合图1和图2中第一列限制酶A和B同时处理的电泳条带结果可知，图1中X代表的碱基对数为4500，根据图2中①电泳分离结果存在3500bp长度的条带可知，①是单独使用限制酶A处理DNA片段的酶切产物电泳分离结果，再根据①电泳分离结果存在500bp长度和6000bp长度的条带可知，Y是限制酶A的酶切位点，B正确； C、电泳凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子大小和构象等有关，C正确； D、引物A或B结合的单链DNA记作长链，引物A或B合成的子链记作中链，以中链为模板合成的子链记作短链，则第一次循环结束后生成2个DNA，其两条链均为长中；第二次循环结束后生成4个DNA，其中2个DNA的两条链为长中， 2个DNA的两条链为短中；第三次循环结束后生成8个DNA，其中2个DNA的两条链为长中，4个DNA的两条链为短中，2个DNA的两条链为短短，这两条脱氧核苷酸链等长。因此设计引物从图1 DNA中扩增出等长的X片段，至少需要3次循环，D正确。 故选A。 12．下图是“DNA 的粗提取与鉴定”实验中的一个操作步骤示意图。下列相关叙述不正确的是 （    ） A．选用植物细胞提取DNA 时需先研磨破碎细胞 B．所示实验操作中有一处明显错误，可能导致试管2中蓝色变化不明显 C．选用动物细胞提取DNA时，可选用鸡血提取 D．试管1的作用是证明物质的量浓度为2mol/L 的NaCl溶液遇二苯胺试剂出现蓝色 【答案】D 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理： （1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精； （2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、提取植物材料的DNA应先破坏细胞结构，让DNA释放出来，A正确； B、图2所示实验的试管中溶液的液面高于烧杯中的液面，可能导致加热不充分，试管2中蓝色变化不明显，B正确； C、鸡血细胞富含DNA，可以用来进行“DNA的粗提取与鉴定”实验，C正确； D、图2试管1起对照作用，目的是证明沸水浴下物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液遇二苯胺试剂不会出现蓝色，而DNA遇二苯胺试剂出现蓝色，D错误。 故选D。 13．下图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”培育的流程，下列叙述错误的是（    ） A．图中的卵子实际上是发育到MⅡ期的卵母细胞 B．过程①通过电融合法使供体细胞与去核的卵母细胞融合，形成重构胚 C．过程①、②分别应用了核移植技术和胚胎移植技术 D．中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定 【答案】C 【分析】动物细胞核移植技术是将动物的细胞核移入一个去核卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。分析图示可知，①为将纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②为对重组细胞进行体外培养，发育成新胚胎，再进行③胚胎移植过程，最终获得克隆猴。 【详解】A、在核移植技术中，用于接受供体细胞核的卵子实际上是发育到MⅡ期（减数第二次分裂中期）的卵母细胞，因为此时的卵母细胞细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质，有利于重组细胞的发育，A正确； B、过程①是将供体细胞（成纤维细胞）与去核的卵母细胞进行融合，通常采用电融合法等方法使两者融合，形成重构胚，B正确； C、过程①应用了核移植技术，即将成纤维细胞的细胞核注入去核的卵母细胞中；过程②是早期胚胎培养技术，是将重构胚在体外培养成早期胚胎，而胚胎移植技术是将早期胚胎移植到代孕母猴的子宫内，图中③过程才是胚胎移植技术，C错误； D、中中、华华是通过体细胞克隆技术培育而来，其细胞核中的遗传物质来自成纤维细胞，而性别是由细胞核中的性染色体决定的，所以中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定，D正确。 故选C。 14．肺类器官拥有类似支气管和肺泡的结构，与人肺部组织结构功能相似，肺上皮干细胞诱导生成的肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，过程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．培养肺上皮干细胞的过程中要定期更换培养液 B．肺上皮干细胞分化程度高于ES细胞且具有组织特异性 C．肺类装配体形成过程中利用了动物细胞融合技术 D．肺类装配体可用于研究肺部疾病的致病机制和开发药物等 【答案】C 【分析】1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质：基因的选择性表达； 2、动物细胞培养的条件： （1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害； （2）营养物质：无机物（无机盐、微量元素等）、有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）、 血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份) ； （3）温度和pH（36.5±0.5℃，7.2～7.4）； （4）气体环境（95%的空气+5%CO2的混合气体），其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定。 【详解】A、在培养肺上皮干细胞的过程中，细胞会进行代谢，产生的代谢废物等会积累在培养液中，这些废物可能对细胞的生长和增殖产生不利影响，所以要定期更换培养液，以清除代谢废物，提供细胞生长所需的营养物质等，A正确； B、ES细胞即胚胎干细胞，具有发育的全能性，分化程度较低；而肺上皮干细胞是已经有一定分化方向的干细胞，分化程度高于ES细胞，并且它是肺部的上皮干细胞，具有组织特异性，B正确； C、从题干和图中可知，肺类装配体是肺类器官自组装或与成熟细胞组装形成的，并没有体现动物细胞融合技术，动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，在此过程中未涉及，C错误； D、因为肺类装配体拥有类似支气管和肺泡的结构，与人肺部组织结构功能相似，所以可用于研究肺部疾病的致病机制和开发药物等，为相关研究和药物开发提供了很好的模型，D正确。 故选C。 15．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法正确的是（    ） A．野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸，因此培养基中无需提供氮源 B．①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸 C．影印时应将细菌原位转印至培养基③④，然后用涂布器涂布均匀 D．从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突变株 【答案】B 【分析】由题图信息分析可知，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基、完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类便可以选择出氨基酸突变株。 【详解】A、野生型大肠杆菌菌株虽然能合成所需的全部氨基酸，但培养基中仍需提供氮源，A错误； B、图中①②④为完全培养基需添加赖氨酸，在④中生长的部分菌落不能在③中生长，故③中没有添加赖氨酸，B正确； C、影印时应将细菌原位转印至培养基③④，但不能用涂布器涂布均匀，C错误； D、结合图示可知，甲在培养基③中无法生长，在培养基④中可生长，说明甲是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株，D错误。 故选B。 16．刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，但不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素分解菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．该鉴别培养基尿素是唯一的氮源 B．完成图中操作，接种环需经过4次灼烧灭菌 C．该方法也可用于微生物数量的测定 D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 【答案】B 【分析】刚果红染色法利用的原理是：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，当纤维素被分解后，在培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。在分离分解纤维素的微生物时，可在培养基中添加纤维素对目标微生物进行选择培养，随后对样品进行梯度稀释，涂布到含有刚果红的培养基上，挑选产生透明圈的菌落即为目标微生物。 【详解】A、鉴别培养基是对纤维素分解菌进行鉴别，无需使用尿素作为唯一的氮源，A错误； B、接种环在每次划线前后均需灼烧，图中显示有三个划线区，所以接种环需要经过4次灼烧灭菌，B正确； C、划线分离法只能用于菌种的分离，而无法对微生物进行计数，C错误； D、刚果红与纤维素形成红色复合物，纤维素被降解后，会在菌落周围出现透明圈，D错误。 故选B。 17．近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株——拟杆菌新菌株并进一步研究了其生物学特性。有关说法错误的是（　　） A．培养基接入沉积物样品后，需要在低温厌氧培养一段时间才能获得含拟杆菌的培养物 B．在以纤维素为唯一碳源时可以得到纯种培养的拟杆菌新菌株 C．将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存 D．藻类细胞解体后难降解的多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部，推测拟杆菌新菌株为异养生物，作为分解者起作用 【答案】B 【分析】分析图中曲线可知，在以纤维素为碳源的培养基中，细胞数量最多，可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。 【详解】A、含拟杆菌生活在某海域1146米深海冷泉附近，该处温度较低且无氧，因此培养基接入沉积物样品后，需要在低温厌氧培养一段时间才能获得含拟杆菌的培养物，A正确； B、分析图中曲线可知，在以纤维素为碳源的培养基中，细胞数量最多，可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好，但无法保证在以纤维素为唯一碳源时可以得到纯种培养的拟杆菌新菌株，B错误； C、深海冷泉中存在的某些微生物，只有利用冷泉中的特有物质才能生存，或者只能在深海冷泉的特定环境中才能存活，故在缺少深海冷泉特有物质或缺少特定环境的情况下，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍可能有很多微生物不能被分离筛选出来，C正确； D、藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部，这些碎屑中含有机物，拟杆菌作为分解者，可将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到无机环境中，有利于碳循环的顺利进行，D正确。 故选B。 18．镇江陈醋具有“色、香、酸、醇、浓”之特色，其主要工艺流程如下图。相关叙述正确的是（    ）    A．作为工业生产，镇江陈醋的酿制过程需要做到严格无菌 B．“淋饭”有助于提高发酵原料的透气性，有助于霉菌的糖化等过程 C．接种醋酸菌后的固态发酵需要“翻缸”，主要目的是抑制杂菌 D．后发酵时间越长，醋体中风味物质的不断堆积导致醋品更佳 【答案】B 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、醋酸菌参与果醋制作的工业生产，A错误； B、“淋饭”有助于提高发酵原料的透气性，为霉菌的糖化等过程提供氧气，B正确； C、醋酸发酵过程中利用的微生物是醋酸菌，发酵需要充足的氧气，所以“翻缸”目的是提供氧气，C错误； D、后发酵时间不能太长，需要适宜，发酵时间越长，可能会产生其他有害的物质或者滋生其他杂菌，D错误。 故选B。 19．包扎伤口时，需要选用透气的消毒纱布或“创可贴”等敷料。图示研究人员开发的一种活性蓝细菌水凝胶贴片，其有助于慢性伤口的愈合。下列叙述错误的是（    ） A．该水凝胶无需为活性蓝细菌提供有机营养物质 B．在接种蓝细菌前须将水凝胶灭菌后再调pH至中性或弱碱性 C．长期口腔溃疡的患者，其伤口不适宜使用该种水凝胶贴片 D．水凝胶贴片开发过程需考虑蓝细菌的储存耐久性等问题 【答案】B 【分析】1、蓝细菌细胞中没有真正的细胞核，因而为原核生物，细胞中含有叶绿素和藻蓝素，能吸收光能，因而可进行光合作用产生氧气，图示中创可贴加入蓝细菌的目的就是利用了蓝细菌在光下产生氧气的功能； 2、包扎伤口时，需要选用透气的消毒纱布或“创可贴”等敷料，可以避免厌氧菌无氧呼吸产生有毒物质。 【详解】A、蓝细菌为自养型生物，可通过光合作用合成有机物，该水凝胶无需为活性蓝细菌提供有机营养物质，A正确； B、在接种蓝细菌前须将水凝胶调pH至中性或弱碱性后再灭菌，B错误； C、口腔中无光照，水凝胶贴片中的蓝细菌不能进行光合作用，因此长期口腔溃疡的患者，其伤口不适宜使用该种水凝胶贴片，C正确； D、水凝胶贴片开发过程需考虑蓝细菌的储存耐久性、避光保存等问题，D正确。 故选B。 20．实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（    ） A．从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B．二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C．若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D．图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 【答案】C 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A 、从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质能与小鼠产生的抗体发生特异性结合，所以该蛋白质相当于抗原，A正确。 B 、由图可知，二抗是与一抗结合的，且带有特殊标记，所以二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体，B正确。 C 、若未显示出杂交带，有可能是目的基因导入了受体细胞，但目的基因没有表达，而不是目的基因未导入受体细胞，C错误。 D 、图示操作是通过抗原 - 抗体杂交技术来检测转基因棉花是否产生了 Bt 毒蛋白，D正确。 故选C。 二、非选择题(本题共5小题，共60分) 21．(11分) 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。回答下列问题： (1)狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都需要利用 技术，④过程选用愈伤组织的细胞进行诱变的原因是 。 (2)启动②③过程的关键激素是 ，其中 过程需要光照。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的蔗糖，原因是 。 (3)黄酮类化合物是广泛分布于植物体内的含量较少的次生代谢物。某同学认为，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物，主要是利用促进细胞生长的培养条件，来提高单个细胞中黄酮类化合物的含量，你同意该同学的观点吗，并说明相应的理由： 。 【答案】(1) 植物组织培养 在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断增殖的状态，因此它们容易受到培养条件和诱变因素（如射线、化学物质等）的影响而产生突变 (2) 生长素和细胞分裂素 ③ 提供碳源（或能源）；维持细胞膜内外渗透压平衡（防止原生质体皱缩或破裂） (3) 不同意；植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量 【分析】1、植物组织培养是指将离体的物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。 2、图中①表示外植体接种，②表示脱分化形成愈伤组织，③表示再分化，④表示再分化过程诱导产生突变体，⑤表示去除细胞壁获得原生质体，⑥表示植物细胞的培养，获取细胞产物黄酮类化合物。 【详解】（1）植物组织培养是指将离体的物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。图中①表示外植体接种，②表示脱分化形成愈伤组织，③表示再分化，形成具有根、芽的幼苗，最后发育成植株乙；④表示再分化过程诱导产生突变体，培养形成植株丙；⑤表示去除细胞壁获得原生质体，然后经过PEG诱导细胞融合，接种培养成植株丁，因此狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都需要利用植物组织培养技术，①过程选择幼嫩的叶作为外植体进行接种，因为幼嫩的叶分裂能力强，分化程度低，容易诱导形成愈伤组织，植物组织培养过程中，形成的愈伤组织具有旺盛的分裂能力，故④过程选用的愈伤组织中的细胞一直处于不断增殖的状态，此时它们容易受到培养条件和诱变因素（如射线、化学物质等）的影响而产生突变。 （2）图中②③过程分别为脱分化与再分化，植物生长素和细胞分裂素是植物组织培养不可缺少的两种调节物质，两者的浓度和配比在脱分化和再分化中起着关键作用。诱导叶绿素的合成，满足叶绿体利用光能进行光合作用制造有机物需要光照，所以利用植物组织培养技术培养植株时，脱分化过程（②）一般不需要光照，再分化过程（③）需要光照。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的蔗糖，其作用主要有两点：一是提供碳源（或能源），二是可以维持细胞内外的渗透压，防止原生质体皱缩或破裂。 （3）不同意该同学的观点，黄酮类化合物属于植物的次生代谢物，植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量。 22．(12分) 美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下。回答下列问题： (1)步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射 和 。 (2)步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是 。 (3)吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入 进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是 。 (4)步骤⑥从 中提取到大量的抗CD14抗体，用于检测巨噬细胞。 【答案】 (1) CD14蛋白/CD14抗原 分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞 (2) 能在体外无限增殖 (3) CD14蛋白 参与形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，有的不能分泌抗CD14抗体 (4) 小鼠腹水 【分析】1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】 （3）步骤①是注射特定抗原，针对本实验目的可知，要获得抗CD14单克隆抗体，故应该注射CD14蛋白/CD14抗原；步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体。 （4）步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，特点是能在体外无限增殖。 （5）根据抗原—抗体杂交原理，应该用CD14蛋白检测其中是否含抗CD14蛋白的抗体。因为形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，因此有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体。 （6）从制备单克隆抗体的流程可知，将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔后，最终要从小鼠的腹水中提取抗CD14抗体。 23．(12分)随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图回答下列问题： (1)应用1中，细胞B获取需对供体2注射 以便获得更多的卵母细胞，使用 技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛，该技术的原理是 。 (2)应用2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫 ，为使受体牛生理状况更适合完成该技术操作，要对受体牛进行 处理，以提高成功率。 (3)在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其 ,得到的卵母细胞需要发育至 时期才能受精。 (4)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过 技术获得二分胚①和②，操作时需将 均等分割。在此之前还可切取 的细胞进行性别鉴定。这种使良种生物大量繁殖的技术属于 （有性/无性）生殖。 (5)应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸，还要加入 。 【答案】(1) 促性腺激素 核移植 动物细胞核的全能性 (2) 胚胎移植 同期发情 (3) 获能 MII期 (4) 胚胎分割 内细胞团 滋养层 无性 (5) 动物血清（或血浆） 【分析】分析题图：应用1中：供体1提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆牛；应用2中：优良公牛和供体1配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；应用3中：采用了胚胎分割技术；应用4中：从早期胚胎和原始性腺中获取胚胎干细胞，并进行体外干细胞培养。 【详解】（1）应用1中供体2提供细胞质，为获取更多的细胞B（卵母细胞），需对供体2注射促性腺激素以促进排卵，使用核移植技术获得重组细胞，最终获得的小牛为克隆牛，该技术是体细胞核移植技术，所依据的原理是动物细胞核的全能性。 （2）应用2属于有性生殖，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植，移植前对受体牛进行同期发情处理，可以使供体和受体处于相同的生理状态，提高成功率。 （3）体外受精时，精子受精前需要进行获能处理，使其具备受精的能力，卵母细胞要发育到MII期才成熟。 （4）通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，操作时需将内细胞团均等分割，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，如果分割不均，会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。在此之前还可切取滋养层的细胞进行性别鉴定，因为滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，不会影响胚胎的发育。这种使良种生物大量繁殖的技术属于无性生殖，因为胚胎分割技术没有经过两性生殖细胞的结合。 （5）在胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸，还要加入动物血清（或血浆）。动物血清中含有多种维持细胞生长和增殖所必需的生长因子、激素等物质，对细胞的生长和维持细胞的正常生理功能起着重要作用。 24．(15分) 下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题： 限制酶 Bam HⅠ Bcl Ⅰ Sau 3AⅠ Hin dⅢ 识别序列及切割位点 (1) 用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用 两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段通过 酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于 生理状态的大肠杆菌。 (2)扩增目的基因，研究人员需要根据 序列设计引物；在PCR反应前，在微量离心管中加入原料、酶等成分后离心，其目的是 ；适当提高复性温度可以提高PCR扩增的特异性，原因是 。 (3)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加 ，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中的 。若利用PCR技术扩增目的基因的过程中消耗了126个引物分子，则该过程DNA扩增了 次。 (3)若BamH Ⅰ 酶切的DNA末端与Bcl Ⅰ 酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 ，对于该部位，这两种酶 （选填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开。 (4)若用Sau3A Ⅰ切图1质粒，最多可能获得 种大小不同的DNA片段。 【答案】(1) Bcl Ⅰ和Hind Ⅲ DNA连接 能吸收周围环境中DNA分子 (2) 目的基因(两端) 使反应液集中于微量离心管底部 特异性越高，则有更多的碱基互补配对，就更耐热 (3) 四环素 引物甲和引物丙 6 (4) （或） 都不能 (5) 7 【分析】分析图1：外源DNA上含有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII和Sau3A I的切割位点，其中限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII的识别序列都能被Sau3k I识别。 分析图2：质粒上有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII三种限制酶的识别序列和切割位点，其中BamHⅠ的切割位点位于两种抗生素抗性基因上。 【详解】（1）选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的四环素抗性基因丢失，因此只能选BclI和HindⅢ两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过DNA连接酶（连接DNA片段）作用后获得重组质粒，为了扩增重组质粒，需将其转入处于感受态的大肠杆菌。 （2)扩增目的基因，研究人员需要根据目的基因两端序列设计引物；在PCR反应前，在微量离心管中加入原料、酶等成分后离心，其目的是使反应液集中于微量离心管底部；适当提高复性温度可以提高PCR扩增的特异性，原因是特异性越高，则有更多的碱基互补配对，就更耐热。 （3）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，根据质粒上的抗性基因，由于氨苄青霉素抗性基因被破坏，所以应在筛选平板培养基中添加四环素，PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙。若扩增过程中消耗引物分子126个，说明通过DNA复制产生（126+2）÷2=64个DNA分子，由26=64，因此DNA扩增了6次。（4）BamHⅠ酶切产生的粘性末端为  和  ，BclⅠ酶切产生的粘性末端为  和  ，经DNA连接酶连接后，连接部位的6个碱基对序列为  或  ，对于该部位，由于没有这两种酶的酶切位点，因此都不能切开。 （5）其中HindⅢ的识别序列不能被Sau3AⅠ识别，而限制酶BclⅠ、BamHⅠ的识别序列都能被Sau3A Ⅰ识别，因此用Sau3A Ⅰ切图1质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段。 25．(10分)大豆是重要的粮油作物，提高大豆产量是我国农业领域的重要任务。我国研究人员发现，基因S在大豆品种DN（种子较大）中的表达量高于品种TL（种子较小），然后克隆了该基因（两品种中基因S序列无差异）及其上游的启动子序列，并开展相关研究。 (1)基因S启动子的基本组成单位是 。 (2)通过基因工程方法,将DN克隆的“启动子D+基因S”序列导入无基因S的优质大豆品种YZ。根据题图所示信息（不考虑未标明序列）判断构建重组表达载体时，为保证目标序列的完整性，不宜使用的限制酶是 ；此外，不宜同时选用酶SpeⅠ和XbaⅠ。原因是 。 (3)为验证“启动子D+基因S”是否连接在表达载体上，可用限制酶对重组表达载体酶切后进行电泳。电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有 。经验证的重组表达载体需转入农杆菌，检测转入是否成功的技术是 。 (4)用检测后的农杆菌转化品种YZ所得再生植株YZ-1的种子变大。同时将从TL克隆的“启动子T+基因S”序列成功导入YZ，所得再生植株YZ-2的种子也变大，但小于YZ-1。综合分析，大豆品种DN较TL种子大的原因是 。 【答案】(1)脱氧核糖核苷酸（脱氧核苷酸） (2) EcoRⅠ 酶切后形成的片段黏性末端相同，易自我环化；不能保证目标片段与载体定向连接（反向连接） (3) 酶切后的空载体片段，启动子D+基因S片段      PCR (4) 品种DN的基因S上游启动子效应比TL强，使得基因S表达量更高，种子更大 【详解】（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，用于启动DNA的转录，是一段DNA片段，其基本组成单位是四种脱氧核糖核苷酸。 （2）①根据图示信息可知，“启动子D＋基因S”的DNA序列上存在EcoR Ⅰ的识别序列，若使用限制酶EcoR Ⅰ，会使目的基因序列被破坏； ②根据图中限制酶的识别序列可知，酶Spe Ⅰ和Xba Ⅰ切割产生的黏性末端相同，若用这两种限制酶切割，形成的DNA片段在构建基因表达载体时，容易出现自我环化，以及无法保证目的基因片段与载体片段单向连接，影响目的基因在受体细胞中的表达。 （3）①DNA电泳可以分离不同大小的DNA片段，用限制酶对重组表达载体酶切后的产物不仅有“启动子D+基因S”片段，还有酶切后的空载体片段，因此电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有酶切后的空载体片段和“启动子D+基因S”片段； ②在分子水平上检测目的基因是否转入成过可通过PCR等技术检测受体细胞的DNA上是否插入目的基因或目的基因是否转录出mRNA。 （4）根据（4）题目信息可知，再生植株YZ-1导入的目的基因为取自品种DN的“启动子D＋基因S”序列，再生植株YZ-2导入的目的基因为取自品种TL的“启动子T＋基因S”序列，结合题干信息“两品种中基因S序列无差异”可推测：品种DN的基因S上游的启动子D的效应强于品种TL的启动子T，启动子D使基因S表达量更高，因而种子更大。 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 顺昌一中 2024-2025 学年第二学期 4月考试高二生物答案 一、选择题(本题共 2.5 小题，每小题 2 分，共 50 分) 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C C D C D C A A D A 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 A D C C B B B B B C 二、非选择题(共 60 分) 21．(11分，除标注外，每空 1 分) (1) 植物组织培养 在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断增殖的状态，因此它们容易受到培养条件和诱变因素（如射线、化学物质等）的影响而产生突变 (2 分) (2) 生长素和细胞分裂素(2 分) ③ 提供碳源（或能源）；维持细胞膜内外渗透压平衡（防止原生质体皱缩或破裂） (2 分) (3) 不同意 (1 分)；植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量 (2 分) 22．(12分，每空 2 分) (1) CD14蛋白/CD14抗原 分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞 (2) 能在体外无限增殖 (3) CD14蛋白 参与形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，有的不能分泌抗CD14抗体 (4) 小鼠腹水 23．(12分，每空 1 分) (1) 促性腺激素 核移植 动物细胞核的全能性 (2) 胚胎移植 同期发情 (3) 获能 MII期 (4) 胚胎分割 内细胞团 滋养层 无性 (5) 动物血清 24．(15分，除标注外，每空 1 分) (1) Bcl Ⅰ和Hind Ⅲ DNA连接 能吸收周围环境中DNA分子 (2) 目的基因(两端) 使反应液集中于微量离心管底部 适当提高复性温度可减少引物与非特异性序列的结合 (3) 四环素(2 分) 引物甲和引物丙(2 分) 6 (4) （或）(2 分) 都不能 (5) 7 25．(10分，除标注外，每空 1 分) (1) 脱氧核糖核苷酸（脱氧核苷酸） (2) EcoRⅠ (2 分) 酶切后形成的片段黏性末端相同，易自我环化；不能保证目标片段与载体定向连接（反向连接）(2 分) (3) 酶切后的空载体片段，启动子D+基因S片段(2 分)      PCR (4) 品种DN的基因S上游启动子效应比TL强，使得基因S表达量更高，种子更大(2 分) 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $$本卷由系统自动生成，请仔细校对后使用，答案仅供参考。 顺昌一中2024-2025学年第二学期4月份考试 高二生物试卷 (考试范围:选必3第1章-第3章第2节 考试时间:75分钟 试卷满分:100分) 一、单择题(本题共20小题，每小题2分，共40分。) 1．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，无需进行碱基互补配对的步骤是（　　） A．PCR扩增目的基因 B．基因表达载体的构建 C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测与鉴定 2．某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（    ） A．培养基pH需偏碱性 B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C．需在无氧条件下培养 D．分离得到的微生物均为乳酸菌 3．土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T－DNA片段转入植物的基因组。利用农杆菌以Ti质粒作为载体进行转基因，下列相关叙述正确的是(　　) A．目的基因应插入T－DNA片段外，以防止破坏T－DNA B．用Ca2＋处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞 C．Ti质粒是一种环状DNA分子，没有双螺旋结构 D．可以用PCR技术检测外源DNA是否整合到植物的染色体DNA上 4．下列关于细胞全能性的描述正确的是（    ） A．大麦种子萌发长成完整植株的过程体现了植物细胞的全能性 B．克隆猴中中、华华的培育体现了高度分化的动物体细胞也具有发育的全能性 C．胚胎干细胞来源于早期胚胎，体外培养得到各种类型组织细胞的过程体现了细胞的全能性 D．生殖细胞不具有控制该物种遗传特性的所有基因，所以不具备发育的全能性 5．某一生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（    ） A．若为植物体细胞杂交技术，直接用聚乙二醇处理两种植物细胞后会出现膜融合 B．若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测就可得到大量的单克隆抗体 C．若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞可直接移植到受体母牛子宫内获得克隆牛 D．若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核 6．谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，发酵工程中通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述错误的是（    ） A．利用谷氨酸棒状杆菌进行发酵，其中心环节是发酵罐内发酵 B．发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L-谷氨酰胺产量 C．提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量 D．发酵结束后，采用适当的提取、分离和纯化措施可获得L-谷氨酰胺 7．培育试管动物、克隆动物和转基因动物都要用到的生物技术有（    ） A．动物细胞培养技术、胚胎移植技术 B．体外受精技术、胚胎移植技术 C．核移植技术、动物细胞培养技术 D．目的基因的筛选技术、动物细胞培养技术 8．下图是研究人员利用生物工程技术培育能产生人生长激素的转基因牛的过程。下列叙述正确的是（　　） A．①表示基因表达载体的构建，有时为了满足应用需要，会在载体中人工构建诱导性启动子 B．接受了重组DNA的受精卵，可直接移植到代孕母牛的子宫 C．若在②过程中培养到囊胚阶段，对胚胎进行酶处理，可培育出多头相同的转基因牛 D．胚胎干细胞具有全能性，故受体细胞可用胚胎干细胞代替受精卵 9．关于"琼脂糖凝胶电泳"实验，下列叙述正确的是（    ） A．根据待分离DNA片段的大小，需用无菌水配制0.8%～1.2%的琼脂糖溶液 B．向琼脂糖溶液中加入适量的核酸染料后，需在沸水浴内加热至琼脂糖熔化 C．将PCR产物和电泳缓冲液混合后，需用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔 D．待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，需及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察 10．研究表明，精子进入卵母细胞时带入的少量miRNA可促进早期胚胎发育。重构胚不能正常发育是限制核移植技术的重要因素，为探究其原因科学家进行相关实验，结果如图所示。下列说法正确的是（    ） A．重构胚需用电刺激等方法激活后才能完成细胞分裂和发育进程 B．精子miRNA可通过改变重构胚中的遗传信息促进其正常发育 C．精子miRNA可通过提高重构胚中组蛋白甲基化水平促进其正常发育 D．与正常胚胎相比，重构胚中甲基化水平异常主要发生在胚胎孵化时期 11．用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，假设限制酶对应切点一定能切开。两种酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述错误的是（    ） A．用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段得到6个游离的磷酸基团 B．图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点 C．电泳凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子大小和构象等有关 D．利用PCR技术从图1DNA中扩增出等长的X片段，至少需要3次循环 12．下图是“DNA 的粗提取与鉴定”实验中的一个操作步骤示意图。下列相关叙述不正确的是 （    ） A．选用植物细胞提取DNA 时需先研磨破碎细胞 B．所示实验操作中有一处明显错误，可能导致试管2中蓝色变化不明显 C．选用动物细胞提取DNA时，可选用鸡血提取 D．试管1的作用是证明物质的量浓度为2mol/L 的NaCl溶液遇二苯胺试剂出现蓝色 13．下图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”培育的流程，下列叙述错误的是（    ） A．图中的卵子实际上是发育到MⅡ期的卵母细胞 B．过程①通过电融合法使供体细胞与去核的卵母细胞融合，形成重构胚 C．过程①、②分别应用了核移植技术和胚胎移植技术 D．中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定 14．肺类器官拥有类似支气管和肺泡的结构，与人肺部组织结构功能相似，肺上皮干细胞诱导生成的肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，过程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．培养肺上皮干细胞的过程中要定期更换培养液 B．肺上皮干细胞分化程度高于ES细胞且具有组织特异性 C．肺类装配体形成过程中利用了动物细胞融合技术 D．肺类装配体可用于研究肺部疾病的致病机制和开发药物等 15．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法正确的是（    ） A．野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸，因此培养基中无需提供氮源 B．①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸 C．影印时应将细菌原位转印至培养基③④，然后用涂布器涂布均匀 D．从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突变株 16．刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，但不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素分解菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．该鉴别培养基尿素是唯一的氮源 B．完成图中操作，接种环需经过4次灼烧灭菌 C．该方法也可用于微生物数量的测定 D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 17．近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株——拟杆菌新菌株并进一步研究了其生物学特性。有关说法错误的是（　　） A．培养基接入沉积物样品后，需要在低温厌氧培养一段时间才能获得含拟杆菌的培养物 B．在以纤维素为唯一碳源时可以得到纯种培养的拟杆菌新菌株 C．将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存 D．藻类细胞解体后难降解的多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部，推测拟杆菌新菌株为异养生物，作为分解者起作用 18．镇江陈醋具有“色、香、酸、醇、浓”之特色，其主要工艺流程如下图。相关叙述正确的是（    ） A．作为工业生产，镇江陈醋的酿制过程需要做到严格无菌 B．“淋饭”有助于提高发酵原料的透气性，有助于霉菌的糖化等过程 C．接种醋酸菌后的固态发酵需要“翻缸”，主要目的是抑制杂菌 D．后发酵时间越长，醋体中风味物质的不断堆积导致醋品更佳 19．包扎伤口时，需要选用透气的消毒纱布或“创可贴”等敷料。图示研究人员开发的一种活性蓝细菌水凝胶贴片，其有助于慢性伤口的愈合。下列叙述错误的是（    ） A．该水凝胶无需为活性蓝细菌提供有机营养物质 B．在接种蓝细菌前须将水凝胶灭菌后再调pH至中性或弱碱性 C．长期口腔溃疡的患者，其伤口不适宜使用该种水凝胶贴片 D．水凝胶贴片开发过程需考虑蓝细菌的储存耐久性等问题 20．实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（    ） A．从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B．二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C．若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D．图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 二、非选择题(本题共5小题，共60分) 21．(11分) 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。回答下列问题： (1)狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都需要利用 技术，④过程选用愈伤组织的细胞进行诱变的原因是 。 (2)启动②③过程的关键激素是 ，其中 过程需要光照。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的蔗糖，原因是 。 (3)黄酮类化合物是广泛分布于植物体内的含量较少的次生代谢物。某同学认为，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物，主要是利用促进细胞生长的培养条件，来提高单个细胞中黄酮类化合物的含量，你同意该同学的观点吗，并说明相应的理由： 。 22．(12分) 美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下。回答下列问题： (1)步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射 和 。 (2)步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是 。 (3)吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入 进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是 。 (4)步骤⑥从 中提取到大量的抗CD14抗体，用于检测巨噬细胞。 23．(12分) 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图回答下列问题： (1)应用1中，细胞B获取需对供体2注射 以便获得更多的卵母细胞，使用 技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛，该技术的原理是 。 (2)应用2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫 ，为使受体牛生理状况更适合完成该技术操作，要对受体牛进行 处理，以提高成功率。 (3)在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其 ,得到的卵母细胞需要发育至 时期才能受精。 (4)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过 技术获得二分胚①和②，操作时需将 均等分割。在此之前还可切取 的细胞进行性别鉴定。这种使良种生物大量繁殖的技术属于 （有性/无性）生殖。 (5)应用4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸，还要加入 。 24．(15分) 下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题： 限制酶 Bam HⅠ Bcl Ⅰ Sau 3AⅠ Hin dⅢ 识别序列及切割位点 (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用 两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段通过 酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于 生理状态的大肠杆菌。 (2)扩增目的基因，研究人员需要根据 序列设计引物；在PCR反应前，在微量离心管中加入原料、酶等成分后离心，其目的是 ；适当提高复性温度可以提高PCR扩增的特异性，原因是 。 (3)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加 ，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中的 。若利用PCR技术扩增目的基因的过程中消耗了126个引物分子，则该过程DNA扩增了 次。 (4)若BamH Ⅰ 酶切的DNA末端与Bcl Ⅰ 酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 ，对于该部位，这两种酶 （选填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开。 (5)若用Sau3A Ⅰ切图1质粒，最多可能获得 种大小不同的DNA片段。 25．(10分) 大豆是重要的粮油作物，提高大豆产量是我国农业领域的重要任务。我国研究人员发现，基因S在大豆品种DN（种子较大）中的表达量高于品种TL（种子较小），然后克隆了该基因（两品种中基因S序列无差异）及其上游的启动子序列，并开展相关研究。 (1)基因S启动子的基本组成单位是 。 (2)通过基因工程方法,将DN克隆的“启动子D+基因S”序列导入无基因S的优质大豆品种YZ。根据题图所示信息（不考虑未标明序列）判断构建重组表达载体时，为保证目标序列的完整性，不宜使用的限制酶是 ；此外，不宜同时选用酶SpeⅠ和XbaⅠ。原因是 。 (3)为验证“启动子D+基因S”是否连接在表达载体上，可用限制酶对重组表达载体酶切后进行电泳。电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有 。经验证的重组表达载体需转入农杆菌，检测转入是否成功的技术是 。 (4)用检测后的农杆菌转化品种YZ所得再生植株YZ-1的种子变大。同时将从TL克隆的“启动子T+基因S”序列成功导入YZ，所得再生植株YZ-2的种子也变大，但小于YZ-1。综合分析，大豆品种DN较TL种子大的原因是 。 答案第1页，总2页 高二生物 第 1 页 共 5 页 学科网（北京）股份有限公司 $$高二生物 第 1 页 共 9 页 顺昌一中 2024-2025 学年第二学期 4 月份考试 高二生物试卷 (考试范围:选必 3第 1章-第 3 章第 2 节 考试时间:75 分钟 试卷满分:100 分) 一、单择题(本题共 20 小题，每小题 2 分，共 40 分。) 1．基因工程是在 DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，无需进行碱基 互补配对的步骤是（ ） A．PCR扩增目的基因 B．基因表达载体的构建 C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测与鉴定 2．某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定 NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（ ） A．培养基 pH需偏碱性 B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C．需在无氧条件下培养 D．分离得到的微生物均为乳酸菌 3．土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的 T－DNA 片段转入植物的基因组。利用农杆菌以 Ti质粒作为载体进行转基因，下列相关叙述正确的是( ) A．目的基因应插入 T－DNA片段外，以防止破坏 T－DNA B．用 Ca2＋处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞 C．Ti质粒是一种环状 DNA分子，没有双螺旋结构 D．可以用 PCR技术检测外源 DNA是否整合到植物的染色体 DNA上 4．下列关于细胞全能性的描述正确的是（ ） A．大麦种子萌发长成完整植株的过程体现了植物细胞的全能性 B．克隆猴中中、华华的培育体现了高度分化的动物体细胞也具有发育的全能性 C．胚胎干细胞来源于早期胚胎，体外培养得到各种类型组织细胞的过程体现了细胞的全能 性 D．生殖细胞不具有控制该物种遗传特性的所有基因，所以不具备发育的全能性 5．某一生物工程技术过程中出现细胞融合的操作，下列叙述正确的是（ ） A．若为植物体细胞杂交技术，直接用聚乙二醇处理两种植物细胞后会出现膜融合 B．若为单克隆抗体的制备技术，融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培 养和抗体检测就可得到大量的单克隆抗体 C．若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞可直接移植到受体母牛子宫内获得克隆牛 高二生物 第 2 页 共 9 页 D．若为体外受精技术，细胞融合时可在显微镜下观察到雌、雄原核 6．谷氨酸棒状杆菌生长的最适 pH为 7.0，发酵工程中通过以下代谢途径发酵生产 L-谷氨酰胺。 下列叙述错误的是（ ） A．利用谷氨酸棒状杆菌进行发酵，其中心环节是发酵罐内发酵 B．发酵初期控制 pH为 7.0，后调为 5.6，有利于提高 L-谷氨酰胺产量 C．提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高 L-谷氨酰胺产量 D．发酵结束后，采用适当的提取、分离和纯化措施可获得 L-谷氨酰胺 7．培育试管动物、克隆动物和转基因动物都要用到的生物技术有（ ） A．动物细胞培养技术、胚胎移植技术 B．体外受精技术、胚胎移植技术 C．核移植技术、动物细胞培养技术 D．目的基因的筛选技术、动物细胞培养技术 8．下图是研究人员利用生物工程技术培育能产生人生长激素的转基因牛的过程。下列叙述正确 的是（ ） A．①表示基因表达载体的构建，有时为了满足应用需要，会在载体中人工构建诱导性启动 子 B．接受了重组 DNA的受精卵，可直接移植到代孕母牛的子宫 C．若在②过程中培养到囊胚阶段，对胚胎进行酶处理，可培育出多头相同的转基因牛 D．胚胎干细胞具有全能性，故受体细胞可用胚胎干细胞代替受精卵 9．关于"琼脂糖凝胶电泳"实验，下列叙述正确的是（ ） A．根据待分离 DNA片段的大小，需用无菌水配制 0.8%～1.2%的琼脂糖溶液 B．向琼脂糖溶液中加入适量的核酸染料后，需在沸水浴内加热至琼脂糖熔化 C．将 PCR产物和电泳缓冲液混合后，需用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔 D．待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，需及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察 10．研究表明，精子进入卵母细胞时带入的少量 miRNA可促进早期胚胎发育。重构胚不能正常 发育是限制核移植技术的重要因素，为探究其原因科学家进行相关实验，结果如图所示。下列说 法正确的是（ ） 高二生物 第 3 页 共 9 页 A．重构胚需用电刺激等方法激活后才能完成细胞分裂和发育进程 B．精子 miRNA可通过改变重构胚中的遗传信息促进其正常发育 C．精子 miRNA可通过提高重构胚中组蛋白甲基化水平促进其正常发育 D．与正常胚胎相比，重构胚中甲基化水平异常主要发生在胚胎孵化时期 11．用 A和 B两种限制酶同时和分别处理同一 DNA片段，假设限制酶对应切点一定能切开。两 种酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图 1和图 2所示。下列叙述错误的是（ ） A．用 A和 B两种限制酶同时处理图中同一 DNA片段得到 6个游离的磷酸基团 B．图 1中 X代表的碱基对数为 4500，Y是限制酶 A的酶切位点 C．电泳凝胶中 DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子大小和构象等有关 D．利用 PCR技术从图 1DNA中扩增出等长的 X片段，至少需要 3次循环 12．下图是“DNA 的粗提取与鉴定”实验中的一个操作步骤示意图。下列相关叙述不正确的是 （ ） A．选用植物细胞提取 DNA 时需先研磨破碎细胞 B．所示实验操作中有一处明显错误，可能导致试管 2中蓝色变化不明显 C．选用动物细胞提取 DNA时，可选用鸡血提取 高二生物 第 4 页 共 9 页 D．试管 1的作用是证明物质的量浓度为 2mol/L 的 NaCl溶液遇二苯胺试剂出现蓝色 13．下图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”培育的流程，下列叙述错误的是（ ） A．图中的卵子实际上是发育到MⅡ期的卵母细胞 B．过程①通过电融合法使供体细胞与去核的卵母细胞融合，形成重构胚 C．过程①、②分别应用了核移植技术和胚胎移植技术 D．中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定 14．肺类器官拥有类似支气管和肺泡的结构，与人肺部组织结构功能相似，肺上皮干细胞诱导生 成的肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A．培养肺上皮干细胞的过程中要定期更换培养液 B．肺上皮干细胞分化程度高于 ES细胞且具有组织特异性 C．肺类装配体形成过程中利用了动物细胞融合技术 D．肺类装配体可用于研究肺部疾病的致病机制和开发药物等 15．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只 能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突 变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法正确的是（ ） A．野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸，因此培养基中无需提供氮源 高二生物 第 5 页 共 9 页 B．①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸 C．影印时应将细菌原位转印至培养基③④，然后用涂布器涂布均匀 D．从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突变株 16．刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，但不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发 生这种反应。为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素分解菌，培养结果如图所示。下列叙 述正确的是（ ） A．该鉴别培养基尿素是唯一的氮源 B．完成图中操作，接种环需经过 4次灼烧灭菌 C．该方法也可用于微生物数量的测定 D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 17．近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域 1146米深海冷泉附近 沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株——拟杆菌新菌株并进一步研究了其生物学特性。 有关说法错误的是（ ） A．培养基接入沉积物样品后，需要在低温厌氧培养一段时间才能获得含拟杆菌的培养物 B．在以纤维素为唯一碳源时可以得到纯种培养的拟杆菌新菌株 C．将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原 因可能是某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存 D．藻类细胞解体后难降解的多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部，推测拟杆菌 新菌株为异养生物，作为分解者起作用 18．镇江陈醋具有“色、香、酸、醇、浓”之特色，其主要工艺流程如下图。相关叙述正确的是（ ） 高二生物 第 6 页 共 9 页 A．作为工业生产，镇江陈醋的酿制过程需要做到严格无菌 B．“淋饭”有助于提高发酵原料的透气性，有助于霉菌的糖化等过程 C．接种醋酸菌后的固态发酵需要“翻缸”，主要目的是抑制杂菌 D．后发酵时间越长，醋体中风味物质的不断堆积导致醋品更佳 19．包扎伤口时，需要选用透气的消毒纱布或“创可贴”等敷料。图示研究人员开发的一种活性蓝 细菌水凝胶贴片，其有助于慢性伤口的愈合。下列叙述错误的是（ ） A．该水凝胶无需为活性蓝细菌提供有机营养物质 B．在接种蓝细菌前须将水凝胶灭菌后再调 pH至中性或弱碱性 C．长期口腔溃疡的患者，其伤口不适宜使用该种水凝胶贴片 D．水凝胶贴片开发过程需考虑蓝细菌的储存耐久性等问题 20．实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取 Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再 从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂 交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A．从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B．二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C．若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D．图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生 Bt毒蛋白 高二生物 第 7 页 共 9 页 二、非选择题(本题共 5 小题，共 60 分) 21．(11分) 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦 松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体 过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。回答下列问题： (1)狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都需要利用 技术，④过程选用愈伤组织的细 胞进行诱变的原因是 。 (2)启动②③过程的关键激素是 ，其中 过程需要光照。原生质体 培养液中需要加入适宜浓度的蔗糖，原因是 。 (3)黄酮类化合物是广泛分布于植物体内的含量较少的次生代谢物。某同学认为，利用细胞产物 的工厂化生产黄酮类化合物，主要是利用促进细胞生长的培养条件，来提高单个细胞中黄酮类化 合物的含量，你同意该同学的观点吗，并说明相应的理由： 。 22．(12分) 美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重 要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白 CD14的单克隆 抗体，具体方法如下。回答下列问题： (1)步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射 和 。 (2)步骤②所用的 SP2/0细胞的生长特点是 。 (3)吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入 进行专一抗体检 测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗 CD14抗体，原因是 。 (4)步骤⑥从 中提取到大量的抗 CD14抗体，用于检测巨噬细胞。 23．(12分) 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技 术研究及应用的相关情况，供体 1是良种荷斯坦高产奶牛，供体 2是健康的黄牛，请据图回答下 列问题： 高二生物 第 8 页 共 9 页 (1)应用 1中，细胞 B获取需对供体 2注射 以便获得更多的卵母细胞，使用 技 术获得重组细胞，最终获得的良种小牛，该技术的原理是 。 (2)应用 2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫 ，为使受体牛生理状况更适合完成 该技术操作，要对受体牛进行 处理，以提高成功率。 (3)在应用 2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使 其 ,得到的卵母细胞需要发育至 时期才能受精。 (4)应用 3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过 技术获得二分胚①和②，操作时 需将 均等分割。在此之前还可切取 的细胞进行性别鉴定。这种使良种生物 大量繁殖的技术属于 （有性/无性）生殖。 (5)应用 4中细胞进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中除需要 适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外，营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、 核苷酸，还要加入 。 24．(15分) 下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2中标注了相关限制酶的酶切 位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题： 限制酶 Bam HⅠ Bcl Ⅰ Sau 3AⅠ Hin dⅢ 识别序列及切割位点 高二生物 第 9 页 共 9 页 (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用 两种限制酶切割，酶 切后的载体和目的基因片段通过 酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将 其转入处于 生理状态的大肠杆菌。 (2)扩增目的基因，研究人员需要根据 序列设计引物；在 PCR反应前，在微量离心管中 加入原料、酶等成分后离心，其目的是 ；适当提高复性温度可以提高 PCR扩增的特异 性，原因是 。 (3)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加 ，平板上长出 的菌落，常用 PCR鉴定，所用的引物组成为图 2中的 。若利用 PCR技术扩增目的 基因的过程中消耗了 126个引物分子，则该过程 DNA 扩增了 次。 (4)若 BamH Ⅰ 酶切的 DNA 末端与 Bcl Ⅰ 酶切的 DNA末端连接，连接部位的 6个碱基对序列 为 ，对于该部位，这两种酶 （选填“都能”“都不能”或“只有一种能”） 切开。 (5)若用 Sau3A Ⅰ切图 1质粒，最多可能获得 种大小不同的 DNA片段。 25．(10分) 大豆是重要的粮油作物，提高大豆产量是我国农业领域的重要任务。我国研究人员 发现，基因 S在大豆品种 DN（种子较大）中的表达量高于品种 TL（种子较小），然后克隆了 该基因（两品种中基因 S序列无差异）及其上游的启动子序列，并开展相关研究。 (1)基因 S启动子的基本组成单位是 。 (2)通过基因工程方法,将 DN克隆的“启动子 D+基因 S”序列导入无基因 S的优质大豆品种 YZ。 根据题图所示信息（不考虑未标明序列）判断构建重组表达载体时，为保证目标序列的完整性， 不宜使用的限制酶是 ；此外，不宜同时选用酶 SpeⅠ和 XbaⅠ。原因是 。 (3)为验证“启动子 D+基因 S”是否连接在表达载体上，可用限制酶对重组表达载体酶切后进行电 泳。电泳时，对照样品除指示分子大小的标准参照物外，还应有 。经验证的重组 表达载体需转入农杆菌，检测转入是否成功的技术是 。 (4)用检测后的农杆菌转化品种 YZ所得再生植株 YZ-1 的种子变大。同时将从 TL克隆的“启动子 T+基因 S”序列成功导入 YZ，所得再生植株 YZ-2的种子也变大，但小于 YZ-1。综合分析，大 豆品种 DN较 TL种子大的原因是 。