第40期 动物细胞工程-【数理报】2024-2025学年高二生物选择性必修3同步学案（人教版2019）

书 书 书 疑点１：为什么选用幼龄动物组织或胚胎进 行细胞培养？ 答：幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度 低，增殖能力很强，更易于培养． 疑点２：动物细胞培养需要脱分化吗？为什 么？ 答：脱分化又称去分化，是指已分化的细胞 经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变 成未分化细胞的过程．植物的任何一部分，甚至 单个细胞都具有长成完整植株的能力．但要发 育成完整植株，必须先脱分化，脱分化的细胞具 的组织或器官． 疑点３：进行动物细胞传代培养时需用胰蛋 白酶或胶原蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的 物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 较高，因此胰蛋白酶或胶原蛋白酶适用于细胞 培养时的细胞分散． 有发育成任何组织的能力，然后进行再分化，形 吗？为什么？ 成完整植株．植物细胞培养主要用于农林生产 质外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细 胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消 中的作物、苗木育种、快速繁殖种苗、培育无病 毒植株等，这都要求植物的组织或细胞先进行 脱分化．动物细胞的培养有各种用途，一般而 化时间． 言，动物细胞培养不需要经过脱分化过程．因为 高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发 件？ 育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有 答：（１）充足的营养供应———微量元素、无 类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了． 机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等． 要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定 向诱导动物干细胞的方法，使其分化成所需要 ７．２～７．４． （３）气体环境 ②ＣＯ２———维持培养液的ｐＨ（５％）． （４）无菌、无毒的环境 ①培养过程中加抗生素杀菌． ②定期更换培养液，清除代谢产物． 答：用胰蛋白酶或胶原蛋白酶可分散细胞， 说明细胞间的物质主要是蛋白质．胃蛋白酶作 用的适宜ｐＨ约为２，当ｐＨ大于６时，胃蛋白酶 就会失去活性．胰蛋白酶或胶原蛋白酶作用的 用途？ 适宜ｐＨ为７．２～８．４．多数动物细胞培养的适宜 ｐＨ为７．２～７．４，胃蛋白酶在此环境中没有活 体等； 性，而胰蛋白酶或胶原蛋白酶在此环境中活性 （２）作为基因工程中常用的受体细胞； （３）检测有毒物质及毒性； （４）用于科学研究，如用于筛选抗癌药物 疑点４：胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉 等． 疑点７：在体细胞的细胞核移植到受体卵母 答：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白 细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的 核？ 答：为使核移植的胚胎或动物的遗传物质 全部来自有重要利用价值的动物提供的体细 疑点５：动物细胞体外培养需满足哪些条 胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必 须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏． 疑点８：用动物体细胞核移植技术生产的克 隆动物，是对体细胞供体动物进行了１００％的复 （２）适宜的温度：３６．５±０．５℃；适宜 ｐＨ： 制吗？为什么？ 答：克隆动物绝大部分 ＤＮＡ来自于供体细 胞核，但其核外还有少量的ＤＮＡ，即线粒体中的 ①Ｏ２———用于有氧呼吸、细胞代谢（９５％）． ＤＮＡ是来自于受体卵细胞．所以，用该技术克隆 的动物不是供核动物完全相同的复制．此外，即 便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行 为、习性的形成与所处环境有很大关系，供核动 物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完 疑点６：动物细胞培养技术在实践方面有何 全相同，其形成的行为、习性也不可能和供核动 物完全相同．另外，在个体发育过程中有可能发 答：（１）生产生物制品，如疫苗、干扰素、抗 生基因突变，产生供体动物没有的性状．基于上 述三个方面的原因，克隆动物不会是供体动物 １００％的复制． 考点１：动物细胞培养 例１．在动物细胞培养过程中，下列处理不 恰当的是 Ａ．培养液和培养用具要进行无菌处理 Ｂ．提供种类齐全的营养物质 Ｃ．提供纯氧以保证细胞的呼吸作用 Ｄ．提供适宜的温度和ｐＨ 解析：动物细胞培养需要满足以下条件： 期更换培养液，消除代谢产物． （２）充足的营养供应：微量元素、无机盐、糖 类、氨基酸、促生长因子、血清等． （３）适宜的温度和 ｐＨ：温度为３６～３７℃； ｐＨ为７．２～７．４． （４）气体环境：Ｏ２：保证有氧呼吸、细胞代谢 （９５％的空气）；ＣＯ２：维持培养液的ｐＨ（５％）． 由此可见选项Ｃ错误． 答案：Ｃ 考点２：动物细胞融合与动物体细胞核移植 例２．从甲、乙细胞到 （　　） 丙细胞的过程可以表示 （１）无菌、无毒的环境：培养液和培养用具 融合 要杀菌消毒；培养过程中要加抗生素杀菌；要定 受精作用 核，则该过程表示克隆 解析：该题型属于模式图，其特点是涉及的 乙为动物细胞，则该过程表示细胞融合．若甲为 卵细胞，乙为精子，则该过程表示受精作用．若甲 为除去细胞核的细胞质，乙为细胞核，则该过程 表示核移植；重组细胞的培养可称为克隆． 答案：Ｄ 考点３：单克隆抗体的制备 例３．乙型肝炎是由乙肝病毒引起的常见传 染病，目前尚无有效治疗办法．有关人员准备以 乙肝病毒的衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗 体，下列相关叙述正确的是 （　　） Ａ．将高度纯化的衣壳蛋白反复注射到小鼠 体内，可在小鼠的血清中分离出单克隆抗体 Ｂ．将能产生特定抗体的Ｂ淋巴细胞在体外 培养增殖，可获得大量的单克隆抗体 Ｃ．将等量 Ｂ淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合， （　　） 经灭活的仙台病毒诱导融合后的细胞就是杂交 Ａ．若甲、乙为植物细胞，则该过程表示植物 瘤细胞 原生质体的融合 Ｄ．制备单克隆抗体的过程中需要经过两次细 Ｂ．若甲、乙为动物细胞，则该过程表示细胞 胞筛选 解析：抗原进入机体会引发机体发生免疫 Ｃ．若甲为卵细胞，乙为精子，则该过程表示 反应，产生抗体，但不是单克隆抗体，Ａ错；Ｂ淋 巴细胞不能在体外无限繁殖，在体外培养条件 Ｄ．若甲为除去细胞核的细胞质，乙为细胞 下不能大量获得单克隆抗体，Ｂ错；将 Ｂ淋巴细 胞和骨髓瘤细胞诱导融合，得到的不一定都是 杂交瘤细胞，还有可能得到的是 Ｂ淋巴细胞自 示植物原生质体（去除了细胞壁）的融合．若甲、 错；在单克隆抗体的制备过程中，第一次筛选是 筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选是筛选出能产 生特定抗体的杂交瘤细胞，Ｄ对． 答案：Ｄ 、一 动物细胞培养 １．概念 动物细胞培养是指从动物体中取出相关的 组织，将它分散成① 然后在适宜的培 养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术．动物 细胞培养是动物细胞工程的基础． ２．培养条件 养用具进行② 进行操作．培养液需③ 处理以及在无菌环境下 ，以便清除代谢 （２）营养：除糖类、氨基酸、无机盐和维生素 等细胞所需的营养物质外，通常还需加入④ 等一些天然成分． （３）适宜的温度、ｐＨ和渗透压：哺乳动物细 （４）适宜的气体环境：动物细胞培养所需的 气体主要有 ＣＯ２和 Ｏ２．Ｏ２是细胞代谢所必需 的，ＣＯ２的主要作用是⑤ ． ３．过程 （１）材料处理：对新鲜取材的动物组织进行 处理，或用机械的方法，或用⑥ 一段时间，将组织分散成单个细胞． （２）培 养：用 培 养 液 将 细 胞 制 成 ⑦ 内，置于适宜环境中培养． （３）原代培养与传代培养 ａ．原代培养：动物组织经处理后的⑧ 培养，通常指分瓶之前的细胞培养． ｂ．传代培养：分瓶后的细胞培养． （４）收集：在进行传代培养时，悬浮培养的 收集；贴壁细胞需要重细胞直接用⑨ 新用⑩ 然后再用离心法收集． ４．体外培养的动物细胞的分类 体外培养的动物细胞可以分为两大类：一 类细胞能够瑏瑡 瑏另一类则需要瑢 在培养液中生长增殖； 于某些基质表面才能 生长增殖． ５．影响体外动物细胞培养的因素 分裂受阻．贴壁细胞在生长增殖时，除受上述因 素的影响外，还会发生瑏瑣 现象，这时就 需要对细胞进行分瓶培养． ６．细胞贴壁和接触抑制 瑏象称为瑤 瑏停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 瑥 二、干细胞培养及其应用 ． １．干细胞存在部位及其分类 干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等 多种组织和器官中，包括瑏瑦 和成体干 （１）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培 细胞等． ２．胚胎干细胞的特点 胚胎干细胞（简称瑏瑧 物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害． 化为成年动物体内的瑏瑨 细胞）具有分 的细胞，并进 一步形成机体的所有组织和器官甚至 瑏瑩 的潜能． ３．成体干细胞的特点 成体干细胞包括骨髓中的造血干细胞、神 胞培养的温度多以３６．５±０．５℃为宜，多数动 经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞 物细胞生存的适宜ｐＨ为７．２～７．４，此外渗透压 等．一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只 瑐也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要 能分化成特定的瑠 瑐，不具有发育成瑡 的能力． ４．干细胞的应用 （１）用于治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗 等疾病． 等处理 疾病，如帕金森病、阿尔茨海默病等． ５．诱导多能干细胞 因为诱导过程无须破坏胚胎，而且诱导多 ，再将细胞悬液放入培养皿或培养瓶 能干细胞（简称瑐瑢 身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可 以避免瑐瑣 胞的应用前景优于胚胎干细胞． 三、动物细胞融合技术与单克隆抗体 １．动物细胞融合技术的概念：动物细胞融 瑐合技术就是使瑤 动物细胞结合形成一 个细胞的技术．融合后形成的杂交细胞具有原 等处理，使之分散成单个细胞， 来两个或多个细胞的遗传信息． ２．动物细胞融合技术 动 物 细 胞 融 合 技 术 ： ：瑐瑦 ：瑐瑧 法 法 法： { 瑐瑨 物 化 生 突 理 学 物 破了瑐瑩 使瑑瑠{ 成为 ， 可能  原理：瑥瑐   方法 意义： 应用：制备单克隆抗体 特别提醒：动物细胞融合技术是制备单克 代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而 合技术的应用． ３．单克隆抗体及其应用 瑑瑡 细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现 其融合后形成的瑑瑢 ．细胞数目不断增多，当贴壁 增殖，又能产生专一抗体． （２）单克隆抗体的优点：准确识别抗原的细 微差异，与特定抗原发生瑑瑦 结合，并且 可以大量制备． （３）单克隆抗体的应用：作为诊断试剂，在 多种疾病的瑑瑧 和病原体鉴定中发挥重 要的作用．单克隆抗体自身也能用于治疗疾病． 在医药领域，单克隆抗体药物占有非常重要的 地位． 四、动物体细胞核移植技术和克隆动物 １．动物细胞核移植技术的概述 动 细 核 技 术 瑒中，使这个瑠 的技术．用核移 分类{瑒瑦 　  定义：将动 发 物 育 一 成 个 瑡瑒 细胞的瑨瑑 继而发育 移 成 入 瑒瑢 瑑瑩 物  ： 瑥瑒 植  植的方法得到的动物为瑣瑒 ， 胞 动物 原理 瑒瑤移    （难度较大，因为动物 体细胞分化程度高， 表现全能性十分困难） ２．体细胞核移植的过程 ３．体细胞核移植技术的应用前景及存在的 问题 （１）应用前景 ａ．畜牧生产：加速家畜瑓瑠 ，促进优 或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍 良畜群繁育． ｂ．医药卫生领域：通过建立转基因体细胞 （２）治疗神经组织损伤和神经系统退行性 系，再利用体细胞核移植技术培育的转基因克 隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的 瑓瑡 ． ｃ．治疗人类疾病：转基因克隆动物的细胞、 ）可以来源于病人自 组织或器官可以作为瑓瑢 的供体． ｄ．保护濒危物种：该技术有望增加濒危物 ，所以科学家普遍认为ｉＰＳ细 种的存活数量． 书 瑓（２）存在问题：绝大多数克隆动物存在瑣 ，许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷． 【参考答案】 　 　①单个细胞 ②灭菌 ③定期更换　④血 　 　清 ⑤维持培养液的ｐＨ ⑥胰蛋白酶、胶原蛋 　 　 　 　白酶 ⑦细胞悬液 ⑧初次 ⑨离心法 ⑩胰 　蛋白酶 瑡 　瑏悬浮 瑏 　瑏瑢贴附 瑣 　接触抑制 瑏瑤细 　胞贴壁 瑥 　瑏瑏接触抑制 瑦 　胚胎干细胞 瑧瑏ＥＳ　 瑏瑨 　任何一种类型 瑩 　瑏个体 瑐 　瑐瑠细胞或组织 瑡 　完整个体 瑢瑐ｉＰＳ细胞　瑐瑣免疫排斥反应　瑐瑤 两个或多个　瑐瑥细胞膜的流动性　瑐瑦电融合法 　瑐瑧ＰＥＧ融合法　瑐瑨 灭活病毒诱导法　瑐瑩有性 悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害 隆抗体的基础，制备单克隆抗体是动物细胞融 杂交的局限　瑠瑑远缘杂交　瑑瑡 瑑骨髓瘤　瑢杂交 瘤　瑑瑣特定的抗原　瑤 瑑杂交瘤　瑥瑑小鼠腹腔　 瑑瑦特异性　瑑 瑧诊断　瑨 瑑细胞核　瑑瑩去核的卵母 　（１）原理：一种 Ｂ淋巴细胞在抗原的刺激 细胞 瑒 　瑠重新组合的细胞 瑒瑡 　瑒新胚胎 瑢动物 下，只能产生一种针对这种抗原的特异性抗体． 个体　瑒瑣克隆　瑒瑤动物细胞核的全能性　瑒瑥胚 细胞能够无限增殖，Ｂ淋巴细胞与 胎细胞核移植　瑦 瑒体细胞核移植　瑧瑒ＭⅡ期去 瑒细胞既能迅速大量 核　瑨电融合法　瑒瑩基本相同　瑓瑠遗传改良进 　瑓程 瑡 　医用蛋白 瑓瑢 　瑓异种移植 瑣健康问题 第３９期２版题 参考答案 专项小练一 　 　１．Ｃ ２．Ｂ ３．Ａ 　 　４．Ｂ ５．Ａ ６．Ａ 　７．Ｂ ８．Ａ 专项小练二 　 　１．Ｂ ２．Ｄ ３．Ｄ 　 　４．Ａ ５．Ａ ６．Ｄ ７．Ｄ 第３９期３版题 参考答案 　 　１．Ｄ ２．Ａ ３．Ｄ 　 　４．Ｃ ５．Ｄ ６．Ｄ 　７．ＡＣＤ ８．ＣＤ ９．ＡＤ １０．（１）形态、结构 和功能　基因的选择性 表达　高效快速地实现 种苗的大量繁殖 （２）具有分生能 力、高度液泡化的薄壁 细胞　诱导愈伤组织形 知识点比较多．若甲、乙为植物细胞，则该过程表 身融合细胞或骨髓瘤细胞自身融合细胞等，Ｃ 成和诱导愈伤组织分化 形成试管苗所需的生长 素和细胞分裂素的比例 不同 （３）将本地桉树的 细胞与红豆杉的细胞融 合，经植物组织培养获 得植株　杂种植株通常 含有同源染色体，减数 分裂过程中联会正常， 环境参数． 能够产生正常的生殖细 胞 １１．（１）Ｄ 　（２）ａ 基因的选 择性表达 （３）固体　生长素 （４）低温诱导或喷 洒秋水仙素 １２．（１）人工诱导 染色体加倍　 ３６、３４ （２）ＡＡＢＣ　 基因 重组　 甘蓝型油菜 （３）将埃塞俄比亚 芥与具有优良性状的其 他品种的油菜杂交再进 行回交，选育具有优良 性状的品种（或将埃塞 俄比亚芥进行诱变处 理，选育具有优良性状 的品种；或通过转基因 技术调控代谢途径） １３．（１）植物体细 胞杂交　纤维素酶和果 胶酶 （２）愈伤组织　再 　分化 杂菌和培养物竞 争获得营养的能力更 强；杂菌生长过程中可 能会产生对培养物有害 的物质　８０ （３）基因的选择性 表达 （４）不能　不同物 种之间存在生殖隔离 ! " # $ !"#$% ! ! $%$& ) '* $(+,-(. ' ( &' !!"#( !" " "#$%& !'()*)+ !,234+ !567890$%#!&#'(!'#) !':;<0=>?@ABCDEFGH '$' IJK2(LMNO(P567 !BT7U(VW0$%#!!#'(!')* !##%))%)++(XYZ[I\ !U]^_`a(BT7<bcdefgQhXi\ !QRU]VW0!!!+# !QR5S0$%$$$) !jklmUnoUpqU ! a ( r d e f ?XB\s t u v w ( ! a ( x = > y < z { | } ~ X@ A B €  ‚ E ƒ „ …\† z ‡ ˆ | z ‰ Š ‹ Œ  ‡ _ ` a ( B T 7 < b Ž  89:4;<=>?@5 /0123456 7 ,%#!&#'(!')+ 89AB;<=>?@5 ,%#!&#'(!"#$ #=>‘L’“” =>Lt•–—˜™š›“œ NO(P564+ P0žŸ  e¡¢3£¤4+¥I0!" $%&'()(X* +\ Q¦§I0,-.,), "!"#$%&'()#!------*+% ,-.( /(0123 456789: 89: !$#-------- ;<%=>?@AB*CD=> ABCD=> =>EF <%=> CGCD=> H<%=> !#%------- " ¨© ª«¬ I J 不同的含义，如右图所 K 示，其中不正确的是 " ­® ¯l° " => 细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会 ±²³ 书 专项小练一　动物细胞培养 ◎ 数理报社试题研究中心 １．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 （　　） Ａ．动物细胞培养一般使用固体培养基 Ｂ．培养液和所有培养用具要进行消毒处理 Ｃ．定期更换培养液可以防止代谢产物的积累 对细胞造成的危害 Ｄ．细胞培养液中通常含有维生素、激素、糖等 多种能源物质 ２．对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养， 下列叙述错误的是 （　　） Ａ．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰 蛋白酶或胶原蛋白酶处理 Ｂ．动物细胞培养应在含５％ＣＯ２的恒温培养 箱中进行，ＣＯ２的作用是刺激细胞呼吸 Ｃ．动物细胞培养过程中必须保证培养环境是 无菌、无毒的 Ｄ．在合成培养基中，通常需加入血清等天然 成分 ３．治疗大面积烧伤时，可通过细胞培养构建 “人造皮肤”进行移植．下列叙述错误的是 （　　） Ａ．使用烧伤病人健康皮肤细胞可培养出不产 生免疫排斥反应的“皮肤” Ｂ．用胰蛋白酶处理皮肤组织，目的是使它分 散成单个细胞 Ｃ．贴壁生长的皮肤细胞会发生接触抑制现象 Ｄ．传代培养时，贴壁细胞直接用离心法收集， 然后再分瓶培养 ４．现在有一个婴儿在出生后医院为他保留了 脐血，在他以后生长发育过程中如果出现了某种 难治疗的疾病，就可以通过血液中的干细胞来为 他治病，关于这个实例说法正确的是 （　　） Ａ．用干细胞培育出人体需要的器官用来移植 治病，需要激发细胞的全能性 Ｂ．用脐血中的干细胞能够治疗这个孩子所有 的疾病 Ｃ．如果要移植用他的干细胞培育出的器官， 需要用到细胞培养技术 Ｄ．如果要移植用他的干细胞培育出的器官， 应该长期给他使用免疫抑制药物 ５．科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞形成ｉＰＳ 细胞，ｉＰＳ细胞可进一步分化为神经元细胞、胰岛细 胞、肝细胞等组织细胞．下列说法错误的是 （　　） Ａ．ｉＰＳ细胞是诱导多能干细胞，在诱导过程中 不需要破坏胚胎 Ｂ．诱导过程中需在培养液添加适量的干扰 素，以防止杂菌污染 Ｃ．ｉＰＳ细胞分化为神经元细胞的过程并未体 现出细胞的全能性 Ｄ．对ｉＰＳ细胞进行定向诱导获得的胰岛细胞 可用于治疗某些疾病 ６．动物细胞培养是动物细胞工程的基础．下 列有关叙述正确的是 （　　） Ａ．一般选择幼龄动物的细胞培养，原因是其 细胞分化程度低 Ｂ．进行细胞传代培养时，细胞每传一代，细胞 数目增加一倍 Ｃ．传代培养前需用胰蛋白酶处理贴壁细胞， 制成细胞悬液 Ｄ．为保证无菌的环境，需要定期更换培养液， 清除代谢物 专项小练二　动物细胞融合 技术与单克隆抗体 １．植物体细胞杂交和动物细胞融合两项技术 有相似也有不同．下列叙述正确的是 （　　） Ａ．愈伤组织经过脱分化、再分化后才能形成 杂种植株 Ｂ．细胞融合过程中发生的变异主要是基因重 组 Ｃ．两种技术均可运用ＰＥＧ融合法或电融合法 来促进细胞融合 Ｄ．植物细胞融合和动物细胞融合时均会用到 纤维素酶和胰蛋白酶 ２．下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆 抗Ｘ抗体的具体操作步骤，选项中对单克隆抗体 制备的相关叙述不正确的是 （　　） ①将 Ｘ抗原注入小鼠体内，获得能产生抗 Ｘ 抗体的Ｂ淋巴细胞 ②从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞 ③利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合 ④将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养 ⑤筛选出能产生抗Ｘ抗体的杂交瘤细胞 ⑥从腹水中提取抗体 Ａ．实验顺序应当是①②③⑤④⑥ Ｂ．④过程中产生的多个杂交瘤细胞也称为克 隆化培养 Ｃ．③过程获得的细胞均可无限增殖 Ｄ．③到⑤的过程中通常要经过两次筛选 ３．下列关于动物细胞融合的说法，错误的是 （　　） Ａ．细胞融合前要用酶解法将组织分散成单个 细胞 Ｂ．细胞融合的原理是细胞膜的流动性 Ｃ．融合后得到的杂交细胞具有两个或多个亲 本细胞的遗传信息 Ｄ．融合后得到的杂交细胞具有两个细胞核 ４．ＣＤ３单克隆抗体（ＯＫＴ３）为第一个用于临床 的抗Ｔ细胞的单克隆抗体，该抗体针对 Ｔ细胞上 ＣＤ３抗原，能抑制免疫系统的功能，有利于器官移 植．下列有关叙述错误的是 （　　） Ａ．利用细胞膜的流动性的生物学原理即可制 备ＯＫＴ３ Ｂ．将提纯的ＣＤ３抗原注入小鼠体内可产生免 疫反应，并分离出相应的Ｂ淋巴细胞 Ｃ．制备ＯＫＴ３过程中使用了胰蛋白酶和聚乙 二醇等溶液 Ｄ．经多次筛选才能获得既能产生抗体，又能 无限增殖的细胞 ５．科学家用灭活的病毒把骨髓瘤细胞与经过 免疫的Ｂ淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，灭活病 毒的作用是 （　　） Ａ．病毒比较小，可钻入到细胞内 Ｂ．灭活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以 让细胞聚集 Ｃ．灭活的病毒已失去感染性，对各种动物细 胞不造成破坏，但所保留的融合活性可使不同的 动物细胞进行融合 Ｄ．灭活的病毒带有目的基因，通过融合可以 让杂交细胞带有目的基因 ６．关于制备单克隆抗体的过程，下列叙述错 误的是 （　　） Ａ．为获得足量相应的 Ｂ淋巴细胞，可多次给 小鼠注射特定抗原 Ｂ．细胞融合前，已免疫的脾细胞不需要经过 原代培养扩大 Ｃ．用ＰＥＧ诱导细胞融合后，可加入过量培养 基终止融合 Ｄ．杂交瘤细胞在体外培养时，常会发生接触 抑制现象 专项小练三　动物体细胞核移植 技术与克隆动物 １．我国研究人员将体外培养的胎猴体细胞注射 到去核卵母细胞，形成重构胚，最终培育了两只克隆 猴“中中”和“华华”．以下说法正确的是 （　　） Ａ．体外培养体细胞的原理是动物体细胞具有 全能性 Ｂ．核移植技术中卵母细胞应该完成两次分裂 后去核 Ｃ．体细胞注射到透明带内体现了细胞膜具有 流动性 Ｄ．代孕母猴对植入的胚胎几乎不发生免疫排 斥反应 ２．科学家利用核移植技术克隆出了多种动 物．下列关于动物核移植技术的叙述，正确的是 （　　） Ａ．胚胎细胞核移植比体细胞核移植难度大 Ｂ．核移植过程中可通过显微操作去除卵母细 胞中的细胞核 Ｃ．核移植时，提供细胞核和去核卵细胞的动 物都应为雌性 Ｄ．通过核移植方法培育的克隆动物遗传物质 全部来自供体细胞核 ３．２０１７年我国科学家提取了一只雌性猕猴胎 儿的体细胞，将其细胞核植入到去核的卵细胞中， 培育出了世界上首批体细胞克隆猴，这推动中国 率先建立起非人灵长类疾病动物模型．下列有关 说法正确的是 （　　） Ａ．该试验表明已分化的动物体细胞具有全能 性 Ｂ．克隆成功的原因是体细胞核中具有该物种 的全套基因 Ｃ．猕猴的受精卵是未分化细胞，所以不具有 全能性 Ｄ．与植物细胞相比，动物细胞的全能性更容 易体现 ４．将蝌蚪肠细胞的细胞核移植到去核的蛙卵 中，形成重建的“合子”．有些“合子”能发育成正常 的蝌蚪，而单独培养肠细胞却不能发育成蝌蚪．下 列叙述错误的是 （　　） Ａ．“合子”发育成正常的蝌蚪，说明肠细胞的 细胞核具有全能性 Ｂ．由“合子”发育成的正常蝌蚪长大后必为雌 性蛙 Ｃ．“合子”发育成正常蝌蚪的过程中伴随着基 因的选择性表达 Ｄ．细胞核含有该物种的全套基因，但单独培 养肠细胞其全能性会受到抑制 ５．传统医药实验常以小鼠为研究对象，但因其与 人类遗传背景相差较远而存在诸多弊端．２０１８年中国 科研团队利用一只流产的雌性猕猴胚胎的成纤维细 胞经克隆得到一对克隆猴“姐妹花”，她们的诞生具有 重大意义．以下相关叙述错误的是 （　　） Ａ．去除染色体—纺锤体复合物可获得去核卵 母细胞 Ｂ．这对“姐妹花”是经无性繁殖产生的，依据 的原理有动物细胞核的全能性 Ｃ．克隆这对猕猴时利用的体细胞核移植技术 比胚胎细胞核移植技术更容易成功 Ｄ．克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模 型研发药物对治疗人类疾病具有一定的参考价值 书 第Ⅰ卷（选择题） 一、单项选择题（本题共６小题，每小题４分， 共２４分．每小题给出的四个选项中，只有一个选 项是最符合题目要求的） １．牙齿再生术的难点在于牙髓再生和牙周组 织再生．空军军医大学口腔医院金岩教授率领团 队经历多年潜心努力，从患者脱落的乳牙中获取 牙髓干细胞，经过体外培养，将形成的干细胞聚合 体植入患者牙髓腔里，使得牙齿神经、血管再生， 完全恢复牙齿原有功能．针对以上技术，下列叙述 正确的是 （　　） Ａ．此技术的原理与植物组织培养的原理相同 Ｂ．此技术需要适宜的温度（３６．５℃）和 ｐＨ （６．８～７．８） Ｃ．牙髓干细胞与胚胎干细胞一样都可以分化 为成年动物体内任何一种类型的细胞，甚至产生 个体 Ｄ．对于牙髓干细胞的培养过程需要经历原代 培养，用胰蛋白酶处理后再用离心法收集悬液中 的细胞进行传代培养 ２．我国科研人员利用人的成纤维细胞培养出 可增殖、具有功能的肝样细胞（ｈｉｈｅｐ细胞），成功 构建了新型的生物人工肝．下列叙述不正确的是 （　　） Ａ．培养过程中需要在培养液中添加动物血清 Ｂ．成纤维细胞与 ｈｉｈｅｐ细胞的遗传物质不相 同 Ｃ．成纤维细胞培养成 ｈｉｈｅｐ细胞并未体现细 胞的全能性 Ｄ．成纤维细胞培养成 ｈｉｈｅｐ细胞的实质是基 因的选择性表达 ３．动物细胞融合和植物体细胞杂交是细胞工 程的基本技术，下列关于这两项技术的叙述，错误 的是 （　　） Ａ．动物细胞融合和植物体细胞杂交采用的方 法不完全相同 Ｂ．可以利用动物细胞融合技术制备单克隆抗 体 Ｃ．科学家利用植物体细胞杂交技术培育出番 茄—马铃薯植株，地上结番茄，地下长马铃薯 Ｄ．动物细胞培养是动物细胞融合的基础，动 物细胞培养要用到胰蛋白酶、胶原蛋白酶 ４．抗癌＂神药”抗 ＰＤ－Ｌ１单克隆抗体通过抑 制Ｔ细胞上的 ＰＤ－１受体和肿瘤细胞上的配体 ＰＤ－Ｌ１结合，从而激活 Ｔ细胞的功能，对抗癌症． 下列关于该药物的制备说法错误的是 （　　） Ａ、制备该药物前必须用 ＰＤ－Ｌ１蛋白免疫小 鼠 Ｂ、需从小鼠的脾脏中提取 Ｂ淋巴细胞和骨髓 瘤细胞融合 Ｃ、用选择性培养基筛选出的杂交瘤细胞均能 产生抗ＰＤ－Ｌ１抗体 Ｄ、必须经过多次克隆化培养和抗体检测以保 证抗体的纯度 ５．科研人员以患病动物个体为供体培育的核 移植胚胎干细胞，经诱导分化培养形成相应的细 胞、组织或器官，然后移植给患病个体，从而降低 免疫排斥．下列相关说法错误的是 （　　） Ａ．上述过程涉及核移植、动物细胞培养等技 术 Ｂ．使用合成培养基培养细胞需要加入血清等 物质 Ｃ．不同细胞的 ＨＬＡ不同是引起免疫排斥反 应的原因 Ｄ．可利用上述过程的原理治疗人体镰状细胞 贫血 ６．下列有关核移植的说法错误的是 （　　） Ａ．通过核移植得到的细胞称为重构胚 Ｂ．哺乳动物体细胞核移植的难度高于胚胎细 胞核移植 Ｃ．核移植得到克隆动物的过程属于无性生殖 Ｄ．动物体细胞表现全能性的难易程度与其分 化程度无关 二、不定项选择题（本题共 ３小题，每小题 ８ 分，共２４分．每小题给出的四个选项中，有的只有 一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对的 得８分，选对但不全的得３分，有选错的得０分） ７．微载体培养动物细胞技术是目前公认的最 有发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其 兼具悬浮培养和贴壁培养的优点．培养的细胞贴 附在微载体表面，可以在较短时间内得到大量的 细胞，细胞传代只需要添加新的微载体，基本上可 避免细胞在胰蛋白酶消化过程中受到的损伤．下 列叙述正确的是 （　　） Ａ．动物细胞必须贴壁才可以在培养液中生长 Ｂ．培养液中添加微载体可以使细胞在悬浮状 态下培养 Ｃ．培养动物细胞时应保证无菌、无毒的环境 及适宜的温度、ｐＨ等条件 Ｄ．在培养动物细胞时提供的气体环境应为 ９５％的空气和５％的ＣＯ２ ８．一个抗原往往有多个不同的抗原决定族， 一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由 同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗．将非 洲猪瘟病毒衣壳蛋白 ｐ７２注入小鼠体内，可利用 该小鼠的免疫细胞制备抗 ｐ７２的单抗，也可以从 该小鼠的血清中直接分离出多抗．下列说法错误 的是 （　　） Ａ．注入小鼠体内的抗原纯度不影响多抗的纯 度 Ｂ．单抗制备过程中通常将分离出的 Ｂ淋巴细 胞与骨髓瘤细胞融合 Ｃ．利用该小鼠只能制备出一种抗ｐ７２的单抗 Ｄ．ｐ７２部分结构改变后，可能会出现原单抗失 效而多抗仍有效的情况 ９．细胞工程中，选择合适的生物材料是成功 的关键．下列选择错误的是 （　　） Ａ．选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移 植可提高克隆动物的成功率 Ｂ．选择高度分化的动物体细胞进行培养有利 于获得大量细胞 Ｃ．选择植物的愈伤组织进行诱变处理不能获 得优质的突变体 Ｄ．选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可 获得脱毒苗 第Ⅱ卷（非选择题） 三、非选择题（本题包括４小题，共５２分） １０．（１２分）右图 为动物细胞培养过程 中细胞增殖情况的变 化曲线，图中 Ｏ、Ａ、Ｂ、 Ｃ、Ｄ、Ｅ是曲线上的点， 其中 Ｂ、Ｅ两点表示经 筛选、分装后继续培 养．据图回答问题： （１）通常将动物组织消化后的初次培养称为 ，在图中是 段（填字母）． （２）在动物细胞培养时，将细胞所需的营养物 质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基称 为 培养基．通常在培养基中还需要加入 适量血清、血浆等一些天然成分，血清、血浆作为 天然培养基的作用是 ． （３）进行动物细胞培养时，选用液体培养基的 ｐＨ的范围是 ，若将组织块剪碎，加入胰蛋 白酶，可使其分散成单个细胞，为什么不能改用胃 蛋白酶？ ． １１．（１１分）科研人员最新发现，单克隆抗体或 许能成为治疗艾滋病（ＡＩＤＳ）（由 ＨＩＶ引起的获得 性免疫缺陷综合征）非常有效的途径，该项研究结 果能进一步促进单克隆抗体的发展．如图为抗ＨＩＶ 单克隆抗体的制备过程，据图回答下列相关问题： 艾滋病自愈者免疫细胞 　　　　　 }骨髓瘤细胞 →融合 甲 →① 乙 →② 丙 →分泼 抗ＨＩＶ单克隆抗体 （１）单克隆抗体是指由单一的 细胞 增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子；艾 滋病自愈者免疫细胞是指 ． （２）图示艾滋病自愈者免疫细胞和骨髓瘤细 胞在聚乙二醇、电刺激或 等诱导因素作 用下，细胞膜会发生一定的损伤，由于细胞膜具有 一定的 ，从而细胞就可以实现相互黏连 而融合在一起． （３）甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是 ，②过程的目的是筛选具有 （特 点）的杂交瘤细胞． １２．（１４分）神经纤毛蛋白 －１（ＮＲＰ－１）是一 种多功能糖蛋白，在多种肿瘤组织中呈高表达，可 与血管内皮生长因子结合促进肿瘤血管的形成， 使肿瘤体积增大．科研人员通过制备ＮＲＰ－１单克 隆抗体，开展对小鼠的乳腺癌肿块进行靶向治疗 的研究．请分析回答： （１）制备单克隆抗体涉及的动物细胞工程常 用技术手段有 ． （２）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的神 经纤毛蛋白－１（ＮＲＰ－１）相当于 ，使小 鼠产生分泌相应抗体的 Ｂ淋巴细胞，此过程属于 特异性免疫中的 免疫． （３）动物细胞融合过程中常用的生物诱导剂 是 ．诱导融合后再用特定的 培 养基进行筛选，选出融合的杂种细胞，该细胞的特 点是 ． （４）单克隆抗体的优点为 ． １３．（１５分）下图表示通过核移植等技术获得 某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程．回答下列问 题： →供体的体细胞 Ａ 卵母细胞 → ① }→去核卵母细胞 →重组细胞 早期胚胎 →② →代孕个体 新个体 （１）图中①去核时常采用 的方法，获 得大量的供体细胞需要先用 酶处理后， 再用 技术． （２）选用卵母细胞细胞质的原因有体积大易 操作、提供营养之外，还有 ． （３）若获得的克隆动物与供体动物性状不完 全相同，从遗传物质的角度分析其主要原因是 ． （４）与克隆羊“多莉”培养成功一样，其他克隆 动物的成功获得也证明了 ． （５）三亲婴儿的获得也采用了核移植的技术， 其过程是将患线粒体疾病的母亲的卵母细胞的核 与一位健康妇女的细胞质组合在一起．将两位女 性的卵母细胞进行细胞核移植的时候， （是／否）可以将母亲的卵母细胞直接注入捐献者 的卵母细胞中．若患线粒体疾病的个体是父亲，则 （是／否）需要进行核移植                                                                                                                                                                       ． ! !"#$% !"#&' " ! ()*+,-./01 """""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""" 23456789: """""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""" 23456789: !"#$ % % % % % ! " # $ % &' (' )' *+ ,' -' .+ / / / / / / / &'() ! 书 答案详解 　　　 　　２０２４～２０２５学年　高中生物选择性必修３　第３７～４０期　（２０２５年４月）　　　 　　 第３７期２版题参考答案 １．Ｄ　配制好的选择培养基应先进行高压蒸汽灭菌然后 再进行倒平板操作，即分装到培养皿，Ａ错误；配置好的培养基 需要灭菌，故配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，倒平板、 接种均需要在酒精灯火焰旁进行，Ｂ错误；一般用高压蒸汽灭 菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，防止杂菌污染，Ｃ错误； 可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养 瓶等进行灭菌，也可用干热灭菌法进行，Ｄ正确． ２．Ｄ　 获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，故两 种纯化方法都要防止杂菌污染，Ａ正确；为验证培养基是否被 污染，两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置， 在培养箱中进行培养，Ｂ正确；接种环和涂布器均需要在火焰 上灼烧，接种环可直接灼烧灭菌，涂布器要沾少量酒精在火焰 上引燃进行灼烧灭菌，Ｃ正确；当两个或多个细胞连在一起时， 平板上观察到的只是一个菌落，故用稀释涂布平板法进行微生 物的计数时，所获得的数据往往比实际值小，Ｄ错误． ３．Ｄ　培养基配方中一般都含有碳源、氮源、水、无机盐等 成分，琼脂是制作固体培养基所需要的凝固剂，Ａ错误；用纤维 素为唯一碳源的培养基可以选择分离出纤维素分解菌，用尿素 为唯一氮源的培养基可以选择分离出尿素分解菌，Ｂ错误；利 用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平 板上观察到的是一个菌落，所以统计结果比活菌实际数目低， Ｃ错误；平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但平板 划线法不能对微生物进行计数，Ｄ正确． ４．Ｃ　在含有尿素为唯一氮源的选择性培养基上，只有能 够分解尿素的微生物才能生长繁殖，故纯化培养阶段使用选择 培养基，应以尿素为唯一氮源，Ａ正确；用移液管或微量移液器 吸取菌液进行梯度稀释操作，Ｂ正确；稀释倍数越高，平板上出 现的菌落数越少，所以中间试管涂布的３个平板的菌落平均数 应大于１６０个，Ｃ错误；据图示可知，平板中平均有 １６０个菌 落，该过程中稀释的倍数为１０４，最后只取了０．１ｍＬ进行涂布 稀释，因此由图示菌落计数结果可知，１０克土样中的菌株数约 为１６０×１０４÷０．１×１０＝１．６×１０８个，Ｄ正确． ５．Ｄ　幽门螺杆菌（Ｈｐ）要能产生脲酶，１４Ｃ标记的尿素进 入胃后才能在其产生的脲酶的催化下能分解生成 ＮＨ３和 １４ＣＯ２，一段时间后通过测定呼出的气体是否含有 １４ＣＯ２才能诊 断是否感染Ｈｐ，Ａ正确；对Ｈｐ进行纯化需要得到 Ｈｐ单菌落， 所以需要用到固体培养基，Ｂ正确；培养基应以尿素作为唯一 氮源，可以允许能分解尿素的微生物（Ｈｐ）在此培养基中生长， 同时抑制或阻止其他不能利用尿素的微生物的生长，Ｃ正确； 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强． 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若 指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，Ｄ错误． ６．Ｂ　利用显微镜进行直接计数不分区活、死菌，统计的结 果一般是活菌数和死菌数的总和，稀释涂布平板法的统计结果 一般用菌落数，Ａ错误；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会 形成一个菌落，Ｂ正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在 ３０～３００之间的平板进行计数，Ｃ错误；采用平板划线法不能对 培养基中的菌落进行计数，Ｄ错误． ７．ＡＢＣ　由于温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝 固，所以倒平板操作应等培养基冷却至５０℃左右时，在酒精灯 火焰附近进行，防止杂菌污染，Ａ正确；为验证培养基是否被污 染或灭菌是否合格，两种方法均需同时将接种的平板和未接种 的平板倒置，在培养箱中进行培养，Ｂ正确；平板划线法和稀释 涂布平板法是微生物常见的接种方法，都能在固体培养基上得 到由单个细胞形成的单菌落，Ｃ正确；用平板划线法分离菌种， 划线五个区域，每次接种之前需要灼烧接种环灭菌，最后划线 完成也需要灼烧灭菌，共６次，Ｄ错误． ８．ＡＣ　甲培养皿的菌落均匀分布，接种方法应为稀释涂 布平板法，Ａ正确；甲、丙培养基菌落数目多，包括野生型酵母 菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿菌株是某种营 养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和 丙是加入了同种营养成分的培养基，Ｂ错误；由于基因突变具 有不定向性，接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷 型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，所以，甲培养皿中菌 落数有可能比接种的酵母菌数少，Ｃ正确；乙培养皿的培养基 是基本培养基，形成的菌落只可能是野生型菌落，Ｄ错误． ９．ＡＢＣ　一般选用１×１０４、１×１０５和１×１０６                                                         倍稀释的稀 —１— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 释液进行平板培养，能得到在３０～３００范围的有效数据，初次 做实验范围可放宽，Ａ正确；要证明选择培养基起到了选择作 用，则需要接种了的牛肉膏蛋白胨培养基做对照，如果两个培 养基上长的菌落不同，则说明选择培养基有选择作用，Ｂ正确； 证明选择培养基未被污染，则需要设置空白培养基做对照，如 果空白对照平板上不长菌，说明没有被污染，Ｃ正确；通过选择 培养基筛选出来的细菌也有可能是利用了空气中Ｎ２作氮源的 细菌，Ｄ错误． １０．（１）固体 （２）为细菌的生长提供蛋白质和维生素 （３）干热灭菌　灼烧灭菌 （４）ＡＤＢＥＣ （５）杀死接种环上残留的菌种　上一次划线的末端　使 细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少 （６）冷却凝固后的固体培养基 解析：（１）ＢＣＧ培养基制作时加入了琼脂，因此其从物理 性质上看，属于固体培养基． （２）酵母膏富含蛋白质和维生素等营养成分，能为细菌的 生长提供蛋白质和维生素． （３）常用的灭菌方法有湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）、干热灭 菌和灼烧灭菌等． （４）根据平板划线操作流程可知，示意图中正确的操作顺 序为ＡＤＢＥＣ． （５）每次划线前灼烧接种环是为了杀死接种环上残留的 菌种．在第二次以及后面的划线操作时，总是从上一次划线的 末端开始划线，原因是使细菌的数目随着划线次数的增加而逐 步减少，达到分离菌株的目的． （６）倒平板中的平板是冷却凝固后的固体培养基． １１．（１）探究不同高度空气中微生物的种类和数量　平板 灭菌不合格（受到杂菌污染） （２）碳源　氮源　避免周围环境中微生物的污染 （３）①使培养基凝固，防止培养基温度过高杀死接种在其 上的微生物 ②让微生物在适宜的温度下生长（繁殖） （４）防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上（污染培养基 和破坏菌落）　灭菌 解析：（１）题述实验中的自变量是打开培养皿盖的培养皿 距地面的高度，因此该实验的实验目的是探究不同高度空气中 微生物的种类和数量．若Ｅ组的培养基表面有菌落生长，说明 平板灭菌不彻底（受到杂菌污染）． （２）培养基中的牛肉膏提供的主要营养物质是碳源、磷酸 盐和维生素等，蛋白胨提供的主要营养物质是氮源和维生素 等，而微生物的生长需要的营养物质主要是碳源和氮源．“在酒 精灯火焰附近”进行相关操作是为了避免周围环境中微生物 的污染． （３）①“待培养基冷却至室温”的目的是使培养基凝固，防 止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物．②“将处理完毕 的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是让微生物在适宜的 温度下生长（繁殖）． （４）培养微生物时将培养皿倒置的目的是防止冷凝后形 成的水珠滴落在培养基上，污染培养基和破坏菌落．实验结束 后，对使用过的培养基应进行灭菌处理． １２．（１）防止琼脂糊底而导致烧杯破裂　高压蒸汽灭菌 （２）稀释涂布平板法　菌液的稀释度要足够高 （３）只有以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生 长　用完全培养基接种后在相同条件下同时培养 （４）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 一个菌落 （５）酚红指示剂 解析：（１）图中所示为固体培养基，在熔化琼脂时需要不 断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂，培养基的灭 菌方法是高压蒸汽灭菌法． （２）由于本实验需要进行计数，所以采用的接种方法是稀 释涂布平板法；培养一段时间要能在培养基表面形成单个的菌 落，需要菌液的稀释度要足够高，防止多个细菌连在一起． （３）由于只有以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基 上生长，所以该培养基能够起到筛选分解尿素的微生物的作 用，为判断其是否起到了筛选作用，需要用完全培养基接种后 在相同条件下同时培养，如果完全培养基上的菌落数目大于选 择培养基，则说明起到选择作用． （４）由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只 是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目低． （５）可以在筛选尿素分解菌的培养基中应加入酚红指示 剂，鉴定该种细菌能够分解尿素． １３．（１）脲酶　分解尿素的细菌是异养生物，不能利用二 氧化碳合成有机物 （２）琼脂　稀释涂布平板法　酚红　红 （３）为细菌生长提供无机盐离子；作为缓冲剂保持细胞生 长过程中ｐＨ的稳定；维持渗透压 （４）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 一个菌落 解析：（１）脲酶可催化尿素分解成 ＣＯ２和 ＮＨ３，能分解尿 素的细菌是异养生物，不能利用二氧化碳合成有机物，因此不 能以ＣＯ２作为碳源                                                                      ． —２— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 （２）培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，琼脂是固 体培养基的必要成分，故 Ｘ通常是琼脂；分析题图可知，图中 将细菌转为固体培养时用的接种方法是稀释涂布平板法．尿素 分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定，原因是其体内产生的脲酶 能够将尿素转化为氨是酚红指示剂呈红色． （３）ＫＨ２ＰＯ４和 Ｎａ２ＨＰＯ４可以为细菌生长提供无机盐离 子、作为缓冲剂保持细胞生长中ｐＨ的稳定、维持渗透压． （４）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 一个菌落，因此一般统计菌落数会比活菌实际数目低． 第３７期３版题参考答案 １．Ａ　发酵工程的产品可以是微生物细胞本身，也可以是 微生物的代谢产物，Ａ正确；发酵工程中发酵条件的变化既会 影响微生物的繁殖，也会影响微生物的代谢途径，如氧气条件， Ｂ错误；发酵工程多为单一菌种发酵，这样便于控制发酵条件， Ｃ错误；发酵工程和传统发酵技术的区别除了微生物的种类， 还有发酵条件的严格度不同等，Ｄ错误． ２．Ｄ　在果浆中添加果胶酶和纤维素酶可以酶解细胞壁， 增加细胞内容物的释放，酶的活性受到温度的影响，所以酶解 环节需要控制酶解温度，Ａ正确；微生物发酵过程中利用蔗糖 产生酒精，所以调整成分时按比例添加蔗糖可以提高果酒的酒 精含量，Ｂ正确；需要对基因工程获得的高产菌株进行扩大培 养，增加基因工程高产菌株的数量，Ｃ正确；在生产过程中，一 般利用酵母菌发酵产生酒精，主发酵前的阶段进行通气，使酵 母菌进行有氧呼吸，促进微生物大量繁殖，后发酵阶段需要密 闭，促进酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，酵母菌的适宜生长温 度是１８～３０℃，Ｄ错误． ３．Ａ　醋酸菌在糖源充足的情况下能将糖分解成醋酸，故 可采用葡萄糖作为发酵培养液的碳源，Ａ错误；工业发酵罐的 体积一般很大，需要接入的菌种总体积也多，所以接入发酵罐 前还需要对菌种进行扩大化培养，Ｂ正确；醋酸菌为需氧型生 物，深层通气液体发酵可保证氧气供应，使醋酸菌迅速生长繁 殖，产生代谢产物醋酸，从而提高醋的产量，Ｃ正确；发酵工程 所用的菌种，大多是单一菌种，一旦有杂菌污染可能导致产量 大大降低，所以发酵设备和培养液均需要经过严格灭菌，Ｄ正 确． ４．Ｄ　为了防止酒精形成乙醛和醋酸，啤酒生产的后发酵 阶段要在低温度和密闭环境下进行，Ａ错误；醋酸菌在 Ｏ２、糖 源都充足时，将糖分解成醋酸，缺少糖源、Ｏ？充足时，将乙醇 转变为乙醛，再转化为醋酸，Ｂ错误；黑曲霉是真核生物，Ｃ错 误；乳酸链球菌在无氧条件下产生的乳酸链球菌素可以作为天 然的防腐剂，Ｄ正确． ５．Ａ　选育高产、优质的菌种需要根据人们的需要进行设 计，而发酵产物需从菌中破碎分离不是选育菌种的条件，且发 酵产物未必需要菌体破碎后获得，Ａ正确；菌种对环境应没有 明显或潜在的伤害这是选育高产、优质菌种的前提条件，Ｂ错 误；选育出的高产、优质的菌种应该具备遗传特性和生产能力 稳定的特征，否则不能投入到生产中，Ｃ错误；选育出的高产、 优质的菌种应该具备能利用充足且廉价的培养基原料的特征， 这样才能降低生产成本，获得较高的经济效益，Ｄ错误． ６．Ａ　酸鱼制作使用了乳酸菌，利用乳酸菌无氧呼吸产乳 酸的反应，所以腌制酸鱼时需要水封坛沿，制造无氧环境，以利 于乳酸菌的发酵，Ａ正确；随着发酵过程的进行，环境逐渐变得 无氧、呈酸性，在这样的条件下大多数微生物不能生存，所以酸 鱼的制作过程不需要对原料和容器进行严格的灭菌处理，Ｂ错 误；乳酸菌无氧呼吸不产生二氧化碳，在发酵初期，由于发酵坛 内有少量氧气，酵母菌会进行有氧呼吸产生二氧化碳，Ｃ错误； 酸鱼是生鱼直接制作的，没有经过严格的灭菌操作，可能会有 误食寄生虫或其他致病微生物的风险，Ｄ错误． ７．ＢＣ　古代生产的氵美陂酱油属于传统发酵技术，不是采用 现代的发酵工程，Ａ错误；大豆蒸熟后冷却到常温再制曲，是为 了防止高温杀死米曲霉，Ｂ正确；发酵后期加入食盐水，造成高 渗环境，能使微生物渗透失水而死，起到抑制杂菌污染的作用， Ｃ正确；制作酱油的主要菌种有米曲霉、酵母菌和乳酸菌等，所 以抽油得到的生酱油不是米曲霉纯培养的产物，Ｄ错误． ８．ＡＢＤ　淀粉的糖化作用是在发酵过程中继续利用微生 物所分泌的淀粉酶将碳水化合物分解成葡萄糖、麦芽糖、糊精 等，便于微生物利用，Ａ正确；发酵产物柠檬酸呈酸性，随着发 酵进程的进行，柠檬酸含量增多，发酵液酸性增强，溶液 ｐＨ逐 渐减小，Ｂ正确；结合题干可知，发酵时采用精制糖如葡萄糖、 蔗糖为原料，能够获得较高产量，故实验室配制培养基筛选黑 曲霉不一定以葡萄糖为唯一碳源，Ｃ错误；如果产品是代谢物， 可以根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得 产品，故发酵结束后，采用提取、分离和纯化等措施获得柠檬 酸，Ｄ正确． ９．ＣＤ　谷氨酸是小分子物质，单纯的过滤、沉淀的方法不 能将谷氨酸从培养液中分离提取出来，Ａ错误；谷氨酸产生菌 在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形 成谷氨酰胺和Ｎ－乙酰谷氨酰胺，Ｂ错误；在菌种选育中，可用 细胞工程、基因工程等方法，构建工程细胞或工程菌，Ｃ正确； 谷氨酸发酵生产过程中搅拌的目的是使菌种与培养液充分接 触，Ｄ正确． １０．（１）蛋白胨　高压蒸汽 （２）菌液体积未知；开始划线区菌落连在一起，无法计数                                                                      　３０～３００ —３— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 （３）无氮源　细菌能生长 １１．（１）高压蒸汽　杀死所有微生物，包括芽孢和孢子 （２）增加纤维素分解菌的浓度　平板划线（或稀释涂布平 板） （３）纤维素　形成透明圈 １２．（１）酵母菌　为酵母菌繁殖提供适量氧气，防止发酵 旺盛时发酵液溢出　低温、密闭 （２）（酸性）重铬酸钾（溶液）　初始糖浓度过高，酵母菌失 水，导致酵母菌的生长繁殖受到抑制 （３）在液体培养基中将葡萄糖作为唯一碳源并不断提高 其浓度　稀释涂布平板　小 解析：（１）某兴趣小组按照如图所示发酵工艺用不同糖源 制得蓝莓酒，所以添加的菌种甲是酵母菌．蓝莓切片不应装满 发酵罐而需留有一定空间，目的是为酵母菌繁殖提供适量氧 气，防止发酵旺盛时发酵液溢出；后发酵阶段需在低温、密闭环 境下进行，这样才能形成澄清、成熟的蓝莓酒． （２）可选择（酸性）重铬酸钾（溶液）检测酒精，由橙色变成 灰绿色．若初始糖浓度过高，所制得的蓝莓酒酒精浓度反而偏 低，其原因可能是初始糖浓度过高，酵母菌失水，导致酵母菌的 生长繁殖受到抑制． （３）具有耐高糖和耐酸特性的菌种甲是酒精发酵的理想 菌种．为提高菌种甲对葡萄糖的耐受能力，可以在液体培养基 中将葡萄糖作为唯一碳源并不断提高其浓度，将允许耐高糖的 酵母菌生长，同时抑制或阻止不耐高糖的酵母菌的生长． 对活菌计数的方法是稀释涂布平板法，当样品的稀释度足 够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中 的一个活菌．该方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是当 两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落． １３．（１）酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下将葡萄 糖分解为酒精　实验思路：取两支试管分别标号 Ａ、Ｂ，向 Ａ试 管中加入２ｍＬ发酵液，向Ｂ试管中加入２ｍＬ酒精，向Ａ、Ｂ两 试管各滴加０．５ｍＬ溶有０．１ｇ重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性 重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化．实验结果： Ａ、Ｂ两试管都变为灰绿色；结论：发酵过程中产生了酒精 （２）混合菌种　沉淀、过滤、灭菌 （３）２．２５×１０９ （４）酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无 菌空气 解析：（１）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了 酵母菌的无氧呼吸．酵母菌属于真核生物，其代谢类型是兼性 厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖 分解为酒精． 橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生 化学反应，变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了 酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色 变化．对照组中应加入酒精作为阳性对照．实验过程中应遵循 等量原则、单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别 标号Ａ、Ｂ，Ａ试管中加入２ｍＬ发酵液，作为实验组，Ｂ试管中 加入２ｍＬ酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸 钾，振荡后观察试管中颜色变化，若 Ａ、Ｂ两试管都变为灰绿 色，即可验证发酵过程中产生了酒精． （２）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作，因此其发酵 菌种为天然的混合菌种．现代工业发酵酿制果酒不同于自制果 酒，需要经过沉淀、过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒． （３）２５×１６型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数／１ ｍＬ＝１个中方格中酵母菌数 ×２５×１００００×稀释倍数，因此该 实验中每毫升发酵液中酵母菌数量＝９×２５×１００００×１０００＝ ２．２５×１０９． （４）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋 利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入 无菌空气． 第３８期３版题参考答案 １．Ｄ　酒精发酵产生的酒精能抑制杂菌的生长，有利于提 高果醋的产率，Ａ正确；缺少糖源时，醋酸能将乙醇转化为乙 醛，再将乙醛变为乙酸（醋酸），Ｂ正确；果酒有利于溶出水果中 的风味物质并保留在果醋中，增加果醋风味，Ｃ正确；酿制果酒 和果醋时的最适发酵温度不同，前者为１８～３０℃，后者为３０～ ３５℃，Ｄ错误． ２．Ｃ　酒糟不仅提供发酵所需的微生物还提供了原料，Ａ 错误；传统发酵是以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主， Ｂ错误；酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分，Ｃ正 确；酒和醋的原料和工艺流程不完全相同，发酵条件也不同，Ｄ 错误． ３．Ａ　酿酒过程中利用酵母菌的无氧呼吸会产生二氧化 碳气体，为防止发酵液溢出，不能装满容器后进行密封发酵，会 留有一段空间（一方面利于早期酵母菌有氧呼吸繁殖增加数 量，一方面防止发酵过程中发酵液溢出），Ａ错误；温度过高，会 将酵母菌等微生物杀死（避免高温杀死酵母菌），故蒸煮好的 糯米需冷却后再加入酒曲，以防影响酒曲中微生物的活性，Ｂ 正确；发酵时，淀粉糖化后为酵母菌的繁殖提供了大量的营养 物质，Ｃ正确；发酵过程中，酵母菌无氧发酵将糖分转化为酒精 和二氧化碳，产生了米酒的特有风味，Ｄ正确． ４．Ｄ　果醋发酵利用的菌种是醋酸菌，在利用醋酸菌进行 钙果果醋发酵过程中，温度应控制在３０～３５℃，Ａ错误；                                                                      酵母 —４— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，但需要根据发酵进程适 时拧松瓶盖放气，Ｂ错误；制作钙果果酒、果醋时，对钙果进行 灭菌会杀死附着在果皮上的野生酵母菌，Ｃ错误；钙果果酒的 颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的，Ｄ正确． ５．Ｄ　醋酸菌是好氧菌，酿制成功的粮食酒如果暴露在空 气中，醋酸菌进行有氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化 为醋酸，Ａ正确；酿酒过程中酵母菌通过呼吸作用产生的 ＣＯ２ 溶于发酵液中，会使发酵液ｐＨ下降，在制作果醋的过程中，醋 酸菌会产生醋酸，发酵液 ｐＨ下降，Ｂ正确；泡菜制作利用的是 乳酸菌发酵，乳酸菌是原核生物，该过程发生在乳酸菌细胞的 细胞质中，泡菜坛内长出一层白膜的原因是因为产膜酵母的繁 殖，Ｃ正确；腐乳的营养丰富，原因是毛霉将蛋白质分解成小分 子肽和氨基酸，在制作过程中加入酒精含量过高，腐乳成熟时 间延长，Ｄ错误． ６．Ａ　存放发酵时需要用膜覆盖密封，说明生产发酵辣椒 酱的菌种不是醋酸菌，而是厌氧的乳酸菌，Ａ错误；若去蒂不完 全，会影响到最终辣椒酱的细腻程度，Ｂ正确；用水泵将下层盐 水抽出从表面淋下有利于腌制均匀，Ｃ正确；发酵辣椒酱的传 统生产工艺主要是利用了天然乳酸菌发酵产生乳酸，再辅以低 盐来保存产品，存在生产周期长，产品品质不稳定，亚硝酸盐等 有害物质的含量超标等严重问题，无法满足工业化大规模生产 和食品安全的需要，Ｄ正确． ７．Ｂ　在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色， 因此可用酸性重铬酸钾来检验果汁发酵是否产生酒精，Ａ错 误；醋酸是一种弱酸，无毒，有酸味，可以品尝或用 ｐＨ试纸鉴 定，Ｂ正确；泡菜制作过程的亚硝酸盐含量可用比色法测定，Ｃ 错误；亚硝酸盐无味，且对人体有害，不能用品尝法测定其含 量，Ｄ错误． ８．Ｄ　灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有 的微生物，包括芽孢和孢子；消毒只能杀死物体表面或内部一 部分微生物，不能杀死芽孢和孢子，Ａ错误；对操作的空间、操 作者的衣着和手进行清洁消毒，Ｂ错误；灼烧灭菌的对象可以 是金属器具和玻璃器具，Ｃ错误；消毒和灭菌的原理基本相同， 都是使微生物的核酸或蛋白质变性，但灭菌更彻底，Ｄ正确． ９．Ａ　微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接种和分离 酵母菌、培养酵母菌，Ａ正确；将配制好的培养基转移到锥形瓶 中，加上棉塞，包上牛皮纸并用牛皮筋勒紧后再放入高压蒸汽 灭菌锅进行灭菌处理，Ｂ错误；接种环在火焰上灼烧灭菌冷却 后再蘸取菌液在培养基表面通过连续划线而分离纯化菌种，Ｃ 错误；平板划线法和稀释涂布平板法都能分离、纯化菌种，但稀 释涂布平板法还可以统计菌种数目，且统计值偏小，Ｄ错误． １０．Ｂ　实验室中常利用平板划线法或稀释涂布平板法获 得纯培养物，最终都可以得到单菌落，Ａ正确；融化后的培养基 需冷却至一定温度后，才可与菌悬液混合，防止高温杀死微生 物，Ｂ错误；稀释涂布平板法先进行梯度稀释，再将不同稀释度 的菌液涂布到固体培养基的表面，Ｃ正确；浇注平板法也可用 于获得纯培养物，即将待分离的样品用无菌水进行充分稀释 后，取合适稀释度的少量菌悬液倒入已溶化的固体培养基中充 分混匀，再倒入无菌培养皿中培养，由此判断浇注平板法获得 的纯培养物可存在于培养基内部．平板划线法在固体培养基表 面连续划线，最终在培养基表面获得单菌落，Ｄ正确． １１．Ａ　从用途分析该培养基属于鉴别培养基，可以鉴别 大肠杆菌，Ａ错误；葡萄糖中含有碳，培养基中提供碳源的物质 主要是葡萄糖，蛋白胨中富含蛋白质，提供氮源的物质是蛋白 胨，Ｂ正确；微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、水和无机 盐等，有的还需要特殊营养物质如维生素，蛋白胨还可以提供 维生素等，Ｃ正确；由于该培养基用于培养细菌，所以 ｐＨ应调 节至中性或弱碱性，Ｄ正确． １２．Ｃ　取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌，防止污 染，Ａ正确；对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法，Ｂ正 确；分离硝化细菌的培养基为选择培养基，应以亚硝酸盐或氨 为唯一氮源，Ｃ错误；为保证结果准确，要选择菌落数为３０～ ３００的平板进行计数，避免因误差过大而影响计数，Ｄ正确． １３．Ａ　焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活， Ａ错误；糖化过程中淀粉酶将淀粉分解成为糖浆，Ｂ正确；蒸煮 可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染，Ｃ正确；消毒可以杀 死啤酒中的大多数微生物，从而延长其保存期，Ｄ正确． １４．Ｂ　幽门螺杆菌能分解对热不稳定的尿素，故选择培养 基应以尿素为唯一氮源，因为灭菌时温度较高，对热不稳定的 尿素可能分解，故制备时应先灭菌后加入无菌尿素，Ａ正确；设 置一个未接种的培养基做为对照组，能证明培养基没有杂菌污 染，而不能证明选择培养基是否起到作用，Ｂ错误；只有能合成 脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源，幽门螺旋杆菌 可通过合成脲酶来分解利用尿素，Ｃ正确；尿素分解成氨，氨会 使培养基的碱性增强，即 ｐＨ升高，可利用酚红指示剂进行鉴 定，Ｄ正确． １５．Ｃ　无氮培养基只能筛选出自生固氮微生物，因为自生 固氮微生物能够利用空气中的氮气作为氮源，但在无氮培养基 上生长的微生物并不一定都是固氮微生物，Ａ错误；在泡菜制 作过程中，盐水需要浸没全部菜料，主要目的是创造一个无氧 的环境，有利于乳酸菌的发酵，Ｂ错误；血细胞计数板适用于测 定酵母菌等个体较大细胞，而不适用于细菌等个体较小的细胞 的测定，Ｃ正确；家庭制果酒利用的是葡萄表面附着的野生酵 母菌，所以不能灭菌，Ｄ错误                                                                      ． —５— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 １６．ＡＢＣ　两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和 无机盐，Ａ正确；甲培养基为液体培养基，其作用是选择和扩大 培养降解精喹禾灵的菌种，Ｂ正确；乙培养基含琼脂，为固体培 养基，其作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种，Ｃ正确； 稀释涂布平板法或显微镜直接计数法可用于测定土壤中能降 解精喹禾灵的细菌细胞数，但平板划线法不能用于微生物计 数，Ｄ错误． １７．ＡＣＤ　利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键 是有恰当的稀释度，才能保证培养基表面生长的一个单菌落， 来源于样品稀释液中的一个活菌，Ａ正确；若要判断选择培养 基是否起到了选择作用，需设置接种在牛肉膏蛋白胨培养基上 作为对照，Ｂ错误；该实验每隔２４ｈ统计一次菌落数目，并以菌 落数目稳定时的记录作为结果，Ｃ正确；分解尿素的细菌能合 成脲酶，将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，酸碱缓冲 剂只能使培养基的ｐＨ相对稳定，所以用以尿素为唯一氮源且 添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后会使酚红指示剂 变红，Ｄ正确． １８．ＡＣ　倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口 的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上 培养皿的皿盖，不能打开皿盖，Ａ错误；用接种无菌水的培养基 作为对照组，与接种微生物的培养基进行对照培养检测培养基 是否受污染，Ｂ正确；用稀释涂布平板计数法时，由于距离相近 的两个细胞可以形成一个菌落，所以统计结果往往少于原始菌 液中微生物数量，Ｃ错误；使用后的培养基丢弃前一定要进行 灭菌处理，防止污染环境，Ｄ正确； １９．ＢＣ　样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目， 土壤中各类微生物数量不同，所以为获得不同类型的微生物， 要按不同的稀释倍数进行分离，Ａ正确、Ｂ错误；在同一稀释度 下只要得到两个或两个以上的菌落数目在３０～３００的平板，就 说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，Ｃ错误；验证 选择培养基是否具有选择作用，需设立牛肉膏蛋白胨固体培养 基作为对照，若后者的菌落数明显大于前者，说明前者具有筛 选作用，Ｄ正确． ２０．ＡＢ　柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，可以 通过黑曲霉发酵制得，Ａ正确；可以将乙型肝炎病毒的抗原基 因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗，Ｂ正确；利用 发酵工程生产的白僵菌可以用来防治８０多种农林害虫，Ｃ错 误；一种放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水 稻枯纹病，Ｄ错误． ２１．（１）新鲜蔬菜中亚硝酸盐含量低　腌制的时间、温度 和食盐的用量等 （２）外界溶液浓度高，细胞渗透失水　抑制杂菌生长，也 可增加泡菜的醇香感 （３）稀释涂布平板法或平板划线法　具有透明圈　将适 量的新鲜蔬菜均分为若干组，每组依次加入等量的盐水、调味 料和不同浓度的蔗糖，其他按上述流程操作，测定不同蔗糖浓 度下亚硝酸盐的含量并比较其峰值 解析：（１）腌制蔬菜含有亚硝酸盐，在体内会转化成亚硝 胺，具有致癌作用．泡菜制作中，需注意控制食盐用量、温度以 及腌制的时间，否则容易造成细菌大量繁殖而导致亚硝酸盐增 加，影响泡菜品质，所以泡菜制作过程中需要定期测定亚硝酸 盐的含量． （２）由于泡菜制作过程中要加入一定量的食盐、白酒以及 香辛料等，因此蔬菜失水，造成泡菜坛中溶液增加．在制作泡菜 过程中泡菜坛内常常长一层白膜，主要是产膜酵母繁殖引起 的，加入少量白酒，可以抑制杂菌生长，减少白膜的产生，同时 也可增加泡菜的醇香感． （３）分离纯化微生物通常用稀释涂布平板法或平板划线 法，分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌 代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离，分离纯化 时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为目的菌．为了探究蔗 糖含量对亚硝酸盐含量峰值的影响，自变量为蔗糖浓度，并且 实验要遵循对照原则，所以实验的主要思路为：配制具有一系 列浓度梯度的蔗糖溶液，分别添加到等量的泡菜中，定期测定 亚硝酸盐的含量，观察并记录亚硝酸盐含量的峰值． ２２．（１）农药起到选择作用，该土壤中富含农药降解菌 （２）中性或弱碱性　 稀释涂布平板法　 防止形成的冷凝 水滴落在培养基上造成污染（或防止培养基中的水分过快蒸 发） （３）筛选出具有高耐药性的降解菌株 解析：（１）寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求， 到相应的环境中去寻找，长期喷洒农药的耕地土壤中，农药起 到选择作用，该土壤中富含农药降解菌，因此可以从该土壤中 取样筛选农药降解菌． （２）一般多数细菌生活在中性或弱碱性，农药降解菌属于 细菌，因此培养基的 ｐＨ需要调至中性或弱碱性．根据步骤可 知，接种前要对菌液进行稀释，因此接种的方法为稀释涂布平 板法．接种后的平板要倒置培养，目的是防止皿盖上的形成的 冷凝水滴落在培养基上，造成污染． （３）有机磷农药能对高效降解有机磷农药的菌株起到选 择作用，步骤③中，依次梯度增加有机磷农药浓度至１０００ｍｇ／ Ｌ，目的是筛选出具有高耐药性的降解菌株． ２３．（１）防止杂菌污染 （２）将温度升高为３０～３５℃、                                                                      通入无菌空气 —６— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 （３）让酵母菌在有氧条件下大量繁殖　 在缺氧、呈酸性的 发酵液中，绝大多数微生物因无法适应这一环境而受抑制 （４）氧气、糖源充足　 氧气充足、糖源不足 （５）重铬酸钾 解析：（１）过程①中，在冲洗之前去除蓝莓枝梗，杂菌可能 从伤口处侵入，造成污染． （２）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分 解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变 为醋酸．由过程④制酒转变为过程⑤制醋，需要采取的措施是 将温度升高为３０～３５℃，同时通入无菌空气． （３）酿制蓝莓酒时，一般要先通气，目的是为了让酵母菌 在有氧条件下进行大量繁殖．在该过程中常不需要对蓝莓进行 严格的消毒处理，是因为在缺氧、呈酸性的发酵液中，绝大多数 微生物因无法适应这一环境而受抑制． （４）醋酸菌的异化方式为需氧型，过程③在氧气、糖源充 足条件下可直接发酵为蓝莓醋；过程⑤在氧气充足、糖源不足 条件时将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸． （５）鉴定酒精产生的方法是在酸性条件下用重铬酸钾检 测样液，如果颜色由橙色变为灰绿色，则说明产生了酒精． ２４．（１）葡萄糖 （２）相对于消毒，灭菌能阻止因杂菌繁殖给实验带来的影 响　 ２８℃ （３）排出二氧化碳，防止发酵液溢出 （４）节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成 本低、原料来源广 解析：（１）上述实验过程中利用了菌种Ｔ能产生纤维素分 解酶将秸秆中的纤维素分解为葡萄糖，进而在酵母菌的作用下 产生酒精． （２）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制 备培养基，培养基中还需要适量补充氮源等营养成分，配制完 成后需要灭菌而不是消毒，原因在于消毒是指使用较为温和的 物理、化学和生物等方法仅杀此物体表面或内部一部分微生 物，灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物， 包括芽孢和孢子．相对于消毒，灭菌能消除因杂菌繁殖给实验 带来的影响．温度是影响酵母菌生长的重要因素，需要设置的 最适温度约为２８℃． （３）在酵母菌发酵过程中，酵母菌的无氧呼吸产生二氧化 碳，为了将其排出，防治发酵液溢出，还需适时拧松瓶盖． （４）与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生 产方式的优点是节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、 生产成本低、原料来源广． ２５．（１）有机磷农药　 蛋白质、核酸 （２）平板划线法　 稀释涂布平板法 （３）用物理或化学因素来处理生物，使生物发生基因突变 （４）以蔗糖为碳源降解率最高；蔗糖浓度为１．６０％时降解 率最高 解析：（１）分析题意可知，本操作的目的是获取农药降解 菌，故应在培养基中加入有机磷农药，以达到富集目的菌种的 目的；磷在体内可以参与合成蛋白质、核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）等生物 大分子． （２）富集培养并不能获得农药降解菌的纯种，可以通过平 板划线法和稀释涂布平板法的方法进行纯化． （３）诱变育种是指用物理或化学因素来处理生物，使生物 发生基因突变，可以提高突变率，创造人类需要的生物新品种． （４）由题图可知，与其它组别相比，蔗糖组的降解率最高， 即以蔗糖为碳源时有机磷农药的降解率最高；且蔗糖浓度为 １．６０％时有机磷农药的降解率最高． 第３９期３版题参考答案 １．Ｄ　诱导原生质体融合的障碍是细胞壁，所以通过纤维 素酶和果胶酶可以去除植物的细胞壁，Ａ正确；用化学的方法 可以诱导原生质体融合，例如 ＰＥＧ诱导，Ｂ正确；细胞工程通 过细胞器、细胞或组织水平上的操作，有目的地获得特定的细 胞、组织、器官、个体或其产品，所以非对称融合属于细胞工程， Ｃ正确；非对称融合过程中部分染色体丢失（断裂），所以会降 低植物细胞的全能性，Ｄ错误． ２．Ａ　进行植物组织培养前，石斛叶片无需酶解去壁，Ａ错 误；诱导愈伤组织形成时，取野生石斛的叶、茎等组织作为外植 体，需先进行清洗和消毒处理，Ｂ正确；利用组织培养技术获得 试管苗属于无性繁殖，能保持优良品种的遗传特性，Ｃ正确；组 织培养经过脱分化形成愈伤组织和再分化两个关键步骤，Ｄ正 确． ３．Ｄ　茎尖分生区细胞内的病毒少，甚至无病毒，可作为 外植体，Ａ正确；由于病毒可以通过胞间连丝扩散，茎尖分生区 不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达，Ｂ正确；离体 的茎尖细胞是通过有丝分裂产生的，含有本物种全套的遗传信 息，具有全能性，Ｃ正确；脱分化和再分化使用的培养基中激素 的种类是相同的，浓度和比例是不同的，Ｄ错误． ４．Ｃ　建立无菌培养物时需分别用酒精和次氯酸钠溶液 对叶片、茎尖、花药等进行消毒处理，Ａ正确；外植体需置于脱 分化培养基中，诱导形成愈伤组织，愈伤组织细胞为脱分化细 胞，全能性较高，Ｂ正确；生根培养基中细胞分裂素与生长素的 含量之比应小于１，生长素有利于生根，同时生根培养需给予 适当时间和强度的光照，Ｃ错误；若培育的是耐盐植株，则需将 获得的试管苗移栽于含高盐土壤（培养液）中进行筛选，                                                                      筛选 —７— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 出所需的幼苗后再推广栽培，Ｄ正确． ５．Ｄ　根据题意可知，工业化生产过程中有利用紫草植株 部分组织诱导形成紫草愈伤组织的过程，该过程为细胞的脱分 化，Ａ正确；题中显示工业化生产的流程为“取紫草植株部分组 织诱导形成紫草愈伤组织，再转入紫草素形成培养基，然后再 将细胞破碎后提取出紫草素”，显然该过程中不必将愈伤组织 培养出根、芽等器官，Ｂ正确；紫草的愈伤组织细胞含有细胞 壁，因此其在低渗溶液中不会涨破，Ｃ正确；题中显示，工业生 产过程中需要将紫草细胞破碎后提取出紫草素，显然紫草素在 细胞内合成后不会被分泌到细胞外，Ｄ错误． ６．Ｄ　紫花苜蓿培育过程中不需要使用蛋白酶，需要使用 生长素和细胞分裂素等植物激素，需要纤维素酶除去细胞壁， Ａ错误；诱导植物细胞原生质融合的方法有物理诱导和化学诱 导两种，没有生物诱导，Ｂ错误；融合的细胞不一定为杂交细 胞，也可能为同种细胞，需要进一步筛选，Ｃ错误；基因的表达 可能存在相互干扰，杂交细胞不一定具备双亲的优良性状，Ｄ 正确． ７．ＡＣＤ　植物组织培养过程中，愈伤组织主要进行细胞生 长和分裂，不能体现植物细胞的全能性，Ａ错误；愈伤组织培养 过程要在无菌条件下进行，以避免微生物的污染，Ｂ正确；由表 格数据可知，两组接种干重相似，但光照条件下收获的愈伤组 织干重和紫杉醇含量均低于黑暗条件下的，Ｃ错误；植物组织 培养过程中，有机物可以为植物细胞提供必需的营养物质和能 量，此外还可以调节渗透压，Ｄ错误． ８．ＣＤ　次生代谢产物是植物生长发育所非必需的物质，Ａ 错误；对高产人参皂苷的细胞进行增殖，利用的是细胞增殖原 理，没有体现植物细胞的全能性，Ｂ错误；由于培养细胞处于不 断增殖的状态，因此容易受到培养条件和诱变因素的影响而发 生基因突变，Ｃ正确；植物组织培养的培养基中蔗糖除供能之 外，还具有调节培养基内的渗透压等作用，故培养人参细胞的 培养基中需要添加糖类等有机物，Ｄ正确． ９．ＡＤ　植物组织培养一般先诱导生芽后诱导生根，先出 芽是组织吸水后细胞分裂的结果，后长根是继续生长的需要， Ａ正确；细胞产物的工厂化生产未涉及到植物细胞的全能性，Ｂ 错误；利用茎尖分生组织培育脱毒苗是因为茎尖分生组织细胞 中不含病毒，而不是因为其含有抗病毒基因，所以此方法不一 定能使植株具备抗病毒的能力，Ｃ错误；植物体细胞杂交技术 是指用人工方法把分离的不同品种或不同种植物的原生质体， 诱导成融合细胞，然后经离体培养、诱导分化，再生出完整植株 的整个技术体系，这里体现了植物细胞全能性，细胞融合体现 了细胞膜的流动性，Ｄ正确． １０．（１）形态、结构和功能　基因的选择性表达　高效快 速地实现种苗的大量繁殖 （２）具有分生能力、高度液泡化的薄壁细胞　诱导愈伤组 织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞 分裂素的比例不同 （３）将本地桉树的细胞与红豆杉的细胞融合，经植物组织 培养获得植株　杂种植株通常含有同源染色体，减数分裂过程 中联会正常，能够产生正常的生殖细胞 １１．（１）Ｄ （２）ａ　基因的选择性表达 （３）固体　生长素 （４）低温诱导或喷洒秋水仙素 解析：（１）分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化 程度低，全能性容易表达，所以茎尖分生区细胞最适合进行植 物组织培养，花粉、叶肉细胞、表皮细胞分化程度高，全能性低， 不适合进行植物组织培养，Ｄ正确． （２）过程ａ表示脱分化，能证明高度分化细胞可被诱导成 为未分化的状态．经过程ｂ产生的胚状体中出现形态结构不同 的细胞，是细胞再分化的结果，细胞分化的根本原因是基因的 选择性表达． （３）植物组织培养通常使用ＭＳ培养基，属于固体培养基； 过程ｃ在形成幼苗时，生长素的占比高时，更利于诱导生根；细 胞分裂素的占比高时，更利于诱导生芽． （４）若要使用该植株的花粉进行培育，形成的个体是单倍 体，高度不育，还需要用低温诱导或喷洒秋水仙素的方法对过 程ｃ得到的幼苗进行处理，才能得到可育植株． １２．（１）人工诱导染色体加倍　 ３６、３４ （２）ＡＡＢＣ　 基因重组　 甘蓝型油菜 （３）将埃塞俄比亚芥与具有优良性状的其他品种的油菜 杂交再进行回交，选育具有优良性状的品种（或将埃塞俄比亚 芥进行诱变处理，选育具有优良性状的品种；或通过转基因技 术调控代谢途径） 解析：（１）甘蓝与芸薹直接杂交，得到的 Ｆ１（ＡＣ）不含同源 染色体，需要经过人工诱导染色体加倍处理才能获得甘蓝型油 菜（ＡＡＣＣ）．经过杂交、纯化培育的芥菜型油菜的染色体组成 为ＡＡＢＢ，埃塞俄比亚芥的染色体组成为ＢＢＣＣ，Ａ、Ｂ、Ｃ分别表 示不同植物的一个染色体组，三者的染色体数目分别为１０、８、 ９．因此芥菜型油菜和埃塞俄比亚芥的染色体数目分别为３６、 ３４． （２）将甘蓝型油菜（ＡＡＣＣ）与芥菜型油菜（ＡＡＢＢ）杂交获 得杂种Ｆ１，Ｆ１的染色体组成是（ＡＡＢＣ）．将Ｆ１连续与甘蓝型油 菜回交，最终选育获得黄籽、油酸含量达６８．５２％的甘蓝型油 菜新品种．该育种过程遵循的遗传学原理主要是基因重组，                                                                      回 —８— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 交的主要目的是保留甘蓝型油菜的优良遗传性状． （３）埃塞俄比亚芥具有耐热、抗倒伏、抗白锈病等优良的 农艺性状，也存在产量低、低油酸、高硫苷等不良的农艺性状． 为改良埃塞俄比亚芥的品质，可以利用诱变育种，即将埃塞俄 比亚芥进行诱变处理，选育具有优良性状的品种；基因工程育 种能定向改变生物的性状，所以可以通过转基因技术调控代谢 途径；或者将埃塞俄比亚芥与具有优良性状的其他品种的油菜 杂交再进行回交，选育具有优良性状的品种． １３．（１）植物体细胞杂交　纤维素酶和果胶酶 （２）愈伤组织　再分化　杂菌和培养物竞争获得营养的 能力更强；杂菌生长过程中可能会产生对培养物有害的物质　 ８０ （３）基因的选择性表达 （４）不能　不同物种之间存在生殖隔离 第４０期３版题参考答案 １．Ｄ　该技术属于动物细胞培养，原理是细胞增殖，而植 物组织培养的原理是植物细胞的全能性，两者不同，Ａ错误；此 技术即动物细胞培养需要适宜的温度（３６．５±０．５℃）和 ｐＨ （７．２～７．４），Ｂ错误；由于技术条件等的制约，目前不能将动物 体细胞培养为完整个体，且牙髓干细胞属于分化程度较高的细 胞，不能分为任何一种类型的细胞，Ｃ错误；对于牙髓干细胞的 培养过程需要经历原代培养（分瓶前的培养过程），用胰蛋白 酶处理后再用离心法收集悬液中的细胞进行传代培养，Ｄ正 确． ２．Ｂ　动物细胞培养需要在培养液中添加一些天然成分， 比如动物血清，Ａ正确；人的成纤维细胞培养出可增殖、具有功 能的肝样细胞（ｈｉｈｅｐ细胞），均由同一个受精卵发育而来，所 含遗传物质相同，Ｂ错误；细胞核具有全能性是指分化为完整 个体或其他各种细胞的潜能，成纤维细胞培养成 ｈｉｈｅｐ细胞并 未体现细胞的全能性，Ｃ正确；人的成纤维细胞培养出可增殖、 具有功能的肝样细胞（ｈｉｈｅｐ细胞）发生了细胞的分化，实质是 基因的选择性表达，Ｄ正确． ３．Ｃ　人工诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法， 诱导动物细胞融合采用的方法有电融合法、ＰＥＧ融合法和灭活 病毒诱导法，二者不完全相同，Ａ正确；让Ｂ细胞和骨髓瘤细胞 融合制备杂交瘤细胞为制备单克隆抗体开辟了新途径，Ｂ正 确；科学家利用植物体细胞杂交技术培育出番茄—马铃薯杂种 植株，但这种植株并没有在地上结番茄、地下长马铃薯，Ｃ错 误；动物细胞培养是动物细胞工程的基本技术，因而也是动物 细胞融合的基础，动物细胞培养时需用胰蛋白酶、胶原蛋白酶 处理，以得到分散的细胞，Ｄ正确． ４．Ｃ　制备该药物前必须用 ＰＤ－Ｌ１蛋白兔疫小鼠，得到 相应的Ｂ淋巴细胞，Ａ正确；制备单克隆抗体，需从小鼠的脾脏 中提取Ｂ淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，Ｂ正确；用选择性培养 基筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗ＰＤ－Ｌ１抗体，还需要 进行抗体检测，Ｃ错误；为保证抗体的纯度，必须经过多次克隆 化培养和抗体检测，Ｄ正确． ５．Ｄ　上述过程涉及到细胞核移植技术、早期胚胎培养技 术及细胞培养技术，Ａ正确；为了保证细胞培养时营养物质和 生长因子的供给，培养基中需添加一定量的动物血清等天然成 分，可以补充合成培养基中缺乏的物质，Ｂ正确．不同细胞的主 要ＨＬＡ不同，会引起机体发生免疫排斥反应，而且 ＨＬＡ差别 越大，引起的免疫排斥反应越强，Ｃ正确；人体患镰状细胞贫血 的根本原因是基因突变，因此无法利用患病个体细胞培养的细 胞、组织或器官进行移植来治疗镰状细胞贫血，Ｄ错误． ６．Ｄ　通过核移植得到的细胞称为重组细胞，由重组细胞 发育成的胚胎称为重构胚，Ａ正确；由于动物胚胎细胞分化程 度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全 能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核 移植，Ｂ正确；核移植得到的克隆动物，没有经过减数分裂和受 精作用，属于无性生殖，Ｃ正确；动物体细胞表现全能性的难易 程度与其分化程度有关，如分化程度低，表现全能性相对容易， Ｄ错误． ７．ＣＤ　动物细胞培养时，有些细胞需要贴壁生长，而有些 细胞可以悬浮生长，如肿瘤细胞，Ａ错误；微载体为细胞提供附 着位点，使细胞能够在微载体上贴壁生长，Ｂ错误；培养动物细 胞时应保证无菌、无毒的环境及适宜的温度、ｐＨ等条件，Ｃ正 确；在培养动物细胞时应提供的气体环境为９５％的空气和５％ 的ＣＯ２，Ｄ正确． ８．ＡＢＣ　单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原 纯度越高，产生的多抗纯度越高，注入小鼠体内的抗原纯度影 响多抗的纯度，Ａ错误；单抗制备过程中通常将经过免疫的 Ｂ 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，Ｂ错误；非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 ｐ７２上有多种抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一 种抗体，所以向小鼠体内注入 ｐ７２后，可以刺激小鼠产生多种 抗ｐ７２的单抗，Ｃ错误；ｐ７２部分结构改变只改变了部分抗原决 定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存 在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效， Ｄ正确． ９．ＢＣ　卵（母）细胞中含有促进全能性表达的物质，因此 选择去核的卵（母）细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动 物的成功率，Ａ正确；高度分化的细胞已经失去分裂能力，因此 选择高度分化的动物体细胞进行培养不利于获得大量细胞，Ｂ 错误；愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，                                                                      因 —９— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 此选择植物的愈伤组织进行诱变处理，再进行人工选择，可获 得优质的突变体，Ｃ错误；茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因 此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，Ｄ正 确． １０．（１）原代培养　 ＯＢ （２）合成　 补充合成培养基中缺失的成分 （３）７．２～７．４　 胃蛋白酶发挥作用的ｐＨ约为１．５～２．２， 在ｐＨ７．２～７．４环境下，酶会变性失活，不能发挥作用 解析：（１）人们通常将动物组织处理后的初次培养称为原 代培养，在图中是ＯＢ段． （２）在动物细胞培养时，将细胞所需的营养物质按其种类 和所需数量严格配制而成的培养基称为合成培养基．通常还需 要在培养基中加入适量血清等一些天然成分，血清作为天然培 养基的作用是补充合成培养基中缺失的成分，有利于细胞的正 常生长与增殖． （３）进行动物细胞培养时，选用液体培养基的ｐＨ为７．２～ ７．４，若将组织块剪碎，加入胰蛋白酶，可使其分散成许多单个 细胞，若改用胃蛋白酶则不行，因为胃蛋白酶发挥作用的 ｐＨ 为１．５～２．２，在ｐＨ为７．２～７．４的环境下，酶会变性失活，不 能发挥作用． １１．（１）Ｂ淋巴　 经过ＨＩＶ免疫的Ｂ淋巴细胞 （２）灭活的病毒　 流动性 （３）乙、丙　 无限增殖且产生特异性抗体 解析：（１）单克隆抗体是指由一个Ｂ淋巴细胞增殖形成的 细胞群所产生的单一型抗体分子；据图分析可知，题图中甲为 艾滋病自愈者免疫细胞与骨髓瘤细胞融合的过程，该杂交瘤细 胞最终产生了抗体，说明艾滋病自愈者免疫细胞为经过 ＨＩＶ 免疫的Ｂ淋巴细胞． （２）常用的诱导动物细胞融合的诱导因素有聚乙二醇 （ＰＥＧ）、灭活的病毒、电刺激等；细胞发生融合利用了细胞膜的 结构特点：具有一定的流动性． （３）题图中甲过程为艾滋病自愈细胞与骨髓瘤细胞的融 合过程，①为选择性培养基的筛选作用；乙为经第一次筛选后 的杂交瘤细胞，②为克隆化培养和抗体检测；丙为第二次筛选 后的所需杂交瘤细胞，既能无限增殖又可产生所需特异性抗体 （抗ＨＩＶ的抗体）；故甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是乙、丙， ②过程的目的是筛选具有无限增殖且产生特异性抗体（特点） 的杂交瘤细胞． １２．（１）动物细胞培养、动物细胞融合 （２）抗原　体液 （３）灭活的病毒　选择性　既能大量繁殖，又能产生专一 性抗体 （４）特异性强、灵敏度高，并可大量制备 １３．（１）显微操作　 胰（胶原）蛋白酶　 动物细胞培养 （２）含有使细胞核中遗传物质全能性表现出来的物质 （３）卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性 状产生影响 （４）已经分化的动物体细胞核具有全能性 （５）否　否 解析：（１）过程①表示去除细胞核，去核时常采用显微操 作去核法．获得大量的供体细胞需要先用胰（胶原）蛋白酶处 理后获得单个细胞后再进行去核操作，②代表的过程是胚胎移 植． （２）构建重组细胞时，选用卵母细胞细胞质的原因有体积 大易操作、可提供丰富的营养之外，主要原因是其中含有使细 胞核中遗传物质全能性表现出来的物质． （３）克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的 角度来说，是因为卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动 物的性状产生影响，即克隆动物的性状绝大多数与供核动物相 同． （４）克隆羊“多莉”和其他克隆动物的成功获得说明了已 经分化的动物体细胞核具有全能性． （５）三亲婴儿的获得也采用了核移植的技术，其过程是将 患线粒体疾病的母亲的卵母细胞的核与一位健康妇女的细胞 质组合在一起获得重组的卵母细胞，在进行该操作时，不可以 将母亲的卵母细胞直接注入捐献者的卵母细胞中，否则母亲的 线粒体基因可能会遗传给子代，导致患病，利用该方法产生健 康婴儿的生殖方式是有性生殖，因为该过程中有雌雄生殖细胞 的融合．若患线粒体疾病的个体是父亲，则不需要进行核移植， 因为父方提供的精子中几乎不含有细胞质                                                          ． —０１— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期