第38期 发酵工程及其应用-【数理报】2024-2025学年高二生物选择性必修3同步学案（人教版2019）

书 （上接第３版） Ａ．两种培养基均能为微生物提供水、碳源、 氮源和无机盐 Ｂ．甲培养基的作用是选择和扩大培养降解 精喹禾灵的菌种 Ｃ．乙培养基的作用是分离和纯化培养降解 精喹禾灵的菌种 Ｄ．平板划线法可用于测定土壤中能降解精 喹禾灵的细菌细胞数 １７．下列关于土壤中分解尿素的细菌的分 离与计数实验操作的叙述，正确的是 （　　） Ａ．利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目 的关键是有恰当的稀释度 Ｂ．若要判断选择培养基是否起到了选择作 用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为 对照 Ｃ．该实验每隔 ２４ｈ统计一次菌落数目，并 以菌落数目稳定时的记录作为结果 Ｄ．用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲 剂的培养基来培养该细菌后会使酚红指示剂变 红 １８．传统葡萄酒的制作利用了果皮上的野 生酵母菌，某学习兴趣小组利用相关培养基培 养葡萄果皮清洗液以探究果皮上的微生物种 类，对此实验相关说法不正确的是 （　　） Ａ．倒平板时需在酒精灯火焰旁，打开皿盖 放在一边，用灭菌后的涂布器进行涂布 Ｂ．用接种无菌水的培养基与接种微生物的 培养基进行对照培养检测培养基是否受污染 Ｃ．采用稀释涂布平板法培养和计数微生物 数量会导致计数结果偏大 Ｄ．使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭 菌处理，以免污染环境 １９．下列说法错误的是 （　　） Ａ．因为土壤中各类微生物的数量不同，所 以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释 倍数进行分离 Ｂ．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能 分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同 Ｃ．只有得到了３个或３个以上菌落数目在 ３０～３００的平板，才说明稀释操作比较成功，并 能够进行菌落的计数 Ｄ．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于 选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出 一些细菌菌落 ２０．下列关于发酵工程的应用，叙述正确的 是 （　　） Ａ．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节 剂，可以通过黑曲霉发酵制得 Ｂ．可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵 母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗 Ｃ．利用发酵工程生产的白僵菌特异性强， 只能用来防治一种农林害虫 Ｄ．一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素 可以用来防治水稻枯纹病 第Ⅱ卷（非选择题） 三、非选择题（本题包括５小题，共５５分） ２１．（１４分）第十三届中国泡菜食品国际博 览会在四川眉山开幕，泡辣椒、泡萝卜、泡黄瓜 等小泡菜吸引了来自多个国家和地区参展商的 眼球．请回答下列问题： （１）泡菜虽然酸爽可口，利于下饭，但在日 常生活中我们应少吃泡菜，多吃新鲜蔬菜，原因 是 ．泡菜腌制的过程中，要注意控制的 条件有 等方面（至少说出２项）． （２）泡菜制作过程中，泡菜坛中溶液量会增 加，原因可能是 ．在制作泡菜过程中泡 菜坛内长白膜，常常加入少量白酒的作用是 ． （３）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料 纯化乳酸菌，纯化乳酸菌的接种方法是 ，固体培养基中因含有碳酸钙而不透 明，分离纯化时应挑选出 的菌落作为 乳酸菌目的菌．研究发现，泡菜制作中添加适量 的蔗糖能降低亚硝酸盐含量的峰值．为了进一 步探究蔗糖量对亚硝酸盐含量峰值的影响，请 你简要写出实验的主要思路． ． ２２．（１０分）为了减少果蔬中农药残留量， 实验人员从长期喷洒农药的耕地土壤中筛选了 一株能高效降解有机磷农药的菌株，筛选步骤 如下： ①取１ｇ土壤溶于１０ｍＬ无菌水中，再梯度 稀释，并选取浓度为１０－２、１０－４、１０－６的稀释液 分别涂布于加有５０ｍｇ／Ｌ有机磷农药的培养基 平板中，于３５℃条件下培养４８ｈ． ②将平板中菌落分别挑至加有１００ｍｇ／Ｌ有机 磷农药的培养基中，于３５℃条件下培养４８ｈ． ③再从②的培养基中挑取单一菌落置于含 有２００ｍｇ／Ｌ有机磷农药培养基的试管中，再依 次梯度增加有机磷农药浓度至１０００ｍｇ／Ｌ，并重 复实验．回答下列问题： （１）筛选农药降解菌时，应从长期喷洒农药 的耕地土壤中取样，原因是 ． （２）筛选农药降解菌的培养基的ｐＨ需要调 至 ，根据筛选步骤可知，步骤①中将菌 液接种到培养基上的方法是 ， 接种后的平板要倒置培养，目的是 （答出１点）． （３）步骤③中，依次梯度增加有机磷农药浓 度至１０００ｍｇ／Ｌ，目的是 ． ２３．（９分）如图是以鲜蓝莓为原料发酵制 作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图．回答下列问题： （１）过程①中，去除蓝莓枝梗应在冲洗之 后，目的是 ． （２）由过程④转变为过程⑤，需要采取的措 施是 ． （３）酿制蓝莓酒时，一般要先通气，目的是 ．通常不需要对蓝莓进行严 格的消毒处理，是因为 ． （４）过程③在 条件下可直接发酵 为蓝莓醋；过程⑤在 条件时醋酸菌可 将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸． （５）鉴定蓝莓酒的方法是在酸性条件下用 检测样液，如果颜色由橙色变为灰绿 色，则说明产生了酒精． ２４．（１２分）某研究小组设计了一个利用作 物秸秆生产燃料乙醇的小型实验．其主要步骤 是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的 托盘中，喷水浸润、接种菌种 Ｔ，培养一段时间 后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌种Ｔ不 会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进 行乙醇发酵（酒精发酵）．实验流程如图所示． 回答下列问题： （１）上述实验过程中利用了菌种 Ｔ能产生 纤维素分解酶将秸秆中的纤维素分解为 以供酵母菌利用． （２）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋 洗液为原料制备培养基，培养基中还需要适量 补充氮源等营养成分，配制完成后需要灭菌而 不是消毒，原因在于 ． 温度是影响酵母菌生长的重要因素，需要设置 的最适温度约为 ． （３）在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶 盖，原因是 ． （４）与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本 实验中乙醇生产方式的优点是 ．（答出３点即可） ２５．（１０分）有机磷农药会造成严重的环境 污染，并直接或间接的危害人类健康，某研究小 组采取下列流程获取农药降解菌：从受农药污 染严重的土壤中筛选分离具优良性状的菌种→ 定向培育优良菌种→在此基础上进行诱变育种 及构建工程菌．回答下列问题： （１）在采集的样品中，一般目的菌种在数量 上并不占优势，为提高分离效率，可以先采用富 集培养，即在培养基中加入 ，使所需要 的微生物繁殖，造成数量上的优势，限制不需要 的微生物生长繁殖．磷在体内可以参与合成 （答出２种即可）等生物大分 子． （２）富集培养并不能获得农药降解菌的纯 种，可以通过 和 的方法进行 纯化． （３）为了进一步获得优良菌种，研究小组进 行了诱变育种，诱变育种是指 ． （４）研究小组进一步研究了影响降解率的 碳源和氮源，得到如下结果，从图中可以得出的 结论有：                                                                                                                                                                                   ． !"#$ %& #$' #$( )*+, ! " # $ % #$-)*+, !"!!! !"#!$ !"%!$ &"'!$ &"(!$ '"!!$ "#"!!$ #!"!!$ )!"!!$ '!"!!$ &!"!!$ !"!!$ ./0 1234 52 12 62 782 9: ;<2 =2 >2 ?@ *!"!!$ #*"!!$ #!"!!$ )*"!!$ )!"!!$ '*"!!$ '!"!!$ + + + + + + ./0 书 第３７期２版题 参考答案 １．Ｄ　２．Ｄ　３．Ｄ　４．Ｃ ５．Ｄ　６．Ｂ　７．ＡＢＣ ８．ＡＣ　９．ＡＢＣ １０．（１）固体 （２）为细菌的生长提供蛋 白质和维生素 （３）干热灭菌　灼烧灭菌 （４）ＡＤＢＥＣ （５）杀死接种环上残留的 菌种　上一次划线的末端　使 细菌的数目随着划线次数的增 加而逐步减少 （６）冷却凝固后的固体培 养基 １１．（１）探究不同高度空 气中微生物的种类和数量　平 板灭菌不合格（受到杂菌污 染） （２）碳源　氮源　避免周 围环境中微生物的污染 （３）①使培养基凝固，防 止培养基温度过高杀死接种在 其上的微生物 ②让微生物在适宜的温度 下生长（繁殖） （４）防止冷凝后形成的水 珠滴落在培养基上（污染培养 基和破坏菌落）　灭菌 １２．（１）防止琼脂糊底而 导致烧杯破裂　高压蒸汽灭菌 （２）稀释涂布平板法　菌 液的稀释度要足够高 （３）只有以尿素作为氮源 的微生物才能在该培养基上生 长　用完全培养基接种后在相 同条件下同时培养 （４）当两个或多个细胞连 在一起时，平板上观察到的只 是一个菌落 （５）酚红指示剂 １３．（１）脲酶　分解尿素 的细菌是异养生物，不能利用 二氧化碳合成有机物 （２）琼脂　稀释涂布平板 法　酚红　红 （３）为细菌生长提供无机 盐离子；作为缓冲剂保持细胞 生长过程中 ｐＨ的稳定；维持 渗透压 （４）当两个或多个细胞连 在一起时，平板上观察到的只 是一个菌落 第３７期３版题 参考答案 １．Ａ　２．Ｄ　３．Ａ　４．Ｄ ５．Ａ　６．Ａ　７．ＢＣ ８．ＡＢＤ　９．ＣＤ　 １０．（１）蛋白胨　高压蒸 汽 （２）菌液体积未知；开始 划线区菌落连在一起，无法计 数　３０～３００ （３）无氮源　细菌能生长 １１．（１）高压蒸汽　杀死 所有微生物，包括芽孢和孢子 （２）增加纤维素分解菌的 浓度　平板划线（或稀释涂布 平板） （３）纤维素　形成透明圈 １２．（１）酵母菌　为酵母 菌繁殖提供适量氧气，防止发 酵旺盛时发酵液溢出　低温、 密闭 （２）（酸性）重铬酸钾（溶 液）　初始糖浓度过高，酵母 菌失水，导致酵母菌的生长繁 殖受到抑制 （３）在液体培养基中将葡 萄糖作为唯一碳源并不断提高 其浓度　稀释涂布平板　小 １３．（１）酵母菌是兼性厌 氧微生物，在无氧条件下将葡 萄糖分解为酒精　实验思路： 取两支试管分别标号 Ａ、Ｂ，向 Ａ试管中加入２ｍＬ发酵液，向 Ｂ试管中加入 ２ｍＬ酒精，向 Ａ、Ｂ两试管各滴加０．５ｍＬ溶 有０．１ｇ重铬酸钾的浓硫酸溶 液（或酸性重铬酸钾），并轻轻 震荡，观察试管中溶液颜色变 化．实验结果：Ａ、Ｂ两试管都 变为灰绿色；结论：发酵过程中 产生了酒精 （２）混合菌种　沉淀、过 滤、灭菌 （３）２．２５×１０９ （４）酿酒时需关闭充气 口，酿醋时则需向充气孔中充 入无菌空气 书 一、消毒和灭菌 １．消毒：使用较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微 生物（不包括芽孢和孢子）．常用的消毒方法有： 煮沸消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 等． ２．灭菌：使用强烈的理化因素杀死物体内 外所有的微生物，包括芽孢和孢子．灭菌的方法 有：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等． 注意：（１）消毒和灭菌都属于无菌技术，不 仅可用来防止实验室的培养物被其他外来的微 生物污染，还能有效避免操作者自身被微生物 感染． （２）芽孢是某些细菌生长到一定阶段，为躲 避高温、干旱等恶劣环境条件，在细胞内形成的 一个圆形、椭圆形或柱形的休眠体．高温灭菌的 主要目的就是杀死细菌的芽孢．芽孢在适宜条 件下可重新萌发成新个体，但一个芽孢只产生 一个营养体，所以芽孢只是细菌产生的休眠结 构．孢子是生物所产生的一种有繁殖或休眠作 用的细胞，能直接发育成新个体，属于无性生殖 细胞． 二、平板划线法和稀释涂布平板法 １．平板划线法：通过接种环在琼脂固体培 养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步 稀释分散到培养基表面．操作时应注意： （１）在进行平板划线时不能划破培养基，原 因有两个：其一，一旦划破，会造成划线不均匀， 难以达到分离出单菌落的目的；其二，存留在划 破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会 沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落． （２）在操作的第一步灼烧接种环是为了避 免接种环上可能存在的微生物污染培养物．每 次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束 后接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种 环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而 通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数 目逐渐减少，以便得到单个菌落．划线结束后灼 烧接种环是为了及时杀死接种环上残留的菌 种，避免细菌污染环境和感染操作者． （３）平板冷凝后，要将平板倒置．这是因为平 板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基 表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培 养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上 的水珠落入培养基，造成污染． ２．稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的 梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布 到琼脂固体培养基的表面进行培养． 注意：（１）平板划线法和稀释涂布平板法是 微生物接种时最常用的方法，目的都是为了使 聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能 在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌 种． （２）稀释涂布平板法常用来统计样品中活 菌的数目，和显微镜直接计数法一样，是测定微 生物数量的最常用方法． 三、选择培养基和鉴别培养基 １．选择培养基：根据某种生物的特殊营养 要求或其对物理、化学因素的抗性而设计的培 养基，能使混合菌样中的目的菌种变为优势菌， 从而提高该菌的筛选效率．如纤维素可用来富 集分解纤维的微生物；尿素可用来富集分解尿 素的微生物；培养基中缺乏氮源时，可以分离固 氮微生物；培养基中缺乏碳源时，可以分离自养 型微生物．又如在培养基中加入青霉素等抗生 素，可抑制细菌、放线菌细胞壁的合成，使它们 不能正常生长，而酵母菌、霉菌却能正常生长、 繁殖；加入高浓度的食盐可筛选出金黄色葡萄 球菌． 改变微生物的培养条件（如温度、ｐＨ等）也 可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在 高温环境中，只能得到耐高温的微生物（如 Ｔａｑ 细菌）；将培养基放入密闭环境中，可培养厌氧 微生物（如乳酸菌）等． ２．鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在 培养基中加入某种指示剂或化学药品，经培养 后，培养基中可显示特殊颜色，从而将某种菌类 与其他菌种区别开． 注意：选择培养基起筛选作用，鉴别培养基 起判断作用． 书 对对碰１：与传统发酵有关的几种微生物的比较 酵母菌 醋酸菌 乳酸菌 生物学 分类 真核生物 原核生物 原核生物 生活方式 异养兼性 厌氧 异养需氧 异养厌氧 适宜温度 ２８℃左右 ３０～３５℃ 室温 发酵条件 前期需氧， 后期不需氧 一直需氧 无氧 主要繁殖 方式 适宜条件下 出芽生殖 二分裂 生殖 二分裂 生殖 主要用途 酿酒、发面 酿醋 制作酸 奶、泡菜 由于醋酸菌和乳酸菌属于原核生物，所以 在利用这两类微生物时，环境中一定不要加入 青霉素等抗生素． 对对碰２：果酒、果醋和泡菜的制作 比较 项目 果酒的制作 果醋的制作 泡菜的制作 作用 菌类 酵母菌（真菌） 醋酸菌（细菌） 假丝酵母 和乳酸菌 原理 酵母菌在无氧的 条件将葡萄糖氧 化成乙醇，而且当 培养液中乙醇浓 度为１６％时，酵母 菌死亡 醋酸菌在有 氧条件下将 乙醇氧化为 醋酸 乳酸菌和假丝 酵母将糖转化 为乳酸和醇类 物质 制作 流程 操作 注意 （１）果酒制作过程 中，紫葡萄在用高 锰酸钾溶液浸泡 后，一定要用清水 将高锰酸钾溶液 冲洗干净； （２）将葡萄浆放入 发酵瓶时，装量不 能超过 ２ ３ （１）果醋发酵 时，通气孔需 塞上脱指棉 球，以过滤空 气． （２）醋酸菌培 养物与酒水 混合物混匀 后需将ｐＨ调 到７．０ 制作泡菜时，用 水密封坛口，以 保证坛内无氧 环境，利于乳酸 菌发酵 在果酒制作的前期在发酵罐中要留有一定 的空间（大约 １ ３），这样可以给酵母菌提供氧气， 使其进行有氧呼吸，为酵母菌的生长、增殖提供 能量，从而使酵母菌迅速增殖，缩短发酵时间． 在产生酒精的阶段要求严格的厌氧环境，此阶 段如果有氧，则会抑制其酒精的发酵．果醋制作 过程中要求始终通氧，醋酸菌是好氧细菌，缺氧 时醋酸菌的生长、增殖会受到影响，从而影响醋 酸的生成． 对对碰３：腐乳与豆腐的营养成分的比较 豆腐由大豆直接磨制而成，其成分与大豆成 分相同．大豆含有丰富的蛋白质，同时还含有硫胺 素、尼克酸、维生素Ａ以及钙、磷、铁等矿物质． ! " # $ !"#$% ! ! &' !!"#( $#$% ) &* !&+,-(. ' ( !" " "#$%& !'()*)+ !,234+ !567890!)*&+*',&'*( !':;<0=>?@ABCDEFGH '!' IJK2(LMNO(P567 !QR5S0!)!!!( !BT7U(VW0!)*&$*',&'(- &**)(()(%%,XYZ[I\ !U]^_`a(BT7<bcdefgQhXi\ !QRU]VW0&&&%* !jklmUnoUpqU ! a ( r d e f ?XB\s t u v w ( ! a ( x = > y < z { | } ~ X@ A B €  ‚ E ƒ „ …\† z ‡ ˆ | z ‰ Š ‹ Œ  ‡ _ ` a ( B T 7 < b Ž  /0123456 7 89:4;<=>?@5 !)*&+*',&'(% 89AB;<=>?@5 !)*&+*',&%&' =>‘L’“” =>Lt•–—˜™š›“œ NO(P564+ P0žŸ  e¡¢3£¤4+¥I0!"#$%&'()(*X+\ Q¦§I0,-.,), Ẍ ©ª«¬­-\ 78A' BCDEF GD HI JKLM NOP6-Q RSGDTU VW(XF GDYZ[ ./ \]B^_`abc [,./_d`GDef " ®¯ °±² ghVi jklmn opqrs Vt tuvw xytu VW\hTz GD q* " ³´ µ¶· {| }~lGD FlS€ DEF &O }~ ‚ƒ „…† ‡ˆlS€F€ 0 Nu& 书 第Ⅰ卷（选择题） 　　　　　　　　　一、单项选择题（本题共 １５小题，每小题 ２ 分，共３０分．每小题给出的四个选项中，只有一个 选项是最符合题目要求的） １．人们在酿造果醋时，往往要先酿造果酒，其 原因不包括 （　　） Ａ．果酒发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提 高果醋的产率 Ｂ．醋酸菌能以果酒中的乙醇为底物来产生乙 酸 Ｃ．果酒有利于溶解水果中的风味物质并保留 在果醋中 Ｄ．酿制果酒和果醋时的最适发酵温度接近， 均为３０～３５℃ ２．相传，酒祖杜康的儿子在长江边上开了个 酒糟房，他把酒糟和江水搅拌后，封存在缸中．到 了第２１天的酉时才想起自己的酒，开缸一闻，香 气扑鼻；舌尖咂磨，酸中带甜；浇到菜里，菜味鲜 美．酒没酿出来，倒酿出来一味好佐料．他高兴地 琢磨，２１天后的酉时，就在酉字后面加上昔（廿一 日），造出了“醋”字．根据上述材料，下列相关分析 正确的是 （　　） Ａ．酒糟只提供发酵所需的微生物 Ｂ．传统发酵以混合菌种的液体发酵为主 Ｃ．酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加 充分 Ｄ．酒和醋的原料和工艺流程相同，但二者的 发酵条件不同 ３．上饶多地都有酿米酒的风俗，其制作流程 大致为：原料处理、糖化发酵、酒精蒸馏、陈酿熟 化、装瓶封存．下列叙述错误的是 （　　） Ａ．制备好的糯米与酒曲充分混合，装满容器 后进行密封发酵 Ｂ．蒸煮好的糯米需冷却后再加入酒曲，以防 影响酒曲中微生物的活性 Ｃ．发酵时，淀粉糖化有利于酵母菌大量繁殖 Ｄ．发酵过程中，酵母菌将糖分转化为酒精和 二氧化碳，产生了米酒的特有风味 ４．钙果果实中含有多种对人体有益的矿物质 元素，其中钙元素的含量超出许多水果．钙果用途 广泛，叶可加工成茶叶，花、仁、根能制成药材，果 实可加工成果汁、果酒、果醋等产品．下列说法正 确的是 （　　） Ａ．利用酵母菌进行钙果果醋发酵的过程中温 度应控制在１８～３０℃ Ｂ．在钙果果酒发酵期间，为保持无氧条件，不 能拧松发酵瓶的盖子 Ｃ．制作钙果果酒、果醋时，应将钙果进行高压 蒸汽灭菌 Ｄ．钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色 素进入发酵液形成的 ５．传统发酵技术的目的是将原料通过微生物 的代谢转化为人类所需要产物，下列关于传统发 酵技术的叙述中，错误的是 （　　） Ａ．酿制成功的粮食酒如果暴露在空气中酒味 会逐渐消失而出现酸味，原因是醋酸菌进行有氧 呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸 Ｂ．酿酒和酿醋两个过程中，发酵液ｐＨ的变化 趋势均为下降 Ｃ．泡菜制作利用的是乳酸菌发酵，该过程发 生在乳酸菌细胞的细胞质中，泡菜坛内长出一层 白膜的原因是因为产膜酵母的繁殖 Ｄ．腐乳的营养丰富，原因是毛霉将蛋白质分 解成小分子肽和氨基酸，在制作过程中加入酒精 含量过高，腐乳成熟时间缩短 ６．湖南发酵辣椒酱工业化生产一般工艺流程 为：原料→去蒂→入池腌制（按一层辣椒一层盐腌 制，并不时用水泵将下层盐水抽出从表面淋下）→ 存放发酵（最好是满池存放，表面用膜覆盖密封） →出池清洗→磨酱→拌料调味→灌装→高温杀菌 →成品．下列叙述错误的是 （　　） Ａ．生产发酵辣椒酱利用了醋酸菌发酵产生醋 酸 Ｂ．去蒂完全与否会影响到最终辣酱的细腻程 度 Ｃ．用水泵将下层盐水抽出从表面淋下以利于 腌制均匀 Ｄ．传统生产辣椒酱无法满足工业化大规模生 产和食品安全的需要 ７．下列关于发酵过程产物检验的说法中，正 确的是 （　　） Ａ．果汁发酵是否产生酒精，可用 ＮａＯＨ来检 验 Ｂ．检验醋酸的产生可用ｐＨ试纸鉴定 Ｃ．泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量不能测定 Ｄ．测定果酒、果醋的产生和亚硝酸盐的含量 均可用品尝法 ８．微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和 消毒．下列关于灭菌和消毒的叙述，正确的是 （　　） Ａ．灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生 物，包括芽孢和孢子 Ｂ．无菌操作时，对操作的空间、操作者的衣着 和手进行灭菌 Ｃ．灼烧灭菌的对象是金属器具，不可以是玻 璃器具 Ｄ．消毒和灭菌的原理是基本相同的，程度有 所不同 ９．下列关于酵母菌纯培养的叙述，正确的是 （　　） Ａ．微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接 种和分离酵母菌、培养酵母菌 Ｂ．将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加上 棉塞后直接放入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌 Ｃ．接种环在火焰上灼烧灭菌后，立即蘸取菌 液在培养基表面连续划线以分离纯化菌种 Ｄ．稀释涂布平板法可以估算酵母菌数量，且 估算值偏大 １０．浇注平板法可用于获得纯培养物，即将待 分离的样品用无菌水进行充分稀释后，取合适稀 释度的少量菌悬液倒入已溶化的固体培养基中充 分混匀，再倒入无菌培养皿中培养．下列叙述错误 的是 （　　） Ａ．实验室中常利用平板划线法或稀释涂布平 板法获得纯培养物 Ｂ．为防止培养基再次凝固，融化后的固体培 养基需立即与菌悬液混合 Ｃ．浇注平板法和稀释涂布平板法均需将待分 离的样品进行适宜梯度稀释 Ｄ．浇注平板法获得的纯培养物可存在于培养 基内部，而平板划线法只在表面 １１．下表表示某培养基的配方（生长在此培养 基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽）， 下列叙述不正确的是 （　　） 成分 蛋白胨 葡萄糖 ＫＨ２ＰＯ４ 伊红 亚甲基蓝 蒸馏水 琼脂 含量 １０ｇ １０ｇ ２ｇ ０．４ｇ ０．０６５ｇ １０００ｍＬ１５ｇ Ａ．从用途分析该培养基属于选择培养基 Ｂ．培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖， 提供氮源的物质是蛋白胨 Ｃ．该培养基含有水、无机盐、碳源和氮源等营 养物质 Ｄ．该培养基ｐＨ应调节至中性或弱碱性 １２．养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚 硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用．研究人 员从养殖池的池泥中分离出硝化细菌并进行计 数．下列相关说法错误的是 （　　） Ａ．取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌 Ｂ．对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法 Ｃ．分离硝化细菌的培养基为含亚硝酸盐的牛 肉膏蛋白胨培养基 Ｄ．为保证结果准确，要选择菌落数为３０～３００ 的平板进行计数 １３．啤酒的工厂化生产流程中，涉及发芽、焙 烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒和终止等若干工 艺流程．下列相关说法错误的是 （　　） Ａ．焙烤可以杀死大麦种子的胚，并使淀粉酶 变性失活 Ｂ．糖化过程中淀粉酶将淀粉分解成为糖浆 Ｃ．蒸煮可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌 污染 Ｄ．消毒可以杀死啤酒中的大多数微生物，从 而延长其保存期 １４．幽门螺旋杆菌（能分解对热不稳定的尿 素）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病菌．从 带菌者胃黏膜样本中分离出该细菌，相关实验步 骤和方法不合理的是 （　　） Ａ．选择培养基应以尿素为唯一氮源，制备时 应先灭菌后加入无菌尿素 Ｂ．若要判断选择培养基是否起到作用，需要 设置未接种的培养基作为对照组 Ｃ．幽门螺旋杆菌可通过合成脲酶来分解利用 尿素 Ｄ．尿素分解后培养基中ｐＨ升高，可利用酚红 指示剂进行鉴定 １５．下列有关发酵工程实验操作正确的是 （　　） Ａ．在暴露于空气的无氮培养基上生长出的都 是固氮微生物 Ｂ．泡菜制作时盐水浸没菜料的主要目的是杀 死菜料中的杂菌 Ｃ．血细胞计数板适用于酵母菌但不适用于细 菌的数量测定 Ｄ．家庭制果酒和工业化啤酒生产都要严格对 原料进行灭菌 二、不定项选择题（本题共 ５小题，每小题 ３ 分，共１５分．每小题给出的四个选项中，有的只有 一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对的 得３分，选对但不全的得１分，有选错的得０分） １６．精喹禾灵（分子式：Ｃ１９Ｈ１７ＣｌＮ２Ｏ４）是一种旱 田除草剂，能被土壤微生物分解．研究人员配制了 甲、乙两种培养基用于从土壤中筛选出能高效降解 精喹禾灵的微生物，甲的组分为无机盐、水和精喹禾 灵，乙的组分为无机盐、水、精喹禾灵和琼脂，其操作 流程如下图所示．下列叙述正确的是 （　　） （下转第４版                                                                                                                                                                       ） 书 １．亚硝酸盐的危害 （１）亚硝酸盐中毒 亚硝酸盐是强氧化剂，进入血液后会与血红 蛋白结合，使氧合血红蛋白变为高铁血红蛋白，从 而失去携氧能力，导致组织缺氧，出现青紫等中毒 现象，并对周围血管有扩张作用．口服亚硝酸盐１０ 分钟至３小时后，可出现头痛、头晕、乏力、胸闷、 气短、心悸、恶心、呕吐、腹痛、腹泻及全身皮肤、黏 膜紫绀等症状，如口唇、舌尖、指尖青紫，重者眼结 膜、面部及全身皮肤青紫，严重者出现意识丧失、 昏迷、惊厥、大小便失禁，可因呼吸衰竭而死亡．实 验室检查可见血中高铁血红蛋白含量明显升高． 急性亚硝酸盐中毒后只要正确迅速救治，一 般能很快痊愈．主要治疗措施包括：①尽快催吐、 洗胃和导泻；②服用解毒剂亚甲兰（美兰）、维生素 Ｃ，重危患者可输入一定量的新鲜血浆，及时处理 低血压休克，纠正酸中毒，吸氧及其他对症处理． 日常生活中引起亚硝酸盐中毒的主要原因 有： ①误将亚硝酸盐当食盐加入食品． ②食用硝酸盐、亚硝酸盐含量较高的腌制类 肉制品、泡菜、刚腌不久的蔬菜．初腌制的蔬菜中 含有大量亚硝酸盐，一般于腌后２０天左右消失； 酸菜在腌制的２至４天亚硝酸盐含量开始增高，在 ７至８天时含量最高，９天以后逐渐下降． ③食用贮存过久的蔬菜、腐烂蔬菜及放置过 久的煮熟蔬菜．这些菜内的硝酸盐会在硝酸盐还 原菌的作用下转化为亚硝酸盐．存放过久的熟菜 如果室温越高、放得越久，其内的亚硝酸盐的含量 就会越高，在气温较高的季节，绿色蔬菜存放一 天，其内的亚硝酸盐含量就会增加几倍． ④食用蔬菜（特别是叶菜）过多时，大量硝酸 盐进入肠道，若肠道消化功能欠佳，则肠道内的细 菌可将硝酸盐还原为亚硝酸盐． ⑤食用的奶制品中含有枯草杆菌，可使硝酸 盐还原为亚硝酸盐． ⑥饮用硝酸盐或亚硝酸盐含量高的苦井水、 蒸锅水．如有些地区的饮用水中含有较多的硝酸 盐，当用该水煮粥或食物时，水中的硝酸盐会在细 菌的作用下还原为亚硝酸盐． （２）亚硝酸盐的致癌性 亚硝酸盐是一种允许使用的食品添加剂，只 要在安全范围内使用就不会对人体造成危害，但 长期大量食用含亚硝酸盐的食物会有致癌的危 险．因为亚硝酸盐在自然界和胃肠道的酸性环境 中可以转化为亚硝胺，亚硝胺具有强烈的致癌作 用，可引发食管癌、胃癌、肝癌和大肠癌等． （３）亚硝酸盐的致畸性 亚硝酸盐能够透过胎盘进入胎儿体内，六个 月以内的胎儿对亚硝酸盐类特别敏感，亚硝酸盐 对胎儿有致畸作用．据研究表明，五岁以下儿童发 生脑癌的相对危险度增高与母体经食物摄入亚硝 酸盐的量有关． 此外，亚硝酸盐还可通过授乳途径进入婴儿 体内，造成婴儿机体组织缺氧，皮肤、黏膜出现青 紫斑． ２．预防措施 亚硝酸盐的危害是完全可以预防的，人们可 采取如下预防措施： （１）加强对亚硝酸盐的管理，不让其进入集体 食堂和家庭．妥善保存硝酸盐和亚硝酸盐，作为建筑 用防冻剂的亚硝酸盐应有明确标志，并标明“有毒” 标记（不宜使用“工业盐”的名称），严禁亚硝酸盐与 食盐、小苏打等混放或临近存放，防止误食中毒． （２）肉类、鱼类制品在加工中，如果必须使用 硝酸盐、亚硝酸盐时，应严格按国家卫生标准的规 定使用，严禁在肉制品加工过程中超量使用亚硝 酸盐． （３）蔬菜随买随吃，不要在室温下长期贮存蔬 菜，存放地点应干燥、阴凉、通风，避免长时间在高 温下堆放，注意保鲜，防止腐烂．尤其在高温季节， 禁食腐烂变质蔬菜．冰箱里存放的蔬菜也不宜时 间太长，否则容易产生亚硝酸盐． （４）尽量少吃或不吃隔夜的剩饭、剩菜、咸鱼、咸 蛋、咸菜等，剩菜中的亚硝酸盐含量明显高于新鲜制 作的菜． （５）在腌制食品过程中，应注意腌制时间和温 度，以及食盐的用量，温度过高、食盐用量不足 １０％、腌制时间过短时，易造成细菌大量繁殖，亚 硝酸盐含量会增加．一般腌制１０天后亚硝酸盐开 始下降．食盐在腌制食品过程中起抑菌防腐的作 用，当浓度为１０％ ～１５％时，只有少数细菌生长， 当浓度超过２０％时，几乎所有的微生物都会停止 生长．所以腌菜应在腌透后再食，且一次进食不可 过量，腌菜时应选用新鲜蔬菜． 书 实验评价是指对实验方案的合理性、实验操 作的规范性、实验结果的处理与讨论等进行的评 价．实验评价题的解题顺序一般为：阅读试题→明 确研究的问题→形成自己的实验方案→与试题中 的实验方案作对比→提出自己的观点和看法→书 写答案． 在解答实验评价题时，要做到“五看”，即： 一“看”对照 无对照实验 有对照实验，看对 照设置是否合理 实验变量设置是否有标记 是否遵循了单一变量原则 是否遵循了等量原则{{ 是否排除了干扰因素 二“看”步骤 步骤的顺序是否合理 步骤是否完整{ 具体操作有无违反生物学基本原理 三“看”验证 实验结果的验证是否准确{实验结果的验证是否得当 四“看”材料 生物材料的选择是否恰当 实验器材的选择是否合理 药剂的选择、使用、 { 用量是否准确 五“看”条件 是否需要搅拌、加热等 实验所需的温度、{ 光照等条件是否合理 以上只是实验评价的一般思路，如果具体到 每一个实验，其评价的内容则不尽相同，以本专题 的《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》为例， 其结果分析与评价如下表： 项目 种类 内容 现象 结论 对实验 过程的 评价　 培养基有 无被杂菌 污染 对照的培养基表面无 菌落生长 培养基未被杂 菌污染 培养基中的菌落形态 多样，菌落数偏高 培养基被杂菌 污染 选择培养 基是否具 有筛选作 用 牛肉膏蛋白胨固体培 养基上的菌落数目大 于选择培养基上的菌 落数目 该选择培养基 具有筛选作用 对实验 结果的 评价　 样品的稀 释操作是 否成功 得到同一稀释度下的２ 个或２个以上菌落数 目在３０～３００的平板 操作成功 各实验组 的结果是 否接近 如果差异很大，则可能的原因有两 种：一是土样不同；二是培养基被污 染或操作失误．究竟是哪个原因，可 设置对照实验来验证 例．下面是对一些实验结果的评价，其中错误 的是 （　　） Ａ．泡菜制作时发霉变味，可能是坛子密封不 严等原因造成了杂菌污染 Ｂ．分离、纯化土壤细菌时，发现培养基上的菌 落连成一片，可能是菌液浓度过高 Ｃ．测定土壤细菌数时，三个平板中的菌落数 分别为２１、２１２、２５６，则实验结果为１６３ Ｄ．在对分解尿素的细菌计数时，如果一个平 板中的菌落数为１５０个，则不能得出正确结论，因 为没有设置重复组 解析：泡菜坛子密封不严、取菜工具不清洁、 盐的比例不足，都会使泡菜因感染杂菌而变质．菌 落连成一片的原因有： ①菌液浓度过高； ②培养过程中被杂菌污染； ③利用接种针划线时，划下一个区域前没有 对接种针进行灭菌处理．在实验结果中，如果一个 计数结果与另两个计数结果相差太远，则说明在 操作过程中出现错误，不能只简单地计算平均值， 只有重复组的结果差距不大时才可信．计数实验 一般需要多次重复取其平均值，该同学没有设置 重复组，其结果不具有说服力． 答案：Ｃ ! !"#$% !"#&' " ! ()*+,-./01 """""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""" ! 23 456 ! 78 9:; !" !"# $% #$ %&' ( ) ( *+, -./ 012 &3 45 67&8#$9:;<=> 书 答案详解 　　　 　　２０２４～２０２５学年　高中生物选择性必修３　第３７～４０期　（２０２５年４月）　　　 　　 第３７期２版题参考答案 １．Ｄ　配制好的选择培养基应先进行高压蒸汽灭菌然后 再进行倒平板操作，即分装到培养皿，Ａ错误；配置好的培养基 需要灭菌，故配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，倒平板、 接种均需要在酒精灯火焰旁进行，Ｂ错误；一般用高压蒸汽灭 菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，防止杂菌污染，Ｃ错误； 可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养 瓶等进行灭菌，也可用干热灭菌法进行，Ｄ正确． ２．Ｄ　 获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，故两 种纯化方法都要防止杂菌污染，Ａ正确；为验证培养基是否被 污染，两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置， 在培养箱中进行培养，Ｂ正确；接种环和涂布器均需要在火焰 上灼烧，接种环可直接灼烧灭菌，涂布器要沾少量酒精在火焰 上引燃进行灼烧灭菌，Ｃ正确；当两个或多个细胞连在一起时， 平板上观察到的只是一个菌落，故用稀释涂布平板法进行微生 物的计数时，所获得的数据往往比实际值小，Ｄ错误． ３．Ｄ　培养基配方中一般都含有碳源、氮源、水、无机盐等 成分，琼脂是制作固体培养基所需要的凝固剂，Ａ错误；用纤维 素为唯一碳源的培养基可以选择分离出纤维素分解菌，用尿素 为唯一氮源的培养基可以选择分离出尿素分解菌，Ｂ错误；利 用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平 板上观察到的是一个菌落，所以统计结果比活菌实际数目低， Ｃ错误；平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但平板 划线法不能对微生物进行计数，Ｄ正确． ４．Ｃ　在含有尿素为唯一氮源的选择性培养基上，只有能 够分解尿素的微生物才能生长繁殖，故纯化培养阶段使用选择 培养基，应以尿素为唯一氮源，Ａ正确；用移液管或微量移液器 吸取菌液进行梯度稀释操作，Ｂ正确；稀释倍数越高，平板上出 现的菌落数越少，所以中间试管涂布的３个平板的菌落平均数 应大于１６０个，Ｃ错误；据图示可知，平板中平均有 １６０个菌 落，该过程中稀释的倍数为１０４，最后只取了０．１ｍＬ进行涂布 稀释，因此由图示菌落计数结果可知，１０克土样中的菌株数约 为１６０×１０４÷０．１×１０＝１．６×１０８个，Ｄ正确． ５．Ｄ　幽门螺杆菌（Ｈｐ）要能产生脲酶，１４Ｃ标记的尿素进 入胃后才能在其产生的脲酶的催化下能分解生成 ＮＨ３和 １４ＣＯ２，一段时间后通过测定呼出的气体是否含有 １４ＣＯ２才能诊 断是否感染Ｈｐ，Ａ正确；对Ｈｐ进行纯化需要得到 Ｈｐ单菌落， 所以需要用到固体培养基，Ｂ正确；培养基应以尿素作为唯一 氮源，可以允许能分解尿素的微生物（Ｈｐ）在此培养基中生长， 同时抑制或阻止其他不能利用尿素的微生物的生长，Ｃ正确； 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强． 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若 指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，Ｄ错误． ６．Ｂ　利用显微镜进行直接计数不分区活、死菌，统计的结 果一般是活菌数和死菌数的总和，稀释涂布平板法的统计结果 一般用菌落数，Ａ错误；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会 形成一个菌落，Ｂ正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在 ３０～３００之间的平板进行计数，Ｃ错误；采用平板划线法不能对 培养基中的菌落进行计数，Ｄ错误． ７．ＡＢＣ　由于温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝 固，所以倒平板操作应等培养基冷却至５０℃左右时，在酒精灯 火焰附近进行，防止杂菌污染，Ａ正确；为验证培养基是否被污 染或灭菌是否合格，两种方法均需同时将接种的平板和未接种 的平板倒置，在培养箱中进行培养，Ｂ正确；平板划线法和稀释 涂布平板法是微生物常见的接种方法，都能在固体培养基上得 到由单个细胞形成的单菌落，Ｃ正确；用平板划线法分离菌种， 划线五个区域，每次接种之前需要灼烧接种环灭菌，最后划线 完成也需要灼烧灭菌，共６次，Ｄ错误． ８．ＡＣ　甲培养皿的菌落均匀分布，接种方法应为稀释涂 布平板法，Ａ正确；甲、丙培养基菌落数目多，包括野生型酵母 菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿菌株是某种营 养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和 丙是加入了同种营养成分的培养基，Ｂ错误；由于基因突变具 有不定向性，接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷 型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，所以，甲培养皿中菌 落数有可能比接种的酵母菌数少，Ｃ正确；乙培养皿的培养基 是基本培养基，形成的菌落只可能是野生型菌落，Ｄ错误． ９．ＡＢＣ　一般选用１×１０４、１×１０５和１×１０６                                                         倍稀释的稀 —１— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 释液进行平板培养，能得到在３０～３００范围的有效数据，初次 做实验范围可放宽，Ａ正确；要证明选择培养基起到了选择作 用，则需要接种了的牛肉膏蛋白胨培养基做对照，如果两个培 养基上长的菌落不同，则说明选择培养基有选择作用，Ｂ正确； 证明选择培养基未被污染，则需要设置空白培养基做对照，如 果空白对照平板上不长菌，说明没有被污染，Ｃ正确；通过选择 培养基筛选出来的细菌也有可能是利用了空气中Ｎ２作氮源的 细菌，Ｄ错误． １０．（１）固体 （２）为细菌的生长提供蛋白质和维生素 （３）干热灭菌　灼烧灭菌 （４）ＡＤＢＥＣ （５）杀死接种环上残留的菌种　上一次划线的末端　使 细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少 （６）冷却凝固后的固体培养基 解析：（１）ＢＣＧ培养基制作时加入了琼脂，因此其从物理 性质上看，属于固体培养基． （２）酵母膏富含蛋白质和维生素等营养成分，能为细菌的 生长提供蛋白质和维生素． （３）常用的灭菌方法有湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）、干热灭 菌和灼烧灭菌等． （４）根据平板划线操作流程可知，示意图中正确的操作顺 序为ＡＤＢＥＣ． （５）每次划线前灼烧接种环是为了杀死接种环上残留的 菌种．在第二次以及后面的划线操作时，总是从上一次划线的 末端开始划线，原因是使细菌的数目随着划线次数的增加而逐 步减少，达到分离菌株的目的． （６）倒平板中的平板是冷却凝固后的固体培养基． １１．（１）探究不同高度空气中微生物的种类和数量　平板 灭菌不合格（受到杂菌污染） （２）碳源　氮源　避免周围环境中微生物的污染 （３）①使培养基凝固，防止培养基温度过高杀死接种在其 上的微生物 ②让微生物在适宜的温度下生长（繁殖） （４）防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上（污染培养基 和破坏菌落）　灭菌 解析：（１）题述实验中的自变量是打开培养皿盖的培养皿 距地面的高度，因此该实验的实验目的是探究不同高度空气中 微生物的种类和数量．若Ｅ组的培养基表面有菌落生长，说明 平板灭菌不彻底（受到杂菌污染）． （２）培养基中的牛肉膏提供的主要营养物质是碳源、磷酸 盐和维生素等，蛋白胨提供的主要营养物质是氮源和维生素 等，而微生物的生长需要的营养物质主要是碳源和氮源．“在酒 精灯火焰附近”进行相关操作是为了避免周围环境中微生物 的污染． （３）①“待培养基冷却至室温”的目的是使培养基凝固，防 止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物．②“将处理完毕 的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是让微生物在适宜的 温度下生长（繁殖）． （４）培养微生物时将培养皿倒置的目的是防止冷凝后形 成的水珠滴落在培养基上，污染培养基和破坏菌落．实验结束 后，对使用过的培养基应进行灭菌处理． １２．（１）防止琼脂糊底而导致烧杯破裂　高压蒸汽灭菌 （２）稀释涂布平板法　菌液的稀释度要足够高 （３）只有以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生 长　用完全培养基接种后在相同条件下同时培养 （４）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 一个菌落 （５）酚红指示剂 解析：（１）图中所示为固体培养基，在熔化琼脂时需要不 断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂，培养基的灭 菌方法是高压蒸汽灭菌法． （２）由于本实验需要进行计数，所以采用的接种方法是稀 释涂布平板法；培养一段时间要能在培养基表面形成单个的菌 落，需要菌液的稀释度要足够高，防止多个细菌连在一起． （３）由于只有以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基 上生长，所以该培养基能够起到筛选分解尿素的微生物的作 用，为判断其是否起到了筛选作用，需要用完全培养基接种后 在相同条件下同时培养，如果完全培养基上的菌落数目大于选 择培养基，则说明起到选择作用． （４）由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只 是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目低． （５）可以在筛选尿素分解菌的培养基中应加入酚红指示 剂，鉴定该种细菌能够分解尿素． １３．（１）脲酶　分解尿素的细菌是异养生物，不能利用二 氧化碳合成有机物 （２）琼脂　稀释涂布平板法　酚红　红 （３）为细菌生长提供无机盐离子；作为缓冲剂保持细胞生 长过程中ｐＨ的稳定；维持渗透压 （４）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 一个菌落 解析：（１）脲酶可催化尿素分解成 ＣＯ２和 ＮＨ３，能分解尿 素的细菌是异养生物，不能利用二氧化碳合成有机物，因此不 能以ＣＯ２作为碳源                                                                      ． —２— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 （２）培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，琼脂是固 体培养基的必要成分，故 Ｘ通常是琼脂；分析题图可知，图中 将细菌转为固体培养时用的接种方法是稀释涂布平板法．尿素 分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定，原因是其体内产生的脲酶 能够将尿素转化为氨是酚红指示剂呈红色． （３）ＫＨ２ＰＯ４和 Ｎａ２ＨＰＯ４可以为细菌生长提供无机盐离 子、作为缓冲剂保持细胞生长中ｐＨ的稳定、维持渗透压． （４）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 一个菌落，因此一般统计菌落数会比活菌实际数目低． 第３７期３版题参考答案 １．Ａ　发酵工程的产品可以是微生物细胞本身，也可以是 微生物的代谢产物，Ａ正确；发酵工程中发酵条件的变化既会 影响微生物的繁殖，也会影响微生物的代谢途径，如氧气条件， Ｂ错误；发酵工程多为单一菌种发酵，这样便于控制发酵条件， Ｃ错误；发酵工程和传统发酵技术的区别除了微生物的种类， 还有发酵条件的严格度不同等，Ｄ错误． ２．Ｄ　在果浆中添加果胶酶和纤维素酶可以酶解细胞壁， 增加细胞内容物的释放，酶的活性受到温度的影响，所以酶解 环节需要控制酶解温度，Ａ正确；微生物发酵过程中利用蔗糖 产生酒精，所以调整成分时按比例添加蔗糖可以提高果酒的酒 精含量，Ｂ正确；需要对基因工程获得的高产菌株进行扩大培 养，增加基因工程高产菌株的数量，Ｃ正确；在生产过程中，一 般利用酵母菌发酵产生酒精，主发酵前的阶段进行通气，使酵 母菌进行有氧呼吸，促进微生物大量繁殖，后发酵阶段需要密 闭，促进酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，酵母菌的适宜生长温 度是１８～３０℃，Ｄ错误． ３．Ａ　醋酸菌在糖源充足的情况下能将糖分解成醋酸，故 可采用葡萄糖作为发酵培养液的碳源，Ａ错误；工业发酵罐的 体积一般很大，需要接入的菌种总体积也多，所以接入发酵罐 前还需要对菌种进行扩大化培养，Ｂ正确；醋酸菌为需氧型生 物，深层通气液体发酵可保证氧气供应，使醋酸菌迅速生长繁 殖，产生代谢产物醋酸，从而提高醋的产量，Ｃ正确；发酵工程 所用的菌种，大多是单一菌种，一旦有杂菌污染可能导致产量 大大降低，所以发酵设备和培养液均需要经过严格灭菌，Ｄ正 确． ４．Ｄ　为了防止酒精形成乙醛和醋酸，啤酒生产的后发酵 阶段要在低温度和密闭环境下进行，Ａ错误；醋酸菌在 Ｏ２、糖 源都充足时，将糖分解成醋酸，缺少糖源、Ｏ？充足时，将乙醇 转变为乙醛，再转化为醋酸，Ｂ错误；黑曲霉是真核生物，Ｃ错 误；乳酸链球菌在无氧条件下产生的乳酸链球菌素可以作为天 然的防腐剂，Ｄ正确． ５．Ａ　选育高产、优质的菌种需要根据人们的需要进行设 计，而发酵产物需从菌中破碎分离不是选育菌种的条件，且发 酵产物未必需要菌体破碎后获得，Ａ正确；菌种对环境应没有 明显或潜在的伤害这是选育高产、优质菌种的前提条件，Ｂ错 误；选育出的高产、优质的菌种应该具备遗传特性和生产能力 稳定的特征，否则不能投入到生产中，Ｃ错误；选育出的高产、 优质的菌种应该具备能利用充足且廉价的培养基原料的特征， 这样才能降低生产成本，获得较高的经济效益，Ｄ错误． ６．Ａ　酸鱼制作使用了乳酸菌，利用乳酸菌无氧呼吸产乳 酸的反应，所以腌制酸鱼时需要水封坛沿，制造无氧环境，以利 于乳酸菌的发酵，Ａ正确；随着发酵过程的进行，环境逐渐变得 无氧、呈酸性，在这样的条件下大多数微生物不能生存，所以酸 鱼的制作过程不需要对原料和容器进行严格的灭菌处理，Ｂ错 误；乳酸菌无氧呼吸不产生二氧化碳，在发酵初期，由于发酵坛 内有少量氧气，酵母菌会进行有氧呼吸产生二氧化碳，Ｃ错误； 酸鱼是生鱼直接制作的，没有经过严格的灭菌操作，可能会有 误食寄生虫或其他致病微生物的风险，Ｄ错误． ７．ＢＣ　古代生产的氵美陂酱油属于传统发酵技术，不是采用 现代的发酵工程，Ａ错误；大豆蒸熟后冷却到常温再制曲，是为 了防止高温杀死米曲霉，Ｂ正确；发酵后期加入食盐水，造成高 渗环境，能使微生物渗透失水而死，起到抑制杂菌污染的作用， Ｃ正确；制作酱油的主要菌种有米曲霉、酵母菌和乳酸菌等，所 以抽油得到的生酱油不是米曲霉纯培养的产物，Ｄ错误． ８．ＡＢＤ　淀粉的糖化作用是在发酵过程中继续利用微生 物所分泌的淀粉酶将碳水化合物分解成葡萄糖、麦芽糖、糊精 等，便于微生物利用，Ａ正确；发酵产物柠檬酸呈酸性，随着发 酵进程的进行，柠檬酸含量增多，发酵液酸性增强，溶液 ｐＨ逐 渐减小，Ｂ正确；结合题干可知，发酵时采用精制糖如葡萄糖、 蔗糖为原料，能够获得较高产量，故实验室配制培养基筛选黑 曲霉不一定以葡萄糖为唯一碳源，Ｃ错误；如果产品是代谢物， 可以根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得 产品，故发酵结束后，采用提取、分离和纯化等措施获得柠檬 酸，Ｄ正确． ９．ＣＤ　谷氨酸是小分子物质，单纯的过滤、沉淀的方法不 能将谷氨酸从培养液中分离提取出来，Ａ错误；谷氨酸产生菌 在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形 成谷氨酰胺和Ｎ－乙酰谷氨酰胺，Ｂ错误；在菌种选育中，可用 细胞工程、基因工程等方法，构建工程细胞或工程菌，Ｃ正确； 谷氨酸发酵生产过程中搅拌的目的是使菌种与培养液充分接 触，Ｄ正确． １０．（１）蛋白胨　高压蒸汽 （２）菌液体积未知；开始划线区菌落连在一起，无法计数                                                                      　３０～３００ —３— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 （３）无氮源　细菌能生长 １１．（１）高压蒸汽　杀死所有微生物，包括芽孢和孢子 （２）增加纤维素分解菌的浓度　平板划线（或稀释涂布平 板） （３）纤维素　形成透明圈 １２．（１）酵母菌　为酵母菌繁殖提供适量氧气，防止发酵 旺盛时发酵液溢出　低温、密闭 （２）（酸性）重铬酸钾（溶液）　初始糖浓度过高，酵母菌失 水，导致酵母菌的生长繁殖受到抑制 （３）在液体培养基中将葡萄糖作为唯一碳源并不断提高 其浓度　稀释涂布平板　小 解析：（１）某兴趣小组按照如图所示发酵工艺用不同糖源 制得蓝莓酒，所以添加的菌种甲是酵母菌．蓝莓切片不应装满 发酵罐而需留有一定空间，目的是为酵母菌繁殖提供适量氧 气，防止发酵旺盛时发酵液溢出；后发酵阶段需在低温、密闭环 境下进行，这样才能形成澄清、成熟的蓝莓酒． （２）可选择（酸性）重铬酸钾（溶液）检测酒精，由橙色变成 灰绿色．若初始糖浓度过高，所制得的蓝莓酒酒精浓度反而偏 低，其原因可能是初始糖浓度过高，酵母菌失水，导致酵母菌的 生长繁殖受到抑制． （３）具有耐高糖和耐酸特性的菌种甲是酒精发酵的理想 菌种．为提高菌种甲对葡萄糖的耐受能力，可以在液体培养基 中将葡萄糖作为唯一碳源并不断提高其浓度，将允许耐高糖的 酵母菌生长，同时抑制或阻止不耐高糖的酵母菌的生长． 对活菌计数的方法是稀释涂布平板法，当样品的稀释度足 够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中 的一个活菌．该方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是当 两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落． １３．（１）酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下将葡萄 糖分解为酒精　实验思路：取两支试管分别标号 Ａ、Ｂ，向 Ａ试 管中加入２ｍＬ发酵液，向Ｂ试管中加入２ｍＬ酒精，向Ａ、Ｂ两 试管各滴加０．５ｍＬ溶有０．１ｇ重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性 重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化．实验结果： Ａ、Ｂ两试管都变为灰绿色；结论：发酵过程中产生了酒精 （２）混合菌种　沉淀、过滤、灭菌 （３）２．２５×１０９ （４）酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无 菌空气 解析：（１）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了 酵母菌的无氧呼吸．酵母菌属于真核生物，其代谢类型是兼性 厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖 分解为酒精． 橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生 化学反应，变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了 酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色 变化．对照组中应加入酒精作为阳性对照．实验过程中应遵循 等量原则、单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别 标号Ａ、Ｂ，Ａ试管中加入２ｍＬ发酵液，作为实验组，Ｂ试管中 加入２ｍＬ酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸 钾，振荡后观察试管中颜色变化，若 Ａ、Ｂ两试管都变为灰绿 色，即可验证发酵过程中产生了酒精． （２）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作，因此其发酵 菌种为天然的混合菌种．现代工业发酵酿制果酒不同于自制果 酒，需要经过沉淀、过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒． （３）２５×１６型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数／１ ｍＬ＝１个中方格中酵母菌数 ×２５×１００００×稀释倍数，因此该 实验中每毫升发酵液中酵母菌数量＝９×２５×１００００×１０００＝ ２．２５×１０９． （４）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋 利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入 无菌空气． 第３８期３版题参考答案 １．Ｄ　酒精发酵产生的酒精能抑制杂菌的生长，有利于提 高果醋的产率，Ａ正确；缺少糖源时，醋酸能将乙醇转化为乙 醛，再将乙醛变为乙酸（醋酸），Ｂ正确；果酒有利于溶出水果中 的风味物质并保留在果醋中，增加果醋风味，Ｃ正确；酿制果酒 和果醋时的最适发酵温度不同，前者为１８～３０℃，后者为３０～ ３５℃，Ｄ错误． ２．Ｃ　酒糟不仅提供发酵所需的微生物还提供了原料，Ａ 错误；传统发酵是以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主， Ｂ错误；酒糟和江水进行搅拌的目的是使发酵更加充分，Ｃ正 确；酒和醋的原料和工艺流程不完全相同，发酵条件也不同，Ｄ 错误． ３．Ａ　酿酒过程中利用酵母菌的无氧呼吸会产生二氧化 碳气体，为防止发酵液溢出，不能装满容器后进行密封发酵，会 留有一段空间（一方面利于早期酵母菌有氧呼吸繁殖增加数 量，一方面防止发酵过程中发酵液溢出），Ａ错误；温度过高，会 将酵母菌等微生物杀死（避免高温杀死酵母菌），故蒸煮好的 糯米需冷却后再加入酒曲，以防影响酒曲中微生物的活性，Ｂ 正确；发酵时，淀粉糖化后为酵母菌的繁殖提供了大量的营养 物质，Ｃ正确；发酵过程中，酵母菌无氧发酵将糖分转化为酒精 和二氧化碳，产生了米酒的特有风味，Ｄ正确． ４．Ｄ　果醋发酵利用的菌种是醋酸菌，在利用醋酸菌进行 钙果果醋发酵过程中，温度应控制在３０～３５℃，Ａ错误；                                                                      酵母 —４— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，但需要根据发酵进程适 时拧松瓶盖放气，Ｂ错误；制作钙果果酒、果醋时，对钙果进行 灭菌会杀死附着在果皮上的野生酵母菌，Ｃ错误；钙果果酒的 颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的，Ｄ正确． ５．Ｄ　醋酸菌是好氧菌，酿制成功的粮食酒如果暴露在空 气中，醋酸菌进行有氧呼吸将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化 为醋酸，Ａ正确；酿酒过程中酵母菌通过呼吸作用产生的 ＣＯ２ 溶于发酵液中，会使发酵液ｐＨ下降，在制作果醋的过程中，醋 酸菌会产生醋酸，发酵液 ｐＨ下降，Ｂ正确；泡菜制作利用的是 乳酸菌发酵，乳酸菌是原核生物，该过程发生在乳酸菌细胞的 细胞质中，泡菜坛内长出一层白膜的原因是因为产膜酵母的繁 殖，Ｃ正确；腐乳的营养丰富，原因是毛霉将蛋白质分解成小分 子肽和氨基酸，在制作过程中加入酒精含量过高，腐乳成熟时 间延长，Ｄ错误． ６．Ａ　存放发酵时需要用膜覆盖密封，说明生产发酵辣椒 酱的菌种不是醋酸菌，而是厌氧的乳酸菌，Ａ错误；若去蒂不完 全，会影响到最终辣椒酱的细腻程度，Ｂ正确；用水泵将下层盐 水抽出从表面淋下有利于腌制均匀，Ｃ正确；发酵辣椒酱的传 统生产工艺主要是利用了天然乳酸菌发酵产生乳酸，再辅以低 盐来保存产品，存在生产周期长，产品品质不稳定，亚硝酸盐等 有害物质的含量超标等严重问题，无法满足工业化大规模生产 和食品安全的需要，Ｄ正确． ７．Ｂ　在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色， 因此可用酸性重铬酸钾来检验果汁发酵是否产生酒精，Ａ错 误；醋酸是一种弱酸，无毒，有酸味，可以品尝或用 ｐＨ试纸鉴 定，Ｂ正确；泡菜制作过程的亚硝酸盐含量可用比色法测定，Ｃ 错误；亚硝酸盐无味，且对人体有害，不能用品尝法测定其含 量，Ｄ错误． ８．Ｄ　灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有 的微生物，包括芽孢和孢子；消毒只能杀死物体表面或内部一 部分微生物，不能杀死芽孢和孢子，Ａ错误；对操作的空间、操 作者的衣着和手进行清洁消毒，Ｂ错误；灼烧灭菌的对象可以 是金属器具和玻璃器具，Ｃ错误；消毒和灭菌的原理基本相同， 都是使微生物的核酸或蛋白质变性，但灭菌更彻底，Ｄ正确． ９．Ａ　微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接种和分离 酵母菌、培养酵母菌，Ａ正确；将配制好的培养基转移到锥形瓶 中，加上棉塞，包上牛皮纸并用牛皮筋勒紧后再放入高压蒸汽 灭菌锅进行灭菌处理，Ｂ错误；接种环在火焰上灼烧灭菌冷却 后再蘸取菌液在培养基表面通过连续划线而分离纯化菌种，Ｃ 错误；平板划线法和稀释涂布平板法都能分离、纯化菌种，但稀 释涂布平板法还可以统计菌种数目，且统计值偏小，Ｄ错误． １０．Ｂ　实验室中常利用平板划线法或稀释涂布平板法获 得纯培养物，最终都可以得到单菌落，Ａ正确；融化后的培养基 需冷却至一定温度后，才可与菌悬液混合，防止高温杀死微生 物，Ｂ错误；稀释涂布平板法先进行梯度稀释，再将不同稀释度 的菌液涂布到固体培养基的表面，Ｃ正确；浇注平板法也可用 于获得纯培养物，即将待分离的样品用无菌水进行充分稀释 后，取合适稀释度的少量菌悬液倒入已溶化的固体培养基中充 分混匀，再倒入无菌培养皿中培养，由此判断浇注平板法获得 的纯培养物可存在于培养基内部．平板划线法在固体培养基表 面连续划线，最终在培养基表面获得单菌落，Ｄ正确． １１．Ａ　从用途分析该培养基属于鉴别培养基，可以鉴别 大肠杆菌，Ａ错误；葡萄糖中含有碳，培养基中提供碳源的物质 主要是葡萄糖，蛋白胨中富含蛋白质，提供氮源的物质是蛋白 胨，Ｂ正确；微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、水和无机 盐等，有的还需要特殊营养物质如维生素，蛋白胨还可以提供 维生素等，Ｃ正确；由于该培养基用于培养细菌，所以 ｐＨ应调 节至中性或弱碱性，Ｄ正确． １２．Ｃ　取样用的铲子和试管使用前后都需要灭菌，防止污 染，Ａ正确；对硝化细菌的计数可采用稀释涂布平板法，Ｂ正 确；分离硝化细菌的培养基为选择培养基，应以亚硝酸盐或氨 为唯一氮源，Ｃ错误；为保证结果准确，要选择菌落数为３０～ ３００的平板进行计数，避免因误差过大而影响计数，Ｄ正确． １３．Ａ　焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活， Ａ错误；糖化过程中淀粉酶将淀粉分解成为糖浆，Ｂ正确；蒸煮 可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染，Ｃ正确；消毒可以杀 死啤酒中的大多数微生物，从而延长其保存期，Ｄ正确． １４．Ｂ　幽门螺杆菌能分解对热不稳定的尿素，故选择培养 基应以尿素为唯一氮源，因为灭菌时温度较高，对热不稳定的 尿素可能分解，故制备时应先灭菌后加入无菌尿素，Ａ正确；设 置一个未接种的培养基做为对照组，能证明培养基没有杂菌污 染，而不能证明选择培养基是否起到作用，Ｂ错误；只有能合成 脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源，幽门螺旋杆菌 可通过合成脲酶来分解利用尿素，Ｃ正确；尿素分解成氨，氨会 使培养基的碱性增强，即 ｐＨ升高，可利用酚红指示剂进行鉴 定，Ｄ正确． １５．Ｃ　无氮培养基只能筛选出自生固氮微生物，因为自生 固氮微生物能够利用空气中的氮气作为氮源，但在无氮培养基 上生长的微生物并不一定都是固氮微生物，Ａ错误；在泡菜制 作过程中，盐水需要浸没全部菜料，主要目的是创造一个无氧 的环境，有利于乳酸菌的发酵，Ｂ错误；血细胞计数板适用于测 定酵母菌等个体较大细胞，而不适用于细菌等个体较小的细胞 的测定，Ｃ正确；家庭制果酒利用的是葡萄表面附着的野生酵 母菌，所以不能灭菌，Ｄ错误                                                                      ． —５— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 １６．ＡＢＣ　两种培养基均能为微生物提供水、碳源、氮源和 无机盐，Ａ正确；甲培养基为液体培养基，其作用是选择和扩大 培养降解精喹禾灵的菌种，Ｂ正确；乙培养基含琼脂，为固体培 养基，其作用是分离和纯化培养降解精喹禾灵的菌种，Ｃ正确； 稀释涂布平板法或显微镜直接计数法可用于测定土壤中能降 解精喹禾灵的细菌细胞数，但平板划线法不能用于微生物计 数，Ｄ错误． １７．ＡＣＤ　利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键 是有恰当的稀释度，才能保证培养基表面生长的一个单菌落， 来源于样品稀释液中的一个活菌，Ａ正确；若要判断选择培养 基是否起到了选择作用，需设置接种在牛肉膏蛋白胨培养基上 作为对照，Ｂ错误；该实验每隔２４ｈ统计一次菌落数目，并以菌 落数目稳定时的记录作为结果，Ｃ正确；分解尿素的细菌能合 成脲酶，将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，酸碱缓冲 剂只能使培养基的ｐＨ相对稳定，所以用以尿素为唯一氮源且 添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后会使酚红指示剂 变红，Ｄ正确． １８．ＡＣ　倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口 的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上 培养皿的皿盖，不能打开皿盖，Ａ错误；用接种无菌水的培养基 作为对照组，与接种微生物的培养基进行对照培养检测培养基 是否受污染，Ｂ正确；用稀释涂布平板计数法时，由于距离相近 的两个细胞可以形成一个菌落，所以统计结果往往少于原始菌 液中微生物数量，Ｃ错误；使用后的培养基丢弃前一定要进行 灭菌处理，防止污染环境，Ｄ正确； １９．ＢＣ　样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目， 土壤中各类微生物数量不同，所以为获得不同类型的微生物， 要按不同的稀释倍数进行分离，Ａ正确、Ｂ错误；在同一稀释度 下只要得到两个或两个以上的菌落数目在３０～３００的平板，就 说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，Ｃ错误；验证 选择培养基是否具有选择作用，需设立牛肉膏蛋白胨固体培养 基作为对照，若后者的菌落数明显大于前者，说明前者具有筛 选作用，Ｄ正确． ２０．ＡＢ　柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，可以 通过黑曲霉发酵制得，Ａ正确；可以将乙型肝炎病毒的抗原基 因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗，Ｂ正确；利用 发酵工程生产的白僵菌可以用来防治８０多种农林害虫，Ｃ错 误；一种放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水 稻枯纹病，Ｄ错误． ２１．（１）新鲜蔬菜中亚硝酸盐含量低　腌制的时间、温度 和食盐的用量等 （２）外界溶液浓度高，细胞渗透失水　抑制杂菌生长，也 可增加泡菜的醇香感 （３）稀释涂布平板法或平板划线法　具有透明圈　将适 量的新鲜蔬菜均分为若干组，每组依次加入等量的盐水、调味 料和不同浓度的蔗糖，其他按上述流程操作，测定不同蔗糖浓 度下亚硝酸盐的含量并比较其峰值 解析：（１）腌制蔬菜含有亚硝酸盐，在体内会转化成亚硝 胺，具有致癌作用．泡菜制作中，需注意控制食盐用量、温度以 及腌制的时间，否则容易造成细菌大量繁殖而导致亚硝酸盐增 加，影响泡菜品质，所以泡菜制作过程中需要定期测定亚硝酸 盐的含量． （２）由于泡菜制作过程中要加入一定量的食盐、白酒以及 香辛料等，因此蔬菜失水，造成泡菜坛中溶液增加．在制作泡菜 过程中泡菜坛内常常长一层白膜，主要是产膜酵母繁殖引起 的，加入少量白酒，可以抑制杂菌生长，减少白膜的产生，同时 也可增加泡菜的醇香感． （３）分离纯化微生物通常用稀释涂布平板法或平板划线 法，分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌 代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离，分离纯化 时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为目的菌．为了探究蔗 糖含量对亚硝酸盐含量峰值的影响，自变量为蔗糖浓度，并且 实验要遵循对照原则，所以实验的主要思路为：配制具有一系 列浓度梯度的蔗糖溶液，分别添加到等量的泡菜中，定期测定 亚硝酸盐的含量，观察并记录亚硝酸盐含量的峰值． ２２．（１）农药起到选择作用，该土壤中富含农药降解菌 （２）中性或弱碱性　 稀释涂布平板法　 防止形成的冷凝 水滴落在培养基上造成污染（或防止培养基中的水分过快蒸 发） （３）筛选出具有高耐药性的降解菌株 解析：（１）寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求， 到相应的环境中去寻找，长期喷洒农药的耕地土壤中，农药起 到选择作用，该土壤中富含农药降解菌，因此可以从该土壤中 取样筛选农药降解菌． （２）一般多数细菌生活在中性或弱碱性，农药降解菌属于 细菌，因此培养基的 ｐＨ需要调至中性或弱碱性．根据步骤可 知，接种前要对菌液进行稀释，因此接种的方法为稀释涂布平 板法．接种后的平板要倒置培养，目的是防止皿盖上的形成的 冷凝水滴落在培养基上，造成污染． （３）有机磷农药能对高效降解有机磷农药的菌株起到选 择作用，步骤③中，依次梯度增加有机磷农药浓度至１０００ｍｇ／ Ｌ，目的是筛选出具有高耐药性的降解菌株． ２３．（１）防止杂菌污染 （２）将温度升高为３０～３５℃、                                                                      通入无菌空气 —６— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 （３）让酵母菌在有氧条件下大量繁殖　 在缺氧、呈酸性的 发酵液中，绝大多数微生物因无法适应这一环境而受抑制 （４）氧气、糖源充足　 氧气充足、糖源不足 （５）重铬酸钾 解析：（１）过程①中，在冲洗之前去除蓝莓枝梗，杂菌可能 从伤口处侵入，造成污染． （２）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分 解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变 为醋酸．由过程④制酒转变为过程⑤制醋，需要采取的措施是 将温度升高为３０～３５℃，同时通入无菌空气． （３）酿制蓝莓酒时，一般要先通气，目的是为了让酵母菌 在有氧条件下进行大量繁殖．在该过程中常不需要对蓝莓进行 严格的消毒处理，是因为在缺氧、呈酸性的发酵液中，绝大多数 微生物因无法适应这一环境而受抑制． （４）醋酸菌的异化方式为需氧型，过程③在氧气、糖源充 足条件下可直接发酵为蓝莓醋；过程⑤在氧气充足、糖源不足 条件时将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸． （５）鉴定酒精产生的方法是在酸性条件下用重铬酸钾检 测样液，如果颜色由橙色变为灰绿色，则说明产生了酒精． ２４．（１）葡萄糖 （２）相对于消毒，灭菌能阻止因杂菌繁殖给实验带来的影 响　 ２８℃ （３）排出二氧化碳，防止发酵液溢出 （４）节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成 本低、原料来源广 解析：（１）上述实验过程中利用了菌种Ｔ能产生纤维素分 解酶将秸秆中的纤维素分解为葡萄糖，进而在酵母菌的作用下 产生酒精． （２）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制 备培养基，培养基中还需要适量补充氮源等营养成分，配制完 成后需要灭菌而不是消毒，原因在于消毒是指使用较为温和的 物理、化学和生物等方法仅杀此物体表面或内部一部分微生 物，灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物， 包括芽孢和孢子．相对于消毒，灭菌能消除因杂菌繁殖给实验 带来的影响．温度是影响酵母菌生长的重要因素，需要设置的 最适温度约为２８℃． （３）在酵母菌发酵过程中，酵母菌的无氧呼吸产生二氧化 碳，为了将其排出，防治发酵液溢出，还需适时拧松瓶盖． （４）与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生 产方式的优点是节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、 生产成本低、原料来源广． ２５．（１）有机磷农药　 蛋白质、核酸 （２）平板划线法　 稀释涂布平板法 （３）用物理或化学因素来处理生物，使生物发生基因突变 （４）以蔗糖为碳源降解率最高；蔗糖浓度为１．６０％时降解 率最高 解析：（１）分析题意可知，本操作的目的是获取农药降解 菌，故应在培养基中加入有机磷农药，以达到富集目的菌种的 目的；磷在体内可以参与合成蛋白质、核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）等生物 大分子． （２）富集培养并不能获得农药降解菌的纯种，可以通过平 板划线法和稀释涂布平板法的方法进行纯化． （３）诱变育种是指用物理或化学因素来处理生物，使生物 发生基因突变，可以提高突变率，创造人类需要的生物新品种． （４）由题图可知，与其它组别相比，蔗糖组的降解率最高， 即以蔗糖为碳源时有机磷农药的降解率最高；且蔗糖浓度为 １．６０％时有机磷农药的降解率最高． 第３９期３版题参考答案 １．Ｄ　诱导原生质体融合的障碍是细胞壁，所以通过纤维 素酶和果胶酶可以去除植物的细胞壁，Ａ正确；用化学的方法 可以诱导原生质体融合，例如 ＰＥＧ诱导，Ｂ正确；细胞工程通 过细胞器、细胞或组织水平上的操作，有目的地获得特定的细 胞、组织、器官、个体或其产品，所以非对称融合属于细胞工程， Ｃ正确；非对称融合过程中部分染色体丢失（断裂），所以会降 低植物细胞的全能性，Ｄ错误． ２．Ａ　进行植物组织培养前，石斛叶片无需酶解去壁，Ａ错 误；诱导愈伤组织形成时，取野生石斛的叶、茎等组织作为外植 体，需先进行清洗和消毒处理，Ｂ正确；利用组织培养技术获得 试管苗属于无性繁殖，能保持优良品种的遗传特性，Ｃ正确；组 织培养经过脱分化形成愈伤组织和再分化两个关键步骤，Ｄ正 确． ３．Ｄ　茎尖分生区细胞内的病毒少，甚至无病毒，可作为 外植体，Ａ正确；由于病毒可以通过胞间连丝扩散，茎尖分生区 不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达，Ｂ正确；离体 的茎尖细胞是通过有丝分裂产生的，含有本物种全套的遗传信 息，具有全能性，Ｃ正确；脱分化和再分化使用的培养基中激素 的种类是相同的，浓度和比例是不同的，Ｄ错误． ４．Ｃ　建立无菌培养物时需分别用酒精和次氯酸钠溶液 对叶片、茎尖、花药等进行消毒处理，Ａ正确；外植体需置于脱 分化培养基中，诱导形成愈伤组织，愈伤组织细胞为脱分化细 胞，全能性较高，Ｂ正确；生根培养基中细胞分裂素与生长素的 含量之比应小于１，生长素有利于生根，同时生根培养需给予 适当时间和强度的光照，Ｃ错误；若培育的是耐盐植株，则需将 获得的试管苗移栽于含高盐土壤（培养液）中进行筛选，                                                                      筛选 —７— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 出所需的幼苗后再推广栽培，Ｄ正确． ５．Ｄ　根据题意可知，工业化生产过程中有利用紫草植株 部分组织诱导形成紫草愈伤组织的过程，该过程为细胞的脱分 化，Ａ正确；题中显示工业化生产的流程为“取紫草植株部分组 织诱导形成紫草愈伤组织，再转入紫草素形成培养基，然后再 将细胞破碎后提取出紫草素”，显然该过程中不必将愈伤组织 培养出根、芽等器官，Ｂ正确；紫草的愈伤组织细胞含有细胞 壁，因此其在低渗溶液中不会涨破，Ｃ正确；题中显示，工业生 产过程中需要将紫草细胞破碎后提取出紫草素，显然紫草素在 细胞内合成后不会被分泌到细胞外，Ｄ错误． ６．Ｄ　紫花苜蓿培育过程中不需要使用蛋白酶，需要使用 生长素和细胞分裂素等植物激素，需要纤维素酶除去细胞壁， Ａ错误；诱导植物细胞原生质融合的方法有物理诱导和化学诱 导两种，没有生物诱导，Ｂ错误；融合的细胞不一定为杂交细 胞，也可能为同种细胞，需要进一步筛选，Ｃ错误；基因的表达 可能存在相互干扰，杂交细胞不一定具备双亲的优良性状，Ｄ 正确． ７．ＡＣＤ　植物组织培养过程中，愈伤组织主要进行细胞生 长和分裂，不能体现植物细胞的全能性，Ａ错误；愈伤组织培养 过程要在无菌条件下进行，以避免微生物的污染，Ｂ正确；由表 格数据可知，两组接种干重相似，但光照条件下收获的愈伤组 织干重和紫杉醇含量均低于黑暗条件下的，Ｃ错误；植物组织 培养过程中，有机物可以为植物细胞提供必需的营养物质和能 量，此外还可以调节渗透压，Ｄ错误． ８．ＣＤ　次生代谢产物是植物生长发育所非必需的物质，Ａ 错误；对高产人参皂苷的细胞进行增殖，利用的是细胞增殖原 理，没有体现植物细胞的全能性，Ｂ错误；由于培养细胞处于不 断增殖的状态，因此容易受到培养条件和诱变因素的影响而发 生基因突变，Ｃ正确；植物组织培养的培养基中蔗糖除供能之 外，还具有调节培养基内的渗透压等作用，故培养人参细胞的 培养基中需要添加糖类等有机物，Ｄ正确． ９．ＡＤ　植物组织培养一般先诱导生芽后诱导生根，先出 芽是组织吸水后细胞分裂的结果，后长根是继续生长的需要， Ａ正确；细胞产物的工厂化生产未涉及到植物细胞的全能性，Ｂ 错误；利用茎尖分生组织培育脱毒苗是因为茎尖分生组织细胞 中不含病毒，而不是因为其含有抗病毒基因，所以此方法不一 定能使植株具备抗病毒的能力，Ｃ错误；植物体细胞杂交技术 是指用人工方法把分离的不同品种或不同种植物的原生质体， 诱导成融合细胞，然后经离体培养、诱导分化，再生出完整植株 的整个技术体系，这里体现了植物细胞全能性，细胞融合体现 了细胞膜的流动性，Ｄ正确． １０．（１）形态、结构和功能　基因的选择性表达　高效快 速地实现种苗的大量繁殖 （２）具有分生能力、高度液泡化的薄壁细胞　诱导愈伤组 织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞 分裂素的比例不同 （３）将本地桉树的细胞与红豆杉的细胞融合，经植物组织 培养获得植株　杂种植株通常含有同源染色体，减数分裂过程 中联会正常，能够产生正常的生殖细胞 １１．（１）Ｄ （２）ａ　基因的选择性表达 （３）固体　生长素 （４）低温诱导或喷洒秋水仙素 解析：（１）分化程度较低的部位的细胞分裂能力强、分化 程度低，全能性容易表达，所以茎尖分生区细胞最适合进行植 物组织培养，花粉、叶肉细胞、表皮细胞分化程度高，全能性低， 不适合进行植物组织培养，Ｄ正确． （２）过程ａ表示脱分化，能证明高度分化细胞可被诱导成 为未分化的状态．经过程ｂ产生的胚状体中出现形态结构不同 的细胞，是细胞再分化的结果，细胞分化的根本原因是基因的 选择性表达． （３）植物组织培养通常使用ＭＳ培养基，属于固体培养基； 过程ｃ在形成幼苗时，生长素的占比高时，更利于诱导生根；细 胞分裂素的占比高时，更利于诱导生芽． （４）若要使用该植株的花粉进行培育，形成的个体是单倍 体，高度不育，还需要用低温诱导或喷洒秋水仙素的方法对过 程ｃ得到的幼苗进行处理，才能得到可育植株． １２．（１）人工诱导染色体加倍　 ３６、３４ （２）ＡＡＢＣ　 基因重组　 甘蓝型油菜 （３）将埃塞俄比亚芥与具有优良性状的其他品种的油菜 杂交再进行回交，选育具有优良性状的品种（或将埃塞俄比亚 芥进行诱变处理，选育具有优良性状的品种；或通过转基因技 术调控代谢途径） 解析：（１）甘蓝与芸薹直接杂交，得到的 Ｆ１（ＡＣ）不含同源 染色体，需要经过人工诱导染色体加倍处理才能获得甘蓝型油 菜（ＡＡＣＣ）．经过杂交、纯化培育的芥菜型油菜的染色体组成 为ＡＡＢＢ，埃塞俄比亚芥的染色体组成为ＢＢＣＣ，Ａ、Ｂ、Ｃ分别表 示不同植物的一个染色体组，三者的染色体数目分别为１０、８、 ９．因此芥菜型油菜和埃塞俄比亚芥的染色体数目分别为３６、 ３４． （２）将甘蓝型油菜（ＡＡＣＣ）与芥菜型油菜（ＡＡＢＢ）杂交获 得杂种Ｆ１，Ｆ１的染色体组成是（ＡＡＢＣ）．将Ｆ１连续与甘蓝型油 菜回交，最终选育获得黄籽、油酸含量达６８．５２％的甘蓝型油 菜新品种．该育种过程遵循的遗传学原理主要是基因重组，                                                                      回 —８— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 交的主要目的是保留甘蓝型油菜的优良遗传性状． （３）埃塞俄比亚芥具有耐热、抗倒伏、抗白锈病等优良的 农艺性状，也存在产量低、低油酸、高硫苷等不良的农艺性状． 为改良埃塞俄比亚芥的品质，可以利用诱变育种，即将埃塞俄 比亚芥进行诱变处理，选育具有优良性状的品种；基因工程育 种能定向改变生物的性状，所以可以通过转基因技术调控代谢 途径；或者将埃塞俄比亚芥与具有优良性状的其他品种的油菜 杂交再进行回交，选育具有优良性状的品种． １３．（１）植物体细胞杂交　纤维素酶和果胶酶 （２）愈伤组织　再分化　杂菌和培养物竞争获得营养的 能力更强；杂菌生长过程中可能会产生对培养物有害的物质　 ８０ （３）基因的选择性表达 （４）不能　不同物种之间存在生殖隔离 第４０期３版题参考答案 １．Ｄ　该技术属于动物细胞培养，原理是细胞增殖，而植 物组织培养的原理是植物细胞的全能性，两者不同，Ａ错误；此 技术即动物细胞培养需要适宜的温度（３６．５±０．５℃）和 ｐＨ （７．２～７．４），Ｂ错误；由于技术条件等的制约，目前不能将动物 体细胞培养为完整个体，且牙髓干细胞属于分化程度较高的细 胞，不能分为任何一种类型的细胞，Ｃ错误；对于牙髓干细胞的 培养过程需要经历原代培养（分瓶前的培养过程），用胰蛋白 酶处理后再用离心法收集悬液中的细胞进行传代培养，Ｄ正 确． ２．Ｂ　动物细胞培养需要在培养液中添加一些天然成分， 比如动物血清，Ａ正确；人的成纤维细胞培养出可增殖、具有功 能的肝样细胞（ｈｉｈｅｐ细胞），均由同一个受精卵发育而来，所 含遗传物质相同，Ｂ错误；细胞核具有全能性是指分化为完整 个体或其他各种细胞的潜能，成纤维细胞培养成 ｈｉｈｅｐ细胞并 未体现细胞的全能性，Ｃ正确；人的成纤维细胞培养出可增殖、 具有功能的肝样细胞（ｈｉｈｅｐ细胞）发生了细胞的分化，实质是 基因的选择性表达，Ｄ正确． ３．Ｃ　人工诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法， 诱导动物细胞融合采用的方法有电融合法、ＰＥＧ融合法和灭活 病毒诱导法，二者不完全相同，Ａ正确；让Ｂ细胞和骨髓瘤细胞 融合制备杂交瘤细胞为制备单克隆抗体开辟了新途径，Ｂ正 确；科学家利用植物体细胞杂交技术培育出番茄—马铃薯杂种 植株，但这种植株并没有在地上结番茄、地下长马铃薯，Ｃ错 误；动物细胞培养是动物细胞工程的基本技术，因而也是动物 细胞融合的基础，动物细胞培养时需用胰蛋白酶、胶原蛋白酶 处理，以得到分散的细胞，Ｄ正确． ４．Ｃ　制备该药物前必须用 ＰＤ－Ｌ１蛋白兔疫小鼠，得到 相应的Ｂ淋巴细胞，Ａ正确；制备单克隆抗体，需从小鼠的脾脏 中提取Ｂ淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，Ｂ正确；用选择性培养 基筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗ＰＤ－Ｌ１抗体，还需要 进行抗体检测，Ｃ错误；为保证抗体的纯度，必须经过多次克隆 化培养和抗体检测，Ｄ正确． ５．Ｄ　上述过程涉及到细胞核移植技术、早期胚胎培养技 术及细胞培养技术，Ａ正确；为了保证细胞培养时营养物质和 生长因子的供给，培养基中需添加一定量的动物血清等天然成 分，可以补充合成培养基中缺乏的物质，Ｂ正确．不同细胞的主 要ＨＬＡ不同，会引起机体发生免疫排斥反应，而且 ＨＬＡ差别 越大，引起的免疫排斥反应越强，Ｃ正确；人体患镰状细胞贫血 的根本原因是基因突变，因此无法利用患病个体细胞培养的细 胞、组织或器官进行移植来治疗镰状细胞贫血，Ｄ错误． ６．Ｄ　通过核移植得到的细胞称为重组细胞，由重组细胞 发育成的胚胎称为重构胚，Ａ正确；由于动物胚胎细胞分化程 度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全 能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核 移植，Ｂ正确；核移植得到的克隆动物，没有经过减数分裂和受 精作用，属于无性生殖，Ｃ正确；动物体细胞表现全能性的难易 程度与其分化程度有关，如分化程度低，表现全能性相对容易， Ｄ错误． ７．ＣＤ　动物细胞培养时，有些细胞需要贴壁生长，而有些 细胞可以悬浮生长，如肿瘤细胞，Ａ错误；微载体为细胞提供附 着位点，使细胞能够在微载体上贴壁生长，Ｂ错误；培养动物细 胞时应保证无菌、无毒的环境及适宜的温度、ｐＨ等条件，Ｃ正 确；在培养动物细胞时应提供的气体环境为９５％的空气和５％ 的ＣＯ２，Ｄ正确． ８．ＡＢＣ　单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原 纯度越高，产生的多抗纯度越高，注入小鼠体内的抗原纯度影 响多抗的纯度，Ａ错误；单抗制备过程中通常将经过免疫的 Ｂ 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，Ｂ错误；非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 ｐ７２上有多种抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一 种抗体，所以向小鼠体内注入 ｐ７２后，可以刺激小鼠产生多种 抗ｐ７２的单抗，Ｃ错误；ｐ７２部分结构改变只改变了部分抗原决 定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存 在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效， Ｄ正确． ９．ＢＣ　卵（母）细胞中含有促进全能性表达的物质，因此 选择去核的卵（母）细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动 物的成功率，Ａ正确；高度分化的细胞已经失去分裂能力，因此 选择高度分化的动物体细胞进行培养不利于获得大量细胞，Ｂ 错误；愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，                                                                      因 —９— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期 此选择植物的愈伤组织进行诱变处理，再进行人工选择，可获 得优质的突变体，Ｃ错误；茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因 此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，Ｄ正 确． １０．（１）原代培养　 ＯＢ （２）合成　 补充合成培养基中缺失的成分 （３）７．２～７．４　 胃蛋白酶发挥作用的ｐＨ约为１．５～２．２， 在ｐＨ７．２～７．４环境下，酶会变性失活，不能发挥作用 解析：（１）人们通常将动物组织处理后的初次培养称为原 代培养，在图中是ＯＢ段． （２）在动物细胞培养时，将细胞所需的营养物质按其种类 和所需数量严格配制而成的培养基称为合成培养基．通常还需 要在培养基中加入适量血清等一些天然成分，血清作为天然培 养基的作用是补充合成培养基中缺失的成分，有利于细胞的正 常生长与增殖． （３）进行动物细胞培养时，选用液体培养基的ｐＨ为７．２～ ７．４，若将组织块剪碎，加入胰蛋白酶，可使其分散成许多单个 细胞，若改用胃蛋白酶则不行，因为胃蛋白酶发挥作用的 ｐＨ 为１．５～２．２，在ｐＨ为７．２～７．４的环境下，酶会变性失活，不 能发挥作用． １１．（１）Ｂ淋巴　 经过ＨＩＶ免疫的Ｂ淋巴细胞 （２）灭活的病毒　 流动性 （３）乙、丙　 无限增殖且产生特异性抗体 解析：（１）单克隆抗体是指由一个Ｂ淋巴细胞增殖形成的 细胞群所产生的单一型抗体分子；据图分析可知，题图中甲为 艾滋病自愈者免疫细胞与骨髓瘤细胞融合的过程，该杂交瘤细 胞最终产生了抗体，说明艾滋病自愈者免疫细胞为经过 ＨＩＶ 免疫的Ｂ淋巴细胞． （２）常用的诱导动物细胞融合的诱导因素有聚乙二醇 （ＰＥＧ）、灭活的病毒、电刺激等；细胞发生融合利用了细胞膜的 结构特点：具有一定的流动性． （３）题图中甲过程为艾滋病自愈细胞与骨髓瘤细胞的融 合过程，①为选择性培养基的筛选作用；乙为经第一次筛选后 的杂交瘤细胞，②为克隆化培养和抗体检测；丙为第二次筛选 后的所需杂交瘤细胞，既能无限增殖又可产生所需特异性抗体 （抗ＨＩＶ的抗体）；故甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是乙、丙， ②过程的目的是筛选具有无限增殖且产生特异性抗体（特点） 的杂交瘤细胞． １２．（１）动物细胞培养、动物细胞融合 （２）抗原　体液 （３）灭活的病毒　选择性　既能大量繁殖，又能产生专一 性抗体 （４）特异性强、灵敏度高，并可大量制备 １３．（１）显微操作　 胰（胶原）蛋白酶　 动物细胞培养 （２）含有使细胞核中遗传物质全能性表现出来的物质 （３）卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性 状产生影响 （４）已经分化的动物体细胞核具有全能性 （５）否　否 解析：（１）过程①表示去除细胞核，去核时常采用显微操 作去核法．获得大量的供体细胞需要先用胰（胶原）蛋白酶处 理后获得单个细胞后再进行去核操作，②代表的过程是胚胎移 植． （２）构建重组细胞时，选用卵母细胞细胞质的原因有体积 大易操作、可提供丰富的营养之外，主要原因是其中含有使细 胞核中遗传物质全能性表现出来的物质． （３）克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的 角度来说，是因为卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动 物的性状产生影响，即克隆动物的性状绝大多数与供核动物相 同． （４）克隆羊“多莉”和其他克隆动物的成功获得说明了已 经分化的动物体细胞核具有全能性． （５）三亲婴儿的获得也采用了核移植的技术，其过程是将 患线粒体疾病的母亲的卵母细胞的核与一位健康妇女的细胞 质组合在一起获得重组的卵母细胞，在进行该操作时，不可以 将母亲的卵母细胞直接注入捐献者的卵母细胞中，否则母亲的 线粒体基因可能会遗传给子代，导致患病，利用该方法产生健 康婴儿的生殖方式是有性生殖，因为该过程中有雌雄生殖细胞 的融合．若患线粒体疾病的个体是父亲，则不需要进行核移植， 因为父方提供的精子中几乎不含有细胞质                                                          ． —０１— 高中生物选择性必修３　第３７～４０期