第二次月考滚动检测卷[范围：第3、4章]-【学而思·高中同步双测卷】2025-2026学年高二生物选择性必修3 生物技术与工程测试卷（人教版2019）

第二次月考滚动检测卷 1.B PCR技术可在体外大量扩增目的基因,A正确;改变 后的NR2B基因作为目的基因,需要与载体结合后才可 导入小鼠受精卵内,B错误;将目的基因导入动物细胞常 用显微注射技术,C正确;通过PCR等技术从分子水平检 测目的基因是否插入染色体DNA,D正确。 2.C Ⅰ为质粒,步骤①为基因表达载体的构建,常需用到 限制酶和DNA连接酶,A错误;图中步骤②是将重组质 粒导入农杆菌细胞,B错误;图中步骤③是将目的基因导 入植物细胞,C正确;基因的表达具有独立性,剔除抗虫 棉体 内 的 四 环 素 抗 性 基 因 不 影 响 抗 虫 基 因 的 表 达,D 错误。 3.A 根据“八氢番茄红素合酶和胡萝卜素脱饱和酶参与β -胡萝卜素的合成”可知,重组质粒中的目的基因含有 psy基因和crtl基因,A正确;构建重组质粒需要限制酶、 DNA连接酶,不需要核酸酶,B错误;可通过农杆菌转化 法将目的基因导入水稻受体细胞,C错误;PCR可扩增特 定基因,但要检测目的基因是否表达应该用抗原-抗体 杂交法,D错误。 4.B 限制酶不能破坏目的基因,也不能破坏质粒上的标记 基因,且用不同的限制酶进行切割,可防止质粒和目的基 因自身的连接以及目的基因与载体的反向连接,所以应 选用限制酶BamHⅠ、PstⅠ和DNA连接酶构建基因表 达载体,A不符合题意;载体和插入目的基因的载体上都 存在抗氨苄青霉素基因,因此用含氨苄青霉素的培养基 筛选出的不一定为导入目的基因的细菌,B符合题意;可 用PCR技术大量扩增目的基因,C不符合题意;用Ca2+ 处理大肠杆菌,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分 子的生理状态,易于转化,D不符合题意。 5.D 转基因动物是指细胞中被转入了外源基因的动物,并 非出现新基因,故A错误;“提高基因的表达水平”是指增 强白蛋白基因的表达,白蛋白基因数目没有增多,故B错 误;“转基因动物”一般用到的受体细胞是受精卵,发育个 体的几乎所有细胞中都有相同的外源基因,故C错误;转 基因牛的白蛋白基因也是选择性表达的,在肌肉细胞中 不能表达,故D正确。 6.C BamHⅠ与AluⅠ切割的均是磷酸二酯键,A错误; BamHⅠ识别并切割 ↓ GGATCC CCTAGG ↑ 序列,Sau3AⅠ识别并切 割 ↓ GATC CTAG ↑ 序列,故BamHⅠ能识别的碱基序列,Sau3A Ⅰ一定能识别,但是Sau3AⅠ能识别的序列,BamHⅠ不 一定能识别,B错误;②⑤的黏性末端相同,②④的黏性末 端也相同,因此DNA连接酶能连接②⑤,也能连接②④, C正确;E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端,T4DNA 连接酶既可以连接黏性末端也可以连接平末端,而题图 中①③均属于平末端,故只能用T4DNA连接酶连接,D 错误。 7.C 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生 物功能的关系作为基础,通过改造或合成基因,来改造现 有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生 活的需求。 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功 能的关系作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋 白质,对Cry蛋白的改造是通过改造Cry蛋白的相关基 因来实现的,A正确;蛋白质的结构决定功能,Cry蛋白的 毒性提高了3~7倍的原因可能是改变了该蛋白质的空 间结构,B正确;改造Cry蛋白应从Cry蛋白的结构和功 能出发设计其特有的结构,并改造或合成相关基因,C错 误;蛋白质工程的基础是基因工程,需要改造或合成相关 的基因,故使用蛋白质工程改造Cry蛋白过程中需要使 用限制酶和DNA连接酶,D正确。故选C。 8.C 由于不同限制酶切割形成的黏性末端可能相同,因此 ①②不一定用同一种限制性内切核酸酶进行切割,A错 误;根据⑥⑦筛选结果可知,构建基因表达载体后,四环 素抗性基因被破坏,而氨苄青霉素基因没有被破坏,因此 Ⅰ表示抗四环素基因,Ⅱ表示抗氨苄青霉素基因,B错误; 3、5菌落中的细菌能抗氨苄青霉素,但不能抗四环素,筛 选出的含有人胰岛素原基因的细菌,C正确;细菌是原核 生物,不含内质网和高尔基体,不能对胰岛素进行加工, 因此细菌不能合成具有生物活性的胰岛素,D错误。 9.D 由题图可知,当仅用一种限制酶切割载体时,仅产生 一种 长 度 的 DNA 片 段,因 此 该 载 体 最 有 可 能 为 环 状 DNA分子,A正确;当仅用一种限制酶切割载体时,两种 限制酶切割产生的DNA片段等长,而两种限制酶同时切 割时则产生两种长度的DNA片段,所以两种限制酶在载 体上各有一个酶切位点,B正确;两种限制酶同时切割时 产生600bp和200bp两种长度的DNA片段,所以两种 限制酶的酶切位点至少相距200bp,C正确;限制酶切割 DNA分子,破坏的是作用位点上两脱氧核糖核苷酸之间 的磷酸二酯键,D错误。 10.C A、B是从技术的角度阐述问题,C、D是从伦理道德 角度阐述问题,A、C是反对生殖性克隆人的观点,B、D 是支持生殖性克隆人的观点,故本题选C。 11.A 科学家将该菌的大型环状DNA分子破坏,该菌仍 能产生肉毒素,可见控制肉毒素合成的基因不位于炭疽 杆菌的拟核中,A错误;抗生素、毒素、色素不是微生物 生长和繁殖所必需的物质,属于次级代谢产物,B正确; 基因控制生物的性状.将蜡状杆菌改造成像炭疽杆菌一 样的致病菌需要通过转基因技术,C正确;生物武器包 括致病菌、病毒、生化毒剂,以及经过基因重组的致病菌 等,如将炭疽杆菌用于军事用途或恐怖活动,则属于生 物武器,D正确。 12.B 该种玉米的果实(种子)也可能含有蛋白酶抑制剂, 食用后使人因无法消化食物而患病,不安全,A正确;生 物体摄取的蛋白酶抑制剂基因会被生物体消化为小分 子核苷酸被吸收,不会在体内表达,是安全的,B错误;由 于不同物种的酶在结构上有差异,该抑制剂对人体消化 酶无影响,因此对人体是安全的,C正确;人类通常食用 煮熟的玉米,该抑制剂会被高温破坏,因此不会影响人 体,是安全的,D正确。 13.ABD 限制性内切核酸酶有特异性,①②过程要切割的 DNA序列不同,故应使用不同的限制性内切核酸酶; DNA连接酶 的 作 用 是 连 接 被 切 开 的 磷 酸 二 酯 键,使 chlL基因、红霉素抗性基因与质粒结合;基因表达载体 由目的基因、启动子、终止子和标记基因等组成,终止密 码子是mRNA上密码子的一种,表示一次翻译的结束; 变异株中chlL基因被重组基因替换,重组基因中有红霉 素抗性 基 因,故 可 用 含 红 霉 素 的 培 养 基 筛 选 出 该 变 异株。 14.C Ti质粒是环状的DNA分子,存在于农杆菌的拟核 DNA之外,A正确;A、B两个基因导入受体细胞的染色 体上,进行表达,继而诱发细胞异常生长和分裂,形成植 物肿瘤,B正确;农杆菌将自身Ti质粒的T-DNA整合 到植物染色体上,诱发了植物肿瘤的形成,故清除肿瘤 组织中的农杆菌后,肿瘤仍可继续生长,C错误;只有T -DNA保留LB、RB序列,T-DNA才能在农杆菌中从 右边界到左边界被剪切、复制,然后进入植物细胞并整 合到染色体上,D正确。 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 —91— 15.CD 蛋白质工程可以定向改变蛋白质分子的结构,A正 确;改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的,B正确; 改造后的中华鲟具有新的性状,但其和现有中华鲟仍是 同一物种,C错误;蛋白质工程改造的是基因,可以遗传 给子代,因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白 质,D错误。 16.B 据表分析可知,乳铁蛋白肽基因探针只与转基因奶 牛乳腺细胞中提取的 mRNA杂交出现了杂交带,说明 乳铁蛋白肽基因只在转基因奶牛的乳腺细胞中表达,A 错误;据表格信息可知,人干扰素基因探针与转基因奶 牛三种细胞中提取的 mRNA杂交都出现了杂交带,说 明人干扰素基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达, B正确;表中两种基因探针所含的脱氧核苷酸序列不同, 因此才会出现不同的杂交结果,C错误;乳铁蛋白肽基 因和人干扰素基因都是特定的DNA片段,D错误。 17.解析:(1)杀虫基因通过①~④,最终在宿主细胞内维持 稳定和表达的过程叫做转化;其中①过程表示基因表达 载体的构建,这是转基因抗虫水稻的核心步骤,需要的 工具酶是限制性内切核酸酶(限制酶)、DNA 连接酶。 (2)分析图解可知,“华恢1号”的培育过程应用的主要 生物技术有基因工程技术(转基因技术)、植物组织培养 技术。(3)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因 为Ti质粒上具有T-DNA,它能把目的基因整合到受体 细胞(植株细胞)中染色体的DNA上。(4)①启动子是 一段特 殊 结 构 的 DNA 片 段,位 于 基 因 的 首 端,它 是 RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因 转录出 mRNA,最终获得所需要的蛋白质。②图中看 出,tms基因能够编码吲哚乙酸,tmr基因能够编码细胞 分裂素,这两种激素能够促进植物的生长。因此人工改 造时用限制酶Ⅰ处理,其目的之一是除去或破坏质粒上 的tmr、tms,保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细 胞的无限分裂和生长;另外只有一个插入位点,也有利 于目的基因(或外源DNA)准确插入。 答案:(1)转化 ① 限制性内切核酸酶(限制酶) DNA连接酶 (2)基因工程技术(转基因技术) 植物组织培养技术 (3)染色体的DNA (4)①启动子 为RNA聚合酶提供识别和结合的部位, 驱动转录 ②tms tmr 四环素 18.解析:(1)由题图可知,新透明质酸酶基因与透明质酸酶 基因等长,核苷酸序列不同,故新透明质酸酶基因的获 得是重叠延伸PCR技术在基因的定点突变方面的应用。 透 明 质 酸 酶 基 因 上 的 一 段 核 苷 酸 序 列 为 “—ATCTCGAGCGGG—”,则对该段核苷酸序列进 行 剪切的XhoⅠ识别的核苷酸序列(6个核苷酸)应能折叠 对称配对,根据此特点,推断 XhoⅠ识别的核苷酸序列 (6个核苷酸)为—CTCGAG—或—GAGCTC—。 (2)基因表达载体中标记基因的作用是供重组DNA的 鉴定和选择;所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端 碱基序列没有专一性要求。早期利用大肠杆菌作为受 体细胞,后来发现毛霉或酵母菌更具优势,最可能的原 因是与大肠杆菌相比,毛霉或酵母菌属于真核细胞,有 内质网和高尔基体,可以对合成的肽链进行加工。 (3)透明质酸酶在链球菌侵染过程中的作用是分解宿主 细胞间质的主要成分,其意义可能是破坏宿主的防御系 统,有利于致病菌入侵(或为细菌提供能源物质)。 答案:(1)基 因 的 定 点 突 变 —CTCGAG—(或— GAGCTC—) (2)供重组DNA的鉴定和选择 没有 毛霉或酵母菌 是真核细胞,有内质网和高尔基体,可对合成的肽链进 行加工 (3)分解宿主细胞间质的主要成分(或分解宿主细胞间 质的透明质酸) 破坏宿主的防御系统,有利于致病菌 入侵(或为细菌提供能源物质) 19.解析:(1)根据图示可知,向导RNA能够与目标DNA的 部分碱基序列配对,进而特异性识别细胞核DNA分子 中的有关序列,向导RNA可指引Cas9结合到特定的切 割位点,Cas9在特定切割位点进行切割,使相应部位的 核苷酸之间的磷酸二酯断裂,最终DNA双链断裂,故向 导RNA的作用是能与特定的DNA分子进行碱基互补 配对,引导Cas9蛋白定点切割DNA;Cas9蛋白的作用 是识别并定点切割DNA,使DNA双链断裂。 (2)基因表达载体上除了含有目的基因和标记基因,还 必须有启动子、终止子。 (3)目的基因在与运载体结合前需要用PCR技术进行大 量扩增,该过程需要 TaqDNA聚合酶,与普通DNA聚 合酶相比,其特点是耐高温。 (4)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将目的基因导入 受体细胞,可使目的基因精确定点敲入,实验操作更加 精准、高效。 答案:(1)能与特定的DNA分子进行碱基互补配对,引 导Cas9蛋白定点切割DNA 识别并定点切割DNA,使 DNA双链断裂 (2)启动子 终止子 (3)TaqDNA聚合酶 耐高温 (4)定点编辑基因,实验操作更加精准、高效 20.解析:(1)目的基因的获取方法有从基因文库中获取、利 用PCR技术扩增和人工合成。利用径柳匙叶草的DNA 直接获得目的基因的方法为从基因文库中获取。 (2)径柳匙叶草根尖分生区细胞中 TaNHX2基因不能 表达,故 不 能 在 径 柳 匙 叶 草 根 尖 分 生 区 细 胞 中 获 得 TaNHX2基因的 mRNA。 (3)由图2分析可知,Sau3AⅠ与BamHⅠ切后露出的黏 性末端相同,故若用BamHⅠ切割图1所示的DNA片 段获得目的基因,则需选用Sau3AⅠ切割图3所示质 粒,以便构建基因表达载体,该方案由于切出后的目的 基因和质粒两端的黏性末端相同,故容易出现目的基因 和质粒的自我环化、目的基因在质粒上的连接方向不确 定的缺陷。为了防止目的基因和质粒的自我环化和反 接,可 选 用 EcoRⅠ和 BamHⅠ同 时 切 割 图1所 示 的 DNA片段。 (4)用EcoRⅠ和BamHⅠ切出的黏性末端再用DNA连 接酶连接在一起形成的序列不一定还是BamHⅠ识别 的序列,故所得重组质粒不一定能被BamHⅠ切割。 (5)图3中质粒上的抗生素抗性基因属于标记基因,其 作用是筛选出含有目的基因的受体细胞。 (6)将转基因棉花种植在盐碱地,观察其生长状况属于 个体水平的检测。 答案:(1)从基因文库中获取 (2)基因的选择性表达 (径柳匙叶草根尖分生区细胞中 TaNHX2基因不能表 达) (3)Sau3AⅠ 易出现目的基因和质粒的自我环 化、目的基因在质粒上的连接方向不确定 EcoRⅠ和 BamHⅠ (4)不一定能 (5)筛选出含有目的基因的受 体细胞 (6)个体 21.解析:(1)图中①过程表示受精作用,涉及的精子需进行 获能处理才具有受精能力。防止多精入卵的两道屏障 分别为透明带反应、卵细胞膜反应。 (2)图中②过程是将外源基因导入受精卵中,所用的方 法是显 微 注 射 法。如 果 外 源 基 因 插 入 牛 受 精 卵 中 的 DNA上后,导致受精卵内生命活动必需的某些基因不 能表达,则会引起受精卵死亡。 (3)图中的b表示囊胚腔,c代表囊胚的内细胞团。 (4)图中⑤过程表示胚胎移植,此时的胚胎一般发育至 囊胚或桑葚胚。 答案:(1)获能 透明带反应、卵细胞膜反应 (2)显微 注射法 外源基因插入牛受精卵中的DNA上后导致受 精卵内生命活动必需的某些基因不能表达(合理即可) (3)囊胚腔、内细胞团 (4)胚胎移植 囊胚或桑葚胚 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 —02— 第二次月考滚动检测卷 [范围：第3、4章] (时间：75分钟满分：100分) 一、选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。每小题给出的四个选项 中，只有一个选项是最符合题目要求的。 1.中美科学家通过改变一种名为NR2B的基因研制出了转基因超级小鼠 Hobbie一J,Hobbie-一J比普通老鼠更加聪明，大脑运转更加迅速，它能够 轻松完成迷宫任务。下列关于Hobbie一J产生过程的描述，错误的是 ( ) A.NR2B基因可通过PCR技术进行扩增 B.改变后的NR2B基因作为目的基因，可直接注入小鼠受精卵内 史 C.通常采用显微注射技术将重组质粒导入小鼠受精卵内 D.可采用PCR等技术检测改变后的NR2B基因是否插入小鼠染色 体DNA 2.如图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取 抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的 过程示意图。以下说法正确的是 ( 开的基因 心 ®稀化细胞一杭虫棉 鉍 四环素抗性基因 A.图中I是质粒，步骤①常需用到限制酶和DNA聚合酶 B.图中Ⅱ是含目的基因的重组Ti质粒，步骤②是将重组质粒导入棉花 细胞 C.图中Ⅲ是农杆菌，通过步骤③将目的基因导入植物细胞 T D.剔除培育成功的抗虫棉体内的四环素抗性基因会影响抗虫基因的 艺 表达 3.缺乏维生素A就容易导致出现夜盲症，营养不良，甚至有一些能够威胁 到生命。而B胡萝卜素可以在人体内转化成维生素A。科学家尝试通过 转基因技术生产富含胡萝卜素的大米。八氢番茄红素合酶（其基因用 psy表示)和胡萝卜素脱饱和酶（其基因用crtl表示）参与B胡萝卜素的合 成。根据以上信息分析正确的是 () A.重组质粒中的目的基因含有psy基因和crtl基因 B.构建重组质粒需要限制酶、DNA连接酶和核酸酶 崽 C.可通过显微注射法将目的基因导人水稻受体细胞 D.PCR既可扩增特定基因也可检测目的基因表达 4.运用转基因技术，将奶牛细胞中编码凝乳酶的基因转移到大肠杆菌细胞 中，达到大规模生产凝乳酶的目的。如图表示用作载体的质粒和目的基 因所在的DNA片段。下列操作与实验目的不符的是 ( ) -EcoR I EcoR I EcoR I Pst I 抗四环素基因一 质粒 INgIm -BamH I -Pst 1 BmHI凝乳酶BamH I 基因 禁溪園 ·55· A.用限制酶BamH I、PstI和DNA连接酶构建基因表达载体 B.用含氨苄青霉素的培养基筛选出的一定为导入目的基因的细菌 C.可用PCR技术大量扩增目的基因 D.用Ca2+处理大肠杆菌使其易于转化 上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。 他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳 汁中的药用蛋白含量提高了30多倍。下列有关叙述正确的是() A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物 B.“提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白 蛋白基因 C.只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛 乳腺细胞中是纯合的 D,转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不 能合成人白蛋白 ,如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切 割位点)。如图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是 ( ) 限制酶AluI BamHI Sam I Sau3A I -AC GATCA- -Td ②T 识别序 GATCC- AGCT GGATCC CCCGGG GATC 列切割 ⑤一ACTAG TCGA CCTAGG GGGCCC CTAG 位点 个 A.BamH I切割的是磷酸二酯键，AluI切割的是氢键 B.能被Sau3AI识别的序列，一定也能被BamHI识别 C.DNA连接酶能连接②⑤，也能连接②④ D.E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接①③ 苏云金芽孢杆菌中的杀虫晶体蛋白Cry具有杀虫毒性，但Cry蛋白存在 杀虫谱窄、毒力有限等问题，制约了其在农业生产中的进一步应用。科学 家通过定点突变，将Cry蛋白第168位的组氨酸替换为精氨酸后，Cry蛋 白对烟草天蛾的毒性提高了3倍；将Cry蛋白第282位、第283位的丙氨 酸和亮氨酸分别替换成甘氨酸和丝氨酸后，Cy蛋白对烟草天蛾的毒性 提高了7倍。下列有关叙述错误的是 A.对Cry蛋白的改造是通过改造Cry蛋白的相关基因来实现的 B.Cy蛋白的毒性提高了3~7倍的原因可能是改变了该蛋白质的空间结构 C.改造Cry蛋白应从Cry蛋白基因的脱氧核苷酸序列出发设计其特有的 结构 D.使用蛋白质工程改造Cry蛋白过程中需要使用限制酶和DNA连接酶 如图表示构建重组质粒和筛选含人胰岛素原基因的细菌的过程，其中「 和Ⅱ表示抗性基因，①~⑦表示过程，其他数字表示菌落。下列有关叙述 正确的是 细菌 人胰岛索原基内 ⑤ 人体细胞 @黔②1小 ③ 大肠菌 质粒 4 一2 2 5 3 令四环素 含氨青莓素 (注：⑦过程表示用灭菌绒布从含氨苄青霉素培养基中蘸取菌种，再按到 含四环素培养基中培养) ·56· A.①②只能用同一种限制性内切核酸酶进行切割 B.I表示抗氨苄青霉素基因，Ⅱ表示抗四环素基因 C.3、5菌落是筛选出的含有人胰岛素原基因的细菌 D.该过程成功的标志是细菌合成具有生物活性的胰岛素 9.在基因工程操作中，科研人员利用识别两种不。 Murker R Ba 同序列的限制酶(R1和R2)处理基因载体，进行负极 琼脂糖凝胶电泳检测，结果如图所示。以下相 关叙述中，不正确的是 600 400 A.该载体最可能为环状DNA分子 200 ⊕ B.两种限制酶在载体上各有一个酶切位点 极 C.限制酶R1与R2的切点最短相距约200bp 缓冲液 D.限制酶作用位点会导致氢键和肽键断裂 10.下列属于从伦理角度反对生殖性克隆人的观点的是 A.克隆技术尚不成熟，生殖性克隆人很可能孕育出有严重生理缺陷的孩子 B.可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法弥补技术的不足 C.生殖性克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德 观念 D.不能迁就于人的道德观念，道德观念是可以改变的 11.炭疽杆菌造成感染者死亡率极高的主要原因之一是它能产生两种成分 为蛋白质的肉毒素。有科学家将该菌的大型环状DNA分子破坏，该菌 仍能产生肉毒素。据此判断下列对炭疽杆菌的叙述，不正确的是() A.控制肉毒素合成的基因位于炭疽杆菌的拟核中 B.炭疽杆菌合成的肉毒素属于代谢产物 C.将蜡状杆菌改造成像炭疽杆菌一样的致病菌需要通过转基因技术 D.如将炭疽杆菌用于军事用途或恐怖活动，则属于生物武器 12.某种转基因玉米能高效合成一种多肽类的蛋白酶抑制剂，积累于茎叶 中，让取食它的害虫的消化酶受抑制无法消化食物而死亡。下列就该玉 米对人类安全性的评论中，不符合生物学原理的是 () A.不安全。这种玉米的果实（种子）也可能含有蛋白酶抑制剂，食用后 使人因无法消化食物而患病 B.不安全。该玉米的蛋白酶抑制剂基因可通过食物链富集并在人体细 胞内表达，使人体无法消化食物而患病 C.安全。因为人与害虫消化酶的结构存在差异，玉米的蛋白酶抑制剂 对人体很可能无影响 D.安全。人类通常食用煮熟的玉米食品，玉米的蛋白酶抑制剂已被高 温破坏，不会影响人的消化 二、选择题：本题共4小题，每小题4分，共16分。每小题给出的四个选项 中，有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对的得4分，选对 但不全的得2分，有选错的得0分。 13.蓝细菌拟核DNA上有控制叶绿素合成的chlL基因。某科学家通过构 建该种生物缺失chlL基因的变异株，以研究chlL基因对叶绿素合成的 控制，技术路线如图所示。下列相关叙述正确的是 hlT基因红莓素抗性基囚 chlT基因 重组基因 】 同源荐换 chL基囚 质粒 重组质粒1重红质粒2 有chlL 无chlL 基因蓝细 基因蓝细芮 A.①②过程应使用不同的限制性内切核酸酶 B.①②过程都要使用DNA连接酶 C.终止密码子是基因表达载体的重要组成部分 D.若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株 ·57· 14.如图为农杆菌Ti质粒的T一DNA区段结构示意图。农杆菌附着植物 细胞后，T一DNA首先在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复制，然 后进入植物细胞并整合到染色体上，继而诱发细胞异常生长和分裂，形 成植物肿瘤。以下有关叙述不正确的是 ( ) 生长素基因(A)细胞分裂素基因(B) 左边界 右边界 (LB) (RB) T-DNA区段 A.Ti质粒存在于农杆菌的拟核DNA之外 B.植物肿瘤的形成与A、B两个基因的表达有关 C.清除植物肿瘤组织中的农杆菌后肿瘤不再生长 D.利用T一DNA进行转基因时需保留LB、RB序列 15.中华鲟是地球上最古老的脊椎动物，被称为“活化石”。研究者试图通过 蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环 境，以下说法错误的是 A.该工程可以定向改变蛋白质分子的结构 B.改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的 C.改造后的中华鲟和现有中华鲟是两个不同的物种 D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质 16.研究者将含有乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段分别制成 探针，与从转基因奶牛的乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞中提取的 mRNA分别进行杂交，结果如表所示。下列叙述正确的是 ( 探针 乳腺细胞 口腔上皮细胞 蹄部细胞 乳铁蛋白肽 出现杂交带 未现杂交带 未现杂交带 基因探针 人干扰素 出现杂交带 出现杂交带 出现杂交带 基因探针 A.乳铁蛋白肽基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达 B.人干扰素基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达 C.表中两种基因探针所含的脱氧核苷酸序列相同 D.乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因都是mRA片段 三、非选择题：本题共5分小题，共60分。 17.(14分)如图1表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”的主要 培育流程，请据图回答： 人工生成 杀虫基因 含杀虫基 含重组质 含杀虫基 “华恢1 (cry1A) ③ ④ →因的重组 ② 粒土壤农 因的水稻 号”抗虫水 农杆菌T 质粒 杆菌 细胞 稻 质粒 图1 限制晦Ⅱ 限制脚I 编码产物控制 侬制酶I 合成唉乙酸 编码产物控制合 限制酶Ⅱ、 T-DNA 成细胞分裂素 四环素抗性基因- (片段) 终止子 卡那莓素基囚 编码产物能激活 T-DNA转移 复制原点 @】 图2 ·58· (1)杀虫基因通过①~④，最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫 做 :其中 (填标号)是转基因抗虫水稻的核心步 骤，需要的工具酶是 (2)“华恢1号”的培育过程应用的主要生物技术有 (3)构建重组质粒时，常用Tⅱ质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T DNA,它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）中 上。 (4)图2是天然土壤农杆菌Tⅰ质粒结构示意图（部分基因及部分限制酶 作用位点)，组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造，据图分析： ①人工改造质粒时，要使抗虫基因表达，还应插入 ,其作用 是 ②人工改造质粒时，先用限制酶处理，可以去除质粒上的 基 因和 基因（填图2质粒上的基因名称），保证重组质粒进入 水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长；然后再用限制酶Ⅱ分别切割经 过改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒， 那么成功导入抗虫基因的水稻胚细胞将不能在含 (填抗生素 名称)的培养基上生长。 (12分)透明质酸酶是一种能够降低体内透明质 NcoI Xh和I 酸的活性，从而提高组织中液体渗透能力的酶。 如图是利用重叠延伸PCR技术获得新透明质酸 透明质酸酶基因 酶基因的过程，VcoI和XhoI为限制酶（箭头所指 重叠延种仲PCR技术 NcoI XhoI 为酶切位点)。请分析回答下列问题： (1)图中新透明质酸酶基因的获得是重叠延伸 新透叨质酸酶基因 PCR技术在 (填“基因敲除”“基因的定点突变”或“融 合基因的构建”)方面的应用。透明质酸酶基因上的一段核苷酸序列为 “一ATCTCGAGCGGG一”，则对该段核苷酸序列进行剪切的XhoI识 别的核苷酸序列(6个核苷酸)为 (2)构建透明质酸酶基因表达载体时，使用的载体往往有特殊的标记基 因，其作用是 ;所用的DNA连接酶对所连 接的DNA两端碱基序列 (填“有”或“没有”)专一性要求。早 期利用大肠杆菌作为受体细胞，后来发现毛霉或酵母菌更具优势，最可 能的原因是 (3)链球菌等致病菌在侵染人体时，可产生透明质酸酶，试分析透明质酸 酶在链球菌侵染过程中的作用： ,其意义可能是 ,(I2分)CRISPR/Cas9是目前应用最广泛的基因组编辑技术，能对DNA 分子中的基因进行编辑，引入人们想要的基因或破坏已有的基因。使用 该技术，需要向要进行编辑的细胞中加人以下主要组分：人工合成的向 导RNA和一种来自细菌的核酸酶Cas9蛋白。其原理是向导RNA与 DNA分子中希望被编辑的序列通过碱基互补配对结合后，Cas9蛋白再 结合上去对与向导RNA结合的DNA进行切割，使DNA双链断裂，过 程如下图所示。回答下列问题： 在链 Cas9雀白 月标DNA 、 工 识别序列 向导RNA 亚匹一日标DNA ·59 (1)据图推测，向导RNA的作用是 Cas9蛋白的作用是 (2)当DNA双链断裂后，可导人目的基因，目的基因的导入往往需要利 用基因工程方法构建基因表达载体，基因表达载体上除了含有目的基因 和标记基因，还必须有 (3)目的基因在与运载体结合前需要用PCR技术进行大量扩增，该过程 需要 酶，该酶与普通DNA聚合酶相比，其特点 是 (4)与传统的限制酶切割基因技术相比，CRISPR/Cas9基因编辑技术的 明显优点是 0 0.(12分)径柳匙叶草是一种泌盐植物，科研工作者将径柳匙叶草液泡膜 Na+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到棉花细胞内，获得 了转基因耐盐棉花新品种，图1是获取的含有目的基因的DNA片段， Sau3AI、EcoR I、BamH I为三种限制酶，图中箭头所指为三种酶的切 点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是土壤农杆 菌中用于携带目的基因的T1质粒结构示意图，请分析回答问题： BanHI Sau3A1 BamHI EeoI 。启动子 ScoRI SQu3AI -BamHLAC 复制 终 原点 止子 Sa3AI日的基因 EcoRI 5Sa4A上琴抗生素性基两 1 图2 3 (I)若图1所示DNA片段是利用径柳匙叶草的DNA直接获得的，则该 获取目的基因的方法为 (2)不能在径柳匙叶草根尖分生区细胞中获得TaNHX2基因的mRNA, 其原因是 (3)若用BamH I切割图1所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用 切割图3所示质粒，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷 是 故切割图1所示DNA片段的最佳方案是选 用 酶。 (4)用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒 (填 “能”“不能”或“不一定能”)被BamHI切割。 (5)图3中，质粒上的抗生素抗性基因的作用是 (6)为了检测技术成果，科研工作者将转基因棉花种植在盐碱地，观察其 生长状况，这属于 水平的检测。 1.(10分)下图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①~⑥ 表示操作过程。请回答以下问题： 外源基囚 ④ xB、C牛 公十一箱了四受精卵国 1② 丹牛子宫 良种激求卵细」 母平处理胞 D牛 转基因牛Aa h (1)图中①过程涉及的精子需进行 处理；防止多精入卵的两道 屏障为 (2)图中②过程所用的方法是 。 外源基因插入牛受精卵中的 DNA上后，有的受精卵能发育成转基因牛，而有的会死亡，请分析外源 基因插入牛受精卵中的DNA上后，导致受精卵死亡的最可能原因： (3)图中b、c分别代表囊胚的 (4)图中⑤过程表示 ,一般培养到 阶段才进行⑤过程。 ·60·