内容正文:
·7· ·8· ·9·
第1章 发酵工程
B卷 能力提升卷
(时间:75分钟 满分:100分)
一、选择题:本题共12小题,每小题2分,共24分。每小题给出的四个选项
中,只有一个选项是最符合题目要求的。
1.网传“酵素能够减肥、美颜”,某同学搜索“水果酵素”相关知识得到下面的
信息。
酵素概念:①酵素本义是酶的别称;②《酵素产品分类导则》中将酵素定义
为以动物、植物、菌类等为原料,经微生物发酵制得的含有特定生物活性
的产品。
水果酵素制作:①把水果小块和水按比例放入容器,密封,注意容器内留
下20%空间;②置于阴凉处6个月后,过滤得到的滤液即为“酵素”。
有关叙述不正确的是 ( )
A.在酵素制作时容器内留下20%空间有防止发酵液溢出造成杂菌污染
的作用
B.发酵装置在阴凉处放置时,需要间隔一定时间放气,间隔时间保持相等
C.由于水果酵素是低热量的饮品,因此酵素具有一定的减肥功能
D.“酵素”中多种有益微生物、氨基酸、维生素等,是发挥功能的有效成分
2.我国的酿酒技术历史悠久,古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要
术》记载:将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发,如鱼眼汤,净淘米八斗,炊
作饭,舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化,冒出鱼眼大小的气泡,把八斗
米淘净,蒸熟,摊开冷透。下列说法错误的是 ( )
A.“浸曲发”过程中酒曲中的微生物代谢加快
B.“鱼眼汤”现象是微生物呼吸作用产生的CO2释放形成的
C.“净淘米”是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施
D.“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物
死亡
3.蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。如图是以鲜蓝莓为
原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是
( )
A.去除蓝莓枝梗应在冲洗之后,目的是防止杂菌污染
B.过程③在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋
C.在过程④时,榨出的蓝莓汁需经过高压蒸汽灭菌后才能密闭发酵
D.过程⑤中酒精可作为醋酸菌的碳源和能源
4.关于微生物培养的叙述正确的是 ( )
A.将允许特定种类的微生物生长的培养基称作选择培养基
B.利用加入刚果红的含纤维素的培养基培养细菌,根据透明圈大小来筛
选出能分解纤维素的细菌
C.可以根据伊红美蓝培养基上红棕色菌落的数目,计算出水样中大肠杆
菌的数量
D.用加入酚红指示剂且以尿素为唯一氮源的培养基培养细菌,若培养基
变红,则该细菌能够分解尿素
5.日前微博传言手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多,为辨别真伪,两
电视台利用微生物培养技术进行实验,过程及结果如下。下列叙述错误
的是 ( )
A.培养细菌时,需将培养基的pH调至酸性
B.为排除实验操作过程中产生的污染,需要设置对照组
C.本实验采用稀释涂布平板法接种
D.两个报道结果不同,可能是因为取样环境不同
6.为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用,需
要设置的对照组的培养基分别是 ( )
A.未接种的选择培养基、未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
B.未接种的培养基、接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
C.接种了的选择培养基、接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D.接种了的培养基、未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
第5题 第7题
7.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂
平板上画3条平行线(3条线均与下图中的链霉素带接触),将平板置于37℃
条件下恒温培养3d,结果如图所示。根据实验结果分析,以下叙述错误的是
( )
A.链霉素能阻止结核杆菌的生长
B.链霉素对结核杆菌的抑制作用比对霍乱菌的更强
C.链霉素对结核杆菌的抑制作用比对伤寒杆菌的更强
D.链霉素可以用于治疗伤寒病人
8.一定浓度的福尔马林(甲醛的水溶液)通过使蛋白质变性而起防腐作用,
可从活性污泥中分离出高效分解甲醛的细菌,以处理废弃的福尔马林。
下图是筛选和纯化甲醛分解菌的实验过程示意图,其中LB培养基能使
菌种成倍扩增。下列相关叙述错误的是 ( )
A.筛选甲醛分解菌的培养基中要添加甲醛作为唯一的碳源
B.③→④接种的目的是通过形成单个菌落分离出甲醛分解菌
C.步骤⑤中,各个培养瓶中的甲醛溶液要有一定的浓度梯度
D.测定并选出甲醛浓度最低的培养瓶后,筛选对应的菌株
第8题 第9题
9.生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需
生长因子的种类,研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他
必需营养物质的培养基混合后倒成平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、
丙三种生长因子分别添加到不同区域,培养结果如图所示,下列说法正确的
是 ( )
A.倒成平板后直接培养可判断有无污染
B.倒成平板后需要进行灭菌处理
C.图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙
D.生长图形法不能用于某些菌种的筛选
10.大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌,在一定条件下会引起胃肠道等局部组织
感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准,常用滤膜
法测定,其操作流程如图。大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝(EMB培养基
的指示剂)反应,菌落呈黑色。下列对实验操作的分析,错误的是 ( )
A.测定前,滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理
B.过滤操作要在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌污染
C.将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上,完成大肠杆菌的接种操作
D.EMB培养基属于选择培养基,只有大肠杆菌能正常生长并形成黑色
菌落
11.果酒的工业化酿造可在图示的发酵罐中进行。下列
有关叙述错误的是 ( )
A.夏季生产果酒时,必要时需考虑对罐体进行降温
处理
B.乙醇为挥发性物质,故发酵过程中进气口和出气
口中空气流速不宜太大
C.发酵过程中需定时关注压力变化以保证安全生产
D.可以通过监测发酵液中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
12.漆酶属于木质降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。
如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是 ( )
A.生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品
B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C.在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步计数
D.斜面培养基中含有大量营养物质,可在常温下长期保存菌株
二、选择题:本题共4小题,每小题4分,共16分。每小题给出的四个选项
中,有的只有一个选项正确,有的有多个选项正确,全部选对的得4分,选对
但不全的得2分,有选错的得0分。
13.下列关于传统发酵技术应用的叙述,正确的是 ( )
A.利用乳酸菌制作酸奶过程中,先通气培养,后密封发酵
B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵
C.果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低,果酒制作过程中情况相反
D.为提高发酵产品的品质,可以加入人工培养的单一菌种
14.工业废水中含有的苯酚可对环境造成极大的破坏,现欲获得以苯酚为唯
一碳源的微生物。
研究人员先采用富集培养的方
法,即在含有大量苯酚的培养基
上培养,使目的菌旺盛生长,且在
数量上占优势,更利于分离出该
目的菌,再用选择培养的方法对
目的菌进行选择,最后从培养基
中挑取单菌落进行验证,其实验
过程如图所示。相关分析错误的
是 ( )
·10· ·11· ·12·
A.实验过程中需将污泥中样品接种到以苯酚为唯一碳源的培养液中
培养
B.配制⑤的培养基时,需添加琼脂,制成固体培养基
C.该实验中使用的锥形瓶、试管等器材需要利用巴氏消毒法进行消毒
D.实验⑥⑦的目的是验证是否分离出目的菌,因此其中一组作为对照
应不含苯酚
15.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图,有关叙述
正确的是 ( )
A.在配制步骤②、③的培养基时,应先调pH后高压蒸汽灭菌
B.步骤③采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
C.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力
D.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单
细胞菌落
16.筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后,若细
菌能分解淀粉,培养平板经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透明圈
(如图),实验结果见表。
菌种
菌落直径:
C(mm)
透明圈直径:
H(mm) H
/C
细菌Ⅰ 5.1 11.2 2.2
细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6
有关本实验的叙述,正确的是 ( )
A.培养基除淀粉外还含有氮源、无机盐等其他营养物质
B.筛选分解淀粉的细菌时,菌液应稀释后涂布
C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
三、非选择题:本题共5分小题,共60分。
17.(12分)利用发酵技术生产泡菜、果酒和果醋等产品,在我国有着悠久的
历史。请据此回答以下问题:
(1)在果酒发酵旺盛时,向发酵液中添加醋酸菌菌种,醋酸菌
(填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸。理由是
。
(2)为了优化发酵工艺,科研人员研究了酵母菌接种量对果酒中酒精度
的影响,结果如表:
酵母菌接种量/% 5 10 15 20 25
酒精度/% 5.05 5.41 5.37 5.21 5.13
由表可知,酵母菌接种量为 %时,果酒的酒精度最高;当酵母菌
接种量过高时,果酒的酒精度会随接种量增大而下降,分析其原因是
。
果汁发酵后是否有酒精产生,可以用 来检测。
(3)制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是 。
泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行 的过程。与
酵母菌相比,乳酸菌在细胞结构上的显著特点是
。
(4)如图是某生物活动小组记录的3种食盐浓度下泡菜中的亚硝酸盐含
量与发酵天数的关系图。
据图分析选择 浓度的食盐制作,且在 天以后食用较
为适宜。
18.(12分)牛奶消毒不过关容易携带细菌。根据国家标准(GB19645—
2010),每毫升合格的牛奶细菌总数不能超过50000个。某兴趣小组利
用恒温水浴锅对新鲜牛奶进行消毒然后检测消毒的效果,如下图所示。
(1)图中步骤①对牛奶的消毒的方法是 ,一般采用
对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌,蛋白胨的作用有
(写两点)。
(2)步骤②将牛奶进行梯度稀释的目的是使聚集在一起的微生物分散,
便于能在培养基表面形成 。步骤③的接种方法是
,这种方法可以用来统计样品中活菌的数目,其原理
是
。
(3)兴趣小组通过步骤①~③接种了3个平板并将其和1个未接种的平
板放入恒温培养箱,在适宜的温度条件下培养48h,然后统计出4个平
板上的菌落数分别是57、53、55和9。根据这样的实验结果
(填“能”或“不能”)判断该兴趣小组消毒后的牛奶细菌超标,原因是
。
(4)如果要检测牛奶中是否含有大肠杆菌,需要在培养基中加入
(填物质),观察是否出现黑色(或蓝黑色)的菌落。
19.(12分)随着对纤维素水解研究的不断深入,利用纤维素废料发酵生产
酒精等能源物质已取得成功。发酵工程中可利用纤维素分解菌将纤维
素分解,随后将其转化成新的能源物质———乙醇,进一步利用乙醇生产
醋酸。工业生产这两种成分的基本工艺流程如图所示。请回答:
(1)在发酵罐Ⅰ内,纤维素分解菌能够分泌纤维素酶将纤维素分解
为 。
(2)在过程②筛选纤维素分解菌时,常常采用平板划线法和
法进行纯化。两种方法的共同点是 。
用来筛选纤维素分解菌的培养基是 培养基(从功能上分类),
培养基中含有Na2HPO4和KH2PO4,其作用有
。(答出两点)
(3)微生物X应为 ,发酵一定时间后,观察到发酵罐内液体
不再有 ,说明发酵基本完毕。
(4)微生物Y应是 。发酵罐Ⅱ内和发酵罐Ⅲ内除了严格控
制温度、pH外,发酵罐Ⅲ内还需要通入 。
(5)若发酵罐Ⅱ中的酒全部流经发酵罐Ⅲ制成醋,发酵罐Ⅲ中CO2 的产
生量是 。
A.发酵罐Ⅱ的两倍 B.与发酵罐Ⅱ的相等
C.发酵罐Ⅱ的一半 D.几乎为零
20.(12分)无菌操作是微生物接种技术的关键。传统发酵技术和微生物分
离、纯化、应用过程均要无菌操作。回答下列相关问题:
(1)消毒和灭菌是两个不同的概念,下列哪些事物适用于消毒处理 。
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培
养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩
C.①②③④⑤ D.④⑤⑥⑧⑨
(2)如下图所示,利用 法进行酵母菌接种。
如图A、B、C、D所示的四种划线方法,正确的是 。
(3)培养酵母菌常用的培养基是 ,此培养基的氮源是
。氮源进入酵母菌细胞后,可参与合成的生物大分子有
、 等。在接种前需要检测培养基是否被
污染。对培养基的检测方法是
,观察培养基上是否有菌落产生。
21.(12分)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中
的细菌含量,并进行了细菌分离和培养等工作。回答下列问题:
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中
细菌含量。将1mL水样稀释1000倍,在3
个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液。
经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为
39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌
数为 个。
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过
灭菌,为了将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落,在第二
次及以后的划线时,一定要 ,示意图A
和B中, 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
通常,对获得的纯菌种可以依据 对细菌
进行初步的鉴定和分类。
(3)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置
培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养
的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中
的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高 的利用率。
第1章 发酵工程
B卷 能力提升卷
1.B 在酵素制作时容器内留下20%空间既保证酵母菌大
量繁殖时对微量氧的需求,又防止发酵旺盛时发酵液溢
出造成杂菌污染,A正确;发酵装置放置在阴凉处,需要
间隔一定时间放气,因为发酵前期微生物有氧呼吸产生
较多CO2,到发酵后期会以无氧呼吸为主,CO2 释放量降
低,故放气间隔可延长避免杂菌污染,B错误;由于水果酵
素是低热量的饮品,因此酵素具有一定的减肥功能,C正
确;“酵素”中多种有益微生物、氨基酸、维生素等,是发挥
功能的有效成分,D正确。
2.C 本题主要考查酒精发酵。由题干信息可知,“浸曲发”
是将酒曲浸到活化,在酵母菌活化的过程中酵母菌细胞
吸水代谢加快,A项正确;“鱼眼汤”是冒出鱼眼大小的气
泡,气泡是酵母菌进行呼吸作用产生的CO2释放形成的,
B项正确;酿酒过程中酵母菌进行无氧呼吸产生的酒精会
抑制其他微生物的生长,“净淘米”是防止一些杂质影响
酒的品质,C项错误;“舒令极冷”是将蒸熟的米摊开冷透,
其目的是防止蒸熟的米温度过高致使酒曲中的微生物死
亡,D项正确。
3.C 榨汁前需将新鲜的蓝莓进行冲洗,然后除去枝梗,以
避免除去枝梗时引起蓝莓破损,防止增加被杂菌污染的
机会,故A正确;过程③是果醋发酵,所用的微生物是醋
酸菌,醋酸菌在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓
醋,故B正确;过程④果酒制作的菌种来源于蓝莓皮上野
生的酵母菌,所以蓝莓汁不需经过高压蒸汽灭菌,故C错
误;在没有糖源的情况下,醋酸菌可以把酒精转化为醋
酸,即酒精可作为醋酸菌的碳源和能源,故D正确。
4.D 选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营
养要求而设计的培养基,允许特定种类的微生物生长,同
时又能抑制或者阻止其他种类的微生物生长,利用这种
培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出
来;利用加入刚果红的含纤维素的培养基培养细菌,根据
透明圈的大小可以初步判断菌株利用底物的能力;常用
的伊红美蓝培养基,可用来鉴别饮用水中是否存在大肠
杆菌等细菌,但是不能计算出水样中大肠杆菌的数量;在
以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细
菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。
5.A 培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,A错误;需
要设立对照组,因为不能排除实验操作、培养过程中、灭
菌中等环节是否产生污染,而设置对照组则可以体现是
否存在污染和污染程度,以确保实验过程的可靠,B正确;
由图可知,该实验的接种方法为稀释涂布平板法,C正
确;取样环境不同、取样时间不同、取样量的差异都可能
影响最终的实验结果,D正确。
6.B 要判断培养基是否被杂菌污染,可将未接种的培养基
放在恒温箱中培养,一段时间后,若有菌落产生,说明培
养基被污染,若无菌落产生,说明培养基没有被污染。要
判断选择培养基是否起到了选择作用,接种了的选择培
养基是实验组,将等量的稀释相同倍数的菌液接种到牛
肉膏蛋白胨培养基上,作为对照组,在相同的条件下进行
培养,观察比较对照组和实验组中的菌落数,牛肉膏蛋白
胨培养基上的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落
数目。
7.D 由题图可知,链霉素能阻止霍乱菌和结核杆菌的生长
繁殖,不能阻止伤寒杆菌的生长繁殖,所以它不能用于治
疗感染伤寒杆菌的伤寒病人,A、C正确,D错误;由题图
可知,链霉素对结核杆菌的抑制作用比对霍乱菌的更强,
B正确。
8.C 由题意可知,由于甲醛分解菌能利用甲醛作为碳源,
而不能分解甲醛的微生物不能利用甲醛作为碳源,所以
筛选甲醛分解菌的培养基中要添加甲醛作为唯一的碳
源,在此培养基上不能分解甲醛的微生物因缺少碳源而
不能生长,A正确;③过程可以筛选出能分解甲醛的微生
物,④过程可以获得单菌落,接种的目的是通过形成单个
菌落分离出甲醛分解菌,B正确;步骤⑤中,各个培养瓶中
的甲醛溶液的浓度要相同,将不同的甲醛分解菌分别接
种到各个培养瓶中,一段时间后检测培养瓶中甲醛的浓
度,选出甲醛浓度最低的培养瓶后,筛选对应的菌株可获
得分解甲醛能力强的甲醛分解菌,C错误,D正确。
9.A 倒成平板后直接培养若有杂菌生长说明已被污染,若
无杂菌生长说明没有污染,A正确;灭菌应在倒平板之
前,B错误;图示结果表明需要两种生长因子乙和丙,C错
误;根据某些菌种需要特殊的生长因子,可用生长图形法
进行筛选,D错误。
10.D 干热灭菌法适用于对滤杯、滤膜和滤瓶进行灭菌,防
止杂菌的污染,A正确;在酒精灯火焰附近操作可以减
少空气中的杂菌污染,B正确;由于过滤完后细菌粘附在
滤膜上,将滤膜紧贴在EMB培养基上可以将粘附的菌
种接种在培养基上,C正确;EMB培养基属于鉴别培养
基,没有选择作用,D错误。
11.B 制作果酒利用的是酵母菌的无氧呼吸,适宜的温度
约为28℃,当夏天温度较高时,生产果酒过程中需考虑
对罐体进行降温处理,A项正确;发酵过程中进气口应
保持关闭,出气口阀门只在排气时打开很短的时间,其
余时间没有空气流动,B项错误;正常发酵过程中,酵母
菌无氧呼吸不消耗气体,但是会不断产生二氧化碳,因
此罐内的压力不会低于大气压,需定时关注压力变化以
保证安全生产,C项正确;发酵会消耗葡萄糖,可以通过
监测发酵液中残余糖的浓度来决定何时终止发酵,D项
正确。
12.B 生活污水中含有大量微生物,但不一定含有产漆酶
的菌株,可能分离不出产漆酶菌株,A错误;生活污水中
含有大量微生物,将筛选培养基中加入漆酶的底物,通
过菌落特征就能挑出产漆酶的菌落,B正确;在涂布平板
上长出的菌落,再通过划线进一步纯化,不是计数,C错
误;斜面培养基中含有大量营养物质,不能在常温下保
存,可在低温下长期保存菌株,D错误。
13.BD 乳酸菌是一种严格的厌氧菌,利用乳酸菌制作酸奶
的过程中,应一直处于密闭状态,否则会导致发酵失败,
A错误;家庭制作果酒、果醋与腐乳过程中所用的菌种
均来源于自然环境,有多种微生物参与发酵过程,所以
都不是纯种发酵,会影响产品品质,为提高产品品质,可
以加入人工培养的单一菌种,B、D正确;果酒、果醋制作
过程中有CO2产生,溶液的pH都是逐渐降低,C错误。
14.AC 该实验先采用富集培养的方法,所以①过程只需
要接种到富含苯酚的培养液中即可,而不需要以苯酚为
唯一碳源,A分析错误;⑤属于固体培养基,在配制固体
培养基时,需加入琼脂,B分析正确;该实验使用的器材
一般采用干热灭菌法灭菌,C分析错误;目的菌以苯酚
为唯一碳源,实验⑥⑦为验证是否成功分离目的菌,其
中一组应不含苯酚,另一组以苯酚为唯一碳源,D分析
正确。
15.ACD 在配制步骤②、③的培养基时,应先调pH 后高
压蒸汽灭菌,A正确;要筛选出能高效分解尿素的细菌,
所选用的培养基要以尿素为唯一氮源,但牛肉膏和蛋白
胨中都含有尿素,因此步骤③所用的培养基中不能含有
牛肉膏蛋白胨,B错误;步骤④挑取③中不同种的菌落分
—3—
别接种,比较细菌分解尿素的能力,C正确;步骤③纯化
分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单
细胞菌落,D正确。
16.ABD 本题考查微生物的筛选与鉴定。培养基含有碳
源(淀粉)、氮源、水、无机盐和生长因子等营养物质,A
项正确;为了得到单个细菌形成的菌落,菌液应该稀释
后进行涂布,B项正确;这两种细菌形成的菌落周围均出
现透明圈,说明均能将淀粉酶分泌到细胞外,C项错误;
H/C值不同反映这两种细菌分解淀粉的能力不同,D项
正确。
17.解析:(1)酒精发酵时需要无氧环境,而醋酸菌为好氧
菌,因此醋酸菌不会进行醋酸发酵。(2)根据表中数据
可知,酵母菌接种量为10%时,果酒的酒精度最高;当酵
母菌接种量过高时,酵母菌种内斗争加剧,影响酒精生
成,从而导致果酒的酒精度会随接种量增大而下降。果
汁发酵后是否有酒精产生,可以用酸性的重铬酸钾来检
测。如果颜 色 由 橙 色 变 成 灰 绿 色,说 明 有 酒 精 产 生。
(3)制作泡菜时,通过煮沸盐水,可以除去杂菌和氧气;
乳酸发酵是乳酸菌细胞的无氧呼吸的过程;乳酸菌是原
核生物,无核膜包被的细胞核。(4)在亚硝酸盐含量最
低时选择该食盐浓度及发酵天数。
答案:(1)不能 醋酸菌是好氧细菌,而果酒发酵需要无
氧环境 (2)10 酵母菌种内斗争加剧,影响酒精生成
酸性的重铬酸钾 (3)除去杂菌、除去溶氧 无氧呼
吸 无核膜包被的细胞核 (4)5% 11
18.解析:(1)图中步骤①对牛奶的消毒方法是巴氏消毒,该
方法既可以杀灭牛奶中的微生物,又可以使牛奶中的营
养成分不会被破坏。对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
常用高压蒸汽灭菌法,蛋白胨含多种有机物,能为微生
物提供碳源、氮源、维生素等。
(2)步骤②将牛奶进行梯度稀释的目的是使聚集在一起
的微生物分散,便于能在培养基表面形成单个菌落。步
骤③的接种方法是稀释涂布平板法,这种方法可以用来
统计样品中活菌的数目,其原理是样品稀释度足够高
时,稀释液中的一个活菌可在平板上长出一个单菌落,
通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中大约含有
多少活菌。
(3)由于未接种的平板上也有菌落,说明培养基灭菌不
合格,则其他培养基上的菌落数不能表示牛奶中细菌数
量,故不能由上述平板上菌落数判断消毒后的牛奶细菌
是否超标。
(4)伊红美蓝可使大肠杆菌的菌落呈现黑色,所以要检
测牛奶中是否含有大肠杆菌,需要在培养基中加入伊红
美蓝,观察是否出现黑色(或蓝黑色)的菌落。
答案:(1)巴氏消毒 高压蒸汽灭菌法 提供碳源、氮
源等
(2)单个菌落 稀释涂布平板法 当样品的稀释度足够
高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液
中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数就能推测出
样品中大约含有多少活菌
(3)不能 因为未接种的培养基上有菌落出现,说明培
养基灭菌不彻底,则其他培养基上的菌落数不能表示牛
奶中细菌数量
(4)伊红美蓝
19.解析:(1)在发酵罐Ⅰ内,纤维素分解菌能够分泌纤维素
酶,该酶可将纤维素分解为葡萄糖。
(2)在过程②筛选纤维素分解菌时,常常采用平板划线
法和稀释涂布平板法进行纯化。两种方法的共同点是
把聚集在一起的细菌分散成单个,培养后得到单个菌
落。用来筛选纤维素分解菌的培养基中含有Na2HPO4
和KH2PO4(这些都是无机盐,又是磷酸一氢盐和磷酸
二氢盐),其作用有为细菌生长提供无机营养,作为缓冲
剂维持细胞生长过程中的pH稳定。
(3)发酵罐Ⅱ是通过酵母菌发酵生产乙醇,发酵一定时
间后,观察到发酵罐内液体不再有气泡产生,说明发酵
基本完毕。
(4)发酵罐Ⅲ是通过醋酸(杆)菌发酵生产醋酸。发酵罐
Ⅱ内和发酵罐Ⅲ内除了严格控制温度、pH外,发酵罐Ⅲ
是需氧发酵,还需要通入无菌空气。
(5)若发酵罐Ⅱ中的酒全部流经发酵罐Ⅲ制成醋,酒精
氧化成醋酸是利用醋酸(杆)菌有氧呼吸得到的,但这一
过程不产生CO2,因此发酵罐Ⅲ中CO2 的产生量几乎
为零。
答案:(1)葡萄糖
(2)稀释涂布平板 把聚集在一起的细菌分散成单个,
培养后得到单个菌落 选择 为细菌生长提供无机营
养,作为缓冲剂维持细胞生长过程中的pH稳定
(3)酵母菌 气泡产生
(4)醋酸(杆)菌 无菌空气
(5)D
20.解析:(1)皮肤可用70%酒精消毒,饮用水用氯气消毒,
牛奶、果汁、酱油用巴氏消毒法进行消毒,注射器、培养
基可用高压蒸汽灭菌,培养皿、手术刀用干热灭菌或高
压蒸汽灭菌,接种环进行灼烧灭菌,①②③⑧⑨应采用
消毒,④⑤⑥⑦⑩应采用灭菌。(2)题图是采用平板划
线法接种,需要注意的是连续划线时,每次划线前后要
灼烧接种环,同时最后一次划线不能与第一次相连。A
图很难得到由单个细胞繁殖而来的菌落,A错误;B图划
线从上次划线末端开始,容易得到由单个细胞繁殖而来
的菌落,B正确;C图划线没有从上次划线的末端开始,
接种环上没有菌种,不能得到由单个细胞繁殖而来的菌
落,C错误;D图划线不是从上次划线末端开始,不容易
得到由单个细胞繁殖而来的菌落,D错误。(3)培养酵
母菌常用的培养基是马铃薯琼脂培养基,提供氮源的是
马铃薯,细胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白质、核
酸等,氮源可参与以上物质的合成。检测培养基是否被
污染,方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适
当时间,观察培养基上是否有菌落产生。
答案:(1)A (2)平板划线 B (3)马铃薯琼脂培养基
马铃薯 蛋白质 核酸 将未接种的培养基在适宜
的温度下放置适当时间
21.解析:(1)由题意知,1mL水样中的菌落数是(39+38+
37)÷3÷0.1×1000=3.8×105,每升水样中的活菌数
为3.8×105×103=3.8×108(个)。(2)接种环用灼烧
法进行灭菌。在第二次及以后的划线时,总是从上一次
划线的末端开始划线,这样做的目的是通过划线次数的
增加,将聚集的菌体逐渐稀释分散,使每次划线时菌体
的数目逐渐减少,以便获得由单个细胞繁殖而来的单个
菌落。图A是用平板划线法接种培养后得到的结果,图
B表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
可以依据菌落的形状、大小等特征对细菌进行初步的鉴
定和分类。(3)振荡培养可以增加液体培养基的氧气含
量,同时还能使菌体与培养液充分接触,提高营养物质
的利用率。
答案:(1)3.8×108 (2)灼烧 从上一次划线的末端开
始划线 B 菌落的形状、大小等特征 (3)溶解氧
营养物质
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