内容正文:
3.3 DNA的复制
第三章 基因的本质
复习:DNA的双螺旋结构
DNA
分子
的结
构
双螺旋结构
基本单位——脱氧核苷酸
主要特点
遵循的原则
一分子磷酸
一分子脱氧核糖
一分子碱基:A、G、C、T
外侧的基本骨架:
由脱氧核糖和磷酸交替连接构成
内侧是由碱基通过 连接成的碱基对
碱基互补配对原则
氢键
复习:DNA分子的结构特点
1.DNA是由几条链构成的?DNA具有怎样的立体结构?
2.DNA的基本骨架是由什么物质组成的,它们分别位于DNA的什么部位?
3.DNA的碱基是如何配对和连接的?它们位于DNA的什么部位?
2.DNA分子的特性
(1)稳定性:DNA中脱氧核糖和磷酸交替连接的方式不变;两条链间碱基互补配对的方式不变。
(2)多样性:DNA分子中碱基对(脱氧核苷酸对)的排列顺序多种多样,构成了DNA的多样性→遗传信息的多样性→生物多样性。
(3)特异性:每种DNA有别于其他DNA的特定的碱基排列顺序。
学习目标
一、简述DNA半保留复制的证明过程
二、概述DNA分子的复制
三、探讨DNA复制的生物学意义
什么是DNA复制?
DNA的复制就是指以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程,(1DNA→2DNA)
沃森和克里克在发表DNA分子双螺旋结构的那篇著名短文的结尾处写到:“在提出碱基特异性配对的看法后,我们立即又提出了遗传物质复制的一种可能机理。”
1. 碱基互补配对原则暗示DNA的复制机制可能是怎样的?
2. 这句话中为什么要用“可能”二字?这反映科学研究具有什么特点?
一、对DNA复制的推测
1.提出者: 。
2.假说内容:
DNA复制时,DNA双链螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂,解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸根据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上。
3.特点:新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中一条链,这种复制方式称做 。
沃森和克里克
半保留复制
4.当时提出的DNA复制模型有三种:
一、对DNA复制的推测
a、全保留复制:DNA复制以DNA双链为模板,子代DNA的双链都是新合成的;
b、半保留复制:DNA复制以两条DNA单链分别为模板,新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中一条链
c、分散复制(弥散复制):新复制的分子中新旧都有,但分配是随机组合的
复制一次
复制一次
复制一次
思考:1.怎样证明DNA复制是半保留复制呢?
2.关键思路?
区分亲代和子代的DNA,标记亲代DNA链,然后观察它们在子代DNA中如何分布。
科学研究需要大胆的想象,但得出结论必须建立在确凿的证据之上。
二、DNA半保留复制的实验证据
1. 人物: 。
2. 实验材料: 。
3. 方法:运用了 技术。
大肠杆菌
同位素标记
梅塞尔森和斯塔尔
(和密度梯度离心技术)
15N 和 14N是N元素的两种稳定同位素,
这两种同位素的相对原子质量不同,
含15N的DNA比含14N的DNA密度大。
背景知识
因此利用离心技术可在试管中区分含不同N元素的DNA。
二、DNA半保留复制的实验证据
思考下列问题。
a、科学家采用什么作为实验材料,有何优点?
b、如何让亲代DNA获得15N标记?
c、如何让子代DNA获得14N标记?
d、收集亲代细菌、分裂一次、分裂两次的细菌中的DNA,如何将不同标记的DNA分开呢??
大肠杆菌细胞 (大肠杆菌20min繁殖一代)
将大肠杆菌放入含15NH4Cl培养若干代
将上述亲代大肠杆菌转入含14NH4Cl的普通培养液中
二、DNA半保留复制的实验证据
密度梯度离心法
高密度带
中密度带
低密度带
15N
14N
15N
15N
14N
14N
二、证明DNA半保留复制的实验证据
4.实验过程
①先用15NH4Cl培养液培养大肠杆菌
②让大肠杆菌繁殖若干代(DNA几乎都是15N标记)
③将大肠杆菌转移到含有14NH4Cl的普通培养液中
④在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA
⑤将提取的DNA进行离心,记录离心管中DNA的位置
15N/14N-DNA
14N/14N-DNA
15N/14N-DNA
实验结果预测(全保留/半保留)
亲代DNA
子一代DNA
子二代DNA
15N/15N
15N/14N
14N/14N
15N/14N
半保留复制
15N/15N
14N/14N
15N/15N
15N/15N
14N/14N
全保留复制
如果是弥散复制呢?
第一次复制
第二次复制
重带 轻带
重带 轻带
第一次复制
第二次复制
中带
中带 变粗
第一次复制
第二次复制
中带
轻带
中带
重带(下部)
15N/ 15N
中带(中间)
15N/ 14N
轻带(上部)
14N/ 14N
中带(中间)
15N/ 14N
证明DNA半保留复制的实验
5.实验现象:
①亲代
1条DNA带,位置靠近底部(15N/15N-DNA)
②第一代
1条DNA带,位置居中(15N/14N-DNA)
③第二代
2条DNA带,一条居中(15N/14N-DNA)
一条靠近上方(14N/14N-DNA)
(可排除全保留复制)
(可排除弥散复制)
证明DNA半保留复制的实验
实验现象说明:
①亲代:1条DNA带(15N/15N-DNA)
②第一代:1条DNA带( 15N/14N-DNA )
③第二代:2条DNA带
(15N/14N-DNA, 14N/14N-DNA)
实验结论:DNA的复制是以半保留的方式进行的。
思考: 随着复制代数增加轻带和中带的宽度会如何变化?
DNA的半保留复制示意图
世代 分
子
总
数 DNA分子在离心管中位置 不同DNA分子占全部DNA分子之比
15N/15N
分子 15N/14N
分子 14N/14N
分子
0
1
2
3
n
拓展延伸
根据上面实验过程,完成下列表格
全在下部
1
2
4
8
2n
全在中部
½中+ ½ 上
¼中+ ¾ 上
2/2n中+(1- 2/ 2n)上
1
1
½
¼
2/ 2n
½
¾
(1- 2/2n)
若对复制后的DNA进行加热处理,使其解开双螺旋结构,变为单链分子,再进行密度梯度离心实验,则结果应该是
世代 分
子
总
数 DNA分子在离心管中位置 不同DNA分子占全部DNA分子之比
15N单链
分子 14N单链
分子
0
1
2
3
n
作出假说
演绎推理
实验验证
得出结论
(二)推测可能的复制方式
(三)推理、探究几种复制模式下得到子代DNA的可能情况,预测可能实验结果
(四)完成实验
(一)DNA的是如何复制的?
提出问题
半保留复制
全保留复制
弥散复制
假说——演绎法
DNA复制方式的探究历程:
1.概念:
2.复制的时间:
以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程
3.复制的场所:
在真核生物中,在细胞分裂前的间期
(有丝分裂前的间期、减数第一次分裂前的间期等)
真核生物:
原核生物:
细胞核(主要)
拟核(主要)、质粒
、叶绿体、线粒体
三、DNA分子复制的过程
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA部分双螺旋结构
DNA解旋酶
三、DNA复制的过程:
T
G
C
A
C
T
A
A
T
DNA 双螺旋
部分解旋
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA解旋酶
破坏了碱基对之间的氢键
A
G
C
T
G
A
C
G
T
T
T
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA解旋酶
A
G
C
T
G
A
C
G
T
T
T
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA聚合酶
DNA聚合酶
DNA解旋酶
A
G
C
T
G
A
C
G
T
T
T
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA解旋酶
C
生成磷酸二酯键
A
G
C
T
G
A
C
G
T
T
T
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA解旋酶
T
G
A
A
A
T
G
复制的方向:5’→ 3’
A
G
C
T
G
A
C
G
T
T
T
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA解旋酶
T
T
G
G
A
A
A
A
G
C
T
G
A
C
G
T
T
T
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA解旋酶
T
T
G
G
A
A
A
A
G
C
T
G
A
C
G
T
T
T
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA解旋酶
T
T
G
G
A
A
A
A
G
C
T
G
A
C
C
T
T
T
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
DNA解旋酶
T
T
G
G
A
A
A
A
A
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
T
G
C
A
C
T
A
A
T
A
C
G
T
G
A
T
T
A
再去解旋其他部位重复上述过程,最终得到两条与原来相同的DNA分子,亲代DNA的链参与新DNA的构成。
4.DNA复制的过程
①解旋:
②合成子链:
③形成子代DNA:
利用 提供的能量(ATP),在 的作用下,把两条螺旋的双链解开(断开碱基对内的氢键)。
以解开的每一段母链为 ,以 为原料,遵循 原则,在有关 的作用下,合成与母链互补的子链。
每条子链与其对应的 盘旋成双螺旋结构,形成 个与亲代 的DNA。
细胞
解旋酶
模板
酶
(DNA聚合酶等)
母链
两
四种游离的脱氧核苷酸
碱基互补配对
完全相同
模板:
亲代DNA分子的两条链
5、条件:
原料:
游离的4种脱氧核苷酸(A、G、C、T)
能量:
酶:
ATP (呼吸作用提供)
解旋酶、DNA聚合酶等
6、DNA复制的特点、原则
①边解旋边复制(过程)
②半保留复制(结果)
★原则:
碱基互补配对原则
★特点:
7、准确复制的原因
8.意义:
将遗传信息从亲代传给子代,从而保持了遗传信息的连续性。
原因:
①DNA分子独特的 提供精确的模板。
②通过 保证了复制准确无误。
双螺旋结构
碱基互补配对
【讨论】
1.解旋和复制是同时进行的么?
2.合成两条子链的方向是相同的么?
3.二条母链的碱基顺序是否相同?二条子链呢?
4.新合成的二个DNA碱基顺序是否相同?
相同
不同,互补
三、DNA分子复制的过程
合成两条子链的方向相反
(因为子链延伸方向固定,都从5,-3,方向延伸)
5,
3,
5,
3,
5,
3,
5,
3,
解旋和复制同时进行,并非双螺旋全部解开后复制
一个DNA分子连续复制n次,含有最初母链的DNA分子只有2个。
能力拓展
DNA复制过程中的数量关系
亲代DNA分子经 n 次复制后,则
(1)DNA分子数
①子代DNA分子数:
②含亲代母链的DNA分子数:
③不含亲代母链的DNA分子数:
2n个
2个
2n-2个
四、DNA复制过程中的相关计算
(2)脱氧核苷酸链数
①子代DNA分子中脱氧核苷酸链数:
②亲代脱氧核苷酸链数:
③新合成的脱氧核苷酸链数:
2n+1条
2条
2n+1-2条
(3)消耗的脱氧核苷酸数
若一亲代DNA分子含有某种脱氧核苷酸m个,则经过n次复制后需要消耗该脱氧核苷酸个数为:
m(2n-1)
(3)消耗的脱氧核苷酸数
若一亲代DNA分子含有某种脱氧核苷酸m个,则
第n次复制后需要消耗该脱氧核苷酸个数为:
m(2n-2n-1)即m.2n-1
$$