河南省南阳市镇平县2024-2025学年高二下学期期中模拟生物试卷

高二年级生物练习题 一、单选题 1.重庆奉节脐橙果大皮淋，汁多味甜，某小组将果肉进行脱色处理后打成匀浆，取样液、 用斐林试剂鉴定其含糖情况。下列叙述错误的是( ) A.脱色处理的目的是为了排除色素等无关变量对实验结果的干扰 B.使用斐林试剂时需将甲液和乙液等量混匀后再注入待测样液 C.为检测还原糖浓度，可增设多组不同浓度的蔗糖样液作为颜色对照 D.斐林试剂通过简单处理后，也能用于鉴定待测样液中的蛋白质 2.农业谚语是劳动人民口口相传的生产实践经验，其中蕴藏着丰富的生物学原理。下列 相关分析错误的是( ) A.“犁地深一寸，等于上层粪”—中耕松土有利于植物根细胞吸收无机盐 B.“人黄有病，苗黄缺肥”—氮镁是构成叶绿素的成分，缺(含氮、镁)肥导致叶片变黄 C.“春天粪堆密，秋后粮铺地”一粪肥中的有机物可直接被植物吸收，促进粮食增产 D.“有收无收，主要看水”是因为水可参与细胞内的生化反应和参与组成细胞结构等 3.《寒菊》中写到“宁可枝头抱香死，何曾吹落北风中”。下列关于菊花的相关叙述，正确 的 是 ( ) A.菊花细胞中少量的水可以和蛋白质、多糖等结合 B.菊花叶片缺少微量元素Mg、Zn均会使光合作用减弱 C.菊花细胞中无机盐含量很少，主要以化合物的形式存在 D.天气变冷后菊花细胞内的结合水/自由水的值会降低 4.油菜种子形成过程中，脂肪会大量积累在膜结构的球状脂滴中；油菜种子萌发初期， 脂滴中的部分脂肪会在细胞质基质中转化为糖类，导致干重增加。下列叙述合理的是() A.构成球状脂滴的膜很可能是磷脂单分子层 B.油菜种子萌发过程中脂滴的体积逐渐增大 C.萌发初期导致油菜种子干重增加的主要元素是碳元素 D.与小麦种子相比，油菜种子在播种时更适合深播 5.蛋白质经Sec61蛋白被转运入内质网后，在严格的质量控制系统的作用下，只有完成 折叠、修饰的成熟蛋白质才会通过分拣过程，被囊泡捕获，而未完成折叠或错误折叠的蛋 白质通常不会被运至高尔基体，具体机制如下图所示，①~⑧表示过程，字母表示不同状 态的蛋白质。下列有关推测错误的是() ( 度 为收门驰 向外钟重夏 高尔笔伴 ① o 新会发输碘 屯 白 并向 子 智 ◎ 量 白 干 子 ) A.Sec61蛋白和U蛋白的起始合成部位相同 试卷第1页，共12页 B.外向转运因子减少会使蛋白质在内质网积累 C.分子伴侣蛋白可在内质网中协助蛋白质折叠 D.M蛋白均在滞留因子的作用下被运出内质网 6.如图表示细胞膜的“脂筏”模型。“脂筏”是细胞膜上以磷脂为主体，胆固醇、鞘磷脂等富 集形成的相对有序的脂相区域，可特异吸收或排出某些蛋白质。下列有关叙述错误的是( ) ( 糖脂 、 糖蛋白 脂筏 脂筏 ) A.“脂筏”结构的排布与磷脂分子的结构特点有关 B.一些脂溶性的小分子可通过“脂筏”区域进行跨膜运输 C.“脂筏”可通过主动运输的方式将大分子物质运输到细胞内 D.“脂筏”区域可能聚集多种信号分子，可促进细胞间的信息交流 7.蛋白质分泌是细胞间通信和生物功能实现的重要过程，大多数分泌蛋白都是通过内质 网—高尔基体途径进行分泌的，称为经典分泌蛋白，其分泌途径称为经典分泌途径。但近 年来的研究表明，在酵母菌以及高等真核细胞中存在一类分泌蛋白，它们不通过内质网— 高尔基体途径分泌，研究者把这类蛋白质称为非经典分泌蛋白，其分泌途径被称为非经典 分泌途径，示意图如下。下列相关叙述正确的是( ) A.豚鼠的胰腺腺泡细胞分泌消化酶最可能是通过非经典分泌途径完成的 B.经典分泌途径中存在膜成分更新且蛋白质分泌至细胞外主要依赖生物膜的选择透 过性 C.非经典分泌途径中的类型IV因有高尔基体的参与，被称为高尔基体旁路途径 D.蛋白质靠经典分泌途径还是非经典分泌途径分泌可能与是否存在“信号序列”有关 8. 口服被14C标记的尿素胶囊，胃内幽门螺杆菌(简称Hp)产生的尿素酶会将尿素分解 试卷第2页，共12页 为CO₂和氨、呼出的ACO₂达到一定值，则说明胃内存在幽门螺杆菌感染。下列有关叙述 正确的是( ) A. 口服纤维素酶胶囊可破坏IIp细胞壁而使其死亡 B.Hp和胃细胞的边界都是细胞膜且都具有选择透过性 C.尿素酶经Hp内质网和高尔基体加工后才具有活性 D.也可用15N标记尿素胶囊，检测氨中放射性强弱 9.将肝脏组织匀浆用差速离心等方法获得不同的细胞结构和组分。下列叙述错误的是( ) A.某细胞结构是“生产蛋白质的机器”,则其形成与核仁有关 B.某具膜细胞结构中检测到多种水解酶，其应是细胞的“消化车间” C.对分离到的无膜细胞器进行检测，发现其化学成分只有蛋白质 D.若离心沉淀物中含细胞核，则其中具有可被醋酸洋红溶液染色的物质 10. 甲、乙两种伞藻的帽形不同(如右图),现将甲的A部分与乙的B部分嫁接，发现第 一次长出的帽状体呈中间类型，若切除这一帽状体，第二次长出的帽状体则与甲的帽状体 形状相同。下列叙述错误的是() A.用黑藻代替伞藻进行本实验是不太合理的 B.第一次为中间类型可能受B残余(乙细胞核合成的)物质影响 C.第二次长出的帽形与甲相同，说明细胞核控制生物的性状 D.若要进一步验证细胞核与细胞质的关系，还应进行核移植实验 11.“红菌豆渣”是粤东地区特有的一种传统名肴，其生产过程是：焙烤新鲜豆腐渣→将豆 腐渣捏成团放入铺有荷叶的筛子、压平、冷却→在渣面上撒上菌种→发酵一天，渣面长出 红毛即得到成品。相关叙述错误的是() A.焙烤可降低豆腐渣含水量，利于后期发酵 B.渣面上长出的红毛是酵母菌繁殖形成的 C.豆腐渣中的蛋白质被分解，可增加成品的营养和风味 D.适当增加菌种量、控制发酵温度，可提高发酵效率 12.某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下。然后用肥皂将该手 洗干净，再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿 放入37℃恒温培养箱中培养24h后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。下列说 法正确的是( ) A.实验前需要对培养皿和培养基进行灭菌处理，对待检测的双手进行消毒处理 B.培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核糖等物质所必需的 C.该实验中所用的培养基是为了筛选手上的微生物 D.从实验结果来看，洗手后我们不能直接进行无菌操作 13.科学家利用从土壤中分离得到的纤维素分解菌将落叶发酵制成有机肥，不仅利用了落 试卷第3页，共12页 学科网（北京）股份有限公司 叶中的纤维素，还不污染环境。如图为科学家分离微生物的过程，据图分析，下列说法错 误的是( ) ( mL ImL 1mL 1mL 1mL 10g 9mL 各 各 各 b.2mL b.2mL 0.2mL 土壤样品90mL 10~1 10~ 10 10* 10 10 10-7 ) A.选择不同稀释倍数的菌液进行接种是为了获得适当数量的单菌落，以准确分离和 计数 B.为了筛选出能够分解纤维素的细菌，图中的选择培养基只能以纤维素作为唯一的 碳源 C.本实验采用的接种方法是稀释涂布平板法，涂布器在使用前要通过火焰灼烧进行 灭菌 D.可以在培养基中添加刚果红染色剂方便筛选，被染成红色的部分就是目的菌株的 部分 14.吃腐烂水果可能会出现头晕、恶心、呕吐或更严重的症状，这可能与微生物代谢产生 的毒素有关。某研究小组致力于研究健康饮食，设计实验探究腐烂苹果不同区域微生物的 种类和数量以及烂果毒性，实验基本步骤如图所示。请据此判断下列说法正确的是() 学科网（北京）股份有限公司 病健交界处 ( ① )② 051015 病斑 刻度尺 (mm) 腐烂的苹果 步骤一： ( 步骤二： 步骤三： 1mL 1mL 接种 菌液分别取样 9mL 培养基 无菌水 ) 分离得到①-⑤ (其中⑤为苹果 剩余部分)共5处 样品，研磨过滤 后得到5种菌液 A.根据本实验探究目的，步骤二接种采用的工具是接种环 B.步骤三在适宜环境下培养8小时即可统计出不同菌液中全部微生物的种类和数量 值 C.若菌落的种类和数量均为①>②>③>④>⑤,则离腐烂部位越远的果肉中毒素含量 越低 D.若编号为⑤的部位微生物的数量极少，则切掉①~④后的苹果就可以放心食用 15.某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程 如图所示。下列叙述错误的是() 试卷第4页，共12页 ( 0.5mL 0.5 mL 0.1 mL ) ( 振 劣 20 mln 0.5 mL 90 mL 土 壤 悬 无 菌 水 浮 液 4.5 mL 无 菌 水 10g 土 样 纯 培 化 养 ) A.尿素不耐热，常用过滤除菌法对尿素进行处理 B.振荡20min的目的是使土壤中的微生物均匀分布 C.鉴别尿紫分解菌需在培养基中加酚红和缓冲对 D.每克该土样中的尿素分解菌约为1.6×106个 16.我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的， 其工业化生产流程如下图所示。下列叙述正确的是( ) ( 加啤酒花 接 种 冷 却 过 滤 发 芽 焙 烤 碾磨 糖 化 蒸 煮 发酵 消 毒 终 止 ) A.焙烤的目的是加热杀死种子胚和使淀粉酶失活 B.碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，糖化主要是将麦芽中的淀粉分解 C.蒸煮的目的只是产生风味组分，终止酶的进一步作用 D.啤酒发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成都在后发酵阶段完成 17.玉米(2n=20)是研究植物遗传、变异和育种的好材料。如图为离体培养过程中发现 的变异情况。下列叙述正确的是() A.上图中培育单倍体的过程，没有体现出植物细胞的全能性 B.玉米的单体植株的体细胞中含有19条染色体 C.上述优良品种的获得利用了多倍体育种方法 D.过程Ⅲ诱导产生的植株均无法作为栽培对象 二倍体 2n 峡体2n-2 花 药 花 药 单体2n-1 三体2n+1 四体2n+2 人工透空 染色体 加做 选择 Ⅲ IV 纯合体 优良品种 18.紫花苜蓿易造成家畜鼓胀病，百脉根富含单宁，单宁与植物蛋白质结合，不会引起家 畜采食后鼓胀。科研人员利用野生型清水紫花苜蓿(2n=32)和里奥百脉根(2n=14)为材 料培育出了抗鼓胀病的新型牧草，研究主要流程如图。下列说法正确的是() 试卷第5页，共12页 学科网（北京）股份有限公司 ( 清水繁花 西着原生 质体 氧奥百脉 根原生质 体 用R-6G处理原生质体及同源融合体 不能再生愈伤组织 原生质体及同源酸合作 不能再生愈伤组织 杂种愈 ③ 伤组织 杂种 细胞团 用1 OA 处理 再生 植株 胚状体 ) 注：10A可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可抑制线粒体的功能。 A.在制备两种植物原生质体时，常用纤维素酶和胶原蛋白酶处理原材料，该过程应 在无菌水中进行，以防止杂菌污染 B.杂种细胞融合成功的标志是两种细胞的细胞核融合成一个细胞核 C.过程②和③的培养基中添加的生长素和细胞分裂素的比例不同，其它条件相同 D.培育抗鼓胀病的苜蓿新品种依据的生物学原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全 能 19.科学家从糖尿病患者体内提取单核细胞，通过转入特定基因重编程为iPS细胞，并将 其在体外诱导分化成胰岛组织，移植回患者体内，成功治愈该患者。 TRPCICa²+通道开放 可提高细胞内Ca²+水平，进而调节iPS细胞的分化。另有研究报道，细胞内的蛋白激酶C (PKC)可促进iPS细胞的分化。为进一步探究其作用机制，研究人员采用PKC激活剂 (PMA)和PKC抑制剂(Bis-1)处理iPS细胞，检测细胞内的Ca²+水平，结果如下表所 示。综上分析，下列相关叙述错误的是( ) 组别 处理方式 实验结果 第一组 PMA处理iPS细胞 Ca²+水平未增加 第二组 Bis-1处理iPS细胞 Ca²+水平增加 A.该项技术对1型糖尿病的治疗具有良好的应用前景 B.利用单核细胞制备iPS细胞涉及动物细胞培养和基因工程技术 C.PKC可能是通过抑制TRPCICa²+通道的开放进而诱导iPS细胞分化 D.糖尿病患者往往呈现多尿症状，血液中抗利尿激素水平较低 20.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备 的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，下 列叙述正确的是( ) 免疫动物 注 射 H C G ( ( 水 B淋巴细胞 学科网（北京）股份有限公司 HAT培养基中培雅 克隆化培雅… … 骨健痢加促融剂 抗体筛选 纲胞 大规模 培 养 试卷第6页，共12页 A. 向小鼠多次注射纯化的HCG,并从小鼠的血液中获得能产生特定抗体的B淋巴细 胞 B.两两融合的细胞均可以在HAT选择培养基上存活 C.克隆化培养时，需要对经选择培养的杂交瘤细胞用无菌水进行充分依次等比稀释 D.可将抗体检测呈阳性的细胞在体外大规模培养，从培养液中获取大量单克隆抗体 ( 21.如图为获得小鼠孤雌、孤雄单倍体胚胎干细胞系的流程图。下列叙述正确的是() 精子 ① ② 受精卵 移除雄原核 早期胚胎孤雌单倍体 卵母细胞 胚胎干细胞 ) ( 霜淳入 ②吸 去 ? ③雄 原 ④单倍 晕器藤器 核形成 体囊胚 ) A.通过直接培养图中的卵母细胞也能获得小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞系 B.通过直接培养精子也能得到小鼠的孤雄单倍体胚胎干细胞系 C.过程②吸去的是第二极体和卵细胞的核 D.孤雄单倍体胚胎干细胞中的基因和精子中的基因一样 22.小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确 的是( ) ( b 囊胚 胚胎干细胞 ) A.囊胚的细胞未出现分化，都能发育成完整的个体 B.b细胞为滋养层细胞，会发育成胎儿的各种组织 C.对雄鼠注射激素以产生更多的精子，从而获得多个囊胚 D .可取样b细胞进行DNA分析，以鉴定胚胎的性别 23.下列有关动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是( ) A.动物细胞培养时，需对细胞进行脱分化和胰蛋白酶处理 B.适宜条件下进行动物细胞培养，细胞周期的长短不随细胞培养进程而改变 C.胚胎工程中常对桑葚胚或囊胚进行二分割，以获得基因型完全相同的两个胚胎 D.为了防止早期胚胎培养过程中发生微生物污染，应将培养箱抽成真空 24.关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验操作，下列说法 错 误 的 是 ( ) A.取洋葱研磨液的上清液倒入离心管中经离心后，管底的沉淀物为粗提取的DNA B.将提取的白色丝状物溶于2molL的NaCl溶液中，再加二苯胺试剂并进行沸水， 试卷第7页，共12页 用于鉴定DNA C.电泳鉴定实验中，将温热的琼脂糖溶液迅速倒入模具后再加入核酸染料 D.电泳时，接通电源后，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳 25.将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-II导入杨树细胞，培育抗虫杨树。如图表示利用含 目的基因的DNA分子和Ti质粒构建基因表达载体的过程，图中AmpR表示氨苄青霉素抗 性基因，NeoR表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表 所示。下列叙述正确的是( ) ( 5' 3' 启动子 终 止 启 动 子 终止子 3/- 5' 引物3 Pin -Ⅱ引物4 Neo Pin -Ⅱ T-DNA 十 EcoR I NeoR K pn I Hind Ⅲ Neo°pin-n 一Sma I AmpR 限 Bc 制 oR 酶 I 5'G 别 AT 位 T 点 C3' Amp² Kpn I 5'GGTAC+C3' 复制原点 HindI 5'A+AGCTT3' 复制原点 SmaI 5'CCC+GGG3' 引物1 BcoR I 引物2 EcoR I ) A.利用PCR扩增目的基因时，应该选择引物2和引物3并在引物3端添加相应酶切 位点 B.为使目的基因与质粒高效重组，选用KpnI和HindII比选用Kpnl和SmaI效果更 好 C.为将表达载体导入农杆菌，可以使用离心法或PEG融合法处理受体细胞 D.成功导入目的基因的杨树细胞既具有氨苄青霉素抗性，又有新霉素抗性 26.下图为利用奶牛乳腺生物反应器生产人血清白蛋白的过程，有关说法正确的是( ) ( 未受精的 卵细胞 单细胞 成熟奶牛 乳汁中提取人 血清白蛋白基因 荷斯坦奶牛组织 处理 分散 细胞 类血清白蛋白 ① ② ③ ④ ) A.步骤①将牛组织置于无菌水中并加入适量的胰蛋白酶处理可得到单细胞 B.步骤②将目的基因与乳腺细胞中基因的启动子重组在一起 C.步骤④常用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 D.若要获得同卵双胎或多胎，分割原肠胚时需将内细胞团均等分割 27.糖化血红蛋白(HbAlc)含量是糖尿病诊断标准之一，其含量测定需要蛋白酶、果糖 氨基酸氧化酶(FPOX)的参与，但FPOX会降低蛋白酶的催化效果，影响诊断结果。科 学家利用蛋白质工程对FPOX进行改造，提升了诊断的准确性和效率。下列叙述正确的是 试卷第8页，共12页 ( ) A.改造后的FPOX在自然界中也存在 B.改造后的FPOX蛋白的合成过程不遵循中心法则 C.可通过基因修饰或合成基因来实现对FPOX的改造 D.根据改造后的FPOX氨垄酸序列可得到一种脱氧核苷酸序列 28.生物技术就像一把“双刃剑”,它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜 在的危害。下列叙述错误的是() A.研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染 B.干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，但也可能面临一些问题，如存在导致肿 瘤发生的风险 C.生物武器是用病毒类、干扰素及生化毒剂类等来形成杀伤力 D.反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 29.克隆技术可用于治疗性克隆，治疗性克隆有望最终解决供体器官短缺和器官移植出现 的排斥反应，下图表示治疗性克隆的过程。下列叙述正确的是( ) 病人取出鑫虚分离。细胞核楂檀支核卵细胞 重组细胞 应用治疗 [发育 囊胚 、② —脏神器经组织干细胞等、 ① -胚胎干| 胞 (离) A.图中的去核卵细胞通常是初级卵母细胞 B.①②过程会进行DNA的复制和有关蛋白质的合成 C.上述过程利用了核移植技术和胚胎移植技术 D.治疗性克隆解决了器官移植的免疫排斥反应，已成为目前器官移植的常用手段 30.下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是() A.将流水充分冲洗后的外植体，用酒精消毒30s,然后立即用蒸馏水清洗2～3次 B.幼嫩的菊花茎段细胞的全能性比愈伤组织细胞的全能性高 C.接种时，需要把外植体的形态学上端插入无菌培养基中 D.从激素比例及浓度角度来考虑，菊花组织培养中需要配置3种培养基 二、非选择题(除标注外，每空1分，共40分) 31. (9分)醪糟是以糯米为主要原料，利用酵母菌和乳酸菌等微生物发酵制作的传统食品。 下图1、图2分别是该小组同学查阅资料后绘制的乳酸菌、酵母菌的细胞结构示意图，序 号表示细胞结构(①细胞壁)。图3是不同细胞蛋白质的分泌过程示意图。 图1 图2 试卷第9页，共12页 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 内质网高尔基体 分幽小液 正常细胞强白质分泌 分泌突变体A 俄白肌维积在内质网 图3 分泌突交体B 蛋白质维粉在高尔基体 (1)据图可知，酵母菌和乳酸菌在结构上两者最显著的区别在于乳酸菌 。但西者的结 构也有统一性，它们都有的细胞器是 0 (2)用有机溶剂从图1的乳酸菌细胞中提取脂质，在空气—水界面上铺展放单分子层，溯得 的单分子层面积约 (填大于、等于、小于)细胞表面积的2倍，理由是 (2分)。 (3)据图2分析，酵母菌中与能量转换有关的细胞结构有. (填序号),标有序号的结构 中，组成酵母菌生物膜系统的有 (填序号)。 (4)科学家筛选出一些突变型酵母菌，这些酵母菌在25℃时蛋白质分泌功能正常，但在35℃ 下培养时，本应分泌到胞外的蛋白质会异常堆积在细胞内某处，如图3所示。 a.下列相关叙述正确的有 A.可利用3H标记氨基酸的羧基追踪分泌蛋白的分泌过程 B . 推测突变体A的异 常是抑制了内质网的囊泡形成 C.酵母菌的细胞骨架是由蛋白质和纤维素构成 的D.蛋白质的分泌过程体现了生物膜的流动性 b.若突变体A和B的异常出现在同一个细胞中，蛋白质会堆积在 0 32. (8分)随着生活水平的提高，因糖、脂过量摄入导致的肥胖、非酒精性脂肪肝炎(NASH) 等代谢性疾病高发。此类疾病与脂滴的代谢异常有关。 (1)甘油三酯(TG)、胆固醇等中性脂作为细胞内良好的 物质，在生命活动需要时分 解为游离脂肪酸，进入线粒体氧化分解供能。 (2)脂滴是由单层磷脂分子组成的泡状结构，具有储存中性脂的功能。机体营养匮乏时，脂 滴可通过脂解和脂噬两种途径分解为脂肪酸，其形成和代谢过程如图1所示。请画出脂滴 的结构 (在答题纸上作答)。 ( 中 性 膈 ) ( 游高脂肪酸 细胞质基质 ) ( 脂滴 脂 脂 肪 酸 — → 分 能 ) ( 内质网膜 ) 图1 (3)细胞脂代谢异常产生的活性氧(ROS)会攻击磷脂分子并影响ATP合成酶的产生。观 察NASH模型小鼠(高脂饲料饲喂获得)的肝细胞，发现细胞内脂滴体积增大并有大量积 累，细胞核被挤压变形或挤向细胞边缘，线粒体结构被破坏，内质网数量明显减少。请完 善图2中： ①. (2分),② (2分), ③. 0 试卷第10页，共12页 ( 结 构 细胞核结构受损 内质网面积减小 腔 滴 体 积 破 裂 大 量 积 东 线 粒 体 的 减 少 ATP 合成障碍一 功 能 影 响 ① 物质合成加工 异 常 释放水解酶， 引发细胞凋亡 细 胞 ③ 不 足 糖脂摄入过蛋 挤 压 增 大 开 有 代 谢 产 生 肝细胞功能受损 导 R O s 击 攻 磷 脂 ) 图 2 ( 4 ) 脂 滴 表 面 有 多 种 蛋 白 分 子 ， 正 常 情 况 下 可 与 细 胞 核 、 内 质 网 、 线 粒 体 等 其 他 具 膜 细 胞 结 构 通 过 膜 融 合 方 式 相 互 作 用 ， 实 现 细 胞 内 各 结 构 的 o 33 . (13分)科学家采用Golden Gate基因工程技术构建和植物开花机制相关的M、N、O 三个基因的重组表达载体，并将其转化到植物细胞中进行后续研究。该技术通过Type IⅡS ( 5'-GAGACC-3' )型限制酶(如Bsa I,识别位点为 在识别位点外部若干个碱基处切割DNA, 3'-CTCTGG-5' 产生黏性末端，最后在同一反应体系中实现多片段的无缝连接。其原理如图所示(以两个片 段连接为例): ( BssL BoaI 目标 P 骂 载体 + + M P2 N P4 ①PCR扩增片段 BerH 醇 M N ②、 组 装 的 单 管 反 应 切载体 十 D N A 产 物 Bsa I- 酶切 PCR 扩增片段 S'-NNNNNGAGACC-3' 3'-NNNNNCTCTGG-5' 注：N表示随机碱基(A/T/G/C) Bsa I ) (1)如图所示， B saI切割后产生的黏性末端长度为 bp(2分)。过程②单管反应中 除了添加Bsa I内切酶，还需加入 酶 。 (2)与传统酶切方法相比， Golden Gate技术最大的优势在于利用BsaI一种内切酶可一次性 连接多个片段，回答以下问题： ①使用TypeⅡS酶切割后产生的黏性末端由 (2分)决定(填“限制酶识别位点” 或“引物设计”)。为保证基因M、N、O按正确顺序连接，需在引物中添加 (2 分)序列(填“重叠”或“随机”)。 ② 已 知 B s a I 的 识 别 序 列 为 5 ' — G G T C T C — 3 ' , M 基 因 部 分 序 列 为 ( 5'—GACCTAGGTA…CCGATTCGTA—3' )若要实现单管反应多个片段一 次性连接， B sa I酶切 3'—CTGGATCCAT…GGCTAAGCAT—5'° 片段的产物应_ (2分)(填“含”或“不含”)BsaI酶识别位点。则以下哪对引物设计最 适 合 M 基 因 ? ( 2 分 ) 。 引物1:5'— GGTCTCGACCTTACG— 3';引物2:5'— GACCTGGTCTCTACG— 3' 引物3:5'— GGTCTCCCGATGACC— 3';引物4:5'— GGCTAGGTCTCGACC— 3' ③由此原理推测， Golden Gate理论上可以实现一次性最多连接______ ( 2 分 ) 个 DNA片段。 试卷第11页，共12页 34. (10分)女性怀孕后会合成并分泌人绒毛膜促性腺激素(HCG),并且该激素会出现在 尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体 制成的“早早孕诊断试剂盒”,在妊娠第8天就可诊断是否怀孕。如图表示早早孕诊断试剂 盒内部试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗 体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体，抗 体2和抗体3分别固定在试纸条的检测线(T线)和质控线(C线),抗体1进行了胶体金 标记，该标记物可以在T线或C线处显色。回答下列问题： ( 样品垫 胶体金垫 质控线(C线) 吸水滤纸 PVC底板 层析方向 检测线(T线入NC膜《硝酸纤维素膜) 胶体金 单克隆 标记的 抗体2 抗体3 单克隆抗体1 ) 甲 T 乙 丙 图 1 图2 (1)女性在妊娠第8天左右，尽管体内HCG含量很低，但仍可用抗人绒毛膜促性腺激素单 抗制成的“早早孕诊断试剂盒”作出诊断，体现出单克隆抗体具有 (2分)的优点。 (2)图1中单克隆抗体2制备的过程中，需要反复向小鼠注射 作为抗原，然后从小 鼠的脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合。经选择培养后获得的杂 交瘤细胞的特点是 。为了得到能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要进行克隆化 培养和抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行，先将细胞悬浮液稀释到7～10个 细胞/mL,再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是 。最后将抗体检测 呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或 ,从而获取大量的单克隆抗体。 (3)图2表示三位女士的检测结果，其中表示没有怀孕的是 (2分),检测结果无效 的是 (2分)。 试卷第12页，共12页 $$