内容正文:
第3节
DNA的复制
科学家们
了解到了:DNA是4种脱氧核苷酸为单位链接的长链
威尔金斯
富兰克林
利用X射线衍射技术获得了DNA衍射图谱。
沃森、克里克
基于资料理论,进行研究并最终提出:DNA双螺旋结构
DNA的复制
?
前情回顾:名人榜
查哥夫
发现DNA中碱基,A与T的数量相等,C与G的数量相等。
问题探讨
沃森和克里克在发表DNA双螺旋结构的那篇著作短文的结尾处写道:“值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能的机制”
《核酸的分子结构》论文节选
1.复制机制可能是怎样的?
2.为什么用“可能”?
碱基互补配对原则是指DNA两条链的碱基之间有准确的一一对应关系,暗示DNA的复制可能需要先解开DNA双螺旋的两条链,然后通过碱基互补配对合成互补链。
科学研究需要大胆的想象,但是得出结论必须建立在确凿的证据之上。
发现问题
一、对DNA复制的推测
1.沃森和克里克提出了遗传物质自我复制的假说:
半
保
留
复
制
DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂,解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸根据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上。
内容
新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链。
结果
提出假说
一、对DNA复制的推测
2.科学家们产生不同观点:
半
保
留
复
制
弥散复制
全保
留
复
制
DNA 复制是镶嵌型的复制,即在子代 DNA 两条链中,母链和子链片段镶嵌存在,也叫弥散复制。
科学的研究方法
2.推测可能的复制方式
3.推理、探究几种复制模式下得到子代DNA的可能情况,预测可能实验结果
4.完成实验
1.DNA的是如何复制的?
半保留复制
全保留复制
......
假说—演绎法
提出问题
作出假说
演绎推理
实验验证
得出结论
科学的研究方法
梅塞尔森
斯塔尔
1958年
同位素标记技术
15N和14N是N元素的两种稳定的同位素,这两种同位素的相对原子质量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大。
N14-N14DNA
N15-N15DNA
N14-N15DNA
如何区分N14-N14DNA、N15-N15DNA、N14 -N15-DNA?
科学的研究方法
14N/14N—DNA
15N/14N—DNA
15N/15N—DNA
(轻带)
(中带)
(重带)
密度梯度离心
提取大肠杆菌的DNA,密度梯度离心后,分子量不同的DNA会出现在离心管的不同位置。密度越大(分子量越大)的DNA分子位于离心管的最下部。
二、DNA半保留复制的实验证据
演绎推理
1.若DNA复制的方式是半保留复制,请你预期实验结果。
亲 代
第1代
第2代
15N
15N
15N
15N
14N
14N
14N
14N
14N
14N
(重带)
(中带)
(中带)
(轻带)
15N
14N
15N
14N
半
保
留
复
制
二、DNA半保留复制的实验证据
2.若DNA复制的方式是全保留复制,请你预期实验结果。
亲 代
第1代
第2代
15N
15N
15N
15N
14N
14N
14N
14N
14N
14N
14N
14N
15N
15N
(重带)
(重带)
(轻带)
(轻带)
(重带)
演绎推理
全保
留
复
制
二、DNA半保留复制的实验证据
3. 若DNA复制的方式是弥散复制,则第一代和第二代分别出现几条带,位置如何?
第1代和第2代都只有1条带
第1代的条带位置居中
第2代的条带比第1代偏上
亲 代
第1代
第2代
(重带)
演绎推理
弥散复制
二、DNA半保留复制的实验证据
实验验证
实验过程:
材料:大肠杆菌
(繁殖快,20min一代)
科学家先用含有15NH4Cl的培养液培养大肠杆菌,让大肠杆菌繁殖若干代,这时大肠杆菌的DNA几乎都是15N标记的。
然后,将大肠杆菌转移到含有14NH4Cl的普通培养液中。在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA,再将提取的DNA进行离心,记录离心后试管中DNA的位置。
15N/14N-DNA
15N/14N-DNA
14N/14N-DNA
得出结论
半保留复制
复制的过程
三、DNA复制的过程
1.DNA复制的概念
2.发生时期
细胞分裂前的间期(有丝分裂前的间期、减数分裂前的间期),随着染色体的复制而完成。
3.发生场所
真核细胞:
主要在细胞核中,但在线粒体、叶绿体也有DNA的复制;
原核细胞:
主要在拟核中,在质粒处也 有DNA的复制。
DNA的复制是指以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。
三、DNA复制的过程
4.条件
模板
原料
酶
能量
DNA分子的两条母链
细胞中游离的4种脱氧核苷酸
解旋酶、DNA聚合酶等
ATP
DNA复制是一个边解旋边复制的过程,需要模板、原料、能量和酶等基本条件。DNA独特的双螺旋结构,为复制提供了精确的模板,通过碱基互补配对,保证了复制能够准确地进行。DNA通过复制,将遗传信息从亲代细胞传递给子代细胞,从而保持了遗传信息的连续性。
三、DNA复制的过程
①解旋:在能量驱动下,解旋酶打开氢键,将DNA双螺旋解开
②合成子链:DNA聚合酶等以解开的每一条母链为模板,以游离的4种脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的子链
③复旋:每条新子链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构
思考:那条子链的延伸方向好像和解旋方向是相反的,如何是好?
三、DNA复制的过程
DNA聚合酶的特点:不能从头合成DNA,而只能从3’端延伸DNA链,因此,DNA复制需要引物,为DNA聚合酶提供3’。
ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC
5’
3’
GGAUCG
5’
RNA引物Ⅰ
TAGCGCTATCGCATCGACGCT
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
AUCGCG
5’
RNA引物Ⅱ
ATAGCGTAGCTGCGACCTAGC
3’
DNA的合成方向:总是从子链的5’端向3’端延伸。
3’
3’
三、DNA复制的过程
5′
3′
5′
3′
5′
3′
解旋酶
DNA聚合酶
解旋酶
三、DNA复制的过程
引物
DNA聚合酶
5′
利用酶将
引物切除
DNA聚合酶
将 “缺口”补齐
用DNA连接酶连接DNA片段
5′
3′
5′
3′
5′
5′
①解旋
在能量的驱动下,解旋酶将DNA双螺旋的两条链解开,氢键断裂。
解旋酶
ATP
三、DNA复制的过程
②合成引物(补充)
在引物酶的作用下,产生一小段RNA作为引物,后期引物会被切除
引物酶
引物
5’
3’
引物的作用简单理解就是引出DNA聚合酶,因为DNA聚合酶必须识别3’端才能结合上去。
③合成子链
DNA聚合酶等以解开的每一条母链为模板,以游离的4种脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的一条子链。
模板
模板
DNA聚合酶
5’
3’
子链延伸方向
子链延伸方向
两条子链延伸方向相反,但都是从5’→3’
随着模板链解旋过程的进行,新合成的子链也在不断延伸。
子链
母链
母链
5’
3’
5’
3’
3’
3’
5’
5’
子链
④重新螺旋
每条新链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构。
三、DNA复制的过程
三、DNA复制的过程
DNA复制总结
时间
场所
所需条件 模板
原料
酶
能量
意义
分裂间期
主要在细胞核(线粒体、叶绿体)
解开的两条母链
4种游离的脱氧核苷酸
解旋酶、DNA聚合酶等
ATP
将遗传信息由亲代传递给子代,保持遗传信息的连续性
半保留复制
半不连续复制
边解旋边复制
多起点双向复制
DNA分子复制的特点
在 DNA复制过程中,一条链的合成是连续的,另一条链的合成是不连续的,所以叫做半不连续复制。
高保真性
三、DNA复制的过程
真核生物 DNA 的复制从多个起点双向开始进行,使得复制能在较短时间内完成。提高了DNA复制的效率。
*原核生物:单起点双向复制
三、DNA复制的过程
思考·讨论
1.如图为DNA分子复制的两个模型,请据图回答下列问题。
(1)图1中的酶1和酶2分别是什么酶?分别作用于图2中哪个部位?
解旋酶
DNA聚合酶
磷酸二酯键
氢键
三、DNA复制的过程
思考·讨论
2.已知果蝇的基因组大小为1.8×108 bp(bp表示碱基对),真核细胞中DNA复制的效率一般为50~100 bp/s。下图为果蝇DNA的电镜照片,图中的泡状结构叫作DNA复制泡,是DNA上正在复制的部分。
请你推测果蝇DNA形成多个复制泡的原因。
由此加快DNA复制的速率,为细胞分裂做好物质准备。
三、DNA复制的过程
思考·讨论
3.【资料】DNA平均每复制109个碱基对才会产生一个错误。
(1)如何保证复制具有如此高的准确性?
(2)DNA进行高精确性的自我复制有何意义?
①DNA具有独特的双螺旋结构,能为复制提供精确的模板。
②碱基具有互补配对的能力,保证了复制能够准确地进行。
使遗传信息从亲代传递给子代,保持遗传信息的连续性,使本物种保持相对稳定和延续。
思考:如果复制出现错误,可能会产生什么影响?
基因突变
高保真性:DNA 复制配错概率极小
遵守严格的碱基配对规律
聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能
复制出错时有即时的校对功能(3'-5'核酸外切酶活性)
1.下列关于DNA复制的叙述,正确的是( )
A.在细胞分裂前的间期,发生DNA复制
B.DNA通过一次复制后产生四个DNA分子
C.DNA双螺旋结构全部解旋后,开始DNA的复制
D.单个脱氧核苷酸在DNA酶的作用下连接合成新的子链
A
当堂检验
2.女性子宫肌瘤细胞中最长的DNA分子可达36 mm,DNA复制速度约为4 μm/min,但复制过程仅需40 min左右即可完成。这是因为DNA分子( )
A.边解旋边复制 B.复制起点多,分段进行复制
C.以半保留方式复制 D.一个复制点双向复制,使子链迅速延伸
B
四、DNA的复制过程中相关计算规律
假设将一个全部被15N标记的双链DNA分子(亲代)转移到含14N的培养液中培养n代,结果如下:
亲 代
第一代
第二代
第三代
15N
15N
15N
15N
14N
14N
14N
14N
14N
14N
21
22
23
DNA复制的计算问题:关键在于正确画出DNA复制3次的图示
四、DNA的复制过程中相关计算规律
假设将一个全部被15N标记的双链DNA分子(亲代)转移到含14N的培养液中培养n代,结果如下:
(1)DNA分子数
①子n代DNA分子总数为______个。
②含15N的DNA分子数为______个。
③含14N的DNA分子数为______个。
④只含15N的DNA分子数为______个。
⑤只含14N的DNA分子数为_________个。
2n
2
2n
0
(2n-2)
四、DNA的复制过程中相关计算规律
假设将一个全部被15N标记的双链DNA分子(亲代)转移到含14N的培养液中培养n代,结果如下:
(2)脱氧核苷酸链数
①子代DNA中脱氧核苷酸链数=_______条。
②亲代脱氧核苷酸链数=______条。
③新合成的脱氧核苷酸链数=__________条。
2n+1
2
(2n+1-2)
四、DNA的复制过程中相关计算规律
假设将一个全部被15N标记的双链DNA分子(亲代)转移到含14N的培养液中培养n代,结果如下:
(3)消耗的脱氧核苷酸数
①若一亲代DNA分子含有某种脱氧核苷酸m个,经过n次复制需消耗游离的该脱氧核苷酸数为________________个。
②若一亲代DNA分子含有某种脱氧核苷酸m个,在第n次复制时,需消耗游离的该脱氧核苷酸数为________________个。
(2n-1)×m
(2n-2n-1)× m
不消耗
DNA复制相关计算题的四个关键点
(1)复制次数:“DNA复制了n次”和“第n次复制”的区别是前者包括所有的复制,后者只包括最后一次复制。
(2)碱基数目:注意碱基的数目单位是“对”还是“个”。
(3)复制模板:在一个DNA复制过程中,无论复制了几次,含有亲代脱氧核苷酸单链的DNA都只有两个。
(4)关键词语:看清是“DNA数”还是“链数”,“含”还是“只含”等。
四、DNA的复制过程中相关计算规律
题型一 有丝分裂中染色体标记问题
1.研究1条染色体,母链标记,培养液不含标记同位素。
(1)过程图解
①培养一个细胞周期:
1条染色体上的双链DNA分子
1条染色体上的两条姐妹染色单体
两条染色体只有1条被标记
复制一次
再复制一次
两条被标记的染色体
四、DNA的复制过程中相关计算规律
题型一 有丝分裂中染色体标记问题
1.研究1条染色体,母链标记,培养液不含标记同位素。
规律总结
若只复制1次,产生的子染色体都带有标记;
若复制2次,产生的子染色体只有一半带有标记。
四、DNA的复制过程中相关计算规律
2.研究1个含有1对同源染色体的细胞,用15N标记细胞核中的DNA,然后放在含14N的培养液中培养,让其连续进行2次有丝分裂,形成4个细胞。
[例1] 1个不含15N的洋葱根尖分生区细胞在含15N标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸的培养液中完成一个细胞周期,然后转入不含15N标记的培养液中继续培养至第二个细胞周期的分裂中期,下图能正确表示该细胞分裂中期的是(只考虑其中一条染色体上的DNA分子) ( )
D
四、DNA的复制过程中相关计算规律
题型二 减数分裂中染色体的标记情况
用15N标记细胞的DNA分子,然后将其放到含14N的培养液中进行正常减数分裂,情况如图所示:
由图可以看出,在减数分裂过程中细胞连续分裂2次,DNA只复制一次,所以四个子细胞中所有的DNA分子都呈“杂合”状态,即15N/14N,子细胞的所有染色体都含15N。
综上分析可知:只要亲代细胞所有的DNA均被标记且只复制1次,产生的子代DNA分子全带15N标记,一次有丝分裂产生的2个子细胞和一次减数分裂产生的4个子细胞,均带15N标记。
[例3] (2024·河北冀州高一质检)假设某果蝇的一个精原细胞的全部染色体DNA分子均用15N标记,然后培养在含14N的培养基中,则该精原细胞经过减数分裂产生的4个精子中,含15N标记的精子数目为( )
A.1 B.2 C.4 D.3
解析:根据DNA分子复制的过程可知,模板链是含15N的DNA链,原料是含14N的脱氧核苷酸,复制一次后,每个DNA分子都是一条链含有15N,另一条链含有14N,因此在减数分裂产生的4个精子中,每一个精子中的DNA组成都是一条链含15N,另一条链含14N,所以减数分裂形成的4个精子中,所有的DNA均含有15N,C正确。
C
当堂检验
3.一个带有同位素15N标记的DNA分子,以含14N的脱氧核苷酸为原料,连续复制三次,在合成的DNA分子中,带有15N标记的DNA分子占( )
A.12.5% B.25% C.50% D.100%
B
4.某一个DNA分子的碱基总数中,腺嘌呤为200个,复制n次后,共消耗周围环境中的腺嘌呤脱氧核苷酸3 000个,则该DNA分子已经复制了几次( )
A.四次 B.五次 C.六次 D.七次
A
练习与应用
1.DNA复制是在为细胞分裂进行必要的物质准备。据此判断下列相关表述是否正确。
(1)DNA 复制与染色体复制是分别独立进行的。 ( )
(2)在细胞有丝分裂的中期,每条染色体是由两条染色单体组成的,所以DNA的复制也是在这个时期完成的。 ( )
2.DNA复制保证了亲子代间遗传信息的连续性。下列关于DNA复制的叙述,正确的是( )
A.复制均在细胞核内进行
B.碱基互补配对原则保证了复制的准确性
C.1个DNA分子复制1次产生4个DNA分子
D.游离的脱氧核苷酸在解旋酶的作用下合成子链
3.将DNA双链都被15N标记的大肠杆菌放在含有14N的培养基中培养,使其分裂3次,下列叙述正确的是 ( )
A.所有的大肠杆菌都含有15N
B.含有15N的大肠杆菌占全部大肠杆菌的比例为1/2
C.含有15N的大肠杆菌占全部大肠杆菌的比例为1/4
D.含有15N的DNA分子占全部DNA分子的比例为1/8
×
×
B
C
实践应用
课后总结
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