精品解析：山西省朔州市怀仁市大地学校2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题

怀仁市大地学校2024-2025学年度下学期第一次月考 高二生物 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名． 准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．考试结束后，将答题卡交回。 第Ⅰ卷 一． 选择题：本题共16个小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 某科研小组用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌，在含有碳酸钙的固体培养基上挑选透明圈菌落作为菌种进行纯化。下列有关说法不正确的是（ ） A. 分离纯化乳酸菌时需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释 B. 出现透明圈菌落的原因是乳酸菌产生的乳酸溶解培养基中的碳酸钙 C. 乳酸菌在-20℃长期保存，需要在菌液中加入一定量的碳酸钙 D. 培养基中加入碳酸钙有利于对菌种的识别和分离 2. 晚清时期女名医曾懿在《中馈录》中记录的四川泡菜的做法如下：泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口上覆一盖，浸于水中，使空气不得入内，则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。凡各种蔬菜均宜，尤以豇豆、青红椒为美，且可经久。下列相关叙述错误的是（ ） A. 泡菜之水需要煮沸，目的是去除氧气和杀菌 B. 加烧酒少许不仅可以调节风味，能抑制杂菌繁殖 C. 覆水坛外沿四周内盛水的目的是抑制酵母菌的有氧呼吸 D. 制作泡菜时要选无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子 3. 垃圾分类是对垃圾收集处置传统方式的改革，是对垃圾进行有效处置的一种科学管理方法。去掉可回收的、不易降解的物质，可以减少垃圾数量达60%以上，从而减少污染。处理生活垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解，下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。相关叙述正确的是（　　） A. 乳制品厂废水中含有大量淀粉，该废水是分离高效降解淀粉菌种的首选样品 B. 该实验中菌液接种到培养基上所用的接种工具只能选择火焰灼烧过的接种环 C. 稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目 D. 由于菌种对碘的分解能力不同，所以菌落①与菌落②产生透明圈的大小不同 4. 下图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法错误的是（ ） A. 上述培育过程中包含有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 B. 愈伤组织的代谢类型是异养需氧型 C. 诱导愈伤组织形成幼苗，需要通过平衡生长调节剂的配比进行调控 D. 植物体细胞杂交技术体现了细胞膜的结构特点，实现了远缘杂交育种 5. 下列有关植物细胞工程的应用的叙述，错误的是（ ） A. 微型繁殖技术不仅能实现种苗的大量繁殖，还能保持优良品种的遗传特性 B. 利用茎尖进行作物脱毒的原因是茎尖的病毒极少，甚至无病毒 C. 利用射线、化学物质等诱变因素处理愈伤组织并进一步培养，可获得突变体 D. 利用植物细胞培养获得的细胞产物都是植物基本的生命活动所必需的物质 6. CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6~5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列叙述错误的是（ ） A. 多次进行步骤①的目的是获得更多已免疫的B淋巴细胞 B. 经两次筛选可得到既能大量增殖又能产生抗CD47抗体的细胞 C. 实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱 D. 对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测 7. 犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(Cpv McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。下列相关叙述，错误的是 A. 在Cpv McAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术 B. 给幼犬注射CPV后，CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应 C. 经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产Cpv McAb D. 对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜 8. 阿霉素是一种抗肿瘤药物，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其他细胞造成伤害，将阿霉素与能特异性识别肿瘤抗原的抗体利用接头连接制成抗体——药物偶联物（ADC）。下列有关叙述错误的是（ ） A. 阿霉素有副作用，正常情况下不能大量、长期使用 B. ADC中的特异性抗体是杀死肿瘤细胞的有效成分 C. 接头既要保持稳定，又不能影响抗体与阿霉素的功能 D. 利用同位素标记的特异性抗体，可用于定位诊断肿瘤 9. 为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森综合征的治疗，科研人员利用人帕金森综合征模型鼠进行如图实验，下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①得到的细胞，其线粒体DNA来自供卵母体 B. 过程②重组细胞培养依次经历了桑椹胚、原肠胚和囊胚时期 C. 过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达 D. 过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能 10. 下表为植物、动物细胞工程有关内容的比较，错误的有几处（ ） 植物细胞工程 动物细胞工程 特殊处理 酶解法去除细胞壁 胰蛋白酶处理配制细胞悬液 融合方法 物理、化学方法 物理、化学、生物方法 典型应用 人工种子，脱毒苗 动物细胞核移植 培养液的区别 生长素、细胞分裂素是不可缺少的调节物质 通常需要加入动物血清 A. 0处 B. 1处 C. 2处 D. 3处 11. 以下关于生物学实验和技术的叙述，正确的是（　　） ①检测生物组织中的还原糖 ②用高倍显微镜观察叶绿体 ③肺炎链球菌的体外转化 ④果酒和果醋的制作 ⑤DNA的粗提取与鉴定 ⑥单克隆抗体的制备 A. ①⑤均需使用酒精溶液 B. ②⑥均可体现细胞膜流动性 C. ③④均制备固体培养基 D. ③⑥均需利用无菌操作技术 12. 如图是PCR扩增的过程示意图，其中叙述正确的是（ ） A. 在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似 B. A过程需要解旋酶的参与 C. Taq DNA聚合酶是在B过程发挥作用的 D. 该过程需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的 13. 下列关于DNA的粗提取与鉴定实验的叙述错误的是（ ） A. 以洋葱为实验材料进行DNA的粗提取必须在无菌条件下进行 B. DNA可溶于2mol/L的NaCl溶液 C. 在提取液中加入预冷的95%的酒精溶液后DNA会与蛋白质分离并析出 D. 溶解后的DNA遇二苯胺试剂在沸水中加热5min冷却后会呈现蓝色 14. 如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（　　） A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 15. 下列有关PCR技术的实验过程叙述，正确的是（　　） A. PCR利用了DNA的热变性原理，实际操作中为了提高循环效率，变性后要迅速冷却，以使引物和模板链尽快结合 B. PCR操作中引物的添加量取决于模板DNA的加入量，如果只加入一个模板DNA进行PCR扩增，需要加入两个不同的引物。 C. 延伸过程是溶液中的四种核糖核苷酸在DNA聚合酶作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 D. 在循环过程中，引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸 16. 如图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①只需用两种限制酶，就可防止酶切产物自身环化 B. 过程②用Ca2＋处理可提高转化成功率 C. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K D. 筛选得到的A包括有农杆菌附着的转化愈伤组织 第Ⅱ卷 二． 非选择题：本大题共5个小题，共52分。 17. 天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。 （1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶____________。 （2）在酒精发酵阶段，对通气的要求是_______(填选项： A.先通气，后密闭;B.先密闭，后通气；C.一直通气;D.一直密闭)，原因_______________。 （3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如图2： ①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如图3。据图2、3分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是______，由此推测，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是______（至少答出两项）。 ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中T2时期的____层和T3时期的_____层的醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的种类、数量均明显减少，主要原因可能是______。 18. 人体感染幽门螺杆菌（Hp）主要会引起慢性胃炎和消化性溃疡等疾病。Hp可产生高活性的尿素酶，口服含14C标记的尿素胶囊，尿素在尿素酶的作用下分解会产生NH3和CO2，一段时间后通过测定呼出的气体是否含有14CO2来诊断是否感染Hp。医务工作者也可以采集胃病患者胃液样本进行微生物的纯化操作，判断是否感染Hp，常用的操作过程如图。已知酚红指示剂在酸性或中性溶液中呈黄色，在碱性溶液中呈红色；NH3极易溶于水，溶于水后显碱性。回答下列问题： （1）医务工作者通常在以______为唯一氮源的培养基中加入______以判定是否感染Hp，若菌落周围出现______，可推测患者感染了Hp。 （2）实验中用到的培养皿、培养基等均需进行灭菌处理，其中必须用湿热灭菌法进行灭菌的是______，不使用干热灭菌法的原因可能是______（写出1点）。 （3）图乙所示的接种工具为______，接种前后均需______接种工具，接种后进行该操作的目的是______。 （4）图丁培养基进行接种前，一般需对所取样液进行稀释处理再进行接种，否则可能会出现______的情况。 19. 接种新冠病毒疫苗是建立群体免疫屏障、防止疫情暴发的主要手段。我国已有3个灭活疫苗、1个腺病毒载体疫苗和1个重组亚单位疫苗批准附条件上市或紧急使用。灭活疫苗是使用非洲绿猴肾（Vero）细胞进行病毒培养扩增，经β-丙内酯灭活的病毒，保留抗原成分以诱导机体产生免疫应答，并加用氢氧化铝佐剂以提高免疫原性。回答下面的问题： （1）非洲绿猴肾（Vero）细胞培养是疫苗研发的主要环节，非洲绿猴肾（Vero）细胞培养时，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是____________与5%二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是____________。在使用合成培养基时通常需加_______________。 （2）把新冠病毒毒株接种于 Vero 细胞培养液在适宜条件下培养，在出现有细胞病变时，收获__________（细胞培养液，Vero 细胞）纯化后加入适宜浓度的β-丙内酯灭活，推测β-丙内酯灭活的成分是病毒的___________，疫苗的有效成分是病毒的_____________。 （3）为检测某种灭活疫苗的安全性，某研究所选择了15只生理状况相同的大鼠，随机分为5组。A组每只注射 0.5μg 疫苗；B组每只注射 5μg；C组每只注射 50μg；D组每只注射 5mg；E组进行X操作。第1次免疫后， 第7d 加强免疫，第 21d 攻毒，第 35d 解剖检验。A、B、C、D均出现抗新冠病毒抗体、且均未出现免疫病理反应。 ①该实验的自变量是________________，因变量是__________________；对E组的X操作是______________________。 ②该实验结果证明______________________________________。 20. 下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题： （1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是_____。 （2）过程①技术为_____。 （3）过程②常用_____激素处理，目的是使B牛_____。 （4）自然条件下，A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵子结合，完成受精作用，这个过程叫_____。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到_____。 （5）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管吸除精核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小牛。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是_____。 21. 图1为胰岛素基因结构与引物位置示意图，图2为pBR322质粒的结构示意图，图中EcoR I、Sma I、 BamH I和Hind Ⅲ为限制酶，箭头或线段所指位点为对应酶切位点。研究人员欲用此质粒构建胰岛素基因的表达载体，培养能产生人胰岛素的大肠杆菌。请回答下列相关问题： （1）若要进行胰岛素基因的扩增常采用_________________技术。已知DNA新链的合成方向是5′→3′，若利用图2中质粒构建基因表达载体，应该选择的引物为___________。 （2）在构建基因表达载体时，选择_____________作为分别切割质粒和目的基因的限制酶，可提高目的基因和运载体的正确连接效率，其原因是_____________________。 （3）成功构建的基因表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_____________________，若利用酵母菌作受体细胞生产胰岛素，与大肠杆菌相比，利用酵母菌生产胰岛素的优势有_________________。若要检测导入酵母菌的胰岛素基因是否成功转录，常用____________________（填“DNA-DNA分子杂交”或“DNA-RNA分子杂交”）技术。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 怀仁市大地学校2024-2025学年度下学期第一次月考 高二生物 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名． 准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．考试结束后，将答题卡交回。 第Ⅰ卷 一． 选择题：本题共16个小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 某科研小组用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌，在含有碳酸钙的固体培养基上挑选透明圈菌落作为菌种进行纯化。下列有关说法不正确的是（ ） A. 分离纯化乳酸菌时需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释 B. 出现透明圈菌落的原因是乳酸菌产生的乳酸溶解培养基中的碳酸钙 C. 乳酸菌在-20℃长期保存，需要在菌液中加入一定量的碳酸钙 D. 培养基中加入碳酸钙有利于对菌种的识别和分离 【答案】C 【解析】 【分析】涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。以菌落的数目来计算原活菌的数目。 【详解】A、涂布平板法计数需要先用无菌水进行稀释，因此分离纯化乳酸菌时需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，A正确； B、碳酸钙使得培养基不透明，乳酸菌可以产生乳酸，乳酸能与碳酸钙反应，溶解培养基中的碳酸钙，使菌落周围出现透明圈，B正确； C、乳酸菌在-20℃长期保存，需要在菌液中加入一定量的甘油，不能加碳酸钙保存，C错误； D、培养基中加入碳酸钙有利于对菌种的识别和分离，出现透明圈的即为乳酸菌，D正确。 故选C。 2. 晚清时期女名医曾懿在《中馈录》中记录的四川泡菜的做法如下：泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口上覆一盖，浸于水中，使空气不得入内，则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。凡各种蔬菜均宜，尤以豇豆、青红椒为美，且可经久。下列相关叙述错误的是（ ） A. 泡菜之水需要煮沸，目的是去除氧气和杀菌 B. 加烧酒少许不仅可以调节风味，能抑制杂菌繁殖 C. 覆水坛外沿四周内盛水的目的是抑制酵母菌的有氧呼吸 D. 制作泡菜时要选无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子 【答案】C 【解析】 【分析】泡菜的制作：①菌种：乳酸菌。②发酵原理：在无氧条件下，将葡萄糖分解成乳酸。③腌制条件：控制腌制的时间、温度和食盐的用量，防止杂菌污染，严格密封。 【详解】A、将水煮沸，可以杀菌和除去水中的氧气，A正确； B、在制作泡菜过程中，加入烧酒可以调节风味和抑制杂菌繁殖，B正确； C、乳酸菌是厌氧型微生物，所以覆水坛外沿四周内盛水的目的是为乳酸菌提供无氧的环境，促进进行乳酸发酵，C错误； D、制作泡菜时要选用火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的泡菜坛子，D正确。 故选C。 3. 垃圾分类是对垃圾收集处置传统方式的改革，是对垃圾进行有效处置的一种科学管理方法。去掉可回收的、不易降解的物质，可以减少垃圾数量达60%以上，从而减少污染。处理生活垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解，下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。相关叙述正确的是（　　） A. 乳制品厂废水中含有大量淀粉，该废水是分离高效降解淀粉菌种的首选样品 B. 该实验中菌液接种到培养基上所用的接种工具只能选择火焰灼烧过的接种环 C. 稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目 D. 由于菌种对碘的分解能力不同，所以菌落①与菌落②产生透明圈的大小不同 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法的接种工具是接种环，稀释涂布平板法的接种工具是涂布器。稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。淀粉遇碘液变蓝，在含淀粉的培养基中滴加碘液，淀粉分解菌菌落周围的淀粉被分解，会出现透明圈。 【详解】A、乳制品不会含有大量的淀粉，所以乳制品厂废水并不是分离高效降解淀粉菌种的首选样品，A错误； B、该实验中菌液接种到培养基上所用的方法应为稀释涂布平板法，接种工具为涂布器，B错误； C、稀释涂布平板法是微生物常用的接种方法，除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目，C正确； D、菌落①与菌落②产生透明圈的大小不同是因为菌种对淀粉的分解能力不同，D错误。 故选C。 4. 下图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法错误的是（ ） A. 上述培育过程中包含有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 B. 愈伤组织的代谢类型是异养需氧型 C. 诱导愈伤组织形成幼苗，需要通过平衡生长调节剂的配比进行调控 D. 植物体细胞杂交技术体现了细胞膜的结构特点，实现了远缘杂交育种 【答案】A 【解析】 【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术； 2、植物组织培养：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、上述培育过程中不包含减数分裂过程（无形成配子阶段），A错误； B、愈伤组织不含叶绿体，不能进行光合作用制造有机物，因此其代谢类型是异养需氧型，B正确； C、诱导愈伤组织分化成幼苗，需要通过平衡生长调节剂（生长素和细胞分裂素）的配比进行调控，C正确。 D、植物体细胞杂交技术体现了植物细胞膜的结构特点，即细胞膜具有一定的流动性，实现了远缘杂交育种，D正确； 故选A。 5. 下列有关植物细胞工程的应用的叙述，错误的是（ ） A. 微型繁殖技术不仅能实现种苗的大量繁殖，还能保持优良品种的遗传特性 B. 利用茎尖进行作物脱毒的原因是茎尖的病毒极少，甚至无病毒 C. 利用射线、化学物质等诱变因素处理愈伤组织并进一步培养，可获得突变体 D. 利用植物细胞培养获得的细胞产物都是植物基本的生命活动所必需的物质 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养技术：（1）过程：离体的植物组织，器官或细胞(外植体) →愈伤组织→胚状体→植株(新植体)。（2）原理：植物细胞的全能性。（3）条件：①细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等) ；②一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素)。（4）植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径(包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等)、作物新品种的培育(单倍体育种、突变体的利用)、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、微型繁殖技术是一种无性繁殖技术，不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，还可以保持优良品种的遗传特性，A正确； B、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因此切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，B正确； C、愈伤组织的细胞分裂旺盛，易受到培养条件和诱变因素（如射线、化学物质等）的影响而产生突变，从产生突变的个体中可以筛选出对人们有用的突变体，C正确； D、在植物细胞培养过程中，植物代谢会产生一些一般认为不是植物基本的生命活动所必需的产物——次生代谢产物，D错误。 故选D。 6. CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6~5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列叙述错误的是（ ） A. 多次进行步骤①的目的是获得更多已免疫的B淋巴细胞 B. 经两次筛选可得到既能大量增殖又能产生抗CD47抗体的细胞 C. 实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱 D. 对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于实验组可验证上述推测 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备： （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠体内获得相应的B淋巴细胞。 （2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 （3）克隆化培养和抗体检测。 （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、步骤①是向免疫小鼠体内注射特定的抗原，多次进行步骤①的目的是获得更多已免疫的B淋巴细胞，A正确； B、第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞，故经两次筛选可得到既能大量增殖又能产生抗CD47抗体的细胞，B正确； C、CO2可维持pH的稳定，实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需放入CO2培养箱，C正确； D、根据单一变量原则可知，应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系为对照，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，没有抗体抑制，CD47对巨噬细胞有抑制作用，对照组中吞噬细胞的吞噬指数显著低于实验组可验证上述推测，D错误。 故选D。 7. 犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(Cpv McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。下列相关叙述，错误的是 A. 在Cpv McAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术 B. 给幼犬注射CPV后，CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应 C. 经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产Cpv McAb D. 对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜 【答案】C 【解析】 【分析】由题文和选项的描述可知，该题考查学生对单克隆抗体的制备过程及动物细胞培养的相关知识的识记和理解能力。 【详解】在单克隆抗体的制备过程中，使用的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合技术，A正确；给幼犬注射CPV后，会激发体液免疫，产生相应的抗体，因此若 CPV抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应，B正确；经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞并不都符合人们需要，还需经过克隆化培养和抗体检测，筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞，C错误；对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等要适宜，D正确。 8. 阿霉素是一种抗肿瘤药物，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其他细胞造成伤害，将阿霉素与能特异性识别肿瘤抗原的抗体利用接头连接制成抗体——药物偶联物（ADC）。下列有关叙述错误的是（ ） A. 阿霉素有副作用，正常情况下不能大量、长期使用 B. ADC中的特异性抗体是杀死肿瘤细胞的有效成分 C. 接头既要保持稳定，又不能影响抗体与阿霉素的功能 D. 利用同位素标记的特异性抗体，可用于定位诊断肿瘤 【答案】B 【解析】 【分析】分析题干信息可知：阿霉素是一种抗肿瘤抗生素，没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其它细胞造成伤害，即具有较大的副作用。为了解决这一问题，可将阿霉素与能特异性识别肿瘤抗原的抗体结合制成抗体–药物偶联物（ADC）。 【详解】A、阿霉素在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其它细胞造成伤害，说明阿霉素有副作用，正常情况下不能大量、长期使用，A正确； B、特异性抗体能和肿瘤抗原结合形成复合物，但是不能杀死肿瘤细胞，B错误； C、接头既要保持稳定，避免阿霉素从抗体中脱落，同时也不能影响抗体与阿霉素的功能，C正确； D、抗体和抗原的结合具有特异性，故利用同位素标记的特异性抗体在特定组织中的成像技术，可定位诊断肿瘤，D正确。 故选B。 9. 为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森综合征的治疗，科研人员利用人帕金森综合征模型鼠进行如图实验，下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①得到的细胞，其线粒体DNA来自供卵母体 B. 过程②重组细胞培养依次经历了桑椹胚、原肠胚和囊胚时期 C. 过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达 D. 过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能 【答案】B 【解析】 【分析】动物胚胎发育的基本过程： (1)受精场所是母体的输卵管。 (2)卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。 (3)桑椹胚：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，是全能细胞。 (4)囊胚：细胞开始出现分化(该时期细胞的全能性仍比较高) ，聚集在胚胎端个体较大的细胞称为内细胞团， 将来发育成胎儿的各种组织，中间的空腔称为囊胚腔。 (5)原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。 【详解】A、过程①为核移植，该过程得到的细胞，其线粒体DNA来自供卵母体，A正确； B、过程②重组细胞培养依次经历了卵裂、桑椹胚、囊胚和原肠胚时期，B错误； C、过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达，使之分化形成神经元，C正确； D、该过程属于自体移植，不会发生免疫排斥反应，因此过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能，D正确。 故选B。 10. 下表为植物、动物细胞工程有关内容的比较，错误的有几处（ ） 植物细胞工程 动物细胞工程 特殊处理 酶解法去除细胞壁 胰蛋白酶处理配制细胞悬液 融合方法 物理、化学方法 物理、化学、生物方法 典型应用 人工种子，脱毒苗 动物细胞核移植 培养液的区别 生长素、细胞分裂素是不可缺少的调节物质 通常需要加入动物血清 A. 0处 B. 1处 C. 2处 D. 3处 【答案】A 【解析】 【分析】细胞工程包括植物细胞工程和动物细胞工程，植物细胞工程的技术包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术；动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。 【详解】特殊处理方面：在植物细胞杂交时首先运用纤维素酶或果胶酶去除植物细胞的细胞壁，而在动物细胞培养过程中要运用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞，正确；融合方法方面：植物体细胞杂交过程中运用物理法和化学法将原生质体进行融合，没有生物方法，而动物细胞融合可以利用三种方法，正确；典型应用方面：可以利用植物组织培养技术获得脱毒苗和人工种子，动物细胞工程中利用动物细胞核移植技术获得克隆动物，正确；培养液的区别方面：植物组织培养过程中生长素、细胞分裂素是不可缺少的调节物质，二者的比例调节可以促使生根、生芽等，动物细胞培养过程中为了保证动物细胞的正常生长，动物血清是不可缺少的成分。全部正确，没有错误。 故选A。 11. 以下关于生物学实验和技术的叙述，正确的是（　　） ①检测生物组织中的还原糖 ②用高倍显微镜观察叶绿体 ③肺炎链球菌的体外转化 ④果酒和果醋的制作 ⑤DNA的粗提取与鉴定 ⑥单克隆抗体的制备 A. ①⑤均需使用酒精溶液 B. ②⑥均可体现细胞膜流动性 C. ③④均制备固体培养基 D. ③⑥均需利用无菌操作技术 【答案】D 【解析】 【分析】1、斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）。叶绿体主要分布于绿色植物的叶肉细胞，呈绿色，扁平的椭球形或球形，散布于细胞质中，可用高倍显微镜观察其形态和分布。 2、肺炎链球菌转化实验包括格里菲思体内转化实验和艾弗里体外转化实验，其中格里菲思体内转化实验证明S型细菌中存在某种“转化因子”，能将R型细菌转化为S型细菌；艾弗里体外转化实验证明DNA是遗传物质。 3、DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色 【详解】A、①检测生物组织中的还原糖不需要使用酒精；⑤DNA的粗提取与鉴定需要使用冷却的酒精，因为DNA不溶于酒精，蛋白质则溶于酒精，加酒精可以使DNA析出,与蛋白质分离，A错误； B、②用高倍显微镜观察叶绿体，不能体现细胞膜的流动性；⑥单克隆抗体的制备需要骨髓瘤细胞与B淋巴细胞进行细胞融合，能体现细胞膜的流动性，B错误； C、③肺炎链球菌的体外转化用的是固体培养基，④果酒和果醋的制作用液体培养基，C错误； D、③肺炎链球菌体外转化涉及到微生物培养，需利用无菌操作技术，防止杂菌污染，⑥单克隆抗体的制备涉及到细胞培养，需要在无菌、无毒的条件下操作，也需利用无菌操作技术，D正确。 故选D。 12. 如图是PCR扩增的过程示意图，其中叙述正确的是（ ） A. 在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似 B. A过程需要解旋酶的参与 C. Taq DNA聚合酶是在B过程发挥作用的 D. 该过程需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的 【答案】A 【解析】 【分析】PCR技术： 1.概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 2.原理：DNA复制。 3.前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物。 4.条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 5.过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【详解】A、PCR技术扩增DNA的原料是DNA复制，因此在该过程中DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似，A正确； B、A过程在高温条件下完成，不需要解旋酶的参与，B错误； C、Taq DNA聚合酶能催化DNA子链的延伸，在过程C中发挥作用，C错误； D、该过程需要一对特异性的引物，这一对引物的序列不能是互补的，否则会 因为碱基互补配对无法发挥作为引物的作用，D错误。 故选A。 13. 下列关于DNA的粗提取与鉴定实验的叙述错误的是（ ） A. 以洋葱为实验材料进行DNA的粗提取必须在无菌条件下进行 B. DNA可溶于2mol/L的NaCl溶液 C. 在提取液中加入预冷的95%的酒精溶液后DNA会与蛋白质分离并析出 D. 溶解后的DNA遇二苯胺试剂在沸水中加热5min冷却后会呈现蓝色 【答案】A 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理： 1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。 2、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、DNA的粗提取不需要在无菌条件下进行，A错误； B、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液，B正确； C、在提取液中加入95%的冷酒精，DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精，则DNA会与蛋白质分离并析出，C正确； D、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，D正确。 故选A。 14. 如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（　　） A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 【答案】A 【解析】 【详解】①是氢键，是解旋酶的作用位点； ②是磷酸二酯键，限制酶可将其断裂；③是磷酸二酯键，DNA连接酶可催化其形成，BCD错误，A正确。 15. 下列有关PCR技术的实验过程叙述，正确的是（　　） A. PCR利用了DNA的热变性原理，实际操作中为了提高循环效率，变性后要迅速冷却，以使引物和模板链尽快结合 B. PCR操作中引物的添加量取决于模板DNA的加入量，如果只加入一个模板DNA进行PCR扩增，需要加入两个不同的引物。 C. 延伸过程是溶液中的四种核糖核苷酸在DNA聚合酶作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 D. 在循环过程中，引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸 【答案】D 【解析】 【分析】生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术——PCR技术。设计引物时，引物要和相应的模板序列互补配对。PCR过程：第一步：变性，加热至90～95℃，DNA解链为单链；第二步：退火，冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合；第三步：延伸，加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 【详解】A、PCR利用了DNA的热变性原理，实际操作中变性后要迅速冷却，以使引物和模板链尽快结合，可提高扩增产物的特异性，不能提高循环效率，一个循环所用的时间主要决定于延伸过程，A错误； B、PCR操作中引物的添加量与模板DNA的量以及反应体系有关，通常情况下进行PCR扩增，需要加入一对引物，B错误； C、延伸过程中需要DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、ATP，不是核糖核苷酸，C错误； D、在循环过程中，引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，D正确。 故选D。 16. 如图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①只需用两种限制酶，就可防止酶切产物自身环化 B. 过程②用Ca2＋处理可提高转化成功率 C. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K D. 筛选得到的A包括有农杆菌附着的转化愈伤组织 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、过程①要用两种特定的限制酶，切割出两个不同的黏性末端序列，从而防止酶切产物自身环化， A 错误； B、农杆菌属于原核生物，所以过程②用Ca2＋处理，使其成为感受态细胞，可提高转化成功率， B 正确； C、根据题意可知，报告基因的产物能催化无色物质 K 呈现蓝色，而愈伤组织表面残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织能在含除草剂的培养基中生长，因此过程③应在培养基中加入除草剂和物质 K , C 正确； D、筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织和农杆菌附着的转化愈伤组织， D 正确。 故选A。 第Ⅱ卷 二． 非选择题：本大题共5个小题，共52分。 17. 天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。 （1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶____________。 （2）在酒精发酵阶段，对通气的要求是_______(填选项： A.先通气，后密闭;B.先密闭，后通气；C.一直通气;D.一直密闭)，原因_______________。 （3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如图2： ①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如图3。据图2、3分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是______，由此推测，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是______（至少答出两项）。 ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中T2时期的____层和T3时期的_____层的醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的种类、数量均明显减少，主要原因可能是______。 【答案】（1）酶促反应需要适宜的温度条件 （2） ①. A ②. 通气能提高酵母菌的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物 （3） ①. 先快速增长后趋于稳定（或先快速增长后增长减慢） ②. 氧气、营养物质、pH等 ③. B ④. A ⑤. 营养物质消耗等、醋酸过多、pH过低 【解析】 【分析】1.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。 2.醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。 3.泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。 【小问1详解】 分析流程图可知，糖化阶段就是淀粉在淀粉酶以及麦芽糖酶的作用下水解产生葡萄糖，由于在最适温度条件下酶的活性最强，因此在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度。 【小问2详解】 酵母菌属于兼性厌氧型微生物，即在有氧呼吸的条件下能够大量繁殖，在无氧呼吸条件下无氧呼吸产生酒精。因此在酒精发酵阶段，发酵罐先通气，后密闭，故选B，通气的目的是提高酵母菌的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。 【小问3详解】 ①据图2、3分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌密度先快速增长后趋于稳定，由此推测，环境因素中的氧气、营养物质、pH会影响醋酸杆菌种群密度的变化。 ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。乳酸发酵是乳酸菌进行的无氧呼吸，因此发酵过程中，发酵缸中T2时期的B层和T3时期的A（或不翻动，或下）层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗、醋酸过多、pH过低，抑制了乳酸菌的生长。 【点睛】熟知果酒和果醋的制作原理和操作流程是解答本题的关键，掌握酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的代谢类型和生长特点是解答本题的另一关键，正确辨析图示的信息并能合理的利用是解答本题的前提。 18. 人体感染幽门螺杆菌（Hp）主要会引起慢性胃炎和消化性溃疡等疾病。Hp可产生高活性的尿素酶，口服含14C标记的尿素胶囊，尿素在尿素酶的作用下分解会产生NH3和CO2，一段时间后通过测定呼出的气体是否含有14CO2来诊断是否感染Hp。医务工作者也可以采集胃病患者胃液样本进行微生物的纯化操作，判断是否感染Hp，常用的操作过程如图。已知酚红指示剂在酸性或中性溶液中呈黄色，在碱性溶液中呈红色；NH3极易溶于水，溶于水后显碱性。回答下列问题： （1）医务工作者通常在以______为唯一氮源的培养基中加入______以判定是否感染Hp，若菌落周围出现______，可推测患者感染了Hp。 （2）实验中用到的培养皿、培养基等均需进行灭菌处理，其中必须用湿热灭菌法进行灭菌的是______，不使用干热灭菌法的原因可能是______（写出1点）。 （3）图乙所示的接种工具为______，接种前后均需______接种工具，接种后进行该操作的目的是______。 （4）图丁培养基进行接种前，一般需对所取样液进行稀释处理再进行接种，否则可能会出现______的情况。 【答案】（1） ①. 尿素 ②. 酚红指示剂 ③. 红色环带 （2） ①. 培养基 ②. 干热灭菌法会使培养基中的水分蒸发；干热灭菌法温度过高导致培养基营养成分被破坏 （3） ①. 接种环 ②. 灼烧 ③. 杀死接种环上残留的菌种，避免微生物污染环境和感染操作者 （4）培养皿中菌落数目过多或菌落相连 【解析】 【分析】培养基选择分解尿素的微生物的原理:培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 【小问1详解】 幽门螺杆菌含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp，由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的NH3，NH3能使培养基中的酚红指示剂变成红色，故菌落周围会出现红色环带。 【小问2详解】 培养基要保留水分，且干热灭菌法温度过高会导致培养基营养成分被破坏，因此必须用湿热灭菌法进行灭菌。 【小问3详解】 乙图采用的是平板划线法进行接种，因此使用的工具是接种环，接种前后都要进行灼烧灭菌。接种后要杀死接种环上残留的菌种，避免微生物污染环境和感染操作者。 【小问4详解】 丁采用的是稀释涂布平板法，一般进行接种前，一般需对所取样液进行稀释处理再进行接种，避免培养皿中菌落数目过多或菌落相连的情况出现。 19. 接种新冠病毒疫苗是建立群体免疫屏障、防止疫情暴发的主要手段。我国已有3个灭活疫苗、1个腺病毒载体疫苗和1个重组亚单位疫苗批准附条件上市或紧急使用。灭活疫苗是使用非洲绿猴肾（Vero）细胞进行病毒培养扩增，经β-丙内酯灭活的病毒，保留抗原成分以诱导机体产生免疫应答，并加用氢氧化铝佐剂以提高免疫原性。回答下面的问题： （1）非洲绿猴肾（Vero）细胞培养是疫苗研发的主要环节，非洲绿猴肾（Vero）细胞培养时，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是____________与5%二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是____________。在使用合成培养基时通常需加_______________。 （2）把新冠病毒毒株接种于 Vero 细胞培养液在适宜条件下培养，在出现有细胞病变时，收获__________（细胞培养液，Vero 细胞）纯化后加入适宜浓度的β-丙内酯灭活，推测β-丙内酯灭活的成分是病毒的___________，疫苗的有效成分是病毒的_____________。 （3）为检测某种灭活疫苗的安全性，某研究所选择了15只生理状况相同的大鼠，随机分为5组。A组每只注射 0.5μg 疫苗；B组每只注射 5μg；C组每只注射 50μg；D组每只注射 5mg；E组进行X操作。第1次免疫后， 第7d 加强免疫，第 21d 攻毒，第 35d 解剖检验。A、B、C、D均出现抗新冠病毒抗体、且均未出现免疫病理反应。 ①该实验的自变量是________________，因变量是__________________；对E组的X操作是______________________。 ②该实验结果证明______________________________________。 【答案】（1） ①. 95%空气 ②. 维持培养液的pH ③. 血清 （2） ①. 细胞培养液 ②. RNA ③. 蛋白质 （3） ①. 疫苗注射的剂量 ②. 是否出现抗体及有无免疫病理反应 ③. 每只不注射疫苗 ④. 在注射该种灭活疫苗剂量不大于5mg时是安全的，能有效预防新冠病毒传染且无免疫病理反应 【解析】 【分析】1、在动物细胞培养中，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要95％空气与5％二氧化碳的气体条件，该气体条件不仅能满足细胞正常代谢过程中氧气的需求，还能调节培养液的pH。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境。 2、分析题意可知，该实验的自变量是疫苗注射的剂量，因变量是是否出现抗体及有无免疫病理反应；对E组的X操作是每只不注射疫苗。该实验结果证明该种灭活疫苗是安全的，能有效预防新冠病毒传染且无免疫病理反应。 【小问1详解】 在动物细胞培养中，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要95%空气与5%二氧化碳的气体条件，其中二氧化碳的作用是调节培养液的pH；由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，动物血清作用是为为培养细胞提供必要的营养物质、激素和各种细胞生长增殖必需的微量物质。 【小问2详解】 把新冠病毒毒株接种于 Vero 细胞培养液在适宜条件下培养，在出现有细胞病变时，收获细胞培养液纯化后加入适宜浓度的β-丙内酯灭活，并加用氢氧化铝佐剂以提高免疫原性；病毒主要由RNA和蛋白质组成，其中用作疫苗的是病毒的蛋白质，同时为减少其毒性，需要用β-丙内酯灭活的成分是病毒的RNA。 【小问3详解】 ①分析实验目的、分组、操作及结果可知，本实验探究疫苗注射的剂量是否对机体安全，能否有效预防新冠病毒传染且无免疫病理反应，因此该实验的自变量是疫苗注射的剂量，因变量是是否出现抗体及有无免疫病理反应；对E组的X操作是每只不注射疫苗，作为空白对照。 ②由于ABCD4组均出现抗新冠病毒抗体、且均未出现免疫病理反应，所以该实验结果证明在注射该种灭活疫苗剂量不大于5mg时是安全的，能有效预防新冠病毒传染且无免疫病理反应。 【点睛】该题考查有关病毒培养和免疫的相关知识点，要求学生在熟练掌握相关知道的基础上，能准确分析题干的信息，再应用相应的知识进行作答。 20. 下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题： （1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是_____。 （2）过程①技术为_____。 （3）过程②常用_____激素处理，目的是使B牛_____。 （4）自然条件下，A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵子结合，完成受精作用，这个过程叫_____。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到_____。 （5）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管吸除精核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小牛。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是_____。 【答案】（1）方法Ⅰ的培育为有性生殖过程，方法Ⅱ的培育为无性生殖过程 （2）动物体细胞核移植技术 （3） ①. 促性腺 ②. 超数排卵 （4） ①. 精子获能 ②. 两个极体 （5）后代是纯合子 【解析】 【分析】分析题图：图示是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法。方法Ⅰ是采用体外受精技术获得试管牛E的过程，因此试管牛E属于有性生殖产物；方法Ⅱ是采用核移植技术获得克隆牛F的过程，因此克隆牛F属于无性生殖产物。 【小问1详解】 方法Ⅰ中试管牛由受精卵发育而来，为有性生殖；方法Ⅱ中克隆牛通过核移植方式培育而来，为无性生殖。 【小问2详解】 图中①过程为体细胞核与去核卵母细胞的融合过程，称为动物体细胞核移植技术。 【小问3详解】 过程②通常用促性腺激素处理，以达到一次性排出多个卵子的目的，即超数排卵。 【小问4详解】 精子必须在母牛的生殖道内获能才能与卵子结合，卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到两个极体。 【小问5详解】 细胞松弛素B处理未受精的卵细胞，可使其染色体加倍，处理后的受精卵发育成的个体类似于植物单倍体育种技术，因此优点是后代是纯合子。 【点睛】本题结合试管牛和克隆牛产生过程图，考查动物体细胞核移植技术、体外受精技术，要求考生识记动物体细胞核移植技术的概念及操作过程，明确核移植形成的克隆动物属于无性生殖产物；识记体外受精过程，明确体外受精形成的试管动物属于有性生殖产物是解答本题的关键。 21. 图1为胰岛素基因结构与引物位置示意图，图2为pBR322质粒的结构示意图，图中EcoR I、Sma I、 BamH I和Hind Ⅲ为限制酶，箭头或线段所指位点为对应酶切位点。研究人员欲用此质粒构建胰岛素基因的表达载体，培养能产生人胰岛素的大肠杆菌。请回答下列相关问题： （1）若要进行胰岛素基因的扩增常采用_________________技术。已知DNA新链的合成方向是5′→3′，若利用图2中质粒构建基因表达载体，应该选择的引物为___________。 （2）在构建基因表达载体时，选择_____________作为分别切割质粒和目的基因的限制酶，可提高目的基因和运载体的正确连接效率，其原因是_____________________。 （3）成功构建的基因表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_____________________，若利用酵母菌作受体细胞生产胰岛素，与大肠杆菌相比，利用酵母菌生产胰岛素的优势有_________________。若要检测导入酵母菌的胰岛素基因是否成功转录，常用____________________（填“DNA-DNA分子杂交”或“DNA-RNA分子杂交”）技术。 【答案】 ①. PCR ②. 引物4、引物5 ③. BamH I和Hind Ⅲ ④. 这两种酶能切割质粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，避免质粒和目的基因自连及反接 ⑤. 提供RNA聚合酶特异性识别和结合的位点，驱动基因的转录 ⑥. 酵母菌为真核细胞，含有内质网和高尔基体，可对核糖体合成的蛋白质进行加工 ⑦. DNA-RNA分子杂交 【解析】 【分析】基因工程的基本操作程序包括四个步骤：目的基因的获得、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。其中需要用的基本工具有限制性核酸内切酶（简称限制酶）、DNA连接酶和运载体。限制酶能够识别DNA上特定的碱基序列，将DNA从特定的位置切开，用同种的限制酶处理目的DNA和运载体，得到相同的末端，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接起来，形成重组运载体。 【详解】（1）PCR（聚合酶链式反应）技术可以利用少量的DNA在短时间内获得大量的相同DNA。引物1-4的模板方向是5'-3'（从左到右），由于DNA新链的合成方向是5′→3′，所以合成胰岛素基因只能选择引物3和引物4。同样，对于引物5-8，只能选择引物5和引物6才能合成胰岛素基因。只有引物4和引物5扩增出来的胰岛素基因含有和题图2相同的两种限制酶的识别位点，而引物3和引物6扩增出来的基因片段不含有，因此应选择的引物为4和5。 （2）结合题图1和题图2，要提高目的基因和运载体的正确连接效率，在构建基因表达载体时，应选择BamH I和Hind Ⅲ，因为这两种酶能同时切割质粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，这样就避免了质粒和目的基因自连及反接。 （3）启动子的作用是提供RNA聚合酶特异性识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA。大肠杆菌属于原核生物，酵母菌属于真核生物，因此与大肠杆菌相比，酵母细胞含有内质网和高尔基体。利用酵母菌生产胰岛素，可对核糖体合成的蛋白质进行加工。为了检测目的基因是否成功转录，即检测是否存在胰岛素基因对应的mRNA，需用放射性同位素标记的胰岛素基因作探针与mRNA杂交，属于DNA-RNA分子杂交技术。 【点睛】基因工程中，运载体的选择标准之一就是，运载体上要有多种限制酶的酶切位点。而且，获得目的基因所使用的限制酶一定要与切割运载体的限制酶一样，如此获得的末端才能再次连接在一起。把握住这一点，是突破本题关键。其他填空，主要涉及记忆性内容。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $