精品解析：天津市大良中学2024-2025学年第二下学期第一次月考生物试卷

高二生物3月验收 一、选择题：共12题，每题4分，共48分。 1. 中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述正确的是（ ） A. 腐乳制作过程中，起主要作用的是曲霉 B. 酸奶制作过程中，密封处理不利于乳酸菌发酵 C. 馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO2 D. 泡菜制作过程中，密封处理有利于醋酸菌的生长 2. 小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行实验(如下图)，下列做法恰当的是（ ） A. 加入适量的酵母菌 B. 一直打开阀b通气 C. 偶尔打开阀a几秒钟，一直关紧阀b D. 把发酵装置放到4 ℃冰箱中进行实验 3. 下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，错误的是（ ） A. 步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰旁进行 B. 步骤④中，经数次划线后培养，可以分离得到单菌落 C. 步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灭菌处理 D. 步骤①中，倒入的培养基冷却后，盖上培养皿的皿盖 4. 下图表示不同的限制酶在目的基因的提取和基因表达载体的构建中的作用，下列有关叙述正确的是（ ） A. 限制酶沿识别序列的中轴线两侧将DNA两条链切开 B. 在图1和图2中将分别产生2个和1个黏性末端 C. 限制酶切割的是特定核苷酸序列之间的磷酸二酯键和氢键 D. 图示中酶1、酶2和酶3必须是同一类限制酶 5. 将Oct3/4、Sox2、c—Myc和K1f4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞后。置于培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养。2～3周后，细胞会呈现出与ES细胞类似的形态和活跃分裂能力，这样的细胞称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列说法错误的是（ ） A. 逆转录病毒充当了载体 B. 从获取途径看，iPS细胞难于胚胎干细胞，不宜推广使用 C. 体细胞经诱导产生iPS细胞后，细胞的分化程度下降 D. 欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，应设置不转入外源基因的对照组 6. 下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，正确的有（ ） A. PCR反应中，复性阶段需要DNA聚合酶连接磷酸二酯键 B. PCR反应中，延伸阶段需要反应体系中的ATP提供能量 C. 电泳时，DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA的大小和构象等有关 D. 电泳时，将PCR产物、核酸染料和电泳指示剂混合后注入凝胶加样孔 7. 孤独症谱系障碍与基因S的变异有关，科研人员对猕猴的基因S进行编辑，首次获得孤独症模型猴，然后再通过动物细胞工程和胚胎工程技术获得更多克隆猴，下列叙述正确的是（ ） A. 在克隆动物时，可以用优良动物MII期卵母细胞做供体 B. 培养早期胚胎的培养基中需要有糖类、氨基酸等营养条件，但无需提供气体环境 C. 胚胎移植的过程中，需要选择具有优良遗传性状的雌性个体作为受体 D. 为获得更多克隆猴，可对早期胚胎进行分割，经移植获得同卵双胎或多胎 8. 在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（ ） A. 单倍体育种 B. 得到“番茄一马铃薯”杂种植株 C. 利用基因工程培育抗棉铃虫的植株 D. 利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株 9. 下图表示人的受精卵在卵裂期过程中，DNA总量、每个细胞体积、所有细胞体积之和、细胞数量的变化趋势（横坐标为发育时间）。其中正确的是（ ） A. ①② B. ①③ C. ②④ D. ③④ 10. 如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。如图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是（ ） 限制酶 AluⅠ BamHⅠ SmaⅠ Sau3AⅠ 识别序列 切割位点 AG↓CT TC↑GA G↓GATCC CCTAG↑G CCC↓GGG GGG↑CCC ↓GATC CTAG↑ A. ②④⑤对应的识别序列均能被Sau3AⅠ识别并切割 B. Sau3AⅠ和BamHⅠ切割产生的片段能够相连，但连接后的片段两者都不能再切割 C. BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键 D. T4DNA连接酶即能连接①③，也能连接②⑤，但后者连接效率低 11. 为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。下列说法错误的是（ ） A. 图中筛选1和筛选2所依据的基本原理是相同的 B. 可将小鼠甲脾脏剪碎并用胰蛋白酶等处理后加培养液制成单细胞悬液 C. 实验前必须给小鼠甲注射病毒A以获得产生相应抗体的B淋巴细胞 D. 杂交瘤细胞需要在含95%空气和5%CO2的混合气体培养箱中进行培养 12. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 粗提取的DNA中可能含有蛋白质 B. 可利用DNA在酒精中溶解度较大的特点来提取DNA C 用二苯胺试剂鉴定DNA时，沸水浴加热后呈蓝色 D. 提取DNA可溶解在2molL的NaCl溶液中 二、非选择题：共52分 13. 营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株在基本培养基中不能生长，但能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量原料。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。 （1）培养基灭菌常用的方法是_____。过程①的接种方法为_____图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____。 （2）进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至_____（填“基本”或“完全”）培养基上，原因是_____。 （3）利用影印法培养优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，所以，挑取_____（填“菌落A”或“菌落B”）即为所需的氨基酸缺陷型菌株。 （4）分离计数土壤中自然突变的氨基酸缺陷型菌株的过程步骤①取5g土壤加入45mL无菌水中充分震荡得到土壤悬液。步骤②中，将1mL土壤悬液进行梯度稀释，每种稀释度经过步骤③各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.2mL），经适当培养后，在稀释倍数为103和104两组平板上的菌落数分别为49、47、48和2、7、6．据此可得出每毫升土壤悬液中的活菌数为_____个。接种后的平板应_____，以防止冷凝水滴落造成污染。 14. 下图表示用青菜（2N=20）与油菜（2N=38）培育种间杂种的过程。据图回答：（胚轴发育为连接茎和根的部分）。 （1）研究发现花粉原生质体及其自身融合体不能形成植株，且其大小与油菜胚轴原生质体差异显著。通常，在将两种原生质体混合前，需用异硫氰酸荧光素活染花粉原生质体，其主要目的是便于利用显微镜鉴别出_________。 （2）实验人员取两种形态特征有明显差异的杂种植株甲、乙，分别利用其根尖细胞制作临时装片，观察其正常体细胞分裂中期染色体数分别是48、58，若多个细胞可以融合，据此，可推测甲是_________倍体，产生乙植株的原因最可能是_________。 （3）将采集到的青菜花粉和剪碎的油菜胚轴分别置于含有_________酶的溶液中，搅拌并保温一段时间后，过滤、离心，获得两种原生质体。 （4）取两种原生质体混合液，滴加到含有_________（化学物质）的融合液中，静置、保温一段时间，以诱导原生质体融合。再转移至液体浅层培养基中培养，通过_________过程形成愈伤组织，诱导分化出芽后，再转移至生根培养基中诱导生根。 15. 心肌长期负荷过重引起的心肌细胞肥大、间质纤维化等过程称为心脏重塑，与基因Snhg5相关。Snhg5转录出的RNA并不翻译产生蛋白质，而是以RNA的形式发挥调节作用。研究人员利用转基因技术建立了心肌细胞特异性Snhg5转基因小鼠。 （1）Snhg5转录所需的原料是_______。 （2）研究人员利用PCR技术获得了Snhg5基因，有关该过程正确的是_______（双选）。 A. 需要了解Sngh5基因的全部碱基序列 B. 新链的合成只能从3'→5' C. 反应体系加入的酶需要具有热稳定性 D. 需要构建两种不同引物 （3）通过PCR获得的目的基因Snhg5和质粒能用相应的酶切割、连接形成重组质粒（图1）。研究人员在构建重组质粒时得到6株可能含有重组质粒的大肠杆菌，分别提取各菌株中的质粒，使用限制性内切核酸酶SalI和HindⅢ切割后，经DNA凝胶电泳技术检测得到结果如图2所示，其中含有重组质粒的菌株编号是_______。 （4）根据图1，为获得α—MHC—Snhg5—hGH转基因片段，研究人员应使用限制性酶KpnⅠ和_______切割Snhg5重组质粒。 16. 染料废水是一种难处理的工业废水。研究发现，活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株，它们通过降解具有生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害，图1表示目标菌株GN—1的筛选和脱色试验流程，图2表示GN—1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。 （1）向含分散蓝2BLN的LB固体培养基中进行接种后，培养结果如图1所示，在菌落①至④中，目标菌株GN—1应从菌落（选出一个最优）_________中挑取。 （2）无菌技术是防止纯种微生物被其他微生物污染，且自身也不污染操作环境的技术。以下过程需要使用无菌技术的是_________。 A. 接种 B. 富集培养 C. 分离、纯化 （3）根据图2所示结果，综合考虑脱色效果（6d脱色率达90%以上为合格）和经济效益，GN—1菌株的最佳接种量为_________%。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物3月验收 一、选择题：共12题，每题4分，共48分。 1. 中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述正确的是（ ） A. 腐乳制作过程中，起主要作用的是曲霉 B. 酸奶制作过程中，密封处理不利于乳酸菌发酵 C. 馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO2 D. 泡菜制作过程中，密封处理有利于醋酸菌的生长 【答案】C 【解析】 【分析】1、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。 2、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。 【详解】A、腐乳制作过程中，起主要作用的是毛霉，A错误； B、制作酸奶利用的是乳酸菌，乳酸菌为厌氧型细菌，所以密封处理有利于乳酸菌发酵，B错误； C、酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸均能产生CO2，馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO2，CO2遇热膨胀而形成小孔，使得馒头暄软多孔，C正确； D、制作泡菜利用的是乳酸菌，并非醋酸菌，D错误。 故选C。 2. 小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行实验(如下图)，下列做法恰当的是（ ） A. 加入适量的酵母菌 B. 一直打开阀b通气 C. 偶尔打开阀a几秒钟，一直关紧阀b D. 把发酵装置放到4 ℃冰箱中进行实验 【答案】A 【解析】 【分析】分析实验装置图：图示表示利用酵母菌进行酒精发酵的实验装置，酵母菌是兼性厌氧菌，在有氧条件下能进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，能发酵产生酒精和二氧化碳；制作果酒时，装置中要加入适量的酵母菌，且关紧阀a和b，但要偶尔打开阀b几秒钟，以便释放出酵母菌无氧呼吸产生的CO2。 【详解】A、制作果酒利用的原理是酵母菌在无氧环境中利用葡萄糖发酵产生酒精和二氧化碳，所以要加入适量的酵母菌，A正确； B、酵母菌在无氧环境中才会产生酒精，所以要关紧阀a和b，偶尔打开阀b以释放CO2，B错误； C、酵母菌在产生酒精的同时还要产生二氧化碳，所以偶尔打开阀b几秒钟，以便释放出二氧化碳，C错误； D、果酒制作适宜温度是18-30℃，4℃的环境不利于酵母菌进行发酵，D错误。 故选A。 3. 下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，错误的是（ ） A. 步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰旁进行 B. 步骤④中，经数次划线后培养，可以分离得到单菌落 C. 步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灭菌处理 D. 步骤①中，倒入的培养基冷却后，盖上培养皿的皿盖 【答案】D 【解析】 【分析】平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同：（1）第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。（2）每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。（3）划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 【详解】A、①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确； B、平板划线操作中，通过连续划线，可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，经数次划线后培养，可以分离得到单菌落，B正确； C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，接种前灼烧，是为了杀死接种环上原有的微生物，每次划线之前灼烧，是为了杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，划线结束后灼烧是为了杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，所以在操作③过程中，每次划线前后都需要对接种环进行灼烧灭菌处理，C正确； D、步骤①倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，D错误。 故选D。 4. 下图表示不同的限制酶在目的基因的提取和基因表达载体的构建中的作用，下列有关叙述正确的是（ ） A. 限制酶沿识别序列的中轴线两侧将DNA两条链切开 B. 在图1和图2中将分别产生2个和1个黏性末端 C. 限制酶切割的是特定核苷酸序列之间的磷酸二酯键和氢键 D. 图示中酶1、酶2和酶3必须是同一类限制酶 【答案】A 【解析】 【分析】限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 【详解】A、由图可知，切割后产生的是黏性末端，所以可知限制酶是在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开的，A正确； B、由图可知，图1中含有酶1和酶2切割位点，能产生4个黏性末端，图2中含有酶3切割位点，能产生2个黏性末端，B错误； C、限制酶切割的是特定核苷酸序列之间的磷酸二酯键，不会切割氢键，C错误； D、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，图示中酶1、酶2和酶3可以为不同种类的限制酶，D错误。 故选A。 5. 将Oct3/4、Sox2、c—Myc和K1f4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞后。置于培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养。2～3周后，细胞会呈现出与ES细胞类似的形态和活跃分裂能力，这样的细胞称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列说法错误的是（ ） A. 逆转录病毒充当了载体 B. 从获取途径看，iPS细胞难于胚胎干细胞，不宜推广使用 C. 体细胞经诱导产生iPS细胞后，细胞的分化程度下降 D. 欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，应设置不转入外源基因的对照组 【答案】B 【解析】 【分析】干细胞是一类未参与分化或未完全分化的细胞，分裂能力强。按照其来源分为胚胎干细胞和成体干细胞（如造血干细胞、神经干细胞）等。 【详解】A、由题意可知，Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因能通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞，说明逆转录病毒充当了将目的基因导入成纤维细胞的载体，A正确； B、胚胎干细胞只能从早期胚胎获取，而成纤维细胞等体细胞经诱导后可形成iPS细胞，因此从获取途径看，iPS细胞的形成比获取胚胎干细胞更容易，由于iPS细胞诱导过程无须破坏胚胎，且iPS细胞可以来源于病人自身体细胞，因此若移植的组织或器官是由病人自身的细胞经过分裂、分化产生的，理论上可避免发生免疫排斥反应，因此iPS细胞值得推广，B错误； C、体细胞分化程度高，全能性低，体细胞被诱导为iPS细胞后，可重新分化为其他细胞，故体细胞经诱导产生iPS细胞后，细胞的全能性升高，细胞的分化程度下降，C正确； D、欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，自变量为是否含有外源基因，应设置不转入外源基因的对照组，D正确。 故选B。 6. 下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，正确的有（ ） A. PCR反应中，复性阶段需要DNA聚合酶连接磷酸二酯键 B. PCR反应中，延伸阶段需要反应体系中的ATP提供能量 C. 电泳时，DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA的大小和构象等有关 D. 电泳时，将PCR产物、核酸染料和电泳指示剂混合后注入凝胶加样孔 【答案】C 【解析】 【分析】（1）PCR是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。（2）DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。 【详解】A、PCR反应中，复性阶段需要耐高温的DNA聚合酶连接磷酸二酯键，A错误； B、PCR反应中需要以dATP、dTTP、dCTP、dGTP为原料合成新的DNA链，这些原料水解就会放出能量，B错误； C、PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，C正确； D、核酸染料在制备凝胶时加入，将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液（内含指示剂）混合，再用微量移液器将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内。留一个加样孔加入分子大小的标准参照物，D错误。 故选C。 7. 孤独症谱系障碍与基因S的变异有关，科研人员对猕猴的基因S进行编辑，首次获得孤独症模型猴，然后再通过动物细胞工程和胚胎工程技术获得更多克隆猴，下列叙述正确的是（ ） A. 在克隆动物时，可以用优良动物的MII期卵母细胞做供体 B. 培养早期胚胎的培养基中需要有糖类、氨基酸等营养条件，但无需提供气体环境 C. 胚胎移植的过程中，需要选择具有优良遗传性状的雌性个体作为受体 D. 为获得更多克隆猴，可对早期胚胎进行分割，经移植获得同卵双胎或多胎 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体；用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、在克隆动物时，优良动物的MII期卵母细胞是作为受体细胞，而不是供体。供体一般是提供细胞核的细胞，通常来自具有优良性状的个体，A错误； B、培养早期胚胎的培养基中需要有糖类、氨基酸等营养条件，同时也需提供气体环境：95％空气和5％CO2，B错误； C、胚胎移植的过程中，需要选择有健康的体质和正常繁殖能力的个体作为受体，C错误； D、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。所以为获得更多克隆猴，可对早期胚胎进行分割，经移植获得同卵双胎或多胎，D正确。 故选D。 8. 在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（ ） A. 单倍体育种 B. 得到“番茄一马铃薯”杂种植株 C. 利用基因工程培育抗棉铃虫的植株 D. 利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、单倍体育种过程中，利用花药离体培养得到单倍体植株时需要采用植物组织培养技术，A不符合题意； B、利用细胞工程技术培养“番茄—马铃薯”杂种植株时需要采用植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株，B不符合题意； C、抗棉铃虫的植株是通过转基因技术形成的，将转基因植物细胞培育成抗棉铃虫的植株需要采用植物组织培养技术，C不符合题意； D、利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株，这属于多倍体育种，不需要采用植物组织培养技术，D符合题意。 故选D。 9. 下图表示人的受精卵在卵裂期过程中，DNA总量、每个细胞体积、所有细胞体积之和、细胞数量的变化趋势（横坐标为发育时间）。其中正确的是（ ） A. ①② B. ①③ C. ②④ D. ③④ 【答案】C 【解析】 分析】 胚胎发育过程为：受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原肠胚与器官形成等阶段．其中卵裂阶段发生在透明带中，囊胚就会从透明带出来，进入母体子宫内，并植入子宫内膜的过程．卵裂期特点：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。 【详解】①受精卵发育至囊胚过程中，由于卵裂（方式是有丝分裂），导致细胞数目增加，每个分裂形成的细胞都有一份DNA，因此DNA总量随时间增加而增多，①错误； ②在卵裂过程中，细胞以几何级数不断分裂，每个细胞体积随时间增长而减小，②正确； ③在卵裂过程，由于每个细胞体积呈减少趋势，所以所有细胞体积之和与受精卵相比基本不变，或者略有减少，③错误； ④人的受精卵在卵裂期过程中，细胞不断分裂，故细胞数目不断增加，④正确。 综上所述，正确的是②④。C正确，ABD错误。 故选C。 10. 如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。如图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是（ ） 限制酶 AluⅠ BamHⅠ SmaⅠ Sau3AⅠ 识别序列 切割位点 AG↓CT TC↑GA G↓GATCC CCTAG↑G CCC↓GGG GGG↑CCC ↓GATC CTAG↑ A. ②④⑤对应的识别序列均能被Sau3AⅠ识别并切割 B. Sau3AⅠ和BamHⅠ切割产生的片段能够相连，但连接后的片段两者都不能再切割 C. BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键 D. T4DNA连接酶即能连接①③，也能连接②⑤，但后者连接效率低 【答案】A 【解析】 【分析】限制性内切核酸酶，简称限制酶：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来；（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（3）结果：形成黏性末端或平末端。 【详解】A、②④⑤对应的识别序列都存在GATC，都能被Sau3AⅠ识别并切割，A正确； B、BamHⅠ切割G↓GATCC，Sau3AⅠ切割↓GATC，故二者切割后产生的黏性末端是相同的，因此二者切割后产生的黏性末端能够相连，连接后仍然存在GATC的序列，能被Sau3AⅠ切割，但是BamHⅠ不一定能切割，B错误； C、BamHⅠ与AluⅠ切割的均是磷酸二酯键，C错误； D、T4DNA连接酶既可以连接黏性末端也可以连接平末端，而图中①、③属于平末端，②⑤是黏性末端，T4DNA连接酶连接平末端时效率较低，D错误。 故选A。 11. 为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。下列说法错误的是（ ） A. 图中筛选1和筛选2所依据的基本原理是相同的 B. 可将小鼠甲脾脏剪碎并用胰蛋白酶等处理后加培养液制成单细胞悬液 C. 实验前必须给小鼠甲注射病毒A以获得产生相应抗体的B淋巴细胞 D. 杂交瘤细胞需要在含95%空气和5%CO2的混合气体培养箱中进行培养 【答案】A 【解析】 【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾脏内获得相应的B淋巴细胞；（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；（3）克隆化培养和抗体检测；（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 2、单克隆抗体的应用：①作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物。 【详解】A、为了得到能产生抗病毒A单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。第一次筛选用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长，第二次筛选用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群，该过程用到抗原抗体杂交，故筛选所依据的基本原理是抗原与抗体的反应具有特异性或抗原与抗体的特异性结合，所以二者原理是不同的，A错误； B、以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液，B正确； C、该实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞，C正确； D、杂交瘤细胞体外培养的条件需要无菌、无毒的环境、合适的营养、适宜的温度、通入含有95％空气和5％CO2混合气体（维持培养液的pH)，D正确。 故选A。 12. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 粗提取的DNA中可能含有蛋白质 B. 可利用DNA在酒精中溶解度较大的特点来提取DNA C. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，沸水浴加热后呈蓝色 D. 提取的DNA可溶解在2molL的NaCl溶液中 【答案】B 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、粗提取的DNA中可能含有蛋白质、脂质、糖类等，A正确； B、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离，B错误； C、在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，C正确； D、在DNA粗提取时，用2mol/L的NaCl溶液可以溶解DNA，D正确。 故选B。 二、非选择题：共52分 13. 营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株在基本培养基中不能生长，但能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量原料。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。 （1）培养基灭菌常用的方法是_____。过程①的接种方法为_____图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是_____。 （2）进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至_____（填“基本”或“完全”）培养基上，原因是_____。 （3）利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，所以，挑取_____（填“菌落A”或“菌落B”）即为所需的氨基酸缺陷型菌株。 （4）分离计数土壤中自然突变的氨基酸缺陷型菌株的过程步骤①取5g土壤加入45mL无菌水中充分震荡得到土壤悬液。步骤②中，将1mL土壤悬液进行梯度稀释，每种稀释度经过步骤③各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.2mL），经适当培养后，在稀释倍数为103和104两组平板上的菌落数分别为49、47、48和2、7、6．据此可得出每毫升土壤悬液中的活菌数为_____个。接种后的平板应_____，以防止冷凝水滴落造成污染。 【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌法（或湿热法） ②. 稀释涂布平板法 ③. 氨基酸 （2） ①. 基本 ②. 防止将特定营养成分从完全培养基带入基本培养基 （3）菌落A （4） ①. 2.4×105 ②. 倒置 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。用稀释涂布平板法进行微生物计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 【小问1详解】 培养基需要有一定的水分，对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法；由图观察可知，过程①的接种方法形成的菌落均匀分布，为稀释涂布平板法；完全培养基是一种在基本培养基内加入一些富含氨基酸、维生素和碱基之类的天然物质，即加入生长因子而制成的各种营养基，可用来满足微生物的各种营养缺陷型菌株的生长需要，故图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是氨基酸。 【小问2详解】 进行过程②培养时，为了防止将特定营养成分从完全培养基带入基本培养基，应先将丝绒布转印至基本培养基上。 【小问3详解】 在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，所以，挑取菌落A即为所需的氨基酸缺陷型菌株。 【小问4详解】 每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，为了保证计数结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，故选择稀释倍数是103的，据此可得出每毫升土壤悬液中的活菌数为（49+47+48）÷3÷0.2×103=2.4×105个；接种后的平板应倒置，以防止冷凝水滴落造成污染，同时还能防止培养基中水分过快蒸发。 14. 下图表示用青菜（2N=20）与油菜（2N=38）培育种间杂种的过程。据图回答：（胚轴发育为连接茎和根的部分）。 （1）研究发现花粉原生质体及其自身融合体不能形成植株，且其大小与油菜胚轴原生质体差异显著。通常，在将两种原生质体混合前，需用异硫氰酸荧光素活染花粉原生质体，其主要目的是便于利用显微镜鉴别出_________。 （2）实验人员取两种形态特征有明显差异的杂种植株甲、乙，分别利用其根尖细胞制作临时装片，观察其正常体细胞分裂中期染色体数分别是48、58，若多个细胞可以融合，据此，可推测甲是_________倍体，产生乙植株的原因最可能是_________。 （3）将采集到的青菜花粉和剪碎的油菜胚轴分别置于含有_________酶的溶液中，搅拌并保温一段时间后，过滤、离心，获得两种原生质体。 （4）取两种原生质体混合液，滴加到含有_________（化学物质）的融合液中，静置、保温一段时间，以诱导原生质体融合。再转移至液体浅层培养基中培养，通过_________过程形成愈伤组织，诱导分化出芽后，再转移至生根培养基中诱导生根。 【答案】（1）杂种原生质体 （2） ①. 三 ②. 两个（花粉）原生质体A与一个原生质体B融合形成 （3）纤维素酶和果胶 （4） ①. 聚乙二醇（PEG） ②. 脱分化 【解析】 【分析】原生质体的制备要用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，常用聚乙二醇诱导原生质体融合，体现了生物膜具有一定的流动性。将杂种细胞培养成完整植株的过程是植物组织培养，经过脱分化形成愈伤组织，再分化形成完整植株。 小问1详解】 由于青菜花粉和油菜胚轴的原生质体大小差异显著，故两者融合后和油菜胚轴原生质体大小几乎无差异，无法鉴别，当用异硫氰酸荧光素染色后，则容易从大小差异不大的两者之间鉴别出杂种原生质体，因此在将两种原生质体混合前，需用异硫氰酸荧光素活染花粉原生质体，其主要目的是便于利用显微镜鉴别出杂种原生质体。 【小问2详解】 青菜是二倍体，含20条染色体，青菜花粉是生殖细胞，染色体数目是体细胞一半，即10条，与油菜胚轴(二倍体、38条染色体)结合后，形成三倍体、共48条染色体，也就是甲植株；58条染色体可能是两个青菜花粉（原生质体A）与一个油菜胚轴（原生质体B）融合形成四倍体、共20+38=58条染色体，也就是乙植株，为四倍体。即产生乙植株的原因最可能是两个（花粉）原生质体A与一个原生质体B融合形成。 【小问3详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，若要获得原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，故将采集到的青菜花粉和剪碎的油菜胚轴分别置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中，搅拌并保温一段时间后，过滤、离心，获得两种原生质体。 【小问4详解】 诱导原生质体融合常用化学试剂为聚乙二醇（PEG），故取两种原生质体混合液，滴加到含有聚乙二醇（PEG）融合液中，以诱导原生质体融合。想要获得愈伤组织（具有再度分化成其他组织细胞能力的薄壁细胞）必须经过脱分化。 15. 心肌长期负荷过重引起的心肌细胞肥大、间质纤维化等过程称为心脏重塑，与基因Snhg5相关。Snhg5转录出的RNA并不翻译产生蛋白质，而是以RNA的形式发挥调节作用。研究人员利用转基因技术建立了心肌细胞特异性Snhg5转基因小鼠。 （1）Snhg5转录所需的原料是_______。 （2）研究人员利用PCR技术获得了Snhg5基因，有关该过程正确的是_______（双选）。 A. 需要了解Sngh5基因的全部碱基序列 B. 新链合成只能从3'→5' C. 反应体系加入酶需要具有热稳定性 D. 需要构建两种不同的引物 （3）通过PCR获得的目的基因Snhg5和质粒能用相应的酶切割、连接形成重组质粒（图1）。研究人员在构建重组质粒时得到6株可能含有重组质粒的大肠杆菌，分别提取各菌株中的质粒，使用限制性内切核酸酶SalI和HindⅢ切割后，经DNA凝胶电泳技术检测得到结果如图2所示，其中含有重组质粒的菌株编号是_______。 （4）根据图1，为获得α—MHC—Snhg5—hGH转基因片段，研究人员应使用限制性酶KpnⅠ和_______切割Snhg5重组质粒。 【答案】（1）4种核糖核苷酸 （2）CD （3）1、3、4、6  （4）SacⅡ 【解析】 【分析】PCR技术的原理是模拟生物体内DNA分子复制的过程，利用DNA分子热变性原理，通过控制温度控制DNA分子的解聚和结合，DNA分子体内复制过程DNA的解旋是在解旋酶的作用下实现的。 【小问1详解】 转录是以DNA的一条链为模板，合成RNA的过程，产物是RNA，所以所需的原料为4种核糖核苷酸。 【小问2详解】 A、PCR技术中只需了解Sngh5基因的部分碱基序列，用于合成引物即可，A错误； B、新链的合成只能从5′→3′，B错误； C、PCR是利用了DNA分子热变性原理，反应体系加入的酶需要具有热稳定性，C正确； D、PCR的原理是DNA半保留复制，两条链都要作为模板，因此PCR过程需要构建两种不同的引物，分别使其与DNA的双链配对，D正确。 故选CD。 【小问3详解】 由图1可见，重组质粒中含有限制性内切核酸酶SalⅠ和HindⅢ的切点，所以，分别提取各菌株中的质粒，使用限制性内切核酸酶SalⅠ和HindⅢ切割后，若含有重组质粒，则会被切成两段，电泳后应含有两个条带，所以根据电泳条带可知其中含有重组质粒的菌株编号是1、3、4、6。 小问4详解】 由图1可见，重组质粒中α-MHC-Snhg5-hGH转基因片段的两端分别为限制性内切核酸酶KpnⅠ和SacⅡ的切点，所以用KpnⅠ和SacⅡ切割Snhg5重组质粒可获得α-MHC-Snhg5-hGH转基因片段。 16. 染料废水是一种难处理的工业废水。研究发现，活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株，它们通过降解具有生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害，图1表示目标菌株GN—1的筛选和脱色试验流程，图2表示GN—1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。 （1）向含分散蓝2BLN的LB固体培养基中进行接种后，培养结果如图1所示，在菌落①至④中，目标菌株GN—1应从菌落（选出一个最优）_________中挑取。 （2）无菌技术是防止纯种微生物被其他微生物污染，且自身也不污染操作环境的技术。以下过程需要使用无菌技术的是_________。 A. 接种 B. 富集培养 C. 分离、纯化 （3）根据图2所示结果，综合考虑脱色效果（6d脱色率达90%以上为合格）和经济效益，GN—1菌株的最佳接种量为_________%。 【答案】（1）③      （2）ABC （3）15% 【解析】 【分析】获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒和灭菌工作主要包括两个方面：对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等；灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。 【小问1详解】 透明圈越大说明该菌落中的菌株分散2BLN的能力越强，故应该选取菌落③。 【小问2详解】 ABC、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，接种、微生物的培养、分离纯化的过程都涉及无菌技术，因此接种、富集培养和分离、纯化过程都需要使用无菌技术，即ABC正确，故选ABC。 【小问3详解】 根据图2，6d脱色率达90%以上为合格，15%和20%效果几乎相同且最佳，以节约的原则考虑，最佳接种量为15%。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $