内容正文:
第2章
细胞工程
第1节植物细胞工程
知识点1植物细胞工程的基本技术
1.细胞工程的理论基础一细胞的全能性
(1)细胞全能性的概念:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生①
或分化成②
的潜能,即细胞具有全能性
(2)在生物体内全能性不能表达的原因:在特定的时间和空间条件下,细
胞中的基因会有③
地表达出各种蛋白质,从而构成生物体的不
同组织和器官。
2.植物组织培养技术
(1)概念理解
①培养对象:离休的④
②培养条件:无菌、人工配制的培养基、相关激素等。
③培养结果:形成完整的植株。
(2)原理:植物细胞具有⑤
(3)操作流程
接种
诱导
诱导
诱母
移栽
⑥
@
生芽
生根
成活
(4)操作实例
菊花的组织培养
消毒液,酒精和⑧
消毒
操作刈象操作者双于、工作台台而、⑨
取材川懈剖刀将消毒过的外枯体切成0.5-1m长的小段
操作将外植体的1/3~1/2插入0
的
接种
培养基甲
要求
在酒精灯火焰旁无闲操作
倍养18-22℃的培养箱中
生芽
将生长良好的愈伤组织转接心
的培养基
转接
生根
长出芽后,再转接到②
的培养基上
移栽培养箱培养一蛭不或珍珠岩培养一土壤培养
3.植物体细胞杂交技术
(1)概念:指将不同来源的⑧
,在一定条件下融合成
4
,并把杂种细胞培育成⑤
的技术。
·11·
(2)原理:体细胞杂交利用了细胞膜的⑥
,杂种细胞培育成杂种
植株利用了植物细胞的@
(3)操作过程
⑧
物理法:电融合法、离心法
和09
20
再生山抑胞
处理去除细
!
融
化学法
合
壁融合完成
胞
的标志
@
1细胞A原生质体
回
→@
在融杂种细胞
B原生质体合的原生出
愈伤
杂种移栽后
B细胞
组织
植株的植株
生质体胞壁
(4)意义:打破@
,实现@
,培育植物新品种。
(5)植物组织培养与植物体细胞杂交的比较
植物组织培养
项日
植物体细胞杂交
v
y
A
细胞膜的流动性和植物细胞
梢物细孢的全能料原理
的全能
离休的植物器官、
植物细胞A
组织或细胞
去壁
人工
脱分化
原生质体A诱进
融合的原
愈伤组织
过程
原生质体B
牛质体AB
再分化
↑去壁
再生壁
胚状体
植物细胞B
杂种细胞AB
发育
脱分化
植物体
杂种植株
再
愈伤组织
分化
选收根尖、茎尖
形成层等容易诱导选材不同种植物体细胞
脱分化的部位
除脱分化、西分化外,还要川用
技不
脱分化、丙分化
晦解法去除细胞壁,川一定的
操作
方法诱导细胞融合
关系
植物组织培养是植物体细胞杂交的基础,植物体细胞杂
交所川的技术更复杂
12·
知识点2植物细胞工程的应用
1.植物繁殖的新途径
(1)快速繁殖:用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
(2)作物脱毒:选取作物⑧
(如茎尖)进行组织培养,获得脱毒苗
的技术。
2.作物新品种的培育
原理
优点
过程
单倍休
明显缩
化药离体培养→②5
植株
秋水仙素诱导
短育种
西
桩株
育种
染色休加倍
年限
诱变处型
产牛新某
脱分化
突变体
20
因.大幅外柏体
愈伤组织
的利川
度改良某
+一突变体
筛选
8
此性状
培育
诱导分化
3.细胞产物的工厂化生产
①次生代谢物:是一类四
有机化合物,在植物抗病、抗虫等方面
发挥作用,也是很多药物、香料和色素等的重要来源。
②细胞产物的工厂化生产:人们利用④
来获得目标产
物,这个过程就是细胞产物的工厂化生产。
③植物细胞培养:是指在①
条件下对单个植物细胞或细胞团进
行培养使其②
的技术。
[易错警示]
1.植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性
2.在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中,不会发生细胞的增殖和分化
3.愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的
4.用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性
)
5.再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志
(
6.培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是细胞杂交
(
)
·13·
自我校对:
①完整生物体②其他各种细胞
③选择性④植物器官、组织或细胞
⑤全能性⑥外植体⑦愈伤组织⑧次氯酸钠溶液⑨外植体⑩诱
导愈伤组织①诱导生芽@诱导生根
⑧植物体细胞④杂种细胞
⑤新植物体⑩流动性⑦全能性⑧纤维素酶⑨果胶酶④聚乙二
醇融合法、高C:+一高pH融合法①生殖隔离@远缘杂交育种⑧无
毒组织@染色体变异四单倍体团纯合子@基因突变⑧新品种
四小分子③植物细胞培养①离体②增殖
易错警示1.×2.×3.×4.×5./6.×
第2节动物细胞工程
知识点1动物细胞培养及其条件
1.动物细胞培养
从动物体中取出相关的组织,将它分散成①
,然后在适宜的培养
条件下,让这些细胞②
的技术。
2.动物细胞培养的条件
(1)营养:除糖类、氨基酸、无机盐、维生素之外,通常还需加入③
等一些天然成分。
(2)无菌、无毒环境
培养液和培养用具进行灭菌处理及在无菌环境下操作
定期更换④
,清除代谢产物
(3)适宜的温度:36.5士0.5℃;适宜的pH:7.2~7.4。
95%的⑤
:其中O。为⑥
必需
(4)气体环境
5%的CO2:维持培养液的pH
知识点2
动物细胞培养的过程
1.过程
机械的方法或
动物组织
单个纫胞
0
、
⑧
处理
培养液
培养
分瓶培养
原代培养
适宜条件⑩
悬液
2.体外培养的动物细胞的类型
(1)一类细胞能够①
于培养液中生长增殖;
(2)另一类则需要②
于某些基质表面才能生长繁殖,而且还会发
生⑧
现象,从而使细胞停止分裂增殖。
·14·
3.生长特点
(1)细胞贴壁:将细胞悬液放入培养瓶内,置于适宜环境中培养,悬液中分
散的细胞很快就四
上,称为细胞贴壁
(2)接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面⑤
时,细胞
的现象称为细胞的接触抑制。
4.原代培养和传代培养
(1)原代培养:通常指⑦
的细胞培养,即动物组织经处理后的
⑧
(2)传代培养:指©
的细胞培养。
知识点3干细胞培养及其应用
1.分布:存在于@
骨髓和①
等多种组织和器官中。
2.类型:胚胎干细胞和成体干细胞等。
(1)胚胎干细胞:简称②
细胞,存在于⑧
中,具有分化为
成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和
器官甚至@
的潜能。
(2)成体干细胞
①分布:⑤
或器官内。
②类型:骨髓中的函
干细胞、神经系统中的⑦
干细胞和
睾丸中的图
干细胞等。
③特性:一般认为,成体干细胞具有四
,只能分化成
风
细胞或组织,③①
发育成完整个体的能力。
4.应用
①有着型
能力及⑧
的干细胞,与组织、器官的发育、再
生和修复等密切相关,因而在医学上有着广泛的应用。
②胚胎干细胞必须从④
中获取,这涉及伦理问题,因而限制了它
在医学上的应用。
③诱导多能干细胞
1概念:通过体外诱导小鼠⑤
细胞,获得了类似胚胎干细胞的一
种细胞,将它称为诱导多能干细胞,简称
ⅱ优点
a.不涉及伦理问题。
b.理论上可以⑦
免疫排斥反应。
知识点4动物细胞融合技术
1.概念:使⑧
个动物细胞结合形成四
的技术。
2.结果:形成
细胞,且具有原来两个或多个细胞的④①
·15·
3.诱导方法:@
融合法、⑧
法和④@
法等。
4.意义:突破了⑤
的局限,使远缘杂交成为可能。
5.应用
(1)是研究细胞遗传、⑤
、肿瘤和培育④⑦
等的
重要手段。
(2)杂交瘤技术为制造⑧
开辟了新途径。
知识点5单克隆抗体及其应用
1.单克隆抗体的制备
(1)制备原理
①B淋巴细胞特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
②骨髓瘤细胞特点:能在体外细
③杂交瘤细胞的特点:既能@
,又能产生足够数量的①
(2)制备过程
注射特定
培养骨髓
免疫
气的抗原
摇细胞
的
6出
⊙
⊙⊙
o60
060
多种2
竹髓瘤细胞
诱导融合
CD
GD
00G0
D
多种杂
白身融
交细胞
合细胞
川特定3
缔选,未
融合或同种融合的邹胞死亡
⊙
0好
克隆述杂交细胞
©变专一抗体怜验m性
⊙1
将不同种杂交细胞分开,并克
降女一抗体,检验阳性细胞
·16·
注射到小
鼠腹腔内
体外
培养
单克降抗体
2.单克隆抗体的应用
(1)作固
,在多种疾病的诊断和⑤团
鉴定中发挥重要
作用。
(2)用于运载药物和⑦
知识点6动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.动物细胞核移植技术的概念和类型
(1)概念
①供体:动物一个细胞的⑧
②受体:去掉细胞核的©
③结果:重新组合的细胞发育成@
,继而发育成①
(2)类型
哺乳动物核移植可分为②
细胞核移植和体细胞核移植。
2.体细胞核移植的过程
供体
→63
一供体细胞
休细胞
注入
细胞
卵母MΠ期位
去核卵了
融合
细胞
母细胞
发直早期胚胎移植代卓母体
生出与稀
遗传物
胚胎
质其木相同的个体
3.体细胞核移植技术的应用前景
(1)应用前景
①畜牧生产中:加速家畜
进程,促进⑧
②医药卫生领域:转基因克隆动物作为@
,生产许多珍
贵的医用蛋白。
③治疗人类疾病:转基因克隆动物细胞、组织和器官作为@
的供
体等。
·17
④使人类更深入地了解@
过程。
⑤保护濒危物种方面:增加颜危物种的@
(2)存在问题
①体细胞核移植技术的⑧
非常低。
②理论研究相对@
0
③克隆动物存在健康问题,表现出遗传和⑤
缺陷等。
[易错警示]
1.动物细胞核移植的受体细胞必须是卵细胞
2.肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸(
3.相比植物体细胞杂交,动物细胞融合特有的诱导方式是用灭活的病毒
处理
(
)
4.杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎(
)
5.杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体
自我校对:
①单个细胞②生长和增殖
③血清
④培养液⑤空气
⑥细胞代谢
⑦胰蛋白酶⑧胶原蛋白酶⑨传代①细胞
①悬浮②贴附
⑧接
触抑制④贴附在瓶壁⑤相互接触⑥停止分裂增殖⑦分瓶之前
⑧初次培养9分瓶之后@早期胚胎①脐带血②ES⑧早期胚胎
@个体⑤成体组织⑩造血⑦神经
⑧精原四组织特异性③①特
定的①不具有②自我更新⑧分化潜能④胚胎成纤维团PS
细胞团避免⑧两个或多图一个细胞④杂交《
①遗传信息
②PG仍电融合灭活病毒诱导④⑤有性杂交⑩细胞免疫⑦生
物新品种⑧单克隆抗体⑧大量增殖@大量增殖?
①特定抗体®B
淋巴细胞⑧选择培养基函杂交瘤细胞⑤诊断试剂团病原体
⑦治疗疾病⑧细胞核®卵母细胞新胚胎①动物个体②胚胎
⑧细胞培养网去核⑤重构胚6供体
团遗传改良⑧优良畜群繁
育四生物反应器
①异种移植①胚胎发育及衰老2存活数量
⑧成功率④落后⑤生理
易错警示1.×2.×3.√4.×5./
·18·
第3节
胚胎工程
知识点1胚胎工程的理论基础
1.胚胎工程概念的理解
操作对象:生殖细胞、①
或早期还胎细胞
技术种类:体外受精、胚哈移植、胚胎分脚、早期
概念理解
胚胎培养等
操作水平:主要集中在②
水平下
理论基础:哺乳动物③
和早期呸怡发育的规律
2.受精
(1)概念:④
和⑤
结合形成⑥
(受精卵)的
过程。
(2)场所:自然条件下,哺乳动物的⑦
内。
(3)过程
雁留r精了⑧:在难性动物的生殖道内完成
阶毁卵了的淮备:发育到⑨
小有受精能力
精子穿越卵细胞膜外的结构
透明带反应(阻止多精人卵的第一道屏障)
受精
进入卵细胞膜0
反应:阻止多精入卵的第
阶段
二道尿障)
形成
堆、雄原核融合(受精元成的标志)
3.胚胎早期发育
12
:胚胎发有的起点
2细胞→4细胞→8细胞:进行有丝分裂,细胞数量不断增加,
但胚胎总休积并不增加
13
:细胞的全能性最高
4④
:将来发育成胎膜和胎盘
龚胚
:将来发育成胎儿的各种组织
原肠胚:出现三个胚层
·19·
知识点2胚胎工程技术及其应用
1.体外受精
(1)过程
卵母狐胞
体外进行1⑦
至MI期
的采集
精子狄取
进行⑧
处理
将获能后的精子和培养成熟的卵子置」适
受精
当培养液中共同培养
(2)意义:①提高动物©
:②为胚胎移植提供@
2.胚胎移植
(1)概念:指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到④
的、四
相同的雕性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。
(2)过程(以牛的胚胎移植为例)
受体母牛
优良供休母牛
(有23
和
(遗传性状优良、生产能力强)
正常繁殖能力)
进行4
---
处理
25
处理
受体发情
发情配种或
·移胚胎
鱼粉
20
优良公牛
锈形勤
对受体进行
收集胚胎并检查
22
检查
:常繁殖或两三个月
后进行另一次移植
其有优良性状的后代
(3)优势:充分发挥⑧
3.胚胎分割
(1)材料:应选择发育良好、形态正常的④
或囊胚。
(2)实质:胚胎分割可增加动物后代的数量,其实质是动物的无性繁殖(或
克隆)。
·20·