精品解析：天津市北辰区天津市九十六中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题

高二年级阶段性检测生物学科试卷 本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。 第Ⅰ卷（共60分） 一、选择题（每题只有一个选项符合题意，每题3分共60分） 1. 下图是酸豆奶的生产工艺流程，利用大豆与奶粉混合，经乳酸菌发酵制成的酸豆奶，具有动、植物蛋白的双重营养。下列叙述正确的是（ ） A. 在两者混合液中加入适量的葡萄糖有利于发酵的进行 B. 巴氏消毒在彻底杀死所有微生物的同时，不破坏营养成分 C. 发酵过程早期需密封，后期需不断地通入无菌空气 D. 醋酸菌能够在上述同样条件下将糖发酵生成醋酸 阅读下列材料，回答下列小题： 乳酸菌在乳中生长发酵乳糖产生乳酸.其产酸力是乳酸菌重要特性。研究表明产酸力与菌株的β-半乳糖苷酶的活性相关，该酶基因位于质粒上，乳糖代谢由质粒控制。通过诱变可以获得乳糖代谢障碍突变体。突变的部位和数量影响对乳糖的利用能力。研究人员以B-3为出发菌株采用紫外线或亚硝基胍进行诱变选育获得高产酸的乳酸菌。 乳酸菌乳糖发酵能力的检测方法通常有两种：一、接种于 MRS 液体培养基(脱脂乳液体培养基)，通过凝乳速度快慢来判断，凝乳速度越快，发酵乳糖能力越强； 二、接种于含ONPG(邻-硝基酚-β-半乳糖苷) 的平面培养基上，培养基中出现β-半乳糖苷酶，会显黄色。 2. 关于乳酸菌乳糖发酵能力检测的两种方法相关叙述，正确的是（ ） A. 都需要经过高压蒸汽灭菌 B. 都是通过观察菌落的特征来进行判断 C. 都可以用平板划线的方法进行接种 D. 两种培养基都属于选择培养基 3. 获得高产酸菌株是发酵工程的第一步。下列关于菌种选育的叙述，正确的是（ ） A. 还可以利用杂交育种和基因工程获得高产酸菌株 B. 连续利用紫外线诱变可以大幅提高乳酸菌的产酸能力 C. 亚硝基胍处理后获得高产酸菌株是自然选择的结果 D. 人工诱变过程中，乳酸菌的其他基因也可能发生突变，体现了基因突变的不定向性 4. 下列有关涂布平板操作的叙述，不正确的是（　　） A. 将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B. 取少量菌液滴加在培养基表面 C. 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10秒再用 D. 涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀 5. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（ ） A. 发酵过程中的菌种不需要专门接种，先清洗后去梗是为了减少杂菌污染 B. 过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋 C. 过程⑤中酒精可作为醋酸菌的碳源和能源 D. 过程④⑤的发酵条件不同，过程④所需的最适温度高于过程⑤ 6. 科研人员进行了土壤中分解尿素的细菌的分离和纯化培养，实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 步骤①获取土壤样品要遵循无菌操作原则，土壤样品要进行高压蒸汽灭菌 B. 步骤④选择的纯化培养基，加入尿素的目的是为微生物提供碳源和氮源 C. 通过步骤④培养基的筛选，得到的一定都是能分解尿素的细菌 D. 若步骤④平板上统计细菌菌落平均数为150，则土壤中含该种细菌约1.5×1010个/升 7. 人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应如图）。下列叙述错误的是（ ） A. 实验所用培养基中要以纤维素作为唯一碳源 B. 培养基中需添加一定量的抗生素以防止微生物污染 C. 在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多 D. 图中降解纤维素能力最强的菌株是① 8. 分离、纯化细菌的实验中，平板划线法接种（甲）及培养结果（乙）如图所示，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述正确的是（ ） A. 实验所用培养基一般用干热灭菌法进行灭菌 B. 图中d区域的划线操作是从c区域划线的末端开始的 C. 为了防止杂菌污染，接种环灼烧后立即蘸取菌液进行划线 D 图示划线接种过程中至少需要对接种环灼烧5次 9. 下图是利用甲、乙两种植物的各自优势，通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图。下列相关叙述错误的是（　　） A. 进行d 选择时要将植株种高盐环境中 B. b 是诱导融合后得到的杂种细胞 C. c 是培养后得到的具有耐盐性状的幼芽 D. 进行a 处理时能用胰蛋白酶 10. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（ ） A. ①过程中细胞的不断分裂会出现染色体互换导致基因重组 B. ①②过程的发生主要与细胞分裂素和生长素的浓度和比例有关 C. 获得脱毒苗常用的外植体是植物的茎尖，脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D. 通过高产细胞系获得辣椒素的过程体现了细胞的全能性 11. 下图是利用玉米（2N=20）的幼苗芽尖细胞（基因型BbTt）进行实验的流程示意图。下列分析错误的是（ ） A. ①过程可发生基因突变 B. 减数分裂发生在图中②过程 C. 植株B纯合的概率为25% D. 植株A为二倍体，植株C属于单倍体 12. Vero细胞因不能合成抗病毒蛋白干扰素，广泛应用在病毒性疫苗生产上。将病毒接种到Vero细胞后，经细胞培养、病毒灭活及提纯，可制成病毒灭活疫苗。下列叙述正确的是（ ） A. 培养 Vero 细胞时，培养液中应加入适量血清以防止杂菌污染 B. 培养 Vero细胞时需要提供95%的O₂和5%的CO₂ C. 培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 D. 将病毒接种到Vero 细胞，培养后提取病毒可直接制成疫苗 13. 犬细小病毒(CPV)主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。犬细小病毒VP2基因的大多数突变影响CPV 的抗原性和宿主范围，关键性位点的突变可能对现有诊断方法造成影响，因此对抗CPV的VP2蛋白单克隆抗体的制备有助于相关疾病抗体诊断试剂的研发。利用小鼠制备抗CPV的VP2单克隆抗体的基本流程如图所示，相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①中向小鼠注射的物质是CPV 的遗传物质 B. X细胞是骨髓细胞 C. 步骤③在培养细胞需要加入血清等天然成分，只需通入氧气 D. 此流程获得的单克隆抗体能够与CPV 的VP2蛋白特异性结合 14. 我国致力于打造国际一流的奶牛繁育体系，集活体采卵、体外受精、性控技术、胚胎移植为一体的产业示范应用。下列叙述错误的是（ ） A. 采集的卵子需培养到MII期，才能与获能的精子受精 B. 可取囊胚期的内细胞团进行性别鉴定，筛选特定性别的胚胎 C. 为获得更多优良胚胎，可对发育良好、形态正常的桑葚胚进行胚胎分割 D. 胚胎移植过程，需对优良供体母牛和健康受体母牛进行同期发情处理 15. 如图是利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列关于该过程的分析，错误的是（ ） A. ②过程通常将胚胎培养到囊胚或原肠胚再进行分割 B. 在进行①过程之前，需要对采集到的卵子继续培养、对精子进行获能处理 C. ③过程中可从滋养层取样，做DNA分析，鉴定性别 D. ⑤过程是胚胎移植，移植前需要对供体、受体进行同期发情处理 16. 有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给“渐冻症”实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是（ ） A. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多 B. iPS细胞分化成的多种细胞中遗传物质不相同，蛋白质也不相同 C. 若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，则可以起到良好的治疗作用 D. 植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使“渐冻症”病情改善 17. 下图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图（其中ampr为抗氨苄青霉素基因）。下列叙述错误的是（　　） A. ④过程中可利用目基因作为探针对植株进行筛选 B. 可同时选用限制酶PstI、SmaI对含目基因的DNA进行剪切 C. 过程②可采用农杆菌转化法将含目的基因的表达载体导入受体细胞 D. 质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞和促进目的基因的表达 18. 有关PCR技术，下列叙述不正确的是（ ） A. 是聚合酶链式反应，是以DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术 B. 在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似 C. PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸 D. PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸 19. 下图为不同限制性内切核酸酶识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是（　　） A. 图示4种限制酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列 B. 若DNA上的碱基随机排列，Not I限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高 C. 使用两种限制酶同时处理质粒和含目的基因的外源DNA可防止二者发生自身环化 D. 用酶Bgl II切出的目的基因与酶BamH I切割的质粒重组后，不能再被这两种酶切开 20. 基因工程利用某目的基因（图甲）和P1噬菌体载体（图乙）构建重组DNA．限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ下列分析错误的是（　　） A. 构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 B. 构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 C. 图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团 D. 用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA 第Ⅱ卷（共40分） 二、填空题 21. 科研人员按照如图所示流程从盐湖土壤中分离筛选出了一株高产α-淀粉酶的耐盐性菌株NWU-8并进行扩大培养，实验中需要a、b两种培养基，a的组分为牛肉膏、蛋白胨、高浓度NaC1、水，相比培养基a，培养基b的组分增加了可溶性淀粉。回答下列问题： （1）培养基a中的氮源主要是________，从功能上讲它属于________培养基。 （2）要在培养基上形成菌落，a、b培养基中均还应加入________，挑取a培养基平板上的菌落进一步划线纯化时，下列图示中正确的操作示意图为________。 （3）培养基b中的碳源主要是________，b培养基平板滴加碘液后，部分菌落周围出现透明圈，其中菌落直径与透明圈直径的比值________（“大”或“小”）的菌落初步判断为产酶能力较高的菌株。 （4）科研人员欲进一步探究不同NaCl浓度的培养基对菌株NWU-8产α-淀粉酶的影响，设计并实施了相关实验。该实验对照组为________。 （5）对已有的土壤样液稀释107倍，取0.1ml稀释液涂布平板上，每隔24h统计一次菌落的数目，菌落数分别是90、163、158，推测土壤样液中菌体的数量为________个/L。 22. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示： （1）过程①常用的酶是_____，杂种细胞形成的标志是_____。 （2）植物原生质体融合过程常利用化学试剂_____诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到不同的原生质体，当观察到融合的细胞表面_____时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 （3）过程③和过程④依次为_____，过程④中的培养基常添加的植物激素是生长素和_____。 （4）若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞含_____条染色体。 23. 抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一，其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞，基本过程如图所示.回答下列问题： （1）在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射_______(填“相同”或“不同”)特定抗原，注射后小鼠体内发生相应的免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 （2）与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用_____________(填具体方法)诱导动物细胞融合。 （3）过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是__________________，过程④对细胞丙进行________培养和__________检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是_______________。 （4）紫杉醇能阻止肿瘤细胞有丝分裂，促进其凋亡，用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，这利用的是单克隆抗体的____________(填“导向”或“治疗”) 功能。 24. 世界卫生组织解释克隆为“遗传上同一机体或细胞系（株）的无性繁殖”。相对于植物克隆而言，动物尤其是高等动物的克隆比较困难，下图表示哺乳动物克隆的几种方法的主要步骤，据图回答问题： （1）方法2获得的小牛的细胞核遗传物质来源于_______________。方法3中①和②发育成的小牛的遗传物质_______________（填“相同”或“不同”）。 （2）细胞B取自囊胚的_______________，具有发育全能性，称为_______________细胞。囊胚_______________（填“已经”或“尚未”）出现分化。 （3）应用图示方法_______________得到小牛与供体1遗传物质最相似。 （4）克隆也可以理解为复制、拷贝，结合世界卫生组织的定义，你认为还有哪些现代生物技术也属于克隆：_______________（至少写出两个）。 25. 下列是基因工程的有关问题，请回答： （1）限制性核酸内切酶可以识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并可以使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的________（填化学键名称）断裂，形成的末端总体可分为两种类型，分别是________。 （2）目的基因和载体重组时需要的工具酶是________，与限制性核酸内切酶相比，它对所重组的DNA两端碱基序列________（填“有”或“无”）专一性要求。 （3）如图表示的是构建表达载体时的某种质粒与目的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。 分析可知，最好选择限制酶_____切割质粒，限制酶_____切割目的基因所在的DNA。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 高二年级阶段性检测生物学科试卷 本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。 第Ⅰ卷（共60分） 一、选择题（每题只有一个选项符合题意，每题3分共60分） 1. 下图是酸豆奶的生产工艺流程，利用大豆与奶粉混合，经乳酸菌发酵制成的酸豆奶，具有动、植物蛋白的双重营养。下列叙述正确的是（ ） A. 在两者混合液中加入适量的葡萄糖有利于发酵的进行 B. 巴氏消毒在彻底杀死所有微生物的同时，不破坏营养成分 C. 发酵过程早期需密封，后期需不断地通入无菌空气 D. 醋酸菌能够在上述同样条件下将糖发酵生成醋酸 【答案】A 【解析】 【分析】巴氏消毒法：不耐高温的液体，如牛奶，在62~65℃消毒30min或80~90℃处理30s~1min，可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。乳酸菌进行乳酸发酵利用的是乳酸菌的无氧呼吸，其产物是乳酸。 【详解】A、乳酸菌可以利用葡萄糖进行乳酸发酵，因此在两者混合液中加入适量的葡萄糖有利于发酵的进行，A正确； B、巴氏消毒的消毒温度较低，时间较短，能在杀死大部分微生物的同时不破坏营养成分，B错误； D、乳酸菌为厌氧菌，发酵过程中需密封，不需要通入无菌空气，C错误； D、乳酸菌为厌氧菌，而醋酸菌为严格的好氧菌，因此上述同样的条件下，醋酸菌不能正常代谢，D错误。 故选A。 阅读下列材料，回答下列小题： 乳酸菌在乳中生长发酵乳糖产生乳酸.其产酸力是乳酸菌的重要特性。研究表明产酸力与菌株的β-半乳糖苷酶的活性相关，该酶基因位于质粒上，乳糖代谢由质粒控制。通过诱变可以获得乳糖代谢障碍突变体。突变的部位和数量影响对乳糖的利用能力。研究人员以B-3为出发菌株采用紫外线或亚硝基胍进行诱变选育获得高产酸的乳酸菌。 乳酸菌乳糖发酵能力的检测方法通常有两种：一、接种于 MRS 液体培养基(脱脂乳液体培养基)，通过凝乳速度快慢来判断，凝乳速度越快，发酵乳糖能力越强； 二、接种于含ONPG(邻-硝基酚-β-半乳糖苷) 的平面培养基上，培养基中出现β-半乳糖苷酶，会显黄色。 2. 关于乳酸菌乳糖发酵能力检测的两种方法相关叙述，正确的是（ ） A. 都需要经过高压蒸汽灭菌 B. 都是通过观察菌落的特征来进行判断 C. 都可以用平板划线的方法进行接种 D. 两种培养基都属于选择培养基 3. 获得高产酸菌株是发酵工程的第一步。下列关于菌种选育的叙述，正确的是（ ） A. 还可以利用杂交育种和基因工程获得高产酸菌株 B. 连续利用紫外线诱变可以大幅提高乳酸菌的产酸能力 C. 亚硝基胍处理后获得高产酸菌株是自然选择的结果 D. 人工诱变过程中，乳酸菌的其他基因也可能发生突变，体现了基因突变的不定向性 【答案】2. A 3. B 【解析】 【分析】灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；消毒是指用较为温和的物理和化学方法杀死物体表面合或内部的部分微生物（不包括芽孢与包子），常用的方法主要有煮沸消毒法，巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，使用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。 【2题详解】 A、由于两种检测方法都用到了培养基，培养基的配制需要进行高压蒸汽灭菌，A正确； B、第一种检测方法是观察培养基的凝乳速度的快慢，第二种是通过观察菌落的特征来进行判断，B错误； C、第一种检测方法是接种于 MRS 液体培养基(脱脂乳液体培养基)中，而平板划线法主要用于分离纯化菌种，且适用于固体培养基。而MRS液体培养基是液体培养基，不适合用平板划线法进行接种，C错误； D、第一种检测方法中的培养基以脱脂乳作为碳源、氮源，不能利用脱脂乳的微生物无法生长，因此属于选择培养基，第二种检测方法中的培养基加了ONPG，培养基中出现β-半乳糖苷酶，会显黄色，是鉴别培养基，D错误。 故选A。 【3题详解】 A、由于乳酸菌是原核生物，因此不遵循孟德尔遗传定律，其次β-半乳糖苷酶基因位于质粒上，因此不可以利用杂交育种获得高产酸菌株，A错误； B、根据题意，连续利用紫外线诱变可以提高菌种的变异频率，进而使得乳酸菌大幅提高乳酸菌的产酸能力，B正确； C、亚硝基胍处理后获得高产酸菌株是人工诱变的结果，C错误； D、人工诱变过程中，乳酸菌的其他基因也可能发生突变，体现了基因突变随机性，D错误。 故选B。 4. 下列有关涂布平板操作的叙述，不正确的是（　　） A. 将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B. 取少量菌液滴加在培养基表面 C. 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10秒再用 D. 涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀 【答案】A 【解析】 【分析】由于土壤中细菌的数量庞大， 要想得到能分解某种物质的细菌的纯培养物，必须要对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上，也 是要采用稀释涂布平板法。待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入 30〜37 ℃的恒温培养箱中培养1〜2 d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。 【详解】AC、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中，将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、 涂布器冷却后，再进行涂布，A错误，C正确。 B、取少量菌液（0.1 mL），滴加到培养基表面，B正确； D、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，涂布时可转动培养皿，使涂布均匀，D正确。 故选A。 5. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（ ） A. 发酵过程中的菌种不需要专门接种，先清洗后去梗是为了减少杂菌污染 B. 过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋 C. 过程⑤中酒精可作为醋酸菌的碳源和能源 D. 过程④⑤的发酵条件不同，过程④所需的最适温度高于过程⑤ 【答案】D 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型； 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、由题意可知，该过程是天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程，所以发酵过程中的菌种不需要专门接种，先清洗后去梗是为了较少杂菌污染，A正确； B、过程③属于果醋发酵，需要醋酸菌参与，醋酸菌在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋，B正确； C、在没有糖原的情况下，醋酸菌可以把酒精转化为醋酸，即酒精可作为醋酸菌的碳源和能源，C正确； D、过程④蓝莓酒制作的菌种是来源于蓝莓上的野生酵母菌，为真核生物，最适温度为18~30℃，需要无氧条件，过程⑤属于蓝莓醋发酵，所需菌种是醋酸菌，为原核生物，最适温度为30~35℃，需要有氧条件，两个发酵菌种的细胞结构不同，且过程④所需的最适温度低于过程⑤，⑤醋酸发酵产生的醋酸使pH下降，过程⑤中的主要发酵菌种酵母菌失去发酵能力，D错误。 故选D。 6. 科研人员进行了土壤中分解尿素的细菌的分离和纯化培养，实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 步骤①获取土壤样品要遵循无菌操作原则，土壤样品要进行高压蒸汽灭菌 B. 步骤④选择的纯化培养基，加入尿素的目的是为微生物提供碳源和氮源 C. 通过步骤④培养基的筛选，得到的一定都是能分解尿素的细菌 D. 若步骤④平板上统计细菌菌落平均数为150，则土壤中含该种细菌约1.5×1010个/升 【答案】D 【解析】 【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。 【详解】A、步骤①土壤样品的获取过程要遵循无菌操作原则，但不能进行高压蒸汽灭菌，不然会杀死土壤中的根瘤菌，A错误； B、步骤④选择的纯化培养基的营养成分应该包括碳源、氮源水和无机盐等，加入尿素的目的是为微生物提供氮源，B错误； C、某些固氮菌不需要培养基提供氮源，所以能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长，所以通过步骤④培养基的筛选，其上生长的不一定都是能分解尿素的细菌，C错误； D、将10g土壤先稀释100倍，再进行梯度稀释1000倍，然后取0.1mL进行涂布平板，若步骤④平板上统计的菌落数平均为150个，则每克土壤含固氮菌约150÷0.1×100×1000÷10=1.5×107个，则土壤中含该种细菌约1.5×107×1000=1.5×1010个/升，D正确。 故选D。 7. 人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应如图）。下列叙述错误的是（ ） A. 实验所用培养基中要以纤维素作为唯一碳源 B. 培养基中需添加一定量的抗生素以防止微生物污染 C. 在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多 D. 图中降解纤维素能力最强的菌株是① 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落，降解圈大小与纤维素酶的多少和活性有关。纤维素酶的量越多，活性越强，分解的纤维素越多，透明圈的直径与相应菌落直径比值 越大，所以图中降解纤维素能力最强的菌株是①。 【详解】A、研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究，故实验所用培养基中要以纤维素作为唯一碳源，使得能够分解纤维素的菌种生存，A正确； B、使用抗生素会将目的菌种杀死，无法进行筛选，B错误； C、在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，避免菌落分布密集，连在一起，影响实验结果的观察，C正确； D、降解圈大小与纤维素酶的多少和活性有关。纤维素酶的量越多，活性越强，分解的纤维素越多，透明圈的直径与相应菌落直径比值 越大，所以图中降解纤维素能力最强的菌株是①，D正确。 故选B。 8. 分离、纯化细菌的实验中，平板划线法接种（甲）及培养结果（乙）如图所示，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述正确的是（ ） A. 实验所用培养基一般用干热灭菌法进行灭菌 B. 图中d区域的划线操作是从c区域划线的末端开始的 C. 为了防止杂菌污染，接种环灼烧后立即蘸取菌液进行划线 D. 图示划线接种过程中至少需要对接种环灼烧5次 【答案】D 【解析】 【分析】图示过程为平板划线法，平板划线法可对微生物进行纯化，只有第一次划线蘸取菌液，其余每次划线的菌落来自于上一次划线的末端。 【详解】A、实验所用培养基一般用湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌）进行灭菌，A错误； B、图中a对应的区域出现了单菌落，d区域菌落最多，因此a区域应该为划线的最终区域，d区域为划线的起始区域，即图中c区域的划线操作是从d区域划线的末端开始的，B错误； C、接种环灼烧后需适当冷却再蘸取菌液进行划线，避免将菌种烫死，C错误； D、蘸取菌液前需要灼烧一次接种环，之后在c、b、a区域划线前都要灼烧接种环，以保证菌种来自上一次划线的末端，划线结束后也要灼烧接种环，防止接种环上的菌种污染环境、感染接种者,因此接种过程中至少需要对接种环灼烧5次，D正确。 故选D。 9. 下图是利用甲、乙两种植物的各自优势，通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图。下列相关叙述错误的是（　　） A. 进行d 选择时要将植株种在高盐环境中 B. b 是诱导融合后得到的杂种细胞 C. c 是培养后得到的具有耐盐性状的幼芽 D. 进行a 处理时能用胰蛋白酶 【答案】D 【解析】 【分析】a为果胶酶和纤维素酶处理得到原生质体，b杂交细胞，c胚状体或丛芽，d高盐环境选择。 【详解】A、d选择需在高盐环境中进行，才能筛选得到高产、耐盐的杂种植株，A正确； B、b是甲乙融合的杂交细胞，B正确； C、c是培养后得到的耐盐的幼芽，由愈伤组织诱导分化而来，C正确； D、a为果胶酶和纤维素酶处理得到原生质体，D错误。 故选D。 10. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（ ） A. ①过程中细胞的不断分裂会出现染色体互换导致基因重组 B. ①②过程的发生主要与细胞分裂素和生长素的浓度和比例有关 C. 获得脱毒苗常用的外植体是植物的茎尖，脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D. 通过高产细胞系获得辣椒素的过程体现了细胞的全能性 【答案】B 【解析】 【分析】题图分析，图中①和②是植物组织培养过程，其中①是脱分化过程、②是再分化过程，上面一种途径是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物；下面一种途径是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物。 【详解】A、①过程中细胞进行的分裂是有丝分裂，该过程中不会发生基因重组，而基因重组发生在减数分裂过程中，A错误； B、①②过程分别是脱分化和再分化过程，这两个过程的发生主要与细胞分裂素和生长素的浓度和比例有关，B正确； C、因为植物顶端分生区附近的病毒极少，甚至没有病毒，所以将茎尖进行离体培养能获得脱毒植株，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力，C错误； D、由题图可知辣椒素是细胞代谢产物，通过细胞培养得到高产细胞系时就可产生，不需要发育成植株，该过程不能体现植物细胞的全能性，D错误。 故选B。 11. 下图是利用玉米（2N=20）的幼苗芽尖细胞（基因型BbTt）进行实验的流程示意图。下列分析错误的是（ ） A. ①过程可发生基因突变 B. 减数分裂发生在图中②过程 C. 植株B纯合的概率为25% D. 植株A为二倍体，植株C属于单倍体 【答案】C 【解析】 【分析】分析题图：图示为利用玉米（2N=20）的幼苗芽尖细胞（基因型BbTt）进行实验的流程示意图，其中①表示芽尖细胞组织培养，所得植株A的基因型与亲本相同；②表示减数分裂过程。幼苗2为花药离体培养形成的单倍体，其经过秋水仙素处理可以得到纯合体植株B，若直接培育可得到单倍体植株C。 【详解】A、①为植物组织培养，该过程可能发生基因突变，A正确； B、②表示减数分裂形成花药，B正确； C、植物B是通过花药离体培养获得的单倍体植株经染色体加倍所得，因此都是纯合子，C错误； D、植株A是由玉米的芽尖细胞经过植物组织培养获得的，是二倍体，植株C是由花药直接离体培养获得的单倍体，D正确。 故选C。 12. Vero细胞因不能合成抗病毒蛋白干扰素，广泛应用在病毒性疫苗生产上。将病毒接种到Vero细胞后，经细胞培养、病毒灭活及提纯，可制成病毒灭活疫苗。下列叙述正确的是（ ） A. 培养 Vero 细胞时，培养液中应加入适量血清以防止杂菌污染 B. 培养 Vero细胞时需要提供95%的O₂和5%的CO₂ C. 培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 D. 将病毒接种到Vero 细胞，培养后提取病毒可直接制成疫苗 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】A、培养 Vero 细胞时，培养液中应加入适量抗生素以防止杂菌污染，A错误； B、培养 Vero细胞时需要提供95%的空气和5%的CO2，B错误； C、在进行细胞培养时，培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，C正确； D、将病毒接种到Vero 细胞，培养后提取病毒需要经过处理，如灭活后才能制成疫苗，D错误。 故选C。 13. 犬细小病毒(CPV)主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。犬细小病毒VP2基因的大多数突变影响CPV 的抗原性和宿主范围，关键性位点的突变可能对现有诊断方法造成影响，因此对抗CPV的VP2蛋白单克隆抗体的制备有助于相关疾病抗体诊断试剂的研发。利用小鼠制备抗CPV的VP2单克隆抗体的基本流程如图所示，相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①中向小鼠注射的物质是CPV 的遗传物质 B. X细胞是骨髓细胞 C. 步骤③在培养细胞需要加入血清等天然成分，只需通入氧气 D. 此流程获得的单克隆抗体能够与CPV 的VP2蛋白特异性结合 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、步骤①中向小鼠注射的物质是CPV的VP2蛋白，目的是激活小鼠的免疫系统，获得能产生特定抗体的B淋巴细胞，A错误； B、图可知，图中X细胞是骨髓瘤细胞，该细胞在适宜条件下，能在体外无限增殖，B错误； C、 据图可知，步骤③为杂交瘤细胞筛选过程，除通入氧气外，还需通入CO2维持培养液的pH，C错误； D、此流程获得的单克隆抗体是抗CPV的VP2单克隆抗体，能与CPV 的VP2蛋白特异性结合，D正确。 故选D。 14. 我国致力于打造国际一流的奶牛繁育体系，集活体采卵、体外受精、性控技术、胚胎移植为一体的产业示范应用。下列叙述错误的是（ ） A. 采集的卵子需培养到MII期，才能与获能的精子受精 B. 可取囊胚期的内细胞团进行性别鉴定，筛选特定性别的胚胎 C. 为获得更多优良胚胎，可对发育良好、形态正常的桑葚胚进行胚胎分割 D. 胚胎移植过程，需对优良供体母牛和健康受体母牛进行同期发情处理 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养MⅡ期，才可以与精子完成受精作用，A正确； B、进行性别鉴定时的取材部位是滋养层细胞，B错误； C、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行操作，且对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，C正确； D、胚胎移植的过程中，需要对供体和受体母牛进行同期发情处理，使其处于相同的生理状态，以便胚胎移植，D正确。 故选B。 15. 如图是利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列关于该过程的分析，错误的是（ ） A. ②过程通常将胚胎培养到囊胚或原肠胚再进行分割 B. 在进行①过程之前，需要对采集到的卵子继续培养、对精子进行获能处理 C. ③过程中可从滋养层取样，做DNA分析，鉴定性别 D. ⑤过程是胚胎移植，移植前需要对供体、受体进行同期发情处理 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复， ⑤是胚胎移植。 【详解】A、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，将它移入盛有操作液的培养皿中，然后在显微镜下用分割针或分割刀分割，A错误； B、在进行①过程之前，需要对采集到的卵子继续培养至MⅡ期、对精子进行获能处理，B正确； C、内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，③过程中可用分割针从滋养层取样，做DNA分析，鉴定性别，C正确； D、⑤过程是胚胎移植，移植前需要对供体、受体进行同期发情处理，D正确。 故选A。 16. 有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给“渐冻症”实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是（ ） A. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多 B. iPS细胞分化成的多种细胞中遗传物质不相同，蛋白质也不相同 C. 若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，则可以起到良好的治疗作用 D. 植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使“渐冻症”病情改善 【答案】B 【解析】 【分析】细胞分化的结果是形成形态、结构和生理功能不同的细胞，使细胞的种类增多，其实质是基因的选择性表达。 【详解】A、细胞分化的结果是形成形态、结构和生理功能不同的细胞，使细胞的种类增多，A正确； B、细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此iPS细胞分化成的多种细胞中DNA相同，RNA和蛋白质不完全相同，B错误； C、若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，则无法合成该毒蛋白，所以可以起到治疗该病的作用，C正确； D、植入神经干细胞，诱导分化成前驱细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使“渐冻症”病情改善，D正确。 故选B。 17. 下图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图（其中ampr为抗氨苄青霉素基因）。下列叙述错误的是（　　） A. ④过程中可利用目基因作为探针对植株进行筛选 B. 可同时选用限制酶PstI、SmaI对含目的基因的DNA进行剪切 C. 过程②可采用农杆菌转化法将含目的基因的表达载体导入受体细胞 D. 质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞和促进目的基因的表达 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图示为转基因抗冻番茄培育过程的示意图，图中①表示基因表达载体的构建过程；②表示将目的基因导入受体细胞；③表示植物组织培养过程；④表示转基因植物的检测。 【详解】A、④过程中可利用目的基因作为探针对植株进行筛选，以获得含有目的基因的植株，A正确； B、Alu酶切位点位于目的基因内部，若选择该酶切割会破坏目的基因，若选择同一种限制酶切割目的基因，则容易导致构建基因表达载体时形成自体连接，而目的基因两侧含有限制酶PstⅠ和SmaⅠ的识别序列，且质粒上也含有这两种限制酶的切割位点，所以可同时选用限制酶PstⅠ、SmaⅠ对含目的基因的DNA进行切割，B正确； C、农杆菌转化法适用于双子叶植物或裸子植物，因此过程②可采用农杆菌转化法将含目的基因的表达载体导入受体细胞，C正确； D、质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞，但不能促进目的基因的表达，D错误。 故选D。 18. 有关PCR技术，下列叙述不正确的是（ ） A. 是聚合酶链式反应，是以DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术 B. 在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似 C. PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸 D. PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸 【答案】C 【解析】 【分析】PCR技术： 1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 2、原理：DNA复制。 3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。 4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）； 5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【详解】A、聚合酶链式反应，是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术，A正确； B、在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似，B正确； C、PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，需提供DNA模板、一对引物、四种脱氧核苷酸及热稳定DNA聚合酶等，C错误； D、PCR一般经历三十多次循环，每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段，D正确。 故选C。 【点睛】 19. 下图为不同限制性内切核酸酶识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是（　　） A. 图示4种限制酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列 B. 若DNA上的碱基随机排列，Not I限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高 C. 使用两种限制酶同时处理质粒和含目的基因的外源DNA可防止二者发生自身环化 D. 用酶Bgl II切出的目的基因与酶BamH I切割的质粒重组后，不能再被这两种酶切开 【答案】B 【解析】 【分析】1、常用的运载体：质粒（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子）、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 2、作为运载体必须具备条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。 3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 【详解】A、酶具有专一性，限制酶是专门切割DNA序列中一定部位的酶，所以图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列，A正确； B、由于Not I限制性核酸内切酶识别的序列比其他三种酶的序列长，若DNA上的碱基随机排列，Not I限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶低，B错误； C、两种不同的限制酶可产生不同的黏性末端，所以使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，C正确； D、用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，重组DNA分子序列为 ，6个脱氧核苷酸序列既不能被限制酶BglⅡ识别，也不能被BamHⅠ识别，所以不可能被这两种酶切开 ，D正确。 故选B。 20. 基因工程利用某目的基因（图甲）和P1噬菌体载体（图乙）构建重组DNA．限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ下列分析错误的是（　　） A. 构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 B. 构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 C. 图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团 D. 用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA 【答案】D 【解析】 【分析】一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割，切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。 【详解】A、如果用BglⅡ和Sau3A I切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3A I切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确； B、由于Sau3A I的切割位点在EcoR I的左侧，因此用EcoR I和Sau3A I切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoR I和Sau3A I切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确； C、P1噬菌体载体为环状DNA，其上只含有一个EcoR I的切点，因此用EcoR I切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确； D、从图甲看出，用EcoR I切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoR I切口对接时，方向可能接反，即可产生两种重组DNA，D错误。 故选D。 第Ⅱ卷（共40分） 二、填空题 21. 科研人员按照如图所示流程从盐湖土壤中分离筛选出了一株高产α-淀粉酶的耐盐性菌株NWU-8并进行扩大培养，实验中需要a、b两种培养基，a的组分为牛肉膏、蛋白胨、高浓度NaC1、水，相比培养基a，培养基b的组分增加了可溶性淀粉。回答下列问题： （1）培养基a中的氮源主要是________，从功能上讲它属于________培养基。 （2）要在培养基上形成菌落，a、b培养基中均还应加入________，挑取a培养基平板上的菌落进一步划线纯化时，下列图示中正确的操作示意图为________。 （3）培养基b中的碳源主要是________，b培养基平板滴加碘液后，部分菌落周围出现透明圈，其中菌落直径与透明圈直径的比值________（“大”或“小”）的菌落初步判断为产酶能力较高的菌株。 （4）科研人员欲进一步探究不同NaCl浓度的培养基对菌株NWU-8产α-淀粉酶的影响，设计并实施了相关实验。该实验对照组为________。 （5）对已有的土壤样液稀释107倍，取0.1ml稀释液涂布平板上，每隔24h统计一次菌落的数目，菌落数分别是90、163、158，推测土壤样液中菌体的数量为________个/L。 【答案】（1） ①. 蛋白胨 ②. 选择 （2） ①. 琼脂 ②. A （3） ①. 牛肉膏和可溶性淀粉 ②. 小 （4）将菌株NWU-8培养在不含NaCl，但其他营养成分完全一样的培养基上 （5）1.37×1013 【解析】 【分析】实验室中目的菌株的筛选：①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。②从土壤中分离目的微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。③培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌，富集培养可以使用液体培养基，选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。 【小问1详解】 培养基通常都含有碳源、氮源、水和无机盐，培养基a中氮源蛋白胨；主要是培养基 a 中含有高浓度 NaCl，能在这种培养基上生长的微生物应具有耐盐性，而该实验目的是从盐湖土壤中分离筛选出一株高产 α-淀粉酶的耐盐性菌株，所以从功能上讲它属于选择培养基。 【小问2详解】 要在培养基上形成菌落，要制成固体培养基，a、b 培养基中均还应加入凝固剂琼脂； 平板划线操作中，每次划线的菌种来自上一次划线末端，从而使菌种逐渐稀释，最终得到单个菌落，正确的操作示意图为 A。 【小问3详解】 培养基 b 中的碳源主要是可牛肉膏和可溶性淀粉； 出现透明圈，说明淀粉被微生物分解了，其中菌落直径与透明圈直径的比值小的，表示透明圈直径越大，可初步判断为产酶能力较高的菌株。 【小问4详解】 该实验的自变量是不同 NaCl 浓度的培养基，因此该实验对照组为将菌株NWU-8培养在不含NaCl，但其他营养成分完全一样的培养基上。 【小问5详解】 对已有的土壤样液稀释107倍，取0.1ml稀释液涂布平板上，每隔24h统计一次菌落的数目，菌落数分别是90、163、158，菌落数在30-300之间，则土壤样液中菌体的数量为（90＋163＋158）/3÷0.1×107×103=1.37×1013个/L。 22. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示： （1）过程①常用的酶是_____，杂种细胞形成的标志是_____。 （2）植物原生质体融合过程常利用化学试剂_____诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到不同的原生质体，当观察到融合的细胞表面_____时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 （3）过程③和过程④依次为_____，过程④中的培养基常添加的植物激素是生长素和_____。 （4）若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞含_____条染色体。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶     ②. 杂种细胞再生出新的细胞壁 （2） ①. 聚乙二醇##PEG ②. 有两种颜色的荧光标记 （3） ①. 脱分化和再分化  ②. 细胞分裂素 （4）m+n 【解析】 【分析】分析题图：图示为番茄一马铃薯杂种植株的培育过程，①表示去壁过程，常用酶解法；②表示融合的原生质体再生出细胞壁的过程；③表示脱分化过程；④表示再分化过程。 【小问1详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此根据酶的专一性原理，去除植物细胞壁常用纤维素酶和果胶酶；细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁。 【小问2详解】 植物原生质体融合过程常利用化学试剂聚乙二醇诱导；在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光不同可观察到：细胞膜上含有两种颜色的荧光标记时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 小问3详解】 过程③脱分化，过程④再分化，过程④再分化中的培养基常添加的植物激素是生长素和细胞分裂素。 【小问4详解】 杂种细胞的染色体数为两种细胞染色体数之和即（m+n）。 23. 抗体—药物偶联物目前已成为肿瘤治疗最有效的手段之一，其基本原理是将特定的药物与单克隆抗体结合在一起，可特异性地杀死患者体内的癌细胞，基本过程如图所示.回答下列问题： （1）在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射_______(填“相同”或“不同”)特定抗原，注射后小鼠体内发生相应的免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 （2）与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用_____________(填具体方法)诱导动物细胞融合。 （3）过程③用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是__________________，过程④对细胞丙进行________培养和__________检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是_______________。 （4）紫杉醇能阻止肿瘤细胞有丝分裂，促进其凋亡，用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，这利用的是单克隆抗体的____________(填“导向”或“治疗”) 功能。 【答案】（1）相同 （2）灭活病毒 （3） ①. 无限增殖， 又能产生特异性抗体 ②. 克隆化 ③. 抗体阳性 ④. 抗原-抗体特异性结合 （4）导向 【解析】 【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。 【小问1详解】 在获得细胞甲之前，小鼠已被多次注射相同的特定抗原，使小鼠产生更多的已被免疫的B淋巴细胞，注射后的小鼠体内发生相应的体液免疫反应，生成能产生抗体的细胞。 【小问2详解】 过程②表示B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合过程，与诱导植物体细胞杂交过程不同的是，过程②可以采用灭活病毒诱导法诱导动物细胞的融合。 【小问3详解】 过程③表示用特定的选择培养基对细胞乙进行筛选，所得细胞丙的特点是既能无限增殖，又能产生抗体。过程④对细胞丙进行克隆化培养和抗体检测，最终得到细胞丁，其中检测时所采用的操作技术的原理是抗原和抗体的特异性结合。 【小问4详解】 与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点有特异性强，可大量制备，纯度高。用单克隆抗体与紫杉醇结合研制而成的“生物导弹”，对某些癌症患者有较好的疗效，利用的是单克隆抗体的导向功能。 24. 世界卫生组织解释克隆为“遗传上同一机体或细胞系（株）的无性繁殖”。相对于植物克隆而言，动物尤其是高等动物的克隆比较困难，下图表示哺乳动物克隆的几种方法的主要步骤，据图回答问题： （1）方法2获得的小牛的细胞核遗传物质来源于_______________。方法3中①和②发育成的小牛的遗传物质_______________（填“相同”或“不同”）。 （2）细胞B取自囊胚的_______________，具有发育全能性，称为_______________细胞。囊胚_______________（填“已经”或“尚未”）出现分化。 （3）应用图示方法_______________得到小牛与供体1遗传物质最相似。 （4）克隆也可以理解为复制、拷贝，结合世界卫生组织的定义，你认为还有哪些现代生物技术也属于克隆：_______________（至少写出两个）。 【答案】（1） ①. 供体1和供体2 ②. 相同 （2） ①. 内细胞团 ②. 胚胎干 ③. 已经 （3）1 （4）制备单克隆抗体、植物组织培养、PCR技术等 【解析】 【分析】分析题图：图示表示哺乳动物克隆的几种方法的主要步骤，其中方法1主要采用了核移植技术来培育克隆动物，该技术得到的子代的遗传物质主要来自供体；方法2主要采用体外受精技术，该技术得到的子代的遗传物质来自双亲；方法3主要采用了胚胎分割技术。 【小问1详解】 方法2提取的细胞来自正常受精作用形成的胚胎，而受精卵的遗传物质来自双亲，结合图解可知方法2获得的小牛的遗传物质来源于供体1和供体2。方法3中采用了胚胎分割技术，而来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此方法3中①和②发育成的小牛的遗传物质相同。’ 【小问2详解】 细胞B取自囊胚的内细胞团，内细胞团的细胞具有很高的全能性，称为胚胎干细胞。囊胚已经出现了内细胞团细胞和滋养层细胞的分化。 【小问3详解】 动物细胞核移植获得个体，遗传物质几乎与供体相同。因此，应用图示方法1得到的小牛与供体1遗传物质最相似。 【小问4详解】 ）根据世界卫生组织对克隆的概念可知除上述个体克隆外，植物组织培养也是个体克隆，制备单克隆抗体是细胞的克隆，PCR技术是分子的克隆。 【点睛】本题结合图解，考查胚胎工程的相关知识，识记胚胎工程的相关技术及具体操作，尤其是胚胎移植和胚胎分割的相关内容，能结合图中信息答题是解题关键。 25. 下列是基因工程的有关问题，请回答： （1）限制性核酸内切酶可以识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并可以使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的________（填化学键名称）断裂，形成的末端总体可分为两种类型，分别是________。 （2）目的基因和载体重组时需要的工具酶是________，与限制性核酸内切酶相比，它对所重组的DNA两端碱基序列________（填“有”或“无”）专一性要求。 （3）如图表示的是构建表达载体时的某种质粒与目的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。 分析可知，最好选择限制酶_____切割质粒，限制酶_____切割目的基因所在的DNA。 【答案】（1） ①. 磷酸二酯键 ②. 黏性末端和平末端 （2） ①. DNA连接酶 ②. 无 （3） ①. Ⅰ ②. Ⅱ 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 限制酶作用的化学键是磷酸二酯键；限制性核酸内切酶切割DNA分子后形成平末端或黏性末端。 【小问2详解】 DNA连接酶能将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，对所重组的DNA两端的碱基序列无专一性。 【小问3详解】 限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—，目的基因的两端皆有限制酶Ⅱ的识别序列，用限制酶Ⅰ切割质粒只会破坏一个标记基因，用限制酶Ⅱ切割质粒则会将两个标记基因全部破坏，故最好选择选择限制酶I切割质粒，限制酶II切割目的基因所在的DNA。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$