精品解析：吉林省长春市绿园区长春市十一高中2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题

长春市十一高中2024-2025学年度高二下学期第一学程考试 生物试题 第I卷（共45分） 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. “碳中和”是指国家、企业、产品、活动或个人在一定时间内直接或间接产生的二氧化碳或温室气体排放总量实现正负抵消，达到相对零排放。新农村建设开发沼气工程，以人畜粪便、秸秆为原料，产生的沼气可以为燃料，沼渣可以作为家禽的饲料及食用菌的培养基，沼液通入养鱼池用于促进浮游生物的生长，增加鱼的饲料，减少对林灌草地进行滥采滥伐，保护生态环境。下列说法错误的是（ ） A. 沼气工程充分利用了循环原理，实现了能量的多级利用，大大提高了能量传递效率 B. 在保护林灌草地改善水土流失的过程中，体现了生物多样性的间接价值 C. 对林灌草地进行保护后，很多鸟类和小动物迁入、定居，改变了演替的速度和方向 D. 可以通过植树造林、种草、开发沼气等绿色清洁能源来尽早实现“碳中和” 2. 传统发酵食品的制作需要各种各样的微生物，且控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（　　） A. 制作泡菜时，发酵后期尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需要定期开盖放气 B. 醋酸菌在O2、糖源充足时将乙醇转化为乙醛，然后变为醋酸 C. 葡萄皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后可直接通入无菌空气制作葡萄醋 D. 腐乳制作过程中参与的微生物包括酵母、曲霉和毛霉等，其中毛霉起主要作用 3. 两位同学食用冰激凌后出现腹泻症状，为此他们检验冰激凌中大肠杆菌数量是否超标。他们的实验流程和结果如下图。下列叙述不合理的是（ ） A. ①应采用涂布平板法 B. 实验方案应增设仅接种无菌水的组别 C. ①应接种至少3个平板 D. 仅以深紫色菌落数估测会导致结果偏高 4. 某实验小组测定土壤中能分解尿素的活菌数，在实验组的每个平板上接种0.1mL稀释105倍的土样稀释液，培养后发现实验组4个平板上的菌落数分别为17、68、69、75，下列相关叙述正确的是（ ） A. 用清水将土样制成1×103～107倍稀释的稀释液后灭菌处理 B. 接种所用的培养基是湿热灭菌处理后的牛肉膏蛋白胨培养基 C. 如果未接种的对照组平板上有菌落出现，应重新进行实验 D. 该实验所用每克土样中能分解尿素的活菌数为5.7×107个 5. 发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品．目前在许多领域得到了广泛的应用。下列说法错误的是（ ） A. 发酵工程大多使用单一菌种，可以从自然界中筛选也可以通过诱变育种或基因工程育种获得 B. 发酵工程的中心环节是分离、提纯产物，如果产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法分离 C. 在酸性和碱性条件下谷氨酸棒状杆菌积累的代谢产物不同，发酵过程需严格控制pH值 D. 发酵工程可用于生产微生物农药，主要是利用微生物或其代谢物来防治病虫害 6. 科研人员以携带葡萄灰比诺病毒的“阳光玫瑰”葡萄为材料，研究了外植体取材部位、光照处理和热处理方式对脱除病毒的影响，结果如下表所示。相关叙述错误的是（ ） 组号 温度/光照+湿度/黑暗 接种部位 存活率/% 株系脱毒率/% 1 38℃/16h+38℃/8h 茎尖 50.00 ———— 2 同上 第1腋芽 33.33 ———— 3 同上 第2腋芽 0 ———— 4 38℃/8h+32℃/8h 茎尖 88.89 100.00 5 同上 第1腋芽 94.44 100.00 6 同上 第2腋芽 94.44 83.33 A. 接种前不应对外植体消毒，以免干扰各处理条件下的株系脱毒率 B. 茎尖和第1、2腋芽都含有顶端分生组织，因此可以作为脱毒材料 C. 研究人员未检测1～3组脱毒率的原因可能是该条件下外植体存活率较低 D. 生产中应选择38℃/8h光照+32℃/8h黑暗，以第1腋芽为外植体脱毒 7. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（ ） A. 实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变 B. ①过程受外源激素的调控，②过程受内源激素的调控 C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D. 通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现细胞的全能性 8. 植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下列相关叙述正确的是（ ） A. 取草莓茎尖进行植物组织培养可获得抗病毒苗 B. 玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株能稳定遗传 C. 红豆杉细胞经植物组织培养技术可工厂化生产紫杉醇 D. 可采用诱变处理烟草愈伤组织的方法来获得烟草抗盐碱突变体 9. 某研究小组为测定药物对体外培养细胞毒性的大小，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列说法正确的是（　　） A. 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶代替胰蛋白酶处理肝组织 B. CO2培养箱中CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸 C. 本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小 D. 为防止细胞培养过程中细菌的污染，需要对培养液和所有培养用具进行消毒处理以及在无菌环境下进行操作 10. 2019年，南京农业大学的“人造肉”研发团队培养出中国第一块肌肉干细胞培养肉。其培养过程如图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 分散肌肉细胞可以采用机械法或酶解法 B. 体外大规模培养肌肉细胞的过程中不会出现接触抑制现象 C. 与传统肉类生产方式相比，细胞培养肉对环境的污染更小，可以减少生态足迹 D. 胚胎干细胞可以培养出肌肉组织、结缔组织等多种组织或器官，肌肉干细胞一般具有组织特异性，只能培养获得肌肉组织 11. 干眼症是由于泪液分泌减少导致的眼睛干涩病症。将有关基因导入已分化的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），培养iPS细胞得到的眼结膜组织可分泌泪液成分“粘液素”，有望治疗干眼症。下列说法不正确的是（ ） A. 导入的基因具有促使体细胞恢复分裂能力的作用 B. 利用iPS细胞获得眼结膜组织时，应加入分化抑制因子 C. 利用iPS细胞治疗人类疾病理论上可避免免疫排斥反应 D. iPS细胞可在一定程度上避免胚胎干细胞涉及的伦理问题 12. 我国科学家成功培育了体细胞克隆猴。在处理重构胚时，将组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA、组蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA 注入了重构胚，促进囊胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。下列叙述错误的是（　　） A. 除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理法在没有穿透卵母细胞透明带的情况下使其中的DNA 变性 B. TSA 能够抑制组蛋白脱乙酰酶的作用从而降低组蛋白的乙酰化水平 C. 组蛋白去甲基化酶KDM4D能够降低组蛋白的甲基化水平 D. 培育克隆猴对研究人类疾病致病机制和研发新药有重要意义 13. 南开大学研究团队展开科研攻关，研制出了集检测分析与操作于一体的原位显微分析与操作仪，实现了机器人化的细胞核移植流程，世界首例机器人操作的体细胞克隆猪在天津诞生。下列有关克隆技术说法错误的是（ ） A. 体细胞克隆猪的核遗传物质绝大部分来自供体细胞，少部分来自受体细胞 B. 通过植物组织培养克隆植物个体时，可通过增大培养基中生长素和细胞分裂素的比值来诱导生根 C. 制备单克隆抗体时，灭活病毒表面的糖蛋白和一些酶类物质在促进B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程中发挥重要作用 D. 机器人操作诞生体细胞克隆猪这一过程属于无性生殖 14. 下列关于植物组织培养技术和动物细胞核移植技术的说法，错误的是（ ） A. 两项技术均说明细胞具有全能性 B. 两项技术均可用于濒危物种的保护 C. 植物细胞全能性表达需要离体、一定的营养物质、植物激素等条件 D. 去核的受体卵母细胞中可能含有促进供体细胞核表达全能性的物质和条件 15. 下表为细胞工程技术的相关应用，各组所选择的实验材料、材料特点与实验目的匹配正确的是（ ） 组别 实验目的 实验材料 材料特点 A 克隆高产奶牛 受精卵 细胞大，细胞质能有效调控核发育 B 培育脱毒草莓 茎尖 分裂能力强，易诱发突变 C 培育西红柿马铃薯超级杂种 花粉粒 易于获取，易于组织培养 D 烧伤患者皮肤细胞移植 自体皮肤生发层细胞 分裂能力强，且不会引起免疫排斥 A. A B. B C. C D. D 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 野外曾一度消失的中华穿山甲在衡阳、永州等地相继出现；5只美丽的彩鹦在郴州市区的农田中悠闲觅食；水松、银杉等珍贵濒危野生植物种群得到恢复性增长……近年来，一些珍稀野生动植物频频“亮相”山水之间。下列叙述正确的是（　　） A. 以上信息体现了生物遗传多样性和种群多样性 B. 对濒危物种可采取克隆的方法放归自然，可增加物种多样性 C. 在保护生物与环境的同时，也关注农民的生产和生活，这遵循整体原理 D. 为了实现可持续性发展，人类不可过度从土地索取更多资源 17. 细胞产物的工业化生产可以使植物细胞内一些具有药用价值的次生代谢产物分泌到细胞膜外，然后从培养基中直接分离纯化得到目标次生代谢产物。例如，Aoyagi将长春花体细胞用富含古罗糖醛酸的藻酸盐凝胶固定起来，然后大量生产吲哚类生物碱。以下说法正确的是（ ） A. 需筛选吲哚类生物碱产量大的细胞进行培养，利用促进细胞生长的培养条件可进一步提高单个细胞的产量 B. 悬浮培养生产代谢物时，若添加抑制细胞壁生长的物质，可能会达到较好的分泌效果 C. 在原生质体培养中，还可以通过添加各种化合物以研究其对植物细胞生长分化的影响 D. 反应器中培养基为液态，培养物处于愈伤组织阶段，除了营养物质以外一般还需要提供诱导代谢物产生的物质和条件 18. 由单一B细胞克隆产生的针对某一特定抗原的抗体，称为单克隆抗体；由多种抗原刺激机体，相应地就产生多种抗体混杂在一起，称为多克隆抗体。如图表示单克隆抗体和多克隆抗体的制备过程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 两种技术均依赖于细胞膜的流动性，②③④⑤的差异是由细胞内基因不同造成的 B. 两种技术均需要对小鼠进行特定抗原的免疫和特定细胞的筛选、鉴定和培养 C. 两种技术均需要从小鼠的血清中收集抗体，但单克隆抗体具有更高的特异性 D. ①含有的多种抗体，源于不同的浆细胞，可与同种病原体的不同抗原结合 19. 粤东黑猪由于生长速度慢、瘦肉率低等缺点，近年来已被列入我国濒危地方猪种。科研人员通过体细胞核移植技术，顺利获得6头健康状况良好的纯种粤东黑猪，具体流程如图。下列相关叙述正确的是（ ） A. ①首先要将取得的耳部组织分散成单个细胞，用培养液将细胞制成细胞悬液 B. ②是细胞融合过程，常用PEG融合法，电融合法和灭活病毒等诱导细胞融合 C. ③是用电刺激、Ca2+载体，乙醇或蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 D. 通过体细胞克隆技术可大量生产粤东黑猪，对地方猪的保种工作具有重大现实意义 20. 为保证实验的成功，选择合适的生物材料非常关键。下列选择合理的是（ ） A. 选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率 B. 选择草莓的茎尖进行组织培养可获得抗病毒草莓 C. 以病人的体细胞诱导成iPS细胞，进而形成无免疫排斥的移植器官 D. 对愈伤组织进行诱变处理可筛选出有用的突变体 第Ⅱ卷（共55分） 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 世界上许多热带、亚热带国家或地区，由于环境温度过高，普通酵母菌难以进行正常乙醇发酵，因此选育耐高温菌株具有重要价值。下表是科学家选用合适菌株进行属间细胞融合培育耐高温的高产酵母菌株的过程。 （1）请完成下表 实验步骤 简易操作 原理及分析 ①.选择菌株 选用产酒率低但可以耐受45℃高温的呼吸缺陷型克鲁维酵母Y菌株和产酒率高但无法在45℃下生长的酿酒酵母A菌株为亲株。 呼吸缺陷型Y菌株线粒体功能丧失，只能进行无氧呼吸，与A菌株相比，菌体细胞较_________（大、小）。 ②.________ 将亲本菌株活化培养后，先用脱壁预处理剂处理一定时间，然后加入2%蜗牛酶液，摇床振荡处理0.5-1hr。 蜗牛酶液可以消化真菌细胞壁。 ③.________ 先用碘乙酸处理Y菌株，然后与A菌株等量混合，加入________（促融剂名称），在28℃下，保温45min。 碘乙酸可以不可逆地抑制细胞中酶的活性，使其失活；融合过程需要在_________中进行，以免吸水涨破。 ④.筛选A-Y融合菌株 将步骤3得到的菌液用________法接种在高渗再生平板上，45℃培养3天，然后加入TTC，________（无色、红色）菌落即为融合株。 无色的TTC可被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原为红色物质，使菌落呈现红色。 ⑤.筛选高产融合株 第4步选出的菌株在___________℃，18%葡萄糖溶液中发酵，并进行比较。 通过对比产酒率和糖利用率选出更优良的菌株。 （2）第3步操作依据的原理是_________。除上述方法外，还可用紫外线处理Y菌株或A菌株，并从中筛选合适的菌株，该育种方法的原理是________。 （3）A-Yoos为复筛获得的产酒率最高的菌株，将其与亲株Y菌株放在相同葡萄糖基质中，在相同且适宜温度下充分发酵，糖利用率见图1；同时检测该温度下两菌株对不同浓度酒精的耐受性，结果见图2（吸光度值越大表示活细胞数量越多）。 试分析A-Y005产酒率更高的原因是_________。 22. 枸杞是一味传统中药，野生黑果枸杞富含花青素，且抗逆性强，但比人工种植的宁夏枸杞个体小、产量低。研究人员尝试利用不对称植物体细胞杂交技术将野生黑果枸杞的抗逆性状转移到宁夏枸杞中。 （1）愈伤组织细胞生长旺盛，是制备原生质体的良好材料。在特定的培养条件下，外植体经过______转变成愈伤组织，培养基中________是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因素。 （2）不对称植物体细胞杂交操作过程如下： ①对黑果枸杞原生质体进行辐射处理，使其细胞核中的______部分断裂，用药物处理宁夏枸杞原生质体，使其细胞质中的某些酶失活，两种原生质体都失去分裂能力。 ②用化学诱导剂_________诱导原生质体融合，培养体系中只有两种不同枸杞的融合原生质体可分裂形成再生愈伤组织。 （3）研究人员对3种愈伤组织的同工酶进行检测。同工酶是功能相同，但酶本身的分子结构、理化性质等方面有所不同的一组酶。 ①过氧化氢酶的功能是______。将提取的愈伤组织蛋白质进行电泳，电泳后的凝胶浸泡在淀粉、KI和H2O2混合溶液中，已知KI遇O2生成I2，一段时间后过氧化氢酶所在部位显色，如下图所示。显色条带为_____色，显色深浅由酶的_______决定。 ②结果显示融合原生质体再生愈伤组织中缺乏来自______的部分过氧化氢同工酶，原因可能是_______。 （4）本研究中，获得多株杂种植株后下一阶段的研究方向是___________。 23. 动物细胞培养在实践中有很大的用途——在检验药物毒性和开发药物方面有重要的应用。为研究药物的抗肝癌效果，需要大量肝癌细胞作为实验材料。回答下列问题： （1）癌细胞其中一个特点是能够无限增殖，据此推测培养肝癌细胞时，______（填“会”或“不会”）发生接触抑制现象。 （2）为了初步检测药物X和Y的抗癌效果，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚砜（溶剂）的药物X或Y，培养过程及结果如图表所示。对照组应加入的是______。根据实验结果判断，药物X、药物Y均有抗癌作用，抗癌效果更好的是______，判断依据是______。 （3）为降低药物X治疗肝癌的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），制备单克隆抗体的过程中，可用灭活病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与____________发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的______分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。ADC进入肝癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物作用于肝癌细胞，可导致______（填“细胞凋亡”或“细胞坏死”）。与直接使用抗肿瘤药物相比，ADC对人体的副作用更小，原因是____________。 24. 癌症免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸。科研人员在研究中发现多种免疫治疗方法结合是提高治疗效果的途径之一。 图2 （1）某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1。PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。其制备方法如下：将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，再经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取免疫效果最好的小鼠用于后面的融合实验。该过程中，进行二次免疫的目的是______________。接着从小鼠的__________中取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。 （2）一段时间后，将（1）所得细胞接种到96孔培养板上，静置培养一段时间，进行抗体阳性检测，如图2。 ①检测原理是________________。在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面，并加入96孔板培养槽中的__________（沉淀/上清液），即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与__________结合的酶标抗体洗去。 ③加入相应酶促反应底物显色，颜色_________（填“深”或“浅”）的组更符合需求。 （3）CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，如图3。这种双特异性抗体的优势在于__________。 图3 25. 我国研究人员培育出了细胞核移植灵长类动物——食蟹猴，流程如图甲所示，①~②表示过程。研究发现向融合细胞中注入酶X的mRNA后，能显著提高融合细胞发育成囊胚的成功率，这与染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，调控了相关基因的表达有关，过程如图乙所示。据图分析回答下列问题： （1）在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常的困难，一方面是由于_____，导致胚胎发育率低；另一方面是对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。 （2）图甲过程①在原代培养时，细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖，这种现象叫_____，进行传代培养时制备细胞悬液的操作是_____。过程②中供体核进入卵母细胞形成重构胚，可用_____（填出两种）的方法使其激活，完成细胞分裂和发育的进程。 （3）图甲中向融合细胞中注入酶X的mRNA有利于相关基因恢复表达，从而提高实验成功率，据图乙分析，酶X可能是_____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 长春市十一高中2024-2025学年度高二下学期第一学程考试 生物试题 第I卷（共45分） 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. “碳中和”是指国家、企业、产品、活动或个人在一定时间内直接或间接产生的二氧化碳或温室气体排放总量实现正负抵消，达到相对零排放。新农村建设开发沼气工程，以人畜粪便、秸秆为原料，产生的沼气可以为燃料，沼渣可以作为家禽的饲料及食用菌的培养基，沼液通入养鱼池用于促进浮游生物的生长，增加鱼的饲料，减少对林灌草地进行滥采滥伐，保护生态环境。下列说法错误的是（ ） A. 沼气工程充分利用了循环原理，实现了能量的多级利用，大大提高了能量传递效率 B. 在保护林灌草地改善水土流失的过程中，体现了生物多样性的间接价值 C. 对林灌草地进行保护后，很多鸟类和小动物迁入、定居，改变了演替的速度和方向 D. 可以通过植树造林、种草、开发沼气等绿色清洁能源来尽早实现“碳中和” 【答案】A 【解析】 【分析】沼气池生态工程以废弃物为原料对废弃物进行了再利用，遵循了循环原理。沼气可以作为燃料为人类供能，沼渣可以用来养蘑菇，为人类及家禽家畜提供食物，实现了能量的多级利用，提高了能量的利用率。 【详解】A、沼气工程“以人畜粪便、秸秆为原料，产生的沼气可以为燃料，沼渣可以作为家禽的饲料及食用菌的培养基，沼液通入养鱼池用于促进浮游生物的生长，增加鱼的饲料，减少对林灌草地进行滥采滥伐，保护生态环境”，该过程充分利用了循环原理，实现了能量的多级利用，大大提高了能量的利用率，不能提高能量传递效率，A错误； B、保护林灌草地改善水土流失，属于生态功能，体现了生物多样性的间接价值，B正确； C、人类对林灌草地滥采滥伐会使生物种类减少，而对林灌草地进行保护后，很多鸟类和小动物迁入、定居，使生物种类增加，改变了演替的速度和方向，C正确； D、为尽早实现“碳中和”，我们一方面，可以通过植树造林、退耕还林还草等增加生产者的光合作用；另一方面，可以开发风电、核电、水能、沼气等新能源，D正确。 故选A。 2. 传统发酵食品的制作需要各种各样的微生物，且控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（　　） A. 制作泡菜时，发酵后期尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需要定期开盖放气 B. 醋酸菌在O2、糖源充足时将乙醇转化为乙醛，然后变为醋酸 C. 葡萄皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后可直接通入无菌空气制作葡萄醋 D. 腐乳制作过程中参与的微生物包括酵母、曲霉和毛霉等，其中毛霉起主要作用 【答案】D 【解析】 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。 【详解】A、乳酸菌属于厌氧菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，A错误； B、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为乙酸，B错误； C、醋酸菌为需氧菌，且发酵温度高于果酒的发酵温度，因此制作好葡萄酒后，除通入无菌空气，还需要适当提高发酵装置的温度，C错误； D、腐乳制作过程中参与的微生物包括酵母、曲霉和毛霉等，其中毛霉起主要作用，豆腐中的蛋白质被分解为小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化吸收，D正确。 故选D。 3. 两位同学食用冰激凌后出现腹泻症状，为此他们检验冰激凌中大肠杆菌数量是否超标。他们的实验流程和结果如下图。下列叙述不合理的是（ ） A. ①应采用涂布平板法 B. 实验方案应增设仅接种无菌水的组别 C. ①应接种至少3个平板 D. 仅以深紫色菌落数估测会导致结果偏高 【答案】D 【解析】 【分析】1、微生物常见的接种的方法：平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法可用于微生物的计数。2、稀释涂布平板法统计菌落数目的原理：①当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。 【详解】A、图中①是稀释涂布平板法，A正确； B、为排除无菌水的干扰，应增设仅接种无菌水的组别作为空白对照，B正确； C、每个稀释梯度应设置3个平行实验，减小误差，C正确； D、稀释涂布平板法，可能两个单菌落长到一起，所以仅以深紫色菌落数估测会导致结果偏低，D错误。 故选D。 4. 某实验小组测定土壤中能分解尿素的活菌数，在实验组的每个平板上接种0.1mL稀释105倍的土样稀释液，培养后发现实验组4个平板上的菌落数分别为17、68、69、75，下列相关叙述正确的是（ ） A. 用清水将土样制成1×103～107倍稀释的稀释液后灭菌处理 B. 接种所用的培养基是湿热灭菌处理后的牛肉膏蛋白胨培养基 C. 如果未接种的对照组平板上有菌落出现，应重新进行实验 D. 该实验所用每克土样中能分解尿素的活菌数为5.7×107个 【答案】C 【解析】 【分析】稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30 ~ 300的平板进行计数。除稀释涂布平板法外，还可以利用显微镜进行直接计数，该方法要利用特定的细菌计数板或血细胞计数板。 【详解】A、用无菌水（不是清水）将土样制成1×103～107倍稀释的稀释液，然后将稀释液涂布到制备好的培养基上，A错误； B、牛肉膏蛋白胨培养基为完全培养基，而实验目的是测定土壤中能分解尿素的活菌数，应使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，B错误； C、如果未接种的对照组平板上有菌落出现，可能是培养菌灭菌不彻底等原因导致的，应重新进行实验，C正确； D、为了保证结果准确，一般选择菌落数为30 ~ 300的平板进行计数，该实验所用每克土样中能分解尿素的活菌数≈（68+69+75）/3÷0.1×105≈7.1×107，D错误。 故选C。 5. 发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品．目前在许多领域得到了广泛的应用。下列说法错误的是（ ） A. 发酵工程大多使用单一菌种，可以从自然界中筛选也可以通过诱变育种或基因工程育种获得 B. 发酵工程的中心环节是分离、提纯产物，如果产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法分离 C. 在酸性和碱性条件下谷氨酸棒状杆菌积累的代谢产物不同，发酵过程需严格控制pH值 D. 发酵工程可用于生产微生物农药，主要是利用微生物或其代谢物来防治病虫害 【答案】B 【解析】 【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。发酵工程以其生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、产物专一、废弃物对环境的污染小和容易处理等特点，在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。 【详解】A、发酵工程一般用到单一菌种，可从自然界筛选，也可通过基因工程育种或诱变育种获得，A正确。 B、发酵工程的中心环节是发酵，B错误； C、谷氨酸棒状杆菌在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，C正确； D、发酵工程可用于生产微生物农药，与传统的化学农药不同，微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的。例如，苏云金杆菌可以用来防治80多种农林虫害，一种放线菌产生的井冈霉素可以用于防治水稻纹枯病，D正确。 故选B。 6. 科研人员以携带葡萄灰比诺病毒的“阳光玫瑰”葡萄为材料，研究了外植体取材部位、光照处理和热处理方式对脱除病毒的影响，结果如下表所示。相关叙述错误的是（ ） 组号 温度/光照+湿度/黑暗 接种部位 存活率/% 株系脱毒率/% 1 38℃/16h+38℃/8h 茎尖 50.00 ———— 2 同上 第1腋芽 33.33 ———— 3 同上 第2腋芽 0 ———— 4 38℃/8h+32℃/8h 茎尖 88.89 100.00 5 同上 第1腋芽 94.44 100.00 6 同上 第2腋芽 94.44 83.33 A. 接种前不应对外植体消毒，以免干扰各处理条件下的株系脱毒率 B. 茎尖和第1、2腋芽都含有顶端分生组织，因此可以作为脱毒材料 C. 研究人员未检测1～3组脱毒率的原因可能是该条件下外植体存活率较低 D. 生产中应选择38℃/8h光照+32℃/8h黑暗，以第1腋芽为外植体脱毒 【答案】A 【解析】 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，其原理为植物细胞的全能性。植物组织培养中外植体发育为完整植株的条件为：离体、严格的无菌条件、适宜的培养条件及适宜浓度和比例的激素。 【详解】A、植物组织培养中外植体发育为完整植株必须要有严格的无菌条件，故接种前应对外植体消毒，A错误； B、茎尖和第1、2腋芽都含有顶端分生组织，病毒极少甚至无病毒，可以作为脱毒材料，B正确； C、分析图表可知，1～3组未检测株系脱毒率，可能因为在38℃/16h光照+38℃/8h黑暗条件下外植体存活率低，C正确； D、分析图表可知，38℃/8h光照+32℃/8h黑暗条件下，第1腋芽的存活率和株系脱毒率均较高，因此生产中应选择38℃/8h光照+32℃/8h黑暗，以第1腋芽为外植体脱毒，D正确。 故选A。 7. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（ ） A. 实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变 B. ①过程受外源激素的调控，②过程受内源激素的调控 C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D. 通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现细胞的全能性 【答案】D 【解析】 【分析】1、题图①和②是植物组织培养过程，其中①是脱分化过程、②是再分化过程，上面一种途径是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物；下面一种途径是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物。2、在进行植物组织培养时，需要在培养基中添加适当比例的生长素和细胞分裂素诱导细胞的脱分化和再分化。但两者的比例对诱导的结果是有影响的：当生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成(即有利于根的发生) ；当细胞分裂素含量高于生长素时，则主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成(即有利于芽的发生)。 【详解】A、由以上分析可知①和②分别表示脱分化(或去分化)和再分化，细胞核中的遗传物质不变，基因发生了选择性表达，但基因没发生突变，A错误； B、在进行植物组织培养时，需要在培养基中添加适当比例的生长素和细胞分裂素诱导细胞的脱分化和再分化，B错误； C、因为分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，所以将分生组织(如根尖、茎尖)进行离体培养能获得脱毒植株而并非根和芽，脱毒苗不具有更强的抗病毒能力，C错误； D、由图可知辣椒素是细胞产物，通过细胞培养得到高产细胞系时就可产生，不需要发育成植株，所以未体现出植物细胞的全能性，D正确。 故选D。 8. 植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下列相关叙述正确的是（ ） A. 取草莓茎尖进行植物组织培养可获得抗病毒苗 B. 玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株能稳定遗传 C. 红豆杉细胞经植物组织培养技术可工厂化生产紫杉醇 D. 可采用诱变处理烟草愈伤组织的方法来获得烟草抗盐碱突变体 【答案】D 【解析】 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、脱毒苗不等同于抗病毒，培育脱毒苗时，一般选取茎尖（或芽尖或根尖）作为外植体，因为植物分生区附近（茎尖）病毒极少，甚至无病毒，再利用植物组织培养技术将外植体培育成幼苗，A错误； B、玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株属于单倍体，不能稳定遗传，B错误； C、植物细胞工程可用于细胞产物的工厂化生产，红豆杉细胞无需经过植物细胞培养技术工厂化生产紫杉醇，只需要培养至愈伤组织获取其产物即可，C错误； D、愈伤组织细胞分裂能力强，易受外界环境条件影响，可采用诱变处理烟草愈伤组织并筛选得到烟草抗盐碱突变体，D正确。 故选D。 9. 某研究小组为测定药物对体外培养细胞毒性的大小，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列说法正确的是（　　） A. 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶代替胰蛋白酶处理肝组织 B. CO2培养箱中CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸 C. 本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小 D. 为防止细胞培养过程中细菌的污染，需要对培养液和所有培养用具进行消毒处理以及在无菌环境下进行操作 【答案】C 【解析】 【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块、剪碎组织、用胰蛋白酶处理分散成单个细胞一制成细胞悬液、转入培养液中进行原代培养、放入二氧化碳培养箱培养、贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液进行传代培养、放入二氧化碳培养箱培养。 2、培养条件：无菌、无毒的环境、添加一定量的抗生素、定期更换培养液、营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、还需加入血清、血浆等天然物质、温度和pH、气体环境：95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【详解】A、在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误； B、细胞培养应在含CO2恒温培养箱中进行，CO2浓度维持在5%左右，CO2的作用是维持培养液的pH，B错误； C、本实验应设置对照实验，用添加甲药物、乙药物的培养液分别培养细胞，根据变异细胞占培养细胞的比例，以检测药物对甲、乙的毒性大小，C正确； D、为防止细胞培养过程中细菌的污染，需在培养液中适量添加抗生素，D错误。 故选C。 10. 2019年，南京农业大学的“人造肉”研发团队培养出中国第一块肌肉干细胞培养肉。其培养过程如图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 分散肌肉细胞可以采用机械法或酶解法 B. 体外大规模培养肌肉细胞的过程中不会出现接触抑制现象 C. 与传统肉类生产方式相比，细胞培养肉对环境的污染更小，可以减少生态足迹 D. 胚胎干细胞可以培养出肌肉组织、结缔组织等多种组织或器官，肌肉干细胞一般具有组织特异性，只能培养获得肌肉组织 【答案】B 【解析】 【分析】成肌干细胞是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞，这种细胞能够自我更新并且能够特化形成组成该类型组织的细胞。成体干细胞存在于机体的各种组织器官中。成年个体组织中的成体干细胞在正常情况下大多处于休眠状态，在病理状态或在外因诱导下可以表现出不同程度的再生和更新能力。 【详解】A、将收集的肌肉组织分散肌肉细胞可以采用机械法或用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理一段时间，A正确； B、肌肉细胞属于正常动物细胞，体外大规模培养肌肉细胞的过程中会出现接触抑制现象，B错误； C、与传统肉类生产方式相比，细胞培养肉对环境的污染更小，从而可以减少生态足迹，C正确； D、胚胎干细胞具有全能性，可以诱导分化形成肌肉组织，多能干细胞类似胚胎干细胞，因此也可以诱导分化形成肌肉组织，肌肉干细胞属于专能干细胞，具有组织特异性，只能分裂分化形成肌肉组织，D正确。 故选B。 11. 干眼症是由于泪液分泌减少导致的眼睛干涩病症。将有关基因导入已分化的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），培养iPS细胞得到的眼结膜组织可分泌泪液成分“粘液素”，有望治疗干眼症。下列说法不正确的是（ ） A. 导入的基因具有促使体细胞恢复分裂能力的作用 B. 利用iPS细胞获得眼结膜组织时，应加入分化抑制因子 C. 利用iPS细胞治疗人类疾病理论上可避免免疫排斥反应 D. iPS细胞可在一定程度上避免胚胎干细胞涉及的伦理问题 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞，iPS与ES细胞一样，可通过定向诱导分化修补某些功能异常的细胞来治疗疾病。 【详解】A、根据题文，导入的基因能促使已分化的体细胞成为诱导多能干细胞（iPS细胞），体细胞无分裂能力，而干细胞是一类有分裂能力的细胞，故导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力，A正确； B、iPS可分化为多种细胞，加入分化诱导因子才能获得相应的组织或器官，B错误； C、iPS细胞可以来自于病人自身，诱导成的组织进行移植，可以避免免疫排斥反应，C正确； D、iPS技术不使用胚胎细胞或卵细胞，只需对体细胞进行操作及适当的培养即可，没有伦理学的问题，D正确。 故选B。 12. 我国科学家成功培育了体细胞克隆猴。在处理重构胚时，将组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA、组蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA 注入了重构胚，促进囊胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。下列叙述错误的是（　　） A. 除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理法在没有穿透卵母细胞透明带的情况下使其中的DNA 变性 B. TSA 能够抑制组蛋白脱乙酰酶的作用从而降低组蛋白的乙酰化水平 C. 组蛋白去甲基化酶KDM4D能够降低组蛋白的甲基化水平 D. 培育克隆猴对研究人类疾病致病机制和研发新药有重要意义 【答案】B 【解析】 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、在核移植过程中，去除卵母细胞的细胞核时，除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理等方法，这些方法可以在不穿透卵母细胞透明带的情况下使其中的DNA 变性，A正确； B、组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA可抑制组蛋白脱乙酰酶的活性，从而抑制组蛋白脱乙酰作用，提高组蛋白的乙酰化水平，B错误； C、组蛋白去甲基化酶KDM4D可促进组蛋白去甲基化，从而能够降低组蛋白的甲基化水平，C正确； D、猴属于灵长类动物，与人更接近，培育遗传背景相同的克隆猴对人类疾病致病机制的研究、新药研发等具有更重要的意义，D正确。 故选B。 13. 南开大学研究团队展开科研攻关，研制出了集检测分析与操作于一体的原位显微分析与操作仪，实现了机器人化的细胞核移植流程，世界首例机器人操作的体细胞克隆猪在天津诞生。下列有关克隆技术说法错误的是（ ） A. 体细胞克隆猪的核遗传物质绝大部分来自供体细胞，少部分来自受体细胞 B. 通过植物组织培养克隆植物个体时，可通过增大培养基中生长素和细胞分裂素的比值来诱导生根 C. 制备单克隆抗体时，灭活病毒表面的糖蛋白和一些酶类物质在促进B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程中发挥重要作用 D. 机器人操作诞生体细胞克隆猪这一过程属于无性生殖 【答案】A 【解析】 【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。 【详解】A、体细胞克隆猪的细胞核遗传物质来自供体细胞，而细胞质遗传物质来自卵母细胞，A错误； B、生长素和细胞分裂素的比例可决定分化方向，通过增大培养基中生长素和细胞分裂素的比值可诱导生根，B正确； C、灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子中心排布，细胞膜打开，细胞发生融合，C正确； D、用核移植方法得到的动物称为克隆动物，核移植过程为无性生殖，机器人操作诞生体细胞克隆猪这一过程属于无性生殖，D正确。 故选A。 14. 下列关于植物组织培养技术和动物细胞核移植技术的说法，错误的是（ ） A. 两项技术均说明细胞具有全能性 B. 两项技术均可用于濒危物种的保护 C. 植物细胞全能性表达需要离体、一定的营养物质、植物激素等条件 D. 去核的受体卵母细胞中可能含有促进供体细胞核表达全能性的物质和条件 【答案】A 【解析】 【分析】细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能，即细胞具有全能性。但是，在生物的生长发育过程中，并不是所有的细胞都表现出全能性，比如，芽原基的细胞只能发育为芽，叶原基的细胞只能发育为叶。这是因为在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会选择性地表达。 【详解】A、动物细胞核移植技术说明动物细胞核有全能性，A错误； B、植物组织培养技术和动物细胞核移植技术都能获得个体，两项技术均可用于濒危物种的保护，B正确； C、植物细胞离体后才能表达出全能性，离体后的细胞无法从个体的其它细胞获得营养物质和激素，因此，在细胞培养过程还要提供营养物质和植物激素等条件，C正确； D、动物体细胞无法体现全能性，利用核移植技术把体细胞的核移植到去核的受体卵母细胞，形成重组细胞，重组细胞可发育成动物个体，说明去核的受体卵母细胞中可能含有促进供体细胞核表达全能性的物质和条件，D正确。 故选A。 15. 下表为细胞工程技术的相关应用，各组所选择的实验材料、材料特点与实验目的匹配正确的是（ ） 组别 实验目的 实验材料 材料特点 A 克隆高产奶牛 受精卵 细胞大，细胞质能有效调控核发育 B 培育脱毒草莓 茎尖 分裂能力强，易诱发突变 C 培育西红柿马铃薯超级杂种 花粉粒 易于获取，易于组织培养 D 烧伤患者皮肤细胞移植 自体皮肤生发层细胞 分裂能力强，且不会引起免疫排斥 A. A B. B C. C D. D 【答案】D 【解析】 【分析】卵母细胞适于作为受体细胞，因为卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。愈伤组织细胞分化程度低，全能性较高，细胞分裂能力强。花粉粒能用于单倍体育种。 【详解】A、克隆动物动物细胞核移植时，常采用去核卵母细胞作为受体细胞，因为卵细胞大，营养丰富，且细胞质物质能有效调控核发育，A错误； B、培育脱毒草莓时，应选用根尖或茎尖的材料，选材的原因是茎尖含病毒很少，甚至不含毒，但诱发突变不是选材的原因，B错误； C、培育番茄—马铃薯超级杂种植株，应选用两种植物的体细胞杂交形成异源多倍体，不能选用花粉粒，C错误； D、烧伤患者的皮肤移植，可以选用自己的生发层细胞，分裂能力强，不会发生排斥反应，D正确。 故选D。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. 野外曾一度消失的中华穿山甲在衡阳、永州等地相继出现；5只美丽的彩鹦在郴州市区的农田中悠闲觅食；水松、银杉等珍贵濒危野生植物种群得到恢复性增长……近年来，一些珍稀野生动植物频频“亮相”山水之间。下列叙述正确的是（　　） A. 以上信息体现了生物遗传多样性和种群多样性 B. 对濒危物种可采取克隆的方法放归自然，可增加物种多样性 C. 在保护生物与环境的同时，也关注农民的生产和生活，这遵循整体原理 D. 为了实现可持续性发展，人类不可过度从土地索取更多资源 【答案】CD 【解析】 【分析】生物多样性的价值： （1）直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的。 （2）间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）。 （3）潜在价值：目前人类不清楚的价值。 【详解】A、生物多样性中不包含种群多样性，A错误； B、对濒危生物克隆繁殖并不能增加物种多样性，B错误； C、人类处在一个社会一经济一自然复合系统，在保护生物与环境的同时，也关注农民的生产和生活、这遵循生态工程的整体原理，C正确； D、为了实现可持续性发展，人类不可过度从土地索取更多资源，D正确。 故选CD。 17. 细胞产物的工业化生产可以使植物细胞内一些具有药用价值的次生代谢产物分泌到细胞膜外，然后从培养基中直接分离纯化得到目标次生代谢产物。例如，Aoyagi将长春花体细胞用富含古罗糖醛酸的藻酸盐凝胶固定起来，然后大量生产吲哚类生物碱。以下说法正确的是（ ） A. 需筛选吲哚类生物碱产量大的细胞进行培养，利用促进细胞生长的培养条件可进一步提高单个细胞的产量 B. 悬浮培养生产代谢物时，若添加抑制细胞壁生长的物质，可能会达到较好的分泌效果 C. 在原生质体培养中，还可以通过添加各种化合物以研究其对植物细胞生长分化的影响 D. 反应器中培养基为液态，培养物处于愈伤组织阶段，除了营养物质以外一般还需要提供诱导代谢物产生的物质和条件 【答案】BCD 【解析】 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、次生代谢产物吲哚类生物碱不是细胞生长所必须，含量少，需要筛选优良的细胞进行培养，通过增加细胞数量来增加细胞产物的量，A错误； B、悬浮培养有利于细胞与培养液进行物质交换，添加抑制细胞壁生长的物质，细胞产物更容易分泌，B正确； C、在原生质体培养中，还可以通过添加各种化合物如植物激素诱导细胞分化以研究其对植物细胞生长分化的影响，C正确； D、反应器中培养基为液态，培养物处于愈伤组织阶段，不一定能够分泌所需物质，除了营养物质以外一般还需要提供诱导代谢物产生的物质和条件，D正确。 故选BCD。 18. 由单一B细胞克隆产生的针对某一特定抗原的抗体，称为单克隆抗体；由多种抗原刺激机体，相应地就产生多种抗体混杂在一起，称为多克隆抗体。如图表示单克隆抗体和多克隆抗体的制备过程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 两种技术均依赖于细胞膜的流动性，②③④⑤的差异是由细胞内基因不同造成的 B. 两种技术均需要对小鼠进行特定抗原的免疫和特定细胞的筛选、鉴定和培养 C. 两种技术均需要从小鼠的血清中收集抗体，但单克隆抗体具有更高的特异性 D. ①含有的多种抗体，源于不同的浆细胞，可与同种病原体的不同抗原结合 【答案】ABC 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备： （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。 （2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 （3）克隆化培养和抗体检测。 （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、两种技术中只有单克隆抗体的制备涉及细胞的融合，依赖细胞膜的流动性，B淋巴细胞的基因相同，②③④⑤的差异与细胞内基因的选择性表达有关，A错误； B、两种技术均需要对小鼠进行特定抗原的免疫，但只有单克隆抗体的制备需要特定细胞的筛选、鉴定和培养，B错误； C、多克隆抗体需要从小鼠的血清中收集抗体，单克隆抗体从细胞培养液或小鼠的腹水中获得，单克隆抗体具有更高的特异性，C错误； D、①含有的多种抗体，源于不同的浆细胞，多种抗体的获得是因为病原体表面的不同抗原导致不同浆细胞的形成，不同浆细胞产生的抗体可与同种病原体的不同抗原结合，D正确。 故选ABC。 19. 粤东黑猪由于生长速度慢、瘦肉率低等缺点，近年来已被列入我国濒危地方猪种。科研人员通过体细胞核移植技术，顺利获得6头健康状况良好的纯种粤东黑猪，具体流程如图。下列相关叙述正确的是（ ） A. ①首先要将取得的耳部组织分散成单个细胞，用培养液将细胞制成细胞悬液 B. ②是细胞融合过程，常用PEG融合法，电融合法和灭活病毒等诱导细胞融合 C. ③是用电刺激、Ca2+载体，乙醇或蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 D. 通过体细胞克隆技术可大量生产粤东黑猪，对地方猪的保种工作具有重大现实意义 【答案】ACD 【解析】 【分析】将供体细胞注入去核卵母细胞通过电刺激使两细胞融合，供体细胞进入受体卵母细胞内构建重组胚胎，通过物理或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞。 【详解】A、①首先要将取得的耳部组织用胰蛋白酶处理，分散成单个细胞，用培养液将细胞制成细胞悬液，A正确； B、②是核移植的过程，使供体核进入去核卵母细胞，B错误； C、③是用电刺激、Ca2+载体，乙醇或蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、在畜牧生产中，利用体细胞核移植技术，可以加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育，通过体细胞克隆技术可大量生产粤东黑猪，对地方猪的保种工作具有重大现实意义，D正确。 故选ACD。 20. 为保证实验的成功，选择合适的生物材料非常关键。下列选择合理的是（ ） A. 选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率 B. 选择草莓的茎尖进行组织培养可获得抗病毒草莓 C. 以病人的体细胞诱导成iPS细胞，进而形成无免疫排斥的移植器官 D. 对愈伤组织进行诱变处理可筛选出有用的突变体 【答案】ACD 【解析】 【分析】动物细胞培养常选择动物胚胎或幼龄动物的组织、器官进行动物细胞培养，细胞分化程度低，细胞分裂能力强，利于细胞增殖，数量增多，动物细胞培养的原理是细胞增殖。 植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，可以采用茎尖组织培养技术脱去病毒，从而获得脱毒苗。 【详解】A、胚胎细胞全能性较高，选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率，A正确； B、常选用植物的茎尖组织培养以获得脱毒植株，脱毒植株不等同于抗病毒植株，B错误； C、以病人的体细胞诱导成iPS细胞来自于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确； D、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此选择植物的愈伤组织进行诱变处理，再进行人工选择，可获得优质的突变体，D正确。 故选ACD。 第Ⅱ卷（共55分） 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 世界上许多热带、亚热带国家或地区，由于环境温度过高，普通酵母菌难以进行正常乙醇发酵，因此选育耐高温菌株具有重要价值。下表是科学家选用合适菌株进行属间细胞融合培育耐高温的高产酵母菌株的过程。 （1）请完成下表 实验步骤 简易操作 原理及分析 ①.选择菌株 选用产酒率低但可以耐受45℃高温的呼吸缺陷型克鲁维酵母Y菌株和产酒率高但无法在45℃下生长的酿酒酵母A菌株为亲株。 呼吸缺陷型Y菌株线粒体功能丧失，只能进行无氧呼吸，与A菌株相比，菌体细胞较_________（大、小）。 ②.________ 将亲本菌株活化培养后，先用脱壁预处理剂处理一定时间，然后加入2%蜗牛酶液，摇床振荡处理0.5-1hr。 蜗牛酶液可以消化真菌细胞壁。 ③.________ 先用碘乙酸处理Y菌株，然后与A菌株等量混合，加入________（促融剂名称），在28℃下，保温45min。 碘乙酸可以不可逆地抑制细胞中酶的活性，使其失活；融合过程需要在_________中进行，以免吸水涨破。 ④.筛选A-Y融合菌株 将步骤3得到的菌液用________法接种在高渗再生平板上，45℃培养3天，然后加入TTC，________（无色、红色）菌落即为融合株。 无色的TTC可被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原为红色物质，使菌落呈现红色。 ⑤.筛选高产融合株 第4步选出的菌株在___________℃，18%葡萄糖溶液中发酵，并进行比较。 通过对比产酒率和糖利用率选出更优良的菌株。 （2）第3步操作依据的原理是_________。除上述方法外，还可用紫外线处理Y菌株或A菌株，并从中筛选合适的菌株，该育种方法的原理是________。 （3）A-Yoos为复筛获得的产酒率最高的菌株，将其与亲株Y菌株放在相同葡萄糖基质中，在相同且适宜温度下充分发酵，糖利用率见图1；同时检测该温度下两菌株对不同浓度酒精的耐受性，结果见图2（吸光度值越大表示活细胞数量越多）。 试分析A-Y005产酒率更高的原因是_________。 【答案】（1） ①. 小 ②. 制备原生质体 ③. 诱导原生质体融合 ④. PEG ⑤. 等渗或略高渗溶液（“等渗”给分） ⑥. 稀释涂布平板 ⑦. 红色 ⑧. 45 （2） ①. 细胞膜具有一定的流动性 ②. 基因突变 （3）A-Y005对酒精耐受性强，对糖的利用率高 【解析】 【分析】诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）； 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。 【小问1详解】 A菌株表现为产酒率高但无法在45℃下生长，而呼吸缺陷型Y菌株线粒体功能丧失，只能进行无氧呼吸，因此，与A菌株相比，由于只能进行无氧呼吸，其细胞中能量供应较少，因而菌体细胞较小。为了将两个菌株的优良性状集中到一个个体上，本实验采用的方法是诱导原生质体融合，因此实验的流程为：首先获得原生质体，具体操作为：将亲本菌株活化培养后，先用脱壁预处理剂处理一定时间，然后加入2%蜗牛酶液，摇床振荡处理0.5-1hr，由于蜗牛酶液可以消化真菌细胞壁，因此经过上述处理后可以获得两种菌株的原生质体；获得原生质体后需要诱导原生质体融合，诱导原生质体融合的方法包括物理、化学和生物的方法，该步骤采用了化学诱导法，即加入PEG进行诱导，在28℃下，保温45min，获得融合的原生质体，融合过程中为了避免原生质体吸水涨破，该过程需要在等渗或略高渗溶液；接下来进行A-Y融合菌株的.筛选，该过程的操作为将步骤3得到的菌液用稀释涂布平板法接种在高渗再生平板上，获得单菌落，45℃培养3天，目的是获得耐高温的杂种菌株，然后加入TTC，而无色的TTC可被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原为红色物质，若菌落呈现红色，说明细胞中耐高温的相关基因进行了表达，则表现为红色菌落即为融合株，为了进一步获得目的菌株，则需要将选出的菌株在45℃，18%葡萄糖溶液中发酵，并与菌株A的产酒量进行比较，进而筛选出耐高温的高产酵母菌株。 【小问2详解】 第3步操作为了诱导原生质体融合，该过程依据的原理是细胞膜的流动性。除上述方法外，还可用紫外线处理Y菌株或A菌株，并从中筛选合适的菌株，该育种方法的原理是基因突变，该方法为诱变育种，由于基因突变具有不定向性，因而诱变育种具有一定的盲目性。 【小问3详解】 图示结果表明：A-Yoos菌株的糖利用率高，且A-Yoos菌株对酒精的耐受性强，因而A-Yoos菌株的产酒率高。 22. 枸杞是一味传统中药，野生黑果枸杞富含花青素，且抗逆性强，但比人工种植的宁夏枸杞个体小、产量低。研究人员尝试利用不对称植物体细胞杂交技术将野生黑果枸杞的抗逆性状转移到宁夏枸杞中。 （1）愈伤组织细胞生长旺盛，是制备原生质体的良好材料。在特定的培养条件下，外植体经过______转变成愈伤组织，培养基中________是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因素。 （2）不对称植物体细胞杂交操作过程如下： ①对黑果枸杞原生质体进行辐射处理，使其细胞核中的______部分断裂，用药物处理宁夏枸杞原生质体，使其细胞质中的某些酶失活，两种原生质体都失去分裂能力。 ②用化学诱导剂_________诱导原生质体融合，培养体系中只有两种不同枸杞的融合原生质体可分裂形成再生愈伤组织。 （3）研究人员对3种愈伤组织的同工酶进行检测。同工酶是功能相同，但酶本身的分子结构、理化性质等方面有所不同的一组酶。 ①过氧化氢酶的功能是______。将提取的愈伤组织蛋白质进行电泳，电泳后的凝胶浸泡在淀粉、KI和H2O2混合溶液中，已知KI遇O2生成I2，一段时间后过氧化氢酶所在部位显色，如下图所示。显色条带为_____色，显色深浅由酶的_______决定。 ②结果显示融合原生质体再生愈伤组织中缺乏来自______的部分过氧化氢同工酶，原因可能是_______。 （4）本研究中，获得多株杂种植株后下一阶段的研究方向是___________。 【答案】（1） ①. 脱分化 ②. 生长素、细胞分裂素的浓度、比例 （2） ①. 染色体（DNA） ②. 聚乙二醇（PEG） （3） ①. 催化过氧化氢分解 ②. 蓝 ③. 活性 ④. 宁夏枸杞和黑果枸杞 ⑤. 相关基因丢失或未表达 （4）依据其抗逆性进一步筛选 【解析】 【分析】植物组织培养是一种在无菌条件下，将植物的离体器官、组织或细胞培养在人工配制的培养基上，使其发育成完整植株的技术。 【小问1详解】 植物组织培养，在特定的培养条件下，外植体经过脱分化转变成愈伤组织；培养基中生长素、细胞分裂素的浓度、比例是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因素。 【小问2详解】 ①对黑果枸杞原生质体进行辐射处理，使其细胞核中的染色体（DNA）部分断裂，导致其发生变异，使其细胞质中的某些酶失活，两种原生质体都失去分裂能力。 ②用化学诱导剂聚乙二醇（PEG）诱导植物细胞原生质体融合。 【小问3详解】 ①过氧化氢酶的功能是催化过氧化氢分解。 首先，过氧化氢酶的主要功能是催化过氧化氢分解为水和氧气。在实验中，通过特定的方法可以检测过氧化氢酶的活性。在进行同工酶电泳时，会使用特定的显色剂。如果存在过氧化氢酶，它会与显色剂发生反应，从而产生显色现象。通常，如果显色结果为蓝色，说明存在过氧化氢酶的作用。显色的深浅程度与过氧化氢酶的活性密切相关。 ②在对融合原生质体再生愈伤组织进行检测时，发现其中缺少宁夏枸杞和黑果枸杞部分过氧化氢同工酶。这意味着在融合过程中，可能由于相关基因丢失或未表达等其他遗传变化，导致某些原本存在于亲本中的过氧化氢同工酶基因没有在融合后的细胞中正常表达，或者表达量显著降低，以至于在检测中无法呈现出相应的同工酶条带。 【小问4详解】 比如可以进一步研究杂种植株的生长特性、生理特性、对环境的适应性、依据其抗逆性进一步筛选，或者探索如何提高杂种植株的产量、品质等方面。 23. 动物细胞培养在实践中有很大的用途——在检验药物毒性和开发药物方面有重要的应用。为研究药物的抗肝癌效果，需要大量肝癌细胞作为实验材料。回答下列问题： （1）癌细胞其中一个特点是能够无限增殖，据此推测培养肝癌细胞时，______（填“会”或“不会”）发生接触抑制现象。 （2）为了初步检测药物X和Y的抗癌效果，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚砜（溶剂）的药物X或Y，培养过程及结果如图表所示。对照组应加入的是______。根据实验结果判断，药物X、药物Y均有抗癌作用，抗癌效果更好的是______，判断依据是______。 （3）为降低药物X治疗肝癌的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），制备单克隆抗体的过程中，可用灭活病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与____________发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的______分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。ADC进入肝癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物作用于肝癌细胞，可导致______（填“细胞凋亡”或“细胞坏死”）。与直接使用抗肿瘤药物相比，ADC对人体的副作用更小，原因是____________。 【答案】（1）不会 （2） ①. 等体积的二甲基亚矾（溶剂） ②. 药物X ③. 添加药物X的组别肝癌细胞数目最少 （3） ①. 细胞膜上的糖蛋白 ②. 蛋白质分子和脂质分子/磷脂分子 ③. 细胞凋亡 ④. 将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的pH） 【小问1详解】 癌细胞在适宜条件下具有无限增殖的特点，据此推测培养肝癌细胞时，不会发生接触抑制现象。 【小问2详解】 题意分析，该实验目的是检测药物X和Y的抗癌效果，自变量是药物X或Y，因变量是检测细胞数量，由于实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X或Y，根据实验设计的对照与单一变量原则可知，对照组应加入的是等体积的二甲基亚矾（溶剂）；由实验结果可知，添加药物X的组别肝癌细胞数目最少，可以初步确定药物X的抗癌效果较好。 【小问3详解】 细胞膜的主要成分是脂质（主要是磷脂）和蛋白质，灭活病毒诱导动物细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子/磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合；ADC进入肝癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物作用于肝癌细胞，该过程实在基因控制下进行的，属于细胞凋亡，对于机体是有利的；因为将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小），故与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小。 24. 癌症免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸。科研人员在研究中发现多种免疫治疗方法结合是提高治疗效果的途径之一。 图2 （1）某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1。PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。其制备方法如下：将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，再经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取免疫效果最好的小鼠用于后面的融合实验。该过程中，进行二次免疫的目的是______________。接着从小鼠的__________中取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。 （2）一段时间后，将（1）所得细胞接种到96孔培养板上，静置培养一段时间，进行抗体阳性检测，如图2。 ①检测原理是________________。在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面，并加入96孔板培养槽中的__________（沉淀/上清液），即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与__________结合的酶标抗体洗去。 ③加入相应酶促反应底物显色，颜色_________（填“深”或“浅”）的组更符合需求。 （3）CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，如图3。这种双特异性抗体的优势在于__________。 图3 【答案】（1） ①. 刺激机体产生更多相应的B淋巴细胞 ②. 脾 （2） ①. 抗原与抗体的特异性结合 ②. 上清液 ③. 抗PD-1抗体 ④. 深 （3）使T细胞更容易（更精确或更高概率）接触到癌细胞 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 单克隆抗体制备过程中，为刺激机体产生更多相应的B淋巴细胞，需要进行二次免疫；需要从小鼠的脾中取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。 【小问2详解】 ①利用抗原与抗体的特异性结合的原理，进行抗体阳性检测；单克隆抗体是分泌蛋白，分布在上清液中，所以在固定抗原上加入多孔板培养槽中的上清液，即待测样本。 ②加入酶标抗体后一段时间，为了排除干扰，则需要用洗涤剂将未与抗PD-1抗体结合的酶标抗体洗去。 ③PD-1蛋白与抗PD-1抗体的结合量越多颜色越深，所以加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表与抗PD-1抗体的量，颜色深的组更符合需求。 【小问3详解】 分析题意，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集，构建既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，如图3。这种双特异性抗体的优势在于使T细胞更容易（更精确或更高概率）接触到癌细胞。 25. 我国研究人员培育出了细胞核移植灵长类动物——食蟹猴，流程如图甲所示，①~②表示过程。研究发现向融合细胞中注入酶X的mRNA后，能显著提高融合细胞发育成囊胚的成功率，这与染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，调控了相关基因的表达有关，过程如图乙所示。据图分析回答下列问题： （1）在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常的困难，一方面是由于_____，导致胚胎发育率低；另一方面是对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。 （2）图甲过程①在原代培养时，细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖，这种现象叫_____，进行传代培养时制备细胞悬液的操作是_____。过程②中供体核进入卵母细胞形成重构胚，可用_____（填出两种）的方法使其激活，完成细胞分裂和发育的进程。 （3）图甲中向融合细胞中注入酶X的mRNA有利于相关基因恢复表达，从而提高实验成功率，据图乙分析，酶X可能是_____。 【答案】（1）供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态 （2） ①. 接触抑制 ②. 重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，之后再将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养 ③. 电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等 （3）组蛋白乙酰化酶或组蛋白去甲基化酶 【解析】 【分析】1、动物细胞核移植是用体细胞作为供体细胞进行的细胞核移植，将供核细胞注射到培养到减数第二次分裂中期的卵母细胞中，用人工的方法将其培养成胚胎，再将胚胎移植到雌性动物子宫内，就可以孕育出新的个体。 2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 3、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【小问1详解】 一方面是由于供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态，导致胚胎发育率低；另一方面是对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善，所以，非人灵长类动物的体细胞核移植非常的困难。 【小问2详解】 图甲过程①在原代培养时，会出现接触抑制现象，接触抑制是指细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖的现象。进行传代培养时需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，之后再将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。过程②中供体核进入卵母细胞形成重构胚，可用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等的方法使其激活，完成细胞分裂和发育的进程。 【小问3详解】 由图可知，组蛋白乙酰化可激活转录，有利于基因表达，甲基化会抑制转录，因此提高组蛋白乙酰化水平，提高组蛋白去甲基化水平都有利于相关基因恢复表达，则酶X为组蛋白乙酰化酶或组蛋白去甲基化酶。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $