专题03 动物细胞工程（浙江专用）-【好题汇编】备战2024-2025学年高二生物下学期期中真题分类汇编（浙江专用）

专题03动物细胞工程 1．（23-24高二下. 浙江省台州十校期中）下列有关动物细胞培养的表述正确的是（    ） A．动物细胞培养的原理应用了动物细胞的全能性 B．细胞要经过脱分化形成愈伤组织 C．培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 D．培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖 【答案】C 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：（1）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。（2）营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。（3）温度、pH和渗透压：适宜温度：哺乳动物多是36.5°C+0.5°C；pH为7.2~7.4。（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、动物细胞培养应用了动物细胞增殖的原理，A错误； B、动物细胞培养不需要脱分化，植物细胞培养要经过脱分化形成愈伤组织，B错误； C、动物细胞培养的培养夜中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等，C正确； D、在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶处理，使之分散成单个细胞，再用离心法收集。之后将收集的细胞制成细胞悬液再分瓶培养，D错误。 故选C。 2．（23-24高二下. 浙江省台州十校期中）如图是体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述错误的是（    ） A．后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定 B．进行胚胎移植时，代孕母体应用免疫抑制剂处理，避免发生免疫排斥反应 C．过程②常使用显微操作对卵母细胞进行去核处理 D．过程③将重组细胞可以培养至囊胚期移植 【答案】B 【分析】题图分析：图示过程为体细胞克隆过程，取甲牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期的乙牛的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。 【详解】A、乙牛提供细胞质遗传物质，甲牛提供大部分遗传物质，所以后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A正确； B、进行胚胎移植时，受体子宫一般不会对移植的胚胎产生免疫排斥反应，B错误； C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，因此子代中细胞质中遗传物质主要是由乙牛提供，C正确； D、过程③将激活后的重组细胞培养至桑葚胚或囊胚后移植，D正确。 故选B。 3．（23-24高二下. 浙江金兰教育期中）下列关于单克隆抗体制备的叙述，错误的是（    ） A．单克隆抗体制备运用了动物细胞融合和动物细胞培养技术 B．动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 C．经小鼠腹腔内培养后，可从小鼠血液中分离得到大量单克隆抗体 D．灭活病毒可使细胞相互凝聚并让细胞膜上的分子重新排布 【答案】C 【分析】单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合，经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞并经专一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞；杂交瘤细胞集合了两个细胞的遗传物质，既能无限繁殖，又能产生特异性抗体，又能无限繁殖。单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【详解】A、单克隆抗体制备时需要将骨髓瘤细胞和浆细胞融合在一起，然后培养细胞，进行筛选，运用了动物细胞融合和动物细胞培养技术，A正确； B、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，都是利用了细胞膜的流动性，B正确； C、注入腹腔可以方便地获得大量抗体，首先注射方便，其次腹水收获容易，单克隆抗体产量高，C错误； D、病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，是细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，D正确。 故选C。 4．（23-24高二下. 浙江金兰教育期中）为确定治疗性克隆技术是否适用于治疗糖尿病，科研人员利用人糖尿病模型鼠进行如图所示实验。下列有关叙述正确的是（    ） A．过程④移植后A鼠一般不发生排斥反应 B．获得的重组细胞经过程②后可直接获得胚胎干细胞悬浮液 C．过程③是诱导胚胎干细胞脱分化定向增殖生成胰岛B细胞 D．过程①中选用小鼠的皮肤细胞有利于细胞核全能性的恢复 【答案】A 【分析】动物胚胎发育的基本过程：（1）受精场所是母体的输卵管。（2）卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。（3）桑葚（椹）胚：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。（4）囊胚：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。（5）原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。 【详解】A、过程④移植的胰岛B细胞是取自该小鼠自身细胞诱导分化而来，不会发生免疫排斥反应，A正确； B、获得的重组细胞经过程②后需要用胰蛋白酶消化后将细胞分散开，获得胚胎干细胞悬浮液，B错误； C、过程③是诱导分化过程，该过程中会发生基因的选择性表达，生成胰岛B细胞，C错误； D、过程①选用卵母细胞，因为卵母细胞中含激发细胞核全能性的物质，核移植过程中选择MII中期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复，D错误。 故选A。 5．（23-24高二下. 浙江丽水五校期中）科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（    ） A．超数排卵 B．精子获能处理 C．细胞核移植 D．胚胎培养 【答案】C 【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。 （1）卵母细胞的采集和培养①主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。 （2）精子的采集和获能①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法；②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。 （3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 【详解】由题干信息可知，该过程通过体外受精获得胚胎，再通过胚胎移植，使长角羚羊成功妊娠并产仔，因此需要进行超数排卵、精子获能处理，并对获得的受精卵进行胚胎培养；由于该过程为有性生殖，因此不需要涉及细胞核移植，所以C正确、ABD错误。 故选C。 6．（23-24高二下. 浙江宁波北仑中学期中）下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（　　） A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植 【答案】B 【分析】分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取乙牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。 【详解】A、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A错误； B、动物细胞培养中需要提供95%空气（保证细胞的有氧呼吸）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，B正确； C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误； D、过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，D错误。 故选B。 7．（23-24高二下. 浙江省强基联盟期中）在单克隆抗体的制备过程中，常采用有限稀释法对融合细胞进行筛选及克隆化培养。操作如下图。下列叙述正确的是（    ） A．①→③过程无须无菌操作 B．①→③过程细胞增殖了3代 C．若①过程获得的细胞均为杂交瘤细胞，则无须进行②→③过程 D．若培养板上各孔均为阳性，说明完成了筛选及克隆培养 【答案】D 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交细胞，进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、为避免微生物污染，有限稀释全程都需无菌操作，A错误； B、该过程重复3-5次，但细胞在多孔板中增殖不止一代，因此增殖代数远大于3-5代，B错误； C、获得的杂交瘤细胞种类有很多种，还需进一步筛选获得产生目的抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、各培养孔均为阳性，说明筛选得到的细胞均为目的细胞，完成了筛选及克隆过程，D正确。 故选D。 8．（23-24高二下. 浙江省绍兴市诸暨中学期中）以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。下图是应用生物技术培育试管动物、克隆动物和获得组织细胞的流程图，其中①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩代表相关的过程。 下列叙述正确的是（　　） A．过程①将人工采集的精子和卵细胞共同培养，便可完成体外受精过程 B．过程③需配置一系列不同成分的培养液，用于胚胎的营养限制性培养 C．过程④可提取囊胚的内细胞团的个别细胞做染色体分析，进行性别鉴定 D．过程⑧胚胎移植前，需要代孕母进行同期发情处理 【答案】D 【分析】胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。理论基础：哺乳动物的体内受精和早期胚胎发育规律。 【详解】A、人工采集的精子需要获能，卵子需要培养到减数第二次分裂的中期，才能进行体外受精，A错误； B、胚胎细胞早期培养需要配置一系列不同成分的培养液，以满足胚胎不同发育时期的营养需求，B错误； C、胚胎在植入前还要进行基因检查，过程④可提取囊胚的滋养层细胞进行基因检测，以减少对胚胎的损伤，C错误； D、过程为⑧胚胎移植，胚胎移植前需要对代孕母注射性激素进行同期发情处理，D正确。 故选D。 9．（23-24高二下. 浙江省台州市台州六校期中）经体外受精和胚胎分割培育优质奶牛的过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．胚胎移植过程中要对供体母牛和受体母牛进行超数排卵处理 B．对囊胚期的胚胎进行分割，需要保证内细胞团和滋养层都均等切割 C．为了获得更多的卵母细胞，需要用雌激素对雌性奶牛进行超数排卵处理 D．胚胎移植时，同物种的受体母牛可以不是良种母牛，也不需要考虑免疫排斥问题 【答案】D 【分析】分析题图：图示为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，其中A是卵母细胞，可与获能的精子受精形成受精卵；①是囊胚中的内细胞团，②是囊胚腔。 【详解】A、胚胎移植过程中对供体和受体母牛要进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，A错误； B、对囊胚期的胚胎进行分割，需要保证内细胞团（具有发育的全能性）均等分割，B错误； C、为了获得更多的卵母细胞，需要用促性腺激素对雌性奶牛进行超数排卵处理，C错误； D、因为决定后代是不是良种的是供体的遗传物质，和受体无关，受体只是承担了繁殖功能，所以说受体只需要同种即可，胚胎移植不会产生免疫排斥，不需要考虑该问题，D正确。 故选D。 10．（23-24高二下. 浙江省91高中联盟期中）胚胎工程在医学、农业和生命科学等领域具有广泛应用，带来新的机遇和突破。下列叙述正确的是（    ） A．用获能的精子与MI期卵母细胞进行人工受精 B．早期胚胎中的内细胞团可发育成胎盘和胎膜 C．利用胚胎分割技术，同卵双胎较同卵多胎的成功率更高 D．用添加适量促性腺激素的饲料饲喂雌性动物可实现超数排卵 【答案】C 【分析】囊胚期细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层的细胞将来发育成胎盘和胎膜。促性腺激素的化学本质是蛋白质，不能口服。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【详解】A、雄性动物新鲜的精子获能后才具备受精能力，因此，可以使用雄性动物获能的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用，A错误； B、内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，B错误； C、通过胚胎分割获得的胚胎遗传特性相同，因此利用胚胎分割技术，同卵双胎较同卵多胎的成功率更高，C正确； D、促性腺激素属于蛋白质类激素，在饲料中添加的促性腺激素，因在动物的消化道中被分解而失去促进超数排卵的作用，D错误。 故选C。 11．（23-24高二下. 浙江省91高中联盟期中）长江流域水利枢纽影响了中华鲟的生殖洄游，使其自然繁殖率持续下降。为了保存中华鲟的种质资源，建立了中华鲟精巢细胞系，其过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．乙过程需用胰蛋白酶处理，制成细胞悬液 B．丙过程属于原代培养，需加入动物血清、蔗糖等成分 C．丁过程中，贴壁生长的精巢细胞可直接用离心法收集 D．丙、丁均在5%CO2和95%O2混合气体的CO2培养箱中进行 【答案】A 【分析】1、取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。2、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2。 【详解】A、制成细胞悬液需要用胰蛋白酶处理精巢组织，A正确； B、动物细胞培养液中不需要加入蔗糖，B错误； C、贴壁生长的精巢细胞需要先用胰蛋白酶处理再用离心法收集，C错误； D、动物细胞培养的气体条件是95%空气+5%CO2，D错误。 故选A。 12．（23-24高二下. 浙江省G5联盟期中）下列关于囊胚的叙述，错误的是（    ） A．通常切割少量囊胚内细胞团细胞用于胚胎性别鉴定 B．胚胎分割时需对囊胚的内细胞团均等分割，分割后可直接移植 C．体外培养得到的囊胚进行胚胎移植时通常移植到受体的子宫 D．囊胚外层的扁平细胞将发育成胚胎附属结构或胚外结构 【答案】A 【分析】囊胚指的是内部产生嚢胚液、嚢胚腔的胚胎，嚢胚中所有细胞都没有开始分化，这个阶段之后胚胎开始出现分化。经过卵裂，受精卵被分割成很多小细胞，这些由小细胞组成的中空球形体称为囊胚。卵裂结束，囊胚细胞要经过一系列复杂的运动，导致细胞空间相互关系的改变。 【详解】A、胚胎工程中通常切割少量囊胚滋养层细胞用于胚胎性别鉴定，A错误； B、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，分割后可直接移植，B正确； C、囊胚移植是将体外受精卵培养至囊胚，然后将囊胚转移到女性的子宫中进行植入、生长和发育，C正确； D、囊胚外表是一层扁平细胞，称为滋养层，主要发育成胚胎的附属结构或胚外结构，如胎盘，D正确。 故选A。 13．（23-24高二下. 浙江省S9联盟期中）我国科学家利用体细胞诱导产生多能干细胞（iPS细胞），并将其注射到无法发育到成体阶段的四倍体囊胚中，最终获得克隆鼠，经鉴定证实克隆鼠确实从iPS细胞发育而来，并可繁殖后代。实验流程见图，下列分析错误的是（    ） A．本实验使用到体外受精、胚胎体外培养和胚胎移植等技术 B．小鼠iPS细胞在特定条件下可恢复受精卵时期的功能 C．四倍体囊胚可能因染色体数目变异而无法发育为成体 D．克隆鼠体细胞具有黑鼠细胞相同的遗传物质 【答案】A 【分析】多能干细胞是一类具有自我更新、自我复制能力的多潜能细胞，多能干细胞具有分化出多种细胞组织的潜能，但失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定的限制。人或者动物都是二倍体，可用电融合的方法使两个细胞融合为一个细胞，这样就获得了四倍体胚胎，四倍体胚胎是不能正常发育的，但是可以形成胎盘，如果将一种多能干细胞注入四倍体囊胚，可以获得一个完整的动物个体，那证明移进去的干细胞是全能的干细胞。 【详解】A、本实验应用了细胞融合、多能干细胞移植、体外胚胎培养、胚胎移植技术，并没有使用到体外受精和胚胎分割移植等技术，A错误； B、多能干细胞（iPS细胞）已被证明可以发育成个体，小鼠体细胞在诱导因子的作用下产生多能干细胞，表明其可恢复全能性，可恢复受精卵时期的功能，B正确； C、四倍体囊胚是由两个二倍体细胞融合发育而来，发生染色体数目变异，无法正常发育成个体， C正确； D、在克隆过程中，研究人员将黑鼠的体细胞诱导形成多能干细胞（iPS细胞），然后注入四倍体囊胚（无法发育为成体）形成重组囊胚，多能干细胞（iPS细胞）属于重组囊胚中的内细胞团，最后通过代孕母鼠生出克隆鼠，因此，克隆鼠的体细胞包含了与原始黑鼠相同的遗传物质，D正确。 故选A。 14．（23-24高二下. 浙江省杭州市期中）下图是应用生物技术培育试管动物、克隆动物和获得组织细胞的流程图，其中①~⑨代表相关的过程。下列有关叙述正确的是（    ） A．过程①在采集卵细胞的过程通常人为注射外源的性激素，以获得更多的成熟卵细胞 B．过程②核移植前需要对体细胞进行特殊处理，如增加培养基中血清的浓度 C．过程④可以在显微镜下用切割针或切割刀把胚胎分割开，或者采用酶处理等方式 D．过程⑥移植早期胚胎之前一定要对胚胎进行性别鉴定 【答案】C 【分析】图示①为体外受精、②为细胞核移植，③为早期胚胎培养，④为胚胎分割，⑥、⑦均为胚胎移植。 【详解】A、过程①在采集卵细胞的过程通常人为注射外源的促性腺激素，以获得更多的成熟卵细胞，A错误； B、移植前要对体细胞进行营养限制性培养，要减少培养基中血清的浓度，B错误； C、过程④是胚胎分割，胚胎分割的基本过程是：将发育良好的早期胚胎（囊胚或囊胚期以前的胚胎）移入含有培养液的培养皿中，在显微镜下用切割针或切割刀把胚胎分割开，或者采用酶处理等方式将早期胚胎中的细胞分散开，C正确； D、如对产生的子代没有性别要求，则胚胎移植前不需要进行性别鉴定，且通过核移植获得的胚胎性别与提供细胞核的个体相同，因此也不需要进行性别鉴定，D错误。 故选C。 15．（23-24高二下. 浙江省会稽联盟期中）杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本操作步骤如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．甲细胞主要是从已经某种抗原免疫的小鼠脾脏中分离出的B淋巴细胞 B．①中可加入聚乙二醇（PEG）促进细胞融合得到的全部为杂交瘤细胞 C．杂交瘤细胞产生的单克隆抗体特异性强、灵敏度高 D．③过程是筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞 【答案】B 【分析】分析图可知，用杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中，首先给小鼠注射抗原后，提取甲细胞，并与骨髓瘤细胞融合，故甲细胞为经免疫处理的小鼠脾脏中分离出的B淋巴细胞，①过程表示细胞融合过程，可加入聚乙二醇以促进细胞融合；②过程表示用选择性培养基筛选获得杂交瘤细胞；③过程表示用抗体检验筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、分析图可知，用杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中，首先给小鼠注射抗原后，提取甲细胞，并与骨髓瘤细胞融合，故甲细胞为经免疫处理的小鼠脾脏中分离出的B淋巴细胞，A正确； B、分析图可知，①过程表示细胞融合过程，可加入聚乙二醇以促进细胞融合，但融合得到的不一定全部为杂交瘤细胞，如自身融合的细胞，B错误； C、杂交瘤细胞产生的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，C正确； D、分析图可知，③过程表示用抗体检验筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，D正确。 故选B。 16．（23-24高二下. 浙江省会稽联盟期中）中国科学家在世界上首次利用体细胞核移植技术成功实现了对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”，培育过程如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．①过程需借助精密的显微操作仪进行细胞核移植 B．②过程属于个体发育过程，其细胞的全能性越来越高 C．③过程必不可少的一个操作是胚胎移植 D．与鼠相比，克隆猴更适合作为人类疾病治疗和药物实验的模型动物 【答案】B 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。我国科学家利用体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术培育出了克隆猴中中和华华。 【详解】A、①过程将体外培养纤维细胞和去核卵子融合，通过显微操作去核，再将纤维细胞注入去核的卵母细胞，通过电融合法使两细胞融合，A正确； B、图中②使早期胚胎培养，属于个体发育过程，该过程中细胞的全能性越来越低，B错误； C、③过程必不可少的一个操作是胚胎移植，胚胎移植是胚胎工程的最后一个环节，其实质是早期胚胎在空间位置上的转移，C正确； D、猴与人在进化上亲缘关系比鼠与 人更近，因此，与鼠相比，克隆猴更适合作为人类疾病和进行药物实验的模型动物，D正确。 故选B。 17．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（    ） A．步骤①的操作不需要在无菌环境中进行操作 B．步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C．步骤③中细胞会在培养瓶底部呈现单层生长 D．步骤④培养过程中大部分细胞遗传物质改变 【答案】C 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件 （1）充足的营养供给--微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 （2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 （3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 （4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、为防止细菌污染，培养过程中的各种操作都需要在无菌环境中进行，A错误； B、用胰蛋白酶溶解细胞间物质使细胞分离，B错误； C、细胞在生长繁殖时，会发生接触抑制现象，会在培养瓶底部贴壁生长，形成一层细胞，C正确； D、在传代培养中，有的细胞（并非大分部细胞）可能会发生癌变，D错误。 故选C。 18．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时常黏附在培养瓶内壁上，而淋巴细胞则常悬浮在培养液中。下列叙述正确的是（    ） A．培养液需要定期更换的主要目的是防止培养过程中细胞被杂菌污染 B．细胞培养需要的气体条件是5%的CO2和95%的O2 C．对该上皮细胞传代培养时，可直接用离心法收集 D．该淋巴细胞可能会因为细胞密度过大等因素而分裂受阻 【答案】D 【分析】1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2、动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质等。 【详解】A、培养液需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，A错误； B、细胞培养需要的气体条件是5%的CO2和95%的空气，B错误； C、分析题意，上皮细胞在培养时常黏附在培养瓶内壁上，对该上皮细胞传代培养时，需要先用胰蛋白酶等处理，再用离心法收集，C错误； D、当细胞密度过大，有害代谢物积累，培养液中物质缺乏会导致其分裂受阻，故该淋巴细胞可能会因为细胞密度过大等因素而分裂受阻，D正确。 故选D。 19．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）在家畜优良品种繁育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述正确的是（    ） A．采集的卵母细胞要经过获能处理后才能完成受精 B．当胚胎发育到适宜阶段时可在液氮环境中冷冻保存 C．胚胎移植前需要对受体进行选择和免疫抑制处理 D．运用胚胎分割技术可以提高胚胎移植的成活率 【答案】B 【分析】1、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作； 2、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。 【详解】A、采集的卵母细胞需要在体外进行人工培养至减数第二次分裂中期才算成熟，才具备受精能力，不是进行获能处理，A错误； B、当胚胎发育到适宜阶段时可将其取出向受体移植或冷冻保存，如可在液氮环境中冷冻保存，B正确； C、胚胎移植前，需选择健康体质和正常繁殖能力的受体且进行同期发情处理，不是进行免疫抑制处理，C错误； D、胚胎分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，D错误。 故选B。 20．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述错误的是（    ） A．该技术避免了母亲的细胞质遗传病基因传递给后代 B．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因可能遗传给“三亲婴儿” C．该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等操作 D．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因 【答案】B 【分析】分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。 【详解】A、母亲为“三亲婴儿”提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，A正确； B、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给“三亲婴儿”，B错误； C、由题图可知，该技术涉及动物细胞培养、动物细胞核移植、体外受精等操作，C正确； D、“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，线粒体基因来自于卵母细胞捐献者，D正确。 故选B。 21．（23-24高二下. 浙江省山海协作体期中）下列关于“试管奶牛”培养流程的叙述，正确的是（    ） A．过程①可对供体母牛注射性激素，使其排出更多的卵子 B．过程②将采集到的精子和卵子共同培养即可完成体外受精 C．过程③之前可取囊胚滋养层细胞进行性别鉴定以获得试管奶牛 D．代孕母牛需进行同期发情处理，并配种，在过程③之后进行妊娠检测 【答案】C 【分析】分析题图：图示为“试管牛”的培养流程，其中①表示卵母细胞的采集和培养，②表示体外受精，③表示胚胎移植。 【详解】A、过程①可对供体母牛注射促性腺激素，进行超数排卵，获得更多的卵子，A错误； B、过程②表示体外受精作用，将采集到的精子获能处理，卵子培育到减数分裂Ⅱ中期，才能受精，B错误； C、为了获得雌性的“试管奶牛”需要取样囊胚的滋养层细胞做DNA分析进行性别鉴定，C正确； D、胚胎移植时，需使受体与供体的生理状况保持相同，需要对代孕奶牛C进行同期发情处理，不用配种，③表示胚胎移植，在过程③之后进行妊娠检测，观察胚胎的发育情况，D错误。 故选C。 22．（23-24高二下. 浙江省台金七校期中）动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程，是动物细胞工程的基础。下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是（    ） A．动物细胞只能贴壁生长，不能进行悬浮培养 B．能连续传代的细胞遗传物质发生改变，其贴壁性下降 C．细胞进行一次传代培养所需时间约等于一个细胞周期的时间 D．将培养箱中CO2浓度维持在5%，目的是促进细胞的呼吸作用 【答案】B 【分析】 动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质等。 【详解】A、动物细胞可以进行悬浮培养，A错误； B、能连续传代的细胞通常具有异倍体核型，其贴壁性下降，B正确； C、传代培养的实质就是分离后再次培养，进行一次分离再培养称之为传一代，因此细胞进行一次传代培养所需时间应该大于一个细胞周期的时间，C错误； D、将培养箱中CO2浓度维持在5%，目的是维持培养液的pH，D错误； 故选B。 23．（23-24高二下. 浙江省S9联盟期中）巨噬细胞移动抑制因子是一种在进化中高度保守的蛋白质，具有重要的生物学功能。研究发现，MIF在哺乳类动物生殖系统各器官和母胎界面均有表达，参与了生殖过程的多个环节，包括胚胎早期发育、胚胎植入、胎盘发育和妊娠维持。为进一步阐明MIF蛋白在哺乳动物早期胚胎发育中的作用提供理论支持，通过现代生物技术对MIF在牛胚胎早期发育中的表达模式和功能进行初探。回答下列问题： (1)根据研究目标，要获得特定的牛胚胎细胞，先通过 技术大量收集牛卵母细胞，牛卵母细胞培养到 （选填“卵细胞”或“次级卵母细胞”）再与解冻并 的精子结合，完成体外受精。 (2)受精卵培养过程中需维持的气体条件中包含5%的CO2，其作用是 。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加 和 ，早期胚胎一般培养到 才能进行移植。 (3)为获得更多的克隆动物A，可在过程④胚胎移植前对胚胎进行分割，进行胚胎分割时，可将 （时期）的胚胎用切割针分割开，或采用 方式将早期胚胎中的细胞分散开。 (4)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是___________。 A．卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达 B．卵细胞含有的营养物质多 C．卵细胞大，便于操作 D．重组细胞才具有全能性 (5)为探究MIF对牛胚胎早期发育率的影响，常采用注射MIF抗体的方法来干扰MIF的表达。研究人员通过以下技术路线制备特异性强、纯度高的MIF单克隆抗体。 a．用 免疫小鼠，然后经过图中的①②③④等步骤，获得大量单克隆抗体。 b．步骤②通常使用选择培养基，主要目的是筛选出 。 c．步骤③主要需要经过 的两项操作，并经多次筛选，最终获得 。 【答案】(1) 超数排卵 次级卵母细胞 获能 (2) 维持培养液的pH 激素 血清 囊胚期 (3) 囊胚期或囊胚期以前 酶处理 (4)A (5) MIF 杂交瘤细胞 克隆化培养和抗体检测 能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 【分析】1、哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤。 2、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】（1）哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤。故要获得特定的牛胚胎细胞，先采用促性腺激素处理的方法大量收集牛卵母细胞（超数排卵），牛卵母细胞培养到减数第二次分裂中期（次级卵母细胞）再与解冻并经获能处理后的精子结合，完成体外受精。 （2）体外受精得到的受精卵需要在CO2培养箱中保温培养，培养所要维持的气体条件中包含95%的空气和5%的CO2，其中CO2的作用是维持培养液pH。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和血清等。早期胚胎一般培养到桑葚胚或囊胚阶段才进行移植。 （3）进行胚胎分割时，可将囊胚期或囊胚期以前的胚胎用切割针分割开，或采用酶处理方式将早期胚胎中的细胞分散开。 （4）进行核移植时受体应该选择减数第二次分裂中期的卵母细胞，最有可能的原因是卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达，A正确，BCD错误。 故选A。 （5）a、为获取MIF单克隆抗体，可以用MIF免疫小鼠，以获取产生特异性抗体的B淋巴细胞。 b、步骤②为第一次筛选，通常使用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 c、步骤③为第二次筛选，需要经过克隆化培养和抗体检测，并经多次筛选，最终获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 24．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）为降低人乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图所示。请回答下列问题：    (1)本实验中，需给实验小鼠多次注射特定的抗原，目的是 。对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用 酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的 中培养，离心收集B淋巴细胞。 (2)步骤①B淋巴细胞和骨髓瘤细胞可以在 、 等介导下相互融合，也可以运用电脉冲诱导等物理技术诱导融合。步骤②用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是 。步骤③将获得的杂交瘤细胞接种到96孔板，进行 培养，用 技术检测每孔中的抗体，筛选单克隆杂交瘤细胞株，可经体外扩大培养，收集 ，提取单克隆抗体。 (3)步骤④将获得的a单克隆抗体和b治疗乳腺癌的药物这2部分，通过接头结合在一起，形成 ，实现对乳腺癌的治疗。与常规化疗方法相比，该治疗方法具有的明显优点是 。 【答案】(1) 获得更多的能产生抗乳腺癌细胞抗体的B淋巴细胞/获得更多的B淋巴细胞 胰蛋白酶/胶原蛋白酶 CO2培养箱/ CO2恒温培养箱 (2) PEG/聚乙二醇 灭活的病毒 既能产生特异性抗体，又能无限增殖 克隆化/克隆 抗原-抗体杂交 细胞培养液/上清液 (3) 生物导弹/抗体药物偶联物 专一杀死肿瘤细胞，正常细胞免受损伤 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）抗原能够激发机体的特异性免疫过程，本实验中，需给实验小鼠多次注射特定的抗原，相当于激发机体的二次免疫过程，目的是获得更多的能产生抗乳腺癌细胞抗体的B淋巴细胞/获得更多的B淋巴细胞；将动物细胞分散为单个细胞的方法通常是用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理；动物细胞培养需要一定的气体条件，故置于含有混合气体的CO2培养箱/ CO2恒温培养箱中培养。 （2）诱导动物细胞融合可用化学方法如聚乙二醇，也可用生物方法如灭活的病毒等；经选择培养基获得的杂交瘤细胞的特点是既能产生特异性抗体，又能无限增殖；步骤③将获得的杂交瘤细胞接种到96孔板，进行克隆化/克隆培养，用抗原-抗体杂交技术检测每孔中的抗体；提取单克隆抗体时，需要从上清液中提取。 （3）步骤④将获得的a单克隆抗体和b治疗乳腺癌的药物这2部分，通过接头结合在一起，形成生物导弹/抗体药物偶联物；该技术中单克隆抗体具有导向作用，故与常规化疗方法相比，该治疗方法具有的明显优点是专一杀死肿瘤细胞，正常细胞免受损伤。 25．（23-24高二下. 浙江省钱塘联盟期中）体外细胞共培养技术是将2种或2种以上的细胞共同培养在同一环境中，能模拟体内生成的微环境，便于更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用。下列关于动物细胞的培养，相关叙述错误的是（    ） A．动物细胞培养时，培养箱应该保持纯氧的环境以保证细胞呼吸对氧气的需要 B．动物细胞培养前需将动物组织块机械处理并用胰蛋白酶处理分散成单个细胞 C．培养动物细胞的培养液需要定期更换，以便清除代谢废物 D．体外培养的动物细胞往往具有贴附生长和接触抑制等特点 【答案】A 【分析】物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、动物细胞培养时，培养箱的气体环境为95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH），A错误； B、动物细胞培养前需将动物组织块剪碎并用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，B正确； C、动物细胞培养过程中产生的代谢废物会影响细胞生长和增殖，因此培养动物细胞的培养液需要定期更换，以便清除代谢废物，C正确； D、贴附性细胞培养时会出现细胞贴壁和接触抑制现象，因此培养贴附性细胞时要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易于贴附，D正确。 故选A。 26.（23-24高二下. 浙江省卓越联盟期中）RecQ4解旋酶基因缺陷会引起人患有某种遗传病。该病还存在另外一种类型的患者，这类患者体内的RecQ4解旋酶基因正常，其体内的某种抗体可与RecQ4解旋酶结合，使RecQ4解旋酶失去活性，从而患病。现有小鼠若干，利用单克隆抗体技术获得大量抗RecQ4解旋酶抗体（mAb），用于临床治疗，制备过程如下图。完成下面小题。 ①．关于利用杂交瘤技术制备抗RecQ4解旋酶抗体的过程，相关叙述错误的是（    ） A．需从注射特定抗原（RecQ4解旋酶）的实验动物脾脏中获取B淋巴细胞 B．细胞融合需要无菌无毒环境，需放在有CO2的环境中 C．若仅考虑细胞的两两融合，则试管甲中存在的融合细胞有3种 D．细胞筛选不需要使用显微镜辨识获得杂交瘤细胞 ②．要获得纯净杂交瘤细胞培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，并保证培养条件的无菌、无毒。下列操作的中正确的是（    ） A．在工作结束后，使用过的器皿、废弃物等应该直接倾倒洗涤。 B．若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，使用70%乙醇擦拭干净继续使用 C．为使动物细胞的培养液与仪器无菌，就采用121℃，15-20min的高压蒸汽灭菌法灭菌 D．为防止细胞代谢产生有毒有害物质，应定期更换培养液 【答案】①．A ②．D 【分析】制造单克隆抗体：（1）用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的 B 淋巴细胞；（2）用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具 有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；（3）对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体 检测，经多次筛选，就可获 得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；（4）抗体检测呈阳性的杂 交瘤细胞（分泌的抗体能与特定抗原结合）；（5）将抗体检测呈阳性的杂交瘤细 胞在体外条件下大规模培养， 或注射到小鼠腹腔内增殖；（6）从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 ①．A、为获得体内具有产生抗RecQ4解旋酶抗体的B淋巴细胞，需向小鼠体内反复注射RecQ4解旋酶抗体，A错误； B、细胞融合需要无菌无毒的环境，细胞培养时需要一定的CO2，B正确； C、若仅考虑细胞的两两融合，则试管甲中会存在B淋巴细胞间的融合、骨髓瘤细胞间的融合和B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合3种融合细胞，C正确； D、细胞筛选不需要使用显微镜辨识获得杂交瘤细胞，只需要进行抗原-抗体实验鉴定，D正确。 故选A。 ②．A、为避免实验器具上残留的微生物污染实验室和操作者，所有使用过的器皿、废弃物等都必须在实验结束后，经过高压蒸汽灭菌后再处理，A错误； B、空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌， B错误； C、高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121C的条件下，维持15~30min，C错误； D、细胞代谢会产生有害物质毒害细胞，为防止细胞代谢产生有毒有害物质，应定期更换培养液，D正确。 故选D。 27．（23-24高二下. 浙江省钱塘联盟期中）亚洲黑熊又称为月熊，是食肉目熊科的哺乳动物。近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，目前处于易危状态。近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内受精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。下列相关叙述错误的是（    ） A．胚胎工程操作中对黑熊A、D均需激素处理，前者为促性腺激素，后者为孕激素 B．D雌性黑熊受体必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B进行同期发情处理 C．E的遗传性状由A、C决定，性别不确定；F的遗传性状由A、B决定，性别为雌性 D．无论是体内受精还是核移植所得胚胎，需培养至囊胚阶段，再移植到D受体内着床 【答案】B 【分析】胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、胚胎工程操作中对黑熊A、D均需激素处理，对黑熊A需要用促性腺激素处理，促进其超数排卵，对受体D用孕激素处理，使其与A能同期发情，A正确； B、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊早A体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊早A同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊早B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，B错误； C、E后代是由黑熊A和黑熊C体外受精之后形成的，遗传物质来源于A和C，F后代是由黑熊B的细胞核和黑熊A的去核卵母细胞重组形成的，遗传物质状来源于A和B，性别与黑熊B相同，都是雌性，C正确； D、无论是体内受精还是核移植所得胚胎，需培养至桑葚胚或者囊胚阶段，再移植到D受体内着床，D正确。 故选B。 28．（23-24高二下. 浙江省钱塘联盟期中）早孕检测试纸可通过检测尿液中人绒毛膜促性腺激素（HCG）的含量，来诊断育龄期女性是否受孕，其有效成分是科学家利用HCG免疫健康小鼠而制备的抗HCG单克隆抗体。下图是抗HCG单克隆抗体制备的流程图。下列相关叙述正确的是（    ） A．HAT培养基上筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体 B．选出产生HCG抗体的杂交瘤细胞后，可将其注入小鼠体内扩大培养 C．单克隆抗体制备过程中的两次筛选，其原理及所需培养基成分均相同 D．该单克隆抗体制备过程中的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞间存在免疫排斥 【答案】B 【分析】制备的抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体，可用于早孕检测，其制备过程：提取HCG→将HCG注射至小鼠体内→获取B淋巴细胞→B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合→筛选出杂交瘤细胞→克隆上述杂交瘤细胞，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞→体外或体内培养→单克隆抗体。 【详解】A、HAT培养基上筛选得到的杂交瘤细胞需要进行多次克隆化培养和抗体检测，获得产生特异性抗体的杂交瘤细胞再用于生产单克隆抗体，A错误； B、选出产生HCG抗体的杂交瘤细胞后，可将其注入小鼠体内扩大培养，或者体外培养，B正确； C、单克隆抗体制备过程中首先在HAT培养基上进行筛选获得杂交瘤细胞，然后再克隆化培养和抗体检测，其原理及所需培养基成分不完全相同，C错误； D、由于B细胞和核骨髓瘤细胞均来自于同一只小鼠，所以B淋巴细胞和骨髓瘤细胞间不存在免疫排斥，D错误。 故选B。 29．（23-24高二下. 浙江省五校联盟期中）猪蓝耳病又称猪的繁殖与呼吸综合征（PRRS），由动脉炎病毒与呼吸综合征病毒（简称蓝病毒）的蛋白质外壳引起。患病动物主要表现为繁殖障碍、呼吸困难、耳朵蓝紫。母猪感染该病毒后会在妊娠晚期流产，为培育抗蓝病毒的转基因猪，工作人员根据哺乳动物受精作用和早期胚胎的发育过程提出了解决方案（如图）。请回答下列问题：    (1)B猪体细胞在培养瓶中培养时，要保证培养液无菌、无毒，常在培养液中加入 ，另外还需定期更换培养液，以防止 对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，还需用 处理后分装到多个培养瓶中进行传代培养。 (2)由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建基因表达载体，该过程需要用的酶有 。常采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和载体，其优点是 。 (3)通过步骤①的技术手段 得到甲，培养至乙 ，然后移植到经 处理的C猪的 ，由于C对乙不发生 ，从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。 (4)利用 技术检验D猪是否产生相应的抗体。该抗体也可使用杂交瘤技术来制备，通常情况下，杂交瘤细胞是由经培养的骨髓瘤细胞和 细胞融合获得的，与诱导植物原生质体融合方法不同的是 。 【答案】(1) 抗生素 细胞代谢产物积累或培养液营养枯竭 胰蛋白酶 (2) 限制酶、DNA连接酶 防止目的基因自身环化或反向连接 (3) 核移植 早期囊胚 同期发情 子宫 免疫排斥 (4) 抗原——抗体杂交 经蓝病毒抗原（外壳蛋白）免疫的B淋巴 灭活的（仙台）病毒诱导 【分析】核移植技术：将供体细胞核注入去核卵母细胞，通过电激等使细胞融合，得到重组细胞，激活得到重组胚胎（重组胚），将胚胎移植到受体雌性动物体内。 抗原-抗体杂交技术原理：抗原抗体的特异性结合；分子杂交技术原理：碱基互补配对原则。 【详解】（1）B猪体细胞在培养瓶中培养时，要保证动物细胞培养条件，如培养液无菌、无毒，常在培养液中加入抗生素，可避免杂菌污染，另外还需定期更换培养液，以防止细胞代谢产物积累或培养液营养枯竭对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，还需用胰蛋白酶处理获得单细胞悬液而后分装到多个培养瓶中进行传代培养。 （2）由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建基因表达载体，构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，该过程中常采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和载体，这样可以防止目的基因自身环化或反向连接，保证目的基因的正向连接。 （3）通过步骤①的技术手段为核移植得到甲重构胚的过程，激活重构胚并培养至乙囊胚期，此时的胚胎处于游离状态，然后将其移植到经同期发情处理的C猪的子宫内，该技术手段的理论基础是受体子宫对移入的胚胎不发生免疫排斥反应，即子宫C对乙不发生免疫排斥，从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。 （4）用抗原—抗体杂交技术判断D猪是否产生ASFV抗体，该技术的原理是抗体与抗原的特异性结合，因此，使用的抗原物质最好是ASFV外壳蛋白。该抗体若使用杂交瘤技术来制备，杂交瘤细胞应该由骨髓瘤细胞和经经蓝病毒外壳蛋白兔疫后的B淋巴细胞融合获得的，经过两次筛选获得的杂交瘤细胞既能产生所需要的抗体，又能大量增殖，因而可以通过对该杂交瘤细胞进行培养获得大量的抗体。在构建杂交瘤细胞融合的过程中灭活的（仙台）病毒诱导融合的方法是动物细胞融合特有的促融受到，这是植物体细胞杂交过程中没有采用的促融技术，因而为动物细胞融合特有的手段。 30．（23-24高二下. 浙江省温州新力量联盟期中）免疫系统可以识别和消除潜在的有害物质从而保护机体，而恶性肿瘤却可以“伪装”自己从而躲避免疫系统的打击，免疫逃避的机理如图1所示。 (1)部分癌细胞可被免疫系统中的细胞A （填名称）识别并消灭，一部分癌细胞持续存在，获得免疫逃避能力后占据优势地位，因癌细胞具有 重要特征，导致临床上出现明显症状。 (2)据图1分析免疫逃避的机理：细胞A存在PD-1分子，癌细胞自身的 分子与之结合使细胞A处于抑制状态，正常组织往往不存在该分子，其存在于癌细胞的根本原因为 。 (3)欧狄沃是中国首个免疫肿瘤药物，其作用机理为 ，从而激活细胞A对抗癌细胞使癌细胞发生如图2所示的 过程。除此之外还可通过 的方法使癌细胞失去免疫逃避的能力。 (4)如图3是制备抗PD-L1单克隆抗体的示意图，它能与癌细胞表面的PD-L1特异性结合，因而用于治疗某些癌症。下列叙述正确的是__________。 A．分离B淋巴细胞前，需要对小鼠注射PD-L1抗体 B．多孔玻璃板中的细胞并非都是杂交瘤细胞 C．图中细胞集落a-d都能大量繁殖，仅a能产生抗体 D．集落a扩大化培养可在体外培养液或小鼠体内进行 【答案】(1) 效应细胞毒性T细胞 无限增殖、能在体内转移 (2) PD-L1 基因突变/基因的异常表达 (3) 阻断PD-1和PD-L1的结合 细胞凋亡 破坏PD-L1/使PD-L1变性 (4)BD 【分析】单克隆抗体的制备（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】（1）部分癌细胞可被免疫系统中的效应细胞毒性T细胞识别并消灭，一部分癌细胞持续存在，获得免疫逃避能力后占据优势地位，因癌细胞具有无限增殖、能在体内转移重要特征，导致临床上出现明显症状。 （2）据图分析，免疫逃避的机理：细胞A存在PD-1分子，癌细胞自身的PD-L1分子与之结合使细胞A处于抑制状态，正常组织往往不存在该分子，其存在于癌细胞的根本原因是因为发生了基因突变。 （3）欧狄沃是中国首个免疫肿瘤药物，其作用机理为阻断PD-1和PD-L1的结合，使肿瘤细胞无法逃逸；从而激活细胞A对抗癌细胞使癌细胞发生如图2所示的细胞凋亡的过程，除此之外还可通过破坏PD-L1/使PD-L1变性的方法使癌细胞失去免疫逃避的能力 （4）A、分离B淋巴细胞前，需要对小鼠注射PD-L1（抗原），A错误； B、多孔玻璃板中的细胞并非都是杂交瘤细胞，所以需要进行少选，B正确； C、图中细胞集落a-d都能大量繁殖，仅a能产生所需的抗体，C错误； D、集落a扩大化培养可在体外培养液或小鼠体内进行，D正确 故选BD。 ( 1 ) 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题03动物细胞工程 1．（23-24高二下. 浙江省台州十校期中）下列有关动物细胞培养的表述正确的是（    ） A．动物细胞培养的原理应用了动物细胞的全能性 B．细胞要经过脱分化形成愈伤组织 C．培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 D．培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖 2．（23-24高二下. 浙江省台州十校期中）如图是体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述错误的是（    ） A．后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定 B．进行胚胎移植时，代孕母体应用免疫抑制剂处理，避免发生免疫排斥反应 C．过程②常使用显微操作对卵母细胞进行去核处理 D．过程③将重组细胞可以培养至囊胚期移植 3．（23-24高二下. 浙江金兰教育期中）下列关于单克隆抗体制备的叙述，错误的是（    ） A．单克隆抗体制备运用了动物细胞融合和动物细胞培养技术 B．动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 C．经小鼠腹腔内培养后，可从小鼠血液中分离得到大量单克隆抗体 D．灭活病毒可使细胞相互凝聚并让细胞膜上的分子重新排布 4．（23-24高二下. 浙江金兰教育期中）为确定治疗性克隆技术是否适用于治疗糖尿病，科研人员利用人糖尿病模型鼠进行如图所示实验。下列有关叙述正确的是（    ） A．过程④移植后A鼠一般不发生排斥反应 B．获得的重组细胞经过程②后可直接获得胚胎干细胞悬浮液 C．过程③是诱导胚胎干细胞脱分化定向增殖生成胰岛B细胞 D．过程①中选用小鼠的皮肤细胞有利于细胞核全能性的恢复 5．（23-24高二下. 浙江丽水五校期中）科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（    ） A．超数排卵 B．精子获能处理 C．细胞核移植 D．胚胎培养 6．（23-24高二下. 浙江宁波北仑中学期中）下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（　　） A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植 7．（23-24高二下. 浙江省强基联盟期中）在单克隆抗体的制备过程中，常采用有限稀释法对融合细胞进行筛选及克隆化培养。操作如下图。下列叙述正确的是（    ） A．①→③过程无须无菌操作 B．①→③过程细胞增殖了3代 C．若①过程获得的细胞均为杂交瘤细胞，则无须进行②→③过程 D．若培养板上各孔均为阳性，说明完成了筛选及克隆培养 8．（23-24高二下. 浙江省绍兴市诸暨中学期中）以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。下图是应用生物技术培育试管动物、克隆动物和获得组织细胞的流程图，其中①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩代表相关的过程。 下列叙述正确的是（　　） A．过程①将人工采集的精子和卵细胞共同培养，便可完成体外受精过程 B．过程③需配置一系列不同成分的培养液，用于胚胎的营养限制性培养 C．过程④可提取囊胚的内细胞团的个别细胞做染色体分析，进行性别鉴定 D．过程⑧胚胎移植前，需要代孕母进行同期发情处理 9．（23-24高二下. 浙江省台州市台州六校期中）经体外受精和胚胎分割培育优质奶牛的过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．胚胎移植过程中要对供体母牛和受体母牛进行超数排卵处理 B．对囊胚期的胚胎进行分割，需要保证内细胞团和滋养层都均等切割 C．为了获得更多的卵母细胞，需要用雌激素对雌性奶牛进行超数排卵处理 D．胚胎移植时，同物种的受体母牛可以不是良种母牛，也不需要考虑免疫排斥问题 10．（23-24高二下. 浙江省91高中联盟期中）胚胎工程在医学、农业和生命科学等领域具有广泛应用，带来新的机遇和突破。下列叙述正确的是（    ） A．用获能的精子与MI期卵母细胞进行人工受精 B．早期胚胎中的内细胞团可发育成胎盘和胎膜 C．利用胚胎分割技术，同卵双胎较同卵多胎的成功率更高 D．用添加适量促性腺激素的饲料饲喂雌性动物可实现超数排卵 11．（23-24高二下. 浙江省91高中联盟期中）长江流域水利枢纽影响了中华鲟的生殖洄游，使其自然繁殖率持续下降。为了保存中华鲟的种质资源，建立了中华鲟精巢细胞系，其过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．乙过程需用胰蛋白酶处理，制成细胞悬液 B．丙过程属于原代培养，需加入动物血清、蔗糖等成分 C．丁过程中，贴壁生长的精巢细胞可直接用离心法收集 D．丙、丁均在5%CO2和95%O2混合气体的CO2培养箱中进行 12．（23-24高二下. 浙江省G5联盟期中）下列关于囊胚的叙述，错误的是（    ） A．通常切割少量囊胚内细胞团细胞用于胚胎性别鉴定 B．胚胎分割时需对囊胚的内细胞团均等分割，分割后可直接移植 C．体外培养得到的囊胚进行胚胎移植时通常移植到受体的子宫 D．囊胚外层的扁平细胞将发育成胚胎附属结构或胚外结构 13．（23-24高二下. 浙江省S9联盟期中）我国科学家利用体细胞诱导产生多能干细胞（iPS细胞），并将其注射到无法发育到成体阶段的四倍体囊胚中，最终获得克隆鼠，经鉴定证实克隆鼠确实从iPS细胞发育而来，并可繁殖后代。实验流程见图，下列分析错误的是（    ） A．本实验使用到体外受精、胚胎体外培养和胚胎移植等技术 B．小鼠iPS细胞在特定条件下可恢复受精卵时期的功能 C．四倍体囊胚可能因染色体数目变异而无法发育为成体 D．克隆鼠体细胞具有黑鼠细胞相同的遗传物质 14．（23-24高二下. 浙江省杭州市期中）下图是应用生物技术培育试管动物、克隆动物和获得组织细胞的流程图，其中①~⑨代表相关的过程。下列有关叙述正确的是（    ） A．过程①在采集卵细胞的过程通常人为注射外源的性激素，以获得更多的成熟卵细胞 B．过程②核移植前需要对体细胞进行特殊处理，如增加培养基中血清的浓度 C．过程④可以在显微镜下用切割针或切割刀把胚胎分割开，或者采用酶处理等方式 D．过程⑥移植早期胚胎之前一定要对胚胎进行性别鉴定 15．（23-24高二下. 浙江省会稽联盟期中）杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本操作步骤如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．甲细胞主要是从已经某种抗原免疫的小鼠脾脏中分离出的B淋巴细胞 B．①中可加入聚乙二醇（PEG）促进细胞融合得到的全部为杂交瘤细胞 C．杂交瘤细胞产生的单克隆抗体特异性强、灵敏度高 D．③过程是筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞 16．（23-24高二下. 浙江省会稽联盟期中）中国科学家在世界上首次利用体细胞核移植技术成功实现了对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”，培育过程如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．①过程需借助精密的显微操作仪进行细胞核移植 B．②过程属于个体发育过程，其细胞的全能性越来越高 C．③过程必不可少的一个操作是胚胎移植 D．与鼠相比，克隆猴更适合作为人类疾病治疗和药物实验的模型动物 17．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（    ） A．步骤①的操作不需要在无菌环境中进行操作 B．步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C．步骤③中细胞会在培养瓶底部呈现单层生长 D．步骤④培养过程中大部分细胞遗传物质改变 18．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时常黏附在培养瓶内壁上，而淋巴细胞则常悬浮在培养液中。下列叙述正确的是（    ） A．培养液需要定期更换的主要目的是防止培养过程中细胞被杂菌污染 B．细胞培养需要的气体条件是5%的CO2和95%的O2 C．对该上皮细胞传代培养时，可直接用离心法收集 D．该淋巴细胞可能会因为细胞密度过大等因素而分裂受阻 19．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）在家畜优良品种繁育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述正确的是（    ） A．采集的卵母细胞要经过获能处理后才能完成受精 B．当胚胎发育到适宜阶段时可在液氮环境中冷冻保存 C．胚胎移植前需要对受体进行选择和免疫抑制处理 D．运用胚胎分割技术可以提高胚胎移植的成活率 20．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述错误的是（    ） A．该技术避免了母亲的细胞质遗传病基因传递给后代 B．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因可能遗传给“三亲婴儿” C．该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等操作 D．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因 21．（23-24高二下. 浙江省山海协作体期中）下列关于“试管奶牛”培养流程的叙述，正确的是（    ） A．过程①可对供体母牛注射性激素，使其排出更多的卵子 B．过程②将采集到的精子和卵子共同培养即可完成体外受精 C．过程③之前可取囊胚滋养层细胞进行性别鉴定以获得试管奶牛 D．代孕母牛需进行同期发情处理，并配种，在过程③之后进行妊娠检测 22．（23-24高二下. 浙江省台金七校期中）动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程，是动物细胞工程的基础。下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是（    ） A．动物细胞只能贴壁生长，不能进行悬浮培养 B．能连续传代的细胞遗传物质发生改变，其贴壁性下降 C．细胞进行一次传代培养所需时间约等于一个细胞周期的时间 D．将培养箱中CO2浓度维持在5%，目的是促进细胞的呼吸作用 23．（23-24高二下. 浙江省S9联盟期中）巨噬细胞移动抑制因子是一种在进化中高度保守的蛋白质，具有重要的生物学功能。研究发现，MIF在哺乳类动物生殖系统各器官和母胎界面均有表达，参与了生殖过程的多个环节，包括胚胎早期发育、胚胎植入、胎盘发育和妊娠维持。为进一步阐明MIF蛋白在哺乳动物早期胚胎发育中的作用提供理论支持，通过现代生物技术对MIF在牛胚胎早期发育中的表达模式和功能进行初探。回答下列问题： (1)根据研究目标，要获得特定的牛胚胎细胞，先通过 技术大量收集牛卵母细胞，牛卵母细胞培养到 （选填“卵细胞”或“次级卵母细胞”）再与解冻并 的精子结合，完成体外受精。 (2)受精卵培养过程中需维持的气体条件中包含5%的CO2，其作用是 。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加 和 ，早期胚胎一般培养到 才能进行移植。 (3)为获得更多的克隆动物A，可在过程④胚胎移植前对胚胎进行分割，进行胚胎分割时，可将 （时期）的胚胎用切割针分割开，或采用 方式将早期胚胎中的细胞分散开。 (4)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是___________。 A．卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达 B．卵细胞含有的营养物质多 C．卵细胞大，便于操作 D．重组细胞才具有全能性 (5)为探究MIF对牛胚胎早期发育率的影响，常采用注射MIF抗体的方法来干扰MIF的表达。研究人员通过以下技术路线制备特异性强、纯度高的MIF单克隆抗体。 a．用 免疫小鼠，然后经过图中的①②③④等步骤，获得大量单克隆抗体。 b．步骤②通常使用选择培养基，主要目的是筛选出 。 c．步骤③主要需要经过 的两项操作，并经多次筛选，最终获得 。 24．（23-24高二下. 浙江省嘉兴八校期中）为降低人乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图所示。请回答下列问题：    (1)本实验中，需给实验小鼠多次注射特定的抗原，目的是 。对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用 酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的 中培养，离心收集B淋巴细胞。 (2)步骤①B淋巴细胞和骨髓瘤细胞可以在 、 等介导下相互融合，也可以运用电脉冲诱导等物理技术诱导融合。步骤②用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是 。步骤③将获得的杂交瘤细胞接种到96孔板，进行 培养，用 技术检测每孔中的抗体，筛选单克隆杂交瘤细胞株，可经体外扩大培养，收集 ，提取单克隆抗体。 (3)步骤④将获得的a单克隆抗体和b治疗乳腺癌的药物这2部分，通过接头结合在一起，形成 ，实现对乳腺癌的治疗。与常规化疗方法相比，该治疗方法具有的明显优点是 。 25．（23-24高二下. 浙江省钱塘联盟期中）体外细胞共培养技术是将2种或2种以上的细胞共同培养在同一环境中，能模拟体内生成的微环境，便于更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用。下列关于动物细胞的培养，相关叙述错误的是（    ） A．动物细胞培养时，培养箱应该保持纯氧的环境以保证细胞呼吸对氧气的需要 B．动物细胞培养前需将动物组织块机械处理并用胰蛋白酶处理分散成单个细胞 C．培养动物细胞的培养液需要定期更换，以便清除代谢废物 D．体外培养的动物细胞往往具有贴附生长和接触抑制等特点 26.（23-24高二下. 浙江省卓越联盟期中）RecQ4解旋酶基因缺陷会引起人患有某种遗传病。该病还存在另外一种类型的患者，这类患者体内的RecQ4解旋酶基因正常，其体内的某种抗体可与RecQ4解旋酶结合，使RecQ4解旋酶失去活性，从而患病。现有小鼠若干，利用单克隆抗体技术获得大量抗RecQ4解旋酶抗体（mAb），用于临床治疗，制备过程如下图。完成下面小题。 ①．关于利用杂交瘤技术制备抗RecQ4解旋酶抗体的过程，相关叙述错误的是（    ） A．需从注射特定抗原（RecQ4解旋酶）的实验动物脾脏中获取B淋巴细胞 B．细胞融合需要无菌无毒环境，需放在有CO2的环境中 C．若仅考虑细胞的两两融合，则试管甲中存在的融合细胞有3种 D．细胞筛选不需要使用显微镜辨识获得杂交瘤细胞 ②．要获得纯净杂交瘤细胞培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，并保证培养条件的无菌、无毒。下列操作的中正确的是（    ） A．在工作结束后，使用过的器皿、废弃物等应该直接倾倒洗涤。 B．若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，使用70%乙醇擦拭干净继续使用 C．为使动物细胞的培养液与仪器无菌，就采用121℃，15-20min的高压蒸汽灭菌法灭菌 D．为防止细胞代谢产生有毒有害物质，应定期更换培养液 27．（23-24高二下. 浙江省钱塘联盟期中）亚洲黑熊又称为月熊，是食肉目熊科的哺乳动物。近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，目前处于易危状态。近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内受精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。下列相关叙述错误的是（    ） A．胚胎工程操作中对黑熊A、D均需激素处理，前者为促性腺激素，后者为孕激素 B．D雌性黑熊受体必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B进行同期发情处理 C．E的遗传性状由A、C决定，性别不确定；F的遗传性状由A、B决定，性别为雌性 D．无论是体内受精还是核移植所得胚胎，需培养至囊胚阶段，再移植到D受体内着床 28．（23-24高二下. 浙江省钱塘联盟期中）早孕检测试纸可通过检测尿液中人绒毛膜促性腺激素（HCG）的含量，来诊断育龄期女性是否受孕，其有效成分是科学家利用HCG免疫健康小鼠而制备的抗HCG单克隆抗体。下图是抗HCG单克隆抗体制备的流程图。下列相关叙述正确的是（    ） A．HAT培养基上筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体 B．选出产生HCG抗体的杂交瘤细胞后，可将其注入小鼠体内扩大培养 C．单克隆抗体制备过程中的两次筛选，其原理及所需培养基成分均相同 D．该单克隆抗体制备过程中的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞间存在免疫排斥 29．（23-24高二下. 浙江省五校联盟期中）猪蓝耳病又称猪的繁殖与呼吸综合征（PRRS），由动脉炎病毒与呼吸综合征病毒（简称蓝病毒）的蛋白质外壳引起。患病动物主要表现为繁殖障碍、呼吸困难、耳朵蓝紫。母猪感染该病毒后会在妊娠晚期流产，为培育抗蓝病毒的转基因猪，工作人员根据哺乳动物受精作用和早期胚胎的发育过程提出了解决方案（如图）。请回答下列问题：    (1)B猪体细胞在培养瓶中培养时，要保证培养液无菌、无毒，常在培养液中加入 ，另外还需定期更换培养液，以防止 对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，还需用 处理后分装到多个培养瓶中进行传代培养。 (2)由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建基因表达载体，该过程需要用的酶有 。常采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和载体，其优点是 。 (3)通过步骤①的技术手段 得到甲，培养至乙 ，然后移植到经 处理的C猪的 ，由于C对乙不发生 ，从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。 (4)利用 技术检验D猪是否产生相应的抗体。该抗体也可使用杂交瘤技术来制备，通常情况下，杂交瘤细胞是由经培养的骨髓瘤细胞和 细胞融合获得的，与诱导植物原生质体融合方法不同的是 。 30．（23-24高二下. 浙江省温州新力量联盟期中）免疫系统可以识别和消除潜在的有害物质从而保护机体，而恶性肿瘤却可以“伪装”自己从而躲避免疫系统的打击，免疫逃避的机理如图1所示。 (1)部分癌细胞可被免疫系统中的细胞A （填名称）识别并消灭，一部分癌细胞持续存在，获得免疫逃避能力后占据优势地位，因癌细胞具有 重要特征，导致临床上出现明显症状。 (2)据图1分析免疫逃避的机理：细胞A存在PD-1分子，癌细胞自身的 分子与之结合使细胞A处于抑制状态，正常组织往往不存在该分子，其存在于癌细胞的根本原因为 。 (3)欧狄沃是中国首个免疫肿瘤药物，其作用机理为 ，从而激活细胞A对抗癌细胞使癌细胞发生如图2所示的 过程。除此之外还可通过 的方法使癌细胞失去免疫逃避的能力。 (4)如图3是制备抗PD-L1单克隆抗体的示意图，它能与癌细胞表面的PD-L1特异性结合，因而用于治疗某些癌症。下列叙述正确的是__________。 A．分离B淋巴细胞前，需要对小鼠注射PD-L1抗体 B．多孔玻璃板中的细胞并非都是杂交瘤细胞 C．图中细胞集落a-d都能大量繁殖，仅a能产生抗体 D．集落a扩大化培养可在体外培养液或小鼠体内进行 ( 1 ) 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$