内容正文:
课时冲关60 基因工程的应用和蛋白质工程 对应学生用书P485
[基础对点练]
1.(2025江西南昌质检)基因工程广泛应用于农
牧业、医药卫生和食品工业等方面.下列有关
说法错误的是 ( )
A.乳腺生物反应器可用于生产药物
B.干扰素是一种具有干扰细菌复制作用的糖
蛋白
C.基因工程技术可用于提高作物和畜产品的
产量
D.将某些病毒的抗病基因导入植物中,可培育
转基因抗病植物
解析:B [干扰素是一种具有干扰病毒复制作
用的糖蛋白,B错误.]
2.(2025河南天一大联考)如图表示构建重组质
粒和筛选含人胰岛素原基因的细菌的过程,其
中Ⅰ和Ⅱ表示抗性基因,①~⑦表示过程,其他
数字表示菌落.下列有关叙述正确的是 ( )
(注:⑦过程表示用灭菌绒布从含氨苄青霉素培
养基中蘸取菌种,再按到含四环素培养基中
培养)
A.①②只能用同一种限制酶进行切割
B.Ⅰ表示抗氨苄青霉素基因,Ⅱ表示抗四环素
基因
C.3、5菌落是筛选出的含有人胰岛素原基因的
细菌
D.该基因工程成功的标志是细菌合成具有生物
活性的胰岛素
解析:C [由于不同限制酶切割形成的黏性末
端可能相同,因此①②也可以用不同种限制酶
进行切割,A 错误;根据⑥⑦筛选结果可知,构
建基因表达载体后,抗四环素基因被破坏,而抗
氨苄青霉素基因没有被破坏,因此Ⅰ表示抗四
环素基因,Ⅱ表示抗氨苄青霉素基因,B 错误;
3、5菌落中的细菌能抗氨苄青霉素,但不能抗四
环素,筛选出的是含有人胰岛素原基因的细菌,
C正确;细菌是原核生物,不含内质网和高尔基
体,不能对胰岛素进行加工,因此细菌不能合成
具有生物活性的胰岛素,D错误.]
3.(2025合肥市调研)如图为蛋白质工程操作的
基本思路,下列叙述错误的是 ( )
A.代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤
B.代表中心法则内容的是①②
C.①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,
⑤代表DNA合成
D.蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子
设计,通过基因合成或改造实现
解析:D [代表蛋白质工程操作思路的过程是
④⑤,A 正确;①代表转录,②代表翻译,④代表
分子设计,⑤代表 DNA 合成,B、C正确;蛋白质
工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计,
通过基因合成或改造实现,D错误.]
4.(2025安徽淮南检测)下列关于蛋白质工程的
说法正确的是 ( )
A.蛋白质工程无需构建基因表达载体
B.蛋白质工程需要限制性内切核酸酶和 DNA
连接酶
C.对蛋白质 的 改 造 是 通 过 直 接 改 造 相 应 的
mRNA来实现的
D.蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程
是相同的
解析:B [蛋白质工程是以基因工程为基础的,
蛋白质工程需要限制性内切核酸酶(切割目的
基因和载体)和 DNA 连接酶(连接切割后的目
的基因和载体),构建基因表达载体,A 错误,
B正确;对蛋白质的改造是通过直接改造相应
的基因来实现的,C错误;蛋白质工程是从预期
的蛋白质功能出发,设计预期的蛋白质结构,推
测应有的氨基酸序列,找到并改变相对应的脱
氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因,获得所
需要的蛋白质,故蛋白质工程的流程和天然蛋
白质合成的过程是不完全相同的,D错误.]
5.(2025福建泉州五中质检)几丁质是许多真菌
细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化其水解.
将几丁质酶基因转入菊花体内,可增强其抗真
菌病的能力.下列有关叙述错误的是 ( )
A.将几丁质酶基因插入 Ti质粒的 T-DNA上
构建表达载体
B.可通过显微注射法将农杆菌导入菊花受体
细胞
C.可用 PCR 等技术检测目的基因是否成功
导入
D.可用真菌接种实验检测转基因菊花对真菌的
抗性程度
解析:B [可通过农杆菌转化法将农杆菌导入
菊花受体细胞,显微注射法是用于将目的基因
导入动物细胞的方法,B错误.]
6.(2025山西部分学校高三检测)基因组编辑技
术能对基因进行定点“修改”,以改变目的基因
的序列和功能,可应用于物种改良和基因治疗.
下列分析错误的是 ( )
A.对目的基因的碱基进行定点替换、增添或敲
除,会引起基因突变
B.编辑过程中造成 DNA 小片段异常插入某基
因中,将导致染色体变异
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第九单元 生物技术与工程
C.将抗性基因编辑后插入农作物基因组中改良
物种,利用了基因重组原理
D.可通过导入正常基因或者精准编辑修复缺陷
基因,达到治疗疾病的目的
解析:B [基因组编辑时对基因进行定点修改,
以改变目的基因的碱基序列,属 于 基 因 突 变,
A 正确;编辑过程中造成 DNA 小片段异常插入
某基因中,将导致基因中的碱基序列增添,属于
基因突变,B错误;将抗性基因编辑后插入农作
物基因组中,通过基因重组使该农作物获得抗
性性状,改良物种,C 正确;导入正常基因或者
精准编辑修复缺陷基因,可纠正因遗传物质改
变引起的病变,达到治疗疾病的目的,D正确.]
7.(2025安徽天域大联考高三质检)生物制药是
生物技术的综合利用,从生物体、生物组织、细
胞和体液中分离出有效成分,制备用于预防、治
疗和诊断的产品.如今,细胞工程在生物制药
工业发挥着不可替代的作用,下列关于细胞工
程制药的叙述,错误的是 ( )
A.乳腺生物反应器是将药用蛋白基因的表达载
体直接导入生物的乳腺细胞中,而后在转基
因动物的乳汁中获得人类需要的药用蛋白
B.将能够分泌特异性抗体的B淋巴细胞与能够
无限增殖的骨髓瘤细胞融合筛选,形成能产
生特定抗体的杂交瘤细胞,从而获得单克隆
抗体
C.利用植物细胞培养技术获得植物细胞次生代
谢物,不会大量破坏植物资源,对于环境保护
具有重要意义
D.利用转基因植物也能生产疫苗,以植物作为
生物反应器,将携带抗原基因的载体导入受
体细胞,在植物体内表达和修饰这类特定抗
原,成为具有免疫活性的蛋白质
解析:A [制备乳腺生物反应器时,需将目的基
因(药用蛋白基因)与乳腺中特异表达的基因的
启动子等调控元件重组在一起,然后导入受精
卵中,A 错误;将能够分泌特异性抗体的B淋巴
细胞与能够无限增殖的骨髓瘤细胞融合,再进
行两次筛选,获得能产生特定抗体的杂交瘤细
胞,从而获得单克隆抗体,B 正确;植物细胞的
次生代谢物含量很低,从植物组织提取会大量
破坏植物资源,利用植物细胞培养技术实现次
生代谢物的工厂化生产,可获得大量植物细胞
次生代谢物,不会大量破坏植物资源,对于环境
保护具有重要意义,C正确;以植物作为生物反
应器,将携带抗原基因的载体导入植物的受体
细胞,获得转基因植物,该植物能表达和修饰这
类特定抗原,成为具有免疫活性的蛋白质,再制
成疫苗,D正确.]
8.(2025河北十县联考高三期中)研究人员利用
点突变技术将干扰素(IFN)第17位的半胱氨酸
诱变为丝氨酸后,发现其抗病毒活性提高了100
倍,且这种新型的IFN在-70℃下保存150天
后仍然稳定.下列相关叙述错误的是 ( )
A.点突变技术通常是直接对蛋白质进行操作,
使氨基酸改变
B.IFN抗病毒活性发生改变的直接原因是其空
间结构发生改变
C.该技术为蛋白质工程,蛋白质工程常利用的
工具酶有限制酶和DNA连接酶等
D.经改造后的新型IFN 活性强、稳定性高的性
状是可以遗传的
解析:A [点突变技术属于蛋白质工程,蛋白质
工程直接改造的对象是基因,A 错误;IFN 抗病
毒活性发生改变的直接原因是其空间结构发生
改变,B 正确;蛋白质工程是第二代基因工程,
基因工程利用的工具酶有限制酶和 DNA 连接
酶等,C正确;蛋白质工程改造的是控制蛋白质
合成的基因,因此经改造后的新型IFN 的性状
可以遗传,D正确.]
9.(2025广东六校高三联考)将天然 Ti质粒改
造成含有Vir 基因的辅助质粒(作用为辅助
T-DNA转移)和不含有Vir 基因、含有 T-
DNA的穿梭质粒,共同转入农杆菌,可提高转
化效率.细菌和棉花对密码子偏好不同,为提
高翻译效率,增强棉花抗病虫害能力,进行下图
所示操作.
注:F1~F3,R1~R3 表示引物;T-DNA-L
B表示 T-DNA 左边界;T-DNA-RB表示
T-DNA右边界;Ori表示复制原点;KanR 表示
卡那霉素抗性基因;HygBR 表示潮霉素B抗性
基因.
请分析并回答下列问题:
(1)本操作中获取目的基因的方法有 .
(2)根据图中穿梭质粒上的KanR 和 HygBR 两
个标记基因的位置,用 (选填“卡那霉素”
或“潮霉素B”)初步筛选转化的棉花愈伤组织.
(3)为检测棉花植株是否导入目的基因,提取棉
花植株染色体DNA 作模板,进行PCR,应选用
的引物是 .
(4)穿梭质粒中通过使用两个p35s启动子,可
以增加 的结合位点,从而提
高目的基因的转录效率,合成更多的 mRNA,进
而增加蛋白质的表达量.
(5)对 T-DNA 边界序列进行测序发现,在连
接的 T-DNA部分中,RB通常比LB更精确完
整.RB连接序列更完整是因为与 RB共价连
接的 VirD2蛋白可以保护它免受核酸外切酶消
化.而较大的 LB序列缺失是因为 LB末端区
域缺乏保护.为了直观地显示 T-DNA 的转
移是否完整,可用绿色荧光蛋白基因(GFP)作
为报告基因,构建在紧邻 (选填“左”或
“右”)边界的位置.
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高考总复习 生物学
(6)本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工
程,理由是 .
A.通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞
B.将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达
C.将1~1362基因序列改变为棉花细胞偏好密
码子的基因序列
D.用1~1362合成基因序列和1363~1848天
然基因序列获得改造的抗虫蛋白
解析:(1)结合图示可知,基因工程中获取目的
基因的方法有人工合成(1-1362基因序列)和
PCR技术扩增(短时间内大量获得目的基因).
(2)结合基因表达载体的示意图可知,HygBR
位于 T-DNA 片段中,而 KanR 不在 T-DNA
片段中,HygBR 能表达潮霉素 B抗性基因,能
合成抗潮霉素B物质,因此用潮霉素 B初步筛
选转化的棉花愈伤组织.
(3)引物是能与目的基因碱基互补配对的序列,
由图可知,该目的基因是人工合成的1-1362
基因序列与 1363-1848 基 因 序 列 拼 接 成 的,
PCR扩增目的基因时,引物应在目的基因的两
端,所以为检测棉花植株是否导入目的基因,应
选用的引物是F3、R2.
(4)启动子是 RNA 聚合酶识别与结合的位点,
可用于驱动基因的转录,故穿梭质粒中通过使
用两个p35s 启动子,可以增加 RNA 聚合酶的
结合位点,从而提高目的基因的转录效率,合成
更多的 mRNA,进而增加蛋白质的表达量.
(5)T-DNA-LB表示 T-DNA 左边界;T-
DNA-RB表示 T-DNA 右边界,由于连接的
T-DNA部分中,RB(右边界)通常比 LB(左边
界)更精确完整,T-DNA 从农杆菌转移到植物
细胞中时始于右边界止于左边界,即 T-DNA
首先在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复
制,然后进入植物细胞并整合到染色体上,且在
T-DNA 的转移过程中会出现不完整转移现
象,即可能出现右边界被剪切,而左边界未被剪
切的现象,因此,以绿色荧光蛋白基因(GFP)作
报告基因研究 T-DNA 的转移,则GFP 应构
建在紧临左边界的位置.
(6)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律
及其与生物功能的关系作为基础,通过改造或
合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的
蛋白质,以满足人类生产和生活的需求,用1~
1362合成基因序列和1363~1848天然基因序
列获 得 改 造 的 抗 虫 蛋 白,属 于 蛋 白 质 工 程.
ABC不符合题意,D符合题意.
答案:(1)PCR扩增和人工合成
(2)潮霉素B (3)F3、R2 (4)RNA 聚合酶
(5)左 (6)D
10.(2025四川成都名校联盟高三模拟)研究发
现,蛋白酶抑制剂(一种蛋白质)可抑制害虫胰
蛋白酶活性,从而使害虫不能正常消化食物以
达到抗虫的目的,因此蛋白酶抑制剂基因转化
方式成为作物抗虫育种的新途径.某研究团
队将胰蛋白酶抑制剂(NaPI)基因转入棉花,
获得了转基因棉花植株,其部分操作流程如下
图所示.已知EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ是两种限
制酶.回答下列问题.
(1)利用PCR技术扩增 NaPI基因时,要添加
酶,该酶需要在反应的缓
冲液中添加 (填一种无机盐离子)来激活.
(2)基因工程的核心步骤是该图中的 (填
序号).利用农杆菌转化法时需要将 NaPI基
因插入到 Ti质粒的 T-DNA上,原因是
.
(3)在分子水平上,研究团队可用 (写出1
种即可)技术检测NaPI基因在棉花愈伤组织
细胞中的整合,然后经过基因表达的检测,筛
选出能合成胰蛋白酶抑制剂的棉花细胞,再通
过
技术,即可得到转基因抗虫植株.
(4)研究发现,胰凝乳蛋白酶抑制剂(StPinlA)
也能起到抗虫的效果.研究团队做了相关实
验(“对照”指的是非转基因棉花),得到如下图
所示的实验结果:
据图分析,研究团队的实验思路是:将 NaPI
基因和StPinlA 基因 ,然后
检测虫体质量及每株棉铃数.根据实验结果,
若想要得到抗虫效果最佳的转基因棉花,你的
建议是
.
解析:(1)PCR 过程中,Mg2+ 可以激活耐高温
的 DNA 聚 合 酶,故 需 要 在 缓 冲 液 中 加
入 Mg2+ .
(2)基因工程的核心步骤是②构建基因表达
载体.
(3)棉花细胞通过植物组织培养可得到转基因
植株.
(4)根据曲线图和柱形图可知,四组的变量是
导入不同基因的转基因棉花,即将 NaPI基因
和StPinlA 基因单独或同时导入棉花,然后检
测虫体质量及每株棉铃数,研究发现,同时导
入 NaPI基因和StPinlA 基因的转基因棉花,
抗虫效果最佳,且每株棉铃数最多,故应该将
NaPI基因和StPinlA 基因同时导入棉花,获
得转基因棉花.
答案:(1)耐高温的DNA聚合 Mg2+
(2)② T-DNA会转移并整合到受体细胞的
染色体DNA上
(3)PCR 植物组织培养
(4)单独或同时导入棉花 将 NaPI 基因和
StPinlA 基因同时导入棉花
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第九单元 生物技术与工程