精品解析：黑龙江省齐齐哈尔市第八中学校2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题

2024—2025学年度下学期3月月考 高二生物试题 一、单选题（每题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。） 1. 某研究小组从野生草本豆科植物中分离得到A和B两种根瘤菌菌株，欲探究二者的固氮能力，以用于生产根瘤菌肥。下列相关叙述正确的是（ ） A. 选择以NH4NO3为唯一氮源的培养基对根瘤菌进行培养 B. 采用干热灭菌法对培养皿、涂布器、接种环等进行灭菌 C. 利用平板划线法分离、纯化根瘤菌并统计样品中的活菌数 D. 根瘤菌肥作为微生物肥料可增进土壤肥力、改良土壤结构 2. 无菌操作是生物实验中一项重要的基本操作。下列过程不需要严格无菌操作的是（ ） A. 传统泡菜的制作 B. 酵母菌的纯培养 C. 动物细胞的传代培养 D. 花药离体培养 3. 以玄参茎段为外植体进行植物组织培养，流程图如下，相关叙述正确是（ ） ①外植体的选择及其消毒→②外植体的接种及愈伤组织诱导→③丛芽与不定根的诱导→④炼苗与移栽 A. 所用培养基含植物细胞所必需的无机盐、蔗糖和激素等营养物质 B. 过程①需用酒精和次氯酸钠混合液对外植体进行无菌处理 C. 过程②脱分化形成愈伤组织时可发生基因突变和染色体变异 D. 过程③诱导形成丛芽和不定根的效果与激素比例有关与种类无关 4. 如图所示，甲、乙、丙依次表示果酒、果醋和腐乳的制作，①②③④表示它们制作的相同之处，下列相关叙述错误的是（ ） A. ①可表示两者制作时所用的主要菌种都是单细胞生物 B. ②可表示两者制作时所用的主要菌种都属于真核生物 C. ③可表示两者制作过程都需要有氧环境 D. ④可表示三者制作过程的温度相同 5. 利用传统发酵技术可制作出大量美味食品，如泡菜、腐乳、豆豉等。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵的叙述，正确的是（ ） A. 家中制作葡萄酒和工业化生产啤酒都要接种酵母菌 B. 泡菜和果酒都是在厌氧条件下发酵产生的传统食品 C. 传统发酵和发酵工程使用的培养基都要严格灭菌 D. 现代发酵工程生产谷氨酸需要严格控制酸性条件 6. 清代满族诗人顾太清在《酸菜》一诗中写道“秋登场圃净，白露已为霜，老韭盐封瓮，时芹碧满筐。刈根仍涤垢，压石更添浆。筑窖深防冻，冬窗一脩觞。”诗中描述了酸菜的制作过程，十分生动。下列说法错误的是（ ） A. 做酸菜的瓮应该密封性良好，没有漏缝 B. “时芹碧满筐”指出要用新鲜蔬菜制作泡菜 C. 制作泡菜时要把蔬菜装满发酵坛后加入盐水 D. 若泡菜咸而不酸，可能是食盐过多抑制了乳酸菌的发酵 7. 纤维素是一种有待开发利用的生物资源，对于能源危机、环境污染问题的解决具有重要作用。从牛粪堆肥中可分离出产纤维素酶的细菌（纤维素分解菌）。刚果红可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但不与纤维素水解产物发生这种反应。图中a~d表示在培养基上生长的四个单菌落及透明圈。下列关于分离、鉴定纤维素分解菌实验相关操作的叙述，正确的是（ ） A. 称取1g牛粪堆肥样品，再用蒸馏水进行梯度稀释 B. 将一定稀释度的稀释液涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上进行培养 C. 该实验可以采用平板划线法进行分离计数 D. 使用刚果红染色法对初筛菌株进行检测，d组细菌可能产纤维素酶最多 8. 下图为幼鼠肾脏上皮细胞培养过程示意图，已知肾脏上皮细胞属于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞。下列叙述错误的是（ ） A. 甲→乙过程需要用机械的方法或特定的酶处理 B. 丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制的现象 C. 丙在CO2培养中培养以维持培养液pH相对稳定 D. 丙→丁过程为传代培养，此过程体现了动物细胞全能性 9. 尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成NH₃ B. 稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目 C. 取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌 D. 图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力 10. 在某地的农业生产中，研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 只有长期使用该除草剂的土壤中才含有能降解该除草剂的细菌 B. 筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源 C. 图中操作I的接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数 D. 经过一段时间的培养，培养皿中应该只存在有透明圈的菌落 11. 野生型大肠杆菌菌株能在未添加某种维生素的基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在添加了多种维生素的完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是（　　） A. 图中①②④为基本培养基，③为完全培养基 B. 紫外线的目的是提高突变率，增加突变株的数量 C. B的正确操作是用涂布器把菌液均匀地涂布在②表面 D. 经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养 12. 如图为诺贝尔奖获得者山中伸弥团队制备iPS细胞（诱导多能干细胞）的过程示意图：①小鼠胚胎成纤维细胞培养→②用分别含有Oct4、Sox2、c—Myc、Klf4基因的四种慢病毒载体感染小鼠胚胎成纤维细胞→③置于含有饲养层细胞的胚胎干细胞培养基中培养→④鼠胚胎成纤维细胞脱分化，形成iPS细胞。下列相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①应在含10%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的渗透压 B. 步骤②由于慢病毒载体会受到免疫细胞的攻击，可能导致感染效率的降低 C. 步骤③培养基中的饲养层细胞可为成纤维细胞提供所必需的生长因子 D. 步骤④形成iPS细胞的实质是基因的选择性表达，使其功能趋向于专门化 13. 萝卜和甘蓝均属于十字花科不同种属的二倍体植物，二者体细胞中的染色体数均为18条现通过两种途径实现萝卜和甘蓝的杂交：①萝卜和甘蓝通过人工授粉杂交获得的幼胚经组织培养形成幼苗甲，再用秋水仙素处理甲形成植株乙；②萝卜体细胞和甘蓝体细胞杂交得到细胞丙，丙经一系列操作得到植株丁。下列叙述错误的是（ ） A. 形成幼苗甲的过程中，需使用纤维素酶、生长素等 B. 染色体加倍后，植株乙的细胞中可能含36或72条染色体 C. 通过①②途径培育出植株乙、丁的过程，均打破了生殖隔离 D. 乙、丁均可育，若品质更好、产量更高，可应用于大田生产种植 14. 如图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。酚红在碱性环境中呈红色。下列有关叙述错误的是（ ） A. ①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源 B. 图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌 C. ④过程采用稀释涂布平板法进行接种，接种工具是涂布器 D. 可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈 15. 工业污水中含有的多环芳烃类化合物（仅含C、H元素）会造成农田土壤污染。研究人员按照如图所示的流程从受污染的农田土壤中分离得到能高效降解多环芳烃类化合物的细菌菌株。下列叙述错误的是（ ） A. 甲、乙培养基中应以多环芳烃类化合物为唯一碳源 B. 步骤①接种操作需要在酒精灯火焰附近进行 C. 步骤②中应用涂布器从甲中蘸取菌液均匀涂布于培养基乙表面 D. 步骤③中应从降解圈直径与菌落直径比值最大的菌落进行挑选 二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。） 16. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。叙述正确的是（ ） A. 过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B. 过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C. 过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D. 可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 17. 在一系列微生物的作用下，黑茶（中国边疆游牧民族的主要饮品）会产生一种对人体非常有益的金黄色颗粒“金花”。研究人员对“金花”中的微生物进行了分离和鉴定，过程如图。下列说法正确的是（ ） A. 向“金花”样品中加入蒸馏水制成样品悬液 B. 稀释涂布平板法用于微生物的分离计数，统计结果可能比实际值偏小 C. 涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化 D. 可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定 18. 小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角，且黏附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列叙述正确的是（ ） A. 培养液需要定期更换的主要目的是防止培养过程中细胞被杂菌污染 B. 细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2作用是刺激细胞呼吸 C. 该淋巴细胞可能会因为细胞密度过大等因素而分裂受阻 D. 对该上皮细胞传代培养时，可直接用离心法收集 19. 工业上生产青霉素的流程如图所示。有关叙述正确的有（ ） A. 制备该培养基除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至碱性 B. 过程①、②都属于扩大培养，发酵过程中心环节是发酵罐中发酵 C. 过程③需要严格的灭菌，否则可能会导致青霉素产量下降 D. 过程④可采用过滤、沉淀方法将菌体分离干燥 20. 肉苁蓉是一种草本植物，具有较高的药用价值，自然条件下产量较低，其次生代谢物苯乙醇苷是主要的活性成分。某实验小组欲利用植物细胞培养技术生产苯乙醇苷，简要流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 苯乙醇苷是肉苁蓉生长和生存所必需的 B. 利用植物细胞培养技术可以实现细胞产物的工厂化生产 C. 经射线处理①获得的都是高产苯乙醇苷的细胞 D. 也可将悬浮培养的细胞置于低渗溶液中涨破以提取苯乙醇苷 三、非选择题：本部分包括5题，共计55分。 21. 多环芳烃（PAHs）是一种不溶于水的有机物，在培养基中以微小的颗粒状存在，PAHs在土壤中的降解速率很慢，并具有致癌和致畸作用。科研人员欲从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，进行如图所示的实验（培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈）。回答下列问题： （1）从培养功能角度分析，培养基甲属于_____；培养基通常需要提前在121℃下进行_____。 （2）将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是_____，该方法不仅适用于筛选某种菌株，还可用于_____。 （3）筛选PAHs降解菌实验时，过程③所需要的实验工具有_____（答出两种）。过程④挑选的单菌落应该是透明圈直径与菌落直径比值_____（填“最小”或“最大”）的。 （4）在5个平板上各接种稀释倍数为103菌液样品0.1 mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，则每升原菌液样品中细菌数为_____个。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，所统计的细菌数通常会比上述方法统计数目偏_____（填“大”或“小”），原因是_____。 22. 某污水处理厂欲处理一批含As3+和硝酸盐浓度较高的污水，研究人员通过对肠道微生物的分离与筛选，得到了耐砷的反硝化细菌，它在厌氧条件下能够将硝酸盐还原为N2O和N2。分离耐砷的反硝化细菌具体步骤如下：采集健康人体的新鲜粪便样本，取采集的人体新鲜粪便样品0.3g，接种至该培养基上，对分离纯化后的菌株进行鉴定。 （1）配制培养基以筛选_______：该培养基中含有适宜浓度的________，从而有利于该菌的生长，抑制其他微生物的生长。此种培养基属于________培养基。 （2）耐砷反硝化细菌的分离与纯化：取200～300μL上述培养液，均匀地涂布在已经添加了5mmol/L As3+和10mmol/LNO3-的细菌固体培养基上。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________；涂布完成后，将平板置于温度为____________的恒温培养箱中培养24h。挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化，用该种方法进行接种时，接种工具是________，该接种工具的灭菌方法是________。操作时，在第二次及其以后的划线时，总是从上一次划线的______________开始划线，目的是__________。 23. 某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵） （1）在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是_____。 （2）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分_____（答出1点即可）。 （3）将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是_____。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是_____。发酵液中的乙醇可用_____溶液检测。 （4）本实验收集的淋洗液中的_____可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是_____。 24. 科学家利用植物体细胞杂交技术，将番茄叶片细胞制成的原生质体和马铃薯块茎细胞制成的原生质体融合，成功地培育出了“番茄一马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①～⑤表示过程，a～f表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如图2所示的三组实验。据图回答下列问题： （1）图1的过程②中，所用的化学方法常用的有_________、_________融合法；过程③成功的标志是_________；过程④形成愈伤组织需要经过______过程，愈伤组织形成D需要经过____过程。培养基中_________、_______的浓度会影响植物细胞的发育方向。 （2）图1培育杂种植株的过程主要应用的原理是_________、________；图2培育植物体B的育种方法Ⅱ称为______________。 （3）番茄是二倍体，体细胞中共24条染色体，马铃薯是四倍体，体细胞中共48条染色体。则图1的杂种植株的叶肉细胞中含有______个染色体组。图2中幼苗A、幼苗B、植物体A、植物体B、植物体C的叶肉细胞中，染色体数目不是24的是_______。图1技术在育种方面的意义在于____________________。 25. 下图为动物细胞培养的基本过程示意图。请回答下列问题。 （1）容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是_________________，易于培养。培养时先要剪碎，然后用____________分散成单个细胞，制成B瓶中的细胞悬液。将细胞悬液转入C瓶中进行的初次培养称为____________。 （2）目前普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，原因是____________。（答出2点） （3）动物细胞培养过程中还需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的作用主要是___________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024—2025学年度下学期3月月考 高二生物试题 一、单选题（每题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。） 1. 某研究小组从野生草本豆科植物中分离得到A和B两种根瘤菌菌株，欲探究二者的固氮能力，以用于生产根瘤菌肥。下列相关叙述正确的是（ ） A. 选择以NH4NO3为唯一氮源的培养基对根瘤菌进行培养 B. 采用干热灭菌法对培养皿、涂布器、接种环等进行灭菌 C. 利用平板划线法分离、纯化根瘤菌并统计样品中的活菌数 D. 根瘤菌肥作为微生物肥料可增进土壤肥力、改良土壤结构 【答案】D 【解析】 【分析】在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。获得纯培养物的过程称纯培养，包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。细胞全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用人工培养基对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体等进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。 【详解】A、根瘤菌可以通过自身的固氮作用将大气中的氮气转化成可利用的氮，所以培养根瘤菌时，培养基中不需要提供氮源，A错误； B、培养皿可采用干热灭菌法灭菌，涂布器、接种环等直接用酒精灯火焰灼烧可迅速彻底地灭菌，B错误； C、利用平板划线法和稀释涂布平板法都能分离、纯化根瘤菌，但平板划线法无法统计样品中的活菌数，常用稀释涂布平板法统计样品中的活菌数，C错误； D、微生物肥料利用微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长，常见的有根瘤菌肥、固氮菌肥等，D正确。 故选D。 2. 无菌操作是生物实验中一项重要的基本操作。下列过程不需要严格无菌操作的是（ ） A. 传统泡菜的制作 B. 酵母菌的纯培养 C. 动物细胞的传代培养 D. 花药离体培养 【答案】A 【解析】 【分析】在传统生物技术中，无需进行严格灭菌，根据目菌种的代谢特征设置相应的培养条件。 【详解】在传统生物技术中，如传统泡菜的制作过程，不需要严格的无菌操作，通常是根据目的菌种的代谢特征设置相应的培养条件进行的，而实验室中的一些生物工程技术，如酵母菌的纯培养、动物细胞的传代培养、花药离体培养等需要严格的无菌操作，A正确，BCD错误。 故选A。 3. 以玄参茎段为外植体进行植物组织培养，流程图如下，相关叙述正确的是（ ） ①外植体的选择及其消毒→②外植体的接种及愈伤组织诱导→③丛芽与不定根的诱导→④炼苗与移栽 A. 所用培养基含植物细胞所必需的无机盐、蔗糖和激素等营养物质 B. 过程①需用酒精和次氯酸钠混合液对外植体进行无菌处理 C. 过程②脱分化形成愈伤组织时可发生基因突变和染色体变异 D. 过程③诱导形成丛芽和不定根的效果与激素比例有关与种类无关 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、植物激素不属于营养物质，A错误； B、过程①需依次用酒精和次氯酸钠对外植体进行无菌处理，B错误； C、由根尖细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，细胞不发生分化，但细胞通过有丝分裂方式进行增殖，在有丝分裂间期可能会发生基因突变，在细胞分裂期可能会发生染色体变异，C正确； D、启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素是生长素和细胞分裂素，生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成，比值适中时，促进愈伤组织的生长，由此可知，过程③诱导形成丛芽和不定根的效果与激素比例、种类有关，D错误。 故选C。 4. 如图所示，甲、乙、丙依次表示果酒、果醋和腐乳的制作，①②③④表示它们制作的相同之处，下列相关叙述错误的是（ ） A. ①可表示两者制作时所用的主要菌种都是单细胞生物 B. ②可表示两者制作时所用的主要菌种都属于真核生物 C. ③可表示两者制作过程都需要有氧环境 D. ④可表示三者制作过程的温度相同 【答案】D 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解成甘油和脂肪酸。 【详解】A、参与甲果酒发酵的微生物是酵母菌，参与乙果醋发酵的微生物是醋酸菌，两者都属于单细胞生物，A正确； B、参与甲果酒发酵的微生物是酵母菌，参与丙腐乳制作的微生物主要是毛霉，两者都属于真核生物，B正确； C、参与乙果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型，③表示两者制作过程都需要有氧环境，C正确； D、制作果酒的适宜温度是18~30℃，制作果醋的适宜温度是30~35℃，而制作腐乳的适宜温度是15~18℃，D错误。 故选D。 5. 利用传统发酵技术可制作出大量美味食品，如泡菜、腐乳、豆豉等。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵的叙述，正确的是（ ） A. 家中制作葡萄酒和工业化生产啤酒都要接种酵母菌 B. 泡菜和果酒都是在厌氧条件下发酵产生的传统食品 C. 传统发酵和发酵工程使用的培养基都要严格灭菌 D. 现代发酵工程生产谷氨酸需要严格控制酸性条件 【答案】B 【解析】 【分析】与果酒、果醋的生产有关的微生物分别是酵母菌、醋酸菌，泡菜腌制过程中起作用的主要是乳酸菌。 详解】A、家中制作葡萄酒不需要接种酵母菌，A错误； B、泡菜和果酒都是在厌氧条件下发酵产生的传统食品，B正确； C、传统发酵的培养基不需要严格灭菌，C错误； D、现代发酵工程生产谷氨酸需要严格控制中性或弱碱性条件，否则得不到谷氨酸，D错误。 故选B。 6. 清代满族诗人顾太清在《酸菜》一诗中写道“秋登场圃净，白露已为霜，老韭盐封瓮，时芹碧满筐。刈根仍涤垢，压石更添浆。筑窖深防冻，冬窗一脩觞。”诗中描述了酸菜的制作过程，十分生动。下列说法错误的是（ ） A. 做酸菜的瓮应该密封性良好，没有漏缝 B. “时芹碧满筐”指出要用新鲜蔬菜制作泡菜 C. 制作泡菜时要把蔬菜装满发酵坛后加入盐水 D. 若泡菜咸而不酸，可能是食盐过多抑制了乳酸菌发酵 【答案】C 【解析】 【分析】泡菜发酵的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。 【详解】A、酸菜制作主要利用了乳酸菌的无氧呼吸，因此做酸菜的瓮应该密封性良好，没有漏缝，A正确； B、制作泡菜时应选用新鲜蔬菜，B正确； C、制作泡菜时，将蔬菜、香辛料等装至八成满，倒入冷却好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖，C错误； D、若泡菜咸而不酸，可能是食盐过多抑制了乳酸菌的发酵，D正确。 故选C。 7. 纤维素是一种有待开发利用的生物资源，对于能源危机、环境污染问题的解决具有重要作用。从牛粪堆肥中可分离出产纤维素酶的细菌（纤维素分解菌）。刚果红可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但不与纤维素水解产物发生这种反应。图中a~d表示在培养基上生长的四个单菌落及透明圈。下列关于分离、鉴定纤维素分解菌实验相关操作的叙述，正确的是（ ） A. 称取1g牛粪堆肥样品，再用蒸馏水进行梯度稀释 B. 将一定稀释度的稀释液涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上进行培养 C. 该实验可以采用平板划线法进行分离计数 D. 使用刚果红染色法对初筛菌株进行检测，d组细菌可能产纤维素酶最多 【答案】D 【解析】 【分析】选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，成为选择培养基。 【详解】A、进行梯度稀释时使用的是无菌水，A错误； B、应将一定稀释度的稀释液涂布在以纤维素为唯一碳源的培养基上进行选择培养，B错误； C、该实验可以采用稀释涂布平板法进行分离计数，平板划线法不能用于计数，C错误； D、与a、b、c三组相比，d组的透明圈直径和菌落直径的比值最大，说明该组细菌可能产纤维素酶最多或酶活性最高，D正确。 故选D。 8. 下图为幼鼠肾脏上皮细胞培养过程示意图，已知肾脏上皮细胞属于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞。下列叙述错误的是（ ） A. 甲→乙过程需要用机械的方法或特定的酶处理 B. 丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制的现象 C. 丙在CO2培养中培养以维持培养液pH相对稳定 D. 丙→丁过程为传代培养，此过程体现了动物细胞全能性 【答案】D 【解析】 【分析】原代培养 ：将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）或机械方法处理，分散成单细胞，置于合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。 传代培养：细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代，即将分瓶之后的培养称为传代培养。 【详解】A、甲→乙过程表示将组织块分散成单个细胞，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，A正确； B、丙过程表示原代培养，对于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞而言，在培养过程中会出现细胞贴壁和接触抑制现象，B正确； C、丙过程表示原代培养，在CO2培养箱中培养，CO2可以维持培养液pH相对稳定，C正确； D、丙→丁过程是传代培养过程，利用了细胞增殖的原理，D错误。 故选D。 9. 尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 分解尿素的细菌能合成脲酶，脲酶能将尿素分解成NH₃ B. 稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目 C. 取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌 D. 图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力 【答案】D 【解析】 【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。 【详解】A、分解尿素的细菌能合成脲酶，在脲酶的催化下能将尿素分解成NH3和二氧化碳，A正确； B、稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目，一般情况下该方法统计的活菌数目比实际值偏低，B正确； C、为防止其他杂菌污染以及防止对土壤中分解尿素的细菌分离与计数造成实验结果的影响，因此取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌，C正确； D、图中纯化培养得到的微生物未必都具有分解尿素的能力，因此还需要对得到的微生物进行鉴定，D错误。 故选D。 10. 在某地的农业生产中，研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 只有长期使用该除草剂的土壤中才含有能降解该除草剂的细菌 B. 筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源 C. 图中操作I的接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数 D. 经过一段时间的培养，培养皿中应该只存在有透明圈的菌落 【答案】ACD 【解析】 【分析】微生物常用的接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法。 【详解】A、土壤中含有能降解该除草剂的细菌，是基因突变的结果，不是长期使用除草剂的结果，A错误； B、筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源，B正确； C、平板划线法不能用于细菌计数，稀释涂布平板法可以，C错误； D、经过一段时间的培养，培养皿中也会存在无透明圈的菌落，D错误。 故选ACD。 11. 野生型大肠杆菌菌株能在未添加某种维生素的基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在添加了多种维生素的完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是（　　） A. 图中①②④为基本培养基，③为完全培养基 B. 紫外线的目的是提高突变率，增加突变株的数量 C. B的正确操作是用涂布器把菌液均匀地涂布在②表面 D. 经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养 【答案】A 【解析】 【分析】分析题图可知：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基、完全培养基；在基本培养基中，某氨基酸营养缺陷型突变株不能生长，而在完全培养基中能够生长，据此可以选择出氨基酸营养缺陷型突变株。 【详解】A、野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题干信息和图形分析，图中①②④为完全培养基，③为基本培养基，A错误； B、紫外线照射的目的诱导野生大肠杆菌发生基因突变，通过紫外线照射处理可提高突变频率，从而增加突变株的数量，B正确； C、B操作是将菌液滴加到培养基表面，再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C正确； D、从图中可看出，D在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。 故选A。 12. 如图为诺贝尔奖获得者山中伸弥团队制备iPS细胞（诱导多能干细胞）的过程示意图：①小鼠胚胎成纤维细胞培养→②用分别含有Oct4、Sox2、c—Myc、Klf4基因的四种慢病毒载体感染小鼠胚胎成纤维细胞→③置于含有饲养层细胞的胚胎干细胞培养基中培养→④鼠胚胎成纤维细胞脱分化，形成iPS细胞。下列相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①应在含10%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的渗透压 B. 步骤②由于慢病毒载体会受到免疫细胞的攻击，可能导致感染效率的降低 C. 步骤③培养基中的饲养层细胞可为成纤维细胞提供所必需的生长因子 D. 步骤④形成iPS细胞的实质是基因的选择性表达，使其功能趋向于专门化 【答案】C 【解析】 【分析】诱导的多能性干细胞可以通过基因转染等细胞重编程技术人工诱导获得的，具有类似于胚胎干细胞多能性分化潜力的干细胞。干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能APSC多能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。 【详解】A、步骤①小鼠胚胎成纤维细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是维持培养液的pH，而不是渗透压，维持渗透压的是无机盐等，A错误； B、步骤②中用慢病毒载体感染小鼠胚胎成纤维细胞，由于小鼠胚胎成纤维细胞是体细胞，不存在免疫细胞对慢病毒载体的攻击，且慢病毒载体能将目的基因导入细胞，B错误； C、步骤③中培养基于含有饲养层细胞，饲养层细胞可以为成纤维细胞提供所必需的生长因子，支持成纤维细胞的生长和增殖等，C正确； D、步骤④形成iPS细胞（诱导多能干细胞）的实质是使高度分化的成纤维细胞恢复到类似胚胎干细胞的多能状态，是去分化过程，而不是基因的选择性表达使其功能趋向于专门化（专门化是细胞分化的特点），D错误。 故选C。 13. 萝卜和甘蓝均属于十字花科不同种属的二倍体植物，二者体细胞中的染色体数均为18条现通过两种途径实现萝卜和甘蓝的杂交：①萝卜和甘蓝通过人工授粉杂交获得的幼胚经组织培养形成幼苗甲，再用秋水仙素处理甲形成植株乙；②萝卜体细胞和甘蓝体细胞杂交得到细胞丙，丙经一系列操作得到植株丁。下列叙述错误的是（ ） A. 形成幼苗甲的过程中，需使用纤维素酶、生长素等 B. 染色体加倍后，植株乙的细胞中可能含36或72条染色体 C. 通过①②途径培育出植株乙、丁的过程，均打破了生殖隔离 D. 乙、丁均可育，若品质更好、产量更高，可应用于大田生产种植 【答案】A 【解析】 【分析】1、植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。 2、植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。 【详解】A、甲是萝卜和甘蓝通过人工授粉杂交获得幼胚经组织培养形成的，进行组织培养时需要向培养基中加入生长素以促进甲生长，但获得甲的过程不需要纤维素酶，A错误； B、萝卜和甘蓝产生的配子中均含9条染色体，所以幼苗甲中应含有18条染色体。秋水仙素能抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍，经秋水仙素处理后染色体数目会加倍，植物乙中一些未分裂的体细胞中含有36条染色体，在有丝分裂后期，由于着丝粒分离，这些细胞中染色体的数目加倍，会含有72条染色体，B正确； C、萝卜和甘蓝是不同物种，由于存在生殖隔离，不能通过传统的杂交育种方式进行育种，通过①②途径培育出植株乙、丁均可育，均打破了生殖隔离，C正确； D、乙、丁均含有同源染色体，所以都可育，若品质更好、产量更高，可应用于大田生产种植，D正确。 故选A。 14. 如图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。酚红在碱性环境中呈红色。下列有关叙述错误的是（ ） A. ①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源 B. 图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌 C. ④过程采用稀释涂布平板法进行接种，接种工具是涂布器 D. 可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈 【答案】C 【解析】 【分析】据图分析，土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。 【详解】A、尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解，从而能利用尿素，其它微生物不能，因此要分离纯化尿素分解菌，培养基都应以尿素为唯一氮源，A正确； B、对培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法，B正确； C、据图可知，④过程采用的是平板划线法进行接种，接种工具是接种环，C错误； D、分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂会变红，因此可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈来鉴定，D正确。 故选C。 15. 工业污水中含有的多环芳烃类化合物（仅含C、H元素）会造成农田土壤污染。研究人员按照如图所示的流程从受污染的农田土壤中分离得到能高效降解多环芳烃类化合物的细菌菌株。下列叙述错误的是（ ） A. 甲、乙培养基中应以多环芳烃类化合物为唯一碳源 B. 步骤①接种操作需要在酒精灯火焰附近进行 C. 步骤②中应用涂布器从甲中蘸取菌液均匀涂布于培养基乙表面 D. 步骤③中应从降解圈直径与菌落直径比值最大的菌落进行挑选 【答案】C 【解析】 【分析】图示表示科研人员从被多环芳烃类化合物污染的土壤中分离出高效降解多环芳烃类化合物的菌株的主要步骤。培养基甲和乙中加入多环芳烃类化合物作为唯一碳源，其目的是筛选出高效降解多环芳烃类化合物的菌株。 【详解】A、该研究的目的是从被多环芳烃类化合物污染的土壤中分离出高效降解多环芳烃类化合物的菌株，所以甲、乙培养基中应以多环芳烃类化合物为唯一碳源，A正确； B、为了能筛选出高效降解多环芳烃类化合物的菌株、防止杂菌污染，在进行步骤①培养的接种操作时，需要在酒精灯火焰附近进行，B正确； C、步骤②是采用稀释涂布平板法接种并分离高效降解多环芳烃类化合物的菌株（目的菌），应先用微量移液器从甲中取0.1mL菌液滴加到培养基乙的表面，再用涂布器将菌液均匀涂布于培养基乙的表面，C错误； D、透明圈直径与菌落直径比值越大，说明目的菌降解多环芳烃类化合物的效果越好，因此步骤③应从降解圈直径与菌落直径比值最大的菌落进行挑选菌株并培养，D正确。 故选C。 二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。） 16. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。叙述正确的是（ ） A. 过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B. 过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C. 过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D. 可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 【答案】ACD 【解析】 【分析】分析题图：图示为甲、乙两种植物细胞融合并培育新植株的过程，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②③表示人工诱导原生质体融合以及再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织；⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。 【详解】A、酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正确； B、过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导原生质体融合，灭活的仙台病毒可诱导动物细胞融合，不能用于植物，B错误； C、过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，C正确； D、植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。 故选ACD。 17. 在一系列微生物的作用下，黑茶（中国边疆游牧民族的主要饮品）会产生一种对人体非常有益的金黄色颗粒“金花”。研究人员对“金花”中的微生物进行了分离和鉴定，过程如图。下列说法正确的是（ ） A. 向“金花”样品中加入蒸馏水制成样品悬液 B. 稀释涂布平板法用于微生物的分离计数，统计结果可能比实际值偏小 C. 涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化 D. 可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定 【答案】BCD 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、向“金花”样品中加入无菌水制成样品悬液，而不是蒸馏水，A错误； B、稀释涂布平板法用于微生物的分离计数，统计结果可能比实际值偏小，这是因为当两个或多个菌落长在一起时，只能计为一个菌落，B正确； C、涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化，平板划线时，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，达到纯化的目的，C正确； D、菌种鉴定有多种方法，基因组测序进行菌种鉴定的结果比传统生化鉴定更为直接，鉴定结果也更为可靠，D正确。 故选BCD。 18. 小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角，且黏附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列叙述正确的是（ ） A. 培养液需要定期更换的主要目的是防止培养过程中细胞被杂菌污染 B. 细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C. 该淋巴细胞可能会因为细胞密度过大等因素而分裂受阻 D. 对该上皮细胞传代培养时，可直接用离心法收集 【答案】C 【解析】 【分析】 动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质等。 【详解】A、培养液需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，A错误； B、细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液pH，B错误； C、当细胞密度过大，有害代谢物积累，培养液中物质缺乏会导致其分裂受阻，C正确； D、对该上皮细胞传代培养时，需要先用胰蛋白酶等处理，再用离心法收集，D错误。 故选C。 19. 工业上生产青霉素的流程如图所示。有关叙述正确的有（ ） A. 制备该培养基除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至碱性 B. 过程①、②都属于扩大培养，发酵过程的中心环节是发酵罐中发酵 C. 过程③需要严格的灭菌，否则可能会导致青霉素产量下降 D. 过程④可采用过滤、沉淀方法将菌体分离干燥 【答案】BCD 【解析】 【分析】培养基的概念及营养构成： （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质； （2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 【详解】A、制备培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至酸性，A错误； B、接种之前的过程①、②都属于扩大培养，以提高微生物产品的产量，其中在发酵罐中发酵是整个发酵过程的中心环节，B正确； C、过程③需要严格的灭菌，因为杂菌污染后，某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解掉，可能会导致青霉素产量下降，C正确； D、待完全发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离干燥，D正确。 故选BCD。 20. 肉苁蓉是一种草本植物，具有较高的药用价值，自然条件下产量较低，其次生代谢物苯乙醇苷是主要的活性成分。某实验小组欲利用植物细胞培养技术生产苯乙醇苷，简要流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 苯乙醇苷是肉苁蓉生长和生存所必需的 B. 利用植物细胞培养技术可以实现细胞产物的工厂化生产 C. 经射线处理①获得的都是高产苯乙醇苷的细胞 D. 也可将悬浮培养的细胞置于低渗溶液中涨破以提取苯乙醇苷 【答案】ACD 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体，植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、苯乙醇苷是肉苁蓉的次生代谢物，次生代谢物不是生物生长和生存所必需的，A错误； B、根据题图“利用植物细胞培养技术生产苯乙醇苷”，利用植物细胞培养技术可以实现细胞产物的工厂化生产，B正确； C、①为愈伤组织，经射线处理后可能发生突变，经筛选后可获得高产苯乙醇苷的细胞，C错误； D、植物细胞具有细胞壁，无法用低渗溶液进行涨破以提取苯乙醇，D错误。 故选ACD。 三、非选择题：本部分包括5题，共计55分。 21. 多环芳烃（PAHs）是一种不溶于水的有机物，在培养基中以微小的颗粒状存在，PAHs在土壤中的降解速率很慢，并具有致癌和致畸作用。科研人员欲从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，进行如图所示的实验（培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈）。回答下列问题： （1）从培养功能角度分析，培养基甲属于_____；培养基通常需要提前在121℃下进行_____。 （2）将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是_____，该方法不仅适用于筛选某种菌株，还可用于_____。 （3）筛选PAHs降解菌实验时，过程③所需要的实验工具有_____（答出两种）。过程④挑选的单菌落应该是透明圈直径与菌落直径比值_____（填“最小”或“最大”）的。 （4）在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1 mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，则每升原菌液样品中细菌数为_____个。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，所统计的细菌数通常会比上述方法统计数目偏_____（填“大”或“小”），原因是_____。 【答案】（1） ①. 选择培养基 ②. 高压蒸汽灭菌 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 微生物的计数 （3） ①. 微量移液器、涂布器 ②. 最大 （4） ①. 5.2×108 ②. 大 ③. 统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和 【解析】 【分析】图示表示科研人员从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株的主要步骤，培养基中加入多环芳烃（PAHs）作为唯一碳源，目的是筛选出高效降解PAHs的菌株。 【小问1详解】 该实验的目的是从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，所以从培养功能角度分析，培养基甲属于选择培养基；培养基通常需要提前在121℃下进行高压蒸汽灭菌。 【小问2详解】 从培养基乙呈现的效果图可知：将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是稀释涂布平板法，该方法还可用于微生物的计数。 【小问3详解】 筛选PAHs降解菌实验时，过程③采用稀释涂布平板法对目的菌进行接种，需要用微量移液器取0.1mL菌液，滴加到培养基表面，然后用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈，透明圈直径与菌落直径比值越大，降解PAHs的效果越好，因此过程④挑选的单菌落应该是透明圈直径与菌落直径比值最大的。 【小问4详解】 在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1 mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，则每升原菌液样品中细菌数为（48＋50＋54＋56＋52）÷5×103÷0.1 ×103＝5.2×108个。由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以稀释涂布平板法统计的细菌数通常会比实际数目偏小。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，由于统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，所以统计的细菌数通常会比上述方法统计数目偏大。 22. 某污水处理厂欲处理一批含As3+和硝酸盐浓度较高的污水，研究人员通过对肠道微生物的分离与筛选，得到了耐砷的反硝化细菌，它在厌氧条件下能够将硝酸盐还原为N2O和N2。分离耐砷的反硝化细菌具体步骤如下：采集健康人体的新鲜粪便样本，取采集的人体新鲜粪便样品0.3g，接种至该培养基上，对分离纯化后的菌株进行鉴定。 （1）配制培养基以筛选_______：该培养基中含有适宜浓度的________，从而有利于该菌的生长，抑制其他微生物的生长。此种培养基属于________培养基。 （2）耐砷反硝化细菌的分离与纯化：取200～300μL上述培养液，均匀地涂布在已经添加了5mmol/L As3+和10mmol/LNO3-的细菌固体培养基上。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________；涂布完成后，将平板置于温度为____________的恒温培养箱中培养24h。挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化，用该种方法进行接种时，接种工具是________，该接种工具的灭菌方法是________。操作时，在第二次及其以后的划线时，总是从上一次划线的______________开始划线，目的是__________。 【答案】（1） ①. 耐砷的反硝化细菌 ②. As3＋和NO3—（或硝酸盐） ③. 选择 （2） ①. 检测培养基平板灭菌是否合格 ②. 37℃ ③. 接种环 ④. 灼烧灭菌 ⑤. 末端 ⑥. 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 【解析】 【分析】选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 【小问1详解】 配制选择培养基的目的是筛选目的菌株，本题中是筛选耐砷的反硝化细菌；该选择培养基中应含有适宜浓度的As3＋和NO3-（或硝酸盐），从而有利于耐砷的反硝化细菌的生长，抑制其他微生物的生长。在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基，故此种培养基属于选择培养基。 小问2详解】 在耐砷反硝化细菌的分离与纯化过程中，为检测培养基平板灭菌是否合格，需要在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间；由于是从人体新鲜粪便中取样，故涂布完成后，将平板置于温度为37℃的恒温培养箱中培养24h；挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用接种环进行平板划线法进行分离纯化，接种环在使用时需要进行灼烧灭菌；操作时，在第二次及其以后的划线时，为将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落，总是从上一次划线的末端开始划线。 23. 某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵） （1）在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是_____。 （2）采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分_____（答出1点即可）。 （3）将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是_____。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是_____。发酵液中的乙醇可用_____溶液检测。 （4）本实验收集的淋洗液中的_____可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是_____。 【答案】（1）菌T能够分泌纤维素酶 （2）为合成微生物细胞结构提供原料 （3） ①. 制造无氧环境 ②. 排出二氧化碳 ③. 酸性的重铬酸钾 （4） ①. 葡萄糖 ②. 节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广 【解析】 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 【小问1详解】 菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解。 【小问2详解】 培养基中的成分有碳源、氮源，氮源可为合成微生物细胞结构提供原料。 【小问3详解】 酵母菌无氧呼吸产生乙醇，将酵母菌接种到灭菌后的培养基中进行乙醇发酵，乙醇发酵需要在无氧的条件下进行，此时拧紧瓶盖的主要目的是制造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生乙醇和二氧化碳，在发酵过程中密闭，所以需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳，乙醇可用酸性重铬酸钾溶液来检测，该物质与乙醇反应呈现灰绿色。 【小问4详解】 纤维素分解产生的葡萄糖可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比、废物利用、不污染环境、原料来源广等优点。 24. 科学家利用植物体细胞杂交技术，将番茄叶片细胞制成的原生质体和马铃薯块茎细胞制成的原生质体融合，成功地培育出了“番茄一马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①～⑤表示过程，a～f表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如图2所示的三组实验。据图回答下列问题： （1）图1的过程②中，所用的化学方法常用的有_________、_________融合法；过程③成功的标志是_________；过程④形成愈伤组织需要经过______过程，愈伤组织形成D需要经过____过程。培养基中_________、_______的浓度会影响植物细胞的发育方向。 （2）图1培育杂种植株的过程主要应用的原理是_________、________；图2培育植物体B的育种方法Ⅱ称为______________。 （3）番茄是二倍体，体细胞中共24条染色体，马铃薯是四倍体，体细胞中共48条染色体。则图1的杂种植株的叶肉细胞中含有______个染色体组。图2中幼苗A、幼苗B、植物体A、植物体B、植物体C的叶肉细胞中，染色体数目不是24的是_______。图1技术在育种方面的意义在于____________________。 【答案】（1） ①. 聚乙二醇（PEG） ②. 高Ca2+—高pH ③. 再生出细胞壁 ④. 脱分化 ⑤. 再分化 ⑥. 生长素 ⑦. 细胞分裂素 （2） ①. 植物细胞的全能性 ②. 细胞膜具有一定的流动性 ③. 单倍体育种 （3） ①. 6 ②. 幼苗B ③. 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 【解析】 【分析】题图分析，图1利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物植株，具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程。过程①是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体a和b，过程②通过物理或化学方法（如聚乙二醇试剂）诱导原生质体融合成c，过程③是再生细胞壁形成杂种细胞d，过程④是脱分化过程形成愈伤组织e，过程⑤是再分化生成完整植株。过程④和⑤是植物组织培养技术培育完整植株。分析图2：Ⅰ是植物组织培养；Ⅱ是单倍体育种；Ⅲ是花粉细胞融合。 【小问1详解】 植物体细胞杂交中诱导原生质体融合，常用的化学方法是聚乙二醇（PEG）融合法和高Ca²⁺—高pH融合法。原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁，意味着新的杂种细胞结构完整。过程④形成愈伤组织需要经过脱分化过程，即将已分化的细胞失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程；愈伤组织形成D（胚状体等结构）需要经过再分化过程，即愈伤组织在一定条件下分化形成各种组织和器官。培养基中生长素和细胞分裂素的浓度会影响植物细胞的发育方向，不同浓度比例可诱导细胞脱分化、再分化以及根或芽的分化等。 【小问2详解】 图1培育杂种植株的过程应用的原理一是植物细胞的全能性，即已分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；二是细胞膜具有一定的流动性，这是原生质体能够融合的基础。 图2中培育植物体B的育种方法Ⅱ是花药离体培养，属于单倍体育种的一部分，通过花药离体培养得到单倍体植株，再经过秋水仙素等处理使染色体加倍得到纯合植株。 【小问3详解】 番茄是二倍体，体细胞中共24条染色体，马铃薯是四倍体，体细胞中共48条染色体。图1是植物体细胞杂交，所以杂种植株中含有番茄和马铃薯的所有染色体，共有6个染色体组。图2的幼苗A和植物体A，都是有丝分裂来的，染色体数目与番茄韧皮部细胞一致，都是24条；幼苗B是花粉有丝分裂发育而来，染色体数目只有番茄体细胞的一半（12条），随后用秋水仙素处理，染色体数目加倍，所以植物体B染色体数是24条；植物体C是两个花粉融合后培养而来，所以体细胞中含有24条染色体。图1技术（植物体细胞杂交技术）在育种方面的意义在于打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，能够将不同物种的优良性状集中到一起。 25. 下图为动物细胞培养的基本过程示意图。请回答下列问题。 （1）容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是_________________，易于培养。培养时先要剪碎，然后用____________分散成单个细胞，制成B瓶中的细胞悬液。将细胞悬液转入C瓶中进行的初次培养称为____________。 （2）目前普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，原因是____________。（答出2点） （3）动物细胞培养过程中还需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的作用主要是___________________。 【答案】（1） ①. 分裂能力强，分化程度低 ②. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） ③. 原代培养 （2）诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，理论上可以避免免疫排斥 （3）维持培养液的pH 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【小问1详解】 动物细胞培养是利用细胞增殖能力以获取大量动物细胞的技术。幼龄动物的器官或组织中的细胞分裂能力强，分化程度低，易于培养。培养时先要剪碎，用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理可去除细胞粘连蛋白，使细胞分散开来，制成B瓶中的细胞悬液。从机体中取出的细胞经分散处理后首次进行的培养称为原代培养。 【小问2详解】 目前普遍认为iPS细胞（诱导多能干细胞）的应用前景优于胚胎干细胞。这是因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，理论上可以避免免疫排斥。 【小问3详解】 在动物细胞培养过程中，除了提供适宜的营养物质和生长因子外，还需要提供O2和CO2等气体环境。其中，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$