课时梯级训练(2) 微生物的基本培养技术（Word练习）-【优化指导】2024-2025学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019 不定项）

课时梯级训练(2)　微生物的基本培养技术 一、选择题 1．下列关于培养基配制的叙述，错误的是(　　) A．合适的培养基可实现分离、鉴定微生物等不同目的 B．固体培养基中加入的琼脂能提供额外的碳源和氮源 C．对有特殊生长条件需求的微生物要对培养基做对应调整 D．无论是固体培养基还是液体培养基，配制时都要加水 B　解析：固体培养基中加入的琼脂不能被微生物分解利用，故琼脂不能提供额外的碳源和氮源，B错误。 2．下列有关微生物培养的叙述，正确的是(　　) A．琼脂固体培养基不含水分 B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风芽孢杆菌的生长 D．有的物质既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能提供能量 D　解析：固体培养基中也含有水分，只是因为含有凝固剂，所以呈固态，A错误；青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，所以加入青霉素的培养基可抑制细菌生长而不抑制真菌生长，B错误；破伤风芽孢杆菌的代谢类型属于异养厌氧型，向其培养基中通入氧气会抑制其生长，C错误；有的物质既可作碳源也可作氮源，如蛋白胨，碳源并不都能提供能量，如CO2等，D正确。 3．许多生物学实验十分重视无菌操作，以防止杂菌污染。下列操作正确的是(　　) A．对无菌室、超净工作台和实验员可采用紫外线消毒 B．家庭制作酸奶时，要将容器和鲜牛奶进行灭菌 C．加入培养基中的染料不需要灭菌 D．灼烧灭菌法可杀死微生物的营养体和芽孢 D　解析：对无菌室、超净工作台可采用紫外线消毒，对实验员可采用酒精消毒，A错误；家庭制作酸奶时，要将容器和鲜牛奶进行消毒，B错误；加入培养基中的染料也需要灭菌，否则可能会污染培养基，C错误；灼烧灭菌法可杀死物体内外所有的微生物(包括微生物的营养体、芽孢和孢子)，D正确。 4．下列有关平板划线操作的描述，错误的是(　　) A．将接种环放在酒精灯火焰上灼烧，直到接种环烧红 B．接种环在平板上划线的位置是随机的 C．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰 D．最后一区的划线不能与第一区的划线相连 B　解析：将微生物的接种工具，如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，A正确；接种环在平板上划线时，采用分区划线，每个区要划3～5条平行线，而不是随机划的，且最后一区的划线不能与第一区相连，B错误、D正确；在挑取菌种前和接种完毕后，试管口均要通过酒精灯火焰灼烧灭菌，以防止杂菌污染，C正确。 5．下图是倒平板的操作，下列相关叙述错误的是(　　) A．正确的操作顺序是丙→乙→甲→丁 B．甲应在酒精灯火焰附近进行 C．此培养基不可能为液体培养基 D．完成甲后应快速进行丁操作 D　解析：应等待培养基冷却凝固后，再进行丁的操作，D错误。 二、非选择题 6．(2024·唐山高二检测)牛奶是微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。为检测自制酸奶是否被杂菌污染，可先将酸奶进行一定程度的稀释，请回答下列问题： (1)牛奶用巴氏消毒的好处是_______________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)取最终的牛奶稀释液在培养基上划线，应选择的工具是下图中的________(填选项)。 (3)理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落，如果培养基上出现________________________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。 (4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，纯化乳酸菌时，下列划线操作正确的是________。 答案：(1)在杀死绝大多数微生物的同时，基本不会破坏牛奶的营养成分 (2)A (3)(形状、大小、颜色、光泽度)不同 (4)B 解析：(1)巴氏消毒法是指在63～65 ℃消毒30 min或72～76 ℃处理15 s或80～85 ℃处理10～15 s，使用这种方法对牛奶进行消毒的好处是可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且基本不会破坏牛奶的营养成分。(2)划线时所用的接种工具是接种环，即图中的A。(3)如果培养基上出现(形状、大小、颜色、光泽度)不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。(4)A图很难得到由单个菌株增殖而来的菌落；B图划线从上次划线末端开始，容易得到由单个菌株增殖而来的菌落；C图第二次及以后的划线没有从上次划线的末端开始，接种环上没有菌种，不能得到由单个菌株增殖而来的菌落；D图划线不是从上次划线末端开始，不容易得到由单个菌株增殖而来的菌落。 一、选择题 1．马铃薯琼脂培养基常用于真菌的筛选，其配制过程如下：将马铃薯去皮切块，加水煮沸至其软烂，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量琼脂，用水定容后灭菌。下列叙述错误的是(　　) A．应在培养基中加入链霉素，以抑制细菌的生长 B．除碳源外，马铃薯浸出液还提供氮源和无机盐 C．氮源进入细胞后，可参与合成核苷酸等物质 D．加入碘液后，周围为蓝色的菌落一般能产生淀粉酶 D　解析：链霉素能抑制细菌的生长，在培养基中加入链霉素后可以筛选真菌，A正确；各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，培养基中的马铃薯浸出液除了为微生物生长提供碳源外，还可提供的营养物质有氮源和无机盐等，B正确；核苷酸含有氮元素，因此氮源进入细胞后，可参与合成核苷酸等物质，C正确；淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，会形成透明圈，D错误。 2．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关的叙述，不正确的是(　　) A．实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉 B．培养基灭菌的方法通常是湿热灭菌法 C．观察细菌培养的实验时，最好是在另一块平板上接种无菌水作为对照实验 D．培养基中含有的蛋白胨可为细菌培养提供碳源和氮源 A　解析：实验用过的带菌培养基必须经过灭菌后才能倒掉，以免污染环境和感染操作者，A错误；培养基灭菌的方法是湿热灭菌法，B正确；观察细菌培养的实验时，最好是在另一块平板上接种无菌水作为对照实验，以检测培养基配制是否合格，C正确；培养基中含有的蛋白胨可为细菌培养提供碳源和氮源，D正确。 3．(2024·福州高二检测)我国科学家从北极分离、鉴定出了一种耐寒细菌，过程如下：①接种在人造海水中，15 ℃条件下振荡培养3 h；②梯度稀释后将样品涂布在TYS培养基中，15 ℃条件下培养7 d；③挑取生长菌落，进行划线，15 ℃条件下培养后，选择不同形态的菌落进行培养、鉴定和保存。下列叙述错误的是(　　) A．平板上第二次及以后划线都要从上一次划线的末端开始 B．TYS培养基可以放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌处理 C．过程①中的振荡培养有利于细菌和营养物质充分接触 D．过程②中的TYS培养基灭菌后需将pH调至中性或弱碱性 D　解析：平板上第二次及以后划线都要从上一次划线的末端开始，同时划线前还需要灼烧接种环，这样可以保证划线的菌种来自上次划线的末端，A正确；为了避免杂菌污染，TYS培养基需要放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌处理，B正确；过程①中振荡培养的目的是使细菌和营养物质充分接触，便于微生物充分利用培养基中的营养，有利于微生物的生长和繁殖，C正确；过程②为接种操作，而TYS培养基的pH调节应在灭菌之前进行，D错误。 4．在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基，接种大肠杆菌并培养36小时后，统计大肠杆菌的菌落数(如下表所示)。下列表述不正确的是(　　) 培养皿 培养基成分 菌落数/个 Ⅰ 琼脂、糖类、含氮物质 35 Ⅱ 琼脂、糖类、含氮物质和维生素 250 Ⅲ 琼脂、含氮物质和维生素 0 A.对比培养皿 Ⅱ 和 Ⅲ ，说明维生素是培养基中必需的营养成分 B．对比培养皿 Ⅰ 和 Ⅱ ，说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子 C．对比培养皿 Ⅱ 和 Ⅲ ，说明糖类是大肠杆菌需要的碳源 D．含氮物质可以为微生物合成核酸、蛋白质提供原料 A　解析：对比培养皿 Ⅱ 和 Ⅲ , Ⅱ 含有糖类， Ⅲ 不含有糖类， Ⅲ 中菌落数目为0，说明大肠杆菌的生长需要糖类，A错误、C正确；对比培养皿 Ⅰ 和 Ⅱ , Ⅰ 中菌落数目小于 Ⅱ ，说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子，B正确；氮是蛋白质和核酸的组成元素，所以含氮物质可以为微生物合成核酸、蛋白质提供原料，D正确。 5．(不定项)艺术不只存在于纸笔之间，我们可以用培养皿当纸，接种环当笔，各种形态、颜色的细菌和真菌当颜料，画出别具风格的作品。如在下列作品培养过程中，白色霉菌带有毛茸茸的感觉，可描绘大熊猫的皮毛，红色大肠杆菌可以描绘鹅嘴，水波则由假单胞杆菌描绘。下列说法错误的是(　　) A．制备培养基时要经过计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板等步骤 B．图甲作品的白色霉菌和图乙作品的假单胞杆菌都是原核生物 C．使用接种环接种时，取菌液前和接种后都需将接种环进行灼烧灭菌 D．培养成型的作品应在适宜菌株生长的环境中保存 BD　解析：制备培养基的步骤是计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板等，A正确；白色霉菌有由核膜包被的细胞核，是真核生物，假单胞杆菌无由核膜包被的细胞核，是原核生物，B错误；使用接种环接种时，取菌液前和接种后都需将接种环进行灼烧灭菌，C正确；低温会抑制微生物的生长，培养成型的作品应低温保存，以免菌株疯长影响整体效果，D错误。 二、非选择题 6．(2024·淮安高二阶段练习)经人工诱变后，部分细菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了营养缺陷型菌株，这在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程，请回答下列问题： (1)制备如图所示的培养基除含有细菌必需的水、碳源、______________等营养物质外，还需要加入____________。 (2)倒平板的适宜温度是50 ℃左右，待平板冷凝后，要将平板倒置，这样做的目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至____________(填“基本”或“完全”)培养基上，原因是___________________________________________________________。 (4)利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取____________(填“菌落A”或“菌落B”)进行接种培养，并进一步鉴定。 (5)科研人员用放射线处理目的菌获得两个突变株C和D，然后对突变株C和D进行实验，结果如表所示。 接种的菌种 一般培养基 实验处理及结果 C 不生长 添加营养物质甲，能生长 D 不生长 添加营养物质乙，能生长 C＋D 能生长 不添加营养物质甲、乙，都能生长 ①突变株C不能在一般培养基上生长的原因最可能是________________________________________________________________________。 ②将突变株C和D混合在一起，接种于一般培养基上，都能生长的原因最可能是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案：(1)氮源、无机盐　凝固剂(或琼脂) (2)防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，又可避免培养基中的水分过快蒸发 (3)基本　防止基本培养基中混入特定氨基酸 (4)菌落A (5)①突变株C缺乏合成营养物质甲所需要的酶　②突变株C可以提供突变株D生长需要的营养物质乙，突变株D可以提供突变株C生长需要的营养物质甲 解析：(1)图示培养基上最后都长出了菌落，说明该培养基为固体培养基，因此制备该培养基时除加入细菌必需的水、碳源、氮源、无机盐等营养物质外，还需要加入凝固剂(或琼脂)。(2)倒平板的适宜温度是50 ℃左右，待平板冷却凝固后，要将平板倒置，平板倒置的好处是一方面可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，另一方面也可避免培养基中的水分过快蒸发。(3)进行过程②培养时，为防止特定氨基酸混入基本培养基中，应先将丝绒布转印至基本培养基上，再转接至完全培养基上。(4)利用影印法培养可以使不同培养基中同种菌株的接种位置相同，为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取完全培养基中的菌落A进行接种培养，并进一步鉴定。(5) ①由表格分析可知，突变株C的生长依赖于营养物质甲，突变株C不能在一般培养基上生长的原因最可能是突变株C缺乏合成营养物质甲所需要的酶；②突变株C的生长依赖于营养物质甲，而突变株D的生长依赖于营养物质乙；不添加营养物质甲和乙时，突变株C与突变株D混合培养时都能生长的原因最可能是突变株C为突变株D提供了营养物质乙，突变株D为突变株C提供了营养物质甲。 学科网（北京）股份有限公司 $$