精品解析：广东省肇庆市鼎湖区鼎湖中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题

肇庆鼎湖中学2026届高二级3月月考 生物学科 考试时间：75分钟；满分：100分 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置上。 2.回答选择题时，选出每 题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 一、选择题（1-12小题每题2分，13-16小题每题4分，共40分） 1. 蓝莓果酒和蓝莓果醋中含有大量的花青素、维生素和矿物质，具有提高视力、抗氧化、抗衰老和美容养颜等功能，深受人们的喜爱。下列说法正确的是（ ） A. 家庭制作蓝莓果酒、果醋时，发酵前都需要对原料进行灭菌 B. 在蓝莓果酒发酵基础上进行果醋制作，需升高温度、增加通气性 C. 缺少糖原时，醋酸菌可将乙醇直接转化为乙酸 D. 酵母菌是好氧菌，利用其细胞呼吸产酒精来制作果酒 2. 人造皮肤构建、动物分泌蛋白的规模化生产等，都离不开动物细胞培养技术。下列说法正确的是（ ） A. 培养的细胞需定期用胰蛋白酶处理后才能继续增殖 B. 将动物细胞置于含有95%O2和5%的CO2培养箱中培养 C. 定期更换培养液可以为动物细胞提供无毒的环境 D. 原代培养和传代培养的细胞都可以直接用离心法收集 3. 聚乳酸（PLA）是以乳酸为主要原料的聚合物，与聚丙烯等材料相比，具有更好的生物可降解性，但在自然条件下降解还是较缓慢。某科研机构拟从黄粉虫肠道中筛选PLA降解菌，按照如图流程进行培养鉴定。下列叙述错误的是（　　） A. 实验过程中需要设置适宜的温度和pH环境，并保证严格的无菌操作 B. PLA既可为PLA降解菌提供碳源，又对培养基中微生物起选择作用 C. 如图采用的是平板划线法接种，同时要将接种和未接种的平板倒置培养 D. 纯化培养后，可根据菌落形状、大小、颜色及DNA检测等进行菌种鉴定 4. 关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是 （ ） A. 培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的 B. 对10mL土样稀释106倍后， 取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则取平均数为176 C. 统计菌落数目时，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果 D. 与稀释涂布平板法相比，平板划线法形成单菌落的效果更好 5. 以二倍体兰花花药为外植体，经植物组织培养过程获得兰花植株。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 为防止杂菌污染，①②③过程要进行严格的无菌操作 B. ②过程需在培养基中添加多种植物激素以利于再分化 C. 该育种过程体现了植物细胞全能性 D. 经④过程形成的植株中可筛选获得纯合的二倍体 6. 研究者采集了一只睡眠紊乱明显的猕猴的体细胞，通过克隆技术，获得了五只克隆猴用于研究生物节律与衰老疾病之间的关系。在此研究中，克隆猴相比有性生殖而来的猴，优势在于（ ） A. 生长发育时间大大缩短 B. 实验对象间的性状差异较小 C. 寿命更长 D. 抵抗病害的能力更强 7. 如图为猪输卵管上皮细胞培养过程示意图。下列有关叙述不正确的是（ ） A. 丙、丁过程均会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象 B. 甲→乙、丙→丁这两个过程需要用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 C. 为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气 D. 丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需在添加血清的合成培养基中进行 8. 干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞。某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列说法错误的是（ ） A 胚胎干细胞具有全能性，成体干细胞具有组织特异性 B. 营养供应充足时，原代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制 C. XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化 D. 若某濒危动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育 9. 卵胞浆内单精子显微注射技术是用显微操作技术将精子注射到卵母细胞胞浆内，使卵子受精，在体外培养形成早期胚胎，再放回母体子宫内发育着床。有关说法错误的是（ ） A. 穿刺可能会对卵母细胞造成损伤，应加强随访 B. 受精完成的标志是雌雄原核融合 C. 该技术主要解决了一些异常精子不能穿越透明带的问题 D. 用于移植的胚胎宜选用原肠胚期的胚胎 10. 大多数哺乳动物的晚期桑葚胚分割后，分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。该调节能力随发育进程逐渐减弱甚至消失。下列说法错误的是（ ） A. 胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴 B. 卵裂过程中所需营养主要来源于培养液 C. 桑葚胚及囊胚的内细胞团细胞具有发育的全能性 D. 囊胚期的细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变 11. 如图为科学家制备诱导多能干细胞(iPS细胞)的操作流程图。下列叙述错误的是（ ） A. 该项技术将来有可能用于再生医学、药物安全性与有效性检测等领域 B. 借助载体将特定基因导入细胞中可以制备 iPS细胞 C. 成纤维细胞可以转化为iPS细胞，已分化的B细胞、T细胞也可以转化为iPS细胞 D. 诱导多能干细胞应用前景不如胚胎干细胞 12. 某同学列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（ ） 比较内容 植物体细胞杂交 动物细胞融合 A 特殊处理 酶解法去除细胞壁 用胰蛋白酶处理分离出单个细胞 B 融合方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、生物方法 C 典型应用 种间杂种植物 培养克隆动物 D 培养基区别 固体培养基，含蔗糖和植物激素 液体培养基，含葡萄糖，一般含有动物血清 A. A B. B C. C D. D 13. 细胞工程在农业生产、医疗卫生等方面发挥了重要作用。下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ） A. 利用茎尖组织培养技术培育的脱毒草莓的产量和品质明显优于未脱毒草莓 B. 科学家利用植物体细胞杂交技术获得白菜—甘蓝杂种植株，打破了生殖隔离 C. 用分割针将桑葚胚分割成2等份，经移植获得同卵双胎的过程属于有性繁殖 D. 将病人自身体细胞诱导形成的iPS细胞移植回病人体内，理论上可避免免疫排斥 14. 下列每项操作获得的多头犊牛之间遗传性状相似的是（ ） ①取母牛甲的体细胞，经体细胞核移植技术获得的犊牛 ②取母牛甲的卵母细胞，经体外受精获得的“试管牛” ③母牛甲经超数排卵、发情配种或人工授精获得的犊牛 ④母牛甲自然受精形成的胚胎，经胚胎分割获得的犊牛 A. ①④ B. ②③ C. ①② D. ③④ 15. 营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营养物质（如氨基酸、维生素）的能力，必须在基本培养基中补充特殊营养物质才能正常生长的一类菌株，可自然产生或人工诱导获得。用一定方法诱变大肠杆菌并将其接种到甲培养皿上，一段时间后将菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿中，进一步培养一段时间可筛选出营养缺陷型菌株，结果如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 影印培养法使用的是液体培养基进行微生物培养 B. 甲丙两种培养基中均添加了特殊营养物质 C. 乙培养皿中能生长的为所需的营养缺陷型菌株 D. 甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变或染色体变异 16. 现代生物工程的操作常常涉及到下面的流程，下列说法正确的是（　　） A. 若图为核移植过程，则②从卵巢中获取的卵母细胞直接作为受体细胞和①供体细胞融合 B. 若图为单克隆抗体的制备过程，需要筛出产生所需抗体的杂交瘤细胞 C. 若图为试管动物的培育过程，需培育到原肠胚才能进行胚胎分割与胚胎移植 D. 若图为植物体细胞杂交过程，则形成③常用灭活的病毒直接处理两种植物细胞 二、非选题（每空2分，共60分） 17. 酱油是由酱演变而来。早在三千多年前，中国周朝就有制做酱的记载。而中国古代劳动人民发明酱油之酿造纯粹是偶然地发现。最早的酱油是由鲜肉腌制而成，与现今的鱼露制造过程相近。因为风味绝佳渐渐流传到民间，后来发现大豆制成风味相似且便宜，才广为流传食用。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。 回答下列问题： （1）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的________、________能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于_____(填“自养厌氧”、“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。 （2）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌作用是______；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是______。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是______（答出一种物质即可）。 18. 已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。 Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5g/L）。 Ⅱ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（15g/L）。 Ⅲ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（45g/L）。 回答下列问题。 （1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是_____。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_____。 （2）若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_____，其原因是_____。 （3）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_____（答出一点即可）。 19. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如下图。 （1）过程①通过酶解法去除______获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带______的杂种原生质体。 （2）科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如下图。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由上图可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在______种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为______。 （3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 ①将表格中C组的实验处理补充完整______。 ②若实验结果为______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 20. 人类乳头瘤病毒（HPV）有多种亚型，HPV45属于高危型，与宫颈癌的发生密切相关。L1蛋白是组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白，科研人员进行了抗HPV45L1蛋白单克隆抗体的制备及研究。其基本操作过程如图所示。回答下列问题： （1）上述实验步骤①是______。 （2）细胞甲、乙、丙、丁中可能产生抗L1蛋白抗体细胞有_______。 （3）对细胞丙进行______和______，经多次筛选，就可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 （4）下图为一种检测待测抗原中目标抗原相对含量的方法，据图分析回答下列问题： ①检测之前，将目标抗原的单克隆抗体固定在支持物上形成固相抗体，然后向该检测体系中加入一定量的待测抗原和等量酶标记抗原，目的是______。 ②保温一段时间后洗涤，向检测体系中加入一定量白色底物，若______，则说明待测抗原中目标抗原的含量越高。 21. 骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆驼曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题： （1）胚胎工程中一般注射_______处理A使其超数排卵。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有_______和______。 （2）过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植，欲获得更多的胚胎可以对囊胚进行_______操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将_______。 （3）胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 肇庆鼎湖中学2026届高二级3月月考 生物学科 考试时间：75分钟；满分：100分 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置上。 2.回答选择题时，选出每 题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 一、选择题（1-12小题每题2分，13-16小题每题4分，共40分） 1. 蓝莓果酒和蓝莓果醋中含有大量的花青素、维生素和矿物质，具有提高视力、抗氧化、抗衰老和美容养颜等功能，深受人们的喜爱。下列说法正确的是（ ） A. 家庭制作蓝莓果酒、果醋时，发酵前都需要对原料进行灭菌 B. 在蓝莓果酒发酵基础上进行果醋制作，需升高温度、增加通气性 C. 缺少糖原时，醋酸菌可将乙醇直接转化为乙酸 D. 酵母菌是好氧菌，利用其细胞呼吸产酒精来制作果酒 【答案】B 【解析】 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：醋酸菌是一种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动．当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、家庭制作蓝莓果酒、果醋时，利用的是原材料上附着的天然微生物，因此发酵前都不需要对原料进行灭菌，A错误； B、、果酒发酵的适宜温度是18～30℃，而果醋发酵的适宜温度为是30～35℃，因此若果酒发酵结束后进行果醋发酵，需升高发酵温度，果醋是需氧微生物，需要提供氧气，B正确； C、缺少糖原时，醋酸菌可将乙醇转化乙醛，再转化乙酸，C错误； D，酵母菌是兼性厌氧型微生物，利用其细胞呼吸产酒精来制作果酒，D错误。 故选B。 2. 人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等，都离不开动物细胞培养技术。下列说法正确的是（ ） A. 培养的细胞需定期用胰蛋白酶处理后才能继续增殖 B. 将动物细胞置于含有95%O2和5%的CO2培养箱中培养 C. 定期更换培养液可以为动物细胞提供无毒的环境 D. 原代培养和传代培养的细胞都可以直接用离心法收集 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养条件： （1）无菌、无毒的环境： ①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。 （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【详解】A、悬浮培养的细胞不需要定期用胰蛋白酶处理后也能继续增殖，A错误； B、动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2，将动物细胞置于含有95%空气和5%的CO2培养箱中培养，B错误； C、定期更换培养液可以清除动物细胞新陈代谢产生的废物，为动物细胞提供无毒的环境，C正确； D、进行传代培养时，贴壁的细胞要用胰蛋白酶等处理成单个细胞后制成细胞悬液，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后制成细胞悬液，D错误。 故选C。 3. 聚乳酸（PLA）是以乳酸为主要原料的聚合物，与聚丙烯等材料相比，具有更好的生物可降解性，但在自然条件下降解还是较缓慢。某科研机构拟从黄粉虫肠道中筛选PLA降解菌，按照如图流程进行培养鉴定。下列叙述错误的是（　　） A. 实验过程中需要设置适宜的温度和pH环境，并保证严格的无菌操作 B. PLA既可为PLA降解菌提供碳源，又对培养基中微生物起选择作用 C. 如图采用的是平板划线法接种，同时要将接种和未接种的平板倒置培养 D. 纯化培养后，可根据菌落形状、大小、颜色及DNA检测等进行菌种鉴定 【答案】C 【解析】 【分析】选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。从黄粉虫肠道中筛选PLA降解菌，那么培养基中要加入PLA，且是唯一碳源。 【详解】A、微生物培养需要有一定的营养、适宜的温度和pH等条件，故实验过程中需要设置适宜的温度和pH环境，并保证严格的无菌操作，A正确； B、聚乳酸（PLA）是以乳酸为主要原料的聚合物，故可为PLA降解菌提供碳源，不能利用PLA的微生物无法在该培养基上生存，故PLA又对培养基中微生物起选择作用，B正确； C、根据图示可知，需要对提取液进行梯度稀释，故接种采用的是稀释涂布平板法，同时将接种和未接种的平板倒置培养，C错误； D、菌落形状、大小、颜色及DNA检测等是进行菌种鉴定的重要依据，故纯化培养后，可根据菌落形状、大小、颜色及DNA检测等进行菌种鉴定，D正确。 故选C。 4. 关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是 （ ） A. 培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的 B. 对10mL土样稀释106倍后， 取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则取平均数为176 C. 统计菌落数目时，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果 D. 与稀释涂布平板法相比，平板划线法形成单菌落的效果更好 【答案】C 【解析】 【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的稀释倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数。 【详解】A、从土壤中分离分解尿素的细菌，培养基应以尿素为唯一氮源，尿素分解菌利用的是有机碳源，硝化细菌利用的是无机碳源（二氧化碳），A错误； B、对10mL土样稀释106倍后，取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，计数时应将18舍去，所以该10mL土样中分解尿素的细菌数为（234＋276）÷2÷0.1×106×10＝2.55×1010个，B错误； C、为了减少实验误差，统计菌落数目时，应选取菌落数目稳定时记录作为结果，C正确； D、与稀释涂布平板法相比，平板划线法不易分离出单个菌落，因此平板划线法形成单菌落的效果不是更好的，D错误。 故选C。 5. 以二倍体兰花花药为外植体，经植物组织培养过程获得兰花植株。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 为防止杂菌污染，①②③过程要进行严格的无菌操作 B. ②过程需在培养基中添加多种植物激素以利于再分化 C. 该育种过程体现了植物细胞的全能性 D. 经④过程形成的植株中可筛选获得纯合的二倍体 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：图示表示将二倍体兰花的花药通过植物组织培养形成植株的过程，其中①表示取出花药过程，②阶段表示脱分化，该阶段能形成愈伤组织，其细胞分化程度低，全能性高；③阶段表示再分化过程，该阶段能形成胚状体发育成幼苗，④表示移栽进一步发育形成植株。 【详解】A、植物组织培养的过程要求无菌、无毒的环境，其中外植体要进行消毒处理，而培养基需灭菌处理，①②③过程要进行严格的无菌操作，A正确； B、②过程需在培养基中添加多种植物激素以利于脱分化，B错误； C、高度分化的细胞首先经过脱分化后形成愈伤组织，然后再分化形成植株，整个育种过程体现了植物细胞的全能性，C正确； D、该过程使用了秋水仙素，能将花药（配子）中的染色体恢复正常，④过程形成的植株中可筛选获得纯合的二倍体兰花植株，D正确。 故选B。 6. 研究者采集了一只睡眠紊乱明显的猕猴的体细胞，通过克隆技术，获得了五只克隆猴用于研究生物节律与衰老疾病之间的关系。在此研究中，克隆猴相比有性生殖而来的猴，优势在于（ ） A. 生长发育时间大大缩短 B. 实验对象间的性状差异较小 C. 寿命更长 D. 抵抗病害的能力更强 【答案】B 【解析】 【分析】（1）无性生殖指的是不需要经过两性生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的过程。有性生殖指的是两性生殖细胞精子和卵细胞结合形成受精卵的过程。 （2）克隆技术是利用生物的体细胞繁殖后代的无性生殖技术。 【详解】克隆猴属于无性生殖，克隆获得的五只猴是经过分裂、分化而来，遗传物质完全相同，五只猴的性状差异较小。有性生殖要经过两性生殖细胞精子和卵细胞的结合。通过有性生殖获得的子代，其遗传物质不完全相同，性状差异较大。该实验是研究生物节律与衰老疾病之间的关系，所选实验个体生理状态等生命特征应该相同。 故选B。 7. 如图为猪输卵管上皮细胞培养过程示意图。下列有关叙述不正确的是（ ） A. 丙、丁过程均会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象 B. 甲→乙、丙→丁这两个过程需要用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 C. 为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气 D. 丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需在添加血清的合成培养基中进行 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞制成细胞悬液→转入培养液(传代培养) →放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、丙为原代培养，丁为传代培养，丙、丁过程均会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，A正确； B、由于动物细胞间存在粘连蛋白，故甲→乙和丙→丁过程需要用用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，B正确； C、为避免培养过程中的杂菌污染，保证其气体需要，丙、丁过程中需松动培养瓶盖，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，C错误； D、丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需在添加血清的合成培养基进行培养，因为对动物细胞培养所需要的营养尚不明确，D正确。 故选C。 8. 干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞。某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列说法错误的是（ ） A. 胚胎干细胞具有全能性，成体干细胞具有组织特异性 B. 营养供应充足时，原代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制 C. XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化 D. 若某濒危动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞。一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。 【详解】A、胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能，即胚胎干细胞具有全能性，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，A正确； B、动物细胞培养时，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时就会发生接触抑制，营养供应充足时，原代培养胚胎干细胞也会发生接触抑制，B错误； C、XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程中，细胞的功能发生了特化，因而发生了细胞分化，C正确； D、若某濒危动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育，实现对濒危物种的保护，D正确。 故选B。 9. 卵胞浆内单精子显微注射技术是用显微操作技术将精子注射到卵母细胞胞浆内，使卵子受精，在体外培养形成早期胚胎，再放回母体子宫内发育着床。有关说法错误的是（ ） A. 穿刺可能会对卵母细胞造成损伤，应加强随访 B. 受精完成的标志是雌雄原核融合 C. 该技术主要解决了一些异常精子不能穿越透明带的问题 D. 用于移植的胚胎宜选用原肠胚期的胚胎 【答案】D 【解析】 【分析】卵胞浆内单精子显微注射技术是用显微操作技术将精子注射到卵母细胞胞浆内，使卵子受精，在体外培养形成早期胚胎，再放回母体子宫内发育着床。该过程应用了体外受精的技术、早期胚胎培养和胚胎移植技术。受精作用完成的标志是雌雄原核融合。 【详解】A、通过显微注射技术将精子注射到卵母细胞胞浆内，使卵子受精，可能会对卵母细胞造成损伤，使其不能继续进行分裂，因此应加强随访，A正确； B、受精完成的标志是雌雄原核融合，B正确； C、体内受精时精子需要穿越透明带和卵黄膜后才能与卵细胞融合，该技术可将精子注射到卵母细胞胞浆内，使卵子受精，因此主要解决了一些异常精子不能穿越透明带的问题，C正确； D、用于移植的胚胎宜选用桑葚胚或囊胚期的胚胎，D错误。 故选D。 10. 大多数哺乳动物的晚期桑葚胚分割后，分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。该调节能力随发育进程逐渐减弱甚至消失。下列说法错误的是（ ） A. 胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴 B. 卵裂过程中所需营养主要来源于培养液 C. 桑葚胚及囊胚的内细胞团细胞具有发育的全能性 D. 囊胚期的细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变 【答案】B 【解析】 【分析】生殖细胞包括睾丸产生的精子和卵巢产生的卵细胞，含精子的精液进入阴道后，精子缓慢地通过子宫，在输卵管内与卵细胞相遇，有一个精子进入卵细胞，与卵细胞相融合，形成受精卵；受精卵不断进行分裂，逐渐发育成胚泡。此时所需要的营养物质来自卵黄。所以受精卵卵裂发育成早期胚胎时期所需营养由（卵黄）提供，卵黄是动物卵内贮存的一种营养物质，它是专供卵生和卵胎生动物胚胎发育过程中所需的营养物质，胎生的哺乳动物的卵细胞内也有卵黄，是胚胎发育初期的营养物质。由受精卵发育到成熟的婴儿，其营养获取的途径是不同的，胚胎发育早期所需要的营养来自卵黄，胚胎发育的主要营养物质是通过胎盘从母体获得的。 【详解】A、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份，经移植可获得同卵双胎或多胎技术，属于无性繁殖或克隆的范畴，A正确； B、胚胎发育早期所需要的营养来自卵黄，B错误； C、在桑椹胚以前细胞没有发生分化，每个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，囊胚内的内细胞团将来可以发育成胎儿的各种组织，因此也具有全能性，C正确； D、细胞分化实质是基因的选择性表达，囊胚期的细胞出现了细胞分化，但遗传物质并没有变化，D正确。 故选B。 11. 如图为科学家制备诱导多能干细胞(iPS细胞)的操作流程图。下列叙述错误的是（ ） A. 该项技术将来有可能用于再生医学、药物安全性与有效性检测等领域 B. 借助载体将特定基因导入细胞中可以制备 iPS细胞 C. 成纤维细胞可以转化为iPS细胞，已分化的B细胞、T细胞也可以转化为iPS细胞 D. 诱导多能干细胞应用前景不如胚胎干细胞 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了它在医学上的应用。2006年，科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)，并用iPS细胞治疗了小鼠的镰状细胞贫血。现在，用iPS细胞治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，所以科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。 【详解】A、诱导多能干细胞(iPS细胞)是类似胚胎干细胞的一种细胞，该项技术将来有可能用于再生医学、药物安全性与有效性检测等领域，A正确； B、借助载体将特定基因导入细胞中可以制备 iPS细胞，也可以直接将特定蛋白导入细胞或用小分子化合物诱导形成iPS细胞，B正确； C、成纤维细胞可以转化为iPS细胞，已分化的B细胞、T细胞也可以转化为iPS细胞，C正确； D、诱导多能干细胞无需破坏胚胎，理论上可以避免免疫排斥反应，科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，D错误。 故选D。 12. 某同学列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（ ） 比较内容 植物体细胞杂交 动物细胞融合 A 特殊处理 酶解法去除细胞壁 用胰蛋白酶处理分离出单个细胞 B 融合方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、生物方法 C 典型应用 种间杂种植物 培养克隆动物 D 培养基区别 固体培养基，含蔗糖和植物激素 液体培养基，含葡萄糖，一般含有动物血清 A. A B. B C. C D. D 【答案】C 【解析】 【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，二者融合的原理都是细胞膜的流动性、植物体细胞杂交的原理还包括了植物细胞的全能性；诱导原生质体融合的方法有 离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，而诱导动物细胞融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导。植物体细胞杂交的主要目的是培育新品种，而动物细胞融合的主要目的是用于获得单克隆抗体。 【详解】A、在植物细胞杂交时首先运用纤维素酶或果胶酶去除植物细胞的细胞壁获得原生质体，而在动物细胞培养过程中要运用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞，A正确； B、植物体细胞杂交过程中运用物理法和化学法将原生质体进行融合，没有生物方法，而动物细胞融合可以利用物理、化学、生物三种方法，B正确； C、可以利用植物组织培养技术获得无病毒植物和人工种子，利用植物体细胞杂交进行种间植物杂交，动物细胞工程中利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体，无法培养克隆动物，C错误； D、植物组织培养的培养基属于固体培养基，利用蔗糖作为营养物质，其中还含有植物激素；动物细胞培养的培养基属于液体培养基，其中含有葡萄糖和动物血清等，利用动物血清作为促进细胞生长的物质，D正确。 故选C。 13. 细胞工程在农业生产、医疗卫生等方面发挥了重要作用。下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ） A. 利用茎尖组织培养技术培育的脱毒草莓的产量和品质明显优于未脱毒草莓 B. 科学家利用植物体细胞杂交技术获得白菜—甘蓝杂种植株，打破了生殖隔离 C. 用分割针将桑葚胚分割成2等份，经移植获得同卵双胎的过程属于有性繁殖 D. 将病人自身体细胞诱导形成的iPS细胞移植回病人体内，理论上可避免免疫排斥 【答案】C 【解析】 【分析】马铃薯、草莓和香蕉等通常是用无性繁殖的方式进行繁殖的，它们感染的病毒很容易传给后代。病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量降低，品质变差。早在20世纪50年代，科学家就发现植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒。因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。 【详解】A、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，利用茎尖组织培养技术培育的脱毒草莓的产量和品质明显优于未脱毒草莓，A正确； B、科学家利用植物体细胞杂交技术获得白菜—甘蓝杂种植株，该植株可产生可育的后代，打破了生殖隔离，B正确； C、用分割针将桑葚胚分割成2等份，经移植获得同卵双胎的过程属于无性繁殖，C错误； D、自体细胞移植，HLA完全相同，可避免免疫排斥，D正确。 故选C。 14. 下列每项操作获得的多头犊牛之间遗传性状相似的是（ ） ①取母牛甲的体细胞，经体细胞核移植技术获得的犊牛 ②取母牛甲的卵母细胞，经体外受精获得的“试管牛” ③母牛甲经超数排卵、发情配种或人工授精获得的犊牛 ④母牛甲自然受精形成的胚胎，经胚胎分割获得的犊牛 A. ①④ B. ②③ C. ①② D. ③④ 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。 【详解】①取母牛甲的体细胞，经体细胞核移植技术获得犊牛的过程属于无性生殖，犊牛细胞核中的遗传物质都来自母牛甲（虽然细胞质中也有少量遗传物质，但主要遗传物质来自细胞核），所以这些犊牛的遗传物质基本相同，遗传性状相似，①符合题意； ②取母牛甲的卵母细胞，经体外受精获得“试管牛”的过程属于有性生殖，卵母细胞、精子中的染色体数是体细胞的一半，且经过减数分裂过程中的基因重组，遗传物质已经发生了变化，并且体外受精时精子和卵细胞是随机结合的，不同的精子与卵母细胞结合形成的受精卵的遗传物质不同，所以这些“试管牛”的遗传性状存在差异，②不符合题意； ③母牛甲经超数排卵、发情配种或人工授精获得犊牛的过程属于有性生殖，母牛甲超数排卵产生的卵细胞经过减数分裂，基因发生了重组，而且与不同的精子结合（无论是自然配种还是人工授精），形成的受精卵遗传物质不同，所以这些犊牛的遗传性状存在差异，③不符合题意； ④母牛甲自然受精形成的胚胎，经胚胎分割获得犊牛的过程属于无性生殖，这些犊牛来自同一个受精卵，同一个受精卵发育而来的个体，其遗传物质相同（因为是由同一个细胞通过有丝分裂产生的），所以遗传性状最相似，④符合题意。 故选A。 15. 营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营养物质（如氨基酸、维生素）的能力，必须在基本培养基中补充特殊营养物质才能正常生长的一类菌株，可自然产生或人工诱导获得。用一定方法诱变大肠杆菌并将其接种到甲培养皿上，一段时间后将菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿中，进一步培养一段时间可筛选出营养缺陷型菌株，结果如图所示。下列说法正确的是（　　） A. 影印培养法使用的是液体培养基进行微生物培养 B. 甲丙两种培养基中均添加了特殊营养物质 C. 乙培养皿中能生长的为所需的营养缺陷型菌株 D. 甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变或染色体变异 【答案】B 【解析】 【分析】①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。 【详解】A、由菌落的分布情况可知，将大肠杆菌接种到甲培养皿的方法为稀释涂布平板法，故影印培养法使用的是固体培养基进行微生物培养，A错误； B、根据甲丙两种培养基中菌落位置可知，甲中的菌种在丙培养基中均能生长，再结合乙培养基中菌落的生长情况，可推测甲培养基和丙培养基都添加了某种特殊物质，B正确； C、结合题意可知，乙培养皿中不能生长的为所需的营养缺陷型菌株，C错误； D、甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变，不可能发生染色体变异，因为大肠杆菌是原核生物，不含染色体，D错误。 故选B。 16. 现代生物工程的操作常常涉及到下面的流程，下列说法正确的是（　　） A. 若图为核移植过程，则②从卵巢中获取的卵母细胞直接作为受体细胞和①供体细胞融合 B. 若图为单克隆抗体制备过程，需要筛出产生所需抗体的杂交瘤细胞 C. 若图为试管动物的培育过程，需培育到原肠胚才能进行胚胎分割与胚胎移植 D. 若图为植物体细胞杂交过程，则形成③常用灭活的病毒直接处理两种植物细胞 【答案】B 【解析】 【分析】单克隆抗体制备的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞)；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 【详解】A、若图为核移植过程，在体细胞核移植过程中，应选择处于MⅡ中期的卵母细胞作为受体细胞，因此需要将卵母细胞培养至MⅡ中期，不是直接作为受体，A错误； B、若图为单克隆抗体的制备，则①和②是经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，形成融合细胞需要经过筛选，筛出产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、若图为试管动物的培育过程，需培育到桑葚胚或者囊胚才能进行胚胎分割与胚胎移植，C错误； D、诱导原生质体融合的方法有物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂，灭活的病毒是诱导动物细胞融合方法，D错误。 故选B。 二、非选题（每空2分，共60分） 17. 酱油是由酱演变而来。早在三千多年前，中国周朝就有制做酱的记载。而中国古代劳动人民发明酱油之酿造纯粹是偶然地发现。最早的酱油是由鲜肉腌制而成，与现今的鱼露制造过程相近。因为风味绝佳渐渐流传到民间，后来发现大豆制成风味相似且便宜，才广为流传食用。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。 回答下列问题： （1）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的________、________能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于_____(填“自养厌氧”、“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。 （2）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌作用是______；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是______。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是______（答出一种物质即可）。 【答案】（1） ①. 蛋白酶 ②. 脂肪酶 ③. 异养好氧 （2） ①. 无氧呼吸产生乳酸进而调节发酵液pH值（或：无氧呼吸产生乳酸进而与酒精形成有特殊香味的酯类；无氧呼吸产生乳酸抑制有害微生物生长） ②. 酒精和CO2 ③. 乳酸（或：酒精、食盐）（答出一种物质即可） 【解析】 【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 【小问1详解】 米曲霉在发酵过程中产生的蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，产生的脂肪酶能将脂肪分解为甘油和脂肪酸，使发酵的产物具有独特的风味。米曲霉发酵时需要利用现有的有机物和需要空气，说明其代谢类型是异养好氧型。 【小问2详解】 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸进而调节发酵液pH值（乳酸还可以与酒精形成有特殊香味的酯类、抑制有害微生物生长）；酵母菌为兼性厌氧微生物，在无氧条件下可以通过无氧呼吸产生酒精和CO2。在发酵池发酵阶段存在乳酸菌和酵母菌，它们产生的乳酸和酒精均会抑制杂菌生长，同时，加入的食盐也有抑制杂菌生长的作用。 18. 已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。 Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5g/L）。 Ⅱ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（15g/L）。 Ⅲ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（45g/L）。 回答下列问题。 （1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是_____。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_____。 （2）若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_____，其原因是_____。 （3）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_____（答出一点即可）。 【答案】（1） ①. 牛肉膏、蛋白胨 ②. X （2） ①. 下降 ②. 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖 （3）能量（或合成其他物质的原料） 【解析】 【分析】1、选择培养基的概念：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，选择培养基必须是固体培养基，本题中选择培养基中的唯一碳源是有机物X，这样能分解X的微生物能够从该有机物获得碳源，其他微生物由于无法获得碳源而不能生存。 2、常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液涂布到固体琼脂培养基上，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，获得由单个细胞繁殖而来的菌落，微生物的计数通常采用稀释涂布平板法。 【小问1详解】 氮源是微生物生长需要的一类营养物质，是含氮化合物，可为微生物的生长提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，因此在1号培养基中，可为微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生长所需要的一类营养物质，可为微生物的生长提供碳元素，II、III号培养基均含有有机物X，因此，II、III号培养基为微生物的生长提供碳源的均为有机物X。 【小问2详解】 由于II号培养基含有的碳源只有有机物X，因此若将土壤悬浮液接种在II号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌由于无法获得碳源而无法增殖，能降解X的细菌能够增殖，故不能降解X的细菌比例会减少。 【小问3详解】 丙酮酸参与有氧呼吸的第二阶段，能被分解产生能量，且丙酮酸可作为许多物质合成的中间产物，因此其可为微生物的生长提供能量和合成其他物质的原料。 19. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如下图。 （1）过程①通过酶解法去除______获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带______的杂种原生质体。 （2）科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如下图。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由上图可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在______种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为______。 （3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 ①将表格中C组的实验处理补充完整______。 ②若实验结果为______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 【答案】（1） ①. 细胞壁 ②. PEG ③. 红、绿荧光色素 （2） ①. 2 ②. 1×106个·mL-1 （3） ①. 等量的蒸馏水 ②. A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组 【解析】 【分析】分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。图2柱形图中，随着原生质体密度增大，双核异核融合体比例先升高后降低，其中在1×106个/mL-1时， 比例最高。 【小问1详解】 据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，需要用纤维素酶、果胶酶处理破坏细胞壁；过程②诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（聚乙二醇）诱导融合；由于三百草细胞酶解液中加入了红荧光色素，鱼腥草细胞酶解液中加入了绿荧光色素，所以杂种原生质体应该带红、绿荧光色素。 【小问2详解】 双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在2种类型的双核融合体（即三白草-三白草、鱼腥草-鱼腥草）；由图2柱形图可知，在密度为1×106个/mL时， 双核异核融合体比例最高，说明促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为1×106个/mL。 【小问3详解】 ①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。 ②若实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 20. 人类乳头瘤病毒（HPV）有多种亚型，HPV45属于高危型，与宫颈癌的发生密切相关。L1蛋白是组成HPV病毒衣壳的主要结构蛋白，科研人员进行了抗HPV45L1蛋白单克隆抗体的制备及研究。其基本操作过程如图所示。回答下列问题： （1）上述实验步骤①是______。 （2）细胞甲、乙、丙、丁中可能产生抗L1蛋白抗体的细胞有_______。 （3）对细胞丙进行______和______，经多次筛选，就可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 （4）下图为一种检测待测抗原中目标抗原相对含量的方法，据图分析回答下列问题： ①检测之前，将目标抗原的单克隆抗体固定在支持物上形成固相抗体，然后向该检测体系中加入一定量的待测抗原和等量酶标记抗原，目的是______。 ②保温一段时间后洗涤，向检测体系中加入一定量的白色底物，若______，则说明待测抗原中目标抗原的含量越高。 【答案】（1）向小鼠体内注射L1蛋白 （2）甲乙丙丁 （3） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 （4） ①. 让待测抗原中的目标抗原与酶标记抗原与抗体竞争性结合 ②. 检验体系的蓝色越浅 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合；单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞；第二次筛选：利用克隆化培养和抗体检测，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问1详解】 在抗L1蛋白单克隆抗体的制备过程中，提取HPV45的L1蛋白（抗原），注射到小鼠体内，其目的是诱导小鼠产生能够分泌抗L1蛋白抗体的B淋巴细胞。 【小问2详解】 B淋巴细胞起源于骨髓造血干细胞，在骨髓中发育成熟，能产生特定抗体的B淋巴细胞在脾中分布较多，故在小鼠的脾中可获得产生特定抗体的B淋巴细胞，故细胞甲需从小鼠的脾脏中来获取；其中细胞甲（B淋巴细胞）、乙（杂交瘤细胞）、丙（第一次筛选的杂交瘤细胞）、丁（第二次筛选的能产生抗L1蛋白抗体的杂交瘤细胞），故细胞甲、乙、丙、丁都能产生抗L1蛋白抗体。 【小问3详解】 过程④是第二次筛选，目的是获得所需的能产生特定抗体的细胞群，需对细胞进行克隆化培养和抗体检测。 【小问4详解】 ①根据图示反应原理，酶标记抗原和待测抗原都能与单克隆抗体特异性结合，即让待测抗原中的目标抗原和酶标记抗原竞争结合单克隆抗体；②标记抗原的酶可催化白色底物变为蓝色产物，所以如果待测抗原中目标抗原越多，则酶标记抗原和抗体结合得越少，催化生成的蓝色产物就越少，检测体系蓝色就越浅，反之若检测体系蓝色越深，则说明待测抗原中目标抗原越少。 21. 骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆驼曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题： （1）胚胎工程中一般注射_______处理A使其超数排卵。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有_______和______。 （2）过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植，欲获得更多的胚胎可以对囊胚进行_______操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将_______。 （3）胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为______。 【答案】（1） ①. 促性腺激素 ②. 透明带反应 ③. 卵细胞膜反应 （2） ①. 胚胎分割 ②. 囊胚的内细胞团均等分割 （3）受体对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应 【解析】 【分析】据图分析，E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，其中①表示体外受精，②表示去掉卵母细胞的细胞核，③表示早期胚胎培养。 【小问1详解】 胚胎工程中一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，以便获得更多的卵子。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有透明带反应、卵细胞膜反应。 【小问2详解】 获得更多的胚胎可进行胚胎分割，再借助胚胎移植技术产生完遗传物质完全相同的后代，由于囊胚内的内细胞团将来会发育为机体的组织和器官，因此应对囊胚的内细胞团进行均等分割，才能获得完全相同的多个胚胎。 【小问3详解】 胚胎能在D受体雌性体内存活，因为同种动物供、受体生殖器官生理变化相同，受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥，这是胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$