作业(二) 微生物的基本培养技术-【精讲精练】2024-2025学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程知能达标训练（人教版2019）

作业（二） 微生物的基本培养技术 [基础达标练] A.①步骤使用的培养基已经灭菌 1.(2024·宿迁高二月考)下列有关培养基配制原 B.①②③步骤操作时均需要在酒精灯火焰旁 则的叙述，错误的是 ( 进行 A.异养微生物的培养基必须有有机物 C.④在恒温培养箱中培养时需要将平板倒置 B.任何培养基都必须含有水、碳源、氯源、无机盐 D.④操作过程中，需灼烧接种环5次 及特殊营养物质 6.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放 C.配制培养基时，要注意各种营养物质的浓度和 入37℃恒温箱的目的是 ( 比例 A.对比观察培养基有没有被微生物利用 D.配制培养基时，应特别考虑细胞产物 B.对比分析培养基是否被杂菌污染 2.下列关于微生物实验室培养的叙述，正确的是 C.没必要放入未接种的培养基 ( D.为了下次接种时再使用 A.制备培养基时，应先灭菌后定容再倒平板 7.下列有关倒平板的操作，叙述错误的是( B.培养霉菌时需将培养基的pH调至中性或弱 A.不能将培养基溅到培养皿l壁上 碱性 B.将打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素 C.将培养皿打开，培养皿盖放在桌子上 D.培养破伤风芽孢杆菌时需要提供有氧的条件 D.感觉锥形瓶的温度刚刚不烫手时倒平板 3.(2023·平遥中学检测)下列关于灭菌和消毒的 8.金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎 理解，正确的是 ( 等，还可能引起食物中毒，下列实验结束后的做 A.医务人员进入工作区要全身灭菌 法错误的是 ) B.接种疫苗前要对注射区域进行消毒 C.消毒与灭菌的含义本质是相同的 A.对接种环进行灼烧处理 D.常用的消毒方法有灼烧和高压蒸汽 B.带菌培养基必须经灭菌后才能倒掉 4.(2024·临汾高二统考)某同学欲判断某品牌消 C.做完实验后，可以在实验室内饮水 毒液的消毒效果，分别在使用消毒液洗手前后在 D.接种后双手必须用肥皂洗净，再用75%的酒精 手的相同部位取样，之后接种、培养并观察统计 棉球擦拭 培养基上的菌落形态和数目。相关操作错误的是 [素能提升练] ( 9.(不定项)接种微生物的方法 A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌 很多，平板划线法是最常用的 B.使用无菌棉拭子从手的皮肤表面取样 一种。如图是平板划线示意 C.用取样后的棉拭子在固体培养基上划线 图，划线的顺序为①②③④。 D.接种后的培养皿要倒置，以防培养污染 操作方法中错误的是 5.如图是实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分 A.划线操作时，将沾有菌种的接种环插入培养基 操作步骤，下列说法错误的是 B.平板划线后培养微生物时要倒置培养 C.可将第④区域的划线与第①区域的划线相连 D.在②~④区域中划线前后都要对接种环进行 灭菌 3 。生物学·选择性必修3生物技术与工程（配RJ版） 10.(不定项)菜籽粕中含有35%~45%的蛋白质，： 判断依据是 是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗营 养因子限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌 : 种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培养基中发 初始氧气浓度如 酵48h,测定菜籽粕中单宁的含量，结果如 下图。 初始氧气浓度a 口R:植物乳酸菌 5 口H:黑曲霉菌 ☑N:酿酒酵母菌 时间 盈K:枯草芽孢杆菌 12.(2023·聊城调研)苯酚及其衍生物广泛存在于 2 工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准 对照 备依据图1所示操作步骤，从处理废水的活性污 下列相关叙述正确的是 ( 泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列 问题： A.菜籽粕与麸皮为微生物提供碳源和氨源 B.接种后需对培养基进行高压蒸汽灭菌 C.黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想 板 D.对照组为不接种微生物的固体培养基 活性污泥富集培养 图1 11.(2024·昆明检测)某兴趣小组欲对葡萄皮上的 (1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K,HPO,、 野生酵母菌进行纯培养。请回答下列问题。 MgSO,、苯酚和水，其中可作为碳源的有 (1)酵母菌的纯培养可使用 (填“牛肉膏蛋白胨”或“马铃薯琼脂”)培养基， (2)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转 培养基中还应加入链霉素以抑制 的生 接次数增加而逐渐 ,以达到富集酚降 解菌的目的。若图1平板中菌落过于密集，应进 长。该培养基应采用 灭菌法灭菌。 一步 ,以便于菌落计数与分离。制备 (2)采用平板划线法将葡萄皮上的野生酵母菌 平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须 接种到平板上，之后经培养得到的单菌落一般 添加 6 是由 形成的纯培养物。上述 (3)图2为平板划线法示意图，在图中 方法能分离得到单菌落的原理是 (填图中序号)区域更易获得单菌落。 开始处 (3)如图为不同初始氧气浓度下，利用等量酵母 菌进行发酵产生酒精实验的相关曲线。其中， 初始氧气浓度较高的是 (填字母)， 图2⑧⊙ 糖添加量为15%时，酒精含量达到最高值，此 需要在培养基中添加维生素，C正确；破伤风芽 时的白砂糖浓度既有利于酒精的产生，也可 孢杆菌属于厌氧菌，培养破伤风芽孢杆菌时需 以避免物质的浪费。白砂糖的添加量超过 要提供无氧的条件，D错误。 20%后，酒精含量下降，原因可能是白砂糖添 :3.B医务人员进入工作区要全身消毒，A错误： 加量过多，导致发酵液渗透压过高，抑制了酵 接种疫苗前要对注射区域进行消毒，B正确：灭 母菌的发酵。 菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所 答案(1)两者均为异养生物(2)15%白 有的微生物，包括芽孢和孢子，而消泰是指使 砂糖添加量过多，导致发酵液渗透压过高，抑 用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物 制了酵母菌的发酵 体表面或内部一部分微生物，C错误：常用的消 12.解析(1)制作泡菜利用的微生物是乳酸菌。 毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒和 发酵初期酵母菌生长旺盛，产生较多的CO2, 化学药物消毒等，灼烧和高压蒸汽都是灭菌的 因此泡莱坛水槽内经常有气泡产生。(2)“陈 方法，D错误。 泡菜水”中含有乳酸菌，装坛时往往加入“陈泡 4.C取样后的棉拭子需要用无菌水在试管内稀 莱水”是为了增加乳酸菌的量。调味料除了蒜 释，然后将稀释液涂布在固体培养基上， 瓣、生姜及其他香辛料外，还要加入少量白酒 C错误。 以使泡莱更加脆爽、清香，同时还能起到抑制：5，D①为倒平板，该步骤使用的培养基已经灭 杂菌生长的作用。(3)①从图中可以看出，与 菌，A正确；①②③步骤操作时需要在酒精灯 食盐浓度为3%、7%的泡菜相比较，食盐浓度： 火焰旁进行，防止被杂菌污染，B正确：④在恒 为5%的泡莱中亚硝酸盐含量变化最大：亚硝 温培养箱中培养时需要将平板倒置，防止冷凝 酸盐峰值最高。②高盐浓度有利于抑制杂菌 水滴入培养基，造成污染，C正确；每次划线前 的生长繁殖，产生的硝酸还原酶少，减缓了硝 后都要灼烧接种环，因此④操作过程中，需灼 酸盐还原，因此发酵初期食盐浓度为7%的泡 烧接种环6次，D错误。 莱中亚硝酸盐含量较低。③泡菜虽然美味却 :6.B对未接种的培养基进行培养，起到对照作 不宜过量食用。根据图中的相关数据，对泡莱 用，可确定培养基是否被杂菌污染。 腌制和食用的合理建议有使用适宜浓度的食：7.C倒平板时不能将培养基溅到培养皿壁上， 盐腌制泡莱；泡莱腌制到一定时间后才能 否则可能造成污染，A正确：使打开的锥形瓶 食用。 瓶口迅速通过火焰，对锥形瓶的口径处进行灼 答案(1)乳酸菌CO2(2)乳酸菌抑制 烧灭菌，防止空气中的杂菌污染，B正确；倒平 杂菌生长(3)①亚硝酸盐含量变化最大：亚 板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上， 硝酸盐峰值最高②高盐浓度有利于抑制杂 这样可能会污染培养基，C错误；已灭菌的培养 菌的生长繁殖，产生的硝酸还原酶少，减缓了 基冷却到大约50℃时可倒平板，D正确。 硝酸盐还原③使用适宜浓度的食盐腌制泡 :8.C 对接种环进行灼烧可以杀灭细菌，防止污 菜：泡菜腌制到一定时间后才能食用 染环境，A正确；带菌的培养基要经过灭菌后 才能倒掉，以免污染环境，B正确：在微生物培 作业（二）微生物的基本培养技术 养的实验室中不能吃东西、饮水，C错误：金黄 1.B虽然各种培养基的具体配方不同，但一般 色葡萄球菌有很强的致病力，所以在操作时一 都含有水、碳源、氨源和无机盐，有些微生物可 定要做到安全防范，接种后双手用肥皂洗净， 以固定空气中的碳元素或者氮元素，因此培养 再用70%一75%的酒精棉球擦拭，D正确。 基中不需要额外添加碳源或者氨源，有些微生 9.AC将沾有菌种的接种环在培养基表面迅速 物不需要特殊营养物质，B错误。 划三至五条平行线，而不能插入培养基；用平 2.C制备培养基时，应先定容后灭菌再倒平板， 板划线法培养微生物时，为防止水蒸气凝集滴 A错误；培养霉菌时需将培养基的pH调至酸 入培养基造成干扰或污染，应将平板倒过来放 性，B错误；雏生素是乳酸杆菌生长繁殖所必需 置培养；划线时要避免最后一区的划线与第一 的，但其自身不能合成，因此培养乳酸杆菌时 区相连，因为最后一区的细菌最稀少，而第一 28 区的细菌最致密，如果连在一起则有可能影响 一步稀释后再接种，以便于菌落计数与分离。 单个菌落的分离效果：在②一④区战中划线前 平板培养基属于固体培养基，该培养基需要 都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的 加入凝固剂，如琼脂等。(3)图2为平板划线 菌种来自上一区域的末端，划线结束灼烧接种 法，随着划线次数的增加，菌种进一步被稀释， 环是为了防止菌种污染环境和感染操作者。 在图中③区域更容易获得单菌落。 10.ACD莱籽粕中含有35%~45%的蛋白质， 答案(1)蛋白胨、苯酚(2)增加 稀释后再 麸皮富含纤雏素，莱籽粕与麸皮可为微生物 接种凝固剂(3)③ 提供碳源和氮源，A正确；对培养基灭菌应在 作业（三）微生物的选择培养和计数 接种前，接种后再灭菌，菌种将被全部杀死， B错误；据图可知，与对照组相比，黑曲霉菌发： 1.A两种方法都需要在无菌条件下操作，①错 酵莱籽粕中单宁含量最低，说明黑曲霉菌对 误；两种方法都需要配制固体培养基，均需要 单宁的去除效果最为理想，C正确：对照组为 添加琼脂，②错误；平板划线法不能对菌落进 不接种微生物的固体培养基，目的是作为对 行计数，稀释涂布平板法能进行活菌计数， 照，D正确。 ③正确；平板划线法的接种工具是接种环，稀 11.解析(1)马铃薯琼脂培养基常用于真菌的筛 释涂布平板法的接种工具是涂布器，④正确， 选，因此酵母菌的纯培养可使用马铃暮琼脂 A符合题意。 培养基：培养基中加入链霉素可以抑制细菌 2.A利用显微镜直接计数时，需要使用特定的 (原核微生物)的生长，培养基应采用湿热灭菌 细菌计数板或血细胞计数板来计数，B错误：平 法灭菌。(2)单菌落一般是由单一个体繁殖形 板划线法只用于分离微生物，不能用于统计细 成的纯培养物。平板划线法通过接种环在固 菌数目，C错误；利用平板计数时，需要选择菌 体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌 落数为30~300的平板计数，D错误。 种逐步稀释分散到培养基表面，经数次划线：3.C根据分析可知，透明圈不显红色的原因是 培养，可以分离得到单菌落。(3)初始氧气浓 其中的纤雏素已被分解，A错误；菌落①形成 度高时，酵母菌进行有氧呼吸的时间长，酒精 的透明圈直径与菌落直径之比最大，说明菌落 发酵的起始时间较晚（或初始氧气浓度高，酵 ①降解纤维素能力最强，B错误；根据题千信息 母菌有氧呼吸大量繁殖，在酒精发酵的初期 不能判断图中菌落的微生物类型，可能是细菌 产生酒精的速率较快)，因此初始氧气浓度较 也可能是真菌，C正确；图中培养基应以纤维素 高的是a。 为唯一碳源，不可用牛肉膏、蛋白胨配制， 答案(1)马铃薯琼脂细菌（原核微生物） D错误。 湿热 4.C利用血细胞计数板，不能区分死菌与活菌， (2)单一个体繁殖通过接种环在固体培养基 A错误：不同的微生物培养需要的pH是不同 表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀 : 的，如培养细菌时需将培养基的pH调至中性 释分散到培养基表面，经数次划线培养，可以 或微碱性，B错误：纤维素分解菌可以将纤维素 分离得到单菌落 : 分解，而其他微生物不能，因此筛选纤维素分 (3)a初始氧气浓度高，酵母菌进行有氧呼吸 解菌时，要将土壤稀释液接种到以纤雏素作为 的时间长，酒精发酵的起始时间较晚（或初始 唯一碳源的固体培养基，C正确；稀释涂布平板 氧气浓度高，酵母菌有氧呼吸大量繁殖，在酒 法既可以用于分离微生物，也可以用来统计样 精发酵的初期产生酒精的速率较快) 品中活菌的数目，D错误。 12.解析(1)培养基成分中的有机物均可以提供：5.B取土壤用的小铁铲和盛土样的信封在使用 碳源，即蛋白胨、苯酚均可以作为碳源。(2)分 前都需要灭菌，A正确；土壤中细菌比真菌多， 析实验可知，实验目的是筛选酚降解菌，因此 在测定土壤中细菌的数量时，一般选用1× 将采集到的样品接种培养。苯酚用量应随转 10,1×105和1×106倍的稀释液进行平板培 接次数增加而逐渐增加，以达到富集酚降解 养，B错误；鉴定分解尿素的细菌的原理是该种 菌的目的。若图1平板中菌落过于密集，应进 细菌能产生脲酶，脲酶能将尿素分解产生氨， 29