高二生物期中模拟卷（天津专用，人教版2019选择性必修3第1～3章）-学易金卷：2024-2025学年高中下学期期中模拟考试

2024-2025学年高一生物下学期期中模拟卷 参考答案 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C B B D A A D B C B 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 C C B C C B D B C C 题号 21 22 23 24 25 答案 A C A C D 二、非选择题：本题共4小题，共50分。 26．【答案】（共9分,每空1分） (1)敌敌畏 液体 氮源、碳源、维生素 (2)常年施用敌敌畏 平板划线法 (3)敌敌畏的剩余量 0.2 少 两个或多个细菌形成一个菌落 27．【答案】（共15分，除标注外每空1分） (1)纤维素酶和果胶（2分） 等渗 (2)6 可育 杂种植株细胞中含有成对的同源染色体（2分） 将pH调为酸性 (3)①③④（2分） (4)植物体细胞杂交 植物组织培养 愈伤组织 生长素与细胞分裂素比例 秋水仙素 28．【答案】（共12分，每空2分） (1)克隆化培养 （专一）抗体检测 (2)2/两 温度、pH和渗透压 (3)免疫排斥反应 (4)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 29．【答案】（共14分，除标注外每空1分） (1)启动子、终止子（2分） (2)在乳腺中特异表达的基因的启动子（牛乳腺蛋白基因的启动子）（2分） 显微注射 受精卵 (3)EcoRⅠ和PstⅠ （2分） 这两种酶能切割质粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免质粒和目的基因自连及反接（这两种酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免质粒和目的基因的自身环化和反向连接）（2分） (4)能 不能 (5)乙、丙 3 / 学科网（北京）股份有限公司 $$2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 生物答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 1,答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，井认真核准 考生禁填： 缺考标记 ▣ 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码 违纪标记 2.选择题必须用2B铅笔填涂：非选择题必须用0.5mm黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题：字体工整、笔迹清嘶。 3.请按题号顺顾序在各题目的答题区域内作答。超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效：在草稿纸、试题卷上答题无效。 正确填涂 4. 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破， 错误填涂[×]【][/1 选择题：本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合 题目要求的。 1A1[B1[C1D1 6.[A][B][C][D] 11.A1[B1[C1fD1 16(A][B][C][D] 2[AI[B][C][D] 7.A1IB1[C1[D1 12[A][B][C][D] 17.A1IB1【C1[D1 3.[A][B][CI[D] 8.1A][B][C][D] 13.[A][B][C][D] 18.[A][B][C][D] 4A1「B1[C1ID1 9[A][B][CI[D] 14[A][BI[CI[D] 19(A][B][C][D] 5,A1[B1[C1ID1 10.[A][B][C][D] 15[A][B][C][D] 20.A1IB1【C1ID1 21[A][B][C][D] 22[AJ[B][CI[D] 23.[A][B][C][D] 24[A][B][C][D] 25A1IB1[C1【D1 二、非选择题：本题共4小题，共50分。 26.(9分) (1) (2) (3) 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 27.(15分) (1) (2) (3) (4) 28.(12分) (1) (2) (3) (4) 29.(14分) (1) (2) (3) (4) (5)………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… 此卷只装订不密封 ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… … 学校：______________姓名：_____________班级：_______________考号：______________________ 2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：60分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修三前三章 5． 难度系数：0．75 6．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．如下是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是（    ）    A．挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗 B．果酒制作时，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约2/3的空间，有利于增加酵母菌数量 C．为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种 D．制作果醋时，利用了醋酸菌在无氧条件下产生了乙酸 2．《齐民要术》记载了古人在生产中运用发酵技术加工食品积累的许多宝贵经验。其中关于桃醋的做法有如下记载：“桃烂自零者，收取，内之于瓮中，以物盖口。七日之后，既烂，漉去皮核，密封闭之。三七日酢成，香美可食。”下列相关叙述错误的是（    ） A．与未成熟的桃子相比，成熟的桃子单糖含量更高，利于酵母菌发酵 B．“以物盖口”和“密封闭之”都是为了防止杂菌污染、创设无氧环境 C．制作桃醋主要是醋酸菌的作用，其代谢类型为异养需氧型 D．“七日之后”发酵液中的pH会降低，其表面可能形成一层菌膜 3．古徽州有许多美食深受人们喜爱，如徽州毛豆腐、灵山酒酿、臭鳜鱼、徽州臭豆腐等。制作臭豆腐时需要将豆腐浸入含有乳酸菌和芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，相关叙述正确的是（    ） A．卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌相互独立，没有种间关系 B．制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基 C．徽州毛豆腐中的毛霉、曲霉产生的蛋白酶能促进大豆蛋白质、脂肪分解，丰富营养成分 D．乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳，需定期排气 4．随着工业的发展，土壤重金属污染日益严重，对动植物的生长有严重的危害作用。科研人员欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，部分实验流程如图。下列相关叙述错误的是（    ）    A．选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌 B．若接种I是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始 C．固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的 D．图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性和修复能力 5．某种物质S（一种含有C、H、O的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。下列相关叙述正确的是（　　） A．甲、乙培养基都是选择培养基，其中Y应是凝固剂琼脂 B．甲培养基中进行的是扩大培养，扩大培养后稀释度数越低越好 C．在乙培养基上统计活菌时，平板上的一个菌落就是一个细菌 D．多次筛选的过程是诱导细菌发生基因突变，产生高效降解S的菌株 6．获取纯净微生物的关键在于无菌技术，主要包括消毒和灭菌。下列叙述错误的是（　　） A．牛奶一般通过100℃煮沸5～6min来消毒 B．紫外线照射30min可以杀死物体表面的微生物 C．吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌 D．接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌 7．培养基是指供微生物、植物组织和动物组织生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。已知青霉素可抑制细菌生长。下列有关培养基及其配制过程的叙述，错误的是（    ） A．培养基中一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等主要营养物质 B．根据微生物对碳源需求上的差别，可在培养基中增减不同的碳源 C．培养基中添加青霉素可将真菌从混有细菌的培养基上选择出来 D．微生物只能在固体培养基表面生长 8．下列对发酵工程的叙述，正确的是（　　） A．发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以利用微生物来进行发酵 B．利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植株生长 C．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 D．啤酒发酵过程中大部分糖的分解在主发酵阶段完成，代谢物的生成在后发酵阶段完成 9．下列关于动物细胞融合的说法，错误的是（    ） A．动物细胞融合是指两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程 B．动物细胞融合后形成的单核细胞称为杂交细胞 C．灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导细胞融合 D．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 10．动物细胞培养是动物克隆的基础，如下图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③分别表示其结果，请据图回答，下列说法正确的是（　　） A．a如果是核移植技术，则①体现了动物细胞的全能性 B．b如果是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 C．c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表型一定相同 D．体外受精获得的早期胚胎在培养液中培养到桑葚胚或原胚期才可进行移植 11．体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述正确的是（　　） A．①过程可用机械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等处理的方法获得细胞悬液 B．③过程中加入微载体为细胞提供更大附着面积，使细胞间不出现接触抑制，产量增加 C．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时既要提供O2也要提供CO2 D．肌肉干细胞属于成体干细胞，能够分化成特定的细胞和组织，具有全能性 12．下列关于植物细胞工程及其应用的叙述，正确的是（    ） A．生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是进行远缘植物体细胞杂交 B．植物细胞培养技术的原理是植物细胞的全能性 C．生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响离体植物细胞的发育方向 D．进行体细胞杂交前，必须用胰蛋白酶和胶原蛋白酶去除细胞壁 13．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（    ） A．图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤 B．图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行 C．若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株体细胞染色体数目最多可达到64条 D．病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例最小的植株抗病性最强 14．科研人员利用两种植物进行体细胞杂交时，各组分别加入不同浓度的PEG来促进原生质体融合，其他条件均相同，结果如下表。下列叙述错误的是（    ） PEG浓度/% 25 30 35 40 45 融合率/% 10 12 15 30 20 A．植物体细胞融合前需先用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B．原生质体融合利用了细胞膜具有流动性的原理 C．低浓度PEG促进原生质体融合，高浓度则抑制融合 D．融合后的细胞经组织培养得到的一般为多倍体植株 15．让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断，下列说法正确的是（    ） A．图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等 B．小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同，小羊a与羊N的性状表现相同 C．依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛”状 D．若研究发现羊N产奶率高是因为细胞中线粒体基因的表达产物丰富，则小羊a会有这一优良性 16．“嵌合体”是指由两个或两个以上具有不同遗传物质的细胞系形成的综合体。某大学利用二倍体小鼠和相应生物技术成功培育出作为科研动物的“嵌合体小鼠”。下列相关叙述正确的是（    ）    A．该实验成功的技术基础是动物细胞培养和动物细胞融合 B．“嵌合体小鼠”依然是二倍体 C．图中囊胚的细胞基因型都相同 D．代孕母鼠不需同期发情处理操作 17．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（    ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 D．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 18．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，染色体全部来自父系的“合子”致死。下列相关叙述错误的是（    ） A．“半同卵双胞胎”的产生与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关 B．细胞a的染色体组成为MP1，则细胞c的染色体组成为P1P1或MM C．排卵是卵子从卵泡中排出的过程，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ D．这对小姐弟来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的常染色体可能不同 19．下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（　　）    A．步骤①的操作不需要在无菌环境中进行 B．步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C．步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理 D．步骤④培养过程中不会发生基因突变 20．“工欲善其事，必先利其器”。下列有关重组DNA技术的基本工具的相关表述正确的是（　　） A．限制酶均能特异性地识别6个核苷酸序列 B．DNA连接酶可以将配对的碱基通过氢键连接起来 C．作为载体的质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因 D．—CATG↓—和—G↓GTACC—序列被限制酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接 21．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（    ） A．DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精，利用这一原理初步分离DNA与蛋白质 B．将研磨液过滤到烧杯中，在冰箱放置一段时间后，上清液中含DNA和蛋白质 C．将析出的丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂在沸水浴下鉴定DNA D．实验结果变色不明显，可能是研磨不充分导致DNA不能从细胞核中充分释放 22．限制酶SpeI、EcoRV和XbaI的识别序列及其切割位点如图所示。下列说法错误的是（　　） A．大多数限制酶识别的序列是由6个 B．SpeI和XbaI切割出的DNA片段可形成重组DNA分子 C．EcoRV切割出的DNA片段可用E．coliDNA连接酶连接 D．三种限制酶发挥催化作用的化学键均为磷酸二酯键 23．乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量。酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌内催化乳酸生成的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的酵母工程菌株。如图为通过双酶切构建重组质粒的过程。相关叙述正确的是（    ） A．用PCR技术获取该目的基因时，经PCR技术扩增n次需引物1数量为（2n+1-2）/2个 B．重组质粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体 C．基因表达载体中应带有乳酸菌LDH基因自身的启动子 D．酵母工程菌培育成功的标志是产生乳酸脱氢酶 24．下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，下列叙述错误的是（    ）   A．图中①一般经胰蛋白酶处理可以得到③ B．在②进入③之前要用限制酶、DNA连接酶和载体等工具来构建基因表达载体 C．一般情况下，用雌激素处理良种母牛可以获得更多卵母细胞 D．⑧是⑦生出的后代，但⑧的遗传性状和荷斯坦奶牛最相似 25．对水稻品种“淮稻7号”诱变获得突变体植株（基因型为aa．a基因位于9号染色体上），分析突变体的a基因全序列及其编码产物发现，突变体的a基因是野生型水稻的A基因内插入654 bp（碱基对）片段形成的。比对水稻基因组发现．野生型水稻的3号染色体上也存在上述654 bp序列。为探究突变体产生的原因，在野生型水稻的3号染色体和突变体水稻的9号染色体上654 bp序列外侧各设计一对引物，对野生型和突变体基因组DNA分别进行PCR，产物的凝胶电泳结果如图（M为核酸分子量大小的标准参照物）。下列相关叙述正确的是（    ） A．图示结果在自然条件下就能观察到 B．配置好的琼脂糖溶液需冷却至30℃后才能倒入模具 C．在凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子大小有关 D．突变体的形成是因为3号染色体上的654 bp序列移接到了9号染色体上 二、非选择题：共4题，共50分 26．（9分）微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题：    (1)已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是 。依照物理性质划分，驯化培养基属于 培养基，其中蛋白胨可提供 （至少答两点）。 (2)用于筛选的样品应来自 的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为 。 (3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的多个相同培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中 ，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、253，测得培养基C中菌落数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为 mL。该统计数据往往比活菌的实际数目 （填“多”或“少”）理由是 。 27．（15分）下图为利用某种低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。请回答下列问题： (1)过程①应将甲、乙两种植物细胞分别置于含有 酶的 （选填“低渗”“等渗”或“高渗”）溶液中，以制备原生质体甲′和乙′。 (2)植物丙′的体细胞中有 个染色体组，得到的杂种植株，理论上是否可育？ ，简要阐述理由： 。为筛选出耐酸的植物丙′，过程③所用的固体培养基需 。 (3)该育种技术涉及的生物学原理有 （填标号）。 ①细胞膜的流动性   ②细胞膜的选择透过性   ③植物细胞的全能性  ④细胞增殖 (4)利用单倍体育种技术，也可以利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁。下表是相关实验中的一些步骤，请根据题意完成以下表格。 实验目的 方法步骤要点 收集花粉 ①将品种甲和品种乙 后获得F1，收集F1的花粉 获得可增殖分化的细胞 ②利用 技术中的脱分化过程，获得 诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的 ，实现诱导分化 获得染色体加倍的植株 ④用 处理单倍体幼苗 获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子 28．（12分）双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： (1)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 ，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 (2)图2方框内至少需要经过 次筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤细胞。单克隆杂交-杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，无菌无毒的环境，适宜的 ，和适宜的气体环境等。 (3)临床试验发现，从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体治疗效果大大降低。因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低 。 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。 29．（14分）人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。下图所示为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。请据图回答问题： (1)人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有 （答出两点）等。 (2)若选用牛作为受体动物，可将人血清蛋白基因与 等调控组件重组在一起，通过 方法将目的基因导入牛的 中，然后使其发育成转基因牛。 (3)据图分析，在构建基因表达载体时，选择 作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率，其原因是 。 (4)为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后，进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基含新霉素，乙培养基含新霉素和氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上 （填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上 （填“能”或“不能”）生存。 (5)据下图分析，利用PCR技术获取HSA基因时，应选择甲、乙、丙、丁四种引物中的 ，需扩增 次后得到HSA目的基因。 试题 第7页（共8页） 试题 第8页（共8页） 试题 第1页（共8页） 试题 第2页（共8页） 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：60分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修三前三章 5． 难度系数：0．75 6．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．如下是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是（    ）    A．挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗 B．果酒制作时，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约2/3的空间，有利于增加酵母菌数量 C．为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种 D．制作果醋时，利用了醋酸菌在无氧条件下产生了乙酸 2．《齐民要术》记载了古人在生产中运用发酵技术加工食品积累的许多宝贵经验。其中关于桃醋的做法有如下记载：“桃烂自零者，收取，内之于瓮中，以物盖口。七日之后，既烂，漉去皮核，密封闭之。三七日酢成，香美可食。”下列相关叙述错误的是（    ） A．与未成熟的桃子相比，成熟的桃子单糖含量更高，利于酵母菌发酵 B．“以物盖口”和“密封闭之”都是为了防止杂菌污染、创设无氧环境 C．制作桃醋主要是醋酸菌的作用，其代谢类型为异养需氧型 D．“七日之后”发酵液中的pH会降低，其表面可能形成一层菌膜 3．古徽州有许多美食深受人们喜爱，如徽州毛豆腐、灵山酒酿、臭鳜鱼、徽州臭豆腐等。制作臭豆腐时需要将豆腐浸入含有乳酸菌和芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，相关叙述正确的是（    ） A．卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌相互独立，没有种间关系 B．制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基 C．徽州毛豆腐中的毛霉、曲霉产生的蛋白酶能促进大豆蛋白质、脂肪分解，丰富营养成分 D．乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳，需定期排气 4．随着工业的发展，土壤重金属污染日益严重，对动植物的生长有严重的危害作用。科研人员欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，部分实验流程如图。下列相关叙述错误的是（    ）    A．选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌 B．若接种I是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始 C．固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的 D．图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性和修复能力 5．某种物质S（一种含有C、H、O的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。下列相关叙述正确的是（　　） A．甲、乙培养基都是选择培养基，其中Y应是凝固剂琼脂 B．甲培养基中进行的是扩大培养，扩大培养后稀释度数越低越好 C．在乙培养基上统计活菌时，平板上的一个菌落就是一个细菌 D．多次筛选的过程是诱导细菌发生基因突变，产生高效降解S的菌株 6．获取纯净微生物的关键在于无菌技术，主要包括消毒和灭菌。下列叙述错误的是（　　） A．牛奶一般通过100℃煮沸5～6min来消毒 B．紫外线照射30min可以杀死物体表面的微生物 C．吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌 D．接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌 7．培养基是指供微生物、植物组织和动物组织生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。已知青霉素可抑制细菌生长。下列有关培养基及其配制过程的叙述，错误的是（    ） A．培养基中一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等主要营养物质 B．根据微生物对碳源需求上的差别，可在培养基中增减不同的碳源 C．培养基中添加青霉素可将真菌从混有细菌的培养基上选择出来 D．微生物只能在固体培养基表面生长 8．下列对发酵工程的叙述，正确的是（　　） A．发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以利用微生物来进行发酵 B．利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植株生长 C．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 D．啤酒发酵过程中大部分糖的分解在主发酵阶段完成，代谢物的生成在后发酵阶段完成 9．下列关于动物细胞融合的说法，错误的是（    ） A．动物细胞融合是指两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程 B．动物细胞融合后形成的单核细胞称为杂交细胞 C．灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导细胞融合 D．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 10．动物细胞培养是动物克隆的基础，如下图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③分别表示其结果，请据图回答，下列说法正确的是（　　） A．a如果是核移植技术，则①体现了动物细胞的全能性 B．b如果是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 C．c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表型一定相同 D．体外受精获得的早期胚胎在培养液中培养到桑葚胚或原胚期才可进行移植 11．体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述正确的是（　　） A．①过程可用机械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等处理的方法获得细胞悬液 B．③过程中加入微载体为细胞提供更大附着面积，使细胞间不出现接触抑制，产量增加 C．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时既要提供O2也要提供CO2 D．肌肉干细胞属于成体干细胞，能够分化成特定的细胞和组织，具有全能性 12．下列关于植物细胞工程及其应用的叙述，正确的是（    ） A．生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是进行远缘植物体细胞杂交 B．植物细胞培养技术的原理是植物细胞的全能性 C．生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响离体植物细胞的发育方向 D．进行体细胞杂交前，必须用胰蛋白酶和胶原蛋白酶去除细胞壁 13．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（    ） A．图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤 B．图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行 C．若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株体细胞染色体数目最多可达到64条 D．病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例最小的植株抗病性最强 14．科研人员利用两种植物进行体细胞杂交时，各组分别加入不同浓度的PEG来促进原生质体融合，其他条件均相同，结果如下表。下列叙述错误的是（    ） PEG浓度/% 25 30 35 40 45 融合率/% 10 12 15 30 20 A．植物体细胞融合前需先用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B．原生质体融合利用了细胞膜具有流动性的原理 C．低浓度PEG促进原生质体融合，高浓度则抑制融合 D．融合后的细胞经组织培养得到的一般为多倍体植株 15．让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断，下列说法正确的是（    ） A．图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等 B．小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同，小羊a与羊N的性状表现相同 C．依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛”状 D．若研究发现羊N产奶率高是因为细胞中线粒体基因的表达产物丰富，则小羊a会有这一优良性 16．“嵌合体”是指由两个或两个以上具有不同遗传物质的细胞系形成的综合体。某大学利用二倍体小鼠和相应生物技术成功培育出作为科研动物的“嵌合体小鼠”。下列相关叙述正确的是（    ）    A．该实验成功的技术基础是动物细胞培养和动物细胞融合 B．“嵌合体小鼠”依然是二倍体 C．图中囊胚的细胞基因型都相同 D．代孕母鼠不需同期发情处理操作 17．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（    ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 D．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 18．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，染色体全部来自父系的“合子”致死。下列相关叙述错误的是（    ） A．“半同卵双胞胎”的产生与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关 B．细胞a的染色体组成为MP1，则细胞c的染色体组成为P1P1或MM C．排卵是卵子从卵泡中排出的过程，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ D．这对小姐弟来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的常染色体可能不同 19．下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（　　）    A．步骤①的操作不需要在无菌环境中进行 B．步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C．步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理 D．步骤④培养过程中不会发生基因突变 20．“工欲善其事，必先利其器”。下列有关重组DNA技术的基本工具的相关表述正确的是（　　） A．限制酶均能特异性地识别6个核苷酸序列 B．DNA连接酶可以将配对的碱基通过氢键连接起来 C．作为载体的质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因 D．—CATG↓—和—G↓GTACC—序列被限制酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接 21．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（    ） A．DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精，利用这一原理初步分离DNA与蛋白质 B．将研磨液过滤到烧杯中，在冰箱放置一段时间后，上清液中含DNA和蛋白质 C．将析出的丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂在沸水浴下鉴定DNA D．实验结果变色不明显，可能是研磨不充分导致DNA不能从细胞核中充分释放 22．限制酶SpeI、EcoRV和XbaI的识别序列及其切割位点如图所示。下列说法错误的是（　　） A．大多数限制酶识别的序列是由6个 B．SpeI和XbaI切割出的DNA片段可形成重组DNA分子 C．EcoRV切割出的DNA片段可用E．coliDNA连接酶连接 D．三种限制酶发挥催化作用的化学键均为磷酸二酯键 23．乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量。酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌内催化乳酸生成的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的酵母工程菌株。如图为通过双酶切构建重组质粒的过程。相关叙述正确的是（    ） A．用PCR技术获取该目的基因时，经PCR技术扩增n次需引物1数量为（2n+1-2）/2个 B．重组质粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体 C．基因表达载体中应带有乳酸菌LDH基因自身的启动子 D．酵母工程菌培育成功的标志是产生乳酸脱氢酶 24．下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，下列叙述错误的是（    ）   A．图中①一般经胰蛋白酶处理可以得到③ B．在②进入③之前要用限制酶、DNA连接酶和载体等工具来构建基因表达载体 C．一般情况下，用雌激素处理良种母牛可以获得更多卵母细胞 D．⑧是⑦生出的后代，但⑧的遗传性状和荷斯坦奶牛最相似 25．对水稻品种“淮稻7号”诱变获得突变体植株（基因型为aa．a基因位于9号染色体上），分析突变体的a基因全序列及其编码产物发现，突变体的a基因是野生型水稻的A基因内插入654 bp（碱基对）片段形成的。比对水稻基因组发现．野生型水稻的3号染色体上也存在上述654 bp序列。为探究突变体产生的原因，在野生型水稻的3号染色体和突变体水稻的9号染色体上654 bp序列外侧各设计一对引物，对野生型和突变体基因组DNA分别进行PCR，产物的凝胶电泳结果如图（M为核酸分子量大小的标准参照物）。下列相关叙述正确的是（    ）   A．图示结果在自然条件下就能观察到 B．配置好的琼脂糖溶液需冷却至30℃后才能倒入模具 C．在凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子大小有关 D．突变体的形成是因为3号染色体上的654 bp序列移接到了9号染色体上 二、非选择题：共4题，共50分 26．（9分）微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题：   (1)已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是 。依照物理性质划分，驯化培养基属于 培养基，其中蛋白胨可提供 （至少答两点）。 (2)用于筛选的样品应来自 的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为 。 (3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的多个相同培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中 ，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、253，测得培养基C中菌落数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为 mL。该统计数据往往比活菌的实际数目 （填“多”或“少”）理由是 。 27．（15分）下图为利用某种低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。请回答下列问题： (1)过程①应将甲、乙两种植物细胞分别置于含有 酶的 （选填“低渗”“等渗”或“高渗”）溶液中，以制备原生质体甲′和乙′。 (2)植物丙′的体细胞中有 个染色体组，得到的杂种植株，理论上是否可育？ ，简要阐述理由： 。为筛选出耐酸的植物丙′，过程③所用的固体培养基需 。 (3)该育种技术涉及的生物学原理有 （填标号）。 ①细胞膜的流动性   ②细胞膜的选择透过性   ③植物细胞的全能性  ④细胞增殖 (4)利用单倍体育种技术，也可以利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁。下表是相关实验中的一些步骤，请根据题意完成以下表格。 实验目的 方法步骤要点 收集花粉 ①将品种甲和品种乙 后获得F1，收集F1的花粉 获得可增殖分化的细胞 ②利用 技术中的脱分化过程，获得 诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的 ，实现诱导分化 获得染色体加倍的植株 ④用 处理单倍体幼苗 获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子 28．（12分）双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： (1)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 ，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 (2)图2方框内至少需要经过 次筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤细胞。单克隆杂交-杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，无菌无毒的环境，适宜的 ，和适宜的气体环境等。 (3)临床试验发现，从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体治疗效果大大降低。因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低 。 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。 29．（14分）人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。下图所示为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。请据图回答问题： (1)人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有 （答出两点）等。 (2)若选用牛作为受体动物，可将人血清蛋白基因与 等调控组件重组在一起，通过 方法将目的基因导入牛的 中，然后使其发育成转基因牛。 (3)据图分析，在构建基因表达载体时，选择 作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率，其原因是 。 (4)为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后，进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基含新霉素，乙培养基含新霉素和氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上 （填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上 （填“能”或“不能”）生存。 (5)据下图分析，利用PCR技术获取HSA基因时，应选择甲、乙、丙、丁四种引物中的 ，需扩增 次后得到HSA目的基因。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $$2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 生物·答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 1,答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 考生禁填： 缺考标记 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码 ▣ 违纪标记 口 2.选择题必须用2B铅笔填涂：非选择题必须用0.5m黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答趣：字体工整、笔迹清嘶。 3.请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效：在草稿纸、试题卷上答题无效， 正确填涂■ 4. 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 错误填涂[×1「]I/1 “、 选择题：本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每小趣给出的四个选项中，只有一项是符 合题目要求的。 LAJIBJICJIDI 6[AIIBIICIID] 11[A][B]IC]ID] 161AJIBJICJID] 2JAJIBIICJID] 7AJIBIICIID] 12AJIBIIC]ID] 17AJIBIICIIDI 3AJ[BI[CIID] 8AIIBIIC][D] 13[AI[BIICIID] 18[A][B]ICIID] AJIBIICJID] 9.AJ[BIICI[DI 14AI[BIICI[D] 1[A][BI[CIID] 51AJIBJICIID] 10.[AJIBIIC]ID] 151AIIBJICIID] 20.[A]IB]ICIID] 21[AJBJICI[DI 22AJIBJICIIDI 23[AJIB]ICI[D] 24AJIBIICIIDI 251AJBIICI[DI 二、 非选择题：本题共4小题，共50分。 26.(9分) (1) (2) (3) 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 27.(15分) (1) (2) (3) (4) 28.(12分) (1) (2) (3) (4) 29.(14分) (1) (2) (3) (4) (5) 2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：60分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修三前三章 5． 难度系数：0．75 6．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共25个小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．如下是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是（    ）    A．挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗 B．果酒制作时，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约2/3的空间，有利于增加酵母菌数量 C．为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种 D．制作果醋时，利用了醋酸菌在无氧条件下产生了乙酸 【答案】C 【分析】主要考查果酒和果醋的制作，A过程是酒精发酵，A过程完成后，要进行果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧菌，最适温度是30~35℃，故转入醋酸发酵后，要持续通气，提高温度。 【详解】 A、为防止杂菌污染，应该在冲洗之后去 除腐烂的籽粒和枝梗，A错误； B、果酒制作时，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，可以防止发酵液的溢出，B错误； C、为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种，C正确。 D、制作果醋时，利用了醋酸菌在有氧条件下产生了乙酸，D错误。 故选C。 2．《齐民要术》记载了古人在生产中运用发酵技术加工食品积累的许多宝贵经验。其中关于桃醋的做法有如下记载：“桃烂自零者，收取，内之于瓮中，以物盖口。七日之后，既烂，漉去皮核，密封闭之。三七日酢成，香美可食。”下列相关叙述错误的是（    ） A．与未成熟的桃子相比，成熟的桃子单糖含量更高，利于酵母菌发酵 B．“以物盖口”和“密封闭之”都是为了防止杂菌污染、创设无氧环境 C．制作桃醋主要是醋酸菌的作用，其代谢类型为异养需氧型 D．“七日之后”发酵液中的pH会降低，其表面可能形成一层菌膜 【答案】B 【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是—种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解为醋酸; 当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-35℃。 【详解】A、桃子在成熟过程中，多糖转化成单糖，单糖含量不断增高，利于酵母菌发酵，A正确； B、“密封闭之”的主要目的只是为了防止杂菌污染，醋酸发酵是需氧过程，B错误； C、制作果醋主要是醋酸菌的作用，醋酸菌是原核生物，其代谢类型为异养需氧型，C正确； D、“七日之后”主要进行醋酸发酵，该过程产生的醋酸可以使发酵液中的pH降低，发酵液表面会出现一层醋酸菌膜，D正确。 故选B。 3．古徽州有许多美食深受人们喜爱，如徽州毛豆腐、灵山酒酿、臭鳜鱼、徽州臭豆腐等。制作臭豆腐时需要将豆腐浸入含有乳酸菌和芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，相关叙述正确的是（    ） A．卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌相互独立，没有种间关系 B．制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基 C．徽州毛豆腐中的毛霉、曲霉产生的蛋白酶能促进大豆蛋白质、脂肪分解，丰富营养成分 D．乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳，需定期排气 【答案】B 【分析】腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15°C~18°C；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。 【详解】A、乳酸菌和芽孢杆菌生活在同一环境下会竞争营养物质和空间等，故卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌存在（种间）竞争关系，A错误； B、制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基，能够给微生物提供其生长所需的营养，B正确； C、酶具有专一性，毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸，C错误； D、乳酸菌发酵产物是乳酸，不会产生二氧化碳，D错误。 故选B。 4．随着工业的发展，土壤重金属污染日益严重，对动植物的生长有严重的危害作用。科研人员欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，部分实验流程如图。下列相关叙述错误的是（    ）    A．选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌 B．若接种I是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始 C．固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的 D．图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性和修复能力 【答案】D 【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质，pH和O2的需求。筛选目的微生物最好应该到目的微生物含量丰富的地方取样，如果没有这样的环境，应该人为创造适宜其生长的环境。 【详解】A、获取目的菌应从富含该菌的环境中进行，本操作欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，工厂的重金属较多，故选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌，A正确； B、若接种I是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始，保证下一次划线的菌落来自上一次的末端，这样随着划线次数增加，最终能得到单菌落，B正确； C、本操作欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的，C正确； D、图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性，但不一定具有修复能力，还需通过实验进一步验证，D错误。 故选D。 5．某种物质S（一种含有C、H、O的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。下列相关叙述正确的是（　　） A．甲、乙培养基都是选择培养基，其中Y应是凝固剂琼脂 B．甲培养基中进行的是扩大培养，扩大培养后稀释度数越低越好 C．在乙培养基上统计活菌时，平板上的一个菌落就是一个细菌 D．多次筛选的过程是诱导细菌发生基因突变，产生高效降解S的菌株 【答案】A 【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】A、根据题干信息可知，甲中组分含有无机盐、水和S，S作为该培养基中唯一的碳源和氮源，只允许能降解S的细菌菌种生长，为选择培养基，由图可知，甲培养基是液体培养基，乙是固体培养基，二者的组分差别在于Y，这说明Y是凝固剂，是琼脂，同时也可说明乙也是选择培养基，A正确； B、稀释涂布平板法中，稀释度数要足够高且适宜，具体稀释倍数由菌液浓度决定，否则得不到单个细菌繁殖而成的菌落，B错误； C、当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此，统计结果中，平板上的一个菌落可能是一个或多个细菌，C错误； D、多次筛选是通过人为营造只有S提供碳源和氮源的环境，选择出适应该环境的能分解S的细菌菌株，即目的是从多种能降解物质S的菌株中将高效降解的菌株筛选出来，而不是诱导基因突变，D错误。 故选A。 6．获取纯净微生物的关键在于无菌技术，主要包括消毒和灭菌。下列叙述错误的是（　　） A．牛奶一般通过100℃煮沸5～6min来消毒 B．紫外线照射30min可以杀死物体表面的微生物 C．吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌 D．接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌 【答案】A 【分析】无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法，适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。 【详解】A、牛奶不耐高温，牛奶的消毒应采用巴氏消毒法，即在62-65℃条件下消毒30分钟或在80-90℃条件下处理30s～1分钟，A错误； B、接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min进行消毒，以杀死物体表面或空气中的微生物，B正确； C、干热灭菌法是在干燥环境下用高温杀死细菌和细菌芽胞的技术，吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌，C正确； D、接种环、试管口等实验中频繁使用的常使用灼烧灭菌法，D正确。 故选A。 7．培养基是指供微生物、植物组织和动物组织生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。已知青霉素可抑制细菌生长。下列有关培养基及其配制过程的叙述，错误的是（    ） A．培养基中一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等主要营养物质 B．根据微生物对碳源需求上的差别，可在培养基中增减不同的碳源 C．培养基中添加青霉素可将真菌从混有细菌的培养基上选择出来 D．微生物只能在固体培养基表面生长 【答案】D 【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。培养基的成分一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、培养基中一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等主要营养物质，A正确； B、根据微生物对碳源需要的差别，在培养基中增减不同的碳源，不同碳源可以对微生物起到选择作用，B正确； C、青霉素能抑制细菌的繁殖，所以要将真菌从其他细菌中分离出来，常采用向培养基中添加青霉素，配制成选择培养基，C正确； D、微生物也可在琼脂固体培养基内部或液体培养基中生长，D错误。 故选D。 8．下列对发酵工程的叙述，正确的是（　　） A．发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以利用微生物来进行发酵 B．利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植株生长 C．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 D．啤酒发酵过程中大部分糖的分解在主发酵阶段完成，代谢物的生成在后发酵阶段完成 【答案】B 【分析】1、微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长。 2、微生物含有丰富的蛋白质。以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白，用单细胞蛋白制成的微生物饲料，能使家畜、家禽增重快，产奶或产蛋量显著提高。 【详解】A、发酵工程与传统发酵技术都需要利用微生物来进行发酵，A错误； B、根瘤菌肥作为微生物肥料，可以通过根瘤菌的固氮作用，增加土壤中的氮肥量，促进植物生长，B正确； C、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，C错误； D、啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵；大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，D错误。 故选B。 9．下列关于动物细胞融合的说法，错误的是（    ） A．动物细胞融合是指两个或多个细胞结合形成一个细胞的过程 B．动物细胞融合后形成的单核细胞称为杂交细胞 C．灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导细胞融合 D．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 【答案】C 【分析】动物细胞融合：（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程；融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞；（2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等；（3）动物细胞融合的意义：打破了生殖隔离，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；（4）最主要的用途：制备单克隆抗体。 【详解】A、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般为两个细胞的融合，A正确； B、动物细胞融合后，原来两个或多个动物细胞的遗传信息重新形成一个单核细胞，称为杂交细胞，例如骨髓瘤细胞和浆细胞融合，形成杂交瘤细胞，B正确； C、灭活病毒让两个细胞的糖蛋白失去活性，相互不能识别，从而诱导细胞融合，而非“通过溶解磷脂双分子层”，C错误； D、细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，克服远缘杂交不亲和的障碍，使远缘杂交成为可能，D正确。 故选C。 10．动物细胞培养是动物克隆的基础，如下图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③分别表示其结果，请据图回答，下列说法正确的是（　　） A．a如果是核移植技术，则①体现了动物细胞的全能性 B．b如果是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 C．c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表型一定相同 D．体外受精获得的早期胚胎在培养液中培养到桑葚胚或原胚期才可进行移植 【答案】B 【分析】动物细胞核移植技术表面动物细胞核具有全能性；体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物；胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。 【详解】A、a如果是核移植技术，则①体现了动物细胞核的全能性，A错误； B、b如果是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该过程可获得大量的胚胎，因而可为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，B正确； C、胚胎分割技术所得个体的基因型完全相同，但表现型不一定完全相同，因为表现型还受环境的影响，即c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型相同，但表型不一定相同，C错误； D、体外受精获得的早期胚胎在培养液中培养到桑葚胚或囊胚阶段才可进行移植，D错误。 故选B。 11．体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述正确的是（　　） A．①过程可用机械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等处理的方法获得细胞悬液 B．③过程中加入微载体为细胞提供更大附着面积，使细胞间不出现接触抑制，产量增加 C．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时既要提供O2也要提供CO2 D．肌肉干细胞属于成体干细胞，能够分化成特定的细胞和组织，具有全能性 【答案】C 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、①过程为制备细胞悬液的过程，可用机械的方法或用胰蛋白酶处理的方法获得细胞悬液，胃蛋白酶催化的酸性环境对细胞有害，A错误； B、③过程中加入微载体为细胞提供了更大的附着面积，但细胞间会出现接触抑制，B错误； C、③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时提供95%空气+5%CO2，C正确； D、肌肉干细胞属于成体干细胞，能够分化成特定的细胞和组织，但不具有发育成完整个体的能力，不具有全能性，D错误。 故选C。 12．下列关于植物细胞工程及其应用的叙述，正确的是（    ） A．生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是进行远缘植物体细胞杂交 B．植物细胞培养技术的原理是植物细胞的全能性 C．生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响离体植物细胞的发育方向 D．进行体细胞杂交前，必须用胰蛋白酶和胶原蛋白酶去除细胞壁 【答案】C 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是取茎尖分生组织进行培养，A错误； B、植物细胞培养技术的原理是细胞增殖，B错误； C、生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响离体植物细胞的发育方向，当生长素含量偏高时有利于生根，而生长素含量偏低时，可促进生芽，C正确； D、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故进行体细胞杂交前，必须用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，D错误。 故选C。 13．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（    ） A．图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤 B．图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行 C．若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株体细胞染色体数目最多可达到64条 D．病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例最小的植株抗病性最强 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质；植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍； 图谱分析，4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，说明是杂种细胞，而1、2、3号个体只有紫罗兰中的蛋白质，说明不是杂种细胞。 【详解】A、图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤，其中原生质体融合过程依赖膜的流动性实现，A正确； B、为保证组织细胞的活性，图1过程①应在等渗或略微高渗的溶液中进行，过程②应在液体培养基中进行，B错误； C、若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株是杂种植株，其细胞在有丝分裂后期染色体数目为64条，C正确； D、病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，若病斑面积占叶片总面积比例越小，则说明该植株抗病性越强，即病斑面积占叶片总面积比例最小的植株是抗病性最强的个体，D正确。 故选B。 14．科研人员利用两种植物进行体细胞杂交时，各组分别加入不同浓度的PEG来促进原生质体融合，其他条件均相同，结果如下表。下列叙述错误的是（    ） PEG浓度/% 25 30 35 40 45 融合率/% 10 12 15 30 20 A．植物体细胞融合前需先用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B．原生质体融合利用了细胞膜具有流动性的原理 C．低浓度PEG促进原生质体融合，高浓度则抑制融合 D．融合后的细胞经组织培养得到的一般为多倍体植株 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。 【详解】A、植物体细胞融合前需先用纤维素酶和果胶酶处理细胞，去除细胞壁，A正确； B、原生质体融合的原理是细胞膜具有流动性，只有依赖于细胞膜的流动性，原生质体才能融合，B正确； C、由表可知，PEG浓度为45%时，融合率较40%时低，但仍为促进融合，C错误； D、融合后的细胞的染色体是两种植物细胞染色体的总和，经组织培养得到的一般为多倍体植株，D正确。 故选C。 15．让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断，下列说法正确的是（    ） A．图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等 B．小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同，小羊a与羊N的性状表现相同 C．依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛”状 D．若研究发现羊N产奶率高是因为细胞中线粒体基因的表达产物丰富，则小羊a会有这一优良性 【答案】C 【分析】据图分析，图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞去核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行胚胎分割移植技术获得小羊 abc。 【详解】A、图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等，没有细胞融合，A错误； B、题图中由早期胚胎到小羊a、小羊b、小羊c的过程利用了胚胎分割、胚胎移植技术，由于这些个体都是由一个细胞（重组细胞）发育而来的，故三者表现出的性状应该基本相同，B错误； C、生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控，相互影响的，所以依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊—牛”，C正确； D、由重组细胞细胞培养、胚胎分割、胚胎移植后获得的小羊a，其细胞核遗传物质来自羊N，细胞质遗传物质来自羊O，小羊a的性状与羊N不完全相同，羊N细胞的线粒体中的遗传物质不会遗传给小羊a，D错误。 故选C。 16．“嵌合体”是指由两个或两个以上具有不同遗传物质的细胞系形成的综合体。某大学利用二倍体小鼠和相应生物技术成功培育出作为科研动物的“嵌合体小鼠”。下列相关叙述正确的是（    ）    A．该实验成功的技术基础是动物细胞培养和动物细胞融合 B．“嵌合体小鼠”依然是二倍体 C．图中囊胚的细胞基因型都相同 D．代孕母鼠不需同期发情处理操作 【答案】B 【分析】动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 【详解】A、由题图可知，白鼠的8细胞胚和黑鼠的8细胞胚合并形成16细胞胚，后经过胚胎发育过程形成囊胚，然后植入代孕母鼠，分娩得到嵌合体小鼠。该实验过程中没有进行动物细胞融合，A错误； B、嵌合体小鼠是由白鼠的8细胞胚和黑鼠的8细胞胚合并形成的，没有发生动物细胞融合，因此嵌合体小鼠仍为二倍体，B正确； C、图中囊胚是由白鼠的8细胞胚和黑鼠的8细胞胚合并形成的，其基因型不一定相同，C错误； D、胚胎移植时，代孕母鼠和供体母鼠需进行同期发情处理，使同种动物的供、受体生殖器官的生理变化相同，以便为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境，D错误。 故选B。 17．2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（    ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 D．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 【答案】D 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。 【详解】A、科学家多年的反复实验带来的娴熟技术减少对卵细胞的伤害，提高了核移植技术的成功率，A正确； B、诱导动物细胞融合的方法可以是灭活的病毒，B正确； C、上述技术有助于加快灵长类动物的克隆技术进步，加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程，C正确； D、重构胚中有部分基因进行选择性表达，本质可能是表观遗传修饰，所以需要用组蛋白去甲基化酶的mRNA来降低组蛋白甲基化水平，组蛋白脱乙酰化抑制剂来提高组蛋白乙酰化水平，从而促进基因表达，D错误。 故选D。 18．目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，染色体全部来自父系的“合子”致死。下列相关叙述错误的是（    ） A．“半同卵双胞胎”的产生与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关 B．细胞a的染色体组成为MP1，则细胞c的染色体组成为P1P1或MM C．排卵是卵子从卵泡中排出的过程，图中卵子发育到减数分裂Ⅱ D．这对小姐弟来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的常染色体可能不同 【答案】B 【分析】1、受精阶段主要包括：精子穿越放射冠和透明带，进入卵黄膜，原核形成和配子结合。 2、阻止多精入卵的两道屏障：透明带反应和卵黄膜封闭作用。 3、多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢。MⅡ是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。 【详解】A、“半同卵双胞胎”的产生是由于两个精子与一个卵细胞受精引起的，与透明带反应和卵细胞膜反应异常有关，A正确； BD、来自母系的染色体为M，来自父系的染色体为P1、P2，经过复制后，染色体进行组合，若细胞a的染色体组成为MP1，细胞c的染色体均来自父亲，其染色体组成为P1P2，细胞b的染色体组成为MP2，故这对小姐弟来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的常染色体可能不同，B错误，D正确； C、排卵是指卵子从卵泡中排出，此时的卵子通常是处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞。卵子发育到减数第二次分裂中期才具备受精的能力，故图中卵子发育到减数分裂Ⅱ的中期，C正确。 故选B。 19．下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（　　）    A．步骤①的操作不需要在无菌环境中进行 B．步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C．步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理 D．步骤④培养过程中不会发生基因突变 【答案】C 【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、动物细胞培养过程需要无菌操作，故步骤①的操作需要在无菌环境中进行，A错误； B、动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，使其分散成单个细胞，制成细胞悬液，B错误； C、③到④为传代培养的分瓶操作过程，需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，使之分散成单个细胞，再分瓶培养，C正确； D、步骤④为传代培养过程，该过程中发生细胞的有丝分裂，可能会发生基因突变，D错误。 故选C。 20．“工欲善其事，必先利其器”。下列有关重组DNA技术的基本工具的相关表述正确的是（　　） A．限制酶均能特异性地识别6个核苷酸序列 B．DNA连接酶可以将配对的碱基通过氢键连接起来 C．作为载体的质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因 D．—CATG↓—和—G↓GTACC—序列被限制酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接 【答案】C 【分析】1、限制酶：（1）特点：能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。（2）识别序列：大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。 2、DNA连接酶（将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键）：（1）种类： E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。（2）作用：E.coli DNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来，不能连接具有平末端的DNA片段；而T4 DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率相对较低。 3、载体（通常是利用质粒作为载体，将基因送入细胞）：（1）质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。（2）质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点供外源DNA片段(基因)插入其中。携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。这些质粒上常有特殊的标记基因，如四环素抗性基因、氨基青霉素抗性基因等，便于重组DNA分子的筛选。 【详解】A、切割质粒的限制酶具有特异性，不是都能特异性地识别6个核苷酸序列，A错误； B、DNA连接酶可以将配对的两个DNA片段之前通过磷酸二酯键连接起来，B错误； C、载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，C正确； D、—CATG↓—和—G↓GTACC—序列被限制酶切出的黏性末端不同，不能用DNA连接酶连接，D错误。 故选C。 21．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（    ） A．DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精，利用这一原理初步分离DNA与蛋白质 B．将研磨液过滤到烧杯中，在冰箱放置一段时间后，上清液中含DNA和蛋白质 C．将析出的丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂在沸水浴下鉴定DNA D．实验结果变色不明显，可能是研磨不充分导致DNA不能从细胞核中充分释放 【答案】A 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度，洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响。 【详解】A、DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离，A错误； B、DNA提取的实验中，要将研磨液过滤到烧杯中，在冰箱放置一段时间后，取上清液，所以上清液中含有DNA和蛋白质，低温可以防止DNA被分解，B正确； C、DNA鉴定时，将提取到的丝状物溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，在水浴加热下呈现蓝色，C正确； D、如果出现实验结果变色不明显，可能是研磨不充分导致DNA不能从细胞核中充分释放，提取的DNA分子减少，D正确。 故选A。 22．限制酶SpeI、EcoRV和XbaI的识别序列及其切割位点如图所示。下列说法错误的是（　　） A．大多数限制酶识别的序列是由6个 B．SpeI和XbaI切割出的DNA片段可形成重组DNA分子 C．EcoRV切割出的DNA片段可用E．coliDNA连接酶连接 D．三种限制酶发挥催化作用的化学键均为磷酸二酯键 【答案】C 【分析】1、限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 2、DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 【详解】A、限制酶的识别序列有4个、6个或8个核苷酸组成，大多数限制酶识别的序列是由6个，A正确； B、由图可知，经Spe I和Xba I切割出的DNA片段，具有相同的黏性末端，所以可形成重组DNA分子，B正确； C、E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端，而经EcoR V切割出的DNA片段为平末端，C错误； D、限制酶的作用特点是识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点进行切割，破坏的是磷酸二酯键，所以三种限制酶发挥催化作用的化学键均为磷酸二酯键，D正确。 故选C。 23．乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量。酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌内催化乳酸生成的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的酵母工程菌株。如图为通过双酶切构建重组质粒的过程。相关叙述正确的是（    ） A．用PCR技术获取该目的基因时，经PCR技术扩增n次需引物1数量为（2n+1-2）/2个 B．重组质粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体 C．基因表达载体中应带有乳酸菌LDH基因自身的启动子 D．酵母工程菌培育成功的标志是产生乳酸脱氢酶 【答案】A 【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建（核心）；（3）将目的基因导入受体细胞；（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、PCR技术扩增n次，根据DNA分子半保留复制特点可知，共有2n-1对引物参与子代DNA分子的合成，故引物1的数量为2n-1=（2n+1-2）/2个，A正确； B、重组质粒含有尿嘧啶合成酶基因，故应以不能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体，便于后续筛选，B错误； C、构建基因表达载体时，目的基因应该插在启动子和终止子之间，据图可知，质粒上已经含有启动子，因此基因表达载体中不需要带有乳酸菌LDH基因自身的启动子，且酵母菌是真核生物，乳酸菌是原核生物，将原核基因导入真核细胞应该使用真核基因的启动子，C错误； D、由题意可知，酵母工程菌培育成功的标志是产生乳酸，D错误。 故选A。 24．下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，下列叙述错误的是（    ）   A．图中①一般经胰蛋白酶处理可以得到③ B．在②进入③之前要用限制酶、DNA连接酶和载体等工具来构建基因表达载体 C．一般情况下，用雌激素处理良种母牛可以获得更多卵母细胞 D．⑧是⑦生出的后代，但⑧的遗传性状和荷斯坦奶牛最相似 【答案】C 【分析】分析题图：①～③是动物细胞培养过程，需要先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞；a是早期胚胎培养形成囊胚；然后进行胚胎移植，⑤～⑥是代孕母牛产出转基因小牛的过程，并从成体转基因母牛乳汁提取人类血清白蛋白。 【详解】A、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，可以获取③单个细胞，A正确； B、将目的基因导入受体细胞之前，要构建基因表达载体，需要使用限制酶、DNA 连接酶和运载体等工具，B正确； C、一般情况下，用促性腺激素处理良种母牛可以获得更多卵母细胞，即进行超数排卵处理，C错误； D、⑧是⑦生出的后代，但⑧的遗传性状和荷斯坦奶牛最相似，因为它的遗传物质主要来自荷斯坦奶牛，D正确。 故选C。 25．对水稻品种“淮稻7号”诱变获得突变体植株（基因型为aa．a基因位于9号染色体上），分析突变体的a基因全序列及其编码产物发现，突变体的a基因是野生型水稻的A基因内插入654 bp（碱基对）片段形成的。比对水稻基因组发现．野生型水稻的3号染色体上也存在上述654 bp序列。为探究突变体产生的原因，在野生型水稻的3号染色体和突变体水稻的9号染色体上654 bp序列外侧各设计一对引物，对野生型和突变体基因组DNA分别进行PCR，产物的凝胶电泳结果如图（M为核酸分子量大小的标准参照物）。下列相关叙述正确的是（    ）   A．图示结果在自然条件下就能观察到 B．配置好的琼脂糖溶液需冷却至30℃后才能倒入模具 C．在凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子大小有关 D．突变体的形成是因为3号染色体上的654 bp序列移接到了9号染色体上 【答案】D 【分析】电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。 【详解】A、凝胶电泳结果需要在紫外灯照射下才能被检测出来，A错误； B、琼脂糖溶液冷却30℃后会凝固，无法倒入模具中，B错误； C、在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子大小、构象和凝胶浓度等有关，C错误； D、根据电泳图谱可知，野生型3号染色体上的片段为754 bp，突变体3号染色体上的片段为100 bp，减少了654 bp，野生型9号染色体上的片段为200 bp，突变体9号染色体上的片段为854 bp，增加了654 bp，由此推测3号染色体上的654 bp序列移接到了9号染色体上，形成了突变体，D正确。 故选D。 二、非选择题：共4题，共50分 26．（9分）微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题：   (1)已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是 。依照物理性质划分，驯化培养基属于 培养基，其中蛋白胨可提供 （至少答两点）。 (2)用于筛选的样品应来自 的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为 。 (3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的多个相同培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中 ，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、253，测得培养基C中菌落数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为 mL。该统计数据往往比活菌的实际数目 （填“多”或“少”）理由是 。 【答案】(1) 敌敌畏 液体 氮源、碳源、维生素 (2) 常年施用敌敌畏 平板划线法 (3) 敌敌畏的剩余量 0.2 少 两个或多个细菌形成一个菌落 【分析】培养基从功能上可划分为选择培养基和鉴别培养基，从物理性质上可划分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基，从成分上可划分为天然培养基和合成培养基。 【详解】（1）本实验目的是筛选抗敌敌畏的微生物，故驯化时，培养液逐步加入的物质X是敌敌畏，这样操作的目的是筛选出高效分解敌敌畏的微生物；由图可知，该驯化培养基中并未加入凝固剂如琼脂等，故依照物理性质划分，驯化培养基属于液体培养基；蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，可以为微生物生长提供碳源、氮源和维生素。 （2）该实验的目的是从土壤中筛选能够高效降解有机磷农药—敌敌畏的微生物，故用于筛选的样品应来自常年施用敌敌畏的土壤，这样能够增加获得目的菌的概率。结合题图可知，将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为平板划线法。 （3）单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，单位时间内剩余的敌敌畏越少，说明筛选出的微生物分解敌敌畏的能力越强，故通过测定培养瓶中敌敌畏的剩余量，可筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物。 微生物计数时应选择菌落数目在30～300之间的进行计数，统计菌落数分别为250、247、312、253，则菌落的平均数（250+247+253）÷3=250个，图中稀释倍数是104，由公式可知250÷Y×104=1.25×107个/mL可知，涂布菌液Y=0.2mL。 用该方法计数时，由于可能存在两个或多个细菌形成一个菌落，所以计数的微生物数目比实际活菌数少。 27．（15分）下图为利用某种低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。请回答下列问题： (1)过程①应将甲、乙两种植物细胞分别置于含有 酶的 （选填“低渗”“等渗”或“高渗”）溶液中，以制备原生质体甲′和乙′。 (2)植物丙′的体细胞中有 个染色体组，得到的杂种植株，理论上是否可育？ ，简要阐述理由： 。为筛选出耐酸的植物丙′，过程③所用的固体培养基需 。 (3)该育种技术涉及的生物学原理有 （填标号）。 ①细胞膜的流动性   ②细胞膜的选择透过性   ③植物细胞的全能性  ④细胞增殖 (4)利用单倍体育种技术，也可以利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁。下表是相关实验中的一些步骤，请根据题意完成以下表格。 实验目的 方法步骤要点 收集花粉 ①将品种甲和品种乙 后获得F1，收集F1的花粉 获得可增殖分化的细胞 ②利用 技术中的脱分化过程，获得 诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的 ，实现诱导分化 获得染色体加倍的植株 ④用 处理单倍体幼苗 获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子 【答案】(1) 纤维素酶和果胶 等渗 (2) 6 可育 杂种植株细胞中含有成对的同源染色体 将pH调为酸性 (3)①③④ (4) 植物体细胞杂交 植物组织培养 愈伤组织 生长素与细胞分裂素比例 秋水仙素 【分析】利用细胞工程技术培养杂种植株时，首先利用纤维素酶和果胶酶（①）处理细胞去除其细胞壁；甲乙两细胞的原生质体经诱导产生“甲'+乙'”，即融合的原生质体，其再生新的细胞壁，形成杂种细胞，杂种细胞经过②脱分化过程形成愈伤组织，再经过再分化过程形成植株丙'，该植株经过图中③过程的选择作用培养出高产耐酸植物丙。 【详解】（1）由植物细胞变成原生质体，需要去掉细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，所以应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁。为保证原生质体正常的形态，含有纤维素酶和果胶酶的溶液浓度应与细胞内的溶液等渗。 （2）植物丙'是甲和乙通过体细胞杂交形成的杂种植株，为异源多倍体，根据题意可知，某种耐酸植物甲（4N）有4个染色体组，高产植物乙（2N）有2个染色体组，因此丙'植株的体细胞中有6个染色体组，由于杂种植株细胞中含有成对的同源染色体，理论上是可育的。植物丙'有耐酸的特性，说明③过程为筛选耐酸的植株的过程，因此可知过程③所用的固体培养基需将pH值调整为酸性。 （3）原生质体融合过程利用了细胞膜的流动性原理，将杂种细胞培养为杂种植株利用了细胞增殖和植物体细胞具有全能性的原理，因此①③④符合题意。 （4）利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁，需要先将两种植物的优良基因集中到一个个体上，由于两种植物存在生殖隔离，因此不能杂交，故需要将品种甲和品种乙植物体细胞杂交后获得F1，收集F1的花粉；利用花药离体培养（植物组织培养）技术培养花粉，经过脱分化过程形成愈伤组织；由于不同阶段需要的生长素和细胞分裂素的比例不同，因此通过改变培养基中的生长素和细胞分裂素的浓度比例（激素比例），实现诱导分化；用一定浓度的秋水仙素（低温、温度骤变）处理单倍体幼苗，获得可育的品种，并通过筛选获得符合要求的植株。　　　　　　　　 28．（12分）双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： (1)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 ，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 (2)图2方框内至少需要经过 次筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤细胞。单克隆杂交-杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，无菌无毒的环境，适宜的 ，和适宜的气体环境等。 (3)临床试验发现，从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体治疗效果大大降低。因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低 。 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。 【答案】(1) 克隆化培养 （专一）抗体检测 (2) 2/两 温度、pH和渗透压 (3)免疫排斥反应 (4)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先将特定抗原注射到小鼠体内，使其发生相应特异性免疫反应，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再经两次筛选：第一次筛选是利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选是利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】（1）为选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞，进行克隆化培养。因此对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和（专一）抗体检测，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 （2）图2方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交—杂交瘤细胞；单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，无菌、无毒的环境，适宜的温度、pH和渗透压，适宜的气体环境等。 （3）由于从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体后会被人体免疫系统识别和清除，因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低免疫排斥反应。 （4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，避免了对正常细胞的损伤，因而对人体的副作用更小。 29．（14分）人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。下图所示为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。请据图回答问题： (1)人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有 （答出两点）等。 (2)若选用牛作为受体动物，可将人血清蛋白基因与 等调控组件重组在一起，通过 方法将目的基因导入牛的 中，然后使其发育成转基因牛。 (3)据图分析，在构建基因表达载体时，选择 作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率，其原因是 。 (4)为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后，进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基含新霉素，乙培养基含新霉素和氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上 （填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上 （填“能”或“不能”）生存。 (5)据下图分析，利用PCR技术获取HSA基因时，应选择甲、乙、丙、丁四种引物中的 ，需扩增 次后得到HSA目的基因。 【答案】(1)启动子、终止子 (2) 在乳腺中特异表达的基因的启动子（牛乳腺蛋白基因的启动子） 显微注射 受精卵 (3) EcoRⅠ和PstⅠ 这两种酶能切割质粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免质粒和目的基因自连及反接（这两种酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免质粒和目的基因的自身环化和反向连接） (4) 能 不能 (5) 乙、丙 3 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）基因工程的关键步骤是构建基因表达载体，基因表达载体主要由启动子、目的基因、标记基因和终止子组成，因此人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有启动子、终止子等。 （2）因为乳腺蛋白基因只能在乳腺细胞中表达，故要从奶牛的乳汁中获得人血清白蛋白，选用牛作为受体动物，则在构建基因的表达载体时，要将人血清白蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子调控组件重组在一起。根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。 （3）据图可知，BamH Ⅰ会切割目的基因，Tth Ⅲ 1会切割质粒中的复制原点，而EcoRⅠ和PstⅠ这两种酶能切割质粒和目的基因，不破坏所有抗性基因和复制原点等，且能够得到不同的黏性末端，避免质粒和目的基因自连及反接，因此在构建基因表达载体时，选择EcoRⅠ和PstⅠ作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率。 （4）分析题图可知，PstI破坏了氨苄青霉素抗性基因（Ampr），构建的重组质粒无氨苄青霉素抗性，但具有新霉素抗性基因，而甲培养基中含有新霉素，因此，含重组质粒的受体细胞能在甲培养基上生存；乙培养基中含有新霉素和氨苄青霉素，能杀死含有目的基因的受体细胞，不能在乙培养基中生存。 （5）PCR时，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的，因此据图分析，利用PCR技术获取HSA基因时，应选择乙、丙作为引物。扩增3次后得到HSA目的基因（第一次循环扩增出来的新片段很长，第二次循环以新的长片段为模板进行，但新片段的一端是引物开头的，所以第二个循环得到的片段就是我们需要的长度，但只是一条链，所以还不能分离出目的基因。第三次循环，当以第二次循环得到的新片段为模板时，因为这个片段的长度就是需要扩增的长度，当第三次循环完成时，这个片段是需要的长度，且是双链DNA，这就得到了需要的目的基因了）。 试卷第1页，共3页 / 学科网（北京）股份有限公司 $$