期中模拟测试卷-2024-2025学年高二生物下学期期中考点大串讲（苏教版2019）

2024-2024学年高二生物下学期期中模拟卷 一、单项选择题:共15题,每题2分,共30分。每题只有一个选项最符合题意。 1．稀释涂布平板法和稀释倒平板法是分离微生物的两种方法。稀释倒平板法是指将稀释的菌液和琼脂混合，然后将其倒入无菌培养皿中进行培养的方法。下列有关叙述错误的是（    ） A．可采用干热灭菌法对培养过程中所用的培养皿进行灭菌 B．两种方法均能得到由一个细菌繁殖而来的单菌落 C．稀释倒平板法能通过统计菌落数实现对样品活菌的计数 D．稀释倒平板法适合用于分离大肠杆菌等好氧型微生物 【答案】D 【分析】微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板、接种、划线、在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、 培养皿的灭菌一般有干热灭菌和高压蒸汽灭菌两种方法，A正确； B、当稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落一般是由一个细菌繁殖而来的，两种接种方法均能得到由一个细菌繁殖而来的单菌落，B正确； C、稀释倒平板法是将充分稀释的菌液和琼脂混合均匀后倒入无菌培养皿中培养，通过统计平板上的菌落数，结合稀释倍数等可以估算出样品中的活菌数，能实现对活菌的计数，C正确； D、大肠杆菌是好氧型微生物，稀释涂布平板法更适合用于分离大肠杆菌等好氧型微生物，因为该方法在涂布时相对能更好地保证菌液与空气接触，利于好氧菌生长，D错误。 故选D。 2．红豆杉是世界上公认濒临灭绝的天然珍稀植物，其含有的紫杉醇成分可有效抑制癌细胞生长与增殖。以人工种植的红豆杉鲜果为原料制作红豆杉全汁发酵果酒的工艺流程如图所示。下列说法错误的（    ） A．应采摘无病虫害、无腐烂、色泽鲜艳的新鲜红豆杉果实 B．调配糖度时加入蔗糖能为酿酒酵母提供碳源和能源 C．该工艺流程中可采用稀释涂布平板法进行接种 D．发酵前期可通过轻摇发酵瓶，以增加溶解氧，有利于菌种的繁殖 【答案】C 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、应采摘无病虫害、无腐烂、色泽鲜艳的新鲜红豆杉果实，提高产品的品质和产量，A正确； B、酿酒酵母在发酵过程中需要碳源和能源，蔗糖是一种常见的碳源，能够为酵母提供能量，促进发酵过程，B正确； C、稀释涂布平板法通常用于微生物的分离和纯化，而不是用于发酵工艺中的接种。在发酵工艺中，通常采用液体培养基，直接接种酵母菌，C错误； D、在发酵初期，酵母菌需要氧气进行繁殖，轻摇发酵瓶可以增加溶解氧，促进酵母菌的生长和繁殖，D正确。 故选C。 3．刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，但不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素分解菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．该鉴别培养基尿素是唯一的氮源 B．完成图中操作，接种环需经过4次灼烧灭菌 C．该方法也可用于微生物数量的测定 D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 【答案】B 【分析】刚果红染色法利用的原理是：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，当纤维素被分解后，在培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。在分离分解纤维素的微生物时，可在培养基中添加纤维素对目标微生物进行选择培养，随后对样品进行梯度稀释，涂布到含有刚果红的培养基上，挑选产生透明圈的菌落即为目标微生物。 【详解】A、鉴别培养基是对纤维素分解菌进行鉴别，无需使用尿素作为唯一的氮源，A错误； B、接种环在每次划线前后均需灼烧，图中显示有三个划线区，所以接种环需要经过4次灼烧灭菌，B正确； C、划线分离法只能用于菌种的分离，而无法对微生物进行计数，C错误； D、刚果红与纤维素形成红色复合物，纤维素被降解后，会在菌落周围出现透明圈，D错误。 故选B。 4．科学家将马铃薯和西红柿进行植物体细胞杂交，成功获得了杂种植株。下列分析正确的是（　　） A．可将植物细胞置于含纤维素酶和果胶酶的略高渗溶液中以获得原生质体 B．可用电融合法、高Ca2+-低pH融合法诱导原生质体融合 C．杂种细胞再分化的过程中需平衡激素的种类方可获得杂种植株 D．原生质体由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成 【答案】A 【分析】1、原生质层由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成。 2、植物细胞壁主要成分为纤维素和果胶，可将植物细胞置于含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液（略高渗溶液）中以获得原生质体。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，获得原生质体时需要用纤维素酶和果胶酶处理，原生质体在低渗溶液中会吸水膨涨甚至破裂，因此需要在略高渗溶液进行，A正确； B、原生质体融合可用高Ca2+－高pH融合法，B错误； C、生长素和细胞分裂素的比例会影响分化的方向，因此杂种细胞再分化的过程中需平衡激素的比例方可获得杂种植株，C错误； D、原生质层由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成，D错误。 故选A。 5．图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述错误的是（    ） A．步骤①常用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B．步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗 C．原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间 D．台盼蓝检测后应选择无色的原生质体继续培养 【答案】B 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，步骤①添加纤维素酶或果胶酶去除细胞，其原理是酶的专一性，A正确； B、步骤②吸取原生质体放入等渗液中清洗，否则会导致原生质体吸水涨破，B错误； C、结合图示可知原生质体处于甘露醇和蔗糖溶液之间，因而可推测原生质体的密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间，C正确； D、台盼蓝检测后应选择无色的原生质体继续培养，染成蓝色的原生质体活性差或死亡，D正确。 故选B。 6．狂犬病病毒（RABV）具有较高的致死率，注射疫苗是预防狂犬病的最有效措施，目前主要采用生物反应器培养Vero细胞（非洲绿猴肾上皮细胞），扩增RABV，再纯化病毒等步骤制备狂犬病疫苗。下图表示培养过程测定的相应数值（培养一定时间后接种RABV，病毒滴度指单位体积培养液中病毒数量）。下列叙述不正确的是（    ）    A．应在无菌、无毒的环境中培养Vero细胞 B．换瓶培养时，需用胰蛋白酶处理Vero细胞 C．接种病毒的时间可能为培养Vero细胞的第4天 D．第六天细胞密度开始下降只与培养液有关 【答案】D 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】A、培养动物细胞应在无菌、无毒的环境中，即Vero细胞的培养需要无菌、无毒环境，因为培养液中营养丰富，容易感染杂菌，A正确； B、换瓶培养时应用胰蛋白酶处理，使其分散成单个细胞制成单细胞悬液，B正确； C、细胞密度从第4天开始增加速率减慢，第6天时开始下降，说明从第6天开始病毒导致细胞裂解死亡，故接种病毒的时间可能为培养Vero细胞第4天，C正确； D、第六天细胞密度开始下降不只与培养液有关，还与病毒的侵染有关，D错误。 故选D。 7．某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如图）。下列说法错误的是（　　） A．利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞 B．可用灭活的噬菌体诱导细胞融合成杂交瘤细胞 C．筛选杂交瘤细胞要进行克隆化培养和抗体检测 D．单克隆抗体A和单克隆抗体B可能不同，但都能够特异性识别S蛋白 【答案】B 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、胰蛋白酶或胶原蛋白酶可以催化分解细胞外的胶原蛋白，因此利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞，A正确； B、用灭活的病毒可诱导动物细胞融合，其过程利用了病毒感染细胞的过程，因特定的病毒只能寄生特定的宿主细胞，而噬菌体不能感染动物细胞，故不能诱导融合成杂交瘤细胞，B错误； C、筛选出多种杂交瘤细胞后，还要对杂交瘤细胞要进行克隆化培养和抗体检测，C正确； D、由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体，单克隆抗体A和单克隆抗体B来自不同的杂交瘤细胞，因此制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B可能不是相同的单克隆抗体，单克隆抗体A和单克隆抗体B都是通过抗体检测筛选出的杂交瘤细胞，因此都能够特异性识别S蛋白上的抗原，D正确。 故选B。 8．我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的活产嵌合体猴。如图所示，研究人员将4CL体系下培育的、可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最终得到嵌合体猴。下列叙述错误的是（　　） A．嵌合体猴中仅部分位置能发出绿色荧光是基因重组的结果 B．嵌合体猴中来源于4CL干细胞的遗传信息不一定能遗传给后代 C．植入胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关的激素促使其同期发情 D．嵌合囊胚中的内细胞团细胞将发育为嵌合体猴的各种组织 【答案】A 【分析】胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。胚胎干细胞，是高度未分化的细胞。如果进行体外培养，能够无限的增殖和分化。胚胎肝细胞还可以分化成多功能的细胞。胚胎干细胞具有多能性，可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。胚胎里的干细胞被称为一种“全能”细胞，可以分化成所有类型的细胞，并且携带生物体的全套遗传信息。 【详解】A、4CL胚胎干细胞与桑葚胚细胞嵌合发育成内细胞团，进而共同发育成幼猴的各种组织，故嵌合体猴体内绿色荧光散乱分布，未发生基因重组，A错误； B、如果来源于4CL干细胞的遗传信息位于体细胞中，则遗传信息一般不能遗传给后代，B正确； C、嵌合胚胎移植前，需要对代孕母猴注射孕激素，进行同期发情处理，C正确； D、嵌合囊胚中的内细胞团细胞会发育成个体（嵌合体猴）的各种组织，D正确。 故选A。 9．异体器官移植是替代器官功能的有效途径。中国科学家综合利用多种现代生物技术，在猪的体内培育出了一个“人—猪嵌合中期肾”，部分流程如下图所示，图中数字表示相关过程。已知胚胎在未分化前相互连接比较松散，可塑性强。下列相关叙述正确的是（    ） A．选择猪的桑葚胚或原肠胚等早期胚胎导入ipsc成功率更高 B．过程②使用蛋白酶合成促进剂激活重构胚发育成早期胚胎 C．利用胚胎分割等有性生殖技术可以增加人源化中肾的数量 D．过程④选择的受体母猪应具有健康的体质和正常繁殖能力 【答案】D 【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、根据题意可知，胚胎在未分化前相互连接比较松散，可塑性强，因此应选择猪的桑葚胚或囊胚等早期胚胎导入ipsc成功率更高，而原肠胚时期的细胞已经发生了分化，A错误； B、可用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B错误； C、胚胎分割属于无性繁殖，C错误； D、过程④是胚胎移植，应选择有健康体质和正常繁殖能力的母猪作为受体，使其完成繁重而漫长的妊娠和育仔任务，D正确。 故选D。 10．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（    ） A．利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精 B．过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解 C．琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快 D．提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色 【答案】B 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。 【详解】A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离，A错误； B、洋葱研磨液在4℃℃冰箱中放置几分钟，可降低DNA水解酶的活性，防止DNA降解，B正确； C、待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率，DNA分子越小，迁移的速率越快，DNA分子越大，迁移速率越慢，C错误； D、将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，水浴加热条件下才会呈现蓝色，D错误。 故选B。 11．用新霉素抗性基因（neo）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。从给定的限制酶中选择一种，用该酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段，随后将酶切产物连接构建基因表达载体（重组质粒），并转化至受体菌中。下列叙述错误的是（    ）    A．若用EcoRⅠ酶切质粒与外源DNA片段，目的基因转录的产物可能不同 B．若用BamHⅠ酶切，在含新霉素培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C．若用AluⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D．若用HindⅡ酶切，携带目的基因的受体菌在含新霉素和四环素的培养基中能生长 【答案】D 【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。 【详解】A、若用EcoRⅠ酶切质粒与外源DNA片段，可能导致目的基因反接，目的基因转录的产物可能不同，A正确； B、BamHⅠ酶切破坏了四环素抗性基因（TetR），若用BamHⅠ酶切，在含新霉素培养基中的菌落，可能含有目的基因，也可能是未转入目的基因的菌落，B正确； C、若用AluⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否，重组质粒大于普通质粒，电泳条带的位置不同，C正确； D、若用HindⅡ酶切，破坏了新霉素抗性基因（neo），携带目的基因的受体菌在含新霉素的培养基中不能生长，D错误。 故选D。 12．科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表达标签短肽V5；该重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。下列分析错误的是（    ）    A．作为基因表达载体，图甲中的质粒还必须具有特殊标记基因、复制原点 B．为检测J基因是否插入到图甲所示的位置，需用引物F1和R1进行PCR C．若J基因转录的模板链位于b链，则引物F2与图甲中a链相应部分的序列相同 D．图乙中，条带1的出现证明重组质粒在受体细胞内表达了J-V5融合蛋白 【答案】B 【分析】基因工程的关键步骤是构建基因表达载体，基因表达载体主要由启动子、目的基因、标记基因和终止子组成，其中标记基因用于筛选重组DNA分子，可以是四环素、氨苄青霉素等抗性基因，也可以是荧光蛋白基因或产物能显色的基因。 【详解】A、作为基因表达载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来，图甲中有启动子和终止子等，因此质粒还需具备的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复制原点等，A正确； B、据图甲可知，引物F1能与J基因左端序列配对，引物R2能与终止子序列配对，因此推测为检测J基因是否插入到图甲所示的位置，需进行PCR检测，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物F1和R2，B错误； C、b是模板链，而根据图上启动子和终止子的位置可知转录方向是图上从左向右，对应的模板链方向应该是3’-5'，非模板链（也就是a链）是5'-3'；考虑到DNA复制的方向是子链的5’-3'，引物基础上延伸的方向肯定是5'-3'，所以引物结合的单链其方向是3'-5'；图中F2是后引物，在右侧，所以其配对的单链是3’-5'的b链，故其序列应该与a链相应部分的序列相同，C正确； D、据图乙可知，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测，均出现条带1，说明条带1是J-V5融合蛋白。抗J蛋白抗体检测出现条带2，抗V5抗体检测不出现条带2，说明条带2所检出的蛋白不是由重组质粒上的融合的J基因表达的，D正确。 故选B。 13．实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（    ）    A．从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B．二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C．若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D．图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 【答案】C 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A 、从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质能与小鼠产生的抗体发生特异性结合，所以该蛋白质相当于抗原，A正确。 B 、由图可知，二抗是与一抗结合的，且带有特殊标记，所以二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体，B正确。 C 、若未显示出杂交带，有可能是目的基因导入了受体细胞，但目的基因没有表达，而不是目的基因未导入受体细胞，C错误。 D 、图示操作是通过抗原 - 抗体杂交技术来检测转基因棉花是否产生了 Bt 毒蛋白，D正确。 故选C。 14．生物科技是一柄“双刃剑”，生物技术如果被误用或滥用将对人类健康、生态环境乃至国家安全造成重大威胁。下列叙述正确的是（    ） A．转基因农作物可能引起食品安全问题，但对生态环境没有影响 B．生殖性克隆是为了获得治疗所需的克隆细胞，应给予一定支持 C．我国反对生物武器及其技术和装备的扩散 D．试管婴儿与克隆人一样，为无性生殖，会引起伦理道德问题 【答案】C 【分析】针对转基因技术，各个国家都制定了符合本国利益的法规和政策。我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，就是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全管理上要严格，坚持依法监管。我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。 【详解】A、转基因农作物除了可能会引起食品安全问题，还可能会对生态环境造成不利影响，A错误； B、生殖性克隆有很多伦理和道德问题，应予以禁止，为获得治疗所用的克隆细胞属于治疗性克隆，B错误； C、生物武器具有传染性等特点，会对人类造成严重的威胁与伤害，我国反对生物武器及其技术和装备的扩散，C正确； D、试管婴儿与克隆人不同，是有性生殖的结果，可能会引起伦理道德问题，D错误。 故选C。 15．“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是（　　） A．用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种微生物 B．诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞 C．制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 D．在试管婴儿技术中，需取滋养层细胞进行性别鉴定来筛选所需的胚胎 【答案】C 【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。 【详解】A、选择培养基的作用是目的菌能够正常在其上生存，其他微生物不能正常生存，为了确定选择培养基是否具有选择作用，应设计一个在完全培养基上接种的培养皿作对照，即对照组也接种微生物，只是实验组和对照组培养基的成分不同，A错误； B、诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁不能用于筛选异种融合细胞，因为同种融合细胞也会再生出细胞壁，B错误； C、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选要用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选要用抗体阳性检测方法从分子水平筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞，即从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，C正确； D、在试管婴儿技术中，不需要进行胚胎的性别鉴定，设计试管婴儿有时需要进行性别鉴定，D错误。 故选C。 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 16．科研人员采集了某深海冷泉附近的沉积物样品，经分离、纯化、鉴定得到了降解藻类多糖的拟杆菌菌株，具体过程如图(Ⅰ～Ⅳ是操作步骤)。下列叙述正确的有（　　） A．步骤Ⅰ均采用湿热灭菌法对深海冷泉沉积物的样品和海水进行灭菌 B．步骤Ⅱ可通过添加不同藻类多糖配制系列培养基①获得多种拟杆菌菌株 C．步骤Ⅲ培养基②中以藻类多糖为唯一碳源，且需加入适量琼脂等凝固剂 D．步骤Ⅳ可通过增加培养基③中碳源的浓度，获得高耐受藻类多糖的菌株 【答案】BCD 【分析】1、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。不同的培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、碳源和氮源。 2、微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。操作方法各不相同，但是核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。微生物常见的接种的方法： (1)平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。(2) 稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、深海冷泉沉积物的样品不能灭菌，否则得不到需要的菌株，A错误； B、向基本培养基中分别添加不同藻类多糖来配制系列培养基①，可获得不同种类的拟杆菌菌株，B正确； C、步骤IV需要挑取单菌落并转接，则需要再固体培养基上接种，需要加琼脂作为凝固剂，C正确； D、本实验的目的是纯化、鉴定得到降解藻类多糖的拟杆菌菌株，步骤IV可通过增加培养基③中碳源的浓度，获得高耐受藻类多糖的菌株，D正确。 故选BCD。 17．甲植物具有耐盐碱效应，乙植物具有高产效应。下图是利用甲、乙两种植物细胞获得高产且耐盐碱植株的部分流程图，下列叙述正确的是（    ） A．进行①处理时可用纤维素酶和果胶酶 B．进行②诱导时可选用电融合法或PEG融合法 C．③过程通常需要一定强度的光照条件 D．将杂种细胞培育成的植物体即为高产且耐盐碱的植株 【答案】AB 【分析】植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性，其主要操作流程为去除细胞壁后诱导原生质体融合，有的原生质体融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导 ，获得杂种细胞经过植物组织培养技术获得杂种植株，该方法的典型优点是克服远缘杂交不亲和的障碍。题图分析：①是酶解法去除细胞壁，②是诱导原生质体融合，③是杂种细胞脱分化形成愈伤组织，④是经过耐盐培养筛选获得的具有耐盐特性的胚状体。 【详解】A、①是去除细胞壁获得甲和乙植物细胞的原生质体，由于植物细胞的主要成分是纤维素和果胶，因此该过程需要用到纤维素酶和果胶酶，A正确； B、②过程为原生质体融合，常见的方法有电融合法或PEG融合法，B正确； C、③过程为杂种细胞脱分化形成愈伤组织，该过程一般不需要光照，再分化过程需要一定强度的光照条件，C错误； D、由于植物体细胞杂交过程中会有部分染色体的丢失，因此杂种细胞培育成的植物体不一定为高产且耐盐碱的植株，D错误。 故选AB。 18．交感神经系统可通过去甲肾上腺素影响骨细胞发育。某科研小组为验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理，进行了图1所示实验，实验检测结果如图2，Cxcl12、Oste、mALP、Runx2、mCOL为骨细胞内表达的不同基因。下列叙述不正确的有（    ） A．图1实验组模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响 B．骨细胞置于含有95%氧气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养 C．加入无菌处理的胎牛血清，可提高MSCs存活率 D．交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达起抑制作用 【答案】BD 【分析】图1中实验组加入去甲肾上腺素模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响。 分析图2，去甲肾上腺素组与对照组相比，Cxcl12、Oste、mALP和mCOL在骨细胞内表达量较低，而Runx2在骨细胞内表达量较高。 【详解】A、分析题意，该实验的目的是验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理，结合图1可知，实验组加入去甲肾上腺素模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响，A正确； B、骨细胞置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，B错误； C、添加胎牛血清能为细胞培养提供未知营养成分，故加入无菌处理的胎牛血清，可提高MSCs存活率，C正确； D、分析图2，去甲肾上腺素组与对照组相比，Cxcl12、Oste、mALP和mCOL在骨细胞内表达量较低，而Runx2在骨细胞内表达量较高，由此可知，交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达并不是都起抑制作用，D错误。 故选BD。 19．幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将Hp的Ipp20基因作为目的基因，用限制酶XhoI和XbaI切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（    ）      A．基因表达载体导入之前，可用Ca2+处理大肠杆菌 B．Ipp20基因插入到大肠杆菌的DNA中使大肠杆菌发生了基因突变 C．培养基A中添加了氯霉素，培养基B中添加了潮霉素 D．能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落3和5中 【答案】BC 【分析】基因工程技术的基本步骤：1.目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。2.基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。3.将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 【详解】A、原核细胞作为受体细胞时，可用Ca2+处理受体细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，更容易将基因表达载体导入其中，A正确； B、Ipp20基因插入到大肠杆菌的DNA中，这属于基因工程中的基因重组，而不是基因突变，基因突变是指DNA分子中发生碱基对的增添、缺失或替换，B错误； CD、该过程使用了限制酶 Xho I和Xba I切割质粒和Ipp20基因，结合图示可知，在构建目的基因表达载体的过程中氯霉素抗性基因被切割掉，保留了潮霉素抗性基因，不管是正常质粒还是重组质粒都含有潮霉素抗性基因，但只有正常质粒才同时含有氯霉素抗性基因，因此，可以先用含有潮霉素的培养基A筛选出导入正常质粒、重组质粒的大肠杆菌，再采用同位影印接种到含有氯霉素的培养基B和含有潮霉素的培养基A中，此时含有重组质粒的大肠杆菌不能在含有氯霉素的培养基 B上生长，从而与培养基A（对照）相比会消失一些菌落，对照两个平板上减少的菌落就是符合要求的大肠杆菌菌落，结合图示可知，符合要求的大肠杆菌菌落是3和5，C错误，D正确。 故选BC。 三、非选择题：本部分包括5题，共计58分。 20．合成塑料是一种非天然的石油基塑料，由于分子量过大而难以通过生物膜被微生物降解。研究发现，某些昆虫的肠道内存在PE(一种合成塑料)降解细菌。现欲从昆虫的肠道中筛选能够降解PE的菌株，过程如下图所示。 (1)选择培养过程中，所使用的培养基中应加入 作为唯一碳源，选择培养的目的是 。 (2)划线纯化过程中，接种环在固体培养基的表面连续划线的目的是 。 (3)某研究团队从昆虫肠道中筛选出能够降解PE的两种细菌(YT1和YP1)，将其分别在加入PE薄膜的培养液中培养，培养液中细胞数目变化及PE失重率变化如下图。(注：PE失重率指在一定条件下，PE材料失去的重量与其原始重量的比值。) 据图可知，两种细菌中降解PE能力较强的是 ，理由是 。 【答案】(1) PE 提高降解PE的微生物的比例 (2)将聚集的菌种逐步稀释(分散到培养基的表面)获得单菌落 (3) YP1 YP1组细胞数目较少，PE失重率较高 【分析】平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 【详解】（1）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基，本实验要筛选出PE（一种合成塑料）降解细菌，因此所使用的培养基中应加入PE作为唯一碳源，选择培养的目的是提高降解PE的微生物的比例。 （2） 划线纯化过程中，接种环在固体培养基的表面连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释（分散到培养基的表面）获得单菌落。每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始。 （3）据图可知，两种细菌的细胞数目在PE薄膜培养液中都是先缓慢增加，后快速增加，最终保持不变，用YP1细菌处理PE失重率明显高于YT1细菌，且其细菌数目较少，因此YP1细菌分解PE的能力强于YT1细菌。 21．1．植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下图表示植物细胞工程的相关操作过程及应用，已知该植物为二倍体，体细胞中染色体数目为m。回答下列问题。 (1)通过植物组织培养技术进行快速繁殖植物，属于 生殖，图中的单倍体幼苗体细胞中含有染色体数目为 ，该单倍体幼苗经 处理后可获得正常二倍体植株。 (2)图中C过程的目的是 ，最终 （填“不一定”或“一定”）会得到突变植株。细胞丙和细胞丁融合前应先用 酶处理，获得原生质体。若融合仅考虑两两融合，则培养液中的细胞类型有 种，获得的杂种细胞中 （填“含有”或“不含”）同源染色体。 (3)次生代谢产物 （填“是”或“不是”）其基本生命活动所必需的产物，为获得图中次生代谢产物，需将外植体培养至 阶段，原因是 。 (4)研究人员发现脱毒苗的成苗率和脱毒率与外植体的大小有关，并利用马铃薯进行脱毒苗的培育实验，结果如下图。 该图表明，马铃薯脱毒培养过程中，适宜的茎尖大小为 。 【答案】(1) 无性 m/2 秋水仙素或低温 (2) 提高乙细胞的突变频率 不一定 纤维素酶和果胶酶 5 含有 (3) 不是 愈伤组织 愈伤组织细胞分裂快，代谢旺盛 (4)0.27mm 【分析】植物细胞工程包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术等，植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞（称为外植体）等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，属于无性生殖的方式，利用的原理是植物细胞具有全能性。植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术，利用的原理是植物细胞的全能性和细胞膜具有一定的流动性。 【详解】（1）通过植物组织培养技术进行快速繁殖植物，属于无性生殖，已知该植物为二倍体，体细胞中染色体数目为m，则图中的单倍体幼苗体细胞中染色体数目减半为m/2，单倍体幼苗可用秋水仙素或低温处理，通过抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍，从而获得正常二倍体植株。 （2）C过程用紫外线照射处理，可以提高乙细胞的突变频率，由于基因突变具有低频性和不定向性，因此诱变后不一定能得到突变植株。植物细胞融合之前要先使用纤维素酶和果胶酶处理，去除细胞壁，获得原生质体，若融合仅考虑两两融合，则培养液中的细胞类型有5种类型，即丙细胞、丁细胞、两个丙细胞融合、两个丁细胞融合、丙和丁细胞融合，获得的杂种细胞含有两个亲本中所有染色体，故细胞中含有同源染色体。 （3）次生代谢产物不是其基本生命活动所必需的产物，为获得图中次生代谢产物，需将外植体培养至愈伤组织阶段，因为愈伤组织细胞分裂快，代谢旺盛，可产生所需的产物。 （4）实验结果说明，茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低，因此马铃薯脱毒培养过程中，适宜的茎尖大小为0.27mm左右，既保证成苗率相对较高，也保证了脱毒苗的脱毒率较高。 22．双特异性抗体（BsAb）是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原相结合，双特异性抗体在自然状态下并不存在，可以通过细胞融合技术人工制备实现。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂文瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。 (1)在体外进行动物细胞培养时为了维持培养液的pH，应该将细胞置于含有 的混合气体的CO2培养箱中培养，同时为了防止有害代谢物的积累，可采用 的方法，以便清除代谢物。 (2)用癌胚抗原作为抗原注射小鼠的目的是 ，一段时间后，将提取的B淋巴细胞细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，该过程可采用的不同于植物原生质体融合的诱导因素是 。 (3)②、③、④存活的细胞中，只含有杂交瘤细胞的是 ，④过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，对其进行 和抗体检测，经多次筛选，其目的是筛选获得 。 (4)图1注射长春碱后，经筛选后可获取单克隆杂交一杂交瘤细胞，结合所学知识分析方框内相关的动物细胞工程技术有 。 (5)图1过程获得的双特异性抗体能结合的抗原有 ，该双特异性单克隆抗体能够准确抗肿瘤的作用机理 。 【答案】(1) 95%空气和5%CO2 定期更换培养液 (2) 对小鼠进行免疫，使其产生相应的B淋巴细胞 灭活病毒 (3) ③④ 克隆化培养 既能无限增殖，又能产生相应抗体的杂交瘤细胞 (4)动物细胞融合、动物细胞培养 (5) 癌胚抗原和长春碱抗原 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，精准杀死癌细胞 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）动物细胞培养需要一定的气体环境，即在含有95%空气和5 % CO2的混合气体的CO2培养箱中进行。在动物细胞培养的过程中，为防止有害代谢物的积累，需要定期更换培养液。 （2）抗原可激发机体的特异性免疫过程，注射癌胚抗原是为了刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞；在诱导细胞融合时不同于诱导植物原生质体融合的诱导因素是灭活的病毒。 （3）HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的，未融合的（B细胞或骨髓瘤细胞）和同种融合的细胞（B细胞+B细胞，骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞）不能在该培养基上生长，能生长的为杂交瘤细胞（B细胞+骨髓瘤细胞，经选择性培养获得的③细胞是杂交瘤细胞，由③细胞到获得细胞还需进过④过程克隆化培养和专一抗体检测即，筛选出既能无限增殖，又能产生抗癌胚抗原抗体的杂交瘤细胞。 （4）图中过程运用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。 （5）图中对小鼠进行了癌胚抗原和长春碱的免疫，所以小鼠可以和癌胚抗原和长春碱抗原结合。双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，精准杀死癌细胞，对人体的副作用更小。 23．中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。请回答下列问题： (1)用 对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞，受精时的卵母细胞所处的时期为 。 (2)为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到 或囊胚期时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，应注意 ，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 (3)卵细胞、精子分别转化为phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞，胚胎干细胞具有 的潜能。不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为 。 (4)据图分析，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，请写出两个理由： 。 【答案】(1) 促性腺激素 MⅡ期 (2) 桑葚胚 将内细胞团均等分割 (3) 分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体 XX、XY或YY (4)需要将ahESC和另一个精子一起注入一个去核卵细胞中；重构胚必须移植到雌性小鼠体内才能发育为个体 【分析】1、卵细胞激活转化成phFSC，通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC，获得甲，从而得到孤雌小鼠。 2、精子激活转化成ahFSC，通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC，获得乙，从而得到孤雄小鼠。 【详解】（1）用促性腺激素对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞，而卵母细胞需要培养到MII期才能受精。 （2）为了获得更多甲的后代，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后在显微镜下用分割针或分割刀分割。在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 （3）卵细胞、精子分别转化为phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞，胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。不考虑致死情况，孤雌小鼠具有双母亲来源，因此其性染色体组成为XX，而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以孤雄小鼠的性染色体组成可能是XX、XY或YY。 （4）结合题图可知，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，这是因为要获得孤雄小鼠需要将ahESC和另一个精子一起注入一个去核卵细胞中，而卵细胞来自雌性小鼠，另外获得的重构胚必须移植到雌性小鼠体内才能发育为个体，可见离开雌性小鼠不能获得孤雄小鼠。 24．水体中的雌激素能使斑马鱼细胞产生E蛋白，激活卵黄蛋白原（vtg）基因的表达，因此斑马鱼可用于监测环境雌激素污染程度。为了实现可视化监测，科学家将图1中的vtg基因与图2中Luc基因载体连接，形成vtg-Luc基因重组载体，成功培育了转基因斑马鱼，当极微量雌激素污染水体，斑马鱼的肝脏就发出荧光。Luc表示荧光素酶基因（无启动子），Kanr为卡那霉素抗性基因，ori为复制起点，BamHI、BclI、HindIII、BsrGI为限制酶，→表示转录方向。 注：图1DNA片段不含有图2所示限制酶的识别序列 (1)为使vtg基因与Luc基因载体形成重组载体，选用限制酶 切割Luc基因载体可降低“空载”概率。通过PCR技术获取vtg基因时，需设计合适的引物。依据图示信息，推测引物1包含的碱基序列为5′ 3′。（写出已知的所有碱基序列） (2)将“vtg-Luc基因重组载体”导入大肠杆菌中进行扩增，为便于筛选，应将大肠杆菌接种在含 的培养基中，转基因成功的斑马鱼只在肝脏中发出荧光指示污染，其原因是 。 (3)Luc基因载体上有一段P2A序列，其功能如图所示，据此推测P2A的作用 。 (4)进一步研究发现，E蛋白能与vtg基因启动子的特定序列结合，启动该基因的表达。已知vtg基因启动子含区域1和区域2，为研究E蛋白的结合位点，设计如下实验：用限制酶将启动子切割成含区域1和区域2的两个片段，将两个酶切片段分别与Luc基因载体连接，连接位点位于Luc基因的上游，形成两种重组载体。将重组载体分别导入斑马鱼的 ，待发育成熟后，往水体中添加 进行检测。 【答案】(1) Bcl I和Hind Ⅲ 5'-TGATCAAACTAT-3' (2) 卡那霉素 vtg基因在肝脏中特异性表达 (3)有助于序列两侧的基因表达成独立的蛋白质 (4) 受精卵 雌激素和荧光素 【分析】基因工程的步骤： （1）提取目的基因：基因组文库中获取、cDNA文库中获取。 （2）目的基因与运载体结合：将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。 （3）将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后，下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。 （4）目的基因的检测和表达。 【详解】（1）由图可知，限制酶BsrGI会破坏Luc，因此不能选择BsrGI，Luc基因载体上存在两个BamHI识别位点，因此不能选择BamHI，为防止目的基因和载体的自身环化和反向连接，因此需选用两种限制酶，即选择BelI、HindIII切割Luc基因载体可降低“空载”概率。根据启动子的位置和基因载体上限制酶的位置，因此需要在引物1上添加限制酶BelI识别序列，因此引物1包含的碱基序列为5′TGATCAAACTAT3′。 （2）Kanr为卡那霉素抗性基因做为标记基因，供重组DNA的鉴定和选择，因此为便于筛选，应将大肠杆菌接种在含卡那霉素的培养基中；转基因成功的斑马鱼只在肝脏中发出荧光指示污染，说明vtg基因只在肝脏中特异性表达。 （3）由图可知2A肽的作用可使两侧基因形成完整蛋白，即P2A有助于序列两侧的基因表达成独立的蛋白质。 （4）可利用显微注射法将目的基因导入动物的受精卵中。由题意可知，在含有雌激素的污水中，转基因斑马鱼可发出荧光，因此可在斑马鱼发育成熟后，往水体中添加雌激素和荧光素检测是否发荧光。 第5页/共23页 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024-2024学年高二生物下学期期中模拟卷 一、单项选择题:共15题,每题2分,共30分。每题只有一个选项最符合题意。 1．稀释涂布平板法和稀释倒平板法是分离微生物的两种方法。稀释倒平板法是指将稀释的菌液和琼脂混合，然后将其倒入无菌培养皿中进行培养的方法。下列有关叙述错误的是（    ） A．可采用干热灭菌法对培养过程中所用的培养皿进行灭菌 B．两种方法均能得到由一个细菌繁殖而来的单菌落 C．稀释倒平板法能通过统计菌落数实现对样品活菌的计数 D．稀释倒平板法适合用于分离大肠杆菌等好氧型微生物 2．红豆杉是世界上公认濒临灭绝的天然珍稀植物，其含有的紫杉醇成分可有效抑制癌细胞生长与增殖。以人工种植的红豆杉鲜果为原料制作红豆杉全汁发酵果酒的工艺流程如图所示。下列说法错误的（    ） A．应采摘无病虫害、无腐烂、色泽鲜艳的新鲜红豆杉果实 B．调配糖度时加入蔗糖能为酿酒酵母提供碳源和能源 C．该工艺流程中可采用稀释涂布平板法进行接种 D．发酵前期可通过轻摇发酵瓶，以增加溶解氧，有利于菌种的繁殖 3．刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，但不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素分解菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．该鉴别培养基尿素是唯一的氮源 B．完成图中操作，接种环需经过4次灼烧灭菌 C．该方法也可用于微生物数量的测定 D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 4．科学家将马铃薯和西红柿进行植物体细胞杂交，成功获得了杂种植株。下列分析正确的是（　　） A．可将植物细胞置于含纤维素酶和果胶酶的略高渗溶液中以获得原生质体 B．可用电融合法、高Ca2+-低pH融合法诱导原生质体融合 C．杂种细胞再分化的过程中需平衡激素的种类方可获得杂种植株 D．原生质体由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成 5．图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述错误的是（    ） A．步骤①常用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B．步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗 C．原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间 D．台盼蓝检测后应选择无色的原生质体继续培养 6．狂犬病病毒（RABV）具有较高的致死率，注射疫苗是预防狂犬病的最有效措施，目前主要采用生物反应器培养Vero细胞（非洲绿猴肾上皮细胞），扩增RABV，再纯化病毒等步骤制备狂犬病疫苗。下图表示培养过程测定的相应数值（培养一定时间后接种RABV，病毒滴度指单位体积培养液中病毒数量）。下列叙述不正确的是（    ）    A．应在无菌、无毒的环境中培养Vero细胞 B．换瓶培养时，需用胰蛋白酶处理Vero细胞 C．接种病毒的时间可能为培养Vero细胞的第4天 D．第六天细胞密度开始下降只与培养液有关 7．某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如图）。下列说法错误的是（　　） A．利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞 B．可用灭活的噬菌体诱导细胞融合成杂交瘤细胞 C．筛选杂交瘤细胞要进行克隆化培养和抗体检测 D．单克隆抗体A和单克隆抗体B可能不同，但都能够特异性识别S蛋白 8．我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的活产嵌合体猴。如图所示，研究人员将4CL体系下培育的、可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最终得到嵌合体猴。下列叙述错误的是（　　） A．嵌合体猴中仅部分位置能发出绿色荧光是基因重组的结果 B．嵌合体猴中来源于4CL干细胞的遗传信息不一定能遗传给后代 C．植入胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关的激素促使其同期发情 D．嵌合囊胚中的内细胞团细胞将发育为嵌合体猴的各种组织 9．异体器官移植是替代器官功能的有效途径。中国科学家综合利用多种现代生物技术，在猪的体内培育出了一个“人—猪嵌合中期肾”，部分流程如下图所示，图中数字表示相关过程。已知胚胎在未分化前相互连接比较松散，可塑性强。下列相关叙述正确的是（    ） A．选择猪的桑葚胚或原肠胚等早期胚胎导入ipsc成功率更高 B．过程②使用蛋白酶合成促进剂激活重构胚发育成早期胚胎 C．利用胚胎分割等有性生殖技术可以增加人源化中肾的数量 D．过程④选择的受体母猪应具有健康的体质和正常繁殖能力 10．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（    ） A．利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精 B．过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解 C．琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快 D．提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色 11．用新霉素抗性基因（neo）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质粒如图所示。从给定的限制酶中选择一种，用该酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段，随后将酶切产物连接构建基因表达载体（重组质粒），并转化至受体菌中。下列叙述错误的是（    ）    A．若用EcoRⅠ酶切质粒与外源DNA片段，目的基因转录的产物可能不同 B．若用BamHⅠ酶切，在含新霉素培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C．若用AluⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D．若用HindⅡ酶切，携带目的基因的受体菌在含新霉素和四环素的培养基中能生长 12．科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表达标签短肽V5；该重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。下列分析错误的是（    ）    A．作为基因表达载体，图甲中的质粒还必须具有特殊标记基因、复制原点 B．为检测J基因是否插入到图甲所示的位置，需用引物F1和R1进行PCR C．若J基因转录的模板链位于b链，则引物F2与图甲中a链相应部分的序列相同 D．图乙中，条带1的出现证明重组质粒在受体细胞内表达了J-V5融合蛋白 13．实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（    ）    A．从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B．二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C．若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D．图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 14．生物科技是一柄“双刃剑”，生物技术如果被误用或滥用将对人类健康、生态环境乃至国家安全造成重大威胁。下列叙述正确的是（    ） A．转基因农作物可能引起食品安全问题，但对生态环境没有影响 B．生殖性克隆是为了获得治疗所需的克隆细胞，应给予一定支持 C．我国反对生物武器及其技术和装备的扩散 D．试管婴儿与克隆人一样，为无性生殖，会引起伦理道德问题 15．“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是（　　） A．用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种微生物 B．诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞 C．制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 D．在试管婴儿技术中，需取滋养层细胞进行性别鉴定来筛选所需的胚胎 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 16．科研人员采集了某深海冷泉附近的沉积物样品，经分离、纯化、鉴定得到了降解藻类多糖的拟杆菌菌株，具体过程如图(Ⅰ～Ⅳ是操作步骤)。下列叙述正确的有（　　） A．步骤Ⅰ均采用湿热灭菌法对深海冷泉沉积物的样品和海水进行灭菌 B．步骤Ⅱ可通过添加不同藻类多糖配制系列培养基①获得多种拟杆菌菌株 C．步骤Ⅲ培养基②中以藻类多糖为唯一碳源，且需加入适量琼脂等凝固剂 D．步骤Ⅳ可通过增加培养基③中碳源的浓度，获得高耐受藻类多糖的菌株 17．甲植物具有耐盐碱效应，乙植物具有高产效应。下图是利用甲、乙两种植物细胞获得高产且耐盐碱植株的部分流程图，下列叙述正确的是（    ） A．进行①处理时可用纤维素酶和果胶酶 B．进行②诱导时可选用电融合法或PEG融合法 C．③过程通常需要一定强度的光照条件 D．将杂种细胞培育成的植物体即为高产且耐盐碱的植株 18．交感神经系统可通过去甲肾上腺素影响骨细胞发育。某科研小组为验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理，进行了图1所示实验，实验检测结果如图2，Cxcl12、Oste、mALP、Runx2、mCOL为骨细胞内表达的不同基因。下列叙述不正确的有（    ） A．图1实验组模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响 B．骨细胞置于含有95%氧气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养 C．加入无菌处理的胎牛血清，可提高MSCs存活率 D．交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达起抑制作用 19．幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将Hp的Ipp20基因作为目的基因，用限制酶XhoI和XbaI切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（    ）      A．基因表达载体导入之前，可用Ca2+处理大肠杆菌 B．Ipp20基因插入到大肠杆菌的DNA中使大肠杆菌发生了基因突变 C．培养基A中添加了氯霉素，培养基B中添加了潮霉素 D．能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落3和5中 三、非选择题：本部分包括5题，共计58分。 20．合成塑料是一种非天然的石油基塑料，由于分子量过大而难以通过生物膜被微生物降解。研究发现，某些昆虫的肠道内存在PE(一种合成塑料)降解细菌。现欲从昆虫的肠道中筛选能够降解PE的菌株，过程如下图所示。 (1)选择培养过程中，所使用的培养基中应加入 作为唯一碳源，选择培养的目的是 。 (2)划线纯化过程中，接种环在固体培养基的表面连续划线的目的是 。 (3)某研究团队从昆虫肠道中筛选出能够降解PE的两种细菌(YT1和YP1)，将其分别在加入PE薄膜的培养液中培养，培养液中细胞数目变化及PE失重率变化如下图。(注：PE失重率指在一定条件下，PE材料失去的重量与其原始重量的比值。) 据图可知，两种细菌中降解PE能力较强的是 ，理由是 。 21．1．植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下图表示植物细胞工程的相关操作过程及应用，已知该植物为二倍体，体细胞中染色体数目为m。回答下列问题。 (1)通过植物组织培养技术进行快速繁殖植物，属于 生殖，图中的单倍体幼苗体细胞中含有染色体数目为 ，该单倍体幼苗经 处理后可获得正常二倍体植株。 (2)图中C过程的目的是 ，最终 （填“不一定”或“一定”）会得到突变植株。细胞丙和细胞丁融合前应先用 酶处理，获得原生质体。若融合仅考虑两两融合，则培养液中的细胞类型有 种，获得的杂种细胞中 （填“含有”或“不含”）同源染色体。 (3)次生代谢产物 （填“是”或“不是”）其基本生命活动所必需的产物，为获得图中次生代谢产物，需将外植体培养至 阶段，原因是 。 (4)研究人员发现脱毒苗的成苗率和脱毒率与外植体的大小有关，并利用马铃薯进行脱毒苗的培育实验，结果如下图。 该图表明，马铃薯脱毒培养过程中，适宜的茎尖大小为 。 22．双特异性抗体（BsAb）是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原相结合，双特异性抗体在自然状态下并不存在，可以通过细胞融合技术人工制备实现。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂文瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。 (1)在体外进行动物细胞培养时为了维持培养液的pH，应该将细胞置于含有 的混合气体的CO2培养箱中培养，同时为了防止有害代谢物的积累，可采用 的方法，以便清除代谢物。 (2)用癌胚抗原作为抗原注射小鼠的目的是 ，一段时间后，将提取的B淋巴细胞细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，该过程可采用的不同于植物原生质体融合的诱导因素是 。 (3)②、③、④存活的细胞中，只含有杂交瘤细胞的是 ，④过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，对其进行 和抗体检测，经多次筛选，其目的是筛选获得 。 (4)图1注射长春碱后，经筛选后可获取单克隆杂交一杂交瘤细胞，结合所学知识分析方框内相关的动物细胞工程技术有 。 (5)图1过程获得的双特异性抗体能结合的抗原有 ，该双特异性单克隆抗体能够准确抗肿瘤的作用机理 。 23．中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。请回答下列问题： (1)用 对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞，受精时的卵母细胞所处的时期为 。 (2)为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到 或囊胚期时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，应注意 ，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 (3)卵细胞、精子分别转化为phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞，胚胎干细胞具有 的潜能。不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为 。 (4)据图分析，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，请写出两个理由： 。 24．水体中的雌激素能使斑马鱼细胞产生E蛋白，激活卵黄蛋白原（vtg）基因的表达，因此斑马鱼可用于监测环境雌激素污染程度。为了实现可视化监测，科学家将图1中的vtg基因与图2中Luc基因载体连接，形成vtg-Luc基因重组载体，成功培育了转基因斑马鱼，当极微量雌激素污染水体，斑马鱼的肝脏就发出荧光。Luc表示荧光素酶基因（无启动子），Kanr为卡那霉素抗性基因，ori为复制起点，BamHI、BclI、HindIII、BsrGI为限制酶，→表示转录方向。 注：图1DNA片段不含有图2所示限制酶的识别序列 (1)为使vtg基因与Luc基因载体形成重组载体，选用限制酶 切割Luc基因载体可降低“空载”概率。通过PCR技术获取vtg基因时，需设计合适的引物。依据图示信息，推测引物1包含的碱基序列为5′ 3′。（写出已知的所有碱基序列） (2)将“vtg-Luc基因重组载体”导入大肠杆菌中进行扩增，为便于筛选，应将大肠杆菌接种在含 的培养基中，转基因成功的斑马鱼只在肝脏中发出荧光指示污染，其原因是 。 (3)Luc基因载体上有一段P2A序列，其功能如图所示，据此推测P2A的作用 。 (4)进一步研究发现，E蛋白能与vtg基因启动子的特定序列结合，启动该基因的表达。已知vtg基因启动子含区域1和区域2，为研究E蛋白的结合位点，设计如下实验：用限制酶将启动子切割成含区域1和区域2的两个片段，将两个酶切片段分别与Luc基因载体连接，连接位点位于Luc基因的上游，形成两种重组载体。将重组载体分别导入斑马鱼的 ，待发育成熟后，往水体中添加 进行检测。 第11页/共11页 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$