精品解析：江苏省扬州市广陵区江苏省扬州中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题

江苏省扬州中学2024-2025学年度3月月考试题 高二生物（选修） 第Ⅰ卷（选择题共42分） 一、单项选择题：本部分包括15题，每题2分，共计30分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 豆豉主要用黄豆通过霉菌发酵制成。下列说法错误的是（　　） A. 传统方法制作豆豉是以混合菌种的液体或半固体发酵为主 B. 发酵时使用煮熟的黄豆，使蛋白质变性，易于被微生物利用 C. 黄豆中的蛋白质会在霉菌作用下分解成多肽及氨基酸 D. 发酵时加入盐和酒可以激发出豆豉的风味，同时抑制杂菌活力 【答案】A 【解析】 【分析】直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保留下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术一般称为传统发酵技术。 【详解】A、传统豆豉的制作通常是以固态发酵及半固体发酵为主，而不是液体或半固体发酵，A错误； B、煮熟的黄豆会使蛋白质变性，使其更容易被霉菌分解和利用，B正确； C、在发酵过程中，霉菌会分解黄豆中的蛋白质，生成多肽和氨基酸，这些物质是豆豉风味的重要来源，C正确； D、盐和酒不仅可以增加豆豉的风味，还可以抑制杂菌的生长，确保发酵过程的顺利进行，D正确。 故选A。 2. 某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基中，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（ ） A. 培养基中需要含有水、无机盐、碳源、氮源和琼脂等营养成分 B. 泡菜汁需多次稀释后才能在酒精灯火焰旁进行划线接种 C. 同时培养空白灭菌平板以检测选择培养基是否有选择作用 D. 分离得到的微生物不一定是乳酸菌，还需要进一步鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落； ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、琼脂起凝固剂的作用，一般不为生物提供营养，A错误； B、该实验所用接种方法为平板划线法，不用稀释菌液，B错误； C、同时培养空白灭菌平板的目的是检测培养基灭菌是否彻底，C错误； D、分离得到的微生物除了耐高盐乳酸菌，可能还会有其他耐高盐的微生物或者能够利用中间产物的微生物，故从培养基中分离得到的微生物不一定全为乳酸菌，D正确。 故选D。 3. 合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭大肠杆菌的效果。该同学将细菌原液稀释10倍后取0.2mL涂布平板，进行菌落计数，结果如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 大肠杆菌在伊红一亚甲蓝培养基上生长的菌落呈深紫色 B. 据该实验结果可知，三种消毒液中杀菌效果最好的是A消毒液 C. 若某样品菌落计数的结果是100，则对应细菌原液中大肠杆菌的浓度为5000个/mL D. 若采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品，计数结果前者小于后者 【答案】D 【解析】 【分析】平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。 【详解】A、大肠杆菌在伊红一亚甲蓝培养基上生长的菌落呈深紫色，并有金属光泽，A正确； B、A消毒液活菌减少量最多，杀菌效率最高，故A消毒液的杀菌效果最好，B正确； C、若计数结果是100，1mL细菌原液中细菌浓度=（菌落数÷菌液体积）×稀释倍数=（100÷0.2）×10=5000个/mL，C正确； D、显微镜直接计数法把死菌和活菌一起计数，菌落计数法计数只计活菌数，还可能存在多个活菌形成一个菌落的情况，故计数结果前者大于后者，D错误。 故选D。 4. 安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落。 A. 经过A处理，试管中大多数放线菌都可产生安莎霉素 B. 在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理 C. 赖氨酸缺陷型放线菌形成的原因可能是突变基因不能编码产生赖氨酸 D. D菌落能产生安莎霉素，而E菌落不能产生安莎霉素 【答案】D 【解析】 【分析】影印培养法是指确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法。主要操作方法是：用灭菌的丝绒覆盖在一块与培养皿同样大小（或略小）的木制圆柱体上，轻轻地在母种培养皿的菌苔上印一下，把细菌菌落全部转移到丝绒面上，然后将这一丝绒面再印在另外的选择性培养基平板上，获得与原始平板完全相同的接种平板。待培养后，比对各培养皿在相同位置出现相同的菌落，从而筛选出适当的菌株。 【详解】A、基因突变是不定向的，且突变频率很低，紫外线处理后只有极少数放线菌可能成为赖氨酸缺陷型放线菌，能产生安莎霉素，A错误； B、在①中进行菌种的扩大培养时，接种前需对培养基进行灭菌处理，接种后不能灭菌，否则会杀死目标微生物，B错误； C、一般情况下，基因表达的产物是蛋白质，氨基酸不是蛋白质，因此赖氨酸缺陷型放线菌形成的原因可能是突变基因不能编码产生赖氨酸的酶，C错误； D、D菌落在③中不能生存，在④中可以生存，说明D菌落只能生活在完全培养基中，不能生活在缺赖氨酸培养基中，即D菌落是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，可以产生安莎霉素，而E菌落在③④中均能生存，即这种微生物有无赖氨酸均可生存。所以E菌落不是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，不能产生安芬霉素，D正确。 故选D。 5. 啤酒发酵流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等。下列有关叙述错误的是（　　） A. 焙烤过程通过加热杀死种子的胚细胞，从而使淀粉酶失活 B. 酵母菌繁殖及大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 C. 发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味的要求不同而有所差异 D. 蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌 【答案】A 【解析】 【分析】现代工业酿酒分为主发酵和后发酵，主发酵是主要的生产过程，主发酵后还要通过后发酵来促酒成熟、澄清。 【详解】A、焙烤是加热杀死种子的胚，但不使淀粉酶失活，A错误； B、主发酵是主要的生产过程，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，B正确； C、发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异，C正确； D、蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，终止淀粉酶的分解作用，并对糖浆灭菌，D正确。 故选A。 6. 甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. B代表愈伤组织，两条技术路径均证明了植物细胞具有全能性 B. 获得愈伤组织的过程应保持在无菌、无毒和环境条件下 C. ①②③的培养基中含有植物激素和多种无机盐，还需要添加蔗糖等能源物质 D. 路径二添加果胶酶的目的是获得原生质体，使用纤维素酶也可以达成该目的 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、途径二并未从已分化的植物细胞获得完整植株，不能体现植物细胞的全能性，A错误； B、获得愈伤组织的过程是植物组织培养中的脱分化过程，此过程应保持无菌、无毒的环境。 而5%CO2环境是动物细胞培养时需要的条件，目的是维持培养液的pH，植物组织培养一般不需要5%CO2环境，B错误； C、①②③的培养过程均为植物组织培养的相关过程。植物组织培养的培养基中除了含有植物激素（如生长素、细胞分裂素等）和多种无机盐外，还需要添加蔗糖等能源物质，蔗糖可以为植物细胞提供碳源和能量，C正确； D、图示过程中添加果胶酶的主要目的瓦解植物的胞间层，更快获得细胞悬液，使用纤维素酶也可以达成该目的，D错误。 故选C。 7. 动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。相关叙述错误的是（ ） A. 配制细胞培养基时，血清和氯霉素需用过滤除菌法除菌 B. 采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染 C. 在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素 D. 检测“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释涂布在平板上培养后计数 【答案】B 【解析】 【分析】微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌是常用的防止杂菌入侵的方法。微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、配制细胞培养基时，湿热灭菌后通过过滤灭菌加入血清（含细胞生长必需的蛋白）和氯霉素，A正确； B、采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作都不能清除“黑胶虫”污染，B错误； C、在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素，保证动物细胞的正常生长，同时抑制细菌的生长，C正确； D、考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释后涂布在平板上培养，待菌落数目稳定后计数，D正确。 故选B。 8. 甲型H1N1流感病毒表面的神经氨酸酶有4个抗原决定簇，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）。由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体。如图为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图。下列叙述错误的是（ ） A. 多克隆抗体的产生需要多种B细胞参与 B. 诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合可以用灭活病毒诱导法 C. 过程①②均涉及细胞的融合 D. 甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现单抗失效而多抗有效的情况 【答案】C 【解析】 【分析】根据题干信息“一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体”，每个抗原决定簇刺激产生的抗体是单抗。 【详解】A、一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体，因此需要多种B细胞参与，A正确； B、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合可用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，B正确； C、过程①是诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后再用选择性培养基筛选杂交瘤细胞；过程②是用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞，但过程②不涉及细胞的融合，C错误； D、甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现原单抗失效，而对没有改变的其他抗原多抗仍有效，D正确。 故选C。 9. 我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的活产嵌合体猴。如图所示，研究人员将4CL体系下培育的、可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最终得到嵌合体猴。下列叙述错误的是（　　） A. 嵌合体猴中仅部分位置能发出绿色荧光是基因重组的结果 B. 嵌合体猴中来源于4CL干细胞的遗传信息不一定能遗传给后代 C. 植入胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关的激素促使其同期发情 D. 嵌合囊胚中的内细胞团细胞将发育为嵌合体猴的各种组织 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。胚胎干细胞，是高度未分化的细胞。如果进行体外培养，能够无限的增殖和分化。胚胎肝细胞还可以分化成多功能的细胞。胚胎干细胞具有多能性，可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。胚胎里的干细胞被称为一种“全能”细胞，可以分化成所有类型的细胞，并且携带生物体的全套遗传信息。 【详解】A、4CL胚胎干细胞与桑葚胚细胞嵌合发育成内细胞团，进而共同发育成幼猴的各种组织，故嵌合体猴体内绿色荧光散乱分布，未发生基因重组，A错误； B、如果来源于4CL干细胞的遗传信息位于体细胞中，则遗传信息一般不能遗传给后代，B正确； C、嵌合胚胎移植前，需要对代孕母猴注射孕激素，进行同期发情处理，C正确； D、嵌合囊胚中的内细胞团细胞会发育成个体（嵌合体猴）的各种组织，D正确。 故选A。 10. 某科研团队分别用孤雌生殖技术和核移植技术获得幼猪，过程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 孤雌生殖技术获得的猪体细胞中含1个染色体组 B. 可以用促性腺激素饲喂良种母猪，使其超数排卵 C. 使用免疫抑制剂以避免受体猪对植入胚胎的排斥反应 D. 核移植中的"去核"是指去除卵母细胞中纺锤体—染色体复合物 【答案】D 【解析】 【分析】题图分析，孤雌生殖克隆猪首先将猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理并发育成早期胚胎，再采用胚胎移植技术移植到受体子宫，最后妊娠形成克隆猪，动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 【详解】A、孤雌生殖技术中阻止极体释放获得的细胞内含2个染色体组，因此孤雌生殖技术获得的猪体细胞中含2个染色体组，A错误； B、促性腺激素是蛋白质类激素，不能饲喂，应给良种母猪注射促性腺激素，使其超数排卵，B错误； C、受体子宫不会对植入的早期胚胎发生免疫排斥反应，C错误； D、核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中纺锤体—染色体复合物，D正确。 故选D。 11. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A. 可选用新鲜香蕉、菠菜、猪肝等作为实验材料 B. 研磨液中2mol/L的NaCl溶液有利于溶解DNA和去除杂质 C. 过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D. 将析出的丝状物加入4mL二苯胺试剂后沸水浴加热可出现蓝色 【答案】D 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离。 【详解】A、NA粗提取实验需要选取DNA含量相对较高的材料。新鲜的香蕉、菠菜（植物细胞）含有细胞核，有DNA；猪肝（动物细胞）也含有细胞核，存在DNA，这些材料都能用于该实验，A正确； B、DNA在2mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度较高，搅拌过滤后，DNA存在于滤液中，有利于去除杂质，B正确； C、酶活性的发挥需要适宜的温度等条件，将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正确； D、将析出的丝状物先溶于5ml 2mol/L NaCl溶液中，然后加入4mL二苯胺试剂，混匀后沸水浴中加热可出现蓝色，D错误。 故选D。 12. 甲植物细胞的核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞的质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物（均为二倍体）进行体细胞杂交相关研究，最终获得了高产、耐盐碱再生植株，其基本操作流程如图。为获得目的植株，下列相关操作不合理的是（　　） A. 将纤维素酶处理获得的原生质体置于与细胞液等渗的培养液中培养 B. 原生质体融合前，需分别使甲、乙原生质体的质基因和核基因失活 C. PEG诱导原生质体融合后，需添加特定化合物才能筛选出杂种细胞 D. 杂种细胞经植物组织培养形成可育二倍体，还需在个体水平做鉴定 【答案】C 【解析】 【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。因植物细胞外面的细胞壁阻碍了细胞间的杂交，因此在诱导植物细胞融合之前，先要用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁。诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。 【详解】A、用纤维素酶处理植物细胞可以获得原生质体，配制原生质体培养液时，其浓度应与细胞液浓度相等，以维持原生质体的正常形态，A正确； B、甲植物细胞的核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞的质基因具有高产效应，故原生质体融合前，两种细胞应保留各自含优良基因的部分，分别使甲、乙原生质体的质基因和核基因失活，避免这些遗传物质对实验结果的干扰，B正确； C、利用PEG诱导原生质体融合后，单独的甲细胞及融合的甲细胞都因只有细胞核而不能存活，单独的乙细胞及融合的乙细胞都因只有细胞质而不能存活，而杂种细胞结构完整能生长增殖，无需添加特定化合物来筛选杂种细胞，C错误； D、杂种细胞的核来自二倍体植物甲的细胞，故经植物组织培养形成的植株是可育的二倍体，为获得目的植株还需在个体水平做高产、耐盐碱鉴定，D正确。 故选C。 13. PCR技术的每轮循环可以分为变性、复性、延伸三步。引物与其模板链形成的杂合分子的解链温度称为引物的Tm值。下列叙述正确的是（ ） A. 引物与模板链的结合属于延伸过程 B. 变性过程的温度一般要低于复性过程 C. 复性过程的温度应设置为略低于Tm值 D. 引物的 Tm 值越接近,引物之间越容易结合 【答案】C 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。其原理为DNA复制。PCR的前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。其过程为：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【详解】A、PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步，引物与模板链的结合属于复性过程，A错误； B、变性过程的温度一般要高于复性过程，变性的目的是使DNA解旋成为单链，B错误； C、题意显示，引物与其模板链形成的杂合分子的解链温度称为引物的Tm值，复性过程的温度应设置为略低于Tm值，否则会导致解螺旋发生，C正确； D、PCR过程中，选用的2种引物往往Tm值是一样的，为了让2种引物在相同的退火温度下都能有效结合模板。而引物之间的结合更多的是取决于序列互补性，而不仅仅是Tm值接近，D错误。 故选C。 14. RT-PCR是将RNA逆转录（RT）成cDNA（与mRNA互补的DNA单链）和聚合酶链式反应（PCR）相结合的技术，具体过程如图所示，下列叙述正确的是（　　） A. 过程Ⅰ获得cDNA的过程与DNA复制过程中碱基配对方式相同 B. 图中A、B两种引物在72°C时通过碱基互补配对结合到模板链 C. 图中子链的合成均是以四种核糖核苷酸为原料从引物的一端开始的 D. 过程Ⅱ中，若进行6轮循环，则共需要加入引物的数量为63个 【答案】D 【解析】 【分析】PCR技术是聚合酶链式反应的简称，利用DNA复制的原理，RT-PCR需要先完成逆转录过程再进行DNA复制，逆转录和DNA复制都遵循碱基互补配对原则。 【详解】A、过程I是逆转录过程，是以mRNA为模板合成cDNA，该过程的碱基配对方式为A-T、U-A、G-C、C-G，而DNA复制过程的碱基配对方式为A-T、T-A、G-C、C-G，二者碱基配对方式不完全相同，A错误； B、引物是通过碱基互补配对结合到模板链上的，该过程是在复性阶段完成的，复性的温度一般为55-60°C，而不是72°C，72°C是延伸阶段的温度，B错误； C、图中子链的合成是以四种脱氧核糖核苷酸为原料，从引物的一端开始进行合成，C错误； D、过程Ⅱ中，若进行6轮循环，最终产生的DNA单链数为26=64（条），新合成的子链数为63条，则进行6轮循环，共需要加入引物的数量为63个，D正确。 故选D。 15. 为探究DNA片段P与O2蛋白结合的关键位点，研究者获得片段P不同位点的突变体M1、M2和M3，用O2蛋白进行结合试验，并用指示探针（带荧光的片段P）等进行检测，结果如图。下列分析正确的是（ ） 注：“－”表示未添加，“+”表示添加，指示探针的浓度很低 A. 条带1越宽说明O2蛋白与待测物的结合越强 B. 显示条带2就说明O2蛋白与P无法结合 C. M1的突变位点几乎不影响O2蛋白的结合 D. M2和M3与O2蛋白的结合强度相同 【答案】C 【解析】 【分析】探针：是指经过同位素或荧光标记的DNA分子。 【详解】AB、泳道2与泳道1相比较，条带2变窄，条带1变宽，说明O2蛋白与指示探针结合，二者结合的越多，条带1就会越宽，条带2就会越窄，由于无荧光标记的P和突变体（M1、M2、M3）会竞争指示探针与O2蛋白结合，从而使条带2变宽，条带1变窄，且与O2蛋白的结合能力越强，条带1会越窄，条带2越宽，条带1越宽说明O2蛋白与指示探针的结合越强，探针与待测物的结合越弱，所以显示条带2说明全部或部分探针未结合O2蛋白，即说明O2蛋白与P可以结合，AB错误； C、M1的电泳条带与片段P的电泳条带大体一致，说明了M1的突变位点几乎不影响O2蛋白的结合，C正确； D、M2和M3的电泳条带不同，说明其与O2蛋白的结合强度不同，D错误。 故选C。 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 16. 山楂—鸭梨混合发酵果酒通过不同水果属性优势互补，提高了保健功效。某生物兴趣小组以山楂和鸭梨为原料，利用传统方法制作山楂—鸭梨混合果酒。下列叙述错误的是（ ） A. 混合果酒的制作原理是酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精 B. 制作时需将高压蒸汽灭菌处理后的混合果汁装入发酵瓶 C. 制作过程中需定期打开瓶盖以排出酵母菌产生的CO2 D. 密封不严的果酒表面长出菌膜是好氧细菌大量繁殖的结果 【答案】BC 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，前期提供有氧环境供酵母菌繁殖，后期形成缺氧环境使酵母菌进行无氧呼吸。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，制作的原理是氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，当糖源缺少时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵，A正确； B、传统发酵没有接种菌种，而是利用了天然存在的菌种，因此利用传统果酒制作方法制作山楂-鸭梨混合果酒时所用的果汁不需要进行高压蒸汽灭菌，B错误； C、制作过程中要定期拧松瓶盖以及时排出酵母菌呼吸产生的CO2，C错误； D、密封不严的果酒表面长出菌膜可能是醋酸菌等好氧细菌大量繁殖的结果，D正确。 故选BC。 17. 制备抗猴痘病毒A35R蛋白单克隆抗体的流程如下，相关叙述正确的是（　　） ①生产A35R重复串联蛋白→②免疫小鼠→③取血清抗体效价高的小鼠再次免疫→④从小鼠脾脏中取B淋巴细胞采用PEG诱导其与骨髓瘤细胞融合→⑤筛选杂交瘤细胞→⑥筛选稳定分泌抗A35R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞→⑦生产单克隆抗体 A. 过程②用A35R重复串联蛋白免疫小鼠的主要目的是减少抗原的用量 B. 过程④PEG进入细胞促进核膜融合，其结构基础是核膜的流动性 C. 过程⑤筛选得到的杂交瘤细胞有多种，不同种细胞的染色体数可能不等 D. 若杂交瘤细胞丢失某染色体后不能分泌单克隆抗体，则该抗体的基因可能位于该染色体上 【答案】CD 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、过程②用A35R重复串联蛋白免疫小鼠的主要目的是使小鼠产生抗A35R重复串联蛋白抗体的B淋巴细胞，A错误； B、过程④PEG会促进B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，其结构基础是细胞膜的流动性，B错误； C、过程⑤筛选得到的杂交瘤细胞有多种，如B-B细胞，B-瘤细胞，瘤-瘤细胞，不同种细胞的染色体数可能不等，C正确； D、染色体上的基因可以指导蛋白质的合成，因此若杂交瘤细胞丢失某染色体后不能分泌单克隆抗体，则该抗体的基因可能位于该染色体上，D正确。 故选CD。 18. 关于“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列说法正确的是（　　） A. 根据 DNA 片段大小配置一定质量分数的琼脂糖溶液以便分离 DNA 分子 B. 琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中含指示剂，其可以在紫外灯下被检测出来 C. 实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理 D. 扩增得到的 PCR 产物与凝胶载样缓冲液混匀后需缓慢注入加样孔以防样品飘散 【答案】ACD 【解析】 【分析】PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。 【详解】A、高浓度凝胶孔径小，适合分离小片段；低浓度凝胶孔径大，适合大片段。因此需根根据 DNA 片段大小配置一定质量分数的琼脂糖溶液以便分离 DNA 分子，A正确； B、琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中不含指示剂，与PCR产物混合的凝胶载样缓冲液中含有指示剂，B错误； C、PCR实验对污染极为敏感，微量离心管、枪头等需高压灭菌以去除外源DNA或核酸酶。蒸馏水也需灭菌确保无核酸酶污染，C正确； D、载样缓冲液含甘油或蔗糖以增加样品密度，使其沉入加样孔。操作时应缓慢注入，避免因冲击力导致样品溢出孔外或飘散至周围缓冲液中，D正确。 故选ACD。 19. 免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述错误的是（　　） A. PCR扩增获得产物的量越多，电泳后距离点样孔越近 B. 图示过程所需抗体需对高温有较强的耐受性 C. 图示中标记抗体2的DNA一般是牛细胞中的DNA片段 D. PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关 【答案】ABC 【解析】 【分析】免疫PCR是一种抗原检测系统，将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会和固定抗体1、抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量，即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量。 【详解】A、PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。在带电量相同的情况下，相对分子质量比较大的DNA片段迁移速度慢，因而距离加样孔越近，但与产物的量无关，A错误； B、该免疫PCR检测的原理是将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会与固定抗体1、抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量（DNA片段的量），即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量，与抗体是否耐高温没有多大关系，因此图示过程所需抗体无需对高温有较强的耐受性，B错误； C、待检测的牛乳中可能含有牛乳腺细胞的DNA，其上含有牛乳基因的DNA片段，若图示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，经过PCR扩增后的产物中，不仅有抗体2上的DNA扩增产物，还可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的扩增产物，使检测结果偏大，C错误； D、微量抗原抗体反应，是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法。因此，PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关，抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，D正确。 故选ABC。 第Ⅱ卷（非选择题共58分） 三、非选择题：本部分包括5题，共计58分。 20. 窑湾绿豆烧酒，香醇甜美，久享盛誉，被列为江苏省新沂市地方特产。它是以优质白酒为基酒，佐以红参、桂花、砂仁、杜仲等48余味名贵中药材和冰糖、蜂蜜勾兑而成，其色宛如绿豆汤。制作的工艺流程如图1所示。请回答下列问题： （1）蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留的农药、霉烂味，还有_____作用。蒸馏后要进行快速冷却，目的是为了防止_____。 （2）菌种选育过程，为了纯化酵母菌，操作如图2所示。该过程的接种方法是_____，接种工具进行了_____次灼烧灭菌。扩大培养目的是_____，使用的培养基按物理性质分类，属于_____培养基。 （3）绿豆烧酒的生产流程中，没有严格的灭菌操作，但发酵过程几乎不会受杂菌污染影响，这是因为_____。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在低温、_____环境中储存一段时间进行后发酵，这样才能形成醇香柔和的绿豆烧酒。 （4）为了筛选优势酿酒酵母菌，将从发酵罐中分离得到的酵母菌编号为T24和F12，进行酒精、SO2耐受性试验。试验结果如图3所示。 综合耐受性试验的研究结果，确定_____为优势葡萄酒酵母菌，理由有_____。 【答案】（1） ①. 消毒（去除杂菌） ②. 温度过高杀死酒曲中的微生物 （2） ①. 平板划线法 ②. 6 ③. 增加菌种数量 ④. 液体 （3） ①. 缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而受到抑制 ②. 密闭 （4） ①. F12 ②. 酒精浓度与SO2含量相同的条件下，酵母菌编号为F12的发酵速率均高于T24，说明的编号为F12酵母菌的耐受性高于编号为T24的酵母菌 【解析】 【分析】1、在微生物学中，将允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 2、微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留的农药、霉烂味，还有消毒（去除杂菌）的作用，蒸米后，温度较高，通常需要进行冷却，再加入酒曲，其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物。 【小问2详解】 纯化菌种时，图2的接种方法是平板划线法，在第一次接种和每次接种后都需要灼烧接种环，图2中一共划线5次，故接种环需要灼烧6次，此外还可采用稀释涂布平板法接种。两种方法的原理相似，都是使聚集的菌种分散开，最后在平板上形成单个菌落。挑取单菌落进行扩大培养，其目的是增加菌种数量，使其处于对数生长期，即菌体代谢旺盛，增殖速度快，扩大培养使用液体培养基。按物理性质分类，该培养基属于液体培养基。 【小问3详解】 传统做米酒的操作中没有进行严格的灭菌处理，但米酒并没有被杂菌污染而腐败，这是因为缺氧和酸性环境条件下酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物因无法适应而受到抑制。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在低温、密闭环境中储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。 【小问4详解】 据图3分析可知酒精浓度与SO2含量相同的条件下，酵母菌编号为F12的发酵速率均高于T24，说明的编号为F12酵母菌的耐受性高于编号为T24的酵母菌。 21. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题： （1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是_____，过程②选用的骨髓瘤细胞_____（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 （2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行_____和_____，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是_____ (答出三点)。 （3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是_____。图2方框内需要经过_____次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为_____、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 （4）假设图2中双特异性抗体分子是由若干个氨基酸形成的，下列叙述不正确的是 。 A. 该特异性抗体能与人体内各类肿瘤细胞结合 B. 双特异性抗体可以在人体内持续发挥作用 C. 该双特异性抗体的制备过程中只用到了动物细胞融合技术 D. 双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，因而不具有特异性 （5）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_____。 【答案】（1） ①. 灭活的病毒 ②. 不能 （2） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测（专一抗体检测） ③. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 （3） ①. 刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 ②. 2 ③. 细胞密度过大 （4）ABCD （5）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 【解析】 【分析】根据题图分析，双特异性抗体制备流程为，先给小鼠注射特定癌胚抗原使之发生免疫反应，然后获取已经免疫的B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获得的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交—杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体。 【小问1详解】 与植物体细胞杂交相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒。小鼠B淋巴细胞在HAT培养基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。 【小问2详解】 为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞，进行克隆化培养，即对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测（专一抗体检测），才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，并且可大量制备。 【小问3详解】 图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞。图2方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 【小问4详解】 A、该特异性抗体可以识别两种抗原——癌胚抗原和长春碱，不识别所有的肿瘤细胞，A错误； B、不同的抗体在人体内存留的时间长短不同，抗体不一定在人体内持续发挥作用，B错误； C、该抗体的制备过程用到了动物细胞培养技术和动物细胞融合技术，C错误； D、双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，具有特异性，D错误。 故选ABCD。 【小问5详解】 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，对人体的副作用更小，这是利用单克隆抗体治疗疾病。 22. 有些人由于不能完全消化牛奶中的乳糖，饮用牛奶后易出现腹泻等不适症状，这称为乳糖不耐受。为了解决这一问题，科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，使获得的转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响。根据如下操作流程回答相关问题： （1）为了获得更多的卵母细胞，在进行①过程前，需要用_____处理奶牛A，从输卵管中采集卵母细胞后，还需要体外培养至_____期，才可以进行③过程。通过图中②过程采集的B奶牛精子不能直接使成熟的卵细胞受精，常用化学诱导法对奶牛的精子进行_____处理，即用一定浓度的_____或钙离子载体溶液处理。 （2）⑤过程表示将重组质粒导入受体细胞，常用的方法是_____。当受精卵发育到_____时，需要取_____细胞进行性别鉴定，以确保发育成熟的牛能分泌乳汁。同时还要用基因探针与目的基因杂交，以检测_____。 （3）⑥过程在移植胚胎前，可以选择发育良好、形态正常的_____进行胚胎分割。 （4）外源基因插入奶牛受精卵中的DNA上后，导致有的受精卵发育成转基因奶牛，有的会死亡。分析导致受精卵死亡的最可能原因是_____。⑦过程的检测结果为_____ 时，说明转基因奶牛D是符合要求的优质牛。 【答案】（1） ①. （外源）促性腺激素 ②. MⅡ ③. 获能 ④. 肝素 （2） ①. 显微注射（利用显微注射将目的基因注入受精卵中） ②. 囊胚期 ③. 滋养层 ④. 受体细胞中是否含有目的基因 （3）囊胚或桑葚胚 （4） ①. 外源基因插入奶牛受精卵中的DNA上后，导致受精卵内生命活动必须的某些基因不能表达 ②. 转基因奶牛的乳汁中乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响，且乳汁产量也不受影响 【解析】 【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 【小问1详解】 为了获得更多的卵母细胞，需要对奶牛A进行超数排卵处理，一般通过注射促性腺激素处理母牛，采集的卵母细胞还需要培养至MⅡ中期，才能进行③体外受精作用过程。精子进行受精作用之前需要进行获能处理，即用一定浓度的肝素或钙离子载体处理。 【小问2详解】 ⑤过程表示将重组质粒导入动物受精卵中，常用的方法是利用显微注射法将目的基因注入受精卵中。当受精卵发育到取囊胚时期，取滋养层细胞进行性别鉴定，以确保发育成熟的牛能分泌乳汁。用基因探针与目的基因杂交是为了检测受体细胞中是否含有目的基因，属于目的基因的检测。 【小问3详解】 在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或者囊胚。 【小问4详解】 外源基因插入受精卵中的DNA上后，导致受精卵死亡的最可能原因是：外源基因插入奶牛受精卵中的DNA上后，导致受精卵内生命活动必须的某些基因不能表达；⑦过程的检测结果为转基因奶牛的乳汁中乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响，且乳汁产量也不受影响时表示转基因成功，说明转基因奶牛D是符合要求的优质牛。 23. 已知组成型启动子可以高效地启动目的基因在植物各种组织中的表达，但常会阻碍植物的生长发育。诱导型启动子可在特定环境条件下诱导目的基因的表达。沙冬青脱水素基因（AmDHN基因）能使植株具有较强的抗旱作用。科研人员通过构建AmDHN基因表达载体，以培育耐旱苜蓿新品种，所用载体如下图所示，请回答下列问题： 限制酶 BclI SacI BamHI PstI SmaI 识别序列和酶切位点 T↓GATCA GAGCT↓C G↓GATCC CTGCA↓G CCC↓GGG 注：neor新霉素抗性基因，aadA是链霉素抗性基因，Ori表示复制原点。 （1）用载体1构建含AmDHN目的基因的表达载体，可以成功转化苜蓿，但会出现抑制抗性芽生长和抗性植株生根的现象，推测35S启动子属于_____启动子。 （2）下图是科研人员扩增Rd29A启动子所设计的引物，根据引物的碱基序列及限制酶的识别序列分析，构建载体2时选用的限制酶是_____。为了改造载体1中的启动子，需要用_____酶切割载体1、2为最佳。 （3）构建Rd29A启动子驱动AmDHN基因的表达载体后，先将其导入_____，再转化苜蓿。转化后应在培养基中添加_____进行筛选。 （4）为检测转基因苜蓿中AmDHN基因的表达水平，科研人员做了相关实验。下表呈现了部分操作步骤，请完成表格： 实验步骤的目 的简要操作过程 ①_____ 在转基因无菌苗根系长至2-3cm时，将培养无菌苗三角瓶的封口膜打开，培养一周，观察其生长状况。 提供适宜生长条件 将甲组幼苗根系置于300mL水中。 模拟干旱胁迫条件 ②_____。 无关变量控制 将甲、乙两组置于温度、光照等条件适宜且相同的环境中培养8h，之后剪取两组叶片放在液氮中储存。 ③_____，并估算目基因的表达量 对叶片研磨、离心后，提取总RNA，以AmDHN和MtActin基因两端脱氧核苷酸序列为依据设计引物，进行RT-PCR扩增。扩增产物用④_____电泳检测，EB（溴化乙锭）染色照相如图。MtActin（一种细胞骨架蛋白）作为⑤_____。 【答案】（1）组成型 （2） ①. Sacl和Smal ②. BclⅠ和SacⅠ （3） ①. 农杆菌 ②. 新霉素 （4） ①. 使幼苗适应外界的自然环境（进行炼苗） ②. 将乙组幼苗根系置于等量的20%PEG溶液中 ③. 检测PCR扩增产物量 ④. 琼脂糖凝胶 ⑤. 对照 【解析】 【分析】启动子是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列，它含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列，多数位于结构基因转录起始点的上游，启动子本身不被转录。 【小问1详解】 据题干信息分析可知，组成型启动子可以高效地启动目的基因在植物各种组织中的表达，但常会阻碍植物的生长发育，用载体1构建含AmDHN目的基因的表达体，可以成功转化苜蓿，但会出现抑制抗性芽生长和抗性植株生根的现象，推测35S启动子属于组成型启动子。 【小问2详解】 SmaⅠ和SacⅠ能识别并切割质粒，引物上也具有相应的酶切位点，故构建载体2时选用的限制酶是SmaⅠ和SacⅠ。为了改造载体1中的启动子，选取的酶要能切开载体1、2，又不破坏Rd29A启动子和T-DNA，并实现二者的连接，应选用BclⅠ和SacⅠ，构建载体导入大肠杆菌能实现稳定保存和准确复制。 【小问3详解】 将重组载体导入植物细胞用的方法是农杆菌转化法，载体需先转入农杆菌后再转化苜蓿，载体5含有的neor是新霉素抗性基因，属于标记基因，转化后应在培养基中添加新霉素筛选转化成功的愈伤组织。 【小问4详解】 该实验是为了检测转基因苜蓿中AmDHN基因的表达水平，有操作过程在转基因无菌苗根系长至2～3cm时，将培养无菌苗三角瓶的封口膜打开，培养一周，观察其生长状况中可知其目的是（①）使幼苗适应外界的自然环境（进行炼苗）材料处理；而模拟干旱胁迫条件的操作应该是将（②）乙组幼苗根系置于等量的20%PEG溶液中，不施加水分；最后PCR扩增之前的操作为对叶片研磨、离心后，提取（总）RNA，以AmDHN和MtActin基因两端脱氧核苷酸序列为依据设计引物，再进行RT-PCR扩增，其中MtActin （一种细胞骨架蛋白）为对照（⑤）。扩增产物用（④）琼脂糖凝胶电泳检测；这一步骤的目的是：③检测PCR扩增产物量，估算目的基因的表达量。 24. RCA是一种核基因（rca）编码的一种叶绿体蛋白。为研究RCA对光合作用的影响及机理，科研人员构建反义rca基因表达载体（rca基因反向插入表达载体），利用农杆菌转化法导入玉米细胞，成功获得rca基因沉默的转基因品种（如图），①~⑥表示相关过程。请回答下列问题： （1）参与过程①的酶有__________，合成的rac基因中_____（填“存在”或“不存在”）启动子，在引物设计时，需分别在上下游引物的5'端添加_____、_____的识别序列，以确保反义表达载体的构建。 （2）C4pdk启动子的基本单位是_____，经过程②替换Ti质粒上原有启动子的目的是_____。 （3）过程④常用的方法是__________，经过程⑤后，可利用含__________的培养基筛选出转染成功的玉米细胞。若通过PCR筛选出转染成功的玉米细胞，某同学提出应针对rac基因的特定序列设计引物，你认为该想法是否可行？__________（可行/不可行），原因是____________________。 （4）为研究RCA对光合作用的影响及机理，科研人员将野生型玉米和转基因玉米在适宜光照条件下进行培养，一段时间后分别测定相关指标，结果如下表（Rubisco是光合作用暗反应中的一种关键酶）。 品种 检测指标 光合速率 叶绿素总量 Rubisco含量 Rubisco活力 野生型玉米 19.88 9.07 1.68 32.68 转基因玉米 9.57 9.09 3.21 14.95 据表分析，RCA对玉米的光合作用具有_____（从“促进”或“抑制”中选填）作用，其机理主要是通过__________ 来影响光合作用强度。 【答案】（1） ①. 逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶 ②. 不存在 ③. SacⅠ ④. BamHⅠ （2） ①. 脱氧核苷酸 ②. 可使目的基因在玉米叶肉细胞中特异性表达 （3） ①. Ca2+处理法 ②. 潮霉素 ③. 不可行 ④. 无论是否转入反义rac基因，植物体内都有内源的rac基因 （4） ①. 促进 ②. RAC可提高Rubisco活力，促进暗反应，进而提高光合速率 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建；（3）将目的基因导入受体细胞；（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 过程①为反转录PCR，因此需要的酶由逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶，由于合成的rac基因是反转录而来，因此不存在启动子。由图可知，将rac基因插到启动子和终止子之间，且构建反义rac基因表达载体，因此在上游引物添加SacⅠ识别序列，在下游引物添加BamHⅠ识别序列以确保反义表达载体的构建。 【小问2详解】 启动子是一段DNA序列，因此启动子的基本单位是脱氧核苷酸，C4pdk启动子是受光诱导的强启动子，驱动基因在玉米叶肉细胞中特异性表达，经过程②替换Ti质粒上原有启动子的目的是可使目的基因在玉米叶肉细胞中特异性表达。 【小问3详解】 过程④是将重组质粒导入到农杆菌中，常用的方法Ca2+处理农杆菌（感受态细胞法）。由图可知T-DNA内部含有潮霉素抗性基因，因此可利用含潮霉素的培养基筛选出转染成功的玉米细胞。若通过PCR筛选出转染成功的玉米细胞，无论是否转入反义rca基因，植物体内都有内源的rca基因，故不能针对rca基因的特定序列设计引物。 【小问4详解】 与野生型玉米相比，转基因玉米的rac基因沉默，无RAC蛋白，光合速率降低，则可知RCA对玉米的光合作用具有促进作用。由表格数据可知，rac基因沉默时Rubisco活力下降，因此可推测RCA对玉米的光合作用的作用机理为RAC可提高Rubisco活力，促进暗反应，进而提高光合速率。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 江苏省扬州中学2024-2025学年度3月月考试题 高二生物（选修） 第Ⅰ卷（选择题共42分） 一、单项选择题：本部分包括15题，每题2分，共计30分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 豆豉主要用黄豆通过霉菌发酵制成。下列说法错误的是（　　） A. 传统方法制作豆豉是以混合菌种的液体或半固体发酵为主 B. 发酵时使用煮熟的黄豆，使蛋白质变性，易于被微生物利用 C. 黄豆中的蛋白质会在霉菌作用下分解成多肽及氨基酸 D. 发酵时加入盐和酒可以激发出豆豉的风味，同时抑制杂菌活力 2. 某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基中，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（ ） A. 培养基中需要含有水、无机盐、碳源、氮源和琼脂等营养成分 B. 泡菜汁需多次稀释后才能在酒精灯火焰旁进行划线接种 C. 同时培养空白灭菌平板以检测选择培养基是否有选择作用 D. 分离得到微生物不一定是乳酸菌，还需要进一步鉴定 3. 合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭大肠杆菌的效果。该同学将细菌原液稀释10倍后取0.2mL涂布平板，进行菌落计数，结果如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 大肠杆菌在伊红一亚甲蓝培养基上生长的菌落呈深紫色 B. 据该实验结果可知，三种消毒液中杀菌效果最好的是A消毒液 C. 若某样品菌落计数的结果是100，则对应细菌原液中大肠杆菌的浓度为5000个/mL D. 若采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品，计数结果前者小于后者 4. 安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落。 A. 经过A处理，试管中大多数放线菌都可产生安莎霉素 B. 在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理 C. 赖氨酸缺陷型放线菌形成的原因可能是突变基因不能编码产生赖氨酸 D. D菌落能产生安莎霉素，而E菌落不能产生安莎霉素 5. 啤酒发酵流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等。下列有关叙述错误的是（　　） A. 焙烤过程通过加热杀死种子的胚细胞，从而使淀粉酶失活 B. 酵母菌繁殖及大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 C. 发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味的要求不同而有所差异 D. 蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌 6. 甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. B代表愈伤组织，两条技术路径均证明了植物细胞具有全能性 B. 获得愈伤组织的过程应保持在无菌、无毒和环境条件下 C. ①②③的培养基中含有植物激素和多种无机盐，还需要添加蔗糖等能源物质 D. 路径二添加果胶酶的目的是获得原生质体，使用纤维素酶也可以达成该目的 7. 动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。相关叙述错误的是（ ） A. 配制细胞培养基时，血清和氯霉素需用过滤除菌法除菌 B. 采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染 C. 在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素 D. 检测“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释涂布在平板上培养后计数 8. 甲型H1N1流感病毒表面的神经氨酸酶有4个抗原决定簇，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）。由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体。如图为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图。下列叙述错误的是（ ） A. 多克隆抗体的产生需要多种B细胞参与 B. 诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合可以用灭活病毒诱导法 C. 过程①②均涉及细胞的融合 D. 甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现单抗失效而多抗有效的情况 9. 我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的活产嵌合体猴。如图所示，研究人员将4CL体系下培育的、可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最终得到嵌合体猴。下列叙述错误的是（　　） A. 嵌合体猴中仅部分位置能发出绿色荧光是基因重组的结果 B. 嵌合体猴中来源于4CL干细胞的遗传信息不一定能遗传给后代 C. 植入胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关的激素促使其同期发情 D. 嵌合囊胚中的内细胞团细胞将发育为嵌合体猴的各种组织 10. 某科研团队分别用孤雌生殖技术和核移植技术获得幼猪，过程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 孤雌生殖技术获得的猪体细胞中含1个染色体组 B. 可以用促性腺激素饲喂良种母猪，使其超数排卵 C. 使用免疫抑制剂以避免受体猪对植入胚胎的排斥反应 D. 核移植中的"去核"是指去除卵母细胞中纺锤体—染色体复合物 11. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A. 可选用新鲜的香蕉、菠菜、猪肝等作为实验材料 B. 研磨液中2mol/L的NaCl溶液有利于溶解DNA和去除杂质 C. 过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D. 将析出的丝状物加入4mL二苯胺试剂后沸水浴加热可出现蓝色 12. 甲植物细胞的核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞的质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物（均为二倍体）进行体细胞杂交相关研究，最终获得了高产、耐盐碱再生植株，其基本操作流程如图。为获得目的植株，下列相关操作不合理的是（　　） A. 将纤维素酶处理获得的原生质体置于与细胞液等渗的培养液中培养 B. 原生质体融合前，需分别使甲、乙原生质体的质基因和核基因失活 C. PEG诱导原生质体融合后，需添加特定化合物才能筛选出杂种细胞 D. 杂种细胞经植物组织培养形成可育二倍体，还需在个体水平做鉴定 13. PCR技术的每轮循环可以分为变性、复性、延伸三步。引物与其模板链形成的杂合分子的解链温度称为引物的Tm值。下列叙述正确的是（ ） A. 引物与模板链的结合属于延伸过程 B. 变性过程的温度一般要低于复性过程 C. 复性过程的温度应设置为略低于Tm值 D. 引物的 Tm 值越接近,引物之间越容易结合 14. RT-PCR是将RNA逆转录（RT）成cDNA（与mRNA互补的DNA单链）和聚合酶链式反应（PCR）相结合的技术，具体过程如图所示，下列叙述正确的是（　　） A. 过程Ⅰ获得cDNA过程与DNA复制过程中碱基配对方式相同 B. 图中A、B两种引物在72°C时通过碱基互补配对结合到模板链 C. 图中子链的合成均是以四种核糖核苷酸为原料从引物的一端开始的 D. 过程Ⅱ中，若进行6轮循环，则共需要加入引物的数量为63个 15. 为探究DNA片段P与O2蛋白结合的关键位点，研究者获得片段P不同位点的突变体M1、M2和M3，用O2蛋白进行结合试验，并用指示探针（带荧光的片段P）等进行检测，结果如图。下列分析正确的是（ ） 注：“－”表示未添加，“+”表示添加，指示探针的浓度很低 A. 条带1越宽说明O2蛋白与待测物的结合越强 B. 显示条带2就说明O2蛋白与P无法结合 C. M1的突变位点几乎不影响O2蛋白的结合 D. M2和M3与O2蛋白的结合强度相同 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 16. 山楂—鸭梨混合发酵果酒通过不同水果属性优势互补，提高了保健功效。某生物兴趣小组以山楂和鸭梨为原料，利用传统方法制作山楂—鸭梨混合果酒。下列叙述错误的是（ ） A. 混合果酒的制作原理是酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精 B. 制作时需将高压蒸汽灭菌处理后的混合果汁装入发酵瓶 C. 制作过程中需定期打开瓶盖以排出酵母菌产生的CO2 D. 密封不严的果酒表面长出菌膜是好氧细菌大量繁殖的结果 17. 制备抗猴痘病毒A35R蛋白单克隆抗体的流程如下，相关叙述正确的是（　　） ①生产A35R重复串联蛋白→②免疫小鼠→③取血清抗体效价高的小鼠再次免疫→④从小鼠脾脏中取B淋巴细胞采用PEG诱导其与骨髓瘤细胞融合→⑤筛选杂交瘤细胞→⑥筛选稳定分泌抗A35R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞→⑦生产单克隆抗体 A. 过程②用A35R重复串联蛋白免疫小鼠主要目的是减少抗原的用量 B. 过程④PEG进入细胞促进核膜融合，其结构基础是核膜的流动性 C. 过程⑤筛选得到的杂交瘤细胞有多种，不同种细胞的染色体数可能不等 D. 若杂交瘤细胞丢失某染色体后不能分泌单克隆抗体，则该抗体的基因可能位于该染色体上 18. 关于“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列说法正确的是（　　） A. 根据 DNA 片段大小配置一定质量分数的琼脂糖溶液以便分离 DNA 分子 B. 琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中含指示剂，其可以在紫外灯下被检测出来 C. 实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理 D. 扩增得到的 PCR 产物与凝胶载样缓冲液混匀后需缓慢注入加样孔以防样品飘散 19. 免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述错误的是（　　） A. PCR扩增获得产物的量越多，电泳后距离点样孔越近 B. 图示过程所需抗体需对高温有较强耐受性 C. 图示中标记抗体2的DNA一般是牛细胞中的DNA片段 D. PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关 第Ⅱ卷（非选择题共58分） 三、非选择题：本部分包括5题，共计58分。 20. 窑湾绿豆烧酒，香醇甜美，久享盛誉，被列为江苏省新沂市地方特产。它是以优质白酒为基酒，佐以红参、桂花、砂仁、杜仲等48余味名贵中药材和冰糖、蜂蜜勾兑而成，其色宛如绿豆汤。制作的工艺流程如图1所示。请回答下列问题： （1）蒸稻壳的目的除了去除稻壳中残留的农药、霉烂味，还有_____作用。蒸馏后要进行快速冷却，目的是为了防止_____。 （2）菌种选育过程，为了纯化酵母菌，操作如图2所示。该过程的接种方法是_____，接种工具进行了_____次灼烧灭菌。扩大培养目的是_____，使用的培养基按物理性质分类，属于_____培养基。 （3）绿豆烧酒的生产流程中，没有严格的灭菌操作，但发酵过程几乎不会受杂菌污染影响，这是因为_____。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，需要在低温、_____环境中储存一段时间进行后发酵，这样才能形成醇香柔和的绿豆烧酒。 （4）为了筛选优势酿酒酵母菌，将从发酵罐中分离得到的酵母菌编号为T24和F12，进行酒精、SO2耐受性试验。试验结果如图3所示。 综合耐受性试验研究结果，确定_____为优势葡萄酒酵母菌，理由有_____。 21. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题： （1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是_____，过程②选用的骨髓瘤细胞_____（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 （2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行_____和_____，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是_____ (答出三点)。 （3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是_____。图2方框内需要经过_____次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为_____、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 （4）假设图2中双特异性抗体分子是由若干个氨基酸形成的，下列叙述不正确的是 。 A. 该特异性抗体能与人体内各类肿瘤细胞结合 B. 双特异性抗体可以在人体内持续发挥作用 C. 该双特异性抗体的制备过程中只用到了动物细胞融合技术 D. 双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，因而不具有特异性 （5）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_____。 22. 有些人由于不能完全消化牛奶中的乳糖，饮用牛奶后易出现腹泻等不适症状，这称为乳糖不耐受。为了解决这一问题，科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，使获得的转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响。根据如下操作流程回答相关问题： （1）为了获得更多的卵母细胞，在进行①过程前，需要用_____处理奶牛A，从输卵管中采集卵母细胞后，还需要体外培养至_____期，才可以进行③过程。通过图中②过程采集的B奶牛精子不能直接使成熟的卵细胞受精，常用化学诱导法对奶牛的精子进行_____处理，即用一定浓度的_____或钙离子载体溶液处理。 （2）⑤过程表示将重组质粒导入受体细胞，常用的方法是_____。当受精卵发育到_____时，需要取_____细胞进行性别鉴定，以确保发育成熟的牛能分泌乳汁。同时还要用基因探针与目的基因杂交，以检测_____。 （3）⑥过程在移植胚胎前，可以选择发育良好、形态正常的_____进行胚胎分割。 （4）外源基因插入奶牛受精卵中的DNA上后，导致有的受精卵发育成转基因奶牛，有的会死亡。分析导致受精卵死亡的最可能原因是_____。⑦过程的检测结果为_____ 时，说明转基因奶牛D是符合要求的优质牛。 23. 已知组成型启动子可以高效地启动目的基因在植物各种组织中的表达，但常会阻碍植物的生长发育。诱导型启动子可在特定环境条件下诱导目的基因的表达。沙冬青脱水素基因（AmDHN基因）能使植株具有较强的抗旱作用。科研人员通过构建AmDHN基因表达载体，以培育耐旱苜蓿新品种，所用载体如下图所示，请回答下列问题： 限制酶 BclI SacI BamHI PstI SmaI 识别序列和酶切位点 T↓GATCA GAGCT↓C G↓GATCC CTGCA↓G CCC↓GGG 注：neor是新霉素抗性基因，aadA是链霉素抗性基因，Ori表示复制原点。 （1）用载体1构建含AmDHN目的基因的表达载体，可以成功转化苜蓿，但会出现抑制抗性芽生长和抗性植株生根的现象，推测35S启动子属于_____启动子。 （2）下图是科研人员扩增Rd29A启动子所设计的引物，根据引物的碱基序列及限制酶的识别序列分析，构建载体2时选用的限制酶是_____。为了改造载体1中的启动子，需要用_____酶切割载体1、2为最佳。 （3）构建Rd29A启动子驱动AmDHN基因的表达载体后，先将其导入_____，再转化苜蓿。转化后应在培养基中添加_____进行筛选。 （4）为检测转基因苜蓿中AmDHN基因的表达水平，科研人员做了相关实验。下表呈现了部分操作步骤，请完成表格： 实验步骤的目 的简要操作过程 ①_____ 在转基因无菌苗根系长至2-3cm时，将培养无菌苗三角瓶的封口膜打开，培养一周，观察其生长状况。 提供适宜生长条件 将甲组幼苗根系置于300mL水中。 模拟干旱胁迫条件 ②_____。 无关变量控制 将甲、乙两组置于温度、光照等条件适宜且相同的环境中培养8h，之后剪取两组叶片放在液氮中储存。 ③_____，并估算目的基因的表达量 对叶片研磨、离心后，提取总RNA，以AmDHN和MtActin基因两端脱氧核苷酸序列为依据设计引物，进行RT-PCR扩增。扩增产物用④_____电泳检测，EB（溴化乙锭）染色照相如图。MtActin（一种细胞骨架蛋白）作为⑤_____。 24. RCA是一种核基因（rca）编码的一种叶绿体蛋白。为研究RCA对光合作用的影响及机理，科研人员构建反义rca基因表达载体（rca基因反向插入表达载体），利用农杆菌转化法导入玉米细胞，成功获得rca基因沉默的转基因品种（如图），①~⑥表示相关过程。请回答下列问题： （1）参与过程①的酶有__________，合成的rac基因中_____（填“存在”或“不存在”）启动子，在引物设计时，需分别在上下游引物的5'端添加_____、_____的识别序列，以确保反义表达载体的构建。 （2）C4pdk启动子的基本单位是_____，经过程②替换Ti质粒上原有启动子的目的是_____。 （3）过程④常用的方法是__________，经过程⑤后，可利用含__________的培养基筛选出转染成功的玉米细胞。若通过PCR筛选出转染成功的玉米细胞，某同学提出应针对rac基因的特定序列设计引物，你认为该想法是否可行？__________（可行/不可行），原因是____________________。 （4）为研究RCA对光合作用的影响及机理，科研人员将野生型玉米和转基因玉米在适宜光照条件下进行培养，一段时间后分别测定相关指标，结果如下表（Rubisco是光合作用暗反应中的一种关键酶）。 品种 检测指标 光合速率 叶绿素总量 Rubisco含量 Rubisco活力 野生型玉米 19.88 9.07 1.68 32.68 转基因玉米 9.57 9.09 3.21 14.95 据表分析，RCA对玉米的光合作用具有_____（从“促进”或“抑制”中选填）作用，其机理主要是通过__________ 来影响光合作用强度。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$