专题05 动物细胞工程（四川专用）-【好题汇编】备战2024-2025学年高二生物下学期期中真题分类汇编

专题5 动物细胞工程及其应用 考点概览 考点01动物细胞工程的原理 考点02 动物细胞工程的应用 动物细胞工程的原理考点01 1．（23-24高二下·四川眉山·期中）2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（    ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 D．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 2．（23-24高二下·四川南充·期中）诺贝尔生理学奖获得者发现，利用逆转录病毒将0ct4等4个关键基因导入已分化的体细胞中并表达，可使这个细胞成为类似干细胞的诱导多能干细胞（iPS细胞）。下图为该技术在人体细胞中的实验示意图。下列相关叙述不正确的是（    ）    A．iPS细胞核移植比胚胎干细胞核移植更容易表现全能性 B．iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，还可以避免免疫排斥 C．导入的4个关键基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力 D．①②③利用iPS获得各种器官组织时应加入分化诱导因子 3．（23-24高二下·四川内江·期中）某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（    ） A．若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育 B．获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异 C．XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化 D．营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制 4．（23-24高二下·四川南充·期中）如图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程，下列相关叙述正确的是（　　） A．“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重 B．该试验中用到的培养液也能用来培养乙肝病毒 C．生物反应器内应控制适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸 D．培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖 5．（23-24高二下·四川达州·期中）下图是在单克隆抗体制备过程中，对特定单克隆抗体（单抗）进行检测筛选原理示意图。相关叙述不正确的是（　　） A．检测涉及到的主要原理是抗体能与抗原特异性结合 B．图中“抗原”应是免疫小鼠时注射的物质 C．图中“二抗”必须结合到待测单抗的可变区（具特定氨基酸序列的片段） D．可根据反应体系中颜色的深浅来判断待测单抗的含量 6．（23-24高二下·四川绵阳·期中）图1为单克隆抗体的制备流程，详细过程②如图2所示，下列相关叙述错误的是（    ）    A．图1中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶处理 B．图1中过程①筛选出的杂交瘤细胞具有能迅速大量增殖的特点 C．图2中多孔玻璃板的每个孔中要接种多个杂交瘤细胞 D．图2中进行抗体检测是利用了抗原与抗体特异性结合的原理 7．（23-24高二下·四川内江·期中）以下关于动物体细胞核移植技术与克隆动物的表述错误的是（　　） A．重构胚具有发育成完整个体的能力 B．激活重构胚常用的方法有电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等 C．克隆动物的遗传物质全部来自供体细胞 D．目前获得的许多克隆动物都表现出遗传和生理缺陷，克隆技术仍需改进 8．（23-24高二下·四川内江·期中）如图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体—药物偶联物（ADC）的示意图，它由抗体、接头和小分子药物三部分组成，能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。例如，用于治疗乳腺癌的Kadcyla“是由阿多曲妥珠单抗和药物美坦新偶联的ADC。下列叙述正确的是（　　） A．单克隆抗体由杂交瘤细胞以胞吐方式释放体现了细胞膜的选择透过性 B．药物美坦新识别并杀伤乳腺癌细胞体现了抗原—抗体的特异性结合 C．ADC中接头稳定性偏低，会导致药物分子容易脱落，对正常细胞造成损伤 D．ADC作用于肿瘤细胞后可引起后者的坏死，从而实现选择性杀伤的治疗效果 9．（23-24高二下·四川内江·期中）下列有关动物细胞培养的表述错误的是（　　） A．培养环境中不仅需要氧气，还需要二氧化碳 B．动物细胞培养体现了动物细胞核具有全能性 C．培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等营养成分 D．悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再作离心收集 10．（23-24高二下·四川德阳·期中）培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述错误的是（　　） A．用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B．生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的CO2，保证培养液pH相对稳定 C．培养液中的支架提供了更多的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D．“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，减少环境污染 11．（23-24高二下·四川德阳·期中）动物细胞培养包含原代培养和传代培养，其中原代培养过程如图所示，下列对相关处理及原因的叙述，错误的是（　　） A．容器甲中幼龄动物组织需要剪碎处理，因为细胞靠在一起限制细胞的生长和增殖 B．锥形瓶乙中用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞，因为细胞间的物质主要是蛋白质 C．培养瓶丙应置于100%O2中培养，因为O2是细胞代谢所必需的 D．培养瓶丙需灭菌处理，培养时细胞大多具有贴壁生长和接触抑制的特点 12．（23-24高二下·四川凉山·期中）为了避免夫妻把某些致病基因遗传给孩子，医生先去除女性捐赠者卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中的细胞核取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育，这样诞生的孩子称为“三亲婴儿”，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述正确的是（    ）    A．该技术涉及核移植、植物组织培养和体外受精等操作 B．该技术不能避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 C．乙卵母细胞携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿” D．“三亲婴儿”同时拥有甲、乙和丙细胞的部分基因 13．（23-24高二下·四川成都·期中）世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿，是由经CRISPR/Cas9基因编辑技术对CCR5基因进行修改的胚胎细胞孕育的。研究者的初衷是让志愿者生出能抗艾滋病病毒的婴儿。但婴儿诞生后，深圳市医学伦理专家委员会启动对该事件涉及伦理问题的调查。下列有关叙述错误的是（    ） A．在普通培养液中加入适量的动物血清可以培养艾滋病病毒 B．修改的胚胎细胞孕育出婴儿说明胚胎细胞具有发育的全能性 C．胚胎是人生命的一个自然阶段，不能对其生命属性进行非道德篡改 D．经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生 14．（23-24高二下·四川成都·期中）CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞激活或使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4或抗PD-1单克隆抗体具有较好的抗肿瘤效果。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，其产生的抗CTLA-4和抗PD-1的双克隆抗体显示具有更好的疗效，如图所示。下列叙述不正确的是（    ） A．双杂交瘤细胞无需识别CTLA-4和PD-1抗原，就能产生双特异性抗体 B．双克隆抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用 C．筛选图中双抗时需要使用CTLA-4和PD-1两种抗原 D．使用双克隆抗体治疗肿瘤的原理是让机体产生更强的细胞免疫反应 15．（23-24高二下·四川成都·期中）Vero细胞是从非洲绿猴的肾脏上皮细胞中分离培养出来的，可无限增殖且能悬浮培养。因不能合成抗病毒蛋白干扰素，因而广泛应用在病毒性疫苗生产上，下列叙述错误的是（    ） A．培养Vero细胞时需要提供5%二氧化碳和95%空气 B．培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 C．Vero细胞无需胰蛋白酶等处理可传代培养 D．生产病毒性疫苗时，可将病毒接种到Vero细胞，培养后提取病毒可直接成为疫苗 16．（23-24高二下·四川广安·期中）我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列叙述错误的是（    ）    A．过程①中小分子化合物诱导成纤维细胞突变为iPS细胞 B．过程②中的卵母细胞需要在体外培养到MⅡ期再除去细胞核 C．过程③中可使用电融合法诱导两细胞融合，进而形成重构胚 D．组蛋白去甲基化和乙酰化水平提高可能有利于重构胚后续的胚胎发育 17．（23-24高二下·四川·期中）关于单克隆抗体制备的叙述中，错误的是（    ） A．正常小鼠注射特定抗原后能产生特定类型的B淋巴细胞 B．可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合 C．诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后的细胞即为杂交瘤细胞 D．杂交瘤细胞的优点是既能迅速大量增殖又能产生特定抗体 18．（23-24高二下·四川·期中）下列有关现代生物技术的叙述错误的是（    ） A．在动物细胞培养液中添加一定量的抗生素以防止杂菌污染 B．动物细胞培养过程中分瓶培养可解除贴壁生长过程中的接触抑制 C．动物细胞培养中控制培养箱中CO 2 浓度可维持培养液中的pH D．转基因羊和克隆羊多利的培育都克服了远缘杂交不亲合的障碍 19．（23-24高二下·四川·期中）下列关于植物体细胞杂交技术的叙述错误的是（    ） A．该技术打破生殖隔离，实现远缘杂交 B．可用灭活病毒诱导植物体细胞融合 C．再生出细胞壁是杂种细胞形成的标志 D．可用酶解法获得植物细胞的原生质体 20．（23-24高二下·四川·期中）下列关于动物细胞培养过程的顺序是（    ） ①传代培养②胰蛋白酶等处理组织，形成分散的细胞③原代培养 A．①②③ B．③①② C．②③① D．①③② 21．（23-24高二下·四川广元·期中）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（    ） A．用于培养的细胞一般取自胚胎或幼龄动物的组织或器官 B．常用培养皿或松盖培养瓶，并置于 95%O2 和 5%的 CO2 气体培养箱中 C．培养瓶中的细胞都需要定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续培养 D．细胞在贴壁生长的过程中会出现接触抑制现象，但不会影响细胞的分裂 22．（23-24高二下·四川成都·期中）下图表示抗人体胃癌的单抗抗体的制备过程，有关叙述错误的是（　　）    A．图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B．利用电融合的方法可诱导细胞融合获得乙 C．用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D．对丙需进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 23．（23-24高二下·四川南充·期中）如图表示生物工程常用技术的流程，下列叙述不正确的是（    ） A．若上图表示用良种牛体细胞克隆牛的培育流程，要通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块分散成单个细胞 B．若此图1、2→3表示动物细胞融合，则形成杂种细胞3的原理是细胞膜具有流动性 C．若上图表示单克隆抗体的制备流程，用来促进细胞1和细胞2融合的灭活病毒，并未破坏其抗原结构 D．若上图表示植物体细胞杂交流程，形成3的过程表示原生质层的融合，完成融合的标志是再生出新的细胞壁 24．（23-24高二下·四川成都·期中）利妥昔单抗适用于复发或耐药的滤泡性中央型淋巴瘤的治疗，下图是其制备过程的示意图（HAT培养基为特定的选择培养基），下列相关说法错误的是（    ） A．利用HAT培养基可以筛选出杂交瘤细胞 B．第二次筛选是选出能生成特定抗体的杂交瘤细胞 C．将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞大规模培养 D．除了体外培养，还可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖 25．（23-24高二下·四川成都·期中）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列有关说法错误的是（    ） A．蛋白酶分散细胞的时间太长会分解膜蛋白，造成细胞损伤 B．动物细胞培养时，可能会多次使用胰蛋白酶来分散细胞 C．贴壁细胞的生长有接触抑制的现象，需要对细胞进行分瓶培养 D．动物细胞培养时，充入5%CO2的目的是刺激细胞的正常呼吸 26．（23-24高二下·四川绵阳·期中）人体肿瘤细胞表面存在PD-L1蛋白。试剂盒中的一种抗PD-L1单克隆抗体能与肿瘤表面的PD-L1特异性结合，发挥诊断作用。利用小鼠制备抗PD-L1单克隆抗体的流程如图，下列叙述错误的是（    ）    A．制备抗PD-L1单克隆抗体使用的B淋巴细胞取自注射过PD-L1的小鼠脾脏 B．放入96孔板的细胞为多种杂交瘤细胞，均能产生所需抗体 C．诱导动物细胞融合常用的方法除了图中的PEG融合法，还有电融合法和灭活病毒诱导法 D．将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗PD-L1单克隆抗体 27．（23-24高二下·四川绵阳·期中）如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图，相关叙述错误的是（    ） A．在培养iPS细胞的过程中定期更换培养液的目的是清除细胞代谢物，防止对细胞自身造成伤害 B．过程③④分化得到的细胞不同，是因为iPS细胞在培养过程中发生了遗传物质的改变 C．若iPS细胞来源于病人自身体细胞，再将其分化出的细胞移入患者体内可以避免免疫排斥反应 D．若要了解这4个关键基因在诱导产生iPS细胞时每个基因作用的相对大小，可以在各实验组中依次去掉1个基因来进行推测 28．（23-24高二下·四川·期中）下列关于动物细胞融合与植物体细胞杂交的叙述错误的是（    ） A．均体现出细胞膜具有流动性 B．融合前均需要用酶解法处理 C．所用到的技术手段完全相同 D．诱导融合的方法不完全相同 29．（23-24高二下·四川成都·期中）下列关于细胞工程操作流程的表述，错误的是（　　） A．动物组织细胞悬液→原代培养传代培养 B．高产奶牛体细胞去核的牛卵母细胞重组细胞 C．B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合细胞单克隆抗体 D．菊花幼嫩茎段切成0.5～1 cm长的小段愈伤组织植株 30．（23-24高二下·四川成都·期中）植物体细胞杂交和动物细胞融合有很多相似之处。下列关于两种技术的说法，正确的是（    ） A．两种技术融合的基本原理相同，诱导方法也完全相同 B．两种技术都是先进行细胞膜融合，再进行细胞核融合 C．两种技术只能用于不同种细胞的融合，同种细胞间不可以 D．植物体细胞杂交不需要获得单个细胞，动物细胞培养需要 31．（23-24高二下·四川成都·期中）下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（    ） A．过程①需要提供95%空气和5%O2的混合气体 B．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 C．过程③可用Ca2+、聚乙二醇等促进细胞分裂和发育进程 D．后代丁牛的遗传性状与甲牛基本相同，与丙牛无遗传联系 32．（23-24高二下·四川成都·期中）甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．细胞甲都是能够产生抗甘草酸抗体的B淋巴细胞 B．过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性 C．过程④利用了选择培养基筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D．过程⑤无论是在体内还是在体外进行，细胞丁都可大量增殖 33．（23-24高二下·四川成都·期中）科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞能增殖分化为多种组织细胞，用于某些疾病的治疗。下列有关叙述正确的是（    ） A．iPS细胞存在于早期胚胎、外周血和脐带血中 B．获得iPS细胞的过程中，细胞的遗传物质一定不变 C．iPS细胞分化产生的组织细胞基因相同，蛋白质也相同 D．与造血干细胞相比，iPS细胞的分化程度低，全能性高 34．（23-24高二下·四川南充·期中）下列有关细胞工程的叙述，正确的有（　　） ①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍 ②动物细胞培养时不能用机械的方法将组织分散成单个细胞 ③利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体 ④利用核移植技术可以培育试管婴儿 ⑤桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” ⑥胚胎移植一般只包括从供体、受体的选择到移植结束，而不包括后续的检查过程 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 35．（23-24高二下·四川南充·期中）下列关于生物科学技术的叙述，正确的是（    ） A．用纤维素酶和果胶酶水解法获得的原生质体仍有全能性 B．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理基本相同，都能形成杂种细胞和杂种个体 C．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能发生细胞脱分化，还可能发生基因突变、基因重组和染色体变异 D．通过细胞核移植技术获得的动物与供体动物性状完全相同 36．（23-24高二下·四川成都·期中）关于动物细胞融合技术与单克隆抗体，下列说法错误的是（    ） A．与原生质体融合相比，动物细胞融合还可使用灭活的病毒 B．动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，未体现细胞的全能性 C．杂交瘤细胞和浆细胞都是能合成并分泌抗体的细胞 D．抗体—药物偶联物中的药物能特异性识别并杀伤肿瘤细胞 37．（23-24高二下·四川绵阳·期中）下图为肾脏上皮细胞，培养过程示意图，下列叙述正确的是（    ） A．细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 B．丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需要在添加血清的合成培养基中进行 C．丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，而丁过程不会出现此现象 D．为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气 动物细胞工程的应用考点02 1．（23-24高二下·四川眉山·期中）为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程。下列分析错误的是（    ） A．B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得 B．HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞 C．杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降 D．图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产 2．（23-24高二下·四川绵阳·期中）中药是几千年来人们智慧的结晶，但由于药源材料减少以及中药化学成分的复杂性和不确定性，对其进行质量控制是中药行业所面临的重要问题。请回答下列问题： (1)为快速繁殖某中药品种，科研工作者采用了组织培养技术，对自然生长的茎进行组培需要进行外植体消毒，具体方法是 ；组培苗锻炼时常采用蛭石作为栽培基质的原因是 。 (2)植物组织培养中 的使用比例影响植物细胞发育，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成。 (3)为对中药成分进行定性和定量研究，科学家制备了甘草酸-人血清白蛋白的融合蛋白，并以此为抗原制备了抗甘氨酸的单克隆抗体。单抗的制备过程中有两次筛选，运用多孔细胞板筛选的目的是 ，与常规抗体相比，单抗的优点是 。 3．（23-24高二下·四川南充·期中）为降低宫颈癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），以便精准治疗，过程如图1所示。 (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自 。 (2)步骤④是将获得的a单克隆抗体和b治疗宫颈癌的药物这两部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC，作用机制如下图2，据图回答： ①ADC能降低宫颈癌治疗药物的副作用，是因为 能精确地定位宫颈癌细胞，该过程的原理是 。 ②根据图2，尝试解释ADC的作用机理：ADC进入宫颈癌细胞后，细胞中的 释放水解酶可将其水解，释放出的药物最终作用于 ，可导致癌细胞凋亡。 4．（23-24高二下·四川德阳·期中）人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： (1)细胞培养中，培养液常用 方法灭菌。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是 ，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是 。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 ，可通过测定产物量来判断待测抗原量。 5．（23-24高二下·四川成都·期中）犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。回答下列问题：   (1)制备单克隆抗体依赖的生物技术有 （答出2点）。步骤①中，用灭活的CPV免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是 。 (2)经过步骤②后获得的是多种类型的杂交细胞，原因是 。对杂交细胞等用特定的选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，对杂交瘤细胞进行 ，经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。 (3)体外培养杂交瘤细胞后从培养液中提取到抗CPV单克隆抗体。杂交瘤细胞的培养液中有各种营养物质，还需要添加 以补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染。与培养大多数动物体细胞不同，骨髓瘤细胞在培养过程中不会出现 的现象，只要营养等条件适宜即可一直增殖。 (4)对疑似感染CPV的幼犬进行确诊时，可用获得的抗CPV单克隆抗体进行检测，所依据的原理是 。 6．（23-24高二下·四川遂宁·期中）双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。分析回答： (1)过程①注射癌胚抗原，制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有 。 (2)过程②诱导融合的方法有 （至少写出两种），假设仅考虑某两个细胞的融合，则经过②过程试管内含有 种类型的细胞。 (3)过程③能在HAT选择培养基上生长的细胞是 ，未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是 。 (4)经过程③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程④，原因是 。 (5)获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或 ，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。 7．（23-24高二下·四川内江·期中）2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。在培育过程中，我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。培育克隆猴的流程如图所示，请结合图回答问题。    (1)为获得数量较多的卵母细胞，采集前应先用 激素处理母猴，从卵巢采集到的卵母细胞经成熟培养后进行“去核”处理，这里的“核”是指 。 (2)研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是 。将体细胞注入去核卵母细胞比早期核移植中将核注入去核卵母细胞更有进步意义，原因是 。 (3)研究人员将Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用TSA处理了它。这两种物质都是通过改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达，据题干信息推测其中Kdm4d的作用机制可能是 。从结果来看，两种物质可以 （填“提高”或“降低”）胚胎的发育率和妊娠率。 8．（23-24高二下·四川德阳·期中）下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，回答下列问题：    (1)在培养体细胞时需要创造无菌无毒的环境，“无菌无毒环境”中的“毒”是指有害代谢产物。对培养液进行 等操作，可创造无菌无毒的环境。 (2)植物组织培养有一项应用是培育“脱毒苗”，脱毒苗中的“毒”主要是指 ，此过程常常选取茎尖作为外植体，其依据是 。 (3)目前核移植技术中常用的去核方法为 ，同一胚胎干细胞可分化为多种细胞是 的结果。 (4)若将上述结果用于白血病病人的骨髓移植，如果图中患者是A型血，提供卵母细胞的女性是AB型血，则骨髓移植成功后患者的血型是 型。按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是 。 9．（23-24高二下·四川内江·期中）犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。回答下列问题： (1)制备单克隆抗体依赖的生物学技术有 和 。 (2)经过步骤②后获得的是多种类型的杂交细胞，原因是 。对杂交细胞用特定的选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，然后对杂交瘤细胞进行 ，再经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。 (3)体外培养杂交瘤细胞后从培养液中提取到抗CPV单克隆抗体。杂交瘤细胞的培养液中有各种营养物质，还需要添加 以补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染。 10．（23-24高二下·四川成都·期中）女性怀孕后会合成并分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），并且该激素会出现在尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以诊断是否怀孕。如图表示早早孕诊断试剂盒内部试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体，抗体2和抗体3分别固定在试纸条的检测 线（T线）和质控线（C线），抗体1进行了胶体金标记，该标记物可以在T线或C线处显色。回答下列问题：    (1)女性在妊娠第8天左右，尽管体内HCG含量很低，但仍可用抗人绒毛膜促性腺激素单抗制成的“早早孕诊断试剂盒”作出诊断，体现出单克隆抗体具有 的优点。 (2)图1中单克隆抗体2制备的过程中，需要反复向小鼠注射 作为抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合。经选择培养后获得的杂交瘤细胞的特点是 。为了得到能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要进行克隆化培养和抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行，先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是 。最后将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或 ，从而获取大量的单克隆抗体。 (3)图2表示三位女士的检测结果，其中表示没有怀孕的是 ，检测结果无效的是 。出现甲结果的原理是 。 11．（23-24高二下·四川广元·期中） CD47 是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。研究发现，多种肿瘤细胞表面的 CD47 含量比正常细胞高 1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗 CD47 的单克隆抗体可以解除 CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，回答下列问题。 (1)步骤①，运用 CD47 对实验小鼠进行多次免疫，目的是 。步骤②，运用特定的 对细胞进行第一次筛选，只有 才能生长，此类细胞的特点是 。 (2)进行③之前还要进行第二次筛选才能获得产生抗 CD47 的单克隆抗体的杂交瘤细胞，筛选的方法是 ，原理是 。 (3)对照组应设置为 。能验证“CD47 的单克隆抗体可以解除 CD47 对巨噬细胞的抑制作用”这一推论的实验结果是 。 12．（23-24高二下·四川南充·期中）胃癌是我国发病率很高的一种恶性疾病，制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体制备过程如图。回答下列问题： (1)抗胃癌单克隆抗体制备过程中要用到 技术。 (2)甲代表 细胞。 (3)诱导骨髓瘤细胞与甲融合，可用的诱导因素有 、 等(写出两种)。 (4)在甲、丙及骨髓瘤细胞中，只有丙经培养后，可获得大量的抗胃癌单克隆抗体，原因是 。 (5)与血清抗体相比，单克隆抗体的优点是 。单克隆抗体在实践中有广泛的应用，如可作为 ，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。 13．（23-24高二下·四川绵阳·阶段练习）双特异性抗体可同时与癌细胞和免疫细胞特异性结合，它一端与癌细胞结合，一端与T细胞结合，将T细胞拉近癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率。CD19是癌细胞表面的抗原蛋白，CD3蛋白受体位于T细胞表面，与抗体结合后，其免疫功能得到激活。下图是研究人员通过杂交瘤细胞技术生产双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题： (1)给小鼠注射CD19蛋白，是为了从小鼠的脾脏中分离得到 ；注射的抗原A是指 。 (2)过程②和④所用诱导方法与诱导植物细胞融合所用方法的不同之处是 。过程③培养杂交瘤细胞时需提供一定的气体环境，其中的主要作用是 。过程⑤筛选获得的细胞具有的特点是 。 (3)与从动物血清中分离的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是 （答出2点）。双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于单克隆抗体CD19，原因是 。 14．（23-24高二下·四川成都·期中）双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（即免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性抗体的部分过程；图2是某双特异性抗体的作用示意图。请分析回答下列问题： (1)图1中过程①需多次注射癌胚抗原，目的是 。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是 ，过程②选用的骨髓瘤细胞 （填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 (2)如图1所示，杂交瘤杂交法是将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合，目的是为了获得 的抗体。 (3)体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为 、 等因素而导致分裂受阻，需进行传代培养。 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。 2 / 22 / 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题5 动物细胞工程及其应用 考点概览 考点01动物细胞工程的原理 考点02 动物细胞工程的应用 动物细胞工程的原理考点01 1．(23-24高二下·四川眉山中学·期中)2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10s内去核，15s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述错误的是（    ） A．科学家多年的反复实验带来的娴熟技术使卵细胞受损减少 B．核移植前用“灭活病毒短暂处理”主要目的是诱导细胞融合 C．上述技术有助于加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程 D．“聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而抑制基因表达 【答案】D 【来源】四川省眉山中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。 【详解】A、科学家多年的反复实验带来的娴熟技术减少对卵细胞的伤害，提高了核移植技术的成功率，A正确； B、诱导动物细胞融合的方法可以是灭活的病毒，B正确； C、上述技术有助于加快灵长类动物的克隆技术进步，加速针对阿尔茨海默病、免疫缺陷、肿瘤等的新药研发进程，C正确； D、重构胚中有部分基因进行选择性表达，本质可能是表观遗传修饰，所以需要用组蛋白去甲基化酶的mRNA来降低组蛋白甲基化水平，组蛋白脱乙酰化抑制剂来提高组蛋白乙酰化水平，从而促进基因表达，D错误。 故选D。 2．(23-24高二下·四川西充中学·期中)诺贝尔生理学奖获得者发现，利用逆转录病毒将0ct4等4个关键基因导入已分化的体细胞中并表达，可使这个细胞成为类似干细胞的诱导多能干细胞（iPS细胞）。下图为该技术在人体细胞中的实验示意图。下列相关叙述不正确的是（    ）    A．iPS细胞核移植比胚胎干细胞核移植更容易表现全能性 B．iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，还可以避免免疫排斥 C．导入的4个关键基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力 D．①②③利用iPS获得各种器官组织时应加入分化诱导因子 【答案】A 【来源】四川省西充中学2023-2024学年高二下学期期中检测生物试题 【分析】分析题图：图示表示将4个关键基因移植入已分化的体细胞中并表达，使这个细胞成为具有类似干细胞的诱导多能干细胞（iPS细胞）。图中@②③表示细胞分化，其实质是基因的选择性表达。用该技术得到的新生器官替换供体病变器官，属于自体移植，不发生免疫排斥反应，这可以大大提高器官移植成功率。 【详解】A、结合题意“iPS细胞是类似干细胞的诱导多能干细胞”，而胚胎干细胞属于全能干细胞，故胚胎干细胞核移植更容易表现全能性，A错误； B、iPS技术不使用胚胎细胞或卵细胞，只需对体细胞进行操作及适当的培养即可，无需破坏胚胎，由于该技术属于自体移植，还可以避免免疫排斥，B正确； C、根据题文，导入的基因能促使已分化的体细胞成为诱导多能干细胞（iPS细胞），已分化体细胞无分裂能力或分裂能力较弱，而干细胞是一类有分裂能力的细胞，故导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力，C正确； D、iPS可分化为多种细胞，加入分化诱导因子才能获得相应的组织或器官，D正确。 故选A。 3．(23-24高二下·四川内江第一中学·期中)某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（    ） A．若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育 B．获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异 C．XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化 D．营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制 【答案】D 【来源】四川省内江市第一中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】干细胞是一类具有自我复制能力及多向分化潜能的细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。 【详解】A、若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法即获得有功能的卵母细胞，进而用于繁育，实现濒危物种的保护，A正确； B、XO胚胎干细胞中丢失了Y染色体，因而该细胞的获得过程发生了染色体数目变异，B正确； C、XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化，即细胞的功能发生了特化，因而发生了细胞分化，C正确； D、胚胎干细胞不能无限增殖，营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞也会发生接触抑制，D错误。 故选D。 4．(23-24高二下·四川南充白塔中学·期中)如图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程，下列相关叙述正确的是（　　） A．“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重 B．该试验中用到的培养液也能用来培养乙肝病毒 C．生物反应器内应控制适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸 D．培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖 【答案】D 【来源】四川省南充市白塔中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高，并可以减少成本和降低环境污染。 【详解】A、理论上来说，仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量，比宰杀1头牛还多100万倍，可有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，A错误； B、该试验中用到的培养液用来培养动物细胞，不能用来培养乙肝病毒，B错误； C、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2，C错误； D、动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上，培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。 故选D。 5．(23-24高二下·四川达州万源万源中学·期中)下图是在单克隆抗体制备过程中，对特定单克隆抗体（单抗）进行检测筛选原理示意图。相关叙述不正确的是（　　） A．检测涉及到的主要原理是抗体能与抗原特异性结合 B．图中“抗原”应是免疫小鼠时注射的物质 C．图中“二抗”必须结合到待测单抗的可变区（具特定氨基酸序列的片段） D．可根据反应体系中颜色的深浅来判断待测单抗的含量 【答案】C 【来源】四川省达州市万源市万源中学2023-2024学年高二下学期5月期中生物试题 【分析】题图分析：图中所示为单克隆抗体的筛选过程：把抗原固定在一定的固体表面，把待测单克隆抗体与抗原混合，如果单克隆抗体与该抗原能发生结合反应，则该单克隆抗体就是所需要的抗体。但是该反应无法用肉眼观察，因此还要用二抗来进行显色。显色的原理是，用单抗作为抗原制备出二抗，然后把催化无色底物反应的酶与之结合，单抗和二抗会发生特异性结合，二抗上携带的酶催化无色底物反应，生成有色产物。依据发不发生显色反应，可以判定单克隆抗体与固体表面抗原有没有发生特异性结合，从而判定待测单抗是否是目的单抗。 【详解】A、把抗原固定在一定的固体表面，把待测单克隆抗体与抗原混合，涉及到的主要原理是抗体能与抗原特异性结合，A正确； B、图中“抗原”应是免疫小鼠时注射的物质，如果单克隆抗体与该抗原能发生结合反应，则该单克隆抗体就是所需要的抗体，B正确； C、由图可知，抗原结合到待测单抗的可变区，二抗结合到待测单抗的恒定区，C错误； D、单抗和二抗会发生特异性结合，二抗上携带的酶催化无色底物反应，生成有色产物，反应体系中单抗越多，结合的二抗越多，酶催化产生的有色产物越多颜色越深，因此，根据反应体系中颜色的深浅来判断待测单抗的含量，D正确。 故选C。 6．(23-24高二下·四川绵阳中学·期中)图1为单克隆抗体的制备流程，详细过程②如图2所示，下列相关叙述错误的是（    ）    A．图1中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶处理 B．图1中过程①筛选出的杂交瘤细胞具有能迅速大量增殖的特点 C．图2中多孔玻璃板的每个孔中要接种多个杂交瘤细胞 D．图2中进行抗体检测是利用了抗原与抗体特异性结合的原理 【答案】C 【来源】四川省绵阳中学2023-2024学年高二下学期5月期中生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、图中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶（胶原蛋白酶）处理将组织分散成单个细胞，A正确； B、图1中过程①是将细胞放在选择性培养基上培养，选出能迅速大量增殖的多种杂交瘤细胞，B正确； C、过程②为筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞玻璃板上，尽量使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖，C错误； D、图2表示过程②，取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入到多孔玻璃板中，在适宜条件下培养，然后利用抗原与抗体特异性结合的原理进行抗体检测，检测阳性反应孔中的细胞还需多次稀释培养并检测，最终将能产生特定（所需）抗体的杂交瘤细胞筛选出来，D正确。 故选C。 7．(23-24高二下·四川内江第六中学·)以下关于动物体细胞核移植技术与克隆动物的表述错误的是（　　） A．重构胚具有发育成完整个体的能力 B．激活重构胚常用的方法有电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等 C．克隆动物的遗传物质全部来自供体细胞 D．目前获得的许多克隆动物都表现出遗传和生理缺陷，克隆技术仍需改进 【答案】C 【来源】四川省内江市第六中学2023-2024学年高二下学期半期考试生物试卷 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程；克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析致病基因；克隆特定疾病模型的动物，还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。 【详解】A、重构胚可以发育成一个完整个体，A正确； B、使用电刺激、Ca2+载体等方法可以激活重构胚, 使其完成细胞分裂和发育过程，B正确； C、克隆动物的核遗传物质全部来自供体细胞，细胞质遗传物质来自供体细胞和去核卵母细胞，C错误； D、目前获得的许多克隆动物都表现出遗传和生理缺陷，如体型过大、异常肥胖等，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决，D正确。 故选C。 8．(23-24高二下·四川内江第六中学·)如图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体—药物偶联物（ADC）的示意图，它由抗体、接头和小分子药物三部分组成，能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。例如，用于治疗乳腺癌的Kadcyla“是由阿多曲妥珠单抗和药物美坦新偶联的ADC。下列叙述正确的是（　　） A．单克隆抗体由杂交瘤细胞以胞吐方式释放体现了细胞膜的选择透过性 B．药物美坦新识别并杀伤乳腺癌细胞体现了抗原—抗体的特异性结合 C．ADC中接头稳定性偏低，会导致药物分子容易脱落，对正常细胞造成损伤 D．ADC作用于肿瘤细胞后可引起后者的坏死，从而实现选择性杀伤的治疗效果 【答案】C 【来源】四川省内江市第六中学2023-2024学年高二下学期半期考试生物试卷 【分析】由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”。借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。 【详解】A、单克隆抗体由免疫过的B淋巴细胞（浆细胞）与瘤细胞形成的杂交瘤细胞合成并分泌，分泌过程为胞吐过程，分泌过程体现了细胞膜的流动性，A错误； B、药物美坦新并不具有识别作用，单克隆抗体才具有识别作用，B错误； C、由图可知，ADC中接头的作用是连接药物分子，其稳定性偏低可能会导致药物分子脱落，进而与正常细胞接触，造成正常细胞的损伤，C正确； D、ADC作用于肿瘤细胞后，可引起肿瘤细胞的凋亡，从而实现选择性杀伤的治疗效果，D错误。 故选C。 9．(23-24高二下·四川内江第六中学·)下列有关动物细胞培养的表述错误的是（　　） A．培养环境中不仅需要氧气，还需要二氧化碳 B．动物细胞培养体现了动物细胞核具有全能性 C．培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等营养成分 D．悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再作离心收集 【答案】B 【来源】四川省内江市第六中学2023-2024学年高二下学期半期考试生物试卷 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件： （1）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 （2）营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。 （3）温度、pH和渗透压：适宜温度：哺乳动物多是36.5°C+0.5°C；pH为7.2~7.4。 （4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、培养环境中不仅需要氧气，还需要二氧化碳，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH，A正确； B、动物细胞培养应用了动物细胞增殖的原理，即动物细胞培养只是使细胞数量增加，不能体现动物细胞核具有全能性，B错误； C、动物细胞培养的培养夜中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等，C正确； D、在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再用离心法收集，D正确。 故选B。 10．(23-24高二下·四川德阳什邡什邡中学·期中)培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述错误的是（　　） A．用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B．生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的CO2，保证培养液pH相对稳定 C．培养液中的支架提供了更多的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D．“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，减少环境污染 【答案】A 【来源】四川省德阳市什邡市什邡中学2023-2024学年高二下学期5月期中考试生物试题 【分析】动物细胞培养： （1）原理：细胞增殖； （2）流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】A、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞，胃蛋白酶的最适pH为2.0左右，而动物细胞培养的pH为7.2-7.4，此时胃蛋白酶失活，故不能用胃蛋白酶处理，A错误； B、生物反应器内应控制温度适宜，36.5±0.5℃，并充入一定量的CO2，以保证培养液的pH相对稳定，B正确； C、培养液中的支架为细胞提供了更大的附着面积，贴壁生长的细胞不仅可在培养瓶壁生长，还可以在支架上生长，故有利于细胞贴壁生长，C正确； D、理论上来说，仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量非常多，有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D正确。 故选A。 11．(23-24高二下·四川德阳什邡什邡中学·期中)动物细胞培养包含原代培养和传代培养，其中原代培养过程如图所示，下列对相关处理及原因的叙述，错误的是（　　） A．容器甲中幼龄动物组织需要剪碎处理，因为细胞靠在一起限制细胞的生长和增殖 B．锥形瓶乙中用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞，因为细胞间的物质主要是蛋白质 C．培养瓶丙应置于100%O2中培养，因为O2是细胞代谢所必需的 D．培养瓶丙需灭菌处理，培养时细胞大多具有贴壁生长和接触抑制的特点 【答案】C 【来源】四川省德阳市什邡市什邡中学2023-2024学年高二下学期5月期中考试生物试题 【分析】动物细胞培养时，取幼龄动物的组织，剪碎后，用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬浮液，转入细胞培养液中进行的培养是原代培养；当细胞贴满瓶壁，在用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬浮液，转入培养液中进行的是传代培养。 【详解】A、进行动物细胞培养时，首先将取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使之分散成单个细胞，因为细胞靠在一起限制细胞的生长和增殖，A正确； B、之所以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞，是因为细胞间的物质主要是蛋白质，而酶具有专一性，B正确； C、细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的作用是维持培养液的pH，所以要将培养瓶置于95%的空气加5%的CO2的混合气体的培养箱中进行培养，C错误； D、动物细胞培养时，培养瓶丙需灭菌处理，细胞具有贴壁生长和接触抑制的特点，要求培养瓶的内表面光滑、无毒、易于贴附，D正确。 故选C。 12．(23-24高二下·四川凉山州西昌·期中)为了避免夫妻把某些致病基因遗传给孩子，医生先去除女性捐赠者卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中的细胞核取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育，这样诞生的孩子称为“三亲婴儿”，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述正确的是（    ）    A．该技术涉及核移植、植物组织培养和体外受精等操作 B．该技术不能避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 C．乙卵母细胞携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿” D．“三亲婴儿”同时拥有甲、乙和丙细胞的部分基因 【答案】D 【来源】四川省凉山州西昌市2023-2024学年高二下学期期中检测生物试题 【分析】分析题图：图示表示“三亲婴儿”的培育过程，该过程中采用了核移植技术、体外受精技术、早期胚胎培养技术及胚胎移植技术。图中过程①表示将两个卵母细胞进行细胞核移植，过程②表示将重组卵母细胞培养到减数第二次分裂中期，过程③表示体外受精，④表示早期胚胎培养和胚胎移植。 【详解】A、该技术涉及核移植、体外受精等操作，但不涉及植物组织培养技术，A错误； B、该技术是用捐献者的卵细胞的细胞质和母亲的卵细胞的核重组，形成的重组卵再和父亲的精子结合，由于母亲的细胞质不参与该过程，故利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中母亲中的线粒体中的基因缺陷传给孩子，B错误； C、乙卵母细胞值提供细胞质，而红绿色盲基因位于细胞核的染色体上，故乙卵母细胞携带的红绿色盲基因不能够遗传给“三亲婴儿”，C错误； D、该技术是用捐献者的卵细胞的细胞质和母亲的卵细胞的核重组，形成的重组卵再和父亲的精子结合，“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，细胞质基因来自卵母细胞捐献者，故“三亲婴儿”同时拥有甲、乙和丙细胞的部分基因，D正确。 故选D。 13．(23-24高二下·四川成都树德中学·期中)世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿，是由经CRISPR/Cas9基因编辑技术对CCR5基因进行修改的胚胎细胞孕育的。研究者的初衷是让志愿者生出能抗艾滋病病毒的婴儿。但婴儿诞生后，深圳市医学伦理专家委员会启动对该事件涉及伦理问题的调查。下列有关叙述错误的是（    ） A．在普通培养液中加入适量的动物血清可以培养艾滋病病毒 B．修改的胚胎细胞孕育出婴儿说明胚胎细胞具有发育的全能性 C．胚胎是人生命的一个自然阶段，不能对其生命属性进行非道德篡改 D．经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生 【答案】A 【来源】四川省成都市树德中学2023-2024学年高二下学期期中考试 生物版含答案word 【分析】基因治疗：通过基因工程技术，利用健康人的正常基因或者别种生物乃至微生物的有关基因，把它们移植到病人细胞内，来取代或者矫正病人所缺陷的基因，以达到根治遗传性疾病的目的。我们把这种输入基因来治疗疾病的方法叫做基因疗法。其原理是利用健康的基因来填补或替代或矫正基因疾病中某些缺失或病变的基因，设计再造出患者能够接受的正常器官；或人为的修改有缺陷的基因组达到治病的目的。涉及的基因工程技术主要有三种，包括病毒载体、基因（编辑）和细胞改造。 【详解】A、病毒只能寄生在活的细胞中，因此不能用普通培养基培养艾滋病病毒，A错误； B、根据全能性的概念可知，修改的胚胎细胞孕育出婴儿是胚胎细胞具有发育的全能性的体现，B正确； C、胚胎是人生命的一个自然阶段，对其生命属性进行篡改，即修改其基因是不道德的，但以治病为目的篡改不是非道德的，C正确； D、基因编辑后，基因的序列发生改变，基因的表达具有选择性，可以相互影响，基因选择性表达受干扰后，容易导致某些疾病的产生，D正确。 故选A。 14．(23-24高二下·四川成都树德中学·期中)CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞激活或使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4或抗PD-1单克隆抗体具有较好的抗肿瘤效果。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，其产生的抗CTLA-4和抗PD-1的双克隆抗体显示具有更好的疗效，如图所示。下列叙述不正确的是（    ） A．双杂交瘤细胞无需识别CTLA-4和PD-1抗原，就能产生双特异性抗体 B．双克隆抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用 C．筛选图中双抗时需要使用CTLA-4和PD-1两种抗原 D．使用双克隆抗体治疗肿瘤的原理是让机体产生更强的细胞免疫反应 【答案】B 【来源】四川省成都市树德中学2023-2024学年高二下学期期中考试 生物版含答案word 【分析】单克隆抗体的制备过程： ①给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，然后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；②诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合；③利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；④进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤用培养基培养筛选出来的杂交瘤细胞或将其注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、杂交瘤细胞是由已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，无需接触抗原就能产生双特异性抗体，A正确； B、由题意可知：CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，双克隆抗体应该与T细胞结合，而不是肿瘤细胞，B错误； C、抗原抗体能特异性结合，由图可知，筛选图中双抗时需要使用CTLA-4和PD-1两种抗原，C正确； D、使用双克隆抗体就可以与T细胞上的CTLA-4和PD-1结合，使T细胞无法与特定的分子结合，从而避免T细胞激活受抑制或避免T细胞进入凋亡程序，T细胞就可以参与细胞免疫，因此可以让机体产生更强的细胞免疫反应，D正确。 故选B。 15．(23-24高二下·四川成都树德中学·期中)Vero细胞是从非洲绿猴的肾脏上皮细胞中分离培养出来的，可无限增殖且能悬浮培养。因不能合成抗病毒蛋白干扰素，因而广泛应用在病毒性疫苗生产上，下列叙述错误的是（    ） A．培养Vero细胞时需要提供5%二氧化碳和95%空气 B．培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 C．Vero细胞无需胰蛋白酶等处理可传代培养 D．生产病毒性疫苗时，可将病毒接种到Vero细胞，培养后提取病毒可直接成为疫苗 【答案】D 【来源】四川省成都市树德中学2023-2024学年高二下学期期中考试 生物版含答案word 【分析】动物细胞培养条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物； （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质； （3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4； （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【详解】A、动物细胞培养的过程中需要控制培养箱中的气体条件为95%空气+5%CO2，其中CO2起到维持培养液的pH的作用，A正确； B、进行动物细胞培养时，培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，B正确； C、Vero细胞悬浮培养，无需胰蛋白酶处理可传代培养，C正确； D、生产病毒性疫苗时，可将病毒接种到Vero细胞，培养后提取病毒进行灭活或减毒处理方可成为疫苗，D错误。 故选D。 16．(23-24高二下·四川广安友实学校、邻水正大实验学校·期中)我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列叙述错误的是（    ）    A．过程①中小分子化合物诱导成纤维细胞突变为iPS细胞 B．过程②中的卵母细胞需要在体外培养到MⅡ期再除去细胞核 C．过程③中可使用电融合法诱导两细胞融合，进而形成重构胚 D．组蛋白去甲基化和乙酰化水平提高可能有利于重构胚后续的胚胎发育 【答案】A 【来源】四川省广安市友实学校、邻水正大实验学校2023-2024学年高二下学期期中联考生物试题 【分析】生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化的现象，叫作表观遗传；除了DNA甲基化，构成染色体的组蛋白发生甲基化、乙酰化等修饰也会影响基因的表达。 【详解】A、过程①中小分子化合物诱导成纤维细胞脱分化为iPS细胞，并未发生突变，A错误； B、MⅡ期卵母细胞的细胞质内含有促使细胞核全能性表达的物质，故要选用MⅡ期卵母细胞去除细胞核，B正确； C、过程③为动物细胞融合过程，可使用电融合法诱导两细胞融合，进而形成重构胚，C正确； D、由图可知，重构胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程，D正确。 故选A。 17．(23-24高二下·安宁河联盟·期中)关于单克隆抗体制备的叙述中，错误的是（    ） A．正常小鼠注射特定抗原后能产生特定类型的B淋巴细胞 B．可用聚乙二醇或灭活的病毒诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合 C．诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后的细胞即为杂交瘤细胞 D．杂交瘤细胞的优点是既能迅速大量增殖又能产生特定抗体 【答案】C 【来源】安宁河联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、应向小鼠体内反复注入特定抗原，使小鼠产生相应的免疫B淋巴细胞，A正确； B、可用聚乙二醇或灭活的病毒或电刺激诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，B正确； C、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞，也有B细胞与B细胞的融合体，也有骨髓瘤与骨髓瘤细胞的融合体，C错误； D、B细胞可以产生抗体，骨髓瘤可以无限增殖，融合成的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能产生特定抗体，D正确。 故选C。 18．(23-24高二下·安宁河联盟·期中)下列有关现代生物技术的叙述错误的是（    ） A．在动物细胞培养液中添加一定量的抗生素以防止杂菌污染 B．动物细胞培养过程中分瓶培养可解除贴壁生长过程中的接触抑制 C．动物细胞培养中控制培养箱中CO 2 浓度可维持培养液中的pH D．转基因羊和克隆羊多利的培育都克服了远缘杂交不亲合的障碍 【答案】D 【来源】安宁河联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题 【分析】动物细胞的生长和增殖需要充足的营养物质。培养动物细胞的培养基通常为液体培养基，其基本成分包括水、无机盐、氨基酸、维生素、糖类、生长因子等。体外培养的动物细胞往往具有贴附生长和接触抑制等特点。 【详解】A、为了防止杂菌的污染，在动物细胞培养液中常添加一定量的抗生素，A正确； B、动物细胞在培养过程中由于细胞密度过大，因而会发生接触抑制的现象，分瓶培养可解除贴壁生长过程中的接触抑制，B正确； C、动物细胞培养中控制培养箱中CO 2 浓度可维持并调节培养液中的pH，C正确； D、克隆羊多利的培育是无性生殖，不能说明克服了远缘杂交不亲合的障碍，D错误。 故选D。 19．(23-24高二下·安宁河联盟·期中)下列关于植物体细胞杂交技术的叙述错误的是（    ） A．该技术打破生殖隔离，实现远缘杂交 B．可用灭活病毒诱导植物体细胞融合 C．再生出细胞壁是杂种细胞形成的标志 D．可用酶解法获得植物细胞的原生质体 【答案】B 【来源】安宁河联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题 【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。 【详解】A、不同种的植物之间具有生殖隔离，该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离，克服了远缘杂交不亲和的障碍，A正确； B、分离出有活性的原生质体后，要用化学法或物理法诱导原生质体的融合，灭活病毒只能诱导动物细胞融合，B错误； C、杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，C正确； D、进行植物的体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁，进行植物原生质体的融合，形成杂种细胞，D正确。 故选B。 20．(23-24高二下·安宁河联盟·期中)下列关于动物细胞培养过程的顺序是（    ） ①传代培养②胰蛋白酶等处理组织，形成分散的细胞③原代培养 A．①②③ B．③①② C．②③① D．①③② 【答案】C 【来源】安宁河联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题 【分析】人们常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。贴满瓶壁的细胞需要用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程常称为传代培养。 【详解】动物细胞培养时，首先从动物机体取出相关的组织，用胰蛋白酶处理制成细胞悬液；再将细胞悬液接入培养瓶中，进行原代培养；贴满瓶壁的细胞再用胰蛋白酶处理，再分瓶进行传代培养。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。 故选C。 21．(23-24高二下·四川广元苍溪县四川苍溪中学校·期中)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（    ） A．用于培养的细胞一般取自胚胎或幼龄动物的组织或器官 B．常用培养皿或松盖培养瓶，并置于 95%O2 和 5%的 CO2 气体培养箱中 C．培养瓶中的细胞都需要定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续培养 D．细胞在贴壁生长的过程中会出现接触抑制现象，但不会影响细胞的分裂 【答案】A 【来源】四川省广元市苍溪县四川省苍溪中学校2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题 【分析】动物细胞培养条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌、②添加一定量的抗生素、③定期更换培养液，以清除代谢废物； （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质； （3）温度和pH； （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。 【详解】A、胚胎细胞分化程度低，分裂能力强，幼龄动物的组织或器官分裂能力强，更易于培养，A正确； B、动物细胞应置于95%空气和5%的CO2气体培养箱中培养，B错误； C、培养瓶中贴壁生长的细胞需要用胰蛋白酶处理后再分瓶培养，悬浮培养的细胞不需要胰蛋白酶处理，C错误； D、当贴壁生长的细胞出现接触抑制现象时，细胞通常会停止分裂，D错误。 故选A。 22．(23-24高二下·四川成都外国语学校·期中)下图表示抗人体胃癌的单抗抗体的制备过程，有关叙述错误的是（　　）    A．图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B．利用电融合的方法可诱导细胞融合获得乙 C．用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D．对丙需进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 【答案】C 【来源】四川省成都市外国语学校2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】根据单克隆抗体的制备过程，可以推断出：图中甲表示抗原，乙表示杂种细胞，丙表示杂交瘤细胞，丁表示能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）、②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；两次抗体检测：专一抗体检验阳性。 【详解】A、图中给小鼠注射甲，能产生分泌特异性抗体的B淋巴细胞，则甲属于与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，A正确； B、利用聚乙二醇（化学法）、灭活的病毒（生物法）和电融合法（物理法）可诱导细胞融合获得杂种细胞，B正确； C、用特定的选择培养基对乙筛选，具有同种核的融合细胞和未融合的细胞均不能生长，只有融合的杂种细胞能生长，C错误； D、对丙杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选，并经单一抗体检测后，多次筛选后培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可制备单克隆抗体丁，D正确。 故选C。 23．(23-24高二下·四川阆中中学校·期中)如图表示生物工程常用技术的流程，下列叙述不正确的是（    ） A．若上图表示用良种牛体细胞克隆牛的培育流程，要通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块分散成单个细胞 B．若此图1、2→3表示动物细胞融合，则形成杂种细胞3的原理是细胞膜具有流动性 C．若上图表示单克隆抗体的制备流程，用来促进细胞1和细胞2融合的灭活病毒，并未破坏其抗原结构 D．若上图表示植物体细胞杂交流程，形成3的过程表示原生质层的融合，完成融合的标志是再生出新的细胞壁 【答案】D 【来源】四川省阆中中学校2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】1、动物细胞培养的具体过程：取胚胎或幼龄动物的器官或组织--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养。 2、利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物，具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程。 【详解】A、若上图表示用良种牛体细胞克隆牛的培育流程，通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块用胰蛋白酶分散成单个细胞，A正确； B、若此图1、2→3表示动物细胞融合，则形成杂种细胞3的过程依赖细胞膜的流动性实现，B正确； C、若图表示单克隆抗体的制备流程：用来促进细胞1和细胞2融合的灭活病毒，并未破坏其抗原结构，只是不具有侵染特性，这是诱导动物细胞融合特有的方法，C正确； D、植物体细胞杂交过程，形成3的过程表示原生质体的融合，再生出新的细胞壁是完成融合的标志，D错误。 故选D。 24．(23-24高二下·四川成都蓉城名校联盟·期中)利妥昔单抗适用于复发或耐药的滤泡性中央型淋巴瘤的治疗，下图是其制备过程的示意图（HAT培养基为特定的选择培养基），下列相关说法错误的是（    ） A．利用HAT培养基可以筛选出杂交瘤细胞 B．第二次筛选是选出能生成特定抗体的杂交瘤细胞 C．将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞大规模培养 D．除了体外培养，还可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖 【答案】C 【来源】四川省成都市蓉城名校联盟2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题 【分析】单克隆抗体的制备过程的细节：（1）二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。（2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．（4）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。 【详解】A、在HAT培养基上，同种融合的细胞不能生长，故可筛选出杂交瘤细胞，A正确； B、第二次筛选是在多孔培养板上选出能生成特定抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞大规模培养，C错误； D、除了体外培养，还可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，D正确。 故选C。 25．(23-24高二下·四川成都蓉城名校联盟·期中)动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列有关说法错误的是（    ） A．蛋白酶分散细胞的时间太长会分解膜蛋白，造成细胞损伤 B．动物细胞培养时，可能会多次使用胰蛋白酶来分散细胞 C．贴壁细胞的生长有接触抑制的现象，需要对细胞进行分瓶培养 D．动物细胞培养时，充入5%CO2的目的是刺激细胞的正常呼吸 【答案】D 【来源】四川省成都市蓉城名校联盟2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题 【分析】动物细胞培养：1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。2、动物培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【详解】A、用胰蛋白酶处理可使动物组织分散成单个细胞，从而制成细胞悬液，但作用时间不能太长，时间太长会分解膜蛋白，造成细胞损伤，A正确； BC、贴附性细胞培养时会出现细胞贴壁和接触抑制现象，因此动物细胞培养时，可能会多次使用胰蛋白酶来分散细胞，然后将细胞重新收集制成细胞悬液，进行分瓶培养，BC正确； D、动物细胞培养过程中通常在培养液中通入5%CO2以维持培养液的pH，D错误。 故选D。 26．(23-24高二下·四川绵阳南山中学·期中)人体肿瘤细胞表面存在PD-L1蛋白。试剂盒中的一种抗PD-L1单克隆抗体能与肿瘤表面的PD-L1特异性结合，发挥诊断作用。利用小鼠制备抗PD-L1单克隆抗体的流程如图，下列叙述错误的是（    ）    A．制备抗PD-L1单克隆抗体使用的B淋巴细胞取自注射过PD-L1的小鼠脾脏 B．放入96孔板的细胞为多种杂交瘤细胞，均能产生所需抗体 C．诱导动物细胞融合常用的方法除了图中的PEG融合法，还有电融合法和灭活病毒诱导法 D．将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗PD-L1单克隆抗体 【答案】B 【来源】四川省绵阳南山中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】将抗原注射入小鼠中，获得免疫小鼠，从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞，将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞通过PEG融合成杂交瘤细胞，再用特定的选择培养基培养筛选，最终获得能在体外大量繁殖的同时能产生抗PD-L1抗体的细胞。 【详解】A、将PD-L1注射入小鼠，获得免疫小鼠，免疫小鼠可以产生抗PD-L1的抗体，从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞，B淋巴细胞可以产生抗PD-L1的抗体，A正确； B、将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，放入特定的选择培养基筛选，只有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞能大量增殖，其他类型的杂交瘤细胞不能正常生存，B错误； C、诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等，C正确； D、图中细胞群a在加入PD-L1后呈阳性，说明细胞群a产生了抗PD-L1的抗体，因此将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗PD-L1单克隆抗体，D正确。 故选B。 27．(23-24高二下·四川绵阳南山中学·期中)如图为iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图，相关叙述错误的是（    ） A．在培养iPS细胞的过程中定期更换培养液的目的是清除细胞代谢物，防止对细胞自身造成伤害 B．过程③④分化得到的细胞不同，是因为iPS细胞在培养过程中发生了遗传物质的改变 C．若iPS细胞来源于病人自身体细胞，再将其分化出的细胞移入患者体内可以避免免疫排斥反应 D．若要了解这4个关键基因在诱导产生iPS细胞时每个基因作用的相对大小，可以在各实验组中依次去掉1个基因来进行推测 【答案】B 【来源】四川省绵阳南山中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：（1）充足的营养供给--微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。（4）气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、定期更换培养液的目的是为细胞提供充足营养物质，并清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身的伤害，因此，体外培养小鼠成纤维细胞和iPS细胞时，可通过定期更换培养液以清除细胞的代谢产物，A正确； B、过程③④分化得到的细胞不同，是因为iPS细胞在培养过程中发生了遗传物质的选择性表达，B错误； C、若iPS细胞来源于病人自身体细胞，经诱导产生的组织和器官再移植回病人体内后，由于移植的组织或器官是由病人自身的细胞经过分裂、分化产生的，因此，理论上可避免发生免疫排斥反应，C正确。 D、若要了解这4个关键基因在诱导产生iPS细胞时每个基因作用的相对大小，可以应用“减法原理”，即在各实验组中依次去掉1个基因来进行推测，D正确。 故选B。 28．(23-24高二下·安宁河联盟·期中)下列关于动物细胞融合与植物体细胞杂交的叙述错误的是（    ） A．均体现出细胞膜具有流动性 B．融合前均需要用酶解法处理 C．所用到的技术手段完全相同 D．诱导融合的方法不完全相同 【答案】C 【来源】安宁河联盟2023-2024学年高二下学期4月期中联考生物试题 【分析】1、植物体细胞杂交技术：（1）将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。（2）过程分析：①诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。2、动物细胞融合技术：（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。（2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等。 【详解】A、植物体细胞杂交（其中的原生质体融合）和动物细胞融合的原理中都用到细胞膜的流动性，A正确； B、植物体细胞杂交需要用酶解法去除细胞壁，然后才能诱导原生质体融合，用胰蛋白酶处理动物组织，使其分散成单个细胞，再进行细胞融合，B正确； C、植物体细胞杂交用到了原生质体融合和植物组织培养技术，而动物细胞融合只用到了细胞融合技术，C错误； D、诱导原生质体融合的方法物理法（离心、振动、电刺激等）和化学法（聚乙二醇）；诱导动物细胞融合的方法：物理法（离心、振动、电刺激等）、化学法（聚乙二醇（PEG））和生物法（灭活的病毒），诱导融合的物理法和化学法相同，D正确。 故选C。 29．(23-24高二下·四川成都外国语学校·期中)下列关于细胞工程操作流程的表述，错误的是（　　） A．动物组织细胞悬液→原代培养传代培养 B．高产奶牛体细胞去核的牛卵母细胞重组细胞 C．B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合细胞单克隆抗体 D．菊花幼嫩茎段切成0.5～1 cm长的小段愈伤组织植株 【答案】D 【来源】四川省成都市外国语学校2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。植物组织培养的过程：取外植体先用清水冲洗后，然后用70%的酒精消毒后用无菌水冲洗2~3次，然后再用次氯酸钠溶液进行处理30min，然后切块接种到培养基上进行脱分化培养，形成愈伤组织，然后转接到分化培养基上继续培养，形成胚状体或丛芽，细胞继续分裂和分化最终发育形成幼苗和植株。 【详解】A、根据动物细胞培养的过程分析，取动物组织块剪碎，用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液后在培养瓶中进行原代培养，分散的细胞会逐渐贴壁生长，进而出现接触抑制现象，需要重新用胰蛋白酶处理，然后进行传代培养，A正确； B、根据动物体细胞核移植的过程分析，取供体高产奶牛体细胞，注入受体母牛去核的MⅡ期卵母细胞，通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎，再将胚胎移入受体母牛体内，B正确； C、根据单克隆抗体制备过程可知，将已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞利用灭活的病毒或PEG等诱导，可获得融合细胞，然后需要利用选择培养基筛选杂交瘤细胞，并进行抗原抗体杂交以获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，最后在体外大规模培养，即可提取大量单克隆抗体，C正确； D、根据植物组织培养的过程可知，胡萝卜根经过清水冲洗后，还需要用70%酒精消毒，用无菌水清洗后再用次氯酸钠溶液处理30min，无菌水清洗吸干水分后再切成1c㎡小块，先接种到脱分化培养基上形成愈伤组织，再转接到分化培养基上培养，形成胚状体和丛芽后，继续分裂和分化最终形成植株，D错误。 故选D。 30．植物体细胞杂交和动物细胞融合有很多相似之处。下列关于两种技术的说法，正确的是（    ） A．两种技术融合的基本原理相同，诱导方法也完全相同 B．两种技术都是先进行细胞膜融合，再进行细胞核融合 C．两种技术只能用于不同种细胞的融合，同种细胞间不可以 D．植物体细胞杂交不需要获得单个细胞，动物细胞培养需要 【答案】B 【来源】四川省成都市第七中学2023—2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】1、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性； 2、动物细胞融合也称细胞杂交，是指在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。⑴诱导细胞融合的方法有三种：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（离心，震动，电刺激）；⑵原理：细胞膜具有一定的流动性。 【详解】A、植物体细胞杂交和动物细胞融合的原理均为细胞膜的流动性，但融合的方法有不同，如通常用灭活的病毒促进动物细胞融合，该技术不能用于植物体细胞杂交，A错误； B、植物原生质体融合和动物细胞融合的过程都是先依靠细胞膜的识别作用进行细胞膜的融合，融合成一个细胞之后再进行细胞核的融合，最后形成一个细胞，B正确； C、不同种细胞间可以进行细胞融合，同种细胞间也可以进行细胞融合，且同种细胞间融合难度小于不同种细胞间融合难度，C错误； D、植物体细胞杂交和动物细胞融合均需要在单个细胞的基础上获得，D错误。 故选B。 31．下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（    ） A．过程①需要提供95%空气和5%O2的混合气体 B．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 C．过程③可用Ca2+、聚乙二醇等促进细胞分裂和发育进程 D．后代丁牛的遗传性状与甲牛基本相同，与丙牛无遗传联系 【答案】D 【来源】四川省成都市第七中学2023—2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】图示为体细胞克隆优质奶牛的过程，取甲牛的体细胞，对处于减数第二次分裂中期的乙牛的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植。融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。 【详解】A、过程①是供体细胞培养，需要提供95%空气和5%CO2的混合气体，A错误； B、过程②常使用显微操作去核法对处于减数第二次分裂中期的卵母细胞进行处理，B错误； C、过程③可用Ca2+载体、乙醇等促进细胞分裂和发育进程，C错误； D、遗传物质DNA主要分布在细胞核中。后代丁牛的细胞核遗传物质来自甲牛、细胞质遗传物质来自乙牛，因此丁牛的遗传性状与甲牛基本相同，与代孕丙牛无遗传联系，D正确。 故选D。 32．甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．细胞甲都是能够产生抗甘草酸抗体的B淋巴细胞 B．过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性 C．过程④利用了选择培养基筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D．过程⑤无论是在体内还是在体外进行，细胞丁都可大量增殖 【答案】D 【来源】四川省成都市第七中学2023—2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】分析图示：①为注射抗原，诱导产生具有免疫能力的B淋巴细胞；②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；③用选择性培养基获得杂交瘤细胞；④用抗体检测和克隆化培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤为提取单克隆抗体。 【详解】A、每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，细胞甲是已经免疫的B淋巴细胞，但数目很多，不一定都是能够产生抗甘草酸抗体的B淋巴细胞，A错误； B、过程②是诱导具有免疫能力的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用了细胞膜的流动性，B错误； C、过程③利用了选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，过程④用抗体检测和克隆化培养筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、细胞丁为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能够增殖又能产生抗体，过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖，D正确。 故选D。 33．科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞能增殖分化为多种组织细胞，用于某些疾病的治疗。下列有关叙述正确的是（    ） A．iPS细胞存在于早期胚胎、外周血和脐带血中 B．获得iPS细胞的过程中，细胞的遗传物质一定不变 C．iPS细胞分化产生的组织细胞基因相同，蛋白质也相同 D．与造血干细胞相比，iPS细胞的分化程度低，全能性高 【答案】D 【来源】四川省成都市第七中学2023—2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞，包括骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞等。一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。 【详解】A、iPS细胞是经体外诱导获得的，A错误； B、获得iPS细胞的过程中，根据诱导的方式不同，细胞的遗传物质可能发生改变，也可能不改变，B错误； C、分化的实质是基因的选择性表达，因此iPS细胞分化产生的组织细胞基因相同，蛋白质不完全相同，C错误； D、iPS细胞类似于胚胎干细胞，与造血干细胞相比，iPS细胞的分化程度低，全能性高，D正确。 故选D。 34．(23-24高二下·四川南充嘉陵第一中学·期中)下列有关细胞工程的叙述，正确的有（　　） ①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍 ②动物细胞培养时不能用机械的方法将组织分散成单个细胞 ③利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体 ④利用核移植技术可以培育试管婴儿 ⑤桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” ⑥胚胎移植一般只包括从供体、受体的选择到移植结束，而不包括后续的检查过程 A．2项 B．3项 C．4项 D．5项 【答案】A 【来源】四川省南充市嘉陵第一中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。 【详解】①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍，①正确； ②在进行细胞培养时，将动物组织分散成单个细胞，可采用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，②错误； ③制备单克隆抗体的过程利用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，③正确； ④利用体外受精、胚胎移植技术可以培育试管婴儿，④错误； ⑤囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”⑤错误； ⑥胚胎移植一般包括从供体、受体的选择到移植结束，以及后续的检查过程，⑥错误。 综上①、③正确，共两项正确，A正确，BCD错误。 故选A。 35．(23-24高二下·四川阆中中学校·期中)下列关于生物科学技术的叙述，正确的是（    ） A．用纤维素酶和果胶酶水解法获得的原生质体仍有全能性 B．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理基本相同，都能形成杂种细胞和杂种个体 C．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能发生细胞脱分化，还可能发生基因突变、基因重组和染色体变异 D．通过细胞核移植技术获得的动物与供体动物性状完全相同 【答案】A 【来源】四川省阆中中学校2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】动物细胞融合和植物体细胞杂交中的不同点：诱导融合的方法、所用技术手段、原理等进行区分比较；并且可遗传变异的三个来源中，基因重组只能发生在有性生殖过程中，而基因突变和染色体变异均可发生在有丝分裂和减数分裂过程中。 【详解】A、植物体细胞杂交，需要用纤维素酶和果胶酶将植物体外阻碍杂交的细胞壁去除获得原生质体，再进行细胞融合获得杂交细胞，然后进一步培养形成完整个体，体现了细胞的全能性，即获得原生质体仍有全能性，A正确； B、动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均不完全相同，动物细胞融合只能形成杂种细胞，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，B错误； C、 由根尖细胞形成愈伤组织过程为脱分化，该过程发生的是有丝分裂，有丝分裂过程中可能会发生基因突变、染色体变异，但不会发生基因重组，C错误； D、生物的性状主要受核基因和质基因共同决定，所以通过细胞核移植技术获得的动物与供体动物性状不完全相同，D错误。 故选A。 36．(23-24高二下·四川成都蓉城名校联盟·期中)关于动物细胞融合技术与单克隆抗体，下列说法错误的是（    ） A．与原生质体融合相比，动物细胞融合还可使用灭活的病毒 B．动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，未体现细胞的全能性 C．杂交瘤细胞和浆细胞都是能合成并分泌抗体的细胞 D．抗体—药物偶联物中的药物能特异性识别并杀伤肿瘤细胞 【答案】D 【来源】四川省成都市蓉城名校联盟2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题 【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面展示出独特的优势。 【详解】A、动物细胞融合过程中可用灭活的病毒进行诱导，而灭活的病毒不能促进植物原生质体融合，A正确； B、植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性（原生质体的融合体现了这一原理）和细胞的全能性（从杂种细胞得到杂种植株体现了这一原理）；动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，未体现细胞的全能性，B正确； C、浆细胞是能合成并分泌抗体的细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生抗体，C正确； D、抗体—药物偶联物中，特异性识别肿瘤细胞的是抗体，抗体起靶向运输的作用，所以药物不能特异性识别肿瘤细胞，只能杀伤肿瘤细胞，D错误。 故选D。 37．(23-24高二下·四川绵阳南山中学·期中)下图为肾脏上皮细胞，培养过程示意图，下列叙述正确的是（    ） A．细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 B．丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需要在添加血清的合成培养基中进行 C．丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，而丁过程不会出现此现象 D．为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气 【答案】B 【来源】四川省绵阳南山中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞制成细胞悬液→转入培养液（传代培养） →放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的 pH，A错误； B、丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需在添加血清的合成培养基进行培养，因为对动物细胞培养所需要的营养尚不明确，B正确； C、丙原代培养过程和丁传代培养过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象，C错误； D、为避免培养过程中的杂菌污染，保证其气体需要，丙、丁过程中需松动培养瓶盖，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，D错误。 故选B。 动物细胞工程的应用考点02 1．(23-24高二下·四川眉山仁寿县实验中学·期中)为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程。下列分析错误的是（    ） A．B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得 B．HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞 C．杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降 D．图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产 【答案】B 【来源】四川省眉山市仁寿县实验中学2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题 【分析】1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。 2、两次筛选：筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 【详解】A、对动物进行间歇注射抗原处理，以刺激动物机体产生相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得，A正确； B、据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感，骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感”可知，HAT培养基去除的是未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，Oua筛选去除的是未与骨髓瘤细胞融合的EBV转化细胞和自身融合的EBV转化细胞，B错误； C、抗体是由浆细胞分泌的，杂交瘤细胞若丢失来自B淋巴细胞的染色体，可能会导致抗体产生能力下降，C正确； D、图示获得的杂交瘤细胞还需要经过进一步的筛选，用专一抗体检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能直接用于生产单克隆抗体，D正确。 故选B。 2．中药是几千年来人们智慧的结晶，但由于药源材料减少以及中药化学成分的复杂性和不确定性，对其进行质量控制是中药行业所面临的重要问题。请回答下列问题： (1)为快速繁殖某中药品种，科研工作者采用了组织培养技术，对自然生长的茎进行组培需要进行外植体消毒，具体方法是 ；组培苗锻炼时常采用蛭石作为栽培基质的原因是 。 (2)植物组织培养中 的使用比例影响植物细胞发育，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成。 (3)为对中药成分进行定性和定量研究，科学家制备了甘草酸-人血清白蛋白的融合蛋白，并以此为抗原制备了抗甘氨酸的单克隆抗体。单抗的制备过程中有两次筛选，运用多孔细胞板筛选的目的是 ，与常规抗体相比，单抗的优点是 。 【答案】(1) 用70%酒精，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗 蛭石带菌量低且营养丰富比较松软，持水性也较好，有利于幼苗的生根和叶片的生长 (2)生长素和细胞分裂素 (3) 获得产生特定抗体的杂交瘤细胞 灵敏度高、特异性强 【来源】四川省江油市太白中学2023—2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】植物组织培养技术过程：植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。 【详解】（1）外植体消毒，先用70%酒精，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗。蛭石带菌量低且营养丰富、比较松软，持水性也较好，有利于幼苗的生根和叶片的生长，故组培苗锻炼时采用蛭石作为栽培基质。 （2）植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响是：比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的形成。 （3）单抗的制备过程中有两次筛选，运用多孔细胞板是第二次筛选，筛选的目的是获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。与常规抗体相比，单抗的优点是灵敏度高、特异性强，故其应用较多。 3．(23-24高二下·四川南充白塔中学·期中)为降低宫颈癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），以便精准治疗，过程如图1所示。 (1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自 。 (2)步骤④是将获得的a单克隆抗体和b治疗宫颈癌的药物这两部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC，作用机制如下图2，据图回答： ①ADC能降低宫颈癌治疗药物的副作用，是因为 能精确地定位宫颈癌细胞，该过程的原理是 。 ②根据图2，尝试解释ADC的作用机理：ADC进入宫颈癌细胞后，细胞中的 释放水解酶可将其水解，释放出的药物最终作用于 ，可导致癌细胞凋亡。 【答案】(1)人的宫颈癌细胞 (2) 单克隆抗体 抗体与抗原的特异性结合 溶酶体 细胞核 【来源】四川省南充市白塔中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”。借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。 【详解】（1）图中的药物是治疗宫颈癌的药物，因此本实验中需要制备的单克隆抗体是针对宫颈癌细胞的，因此图中小鼠注射的特定抗原应取自人的宫颈癌细胞。 （2）①ADC能降低宫颈癌治疗药物的副作用，是因为其上的抗体能将药物精确地定位宫颈癌细胞，该过程的实现是由于抗体能与相应的抗原发生特异性结合，进而避免了对其他细胞的攻击。 ②图2显示：ADC进入宫颈癌细胞后，细胞中的溶酶体释放水解酶可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，启动凋亡相关基因的表达，导致癌细胞凋亡。 4．(23-24高二下·四川德阳什邡什邡中学·期中)人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： (1)细胞培养中，培养液常用 方法灭菌。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是 ，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是 。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 ，可通过测定产物量来判断待测抗原量。 【答案】(1) 高压蒸汽 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞 聚乙二醇(PEG) (2) 乙和丙 能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞 (3)抗体与待测抗原结合，酶催化特定底物反应 【来源】四川省德阳市什邡市什邡中学2023-2024学年高二下学期5月期中考试生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）细胞培养中，培养液常用高压蒸汽方法灭菌；为了提高淋巴细胞的免疫能力，刺激小鼠机体形成更多能产生抗cTnI抗体的B淋巴细胞，一般通过多次注射相同抗原实现；取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，一般采用的化学诱导因素为聚乙二醇（PEG）； （2）据图可知，杂交瘤细胞需要对甲筛选，因此乙和丙应该是筛选得到的杂交瘤细胞；其中①代表用特定的选择培养基进行筛选，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行克隆化培养和抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，就能获得足够数量的能分泌抗cTnI抗体的细胞，该类细胞的特点是既能大量增殖又能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体； （3）分析图中过程可知，两种抗体与检测的抗原均能结合，但结合部位是不同的；该检测方法中，抗体与待测抗原结合，酶催化特定底物反应产生检测产物，可通过测定产物量来判断待测抗原量。 5．(23-24高二下·四川成华区某校·期中)犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。回答下列问题：   (1)制备单克隆抗体依赖的生物技术有 （答出2点）。步骤①中，用灭活的CPV免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是 。 (2)经过步骤②后获得的是多种类型的杂交细胞，原因是 。对杂交细胞等用特定的选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，对杂交瘤细胞进行 ，经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。 (3)体外培养杂交瘤细胞后从培养液中提取到抗CPV单克隆抗体。杂交瘤细胞的培养液中有各种营养物质，还需要添加 以补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染。与培养大多数动物体细胞不同，骨髓瘤细胞在培养过程中不会出现 的现象，只要营养等条件适宜即可一直增殖。 (4)对疑似感染CPV的幼犬进行确诊时，可用获得的抗CPV单克隆抗体进行检测，所依据的原理是 。 【答案】(1) 动物细胞培养、动物细胞融合 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多已免疫的B淋巴细胞 (2) 细胞融合是随机的 克隆化培养和抗体检测 (3) 血清和抗生素 接触抑制 (4)抗原抗体特异性结合 【来源】四川成华区某校2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）制备单克隆抗体依赖的生物技术有动物细胞培养和动物细胞融合（诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合）等技术；步骤①中，灭活的CPV属于抗原，用灭活的CPV免疫小鼠，小鼠会产生体液免疫，产生B淋巴细胞，所以用灭活的CPV免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多已免疫的B淋巴细胞。 （2）步骤②是诱导细胞融合，由于该过程中细胞融合是随机的，故可能得到多种类型的杂交细胞，如可能得到B细胞-B细胞型、骨髓瘤-骨髓瘤细胞型等；最终筛选得到足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞需要经过两次筛选过程，使用特定的选择培养基培养（第一次筛选）得到杂交瘤细胞。对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测（利用抗原-抗体的特异性结合原理，出现阳性反应的即可），经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。 （3）为补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染，需要在培养液中添加血清（含有细胞所必须的物质）和抗生素（避免杂菌污染）。与培养大多数动物体细胞不同，骨髓瘤细胞在培养过程中不会出现接触抑制现象，只要营养等条件适宜即可一直增殖。 （4）对疑似感染CPV的幼犬进行确诊时，可用获得的抗CPV单克隆抗体进行抗原—抗体杂交检测，所依据的原理是抗原抗体特异性结合，若出现杂交带，则证明感染。 6．(23-24高二下·四川遂宁射洪四川射洪中学校·期中)双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。分析回答： (1)过程①注射癌胚抗原，制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有 。 (2)过程②诱导融合的方法有 （至少写出两种），假设仅考虑某两个细胞的融合，则经过②过程试管内含有 种类型的细胞。 (3)过程③能在HAT选择培养基上生长的细胞是 ，未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是 。 (4)经过程③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程④，原因是 。 (5)获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或 ，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。 【答案】(1)动物细胞融合、动物细胞培养 (2) 聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等 5 (3) 杂交瘤细胞 不能无限增殖 (4)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型 (5)注射到小鼠腹腔内增殖 【来源】四川省遂宁市射洪市四川省射洪中学校2023-2024学年高二下学期5月期中生物试题 【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。（2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。（4）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。 【详解】（1）根据单克隆抗体制备流程可知，该过程涉及到的技术有动物细胞融合技术、动物细胞培养技术。 （2）过程②诱导融合的方法是聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。仅考虑某两个细胞的融合，则可能形成骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞、B细胞—B细胞、骨髓瘤细胞—B淋巴细胞3种融合细胞；另外，还有部分B细胞、骨髓瘤细胞不发生融合，总共形成5种类型的细胞。 （3）HAT培养基是特定的选择性培养基，只有杂交瘤细胞能在其上生长，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡。未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是能恶性增殖的细胞，即不能无限增殖。 （4）从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型（筛选得到的杂交瘤细胞产生的抗体并不是单克隆抗体），因此经过程③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中继续进行过程④。 （5）获得的单克隆杂交—杂交瘤细胞在体外条件下培养或注射到小鼠腹腔内增殖，均可提取出大量的双特异性单克隆抗体。 7．(23-24高二下·四川内江第六中学·)2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。在培育过程中，我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。培育克隆猴的流程如图所示，请结合图回答问题。    (1)为获得数量较多的卵母细胞，采集前应先用 激素处理母猴，从卵巢采集到的卵母细胞经成熟培养后进行“去核”处理，这里的“核”是指 。 (2)研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是 。将体细胞注入去核卵母细胞比早期核移植中将核注入去核卵母细胞更有进步意义，原因是 。 (3)研究人员将Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用TSA处理了它。这两种物质都是通过改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达，据题干信息推测其中Kdm4d的作用机制可能是 。从结果来看，两种物质可以 （填“提高”或“降低”）胚胎的发育率和妊娠率。 【答案】(1) 促性腺 纺锤体-染色体复合物 (2) 诱导细胞融合 操作简单，对卵母细胞的损伤较小 (3) 该酶可以隆低组蛋白的甲基化水平，进而促进相关基因的表达 提高 【来源】四川省内江市第六中学2023-2024学年高二下学期半期考试生物试卷 【分析】1、克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。 【详解】（1）用（外源）促性腺（激素）处理母猴，可获得数量较多的卵母细胞。从卵巢采集到的卵母细胞经成熟培养后进行“去核”处理，这里的“核”是指纺锤体一染色体复合物，同时去除透明带内的第一极体。 （2）灭活的仙台病毒可以促进动物细胞融合。卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达，与卵细胞的细胞质营养物质丰富有关，也可能因为卵母细胞大，便于操作，更易成功，对卵母细胞的损伤较小。 （3）Kdm4d是组蛋白去甲基化酶，则Kdm4d可以表达组蛋白去甲基化酶，降低组蛋白的甲基化水平。TSA是组蛋白脱乙酰酶抑制剂，可以抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，提高组蛋白的乙酰化水平最终调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率。 8．(23-24高二下·四川德阳什邡什邡中学·期中)下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，回答下列问题：    (1)在培养体细胞时需要创造无菌无毒的环境，“无菌无毒环境”中的“毒”是指有害代谢产物。对培养液进行 等操作，可创造无菌无毒的环境。 (2)植物组织培养有一项应用是培育“脱毒苗”，脱毒苗中的“毒”主要是指 ，此过程常常选取茎尖作为外植体，其依据是 。 (3)目前核移植技术中常用的去核方法为 ，同一胚胎干细胞可分化为多种细胞是 的结果。 (4)若将上述结果用于白血病病人的骨髓移植，如果图中患者是A型血，提供卵母细胞的女性是AB型血，则骨髓移植成功后患者的血型是 型。按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是 。 【答案】(1)灭菌、添加一定量的抗生素、定期更换培养液 (2) 病毒 茎尖的病毒极少，甚至无病毒 (3) 显微操作去核法 基因的选择性表达 (4) A 没有免疫排斥反应 【来源】四川省德阳市什邡市什邡中学2023-2024学年高二下学期5月期中考试生物试题 【分析】动物细胞培养指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。核移植指将动物一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，该动物称为克隆动物。 【详解】（1）“无菌无毒环境”中的“毒”是指代谢废物。对培养液进行灭菌、添加一定量的抗生素、定期更换培养液等操作，可创造无菌无毒的环境。 （2）脱毒苗中的“毒”是指病毒，由于茎尖的病毒极少，甚至无病毒，故此过程常常选取茎尖作为外植体。 （3）目前核移植技术中常用显微操作进行去核处理，由于基因的选择性表达，同一胚胎干细胞可分化为多种细胞。 （4）若将上述结果用于白血病人的骨髓移植，如果图中患者是A型血，提供卵细胞的女性是AB型血，由于细胞核中的遗传物质仍来自患者，故骨髓移植成功后患者的血型仍为A型。按上述方法克隆的器官没有免疫排斥反应，利于移植器官的存活。 9．(23-24高二下·四川内江第二中学·期中)犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。回答下列问题： (1)制备单克隆抗体依赖的生物学技术有 和 。 (2)经过步骤②后获得的是多种类型的杂交细胞，原因是 。对杂交细胞用特定的选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，然后对杂交瘤细胞进行 ，再经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。 (3)体外培养杂交瘤细胞后从培养液中提取到抗CPV单克隆抗体。杂交瘤细胞的培养液中有各种营养物质，还需要添加 以补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染。 【答案】(1) 动物细胞培养 动物细胞融合 (2) 细胞融合是完全随机的 克隆化培养和抗体检测 (3)动物血清和抗生素 【来源】四川省内江市第二中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）制备单克隆抗体依赖的生物技术有动物细胞培养和动物细胞融合等技术。 （2）步骤②是诱导细胞融合，由于该过程中细胞融合是完全随机的，故可能得到多种类型的杂交细胞，如可能得到B细胞-B细胞型、骨髓瘤-骨髓瘤细胞型等，对杂交细胞用特定的选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，然后对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，再经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。 （3）为补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染，需要在培养液中添加血清（含有细胞所必须的物质）和抗生素（避免杂菌污染）。 10．(23-24高二下·四川成都树德中学·期中)女性怀孕后会合成并分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），并且该激素会出现在尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以诊断是否怀孕。如图表示早早孕诊断试剂盒内部试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体，抗体2和抗体3分别固定在试纸条的检测 线（T线）和质控线（C线），抗体1进行了胶体金标记，该标记物可以在T线或C线处显色。回答下列问题：    (1)女性在妊娠第8天左右，尽管体内HCG含量很低，但仍可用抗人绒毛膜促性腺激素单抗制成的“早早孕诊断试剂盒”作出诊断，体现出单克隆抗体具有 的优点。 (2)图1中单克隆抗体2制备的过程中，需要反复向小鼠注射 作为抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合。经选择培养后获得的杂交瘤细胞的特点是 。为了得到能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要进行克隆化培养和抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行，先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是 。最后将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或 ，从而获取大量的单克隆抗体。 (3)图2表示三位女士的检测结果，其中表示没有怀孕的是 ，检测结果无效的是 。出现甲结果的原理是 。 【答案】(1)特异性强，灵敏度高 (2) HCG的α亚基 既能大量增殖又能分泌抗体 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的 注射到小鼠腹腔内增殖（培养） (3) 乙 丙 样品中的HCG与抗体1结合后形成的复合物移动至T线，HCG又与抗体2结合，然后被固定在T线并显色，部分复合物继续移动至C线，抗体1与抗体3结合，然后被固定在C线并显色。 【来源】四川省成都市树德中学2023-2024学年高二下学期期中考试 生物版含答案word 【分析】分析图1可知，检测原理为：样品中若有HCG遇到胶体金垫中的抗体1，可通过β亚基结合，并一同流向T线；此时HCG-抗体1复合体可通过α亚基与固定在此处的抗体2结合，并显现抗体1上的胶体金红色标记；部分HCG-抗体1复合物（或未结合HCG的抗体1）流向C线，与固定在此处的抗体3结合，并显现抗体1上的胶体金红色标记。因此，若样品中存在HCG，则C、T均显色；若样品中不存在HCG，则T不显色、C显色；若C不显色，则表明检测过程有误。 【详解】（1）“早早孕诊断试剂盒”的诊断是利用了抗原和抗体杂交的原理，利用抗人绒毛膜促性腺激素（HCC）单克隆抗体在妊娠第8天就可以诊断出是否含有人绒毛膜促性腺激素（HCC），以确定是否受孕。单克隆抗体能准确的识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备，即特异性强、灵敏度高，可大量制备；因此常用作诊断试剂、运载药物、也能用于治疗疾病。 （2）根据题干信息，单克隆抗体2是针对α亚基的抗体，因此制备的过程中，需要反复向小鼠注射HCG的α亚基作为抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，利用灭活病毒诱导（PEG融合或电融合）法与小鼠的骨髓瘤细胞融合，经选择培养后获得的杂交瘤细胞的特点是既能大量增殖又能分泌抗体；为了得到能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要进一步进行克隆化培养和抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行，先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。最后将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖（培养），从而获取大量的单克隆抗体。 （3）分析图1可知，检测原理为：样品中若有HCG遇到胶体金垫中的抗体1，可通过β亚基结合，并一同流向T线；此时HCG-抗体1复合体可通过α亚基与固定在此处的抗体2结合，并显现抗体1上的胶体金红色标记；部分HCG-抗体1复合物（或未结合HCG的抗体1）流向C线，与固定在此处的抗体3结合，并显现抗体1上的胶体金红色标记。因此，若样品中存在HCG，则C、T均显色；若样品中不存在HCG，则T不显色、C显色；若C不显色，则表明检测过程有误。图2表示的检测结果，乙C线正常、T线未显色，表示所采样品中没有HCG，说明没有怀孕；丙C线不显色，说明带金标的抗体1不能正常移动至C线与抗体3结合，说明试纸失效或者检测的样品异常，检测结果无效；样品中的HCG与抗体1结合后形成的复合物移动至T线，又可以与抗体2结合，然后被固定在T线并显色，部分复合物继续移动至C线，抗体1与抗体3结合，然后被固定在C先并显色，最终呈现出甲结果。 11．(23-24高二下·四川广元苍溪县四川苍溪中学校·期中) CD47 是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。研究发现，多种肿瘤细胞表面的 CD47 含量比正常细胞高 1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗 CD47 的单克隆抗体可以解除 CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，回答下列问题。 (1)步骤①，运用 CD47 对实验小鼠进行多次免疫，目的是 。步骤②，运用特定的 对细胞进行第一次筛选，只有 才能生长，此类细胞的特点是 。 (2)进行③之前还要进行第二次筛选才能获得产生抗 CD47 的单克隆抗体的杂交瘤细胞，筛选的方法是 ，原理是 。 (3)对照组应设置为 。能验证“CD47 的单克隆抗体可以解除 CD47 对巨噬细胞的抑制作用”这一推论的实验结果是 。 【答案】(1) 获得足够多的能产生抗CD47抗体的B淋巴细胞 选择培养基 杂交瘤细胞 既能迅速增殖，又能产生抗体 (2) 克隆化培养和抗体检测 抗原-抗体的特异性结合 (3) 巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，不加单克隆抗体 对照组中吞噬细胞的吞噬指数明显低于实验组 【来源】四川省广元市苍溪县四川省苍溪中学校2023-2024学年高二下学期4月期中生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。用培养瓶培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）CD47对于小鼠是抗原，可引发小鼠特异性免疫反应，产生抗CD47的B淋巴细胞。步骤②可能产生未融合的骨髓瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、融合后具有同种核的细胞、杂交瘤细胞，用特定的选择培养基培养后只有杂交瘤细胞能存活，这类杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生抗体。 （2）对步骤②获得的杂交瘤细胞不一定能产生抗CD47的抗体，因此需对这部分杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，选择抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞，利用了抗原-抗体特异性结合的原理。 （3）本实验的目的是证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，实验组设置为“巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系+单克隆抗体”，遵循实验的对照原则和单一变量原则，对照组应设置为“巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系”，但不加入单克隆抗体，检测并比较两组巨噬细胞的吞噬指数，若出现“对照组中吞噬细胞的吞噬指数明显低于实验组”，则证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用。 12．(23-24高二下·四川阆中中学校·期中)胃癌是我国发病率很高的一种恶性疾病，制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体制备过程如图。回答下列问题： (1)抗胃癌单克隆抗体制备过程中要用到 技术。 (2)甲代表 细胞。 (3)诱导骨髓瘤细胞与甲融合，可用的诱导因素有 、 等(写出两种)。 (4)在甲、丙及骨髓瘤细胞中，只有丙经培养后，可获得大量的抗胃癌单克隆抗体，原因是 。 (5)与血清抗体相比，单克隆抗体的优点是 。单克隆抗体在实践中有广泛的应用，如可作为 ，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。 【答案】(1)动物细胞培养、动物细胞融合 (2)能产生特异性抗体的B淋巴 (3) 灭活的病毒 聚乙二醇 (4)只有丙既能大量增殖，又能产生特定抗体 (5) 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备 诊断试剂 【来源】四川省阆中中学校2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 2、分析题图：甲表示已免疫的B淋巴细胞，乙为杂种细胞，表示杂交瘤细胞，丙表示能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 【详解】（1）单克隆抗体制备过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。 （2）杂交瘤细胞是能产生特异性抗体的浆细胞和能无限增殖的骨髓瘤细胞融合形成的，故甲细胞表示能产生抗体的 B淋巴细胞。 （3）诱导动物细胞融合可用的诱导方法有物理法（离心、振动、电激）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。 （4）在甲、丙及骨髓瘤细胞中，只有丙经培养后，可获得大量的抗胃癌单克隆抗体，原因是只有丙既能大量增殖，又能产生特定抗体。 （5）与血清抗体相比，单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备。单克隆抗体在实践中有广泛的应用，如可作为诊断试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。 13．(23-24高二下·四川绵阳涪城区绵阳中学·月考)双特异性抗体可同时与癌细胞和免疫细胞特异性结合，它一端与癌细胞结合，一端与T细胞结合，将T细胞拉近癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率。CD19是癌细胞表面的抗原蛋白，CD3蛋白受体位于T细胞表面，与抗体结合后，其免疫功能得到激活。下图是研究人员通过杂交瘤细胞技术生产双特异性单克隆抗体的部分过程。回答下列问题： (1)给小鼠注射CD19蛋白，是为了从小鼠的脾脏中分离得到 ；注射的抗原A是指 。 (2)过程②和④所用诱导方法与诱导植物细胞融合所用方法的不同之处是 。过程③培养杂交瘤细胞时需提供一定的气体环境，其中的主要作用是 。过程⑤筛选获得的细胞具有的特点是 。 (3)与从动物血清中分离的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是 （答出2点）。双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于单克隆抗体CD19，原因是 。 【答案】(1) 能产生特定抗体的B淋巴细胞（免疫的B淋巴细胞） CD3蛋白 (2) 可用灭活的病毒诱导法 维持培养液的pH 既能大量增殖，又能产生特异性抗体 (3) 能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合（特异性强）、可以大量制备、双特异性单克隆抗体可以识别两种抗原 双特异性单克隆抗体使T细胞更精准接触到癌细胞（既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量） 【来源】四川省绵阳市涪城区绵阳中学2023-2024学年高二下学期4月月考生物试题 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）给小鼠注射CD19蛋白，是为了从小鼠的脾脏中获得已免疫的B淋巴细胞，该细胞能够产生特定抗体；分析题意，本过程的目的是得到双特异性抗体，故为保证最终双特异性抗体的产生，注射的抗原A应是CD3蛋白。 （2）据图可知，过程②和④是诱导动物细胞融合的过程，该过程可用化学诱导法，也可用物理诱导法，与诱导植物细胞融合所用方法不同的是该过程还能用灭活的病毒诱导。过程③培养杂交瘤细胞时需提供的气体条件是95%空气加5%CO2的混合气体，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。过程⑤是融合细胞的筛选，筛选后得到的细胞杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 （3）动物在生活过程中会接触各种抗原，体内存在各种抗体，双特异性单克隆抗体是通过双杂交瘤细胞的克隆化培养获得。因此，与从动物血清中分离的抗体相比，通过双杂交瘤细胞得到双特异性单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合（特异性强）、可以大量制备、双特异性单克隆抗体可以识别两种抗原。单克隆抗体CD19可以识别癌细胞，而双特异性抗体可同时与癌细胞和免疫细胞特异性结合，它一端与癌细胞结合，一端与T细胞结合，将T细胞拉近癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率。这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量，因此，双特异性单克隆抗体治疗癌症的效果往往优于单克隆抗体CD19。 14．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（即免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性抗体的部分过程；图2是某双特异性抗体的作用示意图。请分析回答下列问题： (1)图1中过程①需多次注射癌胚抗原，目的是 。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是 ，过程②选用的骨髓瘤细胞 （填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 (2)如图1所示，杂交瘤杂交法是将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合，目的是为了获得 的抗体。 (3)体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为 、 等因素而导致分裂受阻，需进行传代培养。 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。 【答案】(1) 刺激小鼠产生更多的能产生特定抗体的B淋巴细胞 灭活的病毒诱导 不能 (2)既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合 (3) 营养物质缺乏 有害代谢物积累 (4)双特异性单克隆抗体能特异性结合肿瘤细胞，实现长春碱对肿瘤细胞的选择性杀伤 【来源】四川省成都市第七中学2023—2024学年高二下学期期中考试生物试题 【分析】根据题图1分析：双特异性抗体制备流程为，先给小鼠注射特定癌胚抗原使之发生免疫反应，然后获取已经免疫的B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获得的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交—杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物） 的双特异性单克隆抗体。 【详解】（1） 图1中①步骤多次注射癌胚抗原的目的是发生多次免疫反应，刺激小鼠产生更多的已免疫的B淋巴细胞。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法。小鼠B淋巴细胞在HAT培养基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。 （2）为了获得既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合的抗体，需要将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合获得杂交瘤细胞。 （3）体外培养单克隆杂交瘤细胞，由于营养物质缺乏、有害代谢物的积累等因素，导致分裂受阻，需进行传代培养。 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是双特异性单克隆抗体能特异性结合肿瘤细胞膜表面抗原，将长春碱靶向运输至肿瘤细胞所在位置，在原位杀死肿瘤细胞，不对其他正常细胞造成损伤。 2 / 52 / 学科网（北京）股份有限公司 $$