必刷考题02 细胞工程-2024-2025学年高二生物下学期期中考点大串讲（人教版2019）

专题二 细胞工程 （知高频命题、练能力提升） · 高频命题点01 植物组织培养技术 · 高频命题点02 植物体细胞杂交技术 · 高频命题点03 植物细胞工程的应用 · 高频命题点04 动物细胞培养 · 高频命题点05 动物细胞融合技术与单克隆抗体 · 高频命题点06 动物体细胞核移植技术和克隆动物 · 高频命题点07 胚胎工程 ▉命题点1植物组织培养技术 1．植物组织培养技术常用于商业化生产，其过程一般为：无菌培养物的建立→培养物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是(　　) A．为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养 B．组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构 C．提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 D．用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异 2．蓝莓细胞富含花青素等多酚类化合物。在蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞甚至死亡，导致蓝莓组织培养失败。下列叙述错误的是(　　) A．花青素通常存在于蓝莓细胞的液泡中 B．适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率以减少褐变 C．在培养基中添加合适的抗氧化剂以减少褐变 D．宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体 ▉命题点2植物体细胞杂交技术 1．研究者通过体细胞杂交技术，探索利用条斑紫菜和拟线紫菜培育杂种紫菜。下列相关叙述正确的是(　　) A．从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，用于去除细胞壁 B．原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡 C．检测原生质体活力时可用苯酚品红或甲紫溶液处理，活的原生质体被染色 D．聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞 2．人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是(　　) A．细胞融合前应去除细胞壁 B．高Ca2＋—高pH溶液可促进细胞融合 C．融合的细胞即为杂交细胞 D．杂交细胞可能具有生长快速的优势 ▉命题点3植物细胞工程的应用 1．利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是(　　) A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B．植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养 D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量 2．(不定项)超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再用组织培养技术获得脱毒植株的方法。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述正确的是(　　) A．用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少甚至无病毒 B．经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强 C．该技术利用了茎尖分生组织无成熟液泡不易形成冰晶的特性 D．与传统茎尖培养脱毒相比，该方法取材时不受茎尖长度的限制 ▉命题点4动物细胞培养 1．航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是(　　) A．培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌 B．培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳 C．心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖 D．心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动 2．某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能是(　　) A．实验材料取自小鼠胚胎的脑组织 B．为了防止污染将培养瓶瓶口密封 C．血清经过高温处理后加入培养基 D．所使用的培养基呈弱酸性 ▉命题点5动物细胞融合技术与单克隆抗体 1．一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是(　　) A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大 B．单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合 C．利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗 D．p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 2．某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。 回答下列问题： (1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞(含浆细胞)________(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是_____________________________________________________________________。 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对________________________和____________________生长具有抑制作用。 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是_____________________ _______________________________________________________________________________。 ▉命题点6动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是(　　) A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植 2．(不定项)我国科学家利用CRISPR/Cas9技术获得了一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。并通过体细胞克隆技术，获得5只生物节律紊乱的猕猴，用于研究生物节律机制，技术流程如图所示(①②表示操作过程)。下列说法不正确的是(　　) A．在核移植操作前，应对成纤维细胞进行动物细胞培养 B．①是利用显微操作技术去核，去核前需要先将采集的卵母细胞培养至MⅡ时期 C．②可以通过电融合法使两细胞融合，形成重构胚 D．该技术得到的敲除BMAL1基因的克隆猕猴的遗传物质与猕猴甲相同 ▉命题点7胚胎工程 1．DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下，胞嘧啶的第5位碳原子上结合一个甲基基团，但胞嘧啶仍能与鸟嘌呤互补配对，Tet3基因控制合成的Tet3蛋白具有解除DNA甲基化的功能。小鼠胚胎发育过程中的各时期细胞甲基化水平如图所示。下列说法正确的是(　　) A．DNA甲基化后，基因中的碱基序列将发生改变 B．受精卵中父源染色体与母源染色体的甲基化同步进行 C．前3次卵裂时，第3次卵裂的子细胞甲基化水平最低 D．与囊胚期相比，原肠胚期细胞内Tet3基因表达增强 2．(不定项)某地一对小姐弟被确认为全球第二对半同卵双胞胎；发育成该对半同卵双胞胎的受精卵形成过程如图所示。图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成A、B、C三个细胞，其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法正确的是(　　) A．图1表示卵子的异常受精过程，此时卵子已完成减数分裂Ⅱ B．该卵子与2个精子受精，表明透明带反应未能完全阻止多精入卵 C．这对小姐弟来源于母亲的染色体一般相同，来源于父亲的染色体不相同 D．若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个，则细胞C可能含2个母系染色体组 3．科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是(　　) A．超数排卵 B．精子获能处理 C．细胞核移植 D．胚胎培养 4．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是(　　) A．通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精 B．哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质 C．克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程 D．将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖 一、选择题：每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求。 1．下列关于植物组织培养的叙述，错误的是(　　) A．用于植物组织培养的外植体就是指离体培养的植物器官、组织或细胞 B．脱分化的实质是通过基因的选择性表达改变细胞的结构和功能 C．进行植物组织培养时，常常需要添加植物激素，但是菊花茎段的组织培养比较容易，可以不必添加植物激素 D．培养基中添加蔗糖的目的只是提供营养物质 2．培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示。下列有关叙述不正确的是(　　) A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害 B．步骤③切取的组织块中要带有形成层，因为形成层容易诱导形成愈伤组织 C．从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为有害代谢产物积累 D．步骤⑥要进行照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 3．科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如下。 下列叙述正确的是(　　) A．愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的 B．获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状 C．可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生 D．用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体 4．拟矮牵牛的原生质体在X培养基(a)上只能形成小细胞团，不能形成植株，在含放线菌素－D的X培养基(b)上培养结果相同；矮牵牛的原生质体在a上能分化成植株，但在b上不能生长。在a、b上利用植物体细胞杂交技术均可培养出可育杂种矮牵牛。下列说法错误的是(　　) A．酶解法制备原生质体时，应在等渗或稍微高渗溶液中进行 B．只有杂种细胞能在b上形成植株 C．获得的杂种矮牵牛可育，说明拟矮牵牛和矮牵牛属于同一物种 D．植物体细胞杂交技术应用的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 5．花椰菜(2n＝18)易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥(2n＝16)对黑腐病等多种常见病害具有抗性。科研人员用射线照射处理黑芥叶肉原生质体后与花椰菜根原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株甲、乙、丙，它们均含有花椰菜的全部染色体。下列叙述错误的是(　　) 植株 花椰菜 黑芥 杂合新植株甲 杂合新植株乙 杂合新植株丙 染色体数目 18 16 34 24 58 A.可以利用是否含有叶绿体作为初步筛选融合原生质体的依据 B．杂合新植株甲的单倍体的细胞中有2个染色体组，因而可育 C．杂合新植株丙可能是由多个原生质体经PEG诱导融合而成 D．获得的杂种细胞需要经过脱分化和再分化才能培育成新植株 6．胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如图所示，其中GFP(绿色荧光蛋白)基因转入到了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是(　　) A．制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁 B．聚乙二醇可用于诱导原生质体A和B的融合 C．“华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于细胞核中 D．应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 7．体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，培养方式可分为悬浮培养和贴壁培养。下列叙述正确的是(　　) A．悬浮培养一般使用液体培养基 B．贴壁培养一般使用固体培养基 C．悬浮培养会发生接触抑制现象 D．血液中淋巴细胞适合贴壁培养 8．为初步验证药物P1和P2的抗癌效果，研究人员将用动物细胞培养液培养的癌细胞随机分成3份，每一份均分成5组，实验组分别加入用生理盐水配制的不同浓度的药物P1和P2，实验结果如图所示。下列相关分析错误的是(　　) A．本实验至少要设计并完成11组实验 B．对照组需要加入等量的生理盐水 C．药物P2的抗癌效果比药物P1的抗癌效果强 9．科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)，iPS细胞增殖分化后可形成多种组织细胞，用于多种疾病的治疗。如图为该技术的实验示意图，下列有关说法错误的是(　　) A．体外培养小鼠成纤维细胞和iPS细胞时，定期更换培养液可以清除细胞的代谢物 B．选取的小鼠成纤维组织需经胃蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞后制成细胞悬液 C．iPS细胞用于疾病治疗时存在分化为肿瘤细胞的风险 D．若iPS细胞取自病人，经诱导并移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应 10．甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，不考虑基因互作和其他变异。下列相关叙述错误的是(　　) A．可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得已免疫的B淋巴细胞 B．在HAT 选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均无法长期存活 C．用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时每一个孔尽量只接种一个细胞 D．抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞即具有持续产生甲型流感抗体的能力 11．下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是(　　) A．细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质 B．早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体 C．猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴 D．将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 12．细胞毒素类药物能有效杀伤肿瘤细胞，但也会对健康细胞造成伤害，科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合制成抗体—药物偶联物(ADC)，ADC又被称作“生物导弹”，通常由抗体、接头和药物三部分组成(如图所示)。下列相关叙述错误的是(　　) A．杂交瘤细胞释放单克隆抗体，体现了细胞膜的流动性 B．接头的结构不稳定会导致药物分子脱落，造成正常细胞被破坏 C．ADC中的抗体能特异性识别并杀伤肿瘤细胞 D．利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病 13．CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种癌细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍。科研人员制备抗CD47的单克隆抗体，以探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。下列说法正确的是(　　) A．编码CD47的基因是一种原癌基因 B．制备抗CD47的单克隆抗体过程中需为细胞提供95%O2、5%CO2的气体环境 C．制备抗 CD47的单克隆抗体过程中可利用CD47筛选出目标杂交瘤细胞 D．将细胞毒素与抗CD47单克隆抗体偶联到一起，可实现对癌细胞的精准杀伤 14．下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是(　　) A．采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用 B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程 C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成 D．受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体 15．下列有关卵巢的说法，正确的是(　　) A．从卵巢获取卵母细胞后可直接用于体外受精 B．精子和卵子发生的场所分别是睾丸和卵巢，受精作用的场所是卵巢 C．卵巢位于腹腔内，内部有许多发育程度不同的卵泡 D．卵巢分泌的促性腺激素能维持第二性征并促进雌性生殖器官的发育 16．以下有关动物细胞工程和胚胎工程中所用技术操作与原理不相符的是(　　) A．动物细胞培养——应用酶的专一性原理对所需材料用胰蛋白酶进行处理 B．制备单克隆抗体——应用免疫学原理对实验鼠注射特定的抗原 C．胚胎移植——应用细胞增殖原理对受体、供体母畜进行同期发情处理 D．胚胎分割——因桑葚胚细胞一般具有全能性，常选取形态正常的桑葚胚进行移植 17．如图是科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程。下列相关叙述正确的是(　　) A．过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的滋养层 B．过程②中可利用灭活的病毒诱导卵裂球细胞发生融合 C．过程③中不需要对代孕母鼠注射免疫抑制剂 D．培育嵌合体与克隆动物的生物学原理相同，但操作方法有差别 18．卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)是借助显微操作系统将单一精子注入卵母细胞的胞浆内使其受精的一种辅助生殖技术。下列叙述错误的是(　　) A．ICSI所涉及的生殖方式为有性生殖 B．ICSI中所用卵母细胞应处于MⅡ期 C．受精后所得受精卵应直接移植到受体子宫内发育 D．ICSI可用于治疗男性精子数量不足造成的不育症 19．根据图示，正确的是(　　) A．子代动物遗传性状和受体动物完全一致 B．过程1需要MⅡ期去核卵母细胞 C．过程2可以大幅改良动物性状 D．过程2为过程3提供了量产方式，过程3为过程1、2提供了改良性状的方式 20．下列关于胚胎移植的叙述，正确的是(　　) A．经胚胎移植产生的个体一定是无性生殖的后代 B．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 C．胚胎移植前需对受体进行超数排卵处理 D．胚胎移植的优势是可以充分发挥受体的繁殖潜力 二、选择题：每小题给出的四个选项中有一个或多个符合题目要求。 21．寒兰为名贵的兰花品种，一般生长在深山幽谷的山腰谷壁。由于人类的过度采摘，现在很难找到寒兰，偶尔能发现的也只是较小的植株。为了增加野生寒兰数量，科研人员希望对其进行大量人工繁殖，再移栽至原有生境。下列有关叙述正确的是(　　) A．在植物的生长发育过程中，所有的细胞都表现出全能性 B．可将寒兰的组织细胞放置在培养基中进行植物组织培养 C．在诱导生根时，培养基中应适当提高生长素的占比 D．长出丛芽的过程中，寒兰组织细胞中的遗传物质会发生改变 22．iPS细胞被称为诱导多能干细胞，可通过转入相关因子来制备。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导成该类细胞。下列说法正确的是(　　) A．导入的物质可以是DNA、蛋白质，还可用小分子物质来诱导 B．iPS细胞的体外培养需要在无菌的CO2培养箱中进行 C．T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞，说明体内细胞的分化是可逆的 D．与胚胎干细胞相比，iPS细胞的优点是分裂能力强，分化程度低 23．人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体 B．单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 C．可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 D．单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透过性 24．为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导胚胎干细胞(iPS细胞)，继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列叙述错误的是(　　) A．诱导优良模型鼠体细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化 B．胚胎移植后，重构胚进一步扩大导致囊胚腔破裂的过程称为孵化 C．为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠③进行胰岛素抵抗的相关检测 D．为获得更多的双细胞胚，可对白色鼠①注射性激素达到超数排卵的目的 25．原肠胚形成期被称为人体胚胎发育的“黑匣子”时期。研究人员利用胚胎干细胞，在实验室中制造出不能发育成完整胚胎的“拟原肠胚”模型，用来揭示人类早期胚胎发育的过程。下列说法正确的是(　　) A．滋养层细胞将来能发育成胎膜和胎盘 B．利用核移植所得胚胎干细胞，可以诱导发育成适合移植的器官 C．对原肠胚进行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率 D．该模型可以研究酒精、药物和病原体对胚胎发育的影响 三、非选择题 26.白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。白菜—甘蓝是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强、易储存等优点，如图为“白菜—甘蓝”的培育过程，请回答下列问题： (1)为了得到原生质体，需先用________________________处理白菜和甘蓝的细胞。 (2)诱导原生质体融合的方法有多种，常用的化学方法是________________(填写中文名称，写出两种即可)，融合完成的标志是________________。由杂种细胞得到白菜—甘蓝植株还需经过植物组织培养，其中不需要光照的培养过程为________。 (3)经花粉直接培育的白菜—甘蓝植株，体细胞的染色体数为________。这种植株通常不育，为使其可育，需进行人工诱导，通过对幼苗使用________进行处理，这种变异属于________。 (4)植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是____________________________________________。 27.2022年春天，新冠病毒的变异株传播性更强，给人们的日常生产、生活带来很大的影响，因此研发更有效的新冠疫苗受到广泛关注。请回答下列问题： (1)新冠病毒感染人体后，其S蛋白识别人体细胞膜蛋白ACE2并与之结合，使病毒侵入细胞，同时会引起人体发生相应的免疫反应。所以在用小鼠作为实验材料制备杂交瘤细胞时，可以给小鼠注射____________或____________作为抗原，一段时间后从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞，将其与小鼠的________细胞融合。 (2)进行细胞融合操作后，用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上不能存活的细胞是_______________ _____________________________________，能够存活下来的细胞的特点是____________________________ ________________________________________________________________。 筛选出的细胞再进行________培养和抗体检测，经过多次筛选就可得到所需的细胞群。选取检测抗体阳性的杂交瘤细胞进行体外培养时需要的气体环境是_____________________________________________。 (3)有人也用类似的技术研究植物，想利用植物体细胞杂交技术培育“番茄—马铃薯”，结果并没有预想中的“地上结番茄，地下长马铃薯”，可能的原因是___________________________________________； 培育该杂种植物的过程中，遗传物质的传递________(填“遵循”或“不遵循”)孟德尔遗传规律。 28．两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图1所示。请回答下列问题： (1)过程①需要使用__________酶去除细胞壁。③要用到的方法有_____________________(物理法和化学法各举一例)。 (2)过程②紫外线的作用是________________________________________________。 (3)过程④培养基中需添加__________、无机盐、蔗糖等物质才能诱导愈伤组织形成，其中蔗糖的作用是_________________________________________________(至少答出一点)。 (4)以普通小麦、中间偃麦草及再生植株1～4的基因组DNA为模板扩增出差异性条带，可用于杂种植株的鉴定，结果如图2所示。据图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有____________，判断依据是____________________________________。 29．人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请回答相关问题： (1)动物细胞培养时，可以用____________酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸、生长因子等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的__________，以满足动物细胞培养的营养需要。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是_________________________(至少回答两点)。 (2)为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用______________作为抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导剂是__________。为了获得杂交瘤细胞，应将甲放在__________培养基上进行培养。②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行______________检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得抗cTnI抗体产量高、纯度高的杂交瘤细胞丙。与传统方法生成的抗体相比，杂交瘤细胞丙产生的单克隆抗体最主要的优点是_____________________ 1_________________________________________。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与同一抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________________________________。 30.利用转基因母牛乳腺生物反应器可生产蛛丝蛋白，获得转基因母牛的过程如图所示。 请回答下列问题： (1)从雌牛的卵巢中采集的卵母细胞需要培养到________期才能进行体外受精，体外受精前，需要对精子进行获能处理。当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应，如________和________等。 (2)在过程①中，蛛丝蛋白基因应与________基因的启动子等调控组件重组在一起。在过程④前，需对囊胚的________进行切割并做DNA分析进行性别鉴定，再选用雌性胚胎进行移植。 (3)为了进一步扩大繁殖规模，可通过________技术获得同卵多胎，该技术的关键是______________________________________________________________。 (4)从生理学基础角度看，胚胎移植能成功的原因有________________________________________ (任意两点即可)。 14 / 21 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题二 细胞工程 （知高频命题、练能力提升） · 高频命题点01 植物组织培养技术 · 高频命题点02 植物体细胞杂交技术 · 高频命题点03 植物细胞工程的应用 · 高频命题点04 动物细胞培养 · 高频命题点05 动物细胞融合技术与单克隆抗体 · 高频命题点06 动物体细胞核移植技术和克隆动物 · 高频命题点07 胚胎工程 ▉命题点1植物组织培养技术 1．植物组织培养技术常用于商业化生产，其过程一般为：无菌培养物的建立→培养物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是(　　) A．为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养 B．组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构 C．提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 D．用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异 答案　D 解析　植物组织培养过程中应注意无菌操作，为获得无菌培养物，外植体要经过表面消毒处理后，才能进行培养，所用的培养基必须彻底灭菌，A正确；生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成，因此提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根，C正确；用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗会出现变异，如在愈伤组织的培养过程中可能发生基因突变等变异，D错误。 2．蓝莓细胞富含花青素等多酚类化合物。在蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变。褐变会引起细胞生长停滞甚至死亡，导致蓝莓组织培养失败。下列叙述错误的是(　　) A．花青素通常存在于蓝莓细胞的液泡中 B．适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率以减少褐变 C．在培养基中添加合适的抗氧化剂以减少褐变 D．宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体 答案　D 解析　液泡中含有糖类、无机盐、色素和蛋白质等，其中的色素是水溶性色素，如花青素，A正确；适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率可减少氧化剂的浓度，从而减少褐变，B正确；根据题干信息“在蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变”可知，在培养基中添加合适的抗氧化剂可以减少褐变，C正确；一般选用代谢旺盛、再生能力强的器官或组织为材料制备外植体，D错误。 ▉命题点2植物体细胞杂交技术 1．研究者通过体细胞杂交技术，探索利用条斑紫菜和拟线紫菜培育杂种紫菜。下列相关叙述正确的是(　　) A．从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，用于去除细胞壁 B．原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡 C．检测原生质体活力时可用苯酚品红或甲紫溶液处理，活的原生质体被染色 D．聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞 答案　D 解析　从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，不能用于去除细胞壁，因为紫菜细胞的细胞壁成分主要为纤维素和果胶，A错误；获得的原生质体若处在低渗溶液中，会吸水涨破，B错误；检测原生质体活力时可用台盼蓝染色，活的原生质体不能被染色，C错误；聚乙二醇作为诱导剂可促进原生质体融合，对于杂种细胞以叶绿体颜色等差异为标志来进行识别，D正确。 2．人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是(　　) A．细胞融合前应去除细胞壁 B．高Ca2＋—高pH溶液可促进细胞融合 C．融合的细胞即为杂交细胞 D．杂交细胞可能具有生长快速的优势 答案　C 解析　融合的细胞中有人参根－人参根细胞、人参根－胡萝卜根细胞、胡萝卜根－胡萝卜根细胞，只有人参根－胡萝卜根细胞才是杂交细胞，C错误。 ▉命题点3植物细胞工程的应用 1．利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是(　　) A．利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B．植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C．次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养 D．该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量 答案　A 解析　分析题意可知，可通过该技术进行植物细胞产物的工厂化生产，B错误；次生代谢物不是植物生长所必需的，其含量少，可以通过增加细胞的数量来增加次生代谢物的产量，C错误；细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞分裂的培养条件，增加细胞数量，提高次生代谢物的含量，但不能提高单个细胞中次生代谢物的含量，D错误。 2．(不定项)超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再用组织培养技术获得脱毒植株的方法。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述正确的是(　　) A．用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少甚至无病毒 B．经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强 C．该技术利用了茎尖分生组织无成熟液泡不易形成冰晶的特性 D．与传统茎尖培养脱毒相比，该方法取材时不受茎尖长度的限制 答案　ACD 解析　经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯只是脱毒，并没有获得抗病毒的能力，B错误；与传统茎尖培养脱毒相比，该方法取材不受茎尖长度限制，传统茎尖培养脱毒法切取茎尖的大小与脱毒效果直接相关，茎尖越小，去除病毒机会越大，而超低温冷冻脱毒法是通过超低温处理，大多数细胞都受到了损伤而死亡，存活下来的仅有生长点的分生组织细胞，D正确。 ▉命题点4动物细胞培养 1．航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是(　　) A．培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌 B．培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳 C．心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖 D．心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动 答案　B 解析　培养心肌细胞的器具要先进行高压蒸汽灭菌，但是试剂并不都需要高压蒸汽灭菌，如动物血清不能进行高压蒸汽灭菌，否则会使其中的成分失活，A错误；心肌细胞高度分化，不能进行有丝分裂，C错误。 2．某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能是(　　) A．实验材料取自小鼠胚胎的脑组织 B．为了防止污染将培养瓶瓶口密封 C．血清经过高温处理后加入培养基 D．所使用的培养基呈弱酸性 答案　A 解析　小鼠胚胎脑组织中含有丰富的原代神经元，细胞增殖能力强，不会导致细胞生长缓慢，A符合题意；培养瓶瓶口密封会使培养液中缺氧，影响细胞的有氧呼吸，造成供能不足，可能导致细胞生长缓慢，B不符合题意；血清经过高温处理后，其中活性成分变性，失去原有功能，细胞的生存环境严重恶化，可能导致细胞生长缓慢，C不符合题意；小鼠的内环境为弱碱性，若所使用的培养基呈弱酸性，会导致细胞的生存环境恶劣，可能导致细胞生长缓慢，D不符合题意。 ▉命题点5动物细胞融合技术与单克隆抗体 1．一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是(　　) A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大 B．单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合 C．利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗 D．p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 答案　D 解析　单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误；单抗制备过程中通常是免疫后将脾脏破碎，然后用离心法将脾脏细胞(包含各种产生或不产生抗体的B细胞)和红细胞分开，然后用脾细胞与骨髓瘤细胞融合，而不能直接分离出浆细胞，B错误；非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72上有多种抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C错误；p72部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。 2．某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。 回答下列问题： (1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞(含浆细胞)________(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是_____________________________________________________________________。 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对________________________和____________________生长具有抑制作用。 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是_____________________ _______________________________________________________________________________。 答案　(1)不需要　使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合　(2)未融合的亲本细胞　融合的具有同种核的细胞　(3)通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞 解析　(1)浆细胞是高度分化的细胞，不能增殖，所以不能通过原代培养扩大细胞数量。脂溶性物质PEG可使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。(2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。(3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，是运用了抗原—抗体杂交技术，抗体检测呈阳性的细胞，即为所需的杂交瘤细胞。 ▉命题点6动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是(　　) A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植 答案　B 解析　后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自乙，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A错误；动物细胞培养中需要提供95%空气(保证细胞的有氧呼吸)和5%CO2(维持培养液的pH)的混合气体，B正确；过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误；过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑葚胚后移植，D错误。 2．(不定项)我国科学家利用CRISPR/Cas9技术获得了一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。并通过体细胞克隆技术，获得5只生物节律紊乱的猕猴，用于研究生物节律机制，技术流程如图所示(①②表示操作过程)。下列说法不正确的是(　　) A．在核移植操作前，应对成纤维细胞进行动物细胞培养 B．①是利用显微操作技术去核，去核前需要先将采集的卵母细胞培养至MⅡ时期 C．②可以通过电融合法使两细胞融合，形成重构胚 D．该技术得到的敲除BMAL1基因的克隆猕猴的遗传物质与猕猴甲相同 答案　D 解析　该技术得到的敲除BMAL1基因的克隆猕猴的遗传物质主要来自猕猴甲，少量来自卵母细胞的细胞质，D错误。 ▉命题点7胚胎工程 1．DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下，胞嘧啶的第5位碳原子上结合一个甲基基团，但胞嘧啶仍能与鸟嘌呤互补配对，Tet3基因控制合成的Tet3蛋白具有解除DNA甲基化的功能。小鼠胚胎发育过程中的各时期细胞甲基化水平如图所示。下列说法正确的是(　　) A．DNA甲基化后，基因中的碱基序列将发生改变 B．受精卵中父源染色体与母源染色体的甲基化同步进行 C．前3次卵裂时，第3次卵裂的子细胞甲基化水平最低 D．与囊胚期相比，原肠胚期细胞内Tet3基因表达增强 答案　C 解析　DNA甲基化后，基因中的碱基序列不变，A错误；由图可知，受精卵中父源染色体与母源染色体的甲基化不同步，B错误；卵裂属于有丝分裂，第3次卵裂能形成8个细胞，据图可知，第3次卵裂的子细胞甲基化水平最低，C正确；与囊胚期相比，原肠胚期细胞内DNA甲基化水平较高，Tet3基因控制合成的Tet3蛋白具有解除DNA甲基化的功能，因此推测原肠胚期细胞内Tet3基因表达较弱，D错误。 2．(不定项)某地一对小姐弟被确认为全球第二对半同卵双胞胎；发育成该对半同卵双胞胎的受精卵形成过程如图所示。图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成A、B、C三个细胞，其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法正确的是(　　) A．图1表示卵子的异常受精过程，此时卵子已完成减数分裂Ⅱ B．该卵子与2个精子受精，表明透明带反应未能完全阻止多精入卵 C．这对小姐弟来源于母亲的染色体一般相同，来源于父亲的染色体不相同 D．若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个，则细胞C可能含2个母系染色体组 答案　BC 解析　图1两个精子进入一个卵细胞，是异常受精过程，发生在卵细胞的减数分裂Ⅱ中期，此时卵子还未完成减数分裂，A错误；阻止多精入卵的两道屏障是透明带和卵细胞膜的生理反应，该卵子与2个精子受精，表明透明带和卵细胞膜未能完全阻止多精入卵，B正确；该姐弟来源于母亲的染色体是相同的，来自父亲的染色体由两个不同的精子提供，一个精子中含有X染色体，另一个精子中含有Y染色体，因此染色体组成不同，C正确；若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个，C应该包含父系和母系染色体组各1个或包含2个父系染色体组，D错误。 3．科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是(　　) A．超数排卵 B．精子获能处理 C．细胞核移植 D．胚胎培养 答案　C 解析　由题干信息可知，该过程通过体外受精获得胚胎，再通过胚胎移植，使长角羚羊成功妊娠并产仔，因此需要进行超数排卵、精子获能处理，并对获得的受精卵进行胚胎培养；由于该过程为有性生殖，因此不涉及细胞核移植，C符合题意。 4．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是(　　) A．通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精 B．哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质 C．克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程 D．将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖 答案　C 解析　精子获能是获得受精的能力，不是获得能量，A错误；哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养所需营养物质与体内基本相同，胚胎的培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质，B错误；胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一，D错误。 一、选择题：每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求。 1．下列关于植物组织培养的叙述，错误的是(　　) A．用于植物组织培养的外植体就是指离体培养的植物器官、组织或细胞 B．脱分化的实质是通过基因的选择性表达改变细胞的结构和功能 C．进行植物组织培养时，常常需要添加植物激素，但是菊花茎段的组织培养比较容易，可以不必添加植物激素 D．培养基中添加蔗糖的目的只是提供营养物质 答案　D 解析　培养基中添加蔗糖的目的是提供营养物质和调节渗透压，D错误。 2．培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示。下列有关叙述不正确的是(　　) A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害 B．步骤③切取的组织块中要带有形成层，因为形成层容易诱导形成愈伤组织 C．从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为有害代谢产物积累 D．步骤⑥要进行照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用 答案　C 解析　脱分化和再分化过程中植物激素的种类和比例不同，故从步骤⑤(脱分化)到步骤⑥(再分化)需要更换新的培养基，C错误；叶绿素的形成需要光照，步骤⑥要进行照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用，D正确。 3．科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如下。 下列叙述正确的是(　　) A．愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的 B．获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状 C．可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生 D．用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体 答案　D 解析　愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞脱分化形成的，A错误；由于基因的选择性表达和基因间的互作效应，获得的杂种植株不一定能够表现亲本的优良性状，B错误；可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合，但不能诱导细胞壁的再生，C错误；由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，故可以用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体，D正确。 4．拟矮牵牛的原生质体在X培养基(a)上只能形成小细胞团，不能形成植株，在含放线菌素－D的X培养基(b)上培养结果相同；矮牵牛的原生质体在a上能分化成植株，但在b上不能生长。在a、b上利用植物体细胞杂交技术均可培养出可育杂种矮牵牛。下列说法错误的是(　　) A．酶解法制备原生质体时，应在等渗或稍微高渗溶液中进行 B．只有杂种细胞能在b上形成植株 C．获得的杂种矮牵牛可育，说明拟矮牵牛和矮牵牛属于同一物种 D．植物体细胞杂交技术应用的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 答案　C 解析　为避免原生质体吸水涨破，酶解法制备原生质体时，应在等渗或稍微高渗溶液中进行，A正确；根据题干信息可知，杂种细胞兼有两者的特点，能在b上形成植株，B正确；利用植物体细胞杂交技术培养出可育杂种矮牵牛，是人为状态下实现的，不能说明拟矮牵牛和矮牵牛属于同一物种，C错误。 5．花椰菜(2n＝18)易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥(2n＝16)对黑腐病等多种常见病害具有抗性。科研人员用射线照射处理黑芥叶肉原生质体后与花椰菜根原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株甲、乙、丙，它们均含有花椰菜的全部染色体。下列叙述错误的是(　　) 植株 花椰菜 黑芥 杂合新植株甲 杂合新植株乙 杂合新植株丙 染色体数目 18 16 34 24 58 A.可以利用是否含有叶绿体作为初步筛选融合原生质体的依据 B．杂合新植株甲的单倍体的细胞中有2个染色体组，因而可育 C．杂合新植株丙可能是由多个原生质体经PEG诱导融合而成 D．获得的杂种细胞需要经过脱分化和再分化才能培育成新植株 答案　B 解析　杂合新植株甲的单倍体的细胞中有2个染色体组，但来源不同，因而不可育，B错误；杂合新植株丙的染色体数目大于34，可能是由多个原生质体经PEG诱导融合而成，C正确。 6．胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如图所示，其中GFP(绿色荧光蛋白)基因转入到了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是(　　) A．制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁 B．聚乙二醇可用于诱导原生质体A和B的融合 C．“华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于细胞核中 D．应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 答案　B 解析　制备原生质体时需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误；雄性不育的胞质杂种“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，融合后品种A的细胞核消失，说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中，C错误；GFP(绿色荧光蛋白)基因转入到了品种A的细胞核基因组中，而融合后的“华柚2号”不含品种A的细胞核，因此发绿色荧光的杂种细胞应被淘汰，D错误。 7．体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，培养方式可分为悬浮培养和贴壁培养。下列叙述正确的是(　　) A．悬浮培养一般使用液体培养基 B．贴壁培养一般使用固体培养基 C．悬浮培养会发生接触抑制现象 D．血液中淋巴细胞适合贴壁培养 答案　A 解析　动物细胞培养均采用液体培养基，B错误；贴壁培养会发生接触抑制现象，悬浮培养不会发生接触抑制现象，C错误；体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，因此血液中淋巴细胞适合悬浮培养，D错误。 8．为初步验证药物P1和P2的抗癌效果，研究人员将用动物细胞培养液培养的癌细胞随机分成3份，每一份均分成5组，实验组分别加入用生理盐水配制的不同浓度的药物P1和P2，实验结果如图所示。下列相关分析错误的是(　　) A．本实验至少要设计并完成11组实验 B．对照组需要加入等量的生理盐水 C．药物P2的抗癌效果比药物P1的抗癌效果强 D．实验不能说明药物P1和P2对正常细胞有抑制作用 答案　C 解析　本实验与药物P1有关的实验组有5组，与药物P2有关的实验组有5组，对照组1组，因此，本实验至少要设计并完成11组实验，A正确；为排除无关变量对实验结果的影响，对照组需要加入等量的生理盐水，B正确；本实验没有进行药物P1和P2对正常细胞增殖的影响，因而不能说明药物P1和P2对正常细胞有抑制作用，D正确。 9．科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)，iPS细胞增殖分化后可形成多种组织细胞，用于多种疾病的治疗。如图为该技术的实验示意图，下列有关说法错误的是(　　) A．体外培养小鼠成纤维细胞和iPS细胞时，定期更换培养液可以清除细胞的代谢物 B．选取的小鼠成纤维组织需经胃蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞后制成细胞悬液 C．iPS细胞用于疾病治疗时存在分化为肿瘤细胞的风险 D．若iPS细胞取自病人，经诱导并移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应 答案　B 解析　选取的小鼠成纤维组织需经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞后制成细胞悬液，由于动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，B错误。 10．甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，不考虑基因互作和其他变异。下列相关叙述错误的是(　　) A．可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得已免疫的B淋巴细胞 B．在HAT 选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均无法长期存活 C．用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时每一个孔尽量只接种一个细胞 D．抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞即具有持续产生甲型流感抗体的能力 答案　D 解析　杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，若丢失的染色体含有产生甲型流感抗体的基因，则杂交瘤细胞分泌单克隆抗体的功能将丧失，D错误。 11．下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是(　　) A．细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质 B．早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体 C．猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴 D．将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 答案　D 解析　我国利用核移植技术成功培养出克隆猴“中中”和“华华”，C正确；将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，D错误。 12．细胞毒素类药物能有效杀伤肿瘤细胞，但也会对健康细胞造成伤害，科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合制成抗体—药物偶联物(ADC)，ADC又被称作“生物导弹”，通常由抗体、接头和药物三部分组成(如图所示)。下列相关叙述错误的是(　　) A．杂交瘤细胞释放单克隆抗体，体现了细胞膜的流动性 B．接头的结构不稳定会导致药物分子脱落，造成正常细胞被破坏 C．ADC中的抗体能特异性识别并杀伤肿瘤细胞 D．利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病 答案　C 解析　单克隆抗体由杂交瘤细胞通过胞吐的方式释放，体现了细胞膜的流动性，A正确；ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，如果接头的结构不稳定会导致药物分子脱落，则药物分子失去了靶向性，造成正常细胞被破坏，B正确；单克隆抗体能与抗原特异性结合，这种靶向作用使ADC中的药物对肿瘤细胞进行杀伤，而不是抗体杀伤肿瘤细胞，C错误；利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病，该过程利用了抗原—抗体特异性结合原理，D正确。 13．CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种癌细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍。科研人员制备抗CD47的单克隆抗体，以探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。下列说法正确的是(　　) A．编码CD47的基因是一种原癌基因 B．制备抗CD47的单克隆抗体过程中需为细胞提供95%O2、5%CO2的气体环境 C．制备抗 CD47的单克隆抗体过程中可利用CD47筛选出目标杂交瘤细胞 D．将细胞毒素与抗CD47单克隆抗体偶联到一起，可实现对癌细胞的精准杀伤 答案　C 解析　由题意可知，编码CD47的基因不是原癌基因，因为它的作用是通过调节免疫系统的功能来影响肿瘤细胞的生长和转移，而不是通过直接影响细胞的增殖和分化来促进癌症的发生，A错误；制备抗CD47的单克隆抗体过程中，细胞需在含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，B错误；目标杂交瘤细胞可产生抗CD47抗体，可利用CD47筛选出目标杂交瘤细胞，C正确；正常细胞表面也含有CD47，对癌细胞精准杀伤应选择癌细胞特有蛋白质，D错误。 14．下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是(　　) A．采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用 B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程 C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成 D．受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体 答案　D 解析　刚采集的精子不能立刻与卵子受精，必须发生相应的生理变化获能后，才能获得受精能力，A错误；排卵时排出的细胞成熟程度不同，有的可能是初级卵母细胞，有的可能是次级卵母细胞，且并非成熟卵细胞，B错误；卵子形成时，其减数分裂Ⅱ是在输卵管中完成的，C错误。 15．下列有关卵巢的说法，正确的是(　　) A．从卵巢获取卵母细胞后可直接用于体外受精 B．精子和卵子发生的场所分别是睾丸和卵巢，受精作用的场所是卵巢 C．卵巢位于腹腔内，内部有许多发育程度不同的卵泡 D．卵巢分泌的促性腺激素能维持第二性征并促进雌性生殖器官的发育 答案　C 解析　从卵巢获取的卵母细胞没有成熟，需要培养至MⅡ期才能用于体外受精，A错误；受精作用的场所是输卵管，B错误；促性腺激素是垂体分泌的，卵巢分泌的雌激素和孕激素能维持第二性征并促进雌性生殖器官的发育，D错误。 16．以下有关动物细胞工程和胚胎工程中所用技术操作与原理不相符的是(　　) A．动物细胞培养——应用酶的专一性原理对所需材料用胰蛋白酶进行处理 B．制备单克隆抗体——应用免疫学原理对实验鼠注射特定的抗原 C．胚胎移植——应用细胞增殖原理对受体、供体母畜进行同期发情处理 D．胚胎分割——因桑葚胚细胞一般具有全能性，常选取形态正常的桑葚胚进行移植 答案　C 解析　胚胎移植前对受体、供体母畜进行同期发情处理使它们的生理条件达到同步或一致，这样才能使供体的胚胎植入受体后有相同或相似的生存条件，此技术应用激素原理而不是细胞增殖原理，C错误。 17．如图是科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程。下列相关叙述正确的是(　　) A．过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的滋养层 B．过程②中可利用灭活的病毒诱导卵裂球细胞发生融合 C．过程③中不需要对代孕母鼠注射免疫抑制剂 D．培育嵌合体与克隆动物的生物学原理相同，但操作方法有差别 答案　C 解析　卵裂球还没有滋养层细胞，滋养层细胞是囊胚期才分化形成的，A错误；过程②使黑白卵裂球的细胞彼此混合，而非细胞融合，B错误；培育嵌合体的生物学原理是细胞的增殖和分化，克隆动物的生物学原理是动物细胞核具有全能性，两者的原理不相同，操作方法有差别，D错误。 18．卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)是借助显微操作系统将单一精子注入卵母细胞的胞浆内使其受精的一种辅助生殖技术。下列叙述错误的是(　　) A．ICSI所涉及的生殖方式为有性生殖 B．ICSI中所用卵母细胞应处于MⅡ期 C．受精后所得受精卵应直接移植到受体子宫内发育 D．ICSI可用于治疗男性精子数量不足造成的不育症 答案　C 解析　该技术实际上是体外受精技术，故生殖方式是有性生殖，A正确；卵母细胞培养到MⅡ期时才具备受精能力，B正确；受精后所得受精卵应培养到一定阶段才能移植到受体子宫内发育，C错误；由于ICSI技术能使单一精子注入卵母细胞的胞浆内使其受精，因此可用于男性精子数量不足或活力不强造成的不育症的治疗，D正确。 19．根据图示，正确的是(　　) A．子代动物遗传性状和受体动物完全一致 B．过程1需要MⅡ期去核卵母细胞 C．过程2可以大幅改良动物性状 D．过程2为过程3提供了量产方式，过程3为过程1、2提供了改良性状的方式 答案　D 解析　子代动物的遗传性状与供体基本一致，与受体无关，A错误；核移植过程中需要处于MⅡ期的去核卵母细胞，而过程1是培育试管动物，需要培育到适宜时期(桑葚胚或囊胚)进行胚胎移植，B错误；过程2得到的是克隆动物，是无性生殖的一种，不能大幅改良动物性状，C错误；过程2克隆技术可得到大量同种个体，为过程3提供了量产方式；过程3转基因技术可导入外源优良基因，为过程1、2提供改良性状的方式，D正确。 20．下列关于胚胎移植的叙述，正确的是(　　) A．经胚胎移植产生的个体一定是无性生殖的后代 B．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 C．胚胎移植前需对受体进行超数排卵处理 D．胚胎移植的优势是可以充分发挥受体的繁殖潜力 答案　B 解析　经胚胎移植产生的个体可能是有性生殖的后代，也可能是无性生殖的后代，其取决于胚胎的来源，A错误；对供体进行超数排卵以获得较多的卵母细胞，C错误；胚胎移植的优势是可以充分发挥供体(雌性优良个体)的繁殖潜力，受体的任务就是妊娠和育仔，D错误。 二、选择题：每小题给出的四个选项中有一个或多个符合题目要求。 21．寒兰为名贵的兰花品种，一般生长在深山幽谷的山腰谷壁。由于人类的过度采摘，现在很难找到寒兰，偶尔能发现的也只是较小的植株。为了增加野生寒兰数量，科研人员希望对其进行大量人工繁殖，再移栽至原有生境。下列有关叙述正确的是(　　) A．在植物的生长发育过程中，所有的细胞都表现出全能性 B．可将寒兰的组织细胞放置在培养基中进行植物组织培养 C．在诱导生根时，培养基中应适当提高生长素的占比 D．长出丛芽的过程中，寒兰组织细胞中的遗传物质会发生改变 答案　BC 解析　在生物的生长发育过程中，并不是所有的细胞都表现出全能性，这是因为在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会选择性地表达，A错误；长出丛芽的过程为再分化，寒兰组织细胞的遗传物质未发生改变，而是发生了基因的选择性表达，D错误。 22．iPS细胞被称为诱导多能干细胞，可通过转入相关因子来制备。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导成该类细胞。下列说法正确的是(　　) A．导入的物质可以是DNA、蛋白质，还可用小分子物质来诱导 B．iPS细胞的体外培养需要在无菌的CO2培养箱中进行 C．T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞，说明体内细胞的分化是可逆的 D．与胚胎干细胞相比，iPS细胞的优点是分裂能力强，分化程度低 答案　AB 解析　目前已采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定的基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞，A正确；iPS细胞的体外培养是利用动物细胞培养技术，需要在无菌的CO2培养箱中进行培养，B正确；T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞，说明离体的、已分化的细胞经过诱导可转化为未分化的状态，C错误；相较于传统胚胎干细胞的应用，iPS细胞具有细胞来源广泛、不需要破坏胚胎等优点，胚胎干细胞和iPS细胞均具有分裂能力强，分化程度低的特点，D错误。 23．人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体 B．单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 C．可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 D．单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透过性 答案　ABC 解析　单克隆抗体的制备过程主要运用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合，原理依次是细胞增殖、细胞膜的流动性，D错误。 24．为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导胚胎干细胞(iPS细胞)，继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列叙述错误的是(　　) A．诱导优良模型鼠体细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化 B．胚胎移植后，重构胚进一步扩大导致囊胚腔破裂的过程称为孵化 C．为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠③进行胰岛素抵抗的相关检测 D．为获得更多的双细胞胚，可对白色鼠①注射性激素达到超数排卵的目的 答案　BD 解析　囊胚进一步扩大，导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化，B错误；为获得更多的双细胞胚，一般注射的是促性腺激素，以达到超数排卵的目的，D错误。 25．原肠胚形成期被称为人体胚胎发育的“黑匣子”时期。研究人员利用胚胎干细胞，在实验室中制造出不能发育成完整胚胎的“拟原肠胚”模型，用来揭示人类早期胚胎发育的过程。下列说法正确的是(　　) A．滋养层细胞将来能发育成胎膜和胎盘 B．利用核移植所得胚胎干细胞，可以诱导发育成适合移植的器官 C．对原肠胚进行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率 D．该模型可以研究酒精、药物和病原体对胚胎发育的影响 答案　ABD 解析　胚胎分割时应该选择形态正常、发育良好的桑葚胚或囊胚，C错误。 三、非选择题 26.白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。白菜—甘蓝是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强、易储存等优点，如图为“白菜—甘蓝”的培育过程，请回答下列问题： (1)为了得到原生质体，需先用________________________处理白菜和甘蓝的细胞。 (2)诱导原生质体融合的方法有多种，常用的化学方法是________________(填写中文名称，写出两种即可)，融合完成的标志是________________。由杂种细胞得到白菜—甘蓝植株还需经过植物组织培养，其中不需要光照的培养过程为________。 (3)经花粉直接培育的白菜—甘蓝植株，体细胞的染色体数为________。这种植株通常不育，为使其可育，需进行人工诱导，通过对幼苗使用________进行处理，这种变异属于________。 (4)植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是____________________________________________。 答案　(1)纤维素酶、果胶酶　(2)聚乙二醇融合法、高Ca2＋—高pH融合法　形成的杂种细胞再生出新的细胞壁　脱分化　(3)19　秋水仙素　染色体变异　 (4)能打破生殖隔离、克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种 解析　(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，可使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，得到原生质体。(2)诱导原生质体融合的物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇融合法、高Ca2＋—高pH融合法等。融合完成的标志是形成的杂种细胞再生出新的细胞壁。将杂种细胞培育成杂种植株还需要使用植物组织培养技术，包括脱分化和再分化两个阶段，其中脱分化过程一般不需要光照，再分化过程要给予适当光照。(3)经花粉直接培育的白菜—甘蓝植株，体细胞的染色体数为(20＋18)÷2＝19，不含同源染色体，这种植株通常不育，为使其可育，可通过使用秋水仙素处理幼苗使其染色体加倍，这种变异属于染色体变异。(4)植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是能打破生殖隔离、克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。 27.2022年春天，新冠病毒的变异株传播性更强，给人们的日常生产、生活带来很大的影响，因此研发更有效的新冠疫苗受到广泛关注。请回答下列问题： (1)新冠病毒感染人体后，其S蛋白识别人体细胞膜蛋白ACE2并与之结合，使病毒侵入细胞，同时会引起人体发生相应的免疫反应。所以在用小鼠作为实验材料制备杂交瘤细胞时，可以给小鼠注射____________或____________作为抗原，一段时间后从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞，将其与小鼠的________细胞融合。 (2)进行细胞融合操作后，用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上不能存活的细胞是_______________ _____________________________________，能够存活下来的细胞的特点是____________________________ ________________________________________________________________。 筛选出的细胞再进行________培养和抗体检测，经过多次筛选就可得到所需的细胞群。选取检测抗体阳性的杂交瘤细胞进行体外培养时需要的气体环境是_____________________________________________。 (3)有人也用类似的技术研究植物，想利用植物体细胞杂交技术培育“番茄—马铃薯”，结果并没有预想中的“地上结番茄，地下长马铃薯”，可能的原因是___________________________________________； 培育该杂种植物的过程中，遗传物质的传递________(填“遵循”或“不遵循”)孟德尔遗传规律。 答案　(1)纯化的新冠病毒的S蛋白　灭活的新冠病毒(前两空顺序可互换)　骨髓瘤　(2)未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞　既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体　克隆化　95%空气加5%CO2　(3)两个物种之间的基因相互影响，导致某些基因无法正常表达(或生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的)不遵循 解析　(1)若用小鼠来制备抗新冠病毒的单克隆抗体，制备过程中需向小鼠注入的抗原是灭活的新冠病毒或纯化的新冠病毒的S蛋白，一段时间后，提取B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞进行融合。(2)进行细胞融合操作后，要经过筛选才能得到所需的杂交瘤细胞，第一次用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上不能存活的是未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞，只有融合的杂种细胞才能生长，这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。杂交瘤细胞再进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就能得到能产生特异性抗体的细胞群。选取检测抗体阳性的杂交瘤细胞进行体外培养时需要的气体环境是95%空气加5%CO2。 (3)由于原材料番茄、马铃薯两个物种之间的基因相互影响，导致某些基因无法正常表达，所以没有得到预想中的“地上结番茄，地下长马铃薯”；孟德尔的遗传规律发生在有性生殖过程中，培育该杂种植物的过程属于无性繁殖，遗传物质的传递不遵循孟德尔遗传规律。 28．两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图1所示。请回答下列问题： (1)过程①需要使用__________酶去除细胞壁。③要用到的方法有_____________________(物理法和化学法各举一例)。 (2)过程②紫外线的作用是________________________________________________。 (3)过程④培养基中需添加__________、无机盐、蔗糖等物质才能诱导愈伤组织形成，其中蔗糖的作用是_________________________________________________(至少答出一点)。 (4)以普通小麦、中间偃麦草及再生植株1～4的基因组DNA为模板扩增出差异性条带，可用于杂种植株的鉴定，结果如图2所示。据图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有____________，判断依据是____________________________________。 答案　(1)纤维素酶和果胶　离心法、电融合法、PEG融合法、高Ca2＋－高pH融合法　 (2)使中间偃麦草的染色体断裂　(3)植物激素　提供营养物质和调节渗透压　(4)1、2、4　它们同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段 29．人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请回答相关问题： (1)动物细胞培养时，可以用____________酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸、生长因子等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的__________，以满足动物细胞培养的营养需要。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是_________________________(至少回答两点)。 (2)为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用______________作为抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导剂是__________。为了获得杂交瘤细胞，应将甲放在__________培养基上进行培养。②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行______________检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得抗cTnI抗体产量高、纯度高的杂交瘤细胞丙。与传统方法生成的抗体相比，杂交瘤细胞丙产生的单克隆抗体最主要的优点是_____________________ 1_________________________________________。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与同一抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________________________________。 答案　(1)胰蛋白(或胶原蛋白)　动物血清　细胞密度过大、培养液中营养物质缺乏、有害代谢产物积累　(2)cTnI　聚乙二醇　特定的选择(或HAT)　抗体　能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备　(3)与待测抗原结合，酶催化底物水解 解析　(3)分析图中过程，两种抗体与检测的抗原均能结合，但结合部位是不同的，而酶标抗体可以与待测抗原结合，酶催化底物水解，所以通过检测其分解产物多少就可确定抗原的含量。 30.利用转基因母牛乳腺生物反应器可生产蛛丝蛋白，获得转基因母牛的过程如图所示。 请回答下列问题： (1)从雌牛的卵巢中采集的卵母细胞需要培养到________期才能进行体外受精，体外受精前，需要对精子进行获能处理。当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应，如________和________等。 (2)在过程①中，蛛丝蛋白基因应与________基因的启动子等调控组件重组在一起。在过程④前，需对囊胚的________进行切割并做DNA分析进行性别鉴定，再选用雌性胚胎进行移植。 (3)为了进一步扩大繁殖规模，可通过________技术获得同卵多胎，该技术的关键是______________________________________________________________。 (4)从生理学基础角度看，胚胎移植能成功的原因有________________________________________ (任意两点即可)。 答案　(1)减数分裂Ⅱ　透明带反应　卵细胞膜反应　(2)牛乳腺蛋白　滋养层　(3)胚胎分割　将内细胞团均等分割　(4)①哺乳动物发情排卵后，不管是否妊娠，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的；②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，为胚胎的收集提供了可能；③受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系 解析　(1)从雌牛的卵巢中采集的卵母细胞需要培育到减数分裂Ⅱ期才能进行体外受精，阻止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。(2)启动子可以驱动基因的转录，在过程①中，蛛丝蛋白基因应与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，使蛛丝蛋白基因只在乳腺组织中表达。滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，故对囊胚的滋养层进行切割并做DNA分析进行性别鉴定。 (3)通过胚胎分割技术获得同卵多胎，从而可以进一步扩大繁殖规模，用该技术对囊胚阶段的胚胎分割的关键是将内细胞团均等分割，以保证胚胎的正常生长和发育。(4)从生理学基础角度看，胚胎移植能成功的原因有①哺乳动物发情排卵后，不管是否妊娠，一段时间内同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的；②早期胚胎在一定时间内处于游离状态，为胚胎的收集提供了可能；③受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系。 1 / 21 学科网（北京）股份有限公司 $$