内容正文:
第1 节 植物细胞工程
第二章 细胞工程
Part 1 植物细胞工程的基本技术
三、植物体细胞杂交技术
马铃薯
番茄
利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么?
不能。因为两种生物之间存在着天然的生殖隔离
植物体细胞杂交技术
三、植物体细胞杂交技术
(一)概念
指将不同来源的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的技术
阻碍植物细胞融合的第一个结构是什么?
三、植物体细胞杂交技术
(二)基本流程
1、原生质体的制备
①去除细胞壁的原因: 。
②方法: 。
细胞壁阻碍着细胞间的杂交
酶解法
纤维素酶和果胶酶
使溶液具有一定的渗透压,防止原生质体吸水过多而涨破,保持原生质体正常
原生质体
细胞壁
细胞膜
细胞质
液泡
细胞核
纤维素酶和果胶酶的酶溶液中一般加入一定浓度的无机盐离子,试分析原因?
三、植物体细胞杂交技术
(二)基本流程
2、原生质体的融合
高Ca2+-高pH融合法
理论基础:
质壁分离和质壁分离复原实验
细胞融合完成的标志:融合的原生质体重新产生细胞壁,形成杂种细胞
细胞膜具有流动性
方法
物理方法
化学方法
电融合法
离心法
聚乙二醇(PEG)融合法
电融合法先将两种原生质体以适当的比例混合成悬浮液,滴入电融合小室中;然后给小室两极以交变电流,使原生质体沿电场方向排列成串珠状;接着给以瞬间高强度的电脉冲,使原生质体膜产生局部破损而导致融合
有什么实验可以验证融合的原生质体产生了细胞壁吗?
高Ca2+-高pH融合法是中和原生质体表面所带的电荷,使原生质体的质膜紧密接触,从而有利于质膜的融合
三、植物体细胞杂交技术
(二)基本流程
3、杂种细胞的筛选与培养
只考虑细胞两两融合,可能出现哪些结果?
A为2a=20
B为2b=30
50
4
染色体数目的变异
两亲本染色体数之和
两亲本染色体组数之和
杂种细胞染色体数为?
杂种细胞染色体组数为?
从杂种植株的染色体组成上看属于何种变异?
杂种植株可育吗?
可育,减数分裂时同源染色体能正常联会,形成正常配子
三、植物体细胞杂交技术
(二)基本流程
4、杂种植株的再生与鉴定
①
①
②
③
④
⑤
⑥
植物体细胞杂交技术成功的标志:
获得杂种植株
三、植物体细胞杂交技术
(三)优点
打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种
主要原因是∶生物体内基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的。所以"番茄—马铃薯"杂种植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达相互干扰,它们不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达,杂种植株自然就不能地上结番茄、地下长马铃薯了。
"番茄—马铃薯"杂种植株没有如科学家所想象的那样,地上结番茄,地下长马铃薯,这是为什么?
三、植物体细胞杂交技术
Part 2 植物细胞工程的应用
一、植物繁殖的新途径
(一)快速繁殖
(1)概念:
外植体
脱分化
愈伤组织
再分化
芽、根
试管苗
植株
移栽
(2)过程:
(3)优点:
① 高效、快速地实现种苗的大量繁殖
② 无性繁殖,保持优良品种的遗传特性
用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术,称为快速繁殖技术,也叫微型繁殖技术
一、植物繁殖的新途径
(二)作物脱毒
马铃薯
(1) 原因
草莓
香蕉
感染的病毒很容易传给后代
无性繁殖
病毒在作物体内积累
作物产量降低品质变差
(2)原理
植物顶端分生区附近的病毒极少,甚至无病毒
一、植物繁殖的新途径
(二)作物脱毒
马铃薯、草莓、大蒜、甘蔗、菠萝和香蕉等
茎尖
脱分化
愈伤组织
再分化
芽、根
试管苗
脱毒苗
移栽
(3)脱毒过程:
(4)优点:
提高农作物的产量和品质;获得高产优质的脱毒植株
(5)实例:
与快速繁殖相比,二者无本质区别,只是取材部位不同
二、作物新品种的培育
(一)单倍体育种
紫色非甜玉米(基因型为AABB )和白色甜玉米(基因型为aabb )杂交,如果运用常规育种方法,应该如何筛选出纯合的紫色甜玉米?
选择紫色非甜玉米与白色甜玉米作为亲本进行杂交得到F1 , F1自交得到F2 ,选择F2中的紫色甜玉米进行连续自交,直至子代玉米不出现性状分离
结合本节内容,有什么方法可以更快的获得纯和紫色甜玉米吗?
二、作物新品种的培育
(一)单倍体育种
(1)单倍体:
(2)单倍体育种过程
选择亲本
杂交
F1代
花药/花粉离体培养
单倍体植株
正常植物
染色体加倍
①秋水仙素处理
②低温处理
单倍体幼苗
由生殖细胞直接发育而来,无论体细胞中含有几个染色体组一律称为单倍体
抑制纺锤体的形成,导致染色体不能移向细胞两极,从而引起细胞内染色体数目加倍
大多数单倍体植株的细胞中只含一套染色体,染色体加倍后得到的植株的隐性性状容易显现
二、作物新品种的培育
(一)单倍体育种
(3)优点:
①极大地缩短育种年限,节约大量人力和无力;
②后代大都是纯合子,遗传性状相对稳定;
③可作为进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料
为什么?
二、作物新品种的培育
(一)单倍体育种
(4)实例:
我国科学家在1974年成功培育出世界上第一个单倍体作物新品种——单育1号烟草。
我国科学家把单倍体育种与常规育种结合起来,育成水稻、玉米、油菜、甘蓝和甜椒等作物的新品种。
二、作物新品种的培育
(二)突变体的利用
在植物组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断增殖的状态,因此它们容易受到培养条件和诱变因素(如射线、化学物质等)的影响而产生突变
(1)原理
(2)优点
提高变异的频率,加速育种进程;大幅度地改良某些性状
(3)缺点
由于突变的不定向和低频性,有利性状比较少,需要大量处理实验材料
二、作物新品种的培育
(二)突变体的利用
(4)实例
已筛选出抗病、抗盐、高产以及蛋白质含量高的突变体,
抗花叶病毒的甘蔗、抗盐碱的烟草等
白三叶草
抗除草剂的白三叶草
抗花叶病毒的甘蔗
抗盐碱的野生烟草
三、细胞产物的工厂化生产
1、植物代谢产物
生物生长生存所必需的代谢活动
初生代谢
次生代谢
初生代谢物是一类小分子有机化合物(如酚类、萜类和含氮化合物等)
初生代谢物如糖类、脂质、蛋白质、核酸等
不是生物生长所必需的代谢活动
整个生命过程中一直进行
一般在特定的组织或器官中,并在一定的环境和时间条件下才进行
在植物抗病、抗虫等方面发挥作用,也是很多药物、香料和色素等的重要来源
①含量低 ②破坏植物资源 ③难以通过化学合成途径得到
三、细胞产物的工厂化生产
2、植物细胞培养
利用植物细胞培养来获得目标产物,这个过程就是细胞产物的工厂化生产
在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术
人参→人参皂苷
紫草→紫草宁
红豆杉→紫杉醇
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