高二生物期中模拟卷（黑吉辽蒙专用，人教版2019选择性必修3）-学易金卷：2024-2025学年高中下学期期中模拟考试

2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 参考答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 B C B D B B C B C A 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 C A B C D ABD ABC AC BCD CD 三、非选择题：本题共5题，共55分。 21．（11分，除标记外每空1分） 【答案】(1)上升 (2) Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ （2分） Ⅱ、Ⅲ 尖孢镰刀菌 (3)③ (4) 菌株P 菌株S 菌株P和菌株S 实验组2和实验组3（2分） 22．（10分，除标记外每空1分） 【答案】(1) 消毒 无菌水 (2) 细胞壁 PEG 红、绿荧光色素 (3) 2 1×106个·mL-1 (4) 等量的蒸馏水 A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组（2分） 23．（9分，除标记外每空1分） 【答案】(1)T (2) 增殖、分化 浆细胞和记忆 (3) 核酸 抗新型冠状病毒抗体（2分） (4) 杂交瘤 多种B（2分） 24．（11分，除标记外每空1分） 【答案】(1) 促性腺激素 透明带反应、卵细胞膜反应 观察到两个极体或雌、雄原核 (2) 桑葚胚或囊胚 胚胎分割 囊胚的内细胞团均等分割（2分） (3)免疫排斥反应（2分） (4) 有性生殖 滋养层 25．（14分，除标记外每空1分） 【答案】(1)染色体DNA (2)5'-AGATCTATGTCT-3'          5'-GCTAGCCTAGGA-3' (3) 将提取的RNA反转录为cDNA 热稳定DNA聚合酶（TagDNA聚合酶或Taq酶）、四种脱氧核苷酸（dNTP）、Mg2＋（2分） (4)将等量、长势相同的转OsCYP02基因烟草和非转基因烟草分为甲、乙两组，用一定浓度NaC1溶液+完全营养液进行水培，在其他条件相同且适宜条件下培养一段时间，观察并记录两组烟草的生长状况（4分） (5) 位点（或位置、部位） ①OsCYP2基因插入的位置不合适会阻碍基因转录过程，导致基因表达水平低下：②OsCYP2基因发生甲基化等表观遗传修饰，影响OsCYP2基因的表达；③细胞内可能存在与OsCYP2基因转录产生的mRNA互补的小RNA分子，抑制mRNA的翻译过程，使基因表达水平低下；④温度、光照等环境因素可能参与调节植物的基因表达调控，影响OsCYP2基因表达（3分） 2 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版2019选必三 5．难度系数：0．7 6．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1．阳江黑豆豉是以优质黑豆为原料而制作出的发酵食品。黑豆中的蛋白质、脂肪等经毛霉、曲霉发酵分解到一定程度时，通过加盐、加酒、干燥等方法可制成豆豉。下列叙述错误的是（　　） A．毛霉、曲霉中的蛋白酶可将黑豆中的蛋白质分解为小分子多肽和氨基酸 B．制作阳江黑豆豉的过程中需要进行严格的消毒、灭菌处理 C．加盐、加酒、干燥可抑制蛋白酶的活性，防止发酵过度 D．分析发酵过程中微生物的种类、数量变化有助于改良黑豆豉的风味 2．吃腐烂水果可能会出现头晕、恶心、呕吐或更严重的症状，这可能与微生物代谢产生的毒素有关，某研究小组致力于研究健康饮食，设计实验探究腐烂苹果不同区域微生物的种类和数量以及烂果毒性，实验基本步骤如图所示。请据此判断以下说法正确的是（　　） A．根据本实验探究目的，步骤二采用的接种方法是平板划线法 B．步骤三在适宜环境下培养8小时即可统计出不同菌液中全部微生物的种类和数量值 C．若菌落的种类和数量均为①>②>③>④>⑤，则离腐烂部位越远的果肉中毒素含量越低 D．若编号为⑤的部位微生物的数量极少，则切掉①~④后的苹果就可以放心食用 3．柠檬酸具有令人愉悦的酸味，入口爽快，安全无毒，被广泛用于食品和饮料中。利用发酵工程技术制备柠檬酸的流程如图所示，下列相关叙述正确的是（    ）    A．柠檬酸属于次生代谢物，过程①②的目的均为扩大培养 B．发酵罐内的发酵是工厂化生产柠檬酸的中心环节 C．利用干热灭菌箱对培养基进行灭菌是发酵工程生产中一个很重要的环节 D．发酵结束后，采取适当的过滤、沉淀措施可获得柠檬酸 4．大丽花为菊科大丽花属，是多年生草本植物。大丽花为世界名花之一，除具观赏价值外，还具有药用价值。大丽花在栽培过程中易受病毒感染，造成品质退化。研究小组尝试通过植物组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．应选取大丽花植株无病毒的茎尖作为外植体，并用酒精溶液浸泡30min B．过程①为再分化，目的是使细胞失去原特有的结构和功能，该过程无需光照 C．过程②的实质是基因选择性表达，该过程只进行有丝分裂，不进行细胞分化 D．2号和3号培养基中细胞分裂素与生长素用量的比值分别为等于1和大于1 5．研究者欲利用原生质体融合技术，实现三白草和鱼腥草有效成分的工厂化生产。下列叙述正确的是（　　）    A．过程①常使用纤维素酶和果胶酶，应在无菌水中进行，以防止杂菌污染 B．过程②可使用聚乙二醇以诱导三白草原生质体和鱼腥草原生质体的融合 C．过程③经过脱分化、再分化形成的愈伤组织是呈不定形的薄壁组织团块 D．过程④需要调节培养基中生长素和细胞分裂素的比例，诱导生芽和生根 6．“白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。草莓是无性繁殖的植物，感染病毒后容易传染给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的过程。下列叙述正确的是（    ） A．获得外植体时需要用纤维素酶和果胶酶处理草莓植株 B．选用茎尖做外植体是因为其含病毒极少甚至不含病毒 C．培育无病毒草莓苗时不用控制培养基中植物激素的比例 D．常需要用95%的酒精对愈伤组织消毒后再诱导其再分化 7．肝细胞中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因突变会导致酪氨酸血症。下图是研究人员利用基因编辑技术纠正病人来源肝细胞，成功治疗酪氨酸血症小鼠的过程，为治疗人类酪氨酸血症奠定理论基础。相关叙述准确的是（　　） A．酪氨酸血症的发生说明基因能通过控制蛋白质的结构控制生物性状 B．过程②需在培养液中添加琼脂、葡萄糖、干扰素动物血清等物质 C．过程③需敲入正常的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因，并敲除相关抗原基因 D．基因编辑后的人源肝细胞植入小鼠分化为完整肝脏，是治疗小鼠酪氨酸血症的关键 8．抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团，是抗原与T细胞或B细胞表面的抗原识别受体及抗体特异性结合的基本结构单位。下图为单克隆抗体的制备过程，下列叙述错误的是（　　）    A．可用灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合 B．经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞能够产生的抗体共3种 C．克隆化培养和抗体检测后的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体 D．由图可知，利用一种抗原经杂交瘤技术可以获得多种单克隆抗体 9．培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述正确的是（    ）    A．用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B．生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的O2，保证培养液pH相对稳定 C．培养液中的支架提供了更大的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D．人造牛肉的培养有利于牛肉的工厂化生产，培养液不需要更换 10．基因组印记是指由亲本来源不同而导致等位基因表达存在差异的一种遗传现象。基因组印记阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队首先改变小鼠卵母细胞的“基因组印记”，然后将一个第二极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠，实验过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（　　）    A．哺乳动物孤雌生殖不能实现是因为基因组印记阻碍了次级卵母细胞与第二极体结合 B．基因的甲基化可能会抑制转录过程，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达 C．“孤雌小鼠”的基因型与提供卵母细胞的雌鼠不一定相同 D．移植后的囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来 11．一位患有单基因显性遗传病的妇女（其父亲与丈夫表现型正常）想生育一个健康的孩手。医生建议对极体进行基因分析，筛选出不含该致病基因的卵细胞，采用试管婴儿技术辅助生育后代，技术流程示意图如下。 下列叙述错误的是（    ） A．无法判断该致病基因位于X染色体止 B．可选择极体1或极体2用于基因分析 C．自然生育患该病子女的概率是25%或50% D．在获能溶液中精子入卵的时期是② 12．下表是几种限制酶的识别序列及切割位点（Y=C或T，R=A或G）。下列相关叙述正确的是（　　） 限制酶 HindⅡ AluⅠ BamHⅠ Sau3AⅠ 识别序列及切割位点       5'-GTY↓RAC-3'     5'-AG↓CT-3'     5'-G↓GATCC-3'   5'-↓GATC-3' A．限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，增加2个游离的磷酸基团 B．一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，并在特定位点切割 C．AluⅠ切割后的DNA片段只可用E.coliDNA连接酶连接 D．BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段进行重组后，BamHⅠ和Sau3AⅠ均不能识别并切割 13．将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞，培育抗虫杨树。如图表示利用含目的基因的DNA分子和Ti质粒构建基因表达载体的过程，图中表示氨苄青霉素抗性基因，表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表所示。下列叙述正确的是（    ） A．利用PCR扩增目的基因时，应该选择引物2和引物3并在引物3'端添加相应酶切位点 B．为使目的基因与质粒高效重组，选用KpnⅠ和HindⅢ比选用KpnⅠ和SmaⅠ效果更好 C．为将表达载体导入农杆菌，可以使用离心法或PEG融合法处理受体细胞 D．成功导入目的基因的杨树细胞既具有氨苄青霉素抗性，又有新霉素抗性 14．部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV），OMV能穿越肠道上皮屏障，活化肠黏膜内的免疫细胞。研究人员通过构建ClyA-Ag-mFc融合蛋白基因表达载体（见图），转化大肠杆菌来制备工程菌。下列相关叙述错误的是（    ） A．ClyA表达产物可以将融合蛋白定位到OMV表面 B．Ag表达产物可以激活机体的特异性免疫反应 C．mFc表达产物可以提高T细胞摄取OMV的能力。 D．利用该大肠杆菌可制备预防肿瘤的口服疫苗 15．生物技术是把双刃剑，造福人类的同时也带来了安全性和伦理问题，人们必须高度重视。下列叙述错误的是（    ） A．利用核移植技术获得胚胎，从中分离出ES细胞治疗白血病涉及伦理问题 B．若有国家把研制出的新型鼠痘病毒作为生物武器，将会威胁人类安全 C．研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播 D．干细胞的研究具有广阔的应用前景，应大力支持和发展，不需要监管 2、 多选题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作流程，下列说法错误的是（    ）    A．实验中选择培养基含有无机盐、葡萄糖、尿素、蛋白胨、琼脂、水等物质 B．培养基用高压蒸汽灭菌后，将pH调至中性或弱碱性 C．平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为2.2×108个 D．为判断培养基的选择作用，需设置未接种的培养基作对照 17．豆科植物苦参产生的苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法错误的是（　　） A．下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理 B．过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化 C．过程③所得苦参幼苗具有抗病毒的遗传特性 D．通过植物细胞培养获得苦参碱的过程不需要实现细胞的全能性 18．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述正确的是（　　）    A．实验前必须给小鼠甲注射病毒A是为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞 B．将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞 C．筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交痛瘤胞 D．筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 19．下图为全球首例非人灵长类克隆动物的培育过程，为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理了它。下列说法中错误的是（　　）    A．非人灵长类克隆动物成功率低的原因之一为供体细胞的细胞核难以完全恢复分化前的功能状态 B．应将采集到的卵母细胞培养到MII期再通过显微操作去除其核膜包被的细胞核 C．图中对于重构胚的处理使其中某些基因的甲基化程度和组蛋白的乙酰化程度增加，有利于重构胚的正常发育 D．在胚胎移植前，需要对代孕母猴注射糖皮质激素等免疫抑制剂，防止免疫排斥的发生 20．为研究病原微生物对启动子pL活性的影响，研究人员从图a所示结构中获取pL，将其与相同限制酶处理的Ti质粒（图b）连接，再导入烟草。随机选取3组转基因成功的烟草（P1、P2和P3）进行病原微生物接种，检测GUS酶（gus基因编码）活性，该活性可反映pL活性，结果如图c。下列说法中正确的是（　　）      A．可选用限制酶XbaI、BamHI来获取pL B．pL是RNA聚合酶的结合位点，也是转录起始位点 C．可将新鲜的烟草叶片与含重组质粒的农杆菌共培养达到转化目的 D．三种病原微生物都能诱导增强pL的活性，其中交链格孢的诱导作用最强 第Ⅱ卷 三、非选择题：本题共5题，共55分。 21．香蕉枯萎病的微生物防治：香蕉枯萎病对香蕉种植业极具破坏性，由土壤中的尖孢镰刀菌感染香蕉植株所导致。现有菌株S可抑制尖孢镰刀菌，某研究小组拟利用微生物协同作用，优化枯萎病生物防治方案，部分过程如下： (1)【阶段一】将菌株S施于香蕉种植园的土壤中，并分析土壤微生物数量变化情况。若要筛选出土壤中与菌株S有协同作用的有益菌，应选择施加菌株S后数量变化趋势是 （下降/上升/不变）的有益菌。 (2)【阶段二】筛选与菌株S有协同作用的有益菌。过程如图，其接菌液并培养后如表。 菌落编号 ① ② ③ ④ 清晰区直径（cm） 0.8 0.5 1.2 0 Ⅰ~Ⅳ环节中，需无菌操作的是 ；在第 环节分离土壤中的各种菌；环节Ⅳ中需先涂布的菌株X是 。 (3)为达到阶段二的目的，据表应优先选择的是菌落 。 【阶段三】利用筛选到的有益菌P，分析菌株之间的相互关系，形成表中所列方案。 培养基 预先涂布菌株 点接菌液 实验组1 实验组2 实验组3 固体培养基 菌株X ？ ？ ？ (4)各实验组上接的菌液中应含有的菌株分别是：实验组1 ，实验组2 ，实验组3 ，其中能说明菌株P对菌株S的作用的实验组是 。 22．中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 (1)取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其 （填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用 （填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 (2)过程①通过酶解法去除 获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂 诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带 的杂种原生质体。 (3)科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由图2可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在 种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为 。 (4)通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组的实验处理补充完整 。 ②若实验结果为 ，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 23．新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合,侵入人体,引起肺炎。图1为病毒侵入后,人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵,故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题。    (1)图1中人体内抗原呈递细胞吞噬病毒,并将病毒的抗原暴露在细胞表面,被 细胞表面的受体识别后激活该细胞。 (2)B细胞识别入侵的病毒后,在淋巴因子作用下,经过细胞的 ,形成 细胞。 (3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者,采集鼻咽拭子主要用于病原学检查,检测病毒的 ;采集血液样本主要用于血清学检查,检测 。 (4)据图2所示,研制抗S蛋白单克隆抗体,需先注射刺突蛋白(或S蛋白)免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞,再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合,用HAT培养基筛选获得 细胞。因为同一种抗原可能激活 细胞,还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。 24．骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆驼曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题：    (1)胚胎工程中一般注射 处理A使其超数排卵。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有 ，受精的标志是 。 (2)过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至 阶段进行胚胎移植，欲获得更多的胚胎可以对囊胚进行 操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将 。 (3)胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为受体对外来胚胎基本上不发生 。 (4)与F相比，E更具有多样性，其原因是E的生殖方式为 ，其亲代在进行减数分裂过程中会发生基因重组。若要胚胎移植前对E进行性别鉴定应选 细胞，避免对胚胎造成影响。 25．OsCYP2基因已被证实为水稻耐盐碱关键基因。科研人员通过克隆OsCYP2基因，构建OsCYP2基因表达载体，并将其转化到烟草中，探讨OsCYP2基因对烟草耐盐碱能力大小的影响。回答下列问题： (1)构建OsCYP2基因表达载体时所用Ti质粒结构如图甲所示，在构建重组质粒时要将OsCYP2基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，当农杆菌侵染烟草细胞时，OsCYP2基因能随T-DNA整合到烟草细胞的 上。    注：Bar基因为抗草甘膦（一种除草剂）基因 (2)OsCYP2基因两端碱基序列如图乙所示，为了让OsCYP2基因和Ti质粒正确连接，利用PCR技术扩增OsCYP2基因时需要设计一对引物，这对引物的序列分别为 。（从引物5′端开始书写，只写前12个碱基即可）    (3)科研人员将OsCYP2基因导人烟草细胞（烟草细胞无该基因），然后利用植物组织培养技术将含目的基因的受体细胞培养为转基因植株，利用反转录PCR技术等检测OsCYP2基因是否转录，其大致步骤为：提取转基因植株的RNA→ →利用PCR技术进行扩增→对扩增产物进行电泳分析。在构建PCR反应体系时需加入的物质有模板DNA、引物、缓冲液、 等（答出两种）。 (4)科研人员选择上述扩增产物出现特异性扩增条带（呈阳性）的转基因植株，在个体生物学水平检测“转OsCYP2基因烟草的耐盐碱性是否明显提高”，请写出实验的大致思路 。 (5)科研人员在研究转OsCYP2基因烟草的遗传稳定性时，发现有少部分阳性植株的遗传不符合孟德尔遗传规律，这可能是因为基因插入的 和数目是随机的，导致目的基因在转基因植株中的遗传变得复杂。此外，科研人员还发现OsCYP2基因在部分阳性植株中的表达水平低下，这影响了转基因植株从实验室走向农业生产应用，请分析可能的原因有 （答出一点即可）。 1 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版2019选必三 5．难度系数：0．7 6．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1．阳江黑豆豉是以优质黑豆为原料而制作出的发酵食品。黑豆中的蛋白质、脂肪等经毛霉、曲霉发酵分解到一定程度时，通过加盐、加酒、干燥等方法可制成豆豉。下列叙述错误的是（　　） A．毛霉、曲霉中的蛋白酶可将黑豆中的蛋白质分解为小分子多肽和氨基酸 B．制作阳江黑豆豉的过程中需要进行严格的消毒、灭菌处理 C．加盐、加酒、干燥可抑制蛋白酶的活性，防止发酵过度 D．分析发酵过程中微生物的种类、数量变化有助于改良黑豆豉的风味 【答案】B 【分析】腐乳的制作原理：腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。 【详解】A、毛霉、曲霉中等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，因此腐乳易于吸收，A正确； B、传统黑豆豉的制作原理是利用原料中带有的微生物进行发酵，故该过程中不需要进行严格的无菌操作，B错误； C、发酵过程离不开多种蛋白质（蛋白酶、脂肪酶等）的参与，加盐、加酒、干燥可抑制蛋白酶的活性，防止发酵过度，C正确； D、黑豆豉的制作过程需要多种微生物共同参与，对发酵过程中微生物的种类、数量进行分析有助于改良其风味，D正确。 故选B。 2．吃腐烂水果可能会出现头晕、恶心、呕吐或更严重的症状，这可能与微生物代谢产生的毒素有关，某研究小组致力于研究健康饮食，设计实验探究腐烂苹果不同区域微生物的种类和数量以及烂果毒性，实验基本步骤如图所示。请据此判断以下说法正确的是（　　） A．根据本实验探究目的，步骤二采用的接种方法是平板划线法 B．步骤三在适宜环境下培养8小时即可统计出不同菌液中全部微生物的种类和数量值 C．若菌落的种类和数量均为①>②>③>④>⑤，则离腐烂部位越远的果肉中毒素含量越低 D．若编号为⑤的部位微生物的数量极少，则切掉①~④后的苹果就可以放心食用 【答案】C 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、本实验目的是探究腐烂苹果不同区域微生物的种类和数量以及烂果毒性，要对微生物进行计数，应采用稀释涂布平板法，而平板划线法不能用于计数，A错误； B、不同微生物生长繁殖速度不同，培养8小时不一定能让所有微生物都形成肉眼可见的菌落，也就不能统计出全部微生物的种类和数量，B错误； C、若菌落的种类和数量均为①>②>③>④>⑤，说明离腐烂部位越远，微生物的种类和数量越少。因为微生物代谢产生毒素，所以离腐烂部位越远的果肉中毒素含量越低，C正确； D、即使编号为⑤的部位微生物数量极少，但不能排除该部位以及① - ④部位可能存在少量微生物产生的毒素，所以不能放心食用，D错误。 故选C。 3．柠檬酸具有令人愉悦的酸味，入口爽快，安全无毒，被广泛用于食品和饮料中。利用发酵工程技术制备柠檬酸的流程如图所示，下列相关叙述正确的是（    ）    A．柠檬酸属于次生代谢物，过程①②的目的均为扩大培养 B．发酵罐内的发酵是工厂化生产柠檬酸的中心环节 C．利用干热灭菌箱对培养基进行灭菌是发酵工程生产中一个很重要的环节 D．发酵结束后，采取适当的过滤、沉淀措施可获得柠檬酸 【答案】B 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。具体包括：菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等环节。 【详解】A、柠檬酸是微生物的初级代谢产物，不是次生代谢物，过程①是菌种的活化，过程②是扩大培养，A错误； B、发酵罐内的发酵是工厂化生产柠檬酸的中心环节，在发酵罐中微生物进行代谢产生柠檬酸，B正确； C、对培养基进行灭菌通常采用高压蒸汽灭菌法，而不是干热灭菌箱灭菌，干热灭菌箱常用于玻璃器皿等的灭菌，C错误； D、发酵结束后，需要通过过滤、离心等方法除去菌体等杂质，然后通过萃取、蒸馏、离子交换等方法对柠檬酸进行分离和纯化才能获得柠檬酸，仅过滤、沉淀措施不能获得柠檬酸，D错误。 故选B。 4．大丽花为菊科大丽花属，是多年生草本植物。大丽花为世界名花之一，除具观赏价值外，还具有药用价值。大丽花在栽培过程中易受病毒感染，造成品质退化。研究小组尝试通过植物组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．应选取大丽花植株无病毒的茎尖作为外植体，并用酒精溶液浸泡30min B．过程①为再分化，目的是使细胞失去原特有的结构和功能，该过程无需光照 C．过程②的实质是基因选择性表达，该过程只进行有丝分裂，不进行细胞分化 D．2号和3号培养基中细胞分裂素与生长素用量的比值分别为等于1和大于1 【答案】D 【分析】图示分析，①为外植体脱分化形成愈伤组织过程，②为愈伤组织经过再分化形成丛壮苗的过程，③为丛壮苗在生根培养基中形成试管苗过程。 【详解】A、茎尖病毒很少或几乎不含病毒，作为外植体培养脱毒苗，外植体需要在酒精中浸泡30s，A错误； B、过程①为外植体经过脱分化过程形成愈伤组织，目的是使细胞失去原特有的结构和功能，该过程不需要光照，B错误； C、过程②为再分化过程，实质是基因选择性表达，该过程既进行有丝分裂，也进行细胞分化，C错误； D、脱分化过程所用的培养基细胞分裂素与生长素用量的比值等于1，发芽培养基中细胞分裂素与生长素用量的比值大于1，D正确。 故选D。 5．研究者欲利用原生质体融合技术，实现三白草和鱼腥草有效成分的工厂化生产。下列叙述正确的是（　　）    A．过程①常使用纤维素酶和果胶酶，应在无菌水中进行，以防止杂菌污染 B．过程②可使用聚乙二醇以诱导三白草原生质体和鱼腥草原生质体的融合 C．过程③经过脱分化、再分化形成的愈伤组织是呈不定形的薄壁组织团块 D．过程④需要调节培养基中生长素和细胞分裂素的比例，诱导生芽和生根 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离， 实现远缘杂交育种培育植物新品种等方面展示出独特的优势。 【详解】A、用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁的过程应在等渗溶液中进行，以免细胞渗透吸水或失水过多，A错误； B、诱导植物原生质体融合可使用聚乙二醇，B正确； C、过程③经过脱分化即可形成愈伤组织，不存在再分化，C错误； D、过程④是提取代谢产物，并未培育成完整植株，不需要诱导生芽和生根，D错误。 故选B。 6．“白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。草莓是无性繁殖的植物，感染病毒后容易传染给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的过程。下列叙述正确的是（    ） A．获得外植体时需要用纤维素酶和果胶酶处理草莓植株 B．选用茎尖做外植体是因为其含病毒极少甚至不含病毒 C．培育无病毒草莓苗时不用控制培养基中植物激素的比例 D．常需要用95%的酒精对愈伤组织消毒后再诱导其再分化 【答案】B 【分析】植物细胞工程的基本技术有植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术等。植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等培养在培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，进而培育成新植物体的技术。利用植物细胞工程，可以快速繁殖优良品种、培育作物新品种、进行作物脱毒和细胞产物的工厂化生产等，有效提高生产效率。 【详解】A、在植物组织培养中，获得外植体通常是通过无菌操作直接从植物体上切取一小部分组织，如茎尖、叶片等，而不需使用纤维素酶和果胶酶处理，A错误； B、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒。因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，B正确； C、植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。因此，培育无病毒草莓苗时也要控制培养基中植物激素的比例，C错误； D、消毒用的酒精浓度是70%，且是对外植体进行消毒处理，D错误。 故选B。 7．肝细胞中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因突变会导致酪氨酸血症。下图是研究人员利用基因编辑技术纠正病人来源肝细胞，成功治疗酪氨酸血症小鼠的过程，为治疗人类酪氨酸血症奠定理论基础。相关叙述准确的是（　　） A．酪氨酸血症的发生说明基因能通过控制蛋白质的结构控制生物性状 B．过程②需在培养液中添加琼脂、葡萄糖、干扰素动物血清等物质 C．过程③需敲入正常的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因，并敲除相关抗原基因 D．基因编辑后的人源肝细胞植入小鼠分化为完整肝脏，是治疗小鼠酪氨酸血症的关键 【答案】C 【分析】在进行细胞培养时，首先要对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，将组织分散成单个细胞。然后，用培养液将细胞制成细胞悬液，再将细胞悬液放 入培养瓶或培养皿内，置于适宜环境中培养。 【详解】A、酪氨酸血症是由于肝细胞中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因突变，导致酶不能正常合成，进而影响代谢过程，这说明基因能通过控制酶的合成来控制代谢，进而控制生物性状，而不是控制蛋白质的结构，A错误； B、动物细胞培养过程中，培养液中需要添加葡萄糖、动物血清等物质，但不需要添加琼脂，琼脂是用于植物组织培养的凝固剂，B错误； C、过程③基因编辑是为了纠正病人来源肝细胞，所以需要敲入正常的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因，同时敲除相关抗原基因，以避免免疫排斥反应，C正确； D、基因编辑后的人源肝细胞植入小鼠后，是通过肝细胞发挥正常功能来治疗小鼠酪氨酸血症，而不是分化为完整肝脏，D错误。 故选C。 8．抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团，是抗原与T细胞或B细胞表面的抗原识别受体及抗体特异性结合的基本结构单位。下图为单克隆抗体的制备过程，下列叙述错误的是（　　）    A．可用灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合 B．经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞能够产生的抗体共3种 C．克隆化培养和抗体检测后的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体 D．由图可知，利用一种抗原经杂交瘤技术可以获得多种单克隆抗体 【答案】B 【分析】单克隆抗体的制备: （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。 （2）获得杂交瘤细胞①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 （3）克隆化培养和抗体检测。 （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、在单克隆抗体制备过程中，灭活的病毒（如仙台病毒）是常用的细胞融合诱导剂，用于促进骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合，A正确； B、经选择培养基筛选后，由于B细胞有多种，杂交瘤细胞能够产生的抗体有多种，B错误； C、克隆化培养和抗体检测的目的是筛选出单一克隆的杂交瘤细胞，每个克隆只能产生一种特异性抗体，C正确； D、利用一种抗原，可以通过杂交瘤技术获得针对该抗原不同表位的多种单克隆抗体，D正确。 故选B。 9．培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述正确的是（    ）    A．用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B．生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的O2，保证培养液pH相对稳定 C．培养液中的支架提供了更大的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D．人造牛肉的培养有利于牛肉的工厂化生产，培养液不需要更换 【答案】C 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液，转入培养液中(原代培养)放入二氧化碳培养箱培养，贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液转入培养液(传代培养)，放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞，胃蛋白酶的最适pH为2.0左右，而动物细胞培养的pH为7.2~7.4，此时胃蛋白酶失活，故不能用胃蛋白酶处理，A错误； B、生物反应器内应控制温度适宜（36.5±0.5℃），并充入一定量的CO2，以保证培养液pH相对稳定，B错误； C、培养液中的支架为细胞提供了更大的附着面积，有利于细胞贴壁生长，C正确； D、理论上，仅来自一只动物的干细胞，可制成的肉品数量非常多，有利于牛肉的工厂化生产，培养液需要定期更换，D错误。 故选C。 10．基因组印记是指由亲本来源不同而导致等位基因表达存在差异的一种遗传现象。基因组印记阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队首先改变小鼠卵母细胞的“基因组印记”，然后将一个第二极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠，实验过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（　　）    A．哺乳动物孤雌生殖不能实现是因为基因组印记阻碍了次级卵母细胞与第二极体结合 B．基因的甲基化可能会抑制转录过程，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达 C．“孤雌小鼠”的基因型与提供卵母细胞的雌鼠不一定相同 D．移植后的囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来 【答案】A 【分析】从卵泡中取出卵母细胞，再将经过甲基化处理的卵母细胞进行早期胚胎培养、胚胎移植等获得孤雌小鼠。 【详解】A、由题意和题图可知：基因组印记是通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达，从而阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现，而不是基因组印记阻碍了次级卵母细胞与第二极体结合，A错误； B、基因组印记是通过甲基化使一个基因不表达，基因的甲基化可能会抑制转录过程，因此对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达，B正确； C、“孤雌小鼠”是由两个细胞（修饰后的次级卵细胞和第二极体）结合后发育形成，由于在形成次级卵细胞的减数第一次分裂过程中会经历基因重组，将导致发育成的“孤雌小鼠”的基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同，C正确； D、囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化，D正确。 故选A。 11．一位患有单基因显性遗传病的妇女（其父亲与丈夫表现型正常）想生育一个健康的孩手。医生建议对极体进行基因分析，筛选出不含该致病基因的卵细胞，采用试管婴儿技术辅助生育后代，技术流程示意图如下。 下列叙述错误的是（    ） A．无法判断该致病基因位于X染色体止 B．可选择极体1或极体2用于基因分析 C．自然生育患该病子女的概率是25%或50% D．在获能溶液中精子入卵的时期是② 【答案】C 【分析】1、一位患有单基因显性遗传病的妇女，进行基因分析可筛选出不含该致病基因的卵细胞，说明该患病妇女为杂合子。 2、一个卵原细胞减数分裂产生三个第二极体和一个卵细胞，极体最终退化消失。 3、通常说的“卵子”指次级卵母细胞，精卵结合指的是成熟的精子与次级卵母细胞识别，在入卵的同时，次级卵母细胞完成减数第二次分裂产生卵细胞，最后完成精核与卵核的融合。 【详解】A、由题意可知，患病妇女为杂合子，该显性致病基因可以常染色体上，也可以位于X染色体上，A正确； B、卵原细胞减数第一次分裂中同源染色体分离，其上基因也随之分离，最终产生一个次级卵母细胞和一个第一极体，二者基因互补，次级卵母细胞减数第二次分裂着丝粒分裂，姐妹染色单体分离，其上基因也随之分离，最终产生一个卵细胞和一个第二极体，二者基因相同，且卵细胞可用于受精，而极体最后退化消失，因此可选择极体1或极体2用于基因分析，B正确； C、若显性致病基因用A表示，位于常染色体，则患病妇女基因型为Aa，丈夫正常，基因型为aa，自然生育患该病子女（Aa）的概率是1/2，若显性致病基因位于X染色体上，则患病妇女基因型为XAXa，丈夫的基因型为XaY，自然生育患该病子女（XAXa，XAY）的概率是1/4+1/4=1/2，C错误； D、在获能溶液中精子入卵（次级卵母细胞）的时期是②，D正确。 故选C。 12．下表是几种限制酶的识别序列及切割位点（Y=C或T，R=A或G）。下列相关叙述正确的是（　　） 限制酶 HindⅡ AluⅠ BamHⅠ Sau3AⅠ 识别序列及切割位点       5'-GTY↓RAC-3'     5'-AG↓CT-3'     5'-G↓GATCC-3'   5'-↓GATC-3' A．限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，增加2个游离的磷酸基团 B．一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，并在特定位点切割 C．AluⅠ切割后的DNA片段只可用E.coliDNA连接酶连接 D．BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段进行重组后，BamHⅠ和Sau3AⅠ均不能识别并切割 【答案】A 【分析】限制酶的特点：识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点进行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。 【详解】A、限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，形成2个新的游离的磷酸基团，A正确； B、一种限制酶不一定只识别一种核苷酸序列，如HindⅡ，B错误； C、用AluⅠ切割得到的是平末端，可用T4DNA连接酶连接起来，C错误； D、BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段进行重组后，BamHⅠ不能识别并切割重组片段，而Sau3AⅠ可识别并切割重组片段，D错误。 故选A。 13．将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞，培育抗虫杨树。如图表示利用含目的基因的DNA分子和Ti质粒构建基因表达载体的过程，图中表示氨苄青霉素抗性基因，表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表所示。下列叙述正确的是（    ） A．利用PCR扩增目的基因时，应该选择引物2和引物3并在引物3'端添加相应酶切位点 B．为使目的基因与质粒高效重组，选用KpnⅠ和HindⅢ比选用KpnⅠ和SmaⅠ效果更好 C．为将表达载体导入农杆菌，可以使用离心法或PEG融合法处理受体细胞 D．成功导入目的基因的杨树细胞既具有氨苄青霉素抗性，又有新霉素抗性 【答案】B 【分析】基因工程包括四个基本程序：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细 胞、目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、DNA聚合酶只能从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，利用PCR扩增目的基因时，应该选择引物2和引物3，但应该在引物5'端添加相应酶切位点，A错误； B、为使目的基因与质粒高效重组，选用KpnⅠ和HindⅢ比选用KpnⅠ和SmaⅠ效果更好，因为SmaI切割DNA后形成平末端，T4DNA连接酶连接平末端的效率相对较低，B正确； C、为将表达载体导入农杆菌，可以使用Ca2+处理受体细胞，使其处于能吸收周围环境中DNA分子的状态，然后再将重组质粒导入其中；而离心法或PEG融合法是诱导植物细胞融合的方法，C错误； D、只有T-DNA区段会导入植物受体细胞，因此氨苄青霉素抗性基因不会导入植物受体细胞中，即成功导入目的基因的杨树细胞只能表现出新霉素抗性，D错误。 故选B。 14．部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV），OMV能穿越肠道上皮屏障，活化肠黏膜内的免疫细胞。研究人员通过构建ClyA-Ag-mFc融合蛋白基因表达载体（见图），转化大肠杆菌来制备工程菌。下列相关叙述错误的是（    ） A．ClyA表达产物可以将融合蛋白定位到OMV表面 B．Ag表达产物可以激活机体的特异性免疫反应 C．mFc表达产物可以提高T细胞摄取OMV的能力。 D．利用该大肠杆菌可制备预防肿瘤的口服疫苗 【答案】C 【分析】疫苗是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。 【详解】A、分析题意可知，ClyA是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白，而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A(ClyA)，使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别，A正确； B、Ag是肿瘤细胞表面特异性抗原基因，Ag表达产物可以激活机体的特异性免疫反应，B正确； C、mFc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞（而非T细胞）识别、摄取和传递抗原信息的能力，C错误； D、利用该大肠杆菌可制备预防肿瘤的口服疫苗，属于基因工程在免疫方面的应用，D正确。 故选C。 15．生物技术是把双刃剑，造福人类的同时也带来了安全性和伦理问题，人们必须高度重视。下列叙述错误的是（    ） A．利用核移植技术获得胚胎，从中分离出ES细胞治疗白血病涉及伦理问题 B．若有国家把研制出的新型鼠痘病毒作为生物武器，将会威胁人类安全 C．研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播 D．干细胞的研究具有广阔的应用前景，应大力支持和发展，不需要监管 【答案】D 【分析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。 2、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。 【详解】A、从人胚胎分离出ES细胞治疗白血病，会涉及胚胎的处理问题，进而产生伦理问题，A正确； B、研制出的新型鼠痘病毒，若作为生物武器，杀伤力强、传播广泛、难预防，会威胁人类安全，B正确； C、研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，以防止基因污染的发生，C正确； D、干细胞的研究可治疗很多疾病，但也可能会向着克隆人的方向发展，带来伦理问题，因此需要严格监管，D错误。 故选D。 2、 多选题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作流程，下列说法错误的是（    ）    A．实验中选择培养基含有无机盐、葡萄糖、尿素、蛋白胨、琼脂、水等物质 B．培养基用高压蒸汽灭菌后，将pH调至中性或弱碱性 C．平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为2.2×108个 D．为判断培养基的选择作用，需设置未接种的培养基作对照 【答案】ABD 【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。 【详解】 A、培养基的营养成分应该包括碳源、氮源、水和无机盐等，实验目的是分离尿素分解菌，应该以尿素为唯一氮源，不应该含有其他氮源，A错误； B、将培养基的pH调至中性或弱碱性后，再高压蒸汽灭菌，B错误； C、将10g土壤先稀释10倍，再进行梯度稀释10000倍，然后取0.1mL进行涂布平板，若步骤④平板上统计的菌落数平均为（212+230+218）÷3=220个，则每克土壤含分解尿素的细菌数约220÷0.1×10×10000=2.2×108个，C正确； D、为判断培养基的选择作用，需设置接种的完全培养基作对照，菌落数明显小于完全培养基上的菌落数，说明选择培养基起到了选择作用，D错误。 故选ABD。 17．豆科植物苦参产生的苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法错误的是（　　） A．下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理 B．过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化 C．过程③所得苦参幼苗具有抗病毒的遗传特性 D．通过植物细胞培养获得苦参碱的过程不需要实现细胞的全能性 【答案】ABC 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖、作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、下胚轴切段需用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液进行消毒处理，A错误； B、过程②是愈伤组织的扩大培养，不是再分化过程，B错误； C、由无毒下胚轴经组织培养获得的苦参幼苗只是病毒极少甚至不带病毒，是脱毒苗，但不能抗病毒，C错误； D、由工厂化细胞培养提取苦参碱的过程不需要完整的植株，只需要进行在苦参细胞提取就可以了，因此不需要实现细胞的全能性，D正确。 故选ABC。 18．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述正确的是（　　）    A．实验前必须给小鼠甲注射病毒A是为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞 B．将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞 C．筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交痛瘤胞 D．筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 【答案】AC 【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾脏内获得相应的B淋巴细胞；（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；（3）克隆化培养和抗体检测；（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 2、单克隆抗体的应用：①作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物。 【详解】A、该实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞，A正确； B、将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胰蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，B错误； C、为了得到能产生抗病毒A单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。第一次筛选用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长，C正确； D、第二次筛选用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群，该过程用到抗原抗体杂交，获取的杂交瘤细胞通过培养获得大量的分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选AC。 19．下图为全球首例非人灵长类克隆动物的培育过程，为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理了它。下列说法中错误的是（　　）    A．非人灵长类克隆动物成功率低的原因之一为供体细胞的细胞核难以完全恢复分化前的功能状态 B．应将采集到的卵母细胞培养到MII期再通过显微操作去除其核膜包被的细胞核 C．图中对于重构胚的处理使其中某些基因的甲基化程度和组蛋白的乙酰化程度增加，有利于重构胚的正常发育 D．在胚胎移植前，需要对代孕母猴注射糖皮质激素等免疫抑制剂，防止免疫排斥的发生 【答案】BCD 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难，主要原因一方面是供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态，这导致了胚胎发育率低；另一方面是对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善，A正确； B、将卵母细胞培养到MII期后进行去核操作，此时细胞核退化，出现的是纺锤体-染色体复合物，故去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物，B错误； C、结合题意和图示操作可知，将组蛋白去甲基化和增加乙酰化，有利于重构胚的分裂和发育，使其完成细胞分裂和发育进程，C错误； D、代孕母猴在胚胎移植前应进行同期发情处理以使其与供体处于相同的生理状态，但由于受体对外来胚胎几乎不发生免疫排斥，因此不需要对代孕母猴注射免疫抑制剂，D错误。 故选BCD。 20．为研究病原微生物对启动子pL活性的影响，研究人员从图a所示结构中获取pL，将其与相同限制酶处理的Ti质粒（图b）连接，再导入烟草。随机选取3组转基因成功的烟草（P1、P2和P3）进行病原微生物接种，检测GUS酶（gus基因编码）活性，该活性可反映pL活性，结果如图c。下列说法中正确的是（　　）      A．可选用限制酶XbaI、BamHI来获取pL B．pL是RNA聚合酶的结合位点，也是转录起始位点 C．可将新鲜的烟草叶片与含重组质粒的农杆菌共培养达到转化目的 D．三种病原微生物都能诱导增强pL的活性，其中交链格孢的诱导作用最强 【答案】CD 【分析】目的基因的获取有三种方法，分别是基因文库中获取、化学方法合成以及PCR扩增方法。基因工程的步骤：目的基因的获取，基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、结合启动两端的限制酶以及质粒中启动子两端的限制酶可确定，为了获得重组质粒可选用的限制酶为限制酶HindⅢ、BamHI来获取pL，A错误； B、pL是启动子，是RNA聚合酶的结合位点，而转录起始位点知的是与新生RNA链第一个核苷酸相对应的DNA链上的碱基，B错误； C、可将新鲜的烟草叶片与含重组质粒的农杆菌共培养达到转化目的，因为通过农杆菌的侵染其中的Ti质粒能将T-DNA转移到烟草细胞的染色体DNA上，进而实现转化，C正确； D、从图中可看出，与对照组相比，三种病原微生物都能诱导启动子的活性增强，其中交链格孢的诱导作用最强，D正确。 故选CD。 第Ⅱ卷 三、非选择题：本题共5题，共55分。 21．香蕉枯萎病的微生物防治：香蕉枯萎病对香蕉种植业极具破坏性，由土壤中的尖孢镰刀菌感染香蕉植株所导致。现有菌株S可抑制尖孢镰刀菌，某研究小组拟利用微生物协同作用，优化枯萎病生物防治方案，部分过程如下： (1)【阶段一】将菌株S施于香蕉种植园的土壤中，并分析土壤微生物数量变化情况。若要筛选出土壤中与菌株S有协同作用的有益菌，应选择施加菌株S后数量变化趋势是 （下降/上升/不变）的有益菌。 (2)【阶段二】筛选与菌株S有协同作用的有益菌。过程如图，其接菌液并培养后如表。 菌落编号 ① ② ③ ④ 清晰区直径（cm） 0.8 0.5 1.2 0 Ⅰ~Ⅳ环节中，需无菌操作的是 ；在第 环节分离土壤中的各种菌；环节Ⅳ中需先涂布的菌株X是 。 (3)为达到阶段二的目的，据表应优先选择的是菌落 。 【阶段三】利用筛选到的有益菌P，分析菌株之间的相互关系，形成表中所列方案。 培养基 预先涂布菌株 点接菌液 实验组1 实验组2 实验组3 固体培养基 菌株X ？ ？ ？ (4)各实验组上接的菌液中应含有的菌株分别是：实验组1 ，实验组2 ，实验组3 ，其中能说明菌株P对菌株S的作用的实验组是 。 【答案】(1)上升 (2) Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ Ⅱ、Ⅲ 尖孢镰刀菌 (3)③ (4) 菌株P 菌株S 菌株P和菌株S 实验组2和实验组3 【分析】分析题图，图中I是将土壤样品加入无菌水，制成稀释液，进行扩大培养，Ⅱ是将菌液接种于平板，Ⅲ是选择优良菌种进行纯化，IV是进行鉴定选择菌株。 【详解】（1）如果该菌和菌株S有协同作用，则施加菌株S后，该菌数量会上升。故若要筛选出土壤中与菌株S存在协同作用的有益菌，应选择施加菌株S后数量上升的有益菌。 （2）实验室中培养微生物的关键是防止杂菌污染，获得纯净的培养物，故图中过程Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ均在实验室完成，均需要无菌操作，在点燃的酒精灯附近，避免杂菌污染；在环节Ⅱ、III中，将菌液涂布在固体培养基表面即可分离到土壤中的各种菌；该实验的目的是选择出与菌株S有协同作用的有益菌，而菌株S能抑制尖孢镰刀菌生长，所以为筛选出有益菌，则预先涂布的菌株X是尖孢镰刀菌。 （3）为达到阶段二的目的，据表应优先选择清晰区直径较大，对应③。 （4）为进一步分析菌株S和菌株P之间的相互关系，对照组只接种尖孢镰刀菌，实验组1只接种菌株P，实验组2只接种菌株S，实验组3接种菌株P和菌株S，实验组1和实验组3均起到对照组的作用，其中能说明菌株P对菌株S的作用的两个实验组是实验组2(只接种菌株S) 和实验组3(接种菌株P和菌株S)，通过对比这两组平板上菌落周围的清晰区直径即可判断菌株P对菌株S的作用。 22．中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 (1)取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其 （填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用 （填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 (2)过程①通过酶解法去除 获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂 诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带 的杂种原生质体。 (3)科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由图2可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在 种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为 。 (4)通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组的实验处理补充完整 。 ②若实验结果为 ，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 【答案】(1) 消毒 无菌水 (2) 细胞壁 PEG 红、绿荧光色素 (3) 2 1×106个·mL-1 (4) 等量的蒸馏水 A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组 【分析】分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。图2柱形图中，随着原生质体密度增大，双核异核融合体比例先升高后降低，其中在1×106个/mL-1时， 比例最高。 【详解】（1）为防止微生物污染，应取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其消毒；为防止杂菌污染，每次处理后用无菌水冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂。 （2）据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，需要用纤维素酶、果胶酶处理破坏细胞壁；过程②诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（聚乙二醇）诱导融合；由于三百草细胞酶解液中加入了红荧光色素，鱼腥草细胞酶解液中加入了绿荧光色素，所以杂种原生质体应该带红、绿荧光色素。 （3）双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在2种类型的双核融合体（即三白草-三白草、鱼腥草-鱼腥草）；由图2柱形图可知，在密度为1×106个/mL时， 双核异核融合体比例最高，说明促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为1×106个/mL。 （4） ①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。 ②若实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 23．新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合,侵入人体,引起肺炎。图1为病毒侵入后,人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵,故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题。    (1)图1中人体内抗原呈递细胞吞噬病毒,并将病毒的抗原暴露在细胞表面,被 细胞表面的受体识别后激活该细胞。 (2)B细胞识别入侵的病毒后,在淋巴因子作用下,经过细胞的 ,形成 细胞。 (3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者,采集鼻咽拭子主要用于病原学检查,检测病毒的 ;采集血液样本主要用于血清学检查,检测 。 (4)据图2所示,研制抗S蛋白单克隆抗体,需先注射刺突蛋白(或S蛋白)免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞,再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合,用HAT培养基筛选获得 细胞。因为同一种抗原可能激活 细胞,还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。 【答案】(1)T (2) 增殖、分化 浆细胞和记忆 (3) 核酸 抗新型冠状病毒抗体 (4) 杂交瘤 多种B 【分析】在HAT选择性培养基中，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，不能利用补救途径合成DNA而死亡，未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖。 【详解】（1）据题图1可知，人体内抗原递呈细胞吞噬新冠病毒，并将新冠病毒的抗原暴露，呈递给T细胞，被T细胞表面的受体识别后激活T细胞。 （2）激活的T细胞释放淋巴因子，并将抗原呈递给B细胞，B细胞识别入侵的病毒后，迅速增殖分化成浆细胞和记忆细胞。 （3）临床上为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测疑似患者的呼吸道是否有新冠病毒的核酸，采集血液样本主要用于血清学检查，检测血清中是否产生抗新型冠状病毒的抗体。 （4）据题中图2所示，结合单克隆抗体制备方法，要研制抗刺突蛋白单克隆抗体，需先注射新冠病毒的刺突蛋白（或S蛋白），以激活小鼠的免疫细胞，再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得融合的、未融合的细胞，用HAT筛选培养基培养，未融合的B细胞因不能长期生存而死亡，未融合的骨髓瘤细胞因不能合成DNA而死亡，只有杂交瘤细胞能成活。由于同一种抗原可能激活多种B细胞，筛选出的融合的骨髓瘤细胞就可能分泌多种抗体，还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞。 24．骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆驼曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题：    (1)胚胎工程中一般注射 处理A使其超数排卵。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有 ，受精的标志是 。 (2)过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至 阶段进行胚胎移植，欲获得更多的胚胎可以对囊胚进行 操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将 。 (3)胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为受体对外来胚胎基本上不发生 。 (4)与F相比，E更具有多样性，其原因是E的生殖方式为 ，其亲代在进行减数分裂过程中会发生基因重组。若要胚胎移植前对E进行性别鉴定应选 细胞，避免对胚胎造成影响。 【答案】(1) 促性腺激素 透明带反应、卵细胞膜反应 观察到两个极体或雌、雄原核 (2) 桑葚胚或囊胚 胚胎分割 囊胚的内细胞团均等分割 (3)免疫排斥反应 (4) 有性生殖 滋养层 【分析】据图分析，E后代是试管动物，属于有性生殖，F后代是克隆动物，属于无性生殖，其中①表示体外受精，②表示去掉卵母细胞的细胞核，③表示早期胚胎培养。 【详解】（1）胚胎工程中一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，以便获得更多的卵子。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有透明带反应、卵细胞膜反应，受精的标志是观察到两个极体或雌、雄原核。 （2）在桑葚胚或囊胚阶段进行胚胎移植，获得更多的胚胎可进行胚胎分割，再借助胚胎移植技术产生完遗传物质完全相同的后代，由于囊胚内的内细胞团将来会发育为机体的组织和器官，因此应对囊胚的内细胞团进行均等分割，才能获得完全相同的多个胚胎。 （3）胚胎能在D受体雌性体内存活，因为同种动物供、受体生殖器官生理变化相同，受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥，这是胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础。 （4）与F相比，E更具有多样性，原因是E的产生过程经过了受精作用，其的生殖方式为有性生殖，进行性别鉴定应选滋养层细胞，因为该部位的细胞将来发育成胎盘和胎膜，这样可以避免对胚胎造成影响。 25．OsCYP2基因已被证实为水稻耐盐碱关键基因。科研人员通过克隆OsCYP2基因，构建OsCYP2基因表达载体，并将其转化到烟草中，探讨OsCYP2基因对烟草耐盐碱能力大小的影响。回答下列问题： (1)构建OsCYP2基因表达载体时所用Ti质粒结构如图甲所示，在构建重组质粒时要将OsCYP2基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，当农杆菌侵染烟草细胞时，OsCYP2基因能随T-DNA整合到烟草细胞的 上。    注：Bar基因为抗草甘膦（一种除草剂）基因 (2)OsCYP2基因两端碱基序列如图乙所示，为了让OsCYP2基因和Ti质粒正确连接，利用PCR技术扩增OsCYP2基因时需要设计一对引物，这对引物的序列分别为 。（从引物5′端开始书写，只写前12个碱基即可）    (3)科研人员将OsCYP2基因导人烟草细胞（烟草细胞无该基因），然后利用植物组织培养技术将含目的基因的受体细胞培养为转基因植株，利用反转录PCR技术等检测OsCYP2基因是否转录，其大致步骤为：提取转基因植株的RNA→ →利用PCR技术进行扩增→对扩增产物进行电泳分析。在构建PCR反应体系时需加入的物质有模板DNA、引物、缓冲液、 等（答出两种）。 (4)科研人员选择上述扩增产物出现特异性扩增条带（呈阳性）的转基因植株，在个体生物学水平检测“转OsCYP2基因烟草的耐盐碱性是否明显提高”，请写出实验的大致思路 。 (5)科研人员在研究转OsCYP2基因烟草的遗传稳定性时，发现有少部分阳性植株的遗传不符合孟德尔遗传规律，这可能是因为基因插入的 和数目是随机的，导致目的基因在转基因植株中的遗传变得复杂。此外，科研人员还发现OsCYP2基因在部分阳性植株中的表达水平低下，这影响了转基因植株从实验室走向农业生产应用，请分析可能的原因有 （答出一点即可）。 【答案】(1)染色体DNA (2)5'-AGATCTATGTCT-3'          5'-GCTAGCCTAGGA-3' (3) 将提取的RNA反转录为cDNA 热稳定DNA聚合酶（TagDNA聚合酶或Taq酶）、四种脱氧核苷酸（dNTP）、Mg2＋ (4)将等量、长势相同的转OsCYP02基因烟草和非转基因烟草分为甲、乙两组，用一定浓度NaC1溶液+完全营养液进行水培，在其他条件相同且适宜条件下培养一段时间，观察并记录两组烟草的生长状况 (5) 位点（或位置、部位） ①OsCYP2基因插入的位置不合适会阻碍基因转录过程，导致基因表达水平低下：②OsCYP2基因发生甲基化等表观遗传修饰，影响OsCYP2基因的表达；③细胞内可能存在与OsCYP2基因转录产生的mRNA互补的小RNA分子，抑制mRNA的翻译过程，使基因表达水平低下；④温度、光照等环境因素可能参与调节植物的基因表达调控，影响OsCYP2基因表达 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）Ti质粒的T-DNA中可以将目的基因导入受体细胞的染色体DNA上，故，在构建重组质粒时要将OsCYP2基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，当农杆菌侵染烟草细胞时，OsCYP2基因能随T-DNA整合到烟草细胞的染色体DNA上。 （2）应将目的基因导入启动子和终止子之间，且为避免反向连接和自身环化，应选择两种限制酶进行切割，据图可知，应选择启动子2与终止子之间的限制酶，故应选择的是BglII和NheI，再结合图乙的转录方向及碱基序列可知，利用PCR技术扩增OsCYP2基因时需要设计一对引物，该对引物需要与模板的3'端结合，且需要在首端加上上述两种酶的碱基序列，故最终为5'-AGATCTATGTCT-3'和 5'-GCTAGCCTAGGA-3'。 （3）反转录是以RNA为模板合成DNA的过程，利用反转录PCR技术等检测OsCYP2基因是否转录，其大致步骤为：提取转基因植株的RNA→将提取的RNA反转录为cDNA→利用PCR技术进行扩增→对扩增产物进行电泳分析；PCR是一项体外扩增DNA的技术，在构建PCR反应体系时需加入的物质有模板DNA、引物、缓冲液、热稳定DNA聚合酶（TagDNA聚合酶或Taq酶）、四种脱氧核苷酸（dNTP）、Mg2＋。 （4）在个体生物学水平检测“转OsCYP2基因烟草的耐盐碱性是否明显提高”，需要将转基因植物与非转基因植物进行比较，实验设计应遵循对照与单一变量原则额，故可设计实验如下：将等量、长势相同的转OsCYP02基因烟草和非转基因烟草分为甲、乙两组，用一定浓度NaC1溶液+完全营养液进行水培，在其他条件相同且适宜条件下培养一段时间，观察并记录两组烟草的生长状况。 （5）基因工程过程中，基因插入的位置和数目是随机的，故有少部分阳性植株的遗传不符合孟德尔遗传规律；基因的表达包括转录和翻译过程，科研人员还发现OsCYP2基因在部分阳性植株中的表达水平低下，可能的原因有：①OsCYP2基因插入的位置不合适会阻碍基因转录过程，导致基因表达水平低下：②OsCYP2基因发生甲基化等表观遗传修饰，影响OsCYP2基因的表达；③细胞内可能存在与OsCYP2基因转录产生的mRNA互补的小RNA分子，抑制mRNA的翻译过程，使基因表达水平低下；④温度、光照等环境因素可能参与调节植物的基因表达调控，影响OsCYP2基因表达。 1 / 24 学科网（北京）股份有限公司 $$………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… 此卷只装订不密封 ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… … 学校：______________姓名：_____________班级：_______________考号：______________________ 2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版2019选必三。 5．难度系数：0.7 6．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1．阳江黑豆豉是以优质黑豆为原料而制作出的发酵食品。黑豆中的蛋白质、脂肪等经毛霉、曲霉发酵分解到一定程度时，通过加盐、加酒、干燥等方法可制成豆豉。下列叙述错误的是（　　） A．毛霉、曲霉中的蛋白酶可将黑豆中的蛋白质分解为小分子多肽和氨基酸 B．制作阳江黑豆豉的过程中需要进行严格的消毒、灭菌处理 C．加盐、加酒、干燥可抑制蛋白酶的活性，防止发酵过度 D．分析发酵过程中微生物的种类、数量变化有助于改良黑豆豉的风味 2．吃腐烂水果可能会出现头晕、恶心、呕吐或更严重的症状，这可能与微生物代谢产生的毒素有关，某研究小组致力于研究健康饮食，设计实验探究腐烂苹果不同区域微生物的种类和数量以及烂果毒性，实验基本步骤如图所示。请据此判断以下说法正确的是（　　） A．根据本实验探究目的，步骤二采用的接种方法是平板划线法 B．步骤三在适宜环境下培养8小时即可统计出不同菌液中全部微生物的种类和数量值 C．若菌落的种类和数量均为①>②>③>④>⑤，则离腐烂部位越远的果肉中毒素含量越低 D．若编号为⑤的部位微生物的数量极少，则切掉①~④后的苹果就可以放心食用 3．柠檬酸具有令人愉悦的酸味，入口爽快，安全无毒，被广泛用于食品和饮料中。利用发酵工程技术制备柠檬酸的流程如图所示，下列相关叙述正确的是（    ）    A．柠檬酸属于次生代谢物，过程①②的目的均为扩大培养 B．发酵罐内的发酵是工厂化生产柠檬酸的中心环节 C．利用干热灭菌箱对培养基进行灭菌是发酵工程生产中一个很重要的环节 D．发酵结束后，采取适当的过滤、沉淀措施可获得柠檬酸 4．大丽花为菊科大丽花属，是多年生草本植物。大丽花为世界名花之一，除具观赏价值外，还具有药用价值。大丽花在栽培过程中易受病毒感染，造成品质退化。研究小组尝试通过植物组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．应选取大丽花植株无病毒的茎尖作为外植体，并用酒精溶液浸泡30min B．过程①为再分化，目的是使细胞失去原特有的结构和功能，该过程无需光照 C．过程②的实质是基因选择性表达，该过程只进行有丝分裂，不进行细胞分化 D．2号和3号培养基中细胞分裂素与生长素用量的比值分别为等于1和大于1 5．研究者欲利用原生质体融合技术，实现三白草和鱼腥草有效成分的工厂化生产。下列叙述正确的是（　　）    A．过程①常使用纤维素酶和果胶酶，应在无菌水中进行，以防止杂菌污染 B．过程②可使用聚乙二醇以诱导三白草原生质体和鱼腥草原生质体的融合 C．过程③经过脱分化、再分化形成的愈伤组织是呈不定形的薄壁组织团块 D．过程④需要调节培养基中生长素和细胞分裂素的比例，诱导生芽和生根 6．“白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。草莓是无性繁殖的植物，感染病毒后容易传染给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。如图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓的过程。下列叙述正确的是（    ） A．获得外植体时需要用纤维素酶和果胶酶处理草莓植株 B．选用茎尖做外植体是因为其含病毒极少甚至不含病毒 C．培育无病毒草莓苗时不用控制培养基中植物激素的比例 D．常需要用95%的酒精对愈伤组织消毒后再诱导其再分化 7．肝细胞中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因突变会导致酪氨酸血症。下图是研究人员利用基因编辑技术纠正病人来源肝细胞，成功治疗酪氨酸血症小鼠的过程，为治疗人类酪氨酸血症奠定理论基础。相关叙述准确的是（　　） A．酪氨酸血症的发生说明基因能通过控制蛋白质的结构控制生物性状 B．过程②需在培养液中添加琼脂、葡萄糖、干扰素动物血清等物质 C．过程③需敲入正常的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因，并敲除相关抗原基因 D．基因编辑后的人源肝细胞植入小鼠分化为完整肝脏，是治疗小鼠酪氨酸血症的关键 8．抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团，是抗原与T细胞或B细胞表面的抗原识别受体及抗体特异性结合的基本结构单位。下图为单克隆抗体的制备过程，下列叙述错误的是（　　）    A．可用灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合 B．经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞能够产生的抗体共3种 C．克隆化培养和抗体检测后的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体 D．由图可知，利用一种抗原经杂交瘤技术可以获得多种单克隆抗体 9．培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述正确的是（    ）    A．用胃蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B．生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的O2，保证培养液pH相对稳定 C．培养液中的支架提供了更大的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D．人造牛肉的培养有利于牛肉的工厂化生产，培养液不需要更换 10．基因组印记是指由亲本来源不同而导致等位基因表达存在差异的一种遗传现象。基因组印记阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队首先改变小鼠卵母细胞的“基因组印记”，然后将一个第二极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠，实验过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（　　）    A．哺乳动物孤雌生殖不能实现是因为基因组印记阻碍了次级卵母细胞与第二极体结合 B．基因的甲基化可能会抑制转录过程，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达 C．“孤雌小鼠”的基因型与提供卵母细胞的雌鼠不一定相同 D．移植后的囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来 11．一位患有单基因显性遗传病的妇女（其父亲与丈夫表现型正常）想生育一个健康的孩手。医生建议对极体进行基因分析，筛选出不含该致病基因的卵细胞，采用试管婴儿技术辅助生育后代，技术流程示意图如下。 下列叙述错误的是（    ） A．无法判断该致病基因位于X染色体止 B．可选择极体1或极体2用于基因分析 C．自然生育患该病子女的概率是25%或50% D．在获能溶液中精子入卵的时期是② 12．下表是几种限制酶的识别序列及切割位点（Y=C或T，R=A或G）。下列相关叙述正确的是（　　） 限制酶 HindⅡ AluⅠ BamHⅠ Sau3AⅠ 识别序列及切割位点       5'-GTY↓RAC-3'     5'-AG↓CT-3'     5'-G↓GATCC-3'   5'-↓GATC-3' A．限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，增加2个游离的磷酸基团 B．一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，并在特定位点切割 C．AluⅠ切割后的DNA片段只可用E.coliDNA连接酶连接 D．BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段进行重组后，BamHⅠ和Sau3AⅠ均不能识别并切割 13．将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞，培育抗虫杨树。如图表示利用含目的基因的DNA分子和Ti质粒构建基因表达载体的过程，图中表示氨苄青霉素抗性基因，表示新霉素抗性基因，箭头表示限制酶的酶切位点，相关酶的识别序列如表所示。下列叙述正确的是（    ） A．利用PCR扩增目的基因时，应该选择引物2和引物3并在引物3'端添加相应酶切位点 B．为使目的基因与质粒高效重组，选用KpnⅠ和HindⅢ比选用KpnⅠ和SmaⅠ效果更好 C．为将表达载体导入农杆菌，可以使用离心法或PEG融合法处理受体细胞 D．成功导入目的基因的杨树细胞既具有氨苄青霉素抗性，又有新霉素抗性 14．部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV），OMV能穿越肠道上皮屏障，活化肠黏膜内的免疫细胞。研究人员通过构建ClyA-Ag-mFc融合蛋白基因表达载体（见图），转化大肠杆菌来制备工程菌。下列相关叙述错误的是（    ） A．ClyA表达产物可以将融合蛋白定位到OMV表面 B．Ag表达产物可以激活机体的特异性免疫反应 C．mFc表达产物可以提高T细胞摄取OMV的能力。 D．利用该大肠杆菌可制备预防肿瘤的口服疫苗 15．生物技术是把双刃剑，造福人类的同时也带来了安全性和伦理问题，人们必须高度重视。下列叙述错误的是（    ） A．利用核移植技术获得胚胎，从中分离出ES细胞治疗白血病涉及伦理问题 B．若有国家把研制出的新型鼠痘病毒作为生物武器，将会威胁人类安全 C．研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播 D．干细胞的研究具有广阔的应用前景，应大力支持和发展，不需要监管 2、 多选题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作流程，下列说法错误的是（    ）    A．实验中选择培养基含有无机盐、葡萄糖、尿素、蛋白胨、琼脂、水等物质 B．培养基用高压蒸汽灭菌后，将pH调至中性或弱碱性 C．平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为2.2×108个 D．为判断培养基的选择作用，需设置未接种的培养基作对照 17．豆科植物苦参产生的苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法错误的是（　　） A．下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理 B．过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化 C．过程③所得苦参幼苗具有抗病毒的遗传特性 D．通过植物细胞培养获得苦参碱的过程不需要实现细胞的全能性 18．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述正确的是（　　）    A．实验前必须给小鼠甲注射病毒A是为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞 B．将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞 C．筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交痛瘤胞 D．筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 19．下图为全球首例非人灵长类克隆动物的培育过程，为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理了它。下列说法中错误的是（　　）    A．非人灵长类克隆动物成功率低的原因之一为供体细胞的细胞核难以完全恢复分化前的功能状态 B．应将采集到的卵母细胞培养到MII期再通过显微操作去除其核膜包被的细胞核 C．图中对于重构胚的处理使其中某些基因的甲基化程度和组蛋白的乙酰化程度增加，有利于重构胚的正常发育 D．在胚胎移植前，需要对代孕母猴注射糖皮质激素等免疫抑制剂，防止免疫排斥的发生 20．为研究病原微生物对启动子pL活性的影响，研究人员从图a所示结构中获取pL，将其与相同限制酶处理的Ti质粒（图b）连接，再导入烟草。随机选取3组转基因成功的烟草（P1、P2和P3）进行病原微生物接种，检测GUS酶（gus基因编码）活性，该活性可反映pL活性，结果如图c。下列说法中正确的是（　　）      A．可选用限制酶XbaI、BamHI来获取pL B．pL是RNA聚合酶的结合位点，也是转录起始位点 C．可将新鲜的烟草叶片与含重组质粒的农杆菌共培养达到转化目的 D．三种病原微生物都能诱导增强pL的活性，其中交链格孢的诱导作用最强 第Ⅱ卷 三、非选择题：本题共5题，共55分。 21．香蕉枯萎病的微生物防治：香蕉枯萎病对香蕉种植业极具破坏性，由土壤中的尖孢镰刀菌感染香蕉植株所导致。现有菌株S可抑制尖孢镰刀菌，某研究小组拟利用微生物协同作用，优化枯萎病生物防治方案，部分过程如下： (1)【阶段一】将菌株S施于香蕉种植园的土壤中，并分析土壤微生物数量变化情况。若要筛选出土壤中与菌株S有协同作用的有益菌，应选择施加菌株S后数量变化趋势是 （下降/上升/不变）的有益菌。 (2)【阶段二】筛选与菌株S有协同作用的有益菌。过程如图，其接菌液并培养后如表。 菌落编号 ① ② ③ ④ 清晰区直径（cm） 0.8 0.5 1.2 0 Ⅰ~Ⅳ环节中，需无菌操作的是 ；在第 环节分离土壤中的各种菌；环节Ⅳ中需先涂布的菌株X是 。 (3)为达到阶段二的目的，据表应优先选择的是菌落 。 【阶段三】利用筛选到的有益菌P，分析菌株之间的相互关系，形成表中所列方案。 培养基 预先涂布菌株 点接菌液 实验组1 实验组2 实验组3 固体培养基 菌株X ？ ？ ？ (4)各实验组上接的菌液中应含有的菌株分别是：实验组1 ，实验组2 ，实验组3 ，其中能说明菌株P对菌株S的作用的实验组是 。 22．中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 (1)取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其 （填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用 （填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 (2)过程①通过酶解法去除 获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂 诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带 的杂种原生质体。 (3)科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由图2可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在 种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为 。 (4)通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组的实验处理补充完整 。 ②若实验结果为 ，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 23．新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合,侵入人体,引起肺炎。图1为病毒侵入后,人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵,故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题。    (1)图1中人体内抗原呈递细胞吞噬病毒,并将病毒的抗原暴露在细胞表面,被 细胞表面的受体识别后激活该细胞。 (2)B细胞识别入侵的病毒后,在淋巴因子作用下,经过细胞的 ,形成 细胞。 (3)为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者,采集鼻咽拭子主要用于病原学检查,检测病毒的 ;采集血液样本主要用于血清学检查,检测 。 (4)据图2所示,研制抗S蛋白单克隆抗体,需先注射刺突蛋白(或S蛋白)免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞,再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合,用HAT培养基筛选获得 细胞。因为同一种抗原可能激活 细胞,还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。 24．骆驼被称为“沙漠之舟”的哺乳动物，只有单峰骆驼和双峰骆驼两种。其中单峰骆驼曾经分布于阿拉伯半岛，濒危动物保护组织宣布单峰骆驼野外灭绝（只生活在栽培、圈养条件下即认为该分类单元属于野外灭绝，但在人类活动区会有驯养）。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示的研究。请根据所学知识回答下列问题：    (1)胚胎工程中一般注射 处理A使其超数排卵。①是受精过程，为防止多精入卵所发生的生理反应有 ，受精的标志是 。 (2)过程③之后需要将获得的重构胚激活，使其在适宜的培养液中培养至 阶段进行胚胎移植，欲获得更多的胚胎可以对囊胚进行 操作，操作过程需要特别注意的问题是必须将 。 (3)胚胎能在D受体雌性体内存活的生理学基础为受体对外来胚胎基本上不发生 。 (4)与F相比，E更具有多样性，其原因是E的生殖方式为 ，其亲代在进行减数分裂过程中会发生基因重组。若要胚胎移植前对E进行性别鉴定应选 细胞，避免对胚胎造成影响。 25．OsCYP2基因已被证实为水稻耐盐碱关键基因。科研人员通过克隆OsCYP2基因，构建OsCYP2基因表达载体，并将其转化到烟草中，探讨OsCYP2基因对烟草耐盐碱能力大小的影响。回答下列问题： (1)构建OsCYP2基因表达载体时所用Ti质粒结构如图甲所示，在构建重组质粒时要将OsCYP2基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，当农杆菌侵染烟草细胞时，OsCYP2基因能随T-DNA整合到烟草细胞的 上。    注：Bar基因为抗草甘膦（一种除草剂）基因 (2)OsCYP2基因两端碱基序列如图乙所示，为了让OsCYP2基因和Ti质粒正确连接，利用PCR技术扩增OsCYP2基因时需要设计一对引物，这对引物的序列分别为 。（从引物5′端开始书写，只写前12个碱基即可）    (3)科研人员将OsCYP2基因导人烟草细胞（烟草细胞无该基因），然后利用植物组织培养技术将含目的基因的受体细胞培养为转基因植株，利用反转录PCR技术等检测OsCYP2基因是否转录，其大致步骤为：提取转基因植株的RNA→ →利用PCR技术进行扩增→对扩增产物进行电泳分析。在构建PCR反应体系时需加入的物质有模板DNA、引物、缓冲液、 等（答出两种）。 (4)科研人员选择上述扩增产物出现特异性扩增条带（呈阳性）的转基因植株，在个体生物学水平检测“转OsCYP2基因烟草的耐盐碱性是否明显提高”，请写出实验的大致思路 。 (5)科研人员在研究转OsCYP2基因烟草的遗传稳定性时，发现有少部分阳性植株的遗传不符合孟德尔遗传规律，这可能是因为基因插入的 和数目是随机的，导致目的基因在转基因植株中的遗传变得复杂。此外，科研人员还发现OsCYP2基因在部分阳性植株中的表达水平低下，这影响了转基因植株从实验室走向农业生产应用，请分析可能的原因有 （答出一点即可）。 试题 第11页（共12页） 试题 第12页（共12页） 试题 第1页（共12页） 试题 第2页（共12页） 学科网（北京）股份有限公司 $$2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 生物答题卡 姓 名： 准考证号： 00000 注意事项 自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 沿笔填涂：非选择题必须用0.5mm黑色签字笔答题，不得用铅笔或圆珠笔答题：字体工整、笔迹清晰。 题日的答题区域内作答，超出区域书写的答案无效：在草稿纸、试题卷上答题无效。 要折盈、不要弄破。 1AIIBIICIIDI 6AIIBIICIIDI 11.JAIIBIICIIDI 16.1AIIBIICIIDI 2.JAJIBIICIID 7AIIBIICIIDI 12JAJIBIICIIDI 171AlIBIICIID 3.IAIIBIICIID 8AlIBIICIID 13.JAIIBIICIID 18.1AIIBIICIID 4.AIIBIICIID 9.AIIBIICIIDI 14.1AIBIICIID 19.1AIIBIICIID 5.JAIIBIICIIDI 10.AIIB]ICIIDI 15.1AIIBIICIID 20.1AIIBIICIIDI 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.(11分) (1) (2) (3) (4) 请在各题目的答趣区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 22.(10分) (1) (2) (3) (4) 23.(9分) (1) (2) (3) (4) 24.(11分) (1) (3) (4) (5) 25.(14分) (1) (2) (3) (4) (5)■■■ 2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷 生物答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 1.。答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 考生禁填： 缺考标记 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 违纪标记 ✉ 2.选择题必须用2B铅笔填涂：非选择题必须用0.5mm黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题：字体工整、笔迹清嘶。 3。请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效：在卓稿纸、试题卷上答题无效。 正确填涂■ 4. 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破 错误填涂[×」[1【/月 LAJ[B]IC][D] 6AJIBJICJID] 11AJIB][C][D] 16AJ[B][C][D] 2.A1[BJ[C1【DI 7AJ[BJ[C]ID] 12.[A][BJ[C][D] 17AJIBJ[C]ID] 3.[AJ[B][C][D] 8A][B]C][D] 13.A1[B1[C1[D1 18(A][B][CI[D] 4[A][B][C][D] 9AJ[BJ[C][D] 14.AJ[B][C1[D1 19.A1IB1[C1[D] 5.A][B][CI[D] 10.A][B1[C1[DJ 15.[AJ[BJ[C][D] 20AJ[B][CJID] 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 21.(11分) (1) (2) (3) (4) 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 22.(10分) (1) (2) (3) (4) 23.(9分) (1) (2) (3) (4) 24.(11分) (1) (3) (4) (5) 25.(14分) (1) (2) (3) (4) (5)