1.2微生物的培养—无菌技术课件-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

微生物接种操作时为什么要“全副武装”和在专门的设备内进行？ 获得纯净的微生物培养物的关键是什么？ 任务二：阅读教材P10-11，完成优化学案P9二，完成后思考以下问题： 1.获得纯净的微生物培养物的关键是指什么？ 2.无菌技术主要包括哪两方面？ 3.消毒和灭菌工作主要包括哪两方面？ 4.无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？ 5.消毒与灭菌的概念及区别 6.消毒、灭菌的主要方法及应用范围 比较项目 消毒 灭菌 概念 作用强度 作用程度 芽孢和孢子 适用对象 常用方法 二、无菌技术 1.获得纯净的微生物培养物的关键是： 2.无菌技术应围绕着如何避免杂菌污染展开，主要包括： 3.消毒和灭菌工作主要包括两方面： 4.无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？ 防止杂菌污染 消毒和灭菌 (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行 。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行 。 清洁和消毒 灭菌 无菌技术还能有效避免操作者被微生物感染。 注意事项： 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品 。 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 。 超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行 相接触 二、无菌技术 比较项目 消毒 灭菌 概念 作用强度 作用程度 芽孢和孢子 适用对象 常用方法 消毒和灭菌的原理都是使微生物的蛋白质变性，借此杀死微生物。 但两者的实质不同。消毒的结果实际上是部分灭菌。 2.消毒与灭菌的概念及区别： 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物 较为温和的理化因素 杀死物体表面或内部的部分微生物 消灭部分芽孢 操作空间、活体生物材料、操作者的衣着和双手 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 强烈的物理、化学因素 杀死物体内外所有的微生物 能杀灭全部芽孢和孢子 操作工具、玻璃器皿、培养基等 湿热灭菌法、灼烧灭菌法、干热灭菌法 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药物消毒法 紫外线消毒 1. 消毒： 100℃煮沸5~6min。 可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。 63~65℃煮30min或72~76℃处理15s或80~85℃下处理10~15s。 用70%酒精擦拭双手、 用氯气消毒水源等。 对接种室、接种箱或超净工作台用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物。 二、无菌技术 ？对食物、快递的外包装和电梯的墙壁等外表面、空气进行消毒分别用什么方法？ 利用高温导致蛋白质变性，从而导致微生物死亡。 利用化学药物杀死各种微生物 紫外线破坏微生物的DNA结构 相关信息：生物消毒法 巴氏消毒法：可杀死绝大部分微生物，不破坏食物的营养成分。 用强烈的理化方法杀死物体内外的所有的微生物，包括芽孢和孢子。 某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的抗逆性强的休眠体。芽孢萌发可形成细菌体。 芽孢 孢子 2. 灭菌: 细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的无性生殖细胞，能直接发育成新个体。 芽孢和孢子具有高度的耐热性，可抗化学药物和抗辐射。 应用场景: 将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 二、无菌技术 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。 芽孢壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。 原理：高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性。 注：使用后的培养基必须灭菌后才能丢弃，以免污染环境。 ①湿热灭菌：利用沸水、流通蒸汽进行灭菌的方法。 01 优点： 对象：培养基等。 灭菌的方法： 效果最好--高压蒸汽灭菌锅：压力在100kPa、121 ℃下维持15-30min。 操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的 某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏。 将物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽，待水蒸气将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，关闭排气阀，继续加热，蒸汽不能溢出，增加灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度，导致致病菌蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 二、无菌技术 高压蒸汽灭菌锅的使用： 注意：1. 高压蒸汽灭菌开始之前，为什么要将锅内的冷空气排尽？ 2. 灭菌完毕后，为什么要待压力降到0时才能打开排气阀？ 在同一温度下，湿热的灭菌能力比干热的大，在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气是否完全排出极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。 如果在压力未降到0时打开排气阀，会导致锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。 01 使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等。 ②干热灭菌： 耐高温，需保持干燥的物品，适用于 玻璃器皿 (如试管、培养皿、吸管、注射器) 金属器具 (如针头、 镊子、剪刀等)的灭菌 对象： 原理： 160~170℃的热空气中，2~3h进行灭菌的方法。 二、无菌技术 ③灼烧灭菌：酒精灯火焰灼烧 效果：最彻底 原理： 对象： 01 充分燃烧层 （外焰） 使微生物燃烧 接种工具如接种环、接种针，以及接种过程中的试管口或瓶口等易被污染部位。 二、无菌技术 芽孢是某些细菌在营养条件缺乏时，在菌体内形成的含水量低、抗逆性强的休眠体； 孢子是脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的生殖细胞。 考考你 （1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和 。 （2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 。 （3）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 接触。 （4）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 并在 附近进行。 消毒 灭菌 周围的物品 酒精灯火焰 超净工作台上 不耐高温的液体（牛奶） 接种室、超净工作台 培养皿、吸管等玻璃器皿耐高温、需保持干燥的物品 接种环等金属工具 实验操作者的双手 培养基 家庭餐具等生活用品消毒 a.煮沸消毒法 b.巴氏消毒法 c.化学药剂消毒 d.紫外线消毒 e.灼烧灭菌 f.干热灭菌 g.高压蒸汽灭菌 1.将以下器具、物品或对象与所采用的消毒或灭菌方法连线 3. 下列操作能达到灭菌目的的是(　　) A.用免洗酒精凝胶擦手 B.制作泡菜前用开水烫洗容器 C.在火焰上灼烧接种环 D.防疫期间用石炭酸喷洒教室 2. 下列有关无菌技术的说法，正确的是(　　) A．无菌技术的关键是杀灭实验室中的所有的微生物 B．培养微生物的试剂和器具都要进行湿热灭菌 C．经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，不能常温长期保存 D．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌 C C 酒精消毒液中酒精浓度对效果的影响： 70---75%的酒精杀菌效果最好； 浓度过高，菌体表面蛋白质变性过快而凝固成一层保护膜，酒精不能渗入其中； 浓度过低，杀菌能力减弱。 无菌技术措施的选择原则： 进行化学消毒时，某人认为酒精浓度越高，消毒效果可能越好，于是他用了体积分数为95%的酒精进行消毒，他的做法对吗?为什么? ①考虑效果：灭菌的效果比消毒要好。 ②考虑操作对象的承受能力：活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒的方法，而不能采用灭菌的方法。 15 Lavf58.20.100 $$