内容正文:
发酵工程
第1章
章末综合提升
一、构建思维导图
二、默写核心概念
1.酵母菌是兼性厌氧微生物,在________条件下进行酒精发酵产生酒精。
2.当________________时,醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成乙酸;当____________时,醋酸菌将乙醇转化为乙醛,再将乙醛变为乙酸。
3.泡菜制作的实验流程:配制盐水→_________→______________→封坛发酵。
4.果酒制作中应先通气再密闭,温度控制在________ ℃;果醋的制作应始终通气,温度控制在____________ ℃。
无氧
O2、糖源都充足
缺少糖源
原料加工
加调味料装坛
18~30
30~35
5.获得纯净的微生物培养物的关键是________________。
6.消毒是指________________________________方法杀死物体表面或内部____________微生物。
7.灭菌是指使用____________方法杀死物体内外________的微生物,包括________________。
8.由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为____________,获得纯培养物的过程就是____________。
防止杂菌污染
使用较为温和的物理、化学或生物等
一部分
强烈的理化
所有
芽孢和孢子
纯培养物
纯培养
9.________是分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
10.测定微生物数量的常用方法有______________法和________________法。________________法常用来统计活菌的数目,但统计结果往往比活菌的实际数目________。
11.只有能____________的微生物才能分解尿素,因此可用以________作为唯一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。
菌落
稀释涂布平板
显微镜直接计数
稀释涂布平板
少
合成脲酶
尿素
12.为了保证结果准确,一般选择菌落数为________的平板进行计数;在同一稀释度下,应至少对______个平板进行重复计数,然后求出平均值。
13.性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过__________________________获得。
14.发酵工程的中心环节是________________。
30~300
3
诱变育种或基因工程育种
发酵罐内发酵
15.如果发酵产品是微生物细胞本身,可采用______________等方法将菌体分离和干燥得到产品;如果发酵产品是微生物的代谢物,可根据产物的性质采取适当的____________________措施来获得产品。
16.发酵工程的产品主要包括__________________________________。
过滤、沉淀
提取、分离和纯化
微生物的代谢产物、酶及微生物的菌体
三、体验高考真题
1.(2024·湖北卷)制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物,常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是( )
A.食用醋的酸味主要来源于乙酸
B.醋酸菌不适宜在无氧条件下生存
C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶
D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
D
解析:乙酸是由醋酸菌产生的,是食用醋的酸味主要来源,A正确;醋酸菌是好氧细菌,不适宜在无氧的条件下生存,B正确;在氧气充足但缺少糖源时,醋酸菌可以将乙醇转化为乙醛,再将乙醛变为乙酸,因此醋酸菌体内含有催化乙醇氧化成乙酸的酶,C正确;醋酸菌为原核生物,没有核膜包被的细胞核和众多细胞器,因此没有线粒体,D错误。
2.(2024·湖南卷)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示,下列操作正确的是( )
A.①②⑤⑥ B.③④⑥⑦
C.①②⑦⑧ D.①③④⑤
D
解析:由图可知,②中拨出棉塞后应握住棉塞上部;⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开,应在火焰附近将培养皿打开一条缝隙;⑦中划线时应用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线,并且第5次的划线不能与第1次的划线相连;⑧中平板应倒置培养。①③④⑤正确,故选D。
3.(2024·重庆卷)养殖场粪便是农家肥的重要来源,其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3,影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株,正确的是( )
A.①通常在等比稀释后用平板划线法获
取单个菌落
B.②挑取在2种培养基上均能生长的用于
后续的实验
C.③可通过添加脲酶并检测活性,筛选得到甲、乙
D.粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少
C
解析:平板划线法无需稀释,A错误;由图可
知,②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生
长,而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株
用于后续的实验,B错误;所筛选出的菌株之
所以不能利用尿素,可能是由于不产生脲酶或
分泌脲酶抑制剂,所以③可通过添加脲酶并检测活性,筛选得到甲、乙,C正确;由图可知,甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶,且乙同时分泌脲酶抑制剂,粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3,所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少,D错误。
4.(2023·辽宁卷)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m3)。下列叙述错误的是( )
A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
D
解析:为防止杂菌感染,接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭菌,对实验操作者的双手进行消毒,A正确;纯化培养时,为防止污染培养基和水分蒸发,培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养,B正确;微生物计数时在同一稀释度下,应至少需要对3个菌落数目在30~300的平板进行计数,以确保实验的准确性,C正确;使用稀释涂布平板法对微生物计数,数值往往偏小,原因是两个或多个细胞连在一起时,在平板上只能观察到一个菌落,D错误。
5.(2024·江西卷)井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素,它由吸水链霉菌井冈变种(JGs,一种放线菌,菌体呈丝状生长)发酵而来,在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述,正确的是( )
A.JGs可发酵生产井冈霉素,因为它含有能够编码井冈霉素的基因
B.JGs接入发酵罐前需要扩大培养,该过程不影响井冈霉素的产量
C.提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,会提高井冈霉素的产量
D.稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化
D
解析:基因表达的产物是蛋白质,而井冈霉素是JGs发酵生产的一种氨基寡糖类抗生素,A错误;JGs接入发酵罐前需要扩大培养,该过程会影响JGs的数量,进而影响井冈霉素的产量,B错误;在一定范围内提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,会提高井冈霉素的产量,但若浓度过大,可能会降低井冈霉素的产量,C错误;JGs是一种放线菌,菌体呈丝状生长,形成的菌落难以区分,因此稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化,D正确。
6.(2024·北京卷)啤酒经酵母菌发酵酿制而成。生产中,需从密闭的发酵罐中采集酵母菌用于再发酵,而直接开罐采集的传统方式会损失一些占比很低的独特菌种。研究者探究了不同氧气含量下酵母菌的生长繁殖及相关调控,以优化采集条件。
(1)酵母菌是兼性厌氧微生物,在密闭发酵罐中会产生__________和CO2。有氧培养时,酵母菌增殖速度明显快于无氧培养,原因是酵母菌进行有氧呼吸,产生大量__________。
(2)本实验中,采集是指取样并培养4天。在不同的气体条件下从发酵罐中采集酵母菌,统计菌落数(图甲)。由结果可知,有利于保留占比很低菌种的采集条件是________。
(3)根据上述实验结果可知,采集酵母菌时O2浓度的陡然变化会导致部分菌体死亡。研究者推测,酵母菌接触O2的最初阶段,细胞产生的过氧化氢(H2O2)浓度会持续上升,使酵母菌受损。已知H2O2能扩散进出细胞。研究者在无氧条件下从发酵罐中取出酵母菌,分别接种至含不同浓度H2O2的培养基上,无氧培养后得到如图乙所示结果。请判断该实验能否完全证实上述推测,并说明理由____________。
(4)上述推测经证实后,研究者在有氧条件下从发酵罐中取样并分为两组,A组菌液直接滴加到H2O2溶液中,无气泡产生;B组菌液有氧培养4天后,取与A组活菌数相同的菌液,滴加到H2O2溶液中,出现明显气泡。结果说明,酵母菌可通过产生______________以抵抗H2O2的伤害。
答案:(1)酒精/C2H5OH 能量
(2)无氧
(3)不能,该实验只能证明随着H2O2 浓度的持续上升,酵母菌存活率下降(酵母菌受损程度加深),但不能证明酵母菌接触O2的最初阶段,细胞产生的H2O2 浓度会持续上升;该实验在无氧条件下从发酵罐中取出酵母菌,接种到培养基上无氧培养,并没有创造O2浓度陡然变化的条件
(4)过氧化氢酶/H2O2 酶
解析:(1)酵母菌在密闭发酵罐中进行无氧呼吸,会产生酒精(C2H5OH)和CO2。有氧培养时,酵母菌进行有氧呼吸,有机物被彻底氧化分解,产生大量能量,而无氧呼吸中有机物不能彻底分解,只产生少量能量,故有氧培养时酵母菌增殖速度明显快于无氧培养。
(2)由图甲结果可知,无氧/无氧条件下,菌落数最多,因此有利于保留占比很低菌种的采集条件是无氧/无氧。
(3)依据图乙结果可知,随着H2O2浓度的持续上升,酵母菌存活率下降(酵母菌受损程度加深),但不能证明酵母菌接触O2的最初阶段,细胞产生的H2O2浓度会持续上升;由题意可知,该实验在无氧条件下从发酵罐中取出酵母菌,接种到含不同浓度H2O2的培养基上进行无氧培养,并没有创造O2浓度陡然变化的条件,所以不能完全证实上述推测。
(4)过氧化氢酶能催化H2O2分解出现明显气泡,因此实验结果说明,酵母菌可通过产生过氧化氢酶以抵抗H2O2的伤害。
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