内容正文:
第3节 DNA的复制
第三章 基因的本质
图片可替换
本节聚焦
怎样证明 DNA是半保留复制的?
DNA的复制过程是怎样的?
DNA的半保留复制对遗传信息的稳定传递有什么意义?
问题探讨
资料:
沃森和克里克在发表DNA双螺旋结构的那篇著名短文的结尾处写道:“值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能的机制。
碱基互补配对原则暗示DNA的复制机制可能是怎样的?
提出问题
假说一 | 半保留复制
沃森和克里克
亲代DNA
子代DNA
复制
一、对DNA复制的推测
其他假说 | 全保留复制
亲代DNA
子代DNA
复制
其他人
做出假说
1.如果要你来设计实验如何验证哪个假说是对的,你认为最基本的思路是什么?
把复制出的子代DNA链(子链)和原来的链(母链)区别开,观察它在新DNA中出现的情况。
2.如何在实验中直观区分母链和子链?
同位素标记法。
3.如果用同位素标记,什么元素好?
15N和14N是N元素的两种稳定的同位素(无放射性),这两种同位素的相对原子质量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大。(其他元素也行,N更方便且实验效果好)
一、对DNA复制的推测
下
中
上
15N/15N
15N/14N
14N/14N
二、DNA半保留复制的实验证据
低
高
密度
密度梯度离心法
用含有15NH4Cl的培养液
培养大肠杆菌若干代
将大肠杆菌转移到含有
14NH4Cl的普通培养液中
不同时刻收集大肠杆菌并
提取DNA后离心
记录离心后试管中 DNA
的位置
P
全保留复制假说
全部位于重带
15N/ 15N
1/2位于轻带
1/2位于重带
14N/ 14N
15N/ 15N
3/4位于轻带
1/4位于重带
14N/ 14N
15N/ 15N
离心
离心
离心
F1
二、DNA半保留复制的实验证据
请同学们分别推测全保留复制和半保留复制的实验结果。
演绎推理
F2
半保留复制假说
离心
离心
离心
全部位于重带
15N/ 15N
全部位于中带
14N/ 15N
1/2位于轻带
1/2位于中带
14N/ 14N
14N/ 15N
二、DNA半保留复制的实验证据
F1
F2
P
验证假说
得出结论
DNA的复制是以半保留的方式进行的。
提取DNA离心
提取DNA离心
提取DNA离心
转移到含14NH4Cl的培养液中
细胞分裂一次
细胞再分裂一次
实验结果与半保留复制的预期相符
二、DNA半保留复制的实验证据
大肠杆菌在15NH4Cl的培养液培养若干代
全部位于重带
15N/ 15N
全部位于中带
14N/ 15N
1/2位于轻带
1/2位于中带
14N/ 14N
14N/ 15N
第一代
第二代
排除全保留复制
DNA复制方式的探究历程
DNA是如何复制的?
实验结果与半保留复制的预期相符。
DNA分子复制的方式是半保留复制。
预测两种复制模式下得到的子代DNA的可能情况及可能的实验结果。
推测可能的复制方式
半保留复制
全保留复制
小结
提出问题
做出假说
演绎推理
验证假说
得出结论
假说-演绎法
练一练
大本P90
科学家以大肠杆菌为实验材料进行实验(如下图所示),证实了DNA是以半保留方式复制的。实验过程与方法:
(1)在含15N的培养基中培养大肠杆菌若干代,使其DNA双链均被15N标记(试管①)
(2)转至含14N的培养基中培养,每30 min繁殖一代
(3)取出每代DNA样本,离心分层
②③④⑤试管是该实验可能出现的结果,
下列相关推论正确的是( )
A.该实验运用了同位素标记法,出现④所示结果至少需要90分钟
B.③是转入14N培养基中复制一代的结果,②是复制二代的结果
C.对得到“DNA以半保留方式复制”的结论起关键作用的是试管③
D.给试管④中加入解旋酶一段时间后离心出现的结果如试管⑤所示
C
三、DNA复制的过程
DNA复制示意图
DNA聚合酶
新合成的子链
DNA聚合酶
DNA解旋酶
游离的脱氧核苷酸
亲代DNA
两条DNA母链
两个完全相同的子代DNA
解旋
(耗能)
复制
碱基互
补配对
盘绕
解旋酶
DNA聚合酶
氢键
磷酸二酯键
腺嘌呤
胸腺嘧啶
胞嘧啶
鸟嘌呤
三、DNA复制的过程
两条DNA子链
只能催化DNA单链沿着5'→ 3'延伸合成
DNA的复制:(间期)
是指以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。
(边解旋边复制)
场所
时间
条 件 模板
原料
能量
酶
原则
特点
方向
意义
亲代DNA的两条链
4种游离的脱氧核苷酸
解旋酶、DNA聚合酶等
ATP
细胞分裂前的间期
碱基互补配对原则(A-T、G-C)
边解旋边复制、半保留复制
从子链的5' → 3' 端延伸
三、DNA复制的过程
总结
主要是细胞核
通过复制将遗传信息从亲代细胞传递给子代细胞,从而保持了遗传信息的连续性
(2)原核生物:单起点双向复制
P56拓展应用2
左图为果蝇DNA的电镜照片,图中的泡状结构叫作DNA复制泡,是DNA上正在复制的部分。
果蝇DNA复制的电镜照片
(1)真核生物:多起点双向复制
优点:提高复制效率
2n个
2个
2n-2个
0个
四、DNA复制的有关计算
亲代DNA分子经n次复制后,则
①子代DNA分子数:
②含15N的DNA分子数:
④不含15N的DNA分子数:
③只含15N的DNA分子数:
⑤子代DNA分子中脱氧核苷酸链数:
⑥ 15N脱氧核苷酸链数:
⑦新合成的脱氧核苷酸链数:
2n+1条
2条
2n+1-2条
画一画:按照半保留复制原则,绘制DNA复制两次的示意图
假设一个DNA分子中含有m个腺嘌呤,则亲代DNA:
m( 2n-1)
①经过n次复制共需要消耗腺嘌呤脱氧核苷酸个数为:
②第n次复制需要消耗腺嘌呤脱氧核苷酸个数为:
m( 2n-2n-1)= m × 2n-1
四、DNA复制的有关计算
练一练
若两条链都含32P的DNA分子的分子量是M,两条链都不含32P的DNA的分子量为N。现将含32P的DNA的细菌放在不含32P的培养基上让其分裂a次,则子代细菌的DNA的平均分子量是( )
A.[N(2a-2)+M]/2a
B.[N(2a-1)+M]/2a
C.[M(2a-2)+N]/2a
D.[N(2a-1)+M]/(2a-2)
B
大本P91
练一练
小本P212
12.蚕豆根尖细胞在含3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸培养基中完成一个细胞周期,然后在不含放射性标记的培养基中连续分裂2次,在第二次分裂中期,其染色体的放射性标记分布情况是( )
A.每条染色体的两条单体都被标记B.每条染色体中都只有一条单体被标记C.只有半数的染色体中一条单体被标记D.每条染色体的两条单体都不被标记
C
建议删掉的题目如下:
大本P91 例2
小本P210-213 5、12、14、15
课后作业
Lavf56.40.101
Tencent APD MTS
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