第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数-【金版教程】2024-2025学年高中生物必修3 生物技术与工程 作业与测评word（人教版2019 单选版）

第2课时　微生物的选择培养和计数 知识点一　选择培养基 1．某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R，比较理想的方法是采用(　　) A．天然培养基 B．稀释涂布平板法 C．利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基 D．用显微镜直接观察、寻找，再培养 答案　C 解析　在培养过程中可以通过采用利于该微生物生长繁殖而抑制其他微生物生长繁殖的选择培养基，使微生物R能在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖，C正确。 2．选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物，利用不含有机物的培养基、缺氮培养基、含尿素(不含其他氮源)的培养基，可从土壤中分离出的微生物依次是(　　) A．硝化细菌、放线菌、根瘤菌 B．根瘤菌、青霉菌、固氮菌 C．异养型细菌、放线菌、硝化细菌 D．自养型细菌、固氮菌、分解尿素的细菌 答案　D 解析　不含有机物的培养基中能筛选出自养型微生物，如硝化细菌，缺氮培养基可以筛选固氮微生物，如固氮菌，含尿素(不含其他氮源)的培养基能筛选能合成脲酶的微生物，如分解尿素的细菌，D正确。 3．下列关于选择培养基的叙述，不正确的是(　　) A．选择培养基可允许特定种类的微生物在其上生长 B．制备选择培养基时，应根据所选微生物的特点确定培养基的配方 C．筛选能分解尿素的细菌时，应以尿素作为唯一的氮源 D．与普通培养基相比，选择培养基上生长的微生物的数量一般较多 答案　D 解析　普通培养基可满足多数微生物的生长需求，而选择培养基上只能生长特定种类的微生物，因此与普通培养基相比，选择培养基上生长的微生物的数量一般较少，D错误。 知识点二　微生物的选择培养和数量测定 4．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是(　　) A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B．只要稀释倍数合适，通过涂布就可以分散成单个细菌 C．将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽，冷却后再进行涂布 D．涂布时要在酒精灯火焰旁进行，培养皿皿盖也要放在酒精灯火焰附近 答案　D 解析　在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物通过在培养基上涂布将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，B正确；在涂布时将培养皿打开一个缝隙，在酒精灯火焰旁进行涂布，不要将皿盖完全打开，D错误。 5．判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是(　　) A．不接种的选择培养基 B．接种的选择培养基 C．接种的牛肉膏蛋白胨培养基 D．不接种的牛肉膏蛋白胨培养基 答案　C 解析　判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的完全培养基，即牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组(不作选择处理的组别)，若选择培养基(实验组)上只生长了对照组上的部分微生物，说明选择培养基起到了选择作用，C正确。 6．某同学计划用选择培养基筛选尿素分解菌，关于实验方案下列说法正确的是(　　) A．尿素分解菌能分解尿素是因为它们能合成脲酶 B．进行梯度稀释的时候每次吸取的菌液量是随意的 C．从烧杯取出涂布器在火焰上灼烧后要放回烧杯中进行冷却 D．涂布不同稀释倍数菌液的平板的培养时间应随菌液浓度的增大而增加 答案　A 解析　进行梯度稀释的时候每次吸取的菌液量是计算好的，B错误；从烧杯取出涂布器在火焰上灼烧后不可放回烧杯中，避免引燃杯中酒精，C错误；涂布不同稀释倍数菌液的平板的培养时间应该一致，D错误。 7．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是(　　) A．在距地表3～8 cm接近中性的潮湿土壤中取样 B．在30～37 ℃条件下培养，并定期观察记录 C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D．用加入硝酸盐为唯一氮源的培养基筛选分解尿素的细菌 答案　D 解析　细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3～8 cm的土壤层，A正确；细菌一般在30～37 ℃下培养1～2 d，可以每24 h观察记录一次，B正确；将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，检验平板灭菌是否合格，C正确；用以尿素为唯一氮源的选择培养基可筛选出分解尿素的细菌，D错误。 8．下列有关微生物数量测定的叙述，不正确的是(　　) A．稀释涂布平板法可用于分离微生物和统计样品中活菌数目 B．样品稀释度直接影响平板的菌落数目 C．利用细菌计数板或血细胞计数板通过显微镜直接计数 D．细菌计数板与血细胞计数板的计数原理不同 答案　D 解析　稀释涂布平板法除用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目，A正确；利用稀释涂布平板法计数时，样品稀释度直接影响平板的菌落数目，B正确；细菌计数板或血细胞计数板都是通过显微镜直接计数的，C正确；细菌计数板与血细胞计数板的计数原理相同，二者均是通过显微镜直接计数的，D错误。 9．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是(　　) A．采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数 B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数 D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数在30～300间且差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果 答案　C 解析　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，A正确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，密度过大会不好计数，影响结果的准确性，C错误；涂布三个平板，作为重复组，若三个平板统计的菌落数在30～300间且相差不大，取其平均值作为统计结果能增强实验的说服力与准确性，D正确。 10．在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应稀释倍数为106的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。下列有关叙述，不合理的是(　　) A．甲同学出现这种结果的原因可能是土样不同，也可能是操作过程出了问题 B．可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染 C．让其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学操作无误 D．B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则 答案　D 解析　甲同学获得的菌落数远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能是由于操作过程中被污染，A合理；受到污染可能是因为培养基灭菌不彻底，或操作过程中没有保证无菌操作，将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，可以证明培养基是否受到污染，B合理；若题述结果是土样不同造成的，让其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学操作正确，C合理；B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，C选项的实验思路遵循了实验的重复原则，D不合理。 11．关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述不正确的是(　　) A．除尿素外培养基中还需要添加碳源、无机盐等 B．过热的涂布器不能放在盛有酒精的烧杯中 C．对10 mL土样稀释1×106倍后，取0．1 mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10 mL土样中分解尿素的细菌数为2．55×108个 D．使用前对试管和培养皿做标记，防止混淆 答案　C 解析　过热的涂布器放在酒精中，会引燃酒精，B正确。 12．研究小组利用稀释涂布平板法来调查某河流中大肠杆菌的数量。每一个浓度的菌液涂布四个平板，并且设置空白对照组。下列关于该过程中操作步骤的叙述，正确的是(　　) A．涂布前，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后还要冷却一段时间 B．涂布完成后，在培养皿的皿盖上做标记，并将培养皿倒置培养 C．计算平板上的菌落数时，四个培养皿上的菌落数无论多少，都要平均处理 D．若空白对照组有5个菌落，则应在实验组数据的基础上减去5，以获得最准确的数据 答案　A 解析　使用涂布器涂布时，要先将沾有少量酒精的涂布器进行灼烧灭菌，待酒精燃尽后还要冷却一段时间后再进行涂布，A正确；为了避免混淆，最好在使用前做好标记，且应在培养皿的皿底上做标记，B错误；计算平板上的菌落数时，应选择菌落数在30～300的平板进行计数，且四个平板的数据不能差距太大，C错误；若空白对照组有5个菌落，说明有杂菌污染，需要重新进行实验，D错误。 13．耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出可高效产生耐高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接到同时含有葡萄糖和淀粉的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如图2所示情况。下列叙述错误的是(　　) A．过程①、②属于稀释涂布平板法的操作 B．甲、乙试管中的液体均为无菌水 C．Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法 D．图2中周围显蓝色的菌落中含有所需菌种 答案　D 解析　甲、乙试管中的液体是用于样品稀释的，应为无菌水，B正确；淀粉与碘液反应后呈蓝色，嗜热菌产生的淀粉酶将淀粉水解后菌落周围就不能呈蓝色，因此周围不显蓝色的菌落中含有所需菌种，D错误。 14．某生物兴趣小组试图探究山羊瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌)。实验步骤如图所示。请回答下列问题： (1)该实验中所用培养基在成分上的特殊要求是________________；培养基中的葡萄糖可以为细菌提供________；培养基中的KH2PO4和Na2HPO4的作用有_________________________ _________________。培养基在使用前需用________________法进行灭菌。 (2)实验中所用的培养皿、锥形瓶、试管都必须进行灭菌，常用的灭菌方法是________。采用的分离纯化细菌的方法是____________________。实验过程中，除了需将接种后的平板放在适宜的环境中培养一段时间后观察，还需要设置一在相同条件下培养的__________________作为对照实验，其目的是____________________。判断该选择培养基是否起到选择作用，需要设置的对照是__________________________。 (3)为了计数细菌，将取自瘤胃中的液体进行稀释，接种在培养基上，放置在37 ℃恒温培养箱中培养24～48 h，统计菌落数。选取菌落数在________范围内的平板进行计数。 答案　(1)以尿素为唯一氮源　碳源　为细菌生长提供无机盐、作为缓冲液维持培养液的pH　湿热灭菌(高压蒸汽灭菌) (2)干热灭菌　稀释涂布平板法　未接种的空白培养基　检测培养基是否被污染　接种的牛肉膏蛋白胨培养基 (3)30～300 15．多菌灵是一种广谱性有机杀菌剂，对多种由真菌引起的作物病害有一定的防治效果，在我国的使用范围广泛，但其残留能引起肝病和染色体畸变。某科研小组从长期受多菌灵污染的土壤中取样，进行了多菌灵降解菌的分离，分离过程如下： ―→―→―→―→ 请回答下列有关问题。 (1)“第二步”所用的培养基是以多菌灵为唯一碳源的选择培养基，选择培养基的作用原理是____________________________________________________________；“第二步”的目的是________________________。 (2)与“第二步”所用培养基相比，培养基A中还需要加入的成分是________。涂布平板过程中的无菌操作有哪些？___________________________________________________________ ________(至少答出2点)。 (3)对涂布的平板进行培养时，将已接种的培养基和一个未接种的培养基都放入恒温箱中培养，这样操作的目的是________________________。 (4)若研究人员测得每克土壤样品中有多菌灵降解菌2×106个，涂布平板时所用稀释液的体积为0．1 mL，且每个平板上的菌落数分别为190个、200个、210个，则土壤样品的稀释倍数为________。 答案　(1)允许特定种类的微生物生长，抑制或阻止其他种类微生物的生长　筛选多菌灵降解菌 (2)琼脂　将沾有酒精的涂布器在酒精灯火焰上灼烧；涂布过程在酒精灯火焰附近进行(合理即可) (3)检测培养基是否灭菌彻底(或是否被污染) (4)103 解析　(4)已知每克土壤样品中有多菌灵降解菌2×106个，涂布平板时所用稀释液的体积为0．1 mL，且每个平板上的菌落数分别为190个、200个、210个，即平均菌落数为200个，可计算土壤样品的稀释倍数＝2×106÷(200÷0．1)＝103。 16．科研人员偶然从土壤中筛选出一种可以降解塑料的细菌，它能够在30 ℃下经过6个星期完全降解PET薄膜。科研人员为进一步检测土壤中可降解塑料的细菌的数量，进行了如图所示实验。回答下列问题： (1)该实验所采用的接种方法是________________，对本实验中所使用的培养皿、锥形瓶等玻璃器皿进行灭菌，常用的灭菌方法为____________。 (2)有三位同学各取0．1 mL的培养液进行涂布培养，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数分别是47和53；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数分别是43、47和51；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数分别是11、42和55。请对三位同学的统计结果进行评价，并简单阐述统计结果正确与否的原因：________________________________ _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (3)结合图示和(2)中统计结果分析，每克样品中细菌数的理论值为________。除了上述的计数方法外，还可采用在显微镜下直接计数。在相同条件下，采用这两种方法对同一培养液进行计数时，在操作和计算均正确的前提下，两种计数结果是否完全相同？原因是：______________________________________________________________________________________________________________________________________________。 答案　(1)稀释涂布平板法　干热灭菌法 (2)甲同学错误，因为甲同学只涂布了两个平板，实验数据说服力不够；乙同学正确，乙同学涂布的三个平板的计数结果相近，且均在30～300之间；丙同学错误，丙同学其中一个平板的计数结果与另外两个相差太远，说明操作过程中出现错误，数据缺乏准确性 (3)4．7×107　不完全相同，稀释涂布平板法的结果偏低，因为该方法只能统计活菌的数量，且当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落；而显微镜直接计数法统计的是活菌数和死菌数的总和 解析　(2)进行菌落计数时，一般选择菌落数在30～300之间的平板进行计数。分析3名同学的数据可知，甲同学只涂布了两个平板，实验数据不足，说服力不够；丙同学涂布的平板中有一个平板计数的结果与另外两个相差太远，说明操作过程中出现错误，数据缺乏准确性；乙同学涂布的三个平板计数结果相近，且均在30～300之间，能作为正确的统计结果。 (3)由题图可知，涂布平板用的稀释液的稀释倍数为105。每克样品中的细菌数＝(3个平板的平均菌落数÷涂布取样量)×稀释倍数，由(2)可知，可用乙同学的结果计数，即3个平板的平均菌落数为(43＋47＋51)÷3＝47(个)，则每克样品中的细菌数为(47÷0．1)×105＝4．7×107(个)。 一、单项选择题(每题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的) 1．金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，实验中下列做法错误的是(　　) A．对接种环进行灼烧处理 B．带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌后才能倒掉 C．带菌培养基必须经加热后才能倒掉 D．接种后双手必须经肥皂洗净，再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭 答案　C 解析　加热并不能保证达到灭菌效果，C错误。 2．科学家采集了某海域深海冷泉附近的沉积物样品，经分离、鉴定得到了能降解多种难降解的多糖物质的厌氧型拟杆菌新菌株，并进一步研究了其生物学特性。下列说法错误的是(　　) A．将样品经厌氧培养一段时间后，接入以葡萄糖为唯一碳源的培养基中培养 B．可采用稀释涂布平板法或平板划线法接种，以获得含纯种拟杆菌新菌株的培养物 C．推测从该沉积物样品中分离得到的拟杆菌所分泌的酶，可能具有耐低温的特性 D．有些微生物只能在深海冷泉的特定环境中生存，因此样品中的微生物不一定能被全部分离出来 答案　A 解析　根据题意“科学家采集了某海域深海冷泉附近的沉积物样品，经分离、鉴定得到了能降解多种难降解的多糖物质的厌氧型拟杆菌新菌株”，可知应该以难降解的多糖为碳源，进行筛选，A错误；分离纯化微生物可采取稀释涂布平板法或平板划线法接种，B正确；由于该菌体生活在深海冷泉附近，因此推测从该沉积物样品中分离得到的拟杆菌所分泌的酶，可能具有耐低温的特性，C正确；由于有些微生物只能在深海冷泉的特定环境中生存，因此经培养后，样品中的有些微生物不能被分离筛选出来，D正确。 3．平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列相关描述正确的是(　　) A．都可计算菌液中的活菌数 B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面 C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养 D．都会在培养基表面形成单个的菌落 答案　D 解析　平板划线法不可计数，稀释涂布平板法可计算菌液中的活菌数，A错误；平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面，B、C错误；平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个的菌落，D正确。 4．在光亮处用同一种培养液分别培养单细胞绿藻和单细胞酵母菌，其结果如图所示(甲为绿藻，乙为酵母菌)。造成这种现象的原因是(　　) A．培养液中缺少无机盐 B．培养液中氧气含量太高 C．培养液中有机成分少 D．培养液中不含二氧化碳 答案　C 解析　酵母菌为异养型生物，需直接摄取有机物，而绿藻是自养型生物，可以进行光合作用合成有机物，所以在培养液中酵母菌最终被淘汰说明培养液中有机成分少，C正确。 5．北京冬奥会食堂让各国运动健儿爱上中国味道，其餐余垃圾在垃圾集中点采用生化＋雾化＋膜过滤技术处理后，可以达到无次污染的标准。为筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物，提高“生化”处理的效率，研究人员将餐余垃圾机械化处理后加入装有无菌水的锥形瓶中制备餐余垃圾浸出液，然后进行如图所示操作，下列说法错误的是(　　) A．餐余垃圾浸出液在接种前通常需要进行高压蒸汽灭菌处理 B．可用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上 C．X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基 D．图中降解淀粉最高效的微生物是⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型 答案　A 解析　若对餐余垃圾浸出液在接种前进行高压蒸汽灭菌处理，则会杀死菌种，导致实验失败，A错误；可用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上，B正确；结合题意可知，本实验的目的是筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物，故图中X培养基应以淀粉为唯一碳源，且应添加抗生素，Y培养基是液体培养基，用于扩大培养，其中不含凝固剂琼脂，C正确；淀粉遇碘显蓝色，加入碘液后，能够分解淀粉的菌落周围会出现透明圈，图中降解淀粉最高效的微生物是⑤(透明圈最大)；不同微生物形成的菌落特征不同，可根据菌落特征初步判断微生物类型，D正确。 6．生物兴趣小组的三位同学吃冰激凌后有两人严重腹泻，他们怀疑冰激凌中大肠杆菌超标。卫生部门规定1000 mL自来水37 ℃培养48 h后大肠杆菌菌落数不能超过3个，于是他们设计实验对此冰激凌进行检测。下列实验操作中合理的是(　　) A．再去小店买一个同样品牌的同种冰激凌，然后配制伊红美蓝培养基(该培养基可用来鉴别大肠杆菌)，灭菌、倒平板 B．取10 mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释、稀释倍数为1×10～1×105 C．取各个稀释浓度的冰激凌液各0．1 mL，用涂布平板法进行接种，每个浓度至少涂布3个平板，共培养18个平板，在适宜温度下培养48 h D．统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小 答案　D 解析　若只对一个冰激凌进行检测，样品太少，不能确定是某个冰激凌的质量问题还是这个品牌冰激凌的质量问题，正确的做法是再去小店随机买多个同样品牌的同种冰激凌，A错误；测定细菌的数量，一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，应取10 mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释、稀释倍数为1×10～1×106，B错误；实验应该设置对照，取各个稀释浓度的冰激凌液各0．1 mL，用涂布平板法进行接种，每个浓度至少涂布3个平板，再取一个平板接种等量无菌水(作为对照)，共培养19个平板，在适宜温度下培养48 h，当对照组无菌落生长时，选择菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小，D正确。 7．下列是关于“酵母菌的纯培养”的叙述，其中正确的是(　　) A．用蒸馏水配制马铃薯琼脂培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B．酵母菌的纯培养物就是不含代谢废物的酵母菌群体 C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时 D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 答案　A 解析　用蒸馏水配制马铃薯琼脂培养基时，需要先灭菌再倒平板，A正确；酵母菌纯培养物是由一个酵母菌繁殖所获得的酵母菌群体，不含其他杂菌，B错误；培养温度因酵母菌种类不同而稍有差异，课本中酵母菌培养温度为28 ℃左右，C错误；划线时最后一区的划线不能与第一区的相连，D错误。 8．营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营养物质(如氨基酸、维生素)的能力，必须在基本培养基中补充特殊营养物质才能正常生长的一类菌株。可自然产生或人工诱导获得。用一定方法诱变大肠杆菌并将其接种到甲培养基上，一段时间后将获得的菌落影印接种(不改变菌落位置)到乙、丙两培养基中进一步培养一段时间，可筛选出营养缺陷型的菌株，结果如图所示。下列说法不正确的是(　　) A．将大肠杆菌接种到甲培养基的方法为稀释涂布平板法 B．甲、丙培养基中均添加了特殊营养物质 C．乙培养基中能生长的为所需的营养缺陷型菌株 D．影印培养法使用的是固体培养基进行微生物培养 答案　C 解析　由菌落的分布情况可知，将大肠杆菌接种到甲培养基的方法为稀释涂布平板法，A正确；根据甲、丙两培养基中菌落位置可知，甲培养基中的菌种在丙培养基中均能生长，再结合乙培养基中菌落的生长情况，可推测甲培养基和丙培养基中都添加了某种特殊物质，B正确；乙培养基中不能生长的为所需的营养缺陷型菌株，C错误；分析图示可知，影印培养法使用的是固体培养基进行微生物培养，D正确。 9．研究小组为了探究覆盖保鲜膜对西瓜表面微生物的种类和数量的影响，他们将覆盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液，再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是(　　) A．应用液体培养基接种浸出液进行培养 B．应采用平板划线法对浸出液进行接种 C．每组至少设置三个平板，确保实验结果的准确性 D．只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照 答案　C 解析　要探究微生物种类和数量的变化，应采用固体培养基，用稀释涂布平板法进行接种，液体培养基无法观察到菌落，不便区分微生物种类，平板划线法不能对微生物进行计数，A、B错误；每组至少设置三个平板，避免偶然性，确保实验结果的准确性，C正确；对照组还需要设置接种没有覆盖保鲜膜的西瓜的瓜瓤浸出液，D错误。 二、非选择题 10．戴口罩、勤洗手是预防常见传染病的有效措施。为衡量某免洗洗手凝胶的清洗效果，研究人员检测了用该凝胶洗手前后，手部细菌的含量。用凝胶洗手前的检测流程如图。回答下列问题： (1)在进行实验前需要配制培养基，配制培养基通常包括计算、称量、溶解、调pH、灭菌等环节，其中调pH的过程________(填“需要”或“不需要”)在酒精灯火焰旁进行。为检验培养基灭菌是否彻底，可______________________________________________________。 (2)为统计凝胶洗手前手部细菌的数量，应选择的接种方法是________________(填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”)。除该方法外，还可使用显微镜直接计数法计数，但后者所得数据往往比前者________(填“大”或“小”)。 (3)根据图示的步骤得出的实验结果可信度较低，为了提高实验结果的可信度，请给出你的建议：___________________________________________________________________________ _____________________________。 (4)培养一段时间后可根据______________________(至少填两项)等菌落特征初步判断培养基上细菌的类型。为了计算用凝胶洗手前手部单位面积的细菌数量，除图中所给的信息外，还需要知道____________________________________。 答案　(1)不需要　将未接种的培养基在恒温培养箱中倒置培养一段时间，观察是否有菌落产生 (2)稀释涂布平板法　大 (3)同一稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰(合理即可) (4)菌落的大小、形状、颜色　菌悬液的稀释倍数和涂布平板时所取稀释液的体积 解析　(1)调pH的过程不需要在酒精灯火焰旁进行，因为调节pH的步骤在灭菌之前。为检验培养基灭菌是否彻底，可将未接种的培养基在恒温培养箱中倒置培养一段时间，观察是否有菌落产生，若未接种的培养基上也有菌落生长，则说明培养基灭菌不合格。 (2)为统计凝胶洗手前手部细菌的数量，应选择的接种方法是稀释涂布平板法。显微镜直接计数法在计数时不能区分活菌和死菌，而用稀释涂布平板法计数时，统计的是活菌的菌落数，且由于当两个或多个细胞连在一起生长时，观察到的只是一个菌落，所以使用显微镜直接计数法计数所得数据往往比使用稀释涂布平板法计数所得数据大。 (4)不同细菌菌落的大小、形状、颜色等可能不同，所以可根据菌落的大小、形状、颜色等菌落特征初步判断培养基上细菌的类型。用凝胶洗手前手部单位面积的细菌数量＝(平板上的菌落数÷涂布时取样的体积×稀释倍数×10)÷取样的面积，因此，除图中所给信息外，还需要知道菌悬液的稀释倍数和涂布平板时所取稀释液的体积。 11．人和哺乳动物的尿液中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可降解尿素。下图是某同学从土壤中筛选出降解尿素菌株的实验流程。请回答有关问题： ―→―→―→ (1)用以________为唯一氮源的培养基筛选能分泌脲酶的细菌。从功能上讲，该培养基属于________培养基。该类细菌选择培养时必须进行________操作。 (2)采用________________法时需要将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养、菌落计数。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在__________________旁进行操作。稀释处理的目的是________________________________________，接种后的培养皿倒置于适宜温度的恒温箱中培养，平板倒置培养的目的主要是_________________________________________________。 (3)在培养基中加入酚红指示剂，若培养基中存在分泌脲酶的细菌，其菌落周围会出现________，这是由于尿素被分解产生________，使培养基pH升高，酚红指示剂将变红。变色区域越大，表明该菌株降解尿素的能力________。 (4)分离细菌时使用固体平板培养基的原因是______________________________________。 答案　(1)尿素　选择　无菌 (2)稀释涂布平板　酒精灯火焰　得到单菌落，避免土壤溶液中菌体浓度过高　防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染 (3)红色环带　氨(或NH3)　越强 (4)固体培养基上细菌分裂产生的子代个体不易分散，从而形成菌落 解析　(1)欲筛选出能降解尿素的菌株，培养基中应以尿素为唯一氮源，不能降解尿素的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基。该类细菌选择培养时为了避免杂菌污染必须进行无菌操作。 (2)常用稀释涂布平板法进行接种培养、菌落计数，稀释菌液的过程中每一步都要在酒精灯火焰旁进行，以避免周围微生物的污染。为了得到单菌落，需将土壤溶液进行一系列的梯度稀释，然后将合适的稀释浓度的菌液涂布到平板培养基表面，从而使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，进而能在培养基表面形成单个菌落，便于获得纯培养物。平板倒置培养的目的主要是防止培养过程中皿盖上的冷凝水滴落在培养基表面，造成杂菌污染。 (3)细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，遇酚红指示剂变红。降解尿素能力越强的菌株，菌落周围形成的红色环带越大。 (4)液体培养基中难以得到成形的菌落，而固体培养基上可以形成肉眼可见的菌落。 12．某同学发现超市里袋装牛奶的灭菌方式有两种：一种是巴氏灭菌，保质期时间短；一种是超高温灭菌，保质时间长。该同学想通过实验的方法验证超高温灭菌的牛奶所含的细菌比巴氏灭菌的牛奶少(不考虑奶牛品种、产地等因素)，以下是相关检测实验，请回答下列问题： (1)一般来说，培养基中的营养成分应含有____________________________(写出四种)。 (2)对培养基进行灭菌的方法是____________，在对培养基进行灭菌后，待培养基冷却至50 ℃左右时，需要在________________附近倒平板，平板冷凝后，要将平板________，这样放置的原因是________________________________________。 (3)待测牛奶在涂布前需进行系列稀释，原因是____________________________________。 (4)涂布牛奶稀释液应选择的工具是____________，该涂布工具最适合的灭菌方法是____________。 (5)实验结束后，统计的菌落数目比实际活菌的数目要________(填“多”或“少”)。 (6)实验结果表明，超高温灭菌的牛奶形成的菌落数要比巴氏灭菌的少，从细菌中酶的角度理解，这体现了酶的________________的特性。 答案　(1)碳源、氮源、水和无机盐 (2)湿热灭菌　酒精灯火焰　倒置　防止皿盖冷凝水落入培养基，造成污染 (3)在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞 (4)涂布器　灼烧灭菌法　(5)少 (6)作用条件比较温和 核心素养示例 13．物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。 (1)要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是________。 (2)在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________________________________________。 (3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即____________________________________________________________________________________________________________________________。 (4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。 ①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加________，三处滴加量相同。 ②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明____________________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明______________________________。 答案　(1)W (2)乙　乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W (3)将甲、乙菌分别接种在无氮源的培养基上；若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源，若细菌不能生长，则说明该细菌不能利用空气中的氮气作为氮源 (4)①缓冲液　②缓冲液不能降解W　酶E与天然酶降解W的能力相近 解析　(1)要从土壤中分离出能降解含氮有机物W的目标菌，所用选择培养基应以该特定物质W为氮源。 (2)图示信息显示，在乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W，若要得到目标菌，应该选择乙菌落进一步纯化。 (3)若要通过设计实验确定甲、乙两种细菌能否以空气中的氮气作为氮源，需将甲、乙菌分别接种在无氮源的培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源，若细菌不能生长，则说明该细菌不能利用空气中的氮气作为氮源。 (4)①实验应遵循单一变量原则，故C处应滴加缓冲液。②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明缓冲液不能降解W；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明酶E与天然酶降解W的能力相近。 1 学科网（北京）股份有限公司 $$