内容正文:
第3节 DNA的复制
[课标要求]1.概述DNA分子的半保留复制(生命观念)。2.通过分析DNA半保留复制的实验证据,阐明运用假说—演绎法进行科学探究的基本思路(科学思维)。
知识点1 对DNA分子复制的推测及实验证据
1.对DNA复制的推测
(1)假说:__半保留__复制方法。
(2)提出者:__沃森__和__克里克__。
2.内容
(1)解旋:DNA分子复制时,DNA分子的__双螺旋__解开,互补的碱基之间的__氢键__断裂。
(2)复制:以__解开的两条单链__作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据__碱基互补配对__原则,通过形成__氢键__,结合到作为模板的单链上。
(3)特点:新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的__一条链__。
3.DNA半保留复制的实验证据
(1)实验方法:__同位素标记__技术和离心技术。
(2)实验原理:只含15N的DNA密度大,只含14N的DNA密度小,一条链含14N、一条链含15N的双链DNA密度__居中__。
(3)实验假设:DNA分子以__半保留__的方式复制。
(4)实验结果预期:离心后应出现__三__条DNA带。
①重带(密度最大):两条链都为15N标记的亲代双链DNA。
②中带(密度居中):一条链为14N标记,另一条链为15N标记的子代双链DNA。
③轻带(密度最小):两条链都为14N标记的子代双链DNA。
(5)实验过程
(6)实验结果:①立即取出,提取DNA→离心→__重__带。
②繁殖一代后取出,提取DNA→离心→__全部__中带。
③繁殖两代后取出,提取DNA→离心→1/2轻带、1/2中带。
(7)实验结论:DNA的复制是以__半保留__的方式进行的。
知识点2 DNA分子的复制
1.概念
以__亲代DNA__为模板合成__子代DNA__的过程。
2.时间(真核生物中)
细胞有丝分裂前的__间期__,减数分裂前的__间期__。
3.过程
解旋
子合成链
子代DNA:每条新链与其对应的模板链盘绕成__双螺旋结构__形成
4.结果
形成两个与__亲代DNA分子__完全相同的子代DNA分子。
5.条件
模板、原料、__能量__、__酶__。
6.意义
将__遗传信息__从亲代细胞传给子代细胞,从而保持了__遗传信息__的连续性。
7.特点
(1)__边解旋边复制__;(2)__半保留复制__。
8.准确复制的原因
(1)DNA分子独特的__双螺旋结构__,为复制提供了精确的模板。
(2)通过__碱基互补配对原则__,保证了复制能够准确地进行。
思考:若DNA分子在复制过程中出现了差错,则会产生什么影响?
提示 产生的子代DNA与亲代DNA出现结构上的差异,可能会引起性状上的变异。
(教材P55“旁栏思考”)第一代只出现一条居中的DNA条带,这个结果排除了哪种复制方式?
提示 全保留复制
探究点1 DNA分子的复制
项目
内容
概念
以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程
复制时间
有丝分裂前的间期和减数分裂前的间期
复制场所
细胞核(主要)、线粒体和叶绿体
所需条件
模板
解旋后的两条DNA单链
原料
四种脱氧核苷酸
能量
ATP
酶
解旋酶、DNA聚合酶等
复制过程
(1)解旋:在解旋酶的作用下,两条螺旋的双链解开;
(2)合成子链:以解开的每一条母链为模板,以游离的四种脱氧核苷酸为原料,遵循碱基互补配对原则,在有关酶的作用下,各自合成与母链互补的子链;
(3)形成子代DNA:每条子链与其对应的母链盘旋成双螺旋结构,从而形成2个与亲代DNA完全相同的子代DNA分子
复制特点
半保留复制;边解旋边复制
复制结果
形成两个完全相同的DNA分子
准确复制
的原因
(1)DNA分子独特的双螺旋结构,为复制提供精确模板;
(2)碱基互补配对原则保证复制过程准确无误地进行
【例1】 (2023·山东)将一个双链DNA分子的一端固定于载玻片上,置于含有荧光标记的脱氧核苷酸的体系中进行复制。甲、乙和丙分别为复制过程中3个时间点的图像,①和②表示新合成的单链,①的5端指向解旋方向,丙为复制结束时的图像。该DNA复制过程中可观察到单链延伸暂停现象,但延伸进行时2条链延伸速率相等。已知复制过程中严格遵守碱基互补配对原则,下列说法错误的是( )
A.据图分析,①和②延伸时均存在暂停现象
B.甲时①中A、T之和与②中A、T之和可能相等
C.丙时①中A、T之和与②中A、T之和一定相等
D.②延伸方向为5端至3端,其模板链3端指向解旋方向
答案 D
解析 依据题图分析,图甲时新合成的单链①比②短,图乙时①比②长,因此可以说明①和②延伸时均存在暂停现象,A项正确;①和②两条链中碱基是互补的,图甲时新合成的单链①比②短,但②中多出的部分可能不含有A、T,因此①中A、T之和与②中A、T之和可能相等,B项正确;①和②两条链中碱基是互补的,丙为复制结束时的图像,新合成的单链①与②等长,故图丙时①中A、T之和与②中A、T之和一定相等,C项正确;①和②两条单链由一个双链DNA分子复制而来,其中一条母链合成子链时①的5端指向解旋方向,那么另一条母链合成子链时②的延伸方向为5端至3端,其模板链5端指向解旋方向,D项错误。
DNA的复制应注意以下4点
(1)DNA复制的主要场所是细胞核,其他如真核细胞的线粒体、叶绿体及原核细胞的拟核等也含有DNA,也进行DNA的复制。
(2)解旋酶:使DNA氢键断裂,双螺旋解开。DNA聚合酶:将游离的脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸长链。
(3)外部条件对DNA复制的影响:在DNA复制过程中,需要酶的催化和ATP供能。因此影响酶活性的因素和影响细胞呼吸的因素,都会影响DNA的复制。
(4)DNA复制的精确性并不意味着毫无差错,极个别的错误若保留下来,会导致生物的变异。
【例2】 大肠杆菌在含有3H-脱氧核苷培养液中培养,3H-脱氧核苷掺入到新合成的DNA链中,经特殊方法显色,可观察到双链都掺入3H-脱氧核苷的DNA区段显深色,仅单链掺入的显浅色,未掺入的不显色。掺入培养中,大肠杆菌拟核DNA第2次复制时,局部示意图如图。DNA双链区段①②③对应的显色情况可能是( )
A.深色、浅色、浅色
B.浅色、浅色、深色
C.浅色、深色、深色
D.深色、浅色、深色
答案 B
解析 DNA的复制方式为半保留复制,大肠杆菌在含有3H-脱氧核苷培养液中培养,核DNA第1次复制后产生的子代DNA的两条链一条被3H标记,另一条未被标记,如图所示,大肠杆菌拟核DNA第2次复制时,以两条链中一条被3H标记,另一条未被标记的DNA分子为模板,故DNA双链区段①为浅色,区域②③中两条子链均含有3H,其中一条模板链含有3H,一条模板链不含3H,故区域②③分别呈现浅色、深色(或深色、浅色),B符合题意。
探究点2 DNA分子半保留复制的有关计算
假设将一个全部被15N标记的DNA分子(0代)转移到含 14N的培养基中培养n代,过程如图所示。则:
1.DNA分子数
(1)子代DNA分子=2n个。
(2)含15N的DNA分子=2个。
(3)含14N的DNA分子=2n个。
(4)只含15N的DNA分子=0个。
(5)只含14N的DNA分子=(2n-2)个。
2.脱氧核苷酸链数
(1)子代DNA分子中脱氧核苷酸链=2n+1条。
(2)含15N的脱氧核苷酸链=2条。
(3)含14N的脱氧核苷酸链=(2n+1-2)条。
3.复制消耗的脱氧核苷酸数
设亲代DNA分子中含有某种脱氧核苷酸m个,则:
(1)经过n次复制共需要消耗游离的该种脱氧核苷酸m·(2n-1)个。
(2)第n次复制时,共需要消耗游离的该种脱氧核苷酸 m·2n-1个。
【例3】 下列关于DNA分子结构与复制的叙述,正确的是( )
①含有m个腺嘌呤的DNA分子第n次复制需要腺嘌呤脱氧核苷酸2n-1·m个 ②在一个双链DNA分子中,G+C占碱基总数的M%,那么该DNA分子的每条链中G+C都占该链碱基总数的M% ③细胞内全部DNA被32P标记后,在不含32P的环境中进行连续有丝分裂,第2次分裂的每个子细胞染色体均有一半有标记 ④1个DNA双链被32P标记后,复制n次,子代 DNA中有标记的占1/2n
A.①② B.②③
C.③④ D.②④
答案 A
解析 ①含有m个腺嘌呤的DNA分子第n次复制,需要2n-1个DNA分子进行复制,每个DNA分子需要m个腺嘌呤脱氧核苷酸,那么2n-1个DNA分子就需要2n-1·m个腺嘌呤脱氧核苷酸,①正确。②在一个双链DNA分子中,G+C占碱基总数的M%,由于两条链中G+C的数目是相等的,那么该DNA分子的每条链中G+C占该链碱基总数的比例都是M%,②正确。③细胞内全部DNA被32P标记后,在不含32P 的环境中进行连续有丝分裂,第2次分裂中期,每条染色体中都有一条姐妹染色单体被32P标记,在有丝分裂后期,着丝粒分裂后,有一半染色体带有标记,但带有标记的DNA随染色体向细胞两极的移动是随机的,③错误。④1个DNA双链被32P标记后,不管复制多少次,都只有2个DNA带有标记,所以复制n次,子代DNA中有标记的占2/2n=1/2n-1,④错误。
DNA分子复制相关计算的注意事项
(1)运用DNA半保留复制特点,分析被标记DNA分子的比例时,应注意求的是DNA分子数,还是脱氧核苷酸链数。
(2)运用DNA半保留复制特点,解决消耗某种脱氧核苷酸的数量问题时,应注意亲代DNA分子的两条母链被保留下来,不需消耗原料。
(3)在计算消耗脱氧核苷酸数时,要明确是经过n次复制还是第n次复制。
【例4】 具有N个碱基对的一个DNA分子片段,含有m个腺嘌呤脱氧核苷酸。
(1)该片段完成n次复制需要________(填字母)个游离的胞嘧啶脱氧核苷酸。
(2)该片段完成第n次复制需要________(填字母)个游离的胞嘧啶脱氧核苷酸。
A.(2n-1)(N-m)
B.2n-1(N-m)
C.2n-1 (N/2-m)
D.2n(N/2-m)
解析 由题意可知,该DNA分子片段含有胞嘧啶脱氧核苷酸的个数为(2N-2m)/2=N-m。(1)该片段完成 n次复制,共产生DNA分子数为2n个,新增DNA分子(2n-1)个。当其完成n次复制时,需要游离的胞嘧啶脱氧核苷酸数为(2n-1)(N-m)个,A项正确。(2)该片段完成(n-1)次复制时共产生DNA分子2n-1个,若再完成一次复制(也就是第n次复制),新增DNA分子数为2n-2n-1=2n-1个,故需要游离的胞嘧啶脱氧核苷酸数为2n-1(N-m)个,B项正确。
答案 (1)A (2)B
核心知识小结
[网络构建]
[答题必备]
1.DNA复制是指以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。
2.DNA复制的过程可分为三步:
(1)解旋:复制开始时,在细胞提供的能量的驱动下,解旋酶将DNA双螺旋的两条链解开。
(2)合成子链:DNA聚合酶等以解开的每一条母链为模板,以细胞中游离的4种脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的一条子链。
(3)螺旋:每条新链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构。
3.DNA复制的特点:边解旋边复制,半保留复制。
4.DNA复制需要的条件:模板、原料、能量、酶。
1.保证DNA复制准确无误地进行的最关键的步骤是( )
A.DNA解旋酶促进DNA的两条互补链分离
B.游离的脱氧核苷酸与母链碱基进行互补配对
C.脱氧核苷酸之间连接成与母链互补的子链
D.模板母链与互补子链盘绕成双螺旋结构
答案 B
解析 DNA复制过程严格遵循碱基互补配对原则,通过碱基互补配对,保证了复制能够精确地进行。
2.(2021·辽宁)下列有关细胞内的DNA及其复制过程的叙述,正确的是( )
A.子链延伸时游离的脱氧核苷酸添加到3端
B.子链的合成过程不需要引物参与
C.DNA每条链的5端是羟基末端
D.DNA聚合酶的作用是打开DNA双链
答案 A
解析 子链延伸的方向为5→3,故游离的脱氧核苷酸添加到3端,A项正确;子链的合成过程需要引物参与,B项错误;DNA每条链的5端是磷酸基团末端,3端是羟基末端,C项错误;解旋酶的作用是打开DNA双链,D项错误。
3.用15N标记含有100个碱基对的DNA分子,其中有胞嘧啶60个,该DNA分子在14N的培养液中连续复制四次。其结果不可能是( )
A.含有15N的DNA分子占1/8
B.含有14N的DNA分子占7/8
C.复制过程中需游离的腺嘌呤脱氧核苷酸600个
D.复制结果共产生16个DNA分子
答案 B
解析 由于DNA的复制方式是半保留复制,经过四次复制形成16个DNA分子,有2个DNA分子的一条链含有15N,另一条链含有14N,其余14个DNA分子的两条链都只含有14N,因此所有的DNA分子都含14N。该DNA分子中含有胞嘧啶60个,由此计算出含有鸟嘌呤60个,腺嘌呤和胸腺嘧啶各40个,复制四次需要腺嘌呤脱氧核苷酸的数量为40×(24-1)=600(个)。
4.将15N标记的大肠杆菌(其DNA经密度梯度离心后如图甲),转至以14NH4Cl为唯一氮源的培养液中培养,每20分钟繁殖一代。收集并提取DNA,进行密度梯度离心,图乙、丙、丁为离心结果模拟图。已知大肠杆菌DNA中胞嘧啶个数为x,下列有关叙述正确的是( )
A.繁殖过程中所需的嘌呤数等于嘧啶数
B.要得到图丙所示结果至少需要40分钟
C.图乙是大肠杆菌转入14N培养液中繁殖一代获得的结果
D.出现图丁结果至少需要游离的胞嘧啶脱氧核苷酸为4x
答案 A
解析 大肠杆菌的DNA是双链的,双链DNA分子中嘌呤数与嘧啶数相等,因此大肠杆菌繁殖过程中所需的嘌呤数等于嘧啶数,A项正确;DNA复制的特点是半保留复制,图丙中只有中带,DNA复制一次即可,故得到图丙所示结果至少需要20分钟,B、C项错误;图丁中有中带和轻带,出现图丁所示结果至少需要繁殖两代,需要游离的胞嘧啶脱氧核苷酸数为(22-1)·x=3x,D项错误。
5.如下图所示,图甲中的DNA分子有a和d两条链,将图甲中某一片段放大后如图乙所示,结合所学知识回答下列问题:
(1)图甲中,A和B均是DNA分子复制过程中所需要的酶,其中B能将单个的脱氧核苷酸连接到脱氧核苷酸链上,从而形成子链,则A是________酶,B是________酶。
(2)真核细胞中DNA复制时间是____________________________________;在复制完成后,两个子代DNA分开的时期为______________________________ ______________________________________________________________。
(3)图乙中,7是________________。DNA分子的基本骨架由_________(用图中数字表示)交替连接而成; DNA分子两条链上的碱基通过________(用图中数字表示)连接成碱基对。
(4)DNA分子通过复制,将________从亲代细胞传给了子代细胞,从而保持了________的连续性。
解析 (1)由题意可知,A是解旋酶,B是DNA聚合酶。(2)真核细胞DNA复制的时间是有丝分裂前的间期、减数分裂前的间期,复制后的DNA分子进入染色体中形成姐妹染色单体上的DNA分子,而姐妹染色单体在有丝分裂后期和减数分裂Ⅱ后期分开。(3)图乙中7的碱基与A配对,说明4是T ,故7是胸腺嘧啶脱氧核苷酸;DNA分子的基本骨架由5(磷酸)和6(脱氧核糖)交替连接而成;DNA分子两条链上的碱基通过9(氢键)连接。
答案 (1)解旋 DNA聚合 (2)有丝分裂前的间期、减数分裂前的间期 有丝分裂后期、减数分裂Ⅱ后期 (3)胸腺嘧啶脱氧核苷酸 5和6 9 (4)遗传信息 遗传信息
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