内容正文:
术语
课程标准
发酵 传统发酵技术
培养基 菌落
无菌技术 消毒
灭菌 煮沸消毒
巴氏消毒 湿热灭菌
干热灭菌 灼烧灭菌
培养物 纯培养物
纯培养 倒平板
选择培养基 稀释涂布平板法
平板划线法 显微镜计数法
血细胞计数板 细菌计数板
发酵工程 酶制剂
微生物肥料 微生物农药
微生物饲料 单细胞蛋白
获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础
1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提
2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术
3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物
4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法
5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法
发酵工程为人类提供多样的生物产品
1.举例说明日常生活中的某些食品是运用传统发酵技术生产的
2.阐明发酵工程利用现代工程技术及微生物的特定功能,工业化生产人类所需产品
3.举例说明发酵工程在医药、食品及其他工农业生产上有重要的应用价值
1.(2024·湖北,1)制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物,常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是( )
A.食用醋的酸味主要来源于乙酸
B.醋酸菌不适宜在无氧条件下生存
C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶
D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
题点 醋酸菌及醋酸发酵原理(选择性必修3 P7)。
答案 D
解析 醋酸菌是好氧型细菌,不适宜在无氧的条件下生存,B正确;在制醋时,缺少糖源的情况下,醋酸菌将乙醇转化为乙醛,再将乙醛转化为乙酸,因此醋酸菌体内含有催化乙醇氧化成乙酸的酶,C正确;醋酸菌属于细菌,没有核膜包被的细胞核和众多细胞器,因此没有线粒体,葡萄糖氧化分解发生在细胞质基质中,D错误。
2.(多选)(2024·河北,18)中国传统白酒多以泥窖为发酵基础,素有“千年老窖万年糟”“以窖养糟,以糟养泥”之说。多年反复利用的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物。下列叙述正确的是( )
A.传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的
B.窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系,使酿造过程不易污染杂菌
C.从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时,需在CO2或N2环境中进行
D.从谷物原料发酵形成的酒糟中,可分离出产淀粉酶的微生物
题点 酵母菌及酒精发酵的过程和原理(选择性必修3 P6)。
答案 ABD
解析 酵母菌是兼性厌氧微生物,在无氧条件下能进行酒精发酵,可用于酿酒、制作馒头和面包等,传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的,A正确;发酵池是泥质老窖,多年反复利用的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物,窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系,使酿造过程不易污染杂菌,B正确;从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时,需在有氧环境中进行,因为酵母菌在有氧条件下可大量繁殖,C错误;谷物中含有大量淀粉,用谷物原料发酵形成酒糟的过程中,有淀粉分解形成糖浆的过程,因此,从谷物原料发酵形成的酒糟中,可分离出产淀粉酶的微生物,D正确。
3.(多选)(2024·黑吉辽,19,改编)某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病,其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是( )
A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内,从感病植株上采集样品
B.将采集的样品充分消毒后,用蒸馏水冲洗,收集冲洗液进行无菌检测
C.将无菌检测合格的样品研磨,经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落
D.判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小
题点 (1)无菌技术(选择性必修3 P10、P11)。(2)微生物的选择培养(选择性必修3 P17、P18)。
答案 CD
解析 题干信息:某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病,故在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内,从未感病植株上采集样品,A错误;获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染,将采集的样品充分消毒后,用无菌水冲洗,收集冲洗液进行无菌检测,B错误;由题图可知,样品研磨后进行了稀释涂布,可见将无菌检测合格的样品研磨,经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落,C正确;由题图抗性检测可知,判断内生菌的抗性效果需设置对照组和实验组,对照组不接种内生菌得到病原菌菌斑,实验组接种内生菌得到病原菌菌斑,然后比较对照组和实验组的菌斑大小,实验组病原菌菌斑越小表明内生菌抗性效果越好,D正确。
4.(2023·山东,15)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是( )
A.不含氮源的平板不能用于微生物培养
B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
题点 (1)培养基配制的营养要求(选择性必修3 P10)。(2)灼烧灭菌适用范围及操作要求(选择性必修3 P11)。(3)选择培养基的概念(选择性必修3 P16)。(4)尿素分解菌分解尿素的原理(选择性必修3 P16)。
答案 D
解析 不含氮源的平板可以用于固氮微生物的培养,A错误;平板涂布时涂布器使用前必须进行灭菌,B错误;接种后未长出菌落的培养基需要灭菌后再丢弃,以防污染环境,C错误;能合成脲酶(能催化尿素分解产生NH3,NH3可作为某些细菌生长的氮源)的微生物可以以尿素为氮源,其他微生物因缺乏氮源而无法生长繁殖,D正确。
5.(2022·湖北,11,改编)关于白酒、啤酒和果酒的生产,下列叙述错误的是( )
A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气
B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程中,温度是重要的影响因素
C.葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质,也存在于线粒体
D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同,但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌
题点 酒精发酵原理(选择性必修3 P6、P8)。
答案 C
解析 生产白酒、啤酒、果酒的原材料不同,但发酵的主要菌种都是酵母菌,发酵初期需要提供一定的氧气以促进酵母菌的有氧呼吸,从而促进其大量生长繁殖,A、D正确;葡萄糖转化为乙醇的场所是细胞质基质,因此该反应所需的酶只存在于细胞质基质,C错误。
6.(2024·全国甲卷,35)合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果,结果如图所示。回答下列问题。
(1)该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量,发现测得的细菌数量前者大于后者,其原因是________________________________________________________________________。
(2)该同学从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液,再从稀释菌液中取200 μL涂布平板,菌落计数的结果为100,据此推算细菌原液中细菌浓度为________个/mL。
(3)菌落计数过程中,涂布器应先在酒精灯上灼烧,冷却后再涂布。灼烧的目的是______________________________________________________,冷却的目的是________________。
(4)据图可知杀菌效果最好的消毒液是________,判断依据是________________________________。(答出两点即可)
(5)鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈________色。
题点 (1)稀释涂布平板法操作过程(选择性必修3 P17)。(2)微生物的数量测定(选择性必修3 P18、P19)。
答案 (1)显微镜直接计数法将活菌和死菌一起计数,菌落计数法中存在多个活菌形成一个菌落的情况且只计数活菌
(2)5000
(3)杀死涂布器上可能存在的微生物,防止涂布器上可能存在的微生物污染 防止温度过高杀死菌种
(4)A A消毒液活菌数减少量最多,且达到最好的杀菌效果用的时间最短,效率最高
(5)黑
解析 (2)从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液,即稀释了10倍,再从稀释菌液中取200 μL涂布平板,即0.2 mL,已知菌落计数的结果为100,则1 mL细菌原液中细菌浓度=(菌落数÷菌液体积)×稀释倍数=(100个÷0.2 mL)×10=5000个/mL。
7.(2023·北京,16)自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性,能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分,其中蛋白胨主要为细菌提供__________和维生素等。
(2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上,凝固形成薄层。培养一段时间后,薄层变浑浊(如图),表明______________________________________。
(3)为分离出具有溶菌作用的细菌,需要合适的菌落密度,因此应将含菌量较高的湖泊水样________后,依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后,能溶解A菌的菌落周围会出现________。采用这种方法,研究者分离、培养并鉴定出P菌。
(4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式,请提出一个假设,该假设能用以下材料和设备加以验证。
主要实验材料和设备:P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱。
题点 (1)培养基一般含有的营养物质(选择性必修3 P10)。(2)蛋白胨提供的主要营养(选择性必修3 P10)。(3)稀释涂布平板法操作过程(选择性必修3 P17)。
答案 (1)碳源、氮源
(2)A菌通过增殖长成菌落均匀分布在培养基表面
(3)稀释 溶菌圈
(4)假设P菌通过分泌溶菌物质破坏A菌。
解析 (1)蛋白胨可以为细菌生长提供碳源、氮源和维生素等物质。
(3)分离具有溶菌作用的细菌可采用稀释涂布平板法,接种之前要先将湖泊水样稀释,使细菌分开,接种后才能长成单菌落便于分离。能溶解A菌的菌落周围会生成溶菌圈。
(4)可用离心机将含P菌的菌液离心,若P菌能分泌溶菌物质,溶菌物质应在上清液中。用圆形滤纸小片蘸取上清液,放在接种了A菌的培养基上,若滤纸片周围出现溶菌圈,说明假设成立。
8.(2023·全国乙卷,37)某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验,其主要步骤是:先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中,喷水浸润、接种菌T,培养一段时间后,再用清水淋洗秸秆堆(清水淋洗时菌T不会流失),在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌,进行乙醇发酵(酒精发酵),实验流程如图所示。
回答下列问题。
(1)在粉碎的秸秆中接种菌T,培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解,其原因是________________________________________________。
(2)采用液体培养基培养酵母菌,可以用淋洗液为原料制备培养基,培养基中还需要加入氮源等营养成分,氮源的主要作用是________________________(答出1点即可)。通常,可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时,为了达到良好的灭菌效果,需要注意的事项有________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________________(答出2点即可)。
(3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中,拧紧瓶盖,置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是________________________________________________。但是在酵母菌发酵过程中,还需适时拧松瓶盖,原因是________________________________________________________________________________________。发酵液中的乙醇可用________________溶液检测。
(4)本实验收集的淋洗液中的________可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比,本实验中乙醇生产方式的优点是________________________________________________________________。
题点 (1)酶的专一性(必修1 P82)。(2)培养基一般含有的营养物质(选择性必修3 P10)。(3)细胞中化合物(蛋白质、核酸)的元素组成(必修1 P29、P35)。(4)果酒的制作(选择性必修3 P7)。
答案 (1)菌T可以分泌纤维素酶
(2)用于合成蛋白质、核酸等含氮物质 待灭菌的物品不宜放置过挤;必须将锅内的冷空气充分排出;灭菌完毕后,不可立即打开排气阀,待压力表的压力降到零时,才能打开等
(3)创造无氧环境,利于酒精的产生 酒精发酵过程中产生的CO2会导致瓶内压强升高,及时排出CO2可以防止发酵瓶破裂 酸性重铬酸钾
(4)葡萄糖 提高了能量利用率、减少了对环境的污染、保障粮食安全
解析 (1)纤维素的分解需要纤维素酶的催化。
(3)酒精发酵离不开酵母菌,酵母菌是兼性厌氧型微生物,在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖,在无氧条件下,酵母菌进行酒精发酵。要使酵母菌进行酒精发酵,需要创造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的过程中,会不断产生二氧化碳,要适时拧松瓶盖放出CO2,以免发酵瓶破裂。在酸性条件下,橙色的重铬酸钾溶液可与乙醇发生化学反应,变成灰绿色。
(4)菌T可分泌纤维素酶,纤维素酶可以将纤维素分解成葡萄糖。用秸秆替代粮食生产乙醇,一方面提高了能量利用率,减少了环境污染,另一方面减少了对粮食的消耗,从而保障粮食安全。
9.(2022·广东,21)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对南中国海科考中,中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品,分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。
回答下列问题:
(1)研究者先制备富集培养基,然后采用__________________________法灭菌,冷却后再接入沉积物样品,28 ℃厌氧培养一段时间后,获得了含拟杆菌的混合培养物,为了获得纯种培养物,除了稀释涂布平板法,还可采用________法。据图分析,拟杆菌新菌株在以________为碳源时生长状况最好。
(2)研究发现,将采集的样品置于各种培养基中培养,仍有很多微生物不能被分离筛选出来,推测其原因可能是_______________________________________________ _______________________________________________________。(答一点即可)
(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质,通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑,拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是__________________________________________________________________________________________________。
(4)深海冷泉环境特殊,推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,除具有酶的一般共性外,其特性可能还有________。
题点 (1)灭菌方法及适用对象(选择性必修3 P10、P11)。(2)获得纯培养物的方法(选择性必修3 P12)。(3)碳循环(选择性必修2 P62)。(4)酶的特性(必修1 P81~P84)。
答案 (1)高压蒸汽灭菌 平板划线 纤维素
(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活)
(3)拟杆菌作为分解者,将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物,归还到无机环境中,有利于碳循环的顺利进行 (4)耐低温
解析 (1)培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。可以采用稀释涂布平板法或平板划线法,将单个微生物分散在固体培养基上,经过培养得到单菌落,从而获得纯净培养物。分析图可知,在以纤维素为碳源的培养基中,细胞数量最多,可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。
(2)深海冷泉中可能存在某些微生物,只有利用冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活),故将采集的样品置于各种培养基中培养,仍可能有很多微生物不能被分离筛选出来。
(4)深海冷泉温度较低,故生活在其中的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶,应具有耐低温的特性,才能高效降解多糖,保证拟杆菌的正常生命活动所需。
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