精品解析：浙江省嘉兴市平湖市平湖市当湖高级中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题

当湖高级中学2024学年第二学期高二3月阶段测试 生物试卷 一、选择题（本大题共30小题，每小题2分，共60分。每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，不选、多选、错选均不得分） 1. 全球变暖是地表温度年间缓慢上升的现象，目前主要用温室效应来解释。下列叙述错误的是（ ） A. 全球变暖会加剧物种消亡 B. 温室效应使地球温度升高，不利于生物生存 C. 植树造林、减少化石燃料的燃烧是缓解温室效应的重要途径 D. 温室气体对长波辐射具有屏蔽作用，从而导致温度上升 【答案】B 【解析】 【分析】1、全球变暖：指地球表层大气、土壤、水体及植被温度年际间缓慢上升。 2、全球变暖的原因：“温室效应”假说，该假说认为大气中对长波辐射具有屏蔽作用的温室气体浓度增大，使较多的辐射能被截留在地球表层而导致温度上升。 【详解】A、对于陆地环境来说，全球变暖会加剧沙漠化速度，成千上万的物种会随之消亡，故全球变暖会加剧物种消亡，A正确； B、如果没有温室效应，地球的温度可能会降低到-18℃，大多数生物将无法生存，故温室效应使地球温度升高有利于生物生存，B错误； C、植树造林、减少化石燃料的燃烧、开发洁净新能源是缓解温室效应的重要途径，C正确； D、大气中对长波辐射具有屏蔽作用的温室气体浓度增大，使较多的辐射能被截留在地球表层而导致温度上升，D正确。 故选B。 2. 人体内环境保持相对稳定以维持正常生命活动。下列物质不存在于内环境中的是（ ） A. Ca2+ B. 淀粉 C. 葡萄糖 D. 氨基酸 【答案】B 【解析】 【分析】1、内环境的概念：由细胞外液构成的液体环境叫做内环境，包括血浆、组织液和淋巴。 2、内环境中可以存在的物质：①小肠吸收的物质在血浆、淋巴中运输：水、盐、糖、氨基酸、维生素、血浆蛋白、甘油、脂肪酸等；②细胞分泌物：抗体、淋巴因子、神经递质、激素等；③细胞代谢产物：CO2、水分、尿素等。 3、内环境中不存在的物质：血红蛋白、载体蛋白、H2O2酶、细胞呼吸酶有关的酶、复制转录翻译酶等各种胞内酶、消化酶等。 【详解】A、Ca2+是小肠吸收的无机盐离子，可以存在于内环境，A错误； BC、人体不能直接吸收淀粉，需水解葡萄糖后吸收，所以淀粉不存在于内环境中，葡萄糖可存在于内环境中，B正确，C错误； D、氨基酸是小肠吸收的营养物质，可以存在于内环境中，D错误。 故选B。 3. 某种海龟的舌尖处有两条红色突起，它在捕食时，先张开口并让舌头来回摆动，很像小虫在蠕动。这种信息传递的意义是引诱猎物，以利于捕食。海龟的这种活动包含下列哪种信息的传递（ ） A. 物理和化学信息 B. 行为和化学信息 C. 物理和营养信息 D. 物理和行为信息 【答案】D 【解析】 【分析】生态系统中信息的种类有：物理信息，如生态系统中的光、声、温度、湿度、磁力等通过物理过程传递的信息；化学信息，如生物在生命活动过程中产生的可以传递信息的化学物质；行为信息，如同种或异种生物能够通过其特殊行为特征传递的信息。 【详解】海龟的舌尖处有两条红色突起，它在捕食时，先张开口并让舌头来回摆动，这是一种行为，因此属于行为信息，其中红色突起需要通过光传递的信息，属于物理信息，因此海龟的这种活动包含物理信息和行为信息，D正确。 故选D。 4. 人体在接种乙肝病毒灭活疫苗后，血清中会出现相应抗体，发挥免疫保护作用。下列细胞中，不直接参与此过程的是（　　） A. B淋巴细胞 B. 吞噬细胞 C. 细胞毒性T细胞 D. 辅助性T细胞 【答案】C 【解析】 【分析】当病原体进入细胞内部，就要靠T细胞直接接触靶细胞来“作战”，这种方式称为细胞免疫；在细胞免疫过程中，靶细胞、辅助性T细胞等参与细胞毒性T细胞的活化过程。当细胞毒性T细胞活化以后，可以识别并裂解被同样病原体感染的靶细胞。靶细胞裂解后，病原体失去了寄生的基础，因而可被抗体结合或直接被其他免疫细胞吞噬、消灭；此后，活化的免疫细胞的功能受到抑制，机体将逐渐恢复到正常状态。 【详解】疫苗是抗原，会通过巨噬细胞摄取呈递给辅助性T细胞，辅助性T细胞表面特定分子发生变化，同时与B淋巴细胞结合，同时抗原与B淋巴细胞接触，大部分B淋巴细胞增殖分化成浆细胞，浆细胞合成并分泌抗体。此过程细胞毒性T细胞没有直接参与，C符合题意，ABD不符合题意。 故选C。 5. 研究人员对改造绿地的昆虫进行调查，记录到68种昆虫，隶属于10目45科，都明显高于对照样地。该调查的主要内容是（ ） A. 种群最基本的数量特征 B. 群落中的物种丰富度 C. 群落中物种的生态位 D. 生态系统的营养结构 【答案】B 【解析】 【分析】群落中物种的生态位是指一个物种在群落中的地位或作用，包括所处的空间位置，占用资源的情况，以及与其他物种的关系等。 【详解】A、种群最基本的数量特征是种群密度，但该调查是从物种数目方面进行统计，种群密度不是该调查的主要内容，A错误； B、对绿地的昆虫进行调查，记录到68种昆虫，隶属于10目45科，这是从物种分类上进行统计，属于物种丰富度的范畴，B正确； C、群落中物种的生态位是指一个物种在群落中的地位或作用，包括所处的空间位置，占用资源的情况，以及与其他物种的关系等，不是该调查的主要内容，C错误； D、生态系统的营养结构是指食物链和食物网，不是该调查的主要内容，D错误。 故选B。 6. 为得到性状优良的高产奶牛，可采取下图中的技术路径。下列叙述正确的是（ ） A. 核移植过程中需要减数第二次分裂前期的去核卵母细胞 B. 过程1需将胚胎培养至原肠胚期进行胚胎移植 C. 过程2子代奶牛遗传性状与供体奶牛完全一致 D. 转基因技术可为过程1、2提供改良性状的方式 【答案】D 【解析】 【分析】试管动物和克隆动物的比较：①生殖方式：试管动物的生殖方式为有性生殖；克隆动物的生殖方式为无性生殖。②主要技术手段：试管动物的主要技术手段为体外受精、胚胎移植；克隆动物的主要技术手段为核移植技术、胚胎移植。 【详解】A、核移植过程中需要将卵母细胞培养至MⅡ期再去核，A错误； B、过程1需将胚胎培养至桑椹胚或者囊胚期进行胚胎移植，B错误； C、过程2子代奶牛核遗传物质由供体奶牛提供，质遗传物质由卵母细胞提供，所以遗传性状与供体奶牛不一定完全一致，C错误； D、转基因技术可以将优良性状基因导入受体细胞，可为过程1、2提供改良性状的方式，D正确。 故选D。 7. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A. 用SDS处理材料，能使核蛋白变性并与DNA分离 B. 鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴 C. 选用植物细胞提取DNA时，研磨后用滤纸进行过滤 D. 琼脂糖凝胶加样孔一端朝向电泳槽的正极 【答案】A 【解析】 【分析】DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 【详解】A、用SDS处理材料，能使核蛋白变性并与DNA分离，A正确； B、鉴定DNA时，将丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺试剂，在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，B错误； C、研磨后用单层尼龙纱布过滤，C错误； D、琼脂糖凝胶加样孔一端朝向电泳槽的负极，D错误。 故选A。 8. 为研究甲状腺激素分泌的调控，某同学给大鼠注射抗促甲状腺激素血清后，测定其血液中相关激素的含量并进行分析。下列叙述正确的是（ ） A. 甲状腺激素对下丘脑的负反馈作用减弱 B. 垂体分泌促甲状腺激素的功能减弱 C. 促甲状腺激素释放激素含量降低 D. 甲状腺激素含量升高 【答案】A 【解析】 【分析】下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素作用于垂体，促进垂体分泌促甲状腺激素作用于甲状腺，促进甲状腺分泌甲状腺激素，甲状腺激素通过负反馈抑制下丘脑和垂体分泌相应的激素，甲状腺激素含量高时，抑制作用强，含量低时，抑制作用弱。 【详解】给大鼠注射抗促甲状腺激素血清后，促甲状腺激素不能发挥作用，导致甲状腺分泌的甲状腺激素减少，甲状腺激素对下丘脑的负反馈作用减弱，垂体分泌促甲状腺激素的功能增强，下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素增多，A正确，BCD错误。 故选A。 9. 将山核桃miRNA169基因转入到拟南芥中，可促进拟南芥提前开花，部分流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①通常需要逆转录酶催化 B. 过程②中可利用 PCR 技术扩增并筛选出目的基因 C. 过程中转化农杆菌一般需要农杆菌的Ti质粒作为表达载体 D. 过程④收获转化的种子需经植物组织培养才能获得提前开花的植株 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养是一种将植物体的部分细胞或组织与母体分离,在适当的条件下加以培养,使它们能够生长、发育、分化与增殖的技术。原理是来自植物细胞的全能性。 【详解】A、过程①为mRNA逆转录得到cDNA的过程，需要逆转录酶的催化，A正确； B、过程②序列已知，可利用PCR技术筛选并扩增出目的基因，B正确； C、过程③中转化农杆菌一般需要Ti质粒（农杆菌质粒）作为表达载体，C正确； D、过程④收获转化的种子，直接在土壤中培养也可以长成植株，不需要经植物组织培养，D错误。 故选D。 10. 近年报道了多起猴痘病毒感染病例，人体感染猴痘病毒后会产生一系列的免疫应答。下列叙述正确的是（ ） A. 猴痘病毒的增殖发生在血浆内 B. 注射猴痘病毒疫苗属于人工被动免疫 C. 体内的各种B淋巴细胞都能识别猴痘病毒 D. 在抵抗猴痘病毒过程中，辅助性T细胞既参与体液免疫也参与细胞免疫 【答案】D 【解析】 【分析】1、病毒只能寄生在活细胞内，没有细胞结构。 2、树突状细胞、B细胞等抗原呈递细胞摄取病原体，而后对抗原进行处理，呈递在细胞表面，然后传递给辅助性T细胞，辅助性T细胞表面特定分子发生变化并与B细胞结合，这是激活B细胞的第二个信号。 【详解】A、病毒只能寄生在活细胞内，因此猴痘病毒的增殖发生在细胞内，A错误； B、注射猴痘病毒疫苗会引起人体免疫反应产生相关的抗体等，属于人工主动免疫，B错误； C、B淋巴细胞的识别具有特异性，C错误； D、在抵抗猴痘病毒过程中，辅助性T细胞体液免疫过程中作为第二信号，且分泌细胞因子促进B细胞的增殖分化，在细胞免疫过程中，辅助性T细胞分泌细胞因子促进细胞毒性T细胞的增殖分化，D正确。 故选D。 11. 研究表明，氨基酸代谢异常会导致脑组织内谷氨酰胺含量上升，引发脑组织大量吸水出现水肿、昏迷、膝跳反射加剧、39℃左右的高烧持续不退等症状。下列叙述正确的是（ ） A. 机体持续高烧期间产热量明显高于散热量 B. 体温发生变化后会引发下丘脑发生电位变化 C. 脑组织大量吸水过程中脑组织细胞的吸水能力不断上升 D. 静脉注射抗利尿激素，可以有效缓解脑组织水肿症状 【答案】B 【解析】 【分析】人体热量的来源主要是细胞中有机物的氧化放能（尤以骨骼肌和肝脏产热为多），热量的散出主要通过汗液的蒸发、皮肤内毛细血管的散热，其次还有呼气、排尿和排便等，正常机体产热量=散热量。 【详解】A、机体持续高烧期间产热量等于散热量，A错误； B、体温调节的方式是神经-体液调节，温度感受器感受温度变化，将兴奋传给下丘脑体温调节中枢，引发下丘脑发生电位变化，B正确； C、脑组织大量吸水过程中脑组织细胞的吸水能力不断下降，C错误； D、抗利尿激素类药物促进肾脏肾小管和集合管的重吸收，使细胞外液量增加、渗透压下降，脑水肿加剧，不能缓解脑组织水肿症状，D错误。 故选B。 12. 一些植物能通过感知外界光照变化，调节脱落酸和赤霉素合成，保证冬天（短日照）休眠、夏天（长日照）生长。有关叙述错误的是（　　） A. 光作为一种信号参与植物生命活动的调节 B. 短日照能抑制脱落酸和赤霉素的合成 C. 脱落酸和赤霉素的合成均受基因表达的调控 D. 植物的生长发育不仅受激素调节，还受环境因素影响 【答案】B 【解析】 【分析】赤霉素的主要作用有：促进细胞伸长，从而引起植株增高；促进种子萌发、开花和果实发育等。脱落酸的主要作用：抑制细胞分裂等；促进叶和果实的衰老和脱落；维持种子休眠等。 【详解】A、光作为一种能源，为植物光合作用提供能量，结合题干，光也能作为一种信号可以参与植物生命活动的调节，A正确； B、依据题干信息，植物能通过感知外界光照变化，调节脱落酸和赤霉素合成，保证冬天（短日照）休眠、夏天（长日照）生长，并不能得出短日照能抑制脱落酸和赤霉素的合成的结论，B错误； C、植物激素的合成均受到基因表达的调控，C正确； D、植物生长发育的调控，是由基因表达调控、激素调节和环境因素调节共同完成的，所以植物的生长发育不仅受激素调节，还受环境因素影响，D正确。 故选B。 13. 2023年4月25日，来自长江天鹅洲故道的4头迁地保护长江江豚分批顺利放归进入长江干流新螺和石首江段。下列相关叙述正确的是（ ） A. 随着江豚数量增加，种内斗争加剧，江豚的环境容纳量降低 B. 研究江豚的生态位有助于了解其在群落中的地位和作用 C. 迁地保护是保护生物多样性中最有效的保护措施 D. 经迁地保护的江豚回归长江后，生态系统中营养级数量增加 【答案】B 【解析】 【分析】保护生物多样性的措施有：一是就地保护，大多是建自然保护区，比如四川卧龙大熊猫自然保护区等；二是迁地保护，大多转移到动物园或植物园，比如，水杉种子带到南京的中山陵植物园种植等；三是开展生物多样性保护的科学研究，制定生物多样性保护的法律和政策；四是开展生物多样性保护方面的宣传和教育。 【详解】A、环境容纳量主要由环境决定，不会随着江豚数量增加而变小，A错误； B、生态位是指一个种群在生态系统中，在时间空间上所占据的位置及其与相关种群之间的功能关系与作用，研究江豚的生态位有助于了解其在群落中的地位和作用，B正确； C、就地保护是保护生物多样性中最有效的保护措施，C错误； D、江豚仅是长江流域顶级捕食者之一，经迁地保护的江豚回归长江后，生态系统中营养级数量不变，D错误。 故选B。 14. 科学家发现了一种特定功能的人体蛋白质X，某科研小组制备一种膀胱生物反应器来生产蛋白X，如图是生产的基本流程。据图分析下列正确的是（ ） A. 步骤①进行前需要对精子提供足够的能量 B. 步骤②常采用显微注射法将重组载体注入雄原核 C. 步骤③进行传代培养时需用胰蛋白酶处理 D. 步骤④进行前需对代孕母牛注射免疫抑制剂 【答案】B 【解析】 【分析】从生产的角度考虑，生物反应器选择的组织或器官要方便产物的获得，例如乳腺、膀胱、血液等，由此发展了动物乳腺生物反应器、动物血液生物反应器和动物膀胱生物反应器等。 【详解】A、步骤①是体外受精，在体外受精前需要对精子进行获能处理，而不是提供足够能量，获能处理是使精子获得受精能力，A错误； B、步骤②是将重组载体导入受精卵，常采用显微注射法将重组载体注入受精卵的雄原核，B正确； C、步骤③是早期胚胎培养，进行传代培养的是动物细胞培养，早期胚胎培养不进行传代培养，C错误； D、步骤④是胚胎移植，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，所以不需要对代孕母牛注射免疫抑制剂，D错误。 故选B。 15. 为了研究校园土壤动物丰富度，某小组采用土壤取样器在校园的不同地点、不同深度进行取样，然后进行土壤动物的分离和种类鉴定。下列叙述正确的是（　　） A. 校园的不同地点动物种类不同，体现了群落的垂直结构 B. 同一地点不同深度动物种类不同，体现了群落的水平结构 C. 若在不同地点都采集到同一种动物，则这种动物的生态位相对较宽 D. 若某一地点土壤动物的丰富度较高，则往往每种动物的个体数较多 【答案】C 【解析】 【分析】许多土壤小动物有较强的活动能力，而且身体微小，不适宜用样方法或标志重捕法进行调查，调查土壤中小动物常用取样器取样法。 【详解】A、校园的不同地点动物种类不同，体现了群落的水平结构，A错误； B、同一地点不同深度动物种类不同，体现了群落的垂直结构，B错误； C、若在不同地点都采集到同一种动物，则这种动物的栖息地较广泛，生态位相对较宽，C正确； D、若某一地点土壤动物的丰富度较高，则往往该地点物种种类较多，但每种动物的个体数未知，D错误。 故选C。 16. 2024年2月25日，世界首例体细胞克隆顶级种用藏羊“青青”在青海省诞生。研究人员采集种羊耳缘组织培养成耳纤维细胞作为核供体细胞，通过体细胞核移植获得种羊克隆胚胎。下列相关叙述正确的是（ ） A. 使用无菌的胰蛋白酶消化耳缘组织间的胶原纤维 B. 培养耳纤维细胞时使用CO2培养箱维持中性偏酸环境 C. 配制一系列不同成分的培养液进行全体外胚胎培养 D. 重组细胞会依次经历囊胚、桑椹胚、原肠胚等发育阶段 【答案】A 【解析】 【分析】1、胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术； 2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一。 【详解】A、使用无菌的胰蛋白酶消化耳缘组织间的胶原纤维，可使羊耳缘组织分散成单个细胞，A正确； B、多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4，因此培养耳纤维细胞时使用CO2培养箱维持中性偏碱环境，B错误； C、核移植得到的胚胎培养到一定阶段，需进行胚胎移植，移植到体内继续培养，C错误； D、重组细胞会依次经历桑椹胚、囊胚、原肠胚等发育阶段，D错误。 故选A。 17. 某湖区浅水和泥滩中栖息着一种水鸟，以湖区的某些植物作为主要的食物来源，能量流经食物链上该种水鸟的示意图如下。下列叙述正确的是（ ） A. 流经该生态系统的总能量是水鸟的食源植物所固定的太阳能总量 B. 图中的③代表水鸟的同化量流向分解者的部分 C. 图中的①代表水鸟的同化量，也可代表水鸟的总次级生产量 D. 图中的②代表呼吸作用散失，因此食物链中的能量流动具有单向性的特点 【答案】C 【解析】 【分析】生态系统中的能量流动：（1）概念：生态系统中能量的输入、传递、转化和散失的过程；（2）过程：某一营养级的同化量=呼吸作用中以热能形式散失的能量+用于自身生长、发育、繁殖的能量=摄入量-粪便量。 【详解】A、流经该生态系统的总能量是该湖区所有生产者固定的太阳能，A错误； B、图中的③代表流向分解者的能量，有一部分来自水鸟的粪便，有一部分来自水鸟的遗体残骸，水鸟的粪便中的能量不属于水鸟的能量，B错误； C、水鸟的同化量=水鸟的摄入量-粪便，所以图中①属于水鸟的同化量，也可代表水鸟的总次级生产量，C正确； D、图中的②代表呼吸作用散失，因此食物链中的能量流动具有逐级递减的特点，单向是由于捕食关系只能单向，D错误。 故选C。 18. 研究不同浓度赤霉素对白洋淀白花芦苇(BYD-W)、白洋淀黄花芦苇(BYD-Y)以及宿州芦苇(SZ)生长发育与茎秤理化特性的影响；其部分实验结果如图。下列叙述错误的是（ ） A. 实验结果表明，100mg/L的赤霉素浓度会抑制SZ的茎杆生长 B. 在实验浓度范围内，赤霉素对BYD-W纤维素含量的影响不明显 C. 赤霉素明显提升BYD-Y纤维素含量可能与基因选择性表达有关 D. 导致不同种芦苇敏感性不同的原因可能是赤霉素受体数量差异 【答案】A 【解析】 【分析】赤霉素的主要产生部位：幼芽、幼根和未成熟的种子。可以促进细胞伸长、促进细胞分裂分化等。 【详解】A、与对照组相比，100mg/L的赤霉素浓度处理下SZ的纤维素含量稍微升高，说明该浓度会促进SZ的茎秆生长，A错误； B、在不同的赤霉素处理下，BYD-W的纤维素含量变化不大，说明赤霉素对BYD-W纤维素含量的影响不明显，B正确； C、随着赤霉素浓度的升高，BYD-Y的纤维素含量升高，可能与BYD-Y中赤霉素受体相关基因的表达较多有关，C正确； D、由图可知，BYD-W对赤霉素不敏感，BYD-Y对赤霉素敏感，可能因为二者体内赤霉素受体数量有差异，D正确。 故选A。 19. 养殖场的粪便富含氨氮化合物，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①中两种培养基的灭菌方式均为高压蒸汽灭菌法 B. ②应挑取在2种培养基上均能生长的菌落用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测其活性，筛选得到甲、乙 D. 养殖场应选择菌株甲添加在粪便中以减少NH3的产生 【答案】C 【解析】 【分析】选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】A、①初始阶段，筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物，粪便中有菌种，因此不能进行灭菌处理，A错误； B、由图可知，②筛选不能在尿素为唯一氮源的培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误； C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确； D、由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 故选C。 20. CD47是一种跨膜糖蛋白，能抑制巨噬细胞的免疫清除作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍。下图1为抗CD47的单克隆抗体的制备流程，图2为图1过程②的具体操作。下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①中筛选出的杂交瘤细胞都具有产生抗体和无限增殖能力 B. 用多孔玻璃板培养和筛选杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种1个细胞 C. 出现阳性反应的原因是抗原与抗体发生了特异性的结合 D. 注射抗CD47的单抗可以增强巨噬细胞对多种肿瘤细胞的清除作用 【答案】A 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】 A、从小鼠脾脏获得的B细胞有多种，过程①中筛选出的杂交瘤细胞并非都具有产生抗体和无限增殖能力，还需要进一步筛选，A错误； B、过程②为筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞玻璃板上，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖，B正确; C、出现阳性反应是因为抗原（CD47）与抗体（抗 CD47 的单抗）发生了特异性的结合，C正确； D、由于肿瘤细胞表面 CD47 能抑制巨噬细胞的免疫清除作用，而抗 CD47 的单抗可阻断其作用，所以注射抗 CD47 的单抗可以增强巨噬细胞对多种肿瘤细胞的清除作用，D正确。 故选A。 21. 利用动物细胞核移植等技术可以进行动物克隆。下图是利用优良性状牛的高度分化的体细胞生产克隆牛的基本程序，有关叙述错误的是（ ） A. 过程②培养基中需要添加胰蛋白酶 B. 过程③需要用胚胎移植技术 C. 牛犊（乙）的性别不一定为雌性 D. 牛犊（乙）的遗传物质来自卵母细胞和体细胞 【答案】A 【解析】 【分析】克隆技术是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 【详解】A、胰蛋白酶处理是将细胞分离开来，而过程②为早期胚胎发育，不需要添加胰蛋白酶，A错误； B、过程③将囊胚期的早期胚胎移植到雌牛甲中，B正确； C、牛犊（乙）的性别取决于体细胞的细胞核内的性染色体，由于不确定体细胞的性染色体是XX还是XY，因此牛犊（乙）的性别不一定为雌性，C正确； D、牛犊（乙）的遗传物质来自卵母细胞细胞的遗传物质和体细胞的遗传物质，D正确。 故选A。 22. 某研究小组进行微型月季的快速繁殖研究，结果如表所示。 流程 最佳措施或最适培养基 ①外植体腋芽消毒 75%乙醇浸泡30s+5%NaClO浸泡6min ②诱导出丛生苗 MS+3.0mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA ③丛生苗的扩增 MS+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA ④丛生苗的生根 1/2MS+0.25mg·L-1IBA+0.25mg·L-1NAA 注：丛生苗为丛状生长的幼苗，IBA（吲哚丁酸）为生长素类物质 下列叙述正确的是（ ） A. 流程①的效果取决于消毒剂浓度 B. 流程②不需要经过脱分化形成愈伤组织的阶段 C. 与流程②相比，流程③培养基中细胞分裂素类与生长素类物质的比值更大 D. 与流程③相比，提高流程④培养基的盐浓度有利于丛生苗的生根 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养过程中，激素的比例影响其分化的方向，当细胞分裂素与生长素比例相当时，产生愈伤组织，生长素浓度较高时，诱导根的形成，细胞分裂素浓度较高时，诱导芽的形成。 【详解】A、流程①中，消毒效果不仅取决于消毒剂浓度，还取决于消毒时间和消毒剂种类，A错误； B、流程②不需要经过脱分化形成愈伤组织的阶段，直接经腋芽直接分化为丛生苗，B正确； C、与流程②相比，流程③培养基中细胞分裂素类与生长素类物质的比值小，C错误； D、与流程③相比，提高流程④培养基的IBA浓度有利于丛生苗的生根，D错误。 故选B。 23. 某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合，能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤细胞免疫逃逸。将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合，形成抗PD-L1的偶联药物（抗PD-L1—ADC），既可阻断PD-1与PD-L1结合，恢复CTL的活性，又能使化疗药物靶向肿瘤细胞，从而达到治疗目的，流程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 通过步骤①诱导形成的细胞可能有部分不能产生抗体 B. 通过步骤②筛选后能生长的细胞是异种核融合的细胞 C. 步骤③中进行克隆化培养和抗原检测，可获得目的细胞 D. 通过步骤④得到的单克隆抗体可使化疗药物靶向肿瘤细胞 【答案】C 【解析】 【分析】单克隆抗体制备的基本步骤：对小鼠进行免疫→提取B淋巴细胞→将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合→通过筛选、克隆化培养和扩大化培养→最终注入小鼠体内→从腹腔腹水中提取单克隆抗体。 【详解】A、经过程①诱导融合的细胞有同种核两两融合和不同核融合细胞，形成的细胞可能有部分不能产生抗体，需要经过特定的选择性培养基筛选，A正确； B、步骤②选择培养基的筛选得到的杂交瘤细胞（异种核融合）既能迅速大量增殖又能产生抗体，B正确； C、步骤③为克隆化培养和抗体检测，经过③步骤可最终筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，C错误； D、抗体能与抗原发生特异性结合，步骤④得到的ADC中的抗体的能与肿瘤细胞特异性结合，将药物带到肿瘤细胞，D正确。 故选C。 24. 大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（ ） A. 提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解 B. 将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定 C. 电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理 D. 根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点 【答案】D 【解析】 【分析】DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。 【详解】A、由于蛋白质可溶于酒精，而DNA在冷酒精中溶解度很低，所以在提取DNA时加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解，而让DNA析出，A正确； B、由于DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度较大，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，所以将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，B正确； C、DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确； D、因为质粒的本质是环状的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。 故选D。 25. 植物细胞中的叶绿体和细胞核是两个相对独立的遗传体系，控制着许多优良性状，胞质杂交是植物体细胞杂交应用的一个重要方面。下图为将品种甲叶绿体中的优良基因导入品种乙的实验流程。下列说法错误的是（　　） A. 过程①可用纤维素酶和果胶酶处理，需在等渗或较高渗溶液中进行 B. 过程②通常用聚乙二醇（PEG）诱导融合，可加培养液稀释终止融合 C. 过程③筛选同时具备叶绿体和细胞核的融合细胞诱导再生细胞壁 D. 通过④获得的抗病品种丁，并能稳定遗传品种甲、乙的所有优良性状 【答案】D 【解析】 【分析】原生质体是去除细胞壁后各种结构的总称，包括细胞膜、细胞质、细胞核和细胞器等。在植物体细胞杂交过程中常采用人工诱导的方法促进原生质体的融合，诱导方法包括两大类：物理法和化学法。化学法一般常用聚乙二醇作为诱导剂。 【详解】A、植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，因此过程①可用纤维素酶和果胶酶处理，所获得的原生质体若在低渗溶液中会吸水涨破，因此需在等渗或较高渗溶液中进行，A正确； B、过程②即品种甲和乙的原生质体融合可以使用聚乙二醇（PEG）诱导，终止融合可采用加培养液稀释的方法进行，B正确； C、品种甲的原生质体含有叶绿体不含细胞核，品种乙（根尖细胞）含细胞核不含叶绿体，因此过程③筛选同时具备叶绿体和细胞核的融合细胞诱导再生细胞壁，C正确； D、丁具备了品种乙的细胞核基因、细胞质基因以及品种甲的细胞质基因，但不具备甲的细胞核基因，因此不能稳定遗传品种甲、乙的所有优良性状，D错误。 故选D。 26. 从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ） A. 可使用液体培养基进行富集培养 B. 为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌 C. 获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次 D. 利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为107倍 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、与使用固体培养基相比，使用液体培养基培养菌种时，菌体可以分布在整个培养基中，可充分利用其中的营养物质，提高培养液中氧气含量，菌体数量增加的更快，A正确； B、需从采集的样品分离得到目的菌种，不能对样品进行灭菌，B错误； C、图a所示结果的接种次数为3次，接种环需灭菌4次，C错误； D、利用稀释涂布平板法计算菌体浓度的方法为菌落数÷接种液体积×稀释倍数，而用于计数的平板的菌落数应在30-300之间，因此58.5个÷0.1ml×稀释倍数=5.85×108个/ml，计算得出稀释倍数为106倍，D错误。 故选A。 27. 部分限制酶的识别序列及切割位点如下表（注：箭头表示切割位点）。下列叙述正确的是（ ） 名称 识别序列及切割位点 名称 识别序列及切割位点 AatI AGG↓CCT TCC↑GGA EcoRI G↓AATTC CTTAA↑G KpnI G↓GTACC CCATG↑G BamHI G↓GATCC CCTAG↑G A. 表中4种限制酶均是从DNA两端逐步剪切核苷酸 B. EcoRI酶切后形成的黏性末端是5′AATT3′ C. KpnI与BamHI处理不同的DNA片段可获得互补的黏性末端 D. E．coliDNA连接酶可连接AatI酶切后形成的片段 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程的工具： （1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 （2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 （3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 【详解】A、表中4种限制酶均是在DNA特定位置将DNA切割成片段，A错误； B、根据表中信息可知，EcoRI识别的序列为GAATTC，并在GA之间切割磷酸二酯键，因此，该酶切后形成的黏性末端是5′AATT3′，B正确； C、KpnI与BamHI识别的碱基序列不同，形成的黏性末端不同，这两种酶处理不同的DNA片段获得的黏性末端没有互补关系，C错误； D、E．coliDNA连接酶可连接黏性末端，不能连接平末端，而AatI酶切后形成的是平末端，D错误。 故选B。 28. 菊花是两性花，LFY 基因是控制植物花分生组织形成的基因。过量表达LFY 导致植物提早开花。为使菊花花期提前，科学家制备了含有拟南芥过量表达的LFY 基因的转基因菊花。重组Ti质粒的部分信息及实验流程如下图所示，其中启动子均为真核细胞启动子。下列叙述正确的是（ ） A. 在含潮霉素的培养基上存活的农杆菌才可用于侵染菊花叶片 B. 过程①②③所使用的培养基中植物激素的浓度和配比可以相同 C. I是一团具有一定组织结构、松散的薄壁细胞团，具有较强的分裂和分化能力 D. 诱导出芽和根的试管苗要先炼苗以适应外界的低湿强光环境才可进行移栽 【答案】D 【解析】 【分析】1、基因工程的基本工具：分子手术刀”是指限制性核酸内切酶（限制酶）、“分子缝合针”是指DNA连接酶、“分子运输车”是指载体； 2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定； 3、标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素抗性基因； 4、目的基因的检测和表达： （1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术； （2）其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交； （3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交； （4）有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 【详解】A、重组质粒中含有潮霉素抗性基因，能表达出潮霉素抗性物质，在含潮霉素的培养基上存活的农杆菌不一定是导入LFY基因的农杆菌，还有可能是只导入质粒的农杆菌，因此只有在含潮霉素的培养基上存活并导入LFY基因的农杆菌才可用于侵染菊花叶片，A错误； B、植物组织培养的培养基中的生长素和细胞分裂素的含量和比例会影响愈伤组织的生长和分化，在脱分化形成愈伤组织的过程中要求生长素和细胞分裂素的比例相当，而在再分化过程中生长素和细胞分裂素比例高有利于根的分化，比例低有利于芽的分化，B错误； C、愈伤组织是一团排列疏松而无规则、高度液泡化、呈无定形状态的、具有分生能力的薄壁细胞，不具有特定的结构和功能，C错误； D、诱导出芽和根的试管苗要先炼苗有助于试管苗逐渐适应室外环境，并减少在移栽后因气候和土壤变化而造成的伤害，适应外界的低湿强光环境才可进行移栽，D正确。 故选D。 29. 心肌细胞与神经细胞类似，均具有生物电现象。两者静息电位的形成机制相似，但动作电位明显不同，心肌细胞的动作电位分为0~4五个时期，其膜电位变化及形成机制如图所示，下列叙述中正确的是（ ） A. 若适当增大细胞外溶液的浓度，则静息电位的绝对值将变大 B. 神经递质作用于心肌后，即可引起通道介导的内流，出现0期 C. 在2期中，内流量和外流量相等，所以膜电位变化非常平缓 D. 在3期中，钙离子通道关闭，钾离子外流，膜电位恢复至静息电位 【答案】D 【解析】 【分析】在神经纤维未受到刺激时，神经纤维处于静息状态。此时，神经细胞外的Na+浓度比膜内要高，K+浓度比膜内低，而神经细胞膜对不同离子的通透性各不相同。静息时，膜主要对K+有通透性，造成K+外流，使膜外阳离子浓度高于膜内。由于细胞膜内外这种特异的离子分布特点，细胞膜两侧的电位表现为内负外正，这称为静息电位。 【详解】A、静息状态时，细胞外液K+浓度比膜内低，膜主要对K+有通透性，K+通过协助扩散外流。若适当增大细胞外溶液的K+浓度，则膜两侧K+的浓度差减小，K+外液减少，静息电位的绝对值减小，A错误； B、神经纤维受足够强度刺激产生兴奋时，Na+通道开放，Na+内流，形成兴奋电位。神经递质有兴奋性神经递质和抑制性神经递质，神经递质作用于受体引发电位变化的前提之一是要有足够量的神经递质。若作用于心肌的神经递质量不足，或该神经递质是抑制性神经递质，则Na+通道不会开放，B错误； C、根据图中信息，在2期中，Ca2+内流和K+外流，且Ca2+内流和K+外流交换的电荷量相当，所以膜电位变化非常平缓，C错误； D、从图中看出，在3期中，钙离子通道关闭，K+通道开放，K+外流，膜电位恢复至静息电位，D正确。 故选D。 30. 利用基因工程技术培育出油脂高产的四尾栅藻，是获取生物柴油的新途径。科学家欲从紫苏中提取DGAT1基因（催化油脂合成的关键酶基因），导入到四尾栅藻细胞，获得转基因油脂高产的四尾栅藻，质粒pCAMBIA与PCR扩增出的DGAT1酶切位点如图所示。现有BamHⅠ、BglⅡ、EcoRⅠ三种限制酶，它们识别并切割的碱基序列分别为BamHI：5'—G↓GATCC—3'，BglⅡ：5'—A↓GATCT—3'，EcoR I：5'—G↓AATTC—3'。已知启动子往往具有物种特异性，质粒pCAMBIA中EcoRI酶切位点与BamHⅠ酶切位点间的最短距离为600bp。用BglⅡ酶切割DGAT1，BamHⅠ酶切割质粒，下列叙述正确的是（ ） A. 过程②进行PCR时，需要在两种引物的3'端添加限制酶Bgl Ⅱ的识别序列 B. 在载体pCAMBIA 质粒中插入紫苏DGAT1基因，其上游启动子应选择紫苏的启动子 C. 重组质粒若只考虑两两连接，可得到4种大小不同的连接产物 D. 用EcoR I酶对不同的重组质粒进行酶切鉴定，正确连接的重组质粒酶切产物长度为2400bp和800bp 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、基因的检测与鉴定。 【详解】A、过程②是通过PCR技术实现的，由②的扩增产物两端的酶切序列为BglⅡ可知，进行PCR时，需要在两种引物的5'端添加限制酶BglⅡ的识别序列，A错误； B、要达到让紫苏DGATI基因在四尾栅藻细胞中表达的目的，应该添加四尾栅藻的启动子，B错误； C、若只考虑DNA片段的两两连接，构建重组质粒时可得到3种大小不同的连接产物，即目的基因自连、质粒自连以及目的基因和质粒相互连接的用产物，C错误； D、利用EcoRI限制酶切割重组质粒进行鉴定。已知质粒pCAMBLA中EcoRⅠ的酶切位点与BamHI的酶切位点间的最短距离为600bp，根据质粒pCAMBIA和DGATI基因的长度可知，若利用EcoRI限制酶切割重组质粒进行鉴定，正确连接的重组质粒酶切产物应为2400bp和800bp，D正确。 故选D。 二、非选择题（本大题共4小题，共40分） 31. 紫杉醇是红豆杉属植物产生的次生代谢产物，能促进微管聚合并使之稳定，从而阻碍了肿瘤细胞的分裂，直至死亡。从36棵60年树龄的树皮中才能提取到1g紫杉醇，治疗一个癌症患者。利用植物细胞工程是生产紫杉醇的重要途径，如图是两条技术路线。请回答下列问题： （1）甲路线运用的原理是______。启动b过程的关键激素是______。其浓度以及______都会影响植物细胞发育的方向。 （2）甲路线生成完整植株通过两种途径，其中经由虚线的属于______途径，实线属于______途径。 （3）甲和乙路线中所用的外植体最好选取春季新长出来的______，接种前常用75%酒精、______对外植体进行消毒。其中甲的a、乙的①过程______（需要/不需要）光照。 （4）乙过程②需更换为液体培养基进行______培养。悬浮培养时发现，即使营养条件充足，红豆杉细胞继代培养一段时间也会停止增殖，结合材料分析其原因可能是_______。 【答案】（1） ①. （植物）细胞的全能性 ②. 细胞分裂素和生长素 ③. 比例（或配比 ） （2） ①. 胚状体 ②. 器官发生 （3） ①. 嫩叶（或叶尖或茎尖或根尖）等 ②. 次氯酸钠（NaClO）或氯化汞（HgCl2） ③. 不需要 （4） ①. 继代 ②.   培养一段时间后，培养液中的紫杉醇含量升高，紫杉醇能促进微管聚合并使之稳定，从而抑制了红豆杉细胞的分裂 【解析】 【分析】1、植物组织培养过程：离体的细胞、组织或器官脱分化形成愈伤组织再分化形成胚状体最后发育成植株； 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件 （如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。 【小问1详解】 甲路线是通过植物组织培养获得红豆杉植株的过程，利用的原理是植物细胞的全能性。a是脱分化，b是再分化，决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素如细胞分裂素和生长素的比例； 【小问2详解】 植物组织培养生成完整植株通过两种途径，经由虚线的是胚状体途径，在这种途径中，外植体经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，胚状体进一步发育成完整植株；实线属于器官发生途径，外植体经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化直接形成根、芽等器官，进而发育成完整植株； 【小问3详解】 甲和乙路线中所用的外植体最好选取春季新长出来的叶尖、茎尖等，因为此处细胞内病毒含量极少甚至无病毒可培养出脱毒苗。甲和乙路线中所用外植体的消毒常用75%酒精、次氯酸钠等消毒。其中甲的a、乙的①过程都是脱分化过程，不需要光照； 【小问4详解】 乙的过程②需更换为液体培养基进行继代培养；在悬浮培养过程中，即使营养条件充足，红豆杉细胞悬浮培养一段时间，就会停止增殖，其原因是培养一段时间后，培养液中的紫杉醇含量升高，而紫杉醇能和微管蛋白聚合体相互作用，促进微管聚合并使之稳定，因此抑制了红豆杉细胞的增殖。 32. 巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）是一种在进化中高度保守的蛋白质，具有重要的生物学功能。研究发现，MIF在哺乳类动物生殖系统各器官和母胎界面均有表达，参与了生殖过程的多个环节，包括胚胎早期发育、胚胎植入、胎盘发育和妊娠维持。为进一步阐明MIF蛋白在哺乳动物早期胚胎发育中的作用提供理论支持，通过现代生物技术对MIF在牛胚胎早期发育中的表达模式和功能进行初探。回答下列问题： （1）根据研究目标，要获得特定的牛胚胎细胞，先通过______技术大量收集牛卵母细胞，培养至成熟阶段后与解冻并______处理的精子结合，完成体外受精。 （2）受精卵培养过程中需维持的气体条件中包含5%的CO2，其作用是______。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和______，早期胚胎一般培养到______阶段才能进行移植。 （3）在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是______。 A. 卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达 B. 卵细胞含有的营养物质多 C. 卵细胞大，便于操作 D. 重组细胞才具有全能性 （4）为探究MIF对牛胚胎早期发育率的影响，常采用注射MIF抗体的方法来干扰MIF的表达。研究人员通过以下技术路线制备特异性强、纯度高的MIF单克隆抗体。 a．用______免疫小鼠，然后经过图中的①②③④等步骤，获得大量单克隆抗体。 b．步骤②通常使用HAT选择培养基，主要目的是筛选出______。 c．步骤③主要需要经过克隆化培养及______的两项操作，并经多次筛选，最终获得______。 【答案】（1） ①. 超数排卵 ②. 获能 （2） ①. 维持培养液的pH ②. 血清 ③. 囊胚期 （3）A （4） ①. MIF ②. 杂交瘤细胞 ③. 抗体检测 ④.   能分泌所需抗体的杂交瘤细胞      【解析】 【分析】1、哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤； 2、单克隆抗体的制备： （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞； （2）获得杂交瘤细胞： ①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合； ②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体； （3）克隆化培养和抗体检测； （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖； （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【小问1详解】 哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤。故要获得特定的牛胚胎细胞，先采用促性腺激素处理的方法大量收集牛卵母细胞（超数排卵），牛卵母细胞培养到减数第二次分裂中期（次级卵母细胞）再与解冻并经获能处理后的精子结合，完成体外受精； 【小问2详解】 体外受精得到的受精卵需要在CO2培养箱中保温培养，培养所要维持的气体条件中包含95%的空气和5%的CO2，其中CO2的作用是维持培养液pH。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和血清等。早期胚胎一般培养到桑葚胚或囊胚阶段才进行移植； 【小问3详解】 进行核移植时受体应该选择减数第二次分裂中期的卵母细胞，最有可能的原因是卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达，A正确，BCD错误。 故选A。 【小问4详解】 a、为获取MIF单克隆抗体，可以用MIF免疫小鼠，以获取产生特异性抗体的B淋巴细胞； b、步骤②为第一次筛选，通常使用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体； c、步骤③为第二次筛选，需要经过克隆化培养和抗体检测，并经多次筛选，最终获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 33. 普通玉米缺乏人体生长发育必需的赖氨酸。科研人员利用基因工程技术将高赖氨酸蛋白基因SBgLR转入玉米细胞获得高赖氨酸玉米新品种，操作流程如图所示，其中强启动子能驱动基因在植物细胞中持续转录，T-DNA区段中的基因在农杆菌中不表达。 （1）获取目的基因：检索生物信息数据库，获取SBgLR基因的编码序列，用______方法制备得到。 （2）构建重组质粒：优先选用______两种限制酶分别酶切SBgLR基因和Ti质粒，其优点是______、______等。 （3）转化农杆菌：将重组质粒导入氯化钙处理过、处于______的农杆菌，以提高转化效率。为筛选转化了的农杆菌，需要在培养基中加入______。 （4）转化愈伤组织：将转化了的农杆菌与愈伤组织共同培养一段时间，农杆菌Ti质粒中的______能够将目的基因导入并整合到受体细胞的染色体上。筛选转化的受体细胞时，培养基中需要加入______。 （5）培养转基因植株：愈伤组织培养形成植株的过程称为______，此过程需要在培养基上添加______调控其生长发育。 【答案】（1）化学合成（PCR） （2） ①. BamHⅠ和Hind Ⅲ ②. 使目的基因和质粒定向连接（防止自身环化） ③. 驱动目的基因的持续转录 （3） ①. 感受态 ②. 卡那霉素 （4） ①. T-DNA ②. 潮霉素 （5） ①. 再分化 ②. 植物激素（生长调节剂、生长素和细胞分裂素） 【解析】 【分析】1、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建；（3）将目的基因导入受体细胞；（4）目的基因的检测与鉴定； 2、利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增。PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA 双链的解聚与结合PCR仪实质上就是一台能够自动调控温度的仪器。一次PCR一般要经历30次循环DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来； 3、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度。终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。 【小问1详解】 已知目的基因的编码序列，可以采用化学合成（PCR）方法制备得到； 【小问2详解】 由图可知，质粒上没有启动子，而目的基因的上游含有强启动子，所以需要保留，故选择BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶分别酶切SBgLR基因和Ti质粒，其优点是使目的基因和质粒定向连接（防止自身环化）、驱动目的基因的持续转录； 【小问3详解】 将目的基因导入微生物细胞时，需要用氯化钙（CaCl2）处理，使其成为感受态，容易吸收周围环境中的DNA分子，以提高转化效率。重组质粒上含有卡那霉素抗性基因，所以为筛选转化了的农杆菌，需要在培养基中加入卡那霉素； 【小问4详解】 将转化了的农杆菌与愈伤组织共同培养一段时间，农杆菌Ti质粒中的T-DNA能够将目的基因导入并整合到受体细胞的染色体上。T-DNA上含有潮霉素抗性基因，所以筛选转化的受体细胞时，培养基中需要加入潮霉素； 【小问5详解】 愈伤组织培养形成植株的过程称为再分化，此过程需要在培养基上添加植物激素（生长调节剂、生长素和细胞分裂素）调控其生长发育。 34. 天然微生物来源的内切葡聚糖酶产量低，极大地制约了其生产和应用。内切葡聚糖酶高效异源表达是解决这一问题的有效途径。科研人员从绿色木霉中获得了纤维素内切葡聚糖酶基因EgⅢ，并将其导入毕赤酵母中，成功构建了工程菌（如图），实现了高效降解固体废物中纤维素的目的。 回答下列问题： （1）在构建基因表达载体时，应选择的限制酶是______，以避免目的基因与质粒反向连接。启动子通常具有物种及组织特异性，应选择来源于______的启动子。 （2）将重组质粒导入大肠杆菌的目的是______，此外还可查询______并设计引物，提取绿色木霉______为模板，采用逆转录PCR技术达到此目的。筛选含有重组质粒的大肠杆菌应使用的抗生素是______，理由是______。 （3）科学家为调整纤维素内切葡聚糖酶的最适pH，欲对酶分子结构进行改造，设计了酶分子的氨基酸序列，进而利用基因工程技术改变EgIII基因中______的核苷酸序列，最终显著地改变了该酶的最适pH，这属于______工程。 （4）农作物秸秆富含纤维素，利用纤维素生产燃料乙醇避免了与人争粮的问题，实现了纤维素类固体废物的减量化、无害化和______。 【答案】（1） ①. BamHⅠ和SalⅠ ②. 毕赤酵母 （2） ①. 扩增目的基因 ②. 基因数据库 ③. 总RNA ④. 氨苄青霉素和卡那霉素 ⑤. 含有重组质粒的大肠杆菌细胞中氨苄青霉素抗性基因能表达，卡那霉素基因不能表达 （3） ①. 特定位点 ②. 蛋白质 （4）资源化 【解析】 【分析】1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与表达。 2、限制酶的选择原则：不破坏目的基因、保留标记基因、启动子、终止子、复制原点等、确保出现相同黏性末端的原则。为了避免目的基因、质粒的自身环化以及目的基因与质粒反向连接，分别使用两种限制酶去切割目的基因和运载体。 【小问1详解】 为避免自身环化和反向连接，在构建基因表达载体时，最好选择两种酶，图中EcoRI会破坏目的基因，BamHI、SalI刚好可以切目的基因两端，且载体上也有这两个限制酶的切割位点，故应该用BamHI和SalI切割。启动子通常具有物种及组织特异性，只有使用受体生物自身基因的启动子才能有利于基因的表达，所以应选择来源于毕赤酵母的启动子。 【小问2详解】 图中步骤1将重组质粒导入大肠杆菌后，就会在大场杆菌体内复制，产生大量重组质粒，即大量扩增目的基因。扩增目的基因还可以通过PCR技术，查询基因数据库设计引物，提取绿色木霉总RNA为模板进行扩增。筛选含有重组质粒的大肠杆菌应使用氨苄青霉素和卡那霉素，因为含有重组质粒的大肠杆菌细胞中氨苄青霉素抗性基因能表达，卡那霉素基因不能表达。 【小问3详解】 蛋白质工程首先要建立蛋白质功能与结构的联系，欲对酶分子结构进行改造，设计了酶分子的氨基酸序列，进而利用基因工程技术改变EgIII基因中特定位点的核苷酸序列，最终显著地改变了该酶的最适pH，这属于蛋白质工程。 【小问4详解】 利用纤维素生产燃料乙醇既可以避免与人争粮的问题还实现了纤维素类固体废物的减量化、无害化和资源化。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 当湖高级中学2024学年第二学期高二3月阶段测试 生物试卷 一、选择题（本大题共30小题，每小题2分，共60分。每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，不选、多选、错选均不得分） 1. 全球变暖是地表温度年间缓慢上升的现象，目前主要用温室效应来解释。下列叙述错误的是（ ） A. 全球变暖会加剧物种消亡 B. 温室效应使地球温度升高，不利于生物生存 C. 植树造林、减少化石燃料的燃烧是缓解温室效应的重要途径 D. 温室气体对长波辐射具有屏蔽作用，从而导致温度上升 2. 人体内环境保持相对稳定以维持正常生命活动。下列物质不存在于内环境中的是（ ） A. Ca2+ B. 淀粉 C. 葡萄糖 D. 氨基酸 3. 某种海龟的舌尖处有两条红色突起，它在捕食时，先张开口并让舌头来回摆动，很像小虫在蠕动。这种信息传递的意义是引诱猎物，以利于捕食。海龟的这种活动包含下列哪种信息的传递（ ） A. 物理和化学信息 B. 行为和化学信息 C. 物理和营养信息 D. 物理和行为信息 4. 人体在接种乙肝病毒灭活疫苗后，血清中会出现相应抗体，发挥免疫保护作用。下列细胞中，不直接参与此过程的是（　　） A. B淋巴细胞 B. 吞噬细胞 C. 细胞毒性T细胞 D. 辅助性T细胞 5. 研究人员对改造绿地的昆虫进行调查，记录到68种昆虫，隶属于10目45科，都明显高于对照样地。该调查的主要内容是（ ） A. 种群最基本的数量特征 B. 群落中的物种丰富度 C. 群落中物种的生态位 D. 生态系统的营养结构 6. 为得到性状优良的高产奶牛，可采取下图中的技术路径。下列叙述正确的是（ ） A. 核移植过程中需要减数第二次分裂前期的去核卵母细胞 B. 过程1需将胚胎培养至原肠胚期进行胚胎移植 C. 过程2子代奶牛遗传性状与供体奶牛完全一致 D. 转基因技术可为过程1、2提供改良性状的方式 7. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A. 用SDS处理材料，能使核蛋白变性并与DNA分离 B. 鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴 C. 选用植物细胞提取DNA时，研磨后用滤纸进行过滤 D. 琼脂糖凝胶加样孔一端朝向电泳槽的正极 8. 为研究甲状腺激素分泌的调控，某同学给大鼠注射抗促甲状腺激素血清后，测定其血液中相关激素的含量并进行分析。下列叙述正确的是（ ） A. 甲状腺激素对下丘脑的负反馈作用减弱 B. 垂体分泌促甲状腺激素的功能减弱 C. 促甲状腺激素释放激素含量降低 D 甲状腺激素含量升高 9. 将山核桃miRNA169基因转入到拟南芥中，可促进拟南芥提前开花，部分流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①通常需要逆转录酶催化 B. 过程②中可利用 PCR 技术扩增并筛选出目的基因 C. 过程中转化农杆菌一般需要农杆菌的Ti质粒作为表达载体 D. 过程④收获转化的种子需经植物组织培养才能获得提前开花的植株 10. 近年报道了多起猴痘病毒感染病例，人体感染猴痘病毒后会产生一系列的免疫应答。下列叙述正确的是（ ） A. 猴痘病毒的增殖发生在血浆内 B. 注射猴痘病毒疫苗属于人工被动免疫 C. 体内的各种B淋巴细胞都能识别猴痘病毒 D. 在抵抗猴痘病毒过程中，辅助性T细胞既参与体液免疫也参与细胞免疫 11. 研究表明，氨基酸代谢异常会导致脑组织内谷氨酰胺含量上升，引发脑组织大量吸水出现水肿、昏迷、膝跳反射加剧、39℃左右的高烧持续不退等症状。下列叙述正确的是（ ） A. 机体持续高烧期间产热量明显高于散热量 B. 体温发生变化后会引发下丘脑发生电位变化 C. 脑组织大量吸水过程中脑组织细胞的吸水能力不断上升 D. 静脉注射抗利尿激素，可以有效缓解脑组织水肿症状 12. 一些植物能通过感知外界光照变化，调节脱落酸和赤霉素合成，保证冬天（短日照）休眠、夏天（长日照）生长。有关叙述错误的是（　　） A. 光作为一种信号参与植物生命活动的调节 B. 短日照能抑制脱落酸和赤霉素的合成 C. 脱落酸和赤霉素的合成均受基因表达的调控 D. 植物的生长发育不仅受激素调节，还受环境因素影响 13. 2023年4月25日，来自长江天鹅洲故道的4头迁地保护长江江豚分批顺利放归进入长江干流新螺和石首江段。下列相关叙述正确的是（ ） A. 随着江豚数量增加，种内斗争加剧，江豚的环境容纳量降低 B. 研究江豚的生态位有助于了解其在群落中的地位和作用 C. 迁地保护是保护生物多样性中最有效的保护措施 D. 经迁地保护的江豚回归长江后，生态系统中营养级数量增加 14. 科学家发现了一种特定功能的人体蛋白质X，某科研小组制备一种膀胱生物反应器来生产蛋白X，如图是生产的基本流程。据图分析下列正确的是（ ） A. 步骤①进行前需要对精子提供足够的能量 B. 步骤②常采用显微注射法将重组载体注入雄原核 C. 步骤③进行传代培养时需用胰蛋白酶处理 D 步骤④进行前需对代孕母牛注射免疫抑制剂 15. 为了研究校园土壤动物丰富度，某小组采用土壤取样器在校园的不同地点、不同深度进行取样，然后进行土壤动物的分离和种类鉴定。下列叙述正确的是（　　） A. 校园的不同地点动物种类不同，体现了群落的垂直结构 B. 同一地点不同深度动物种类不同，体现了群落的水平结构 C. 若在不同地点都采集到同一种动物，则这种动物的生态位相对较宽 D. 若某一地点土壤动物的丰富度较高，则往往每种动物的个体数较多 16. 2024年2月25日，世界首例体细胞克隆顶级种用藏羊“青青”在青海省诞生。研究人员采集种羊耳缘组织培养成耳纤维细胞作为核供体细胞，通过体细胞核移植获得种羊克隆胚胎。下列相关叙述正确的是（ ） A. 使用无菌的胰蛋白酶消化耳缘组织间的胶原纤维 B. 培养耳纤维细胞时使用CO2培养箱维持中性偏酸环境 C. 配制一系列不同成分的培养液进行全体外胚胎培养 D. 重组细胞会依次经历囊胚、桑椹胚、原肠胚等发育阶段 17. 某湖区浅水和泥滩中栖息着一种水鸟，以湖区某些植物作为主要的食物来源，能量流经食物链上该种水鸟的示意图如下。下列叙述正确的是（ ） A. 流经该生态系统的总能量是水鸟的食源植物所固定的太阳能总量 B. 图中的③代表水鸟的同化量流向分解者的部分 C. 图中的①代表水鸟的同化量，也可代表水鸟的总次级生产量 D. 图中的②代表呼吸作用散失，因此食物链中的能量流动具有单向性的特点 18. 研究不同浓度赤霉素对白洋淀白花芦苇(BYD-W)、白洋淀黄花芦苇(BYD-Y)以及宿州芦苇(SZ)生长发育与茎秤理化特性的影响；其部分实验结果如图。下列叙述错误的是（ ） A. 实验结果表明，100mg/L的赤霉素浓度会抑制SZ的茎杆生长 B. 在实验浓度范围内，赤霉素对BYD-W纤维素含量的影响不明显 C. 赤霉素明显提升BYD-Y纤维素含量可能与基因选择性表达有关 D. 导致不同种芦苇敏感性不同的原因可能是赤霉素受体数量差异 19. 养殖场的粪便富含氨氮化合物，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①中两种培养基的灭菌方式均为高压蒸汽灭菌法 B. ②应挑取在2种培养基上均能生长的菌落用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测其活性，筛选得到甲、乙 D. 养殖场应选择菌株甲添加在粪便中以减少NH3的产生 20. CD47是一种跨膜糖蛋白，能抑制巨噬细胞的免疫清除作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍。下图1为抗CD47的单克隆抗体的制备流程，图2为图1过程②的具体操作。下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①中筛选出的杂交瘤细胞都具有产生抗体和无限增殖能力 B. 用多孔玻璃板培养和筛选杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种1个细胞 C. 出现阳性反应的原因是抗原与抗体发生了特异性的结合 D. 注射抗CD47的单抗可以增强巨噬细胞对多种肿瘤细胞的清除作用 21. 利用动物细胞核移植等技术可以进行动物克隆。下图是利用优良性状牛的高度分化的体细胞生产克隆牛的基本程序，有关叙述错误的是（ ） A. 过程②培养基中需要添加胰蛋白酶 B. 过程③需要用胚胎移植技术 C. 牛犊（乙）的性别不一定为雌性 D. 牛犊（乙）的遗传物质来自卵母细胞和体细胞 22. 某研究小组进行微型月季的快速繁殖研究，结果如表所示。 流程 最佳措施或最适培养基 ①外植体腋芽消毒 75%乙醇浸泡30s+5%NaClO浸泡6min ②诱导出丛生苗 MS+3.0mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA ③丛生苗的扩增 MS+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA ④丛生苗的生根 1/2MS+0.25mg·L-1IBA+0.25mg·L-1NAA 注：丛生苗为丛状生长的幼苗，IBA（吲哚丁酸）为生长素类物质 下列叙述正确的是（ ） A. 流程①的效果取决于消毒剂浓度 B. 流程②不需要经过脱分化形成愈伤组织的阶段 C. 与流程②相比，流程③培养基中细胞分裂素类与生长素类物质的比值更大 D. 与流程③相比，提高流程④培养基的盐浓度有利于丛生苗的生根 23. 某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合，能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤细胞免疫逃逸。将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合，形成抗PD-L1的偶联药物（抗PD-L1—ADC），既可阻断PD-1与PD-L1结合，恢复CTL的活性，又能使化疗药物靶向肿瘤细胞，从而达到治疗目的，流程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 通过步骤①诱导形成的细胞可能有部分不能产生抗体 B. 通过步骤②筛选后能生长的细胞是异种核融合的细胞 C. 步骤③中进行克隆化培养和抗原检测，可获得目的细胞 D. 通过步骤④得到的单克隆抗体可使化疗药物靶向肿瘤细胞 24. 大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（ ） A. 提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解 B. 将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定 C. 电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理 D. 根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点 25. 植物细胞中的叶绿体和细胞核是两个相对独立的遗传体系，控制着许多优良性状，胞质杂交是植物体细胞杂交应用的一个重要方面。下图为将品种甲叶绿体中的优良基因导入品种乙的实验流程。下列说法错误的是（　　） A. 过程①可用纤维素酶和果胶酶处理，需在等渗或较高渗溶液中进行 B. 过程②通常用聚乙二醇（PEG）诱导融合，可加培养液稀释终止融合 C. 过程③筛选同时具备叶绿体和细胞核的融合细胞诱导再生细胞壁 D. 通过④获得的抗病品种丁，并能稳定遗传品种甲、乙的所有优良性状 26. 从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ） A. 可使用液体培养基进行富集培养 B. 为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌 C. 获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次 D. 利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为107倍 27. 部分限制酶的识别序列及切割位点如下表（注：箭头表示切割位点）。下列叙述正确的是（ ） 名称 识别序列及切割位点 名称 识别序列及切割位点 AatI AGG↓CCT TCC↑GGA EcoRI G↓AATTC CTTAA↑G KpnI G↓GTACC CCATG↑G BamHI G↓GATCC CCTAG↑G A. 表中4种限制酶均是从DNA两端逐步剪切核苷酸 B. EcoRI酶切后形成的黏性末端是5′AATT3′ C. KpnI与BamHI处理不同的DNA片段可获得互补的黏性末端 D. E．coliDNA连接酶可连接AatI酶切后形成的片段 28. 菊花是两性花，LFY 基因是控制植物花分生组织形成的基因。过量表达LFY 导致植物提早开花。为使菊花花期提前，科学家制备了含有拟南芥过量表达的LFY 基因的转基因菊花。重组Ti质粒的部分信息及实验流程如下图所示，其中启动子均为真核细胞启动子。下列叙述正确的是（ ） A. 在含潮霉素的培养基上存活的农杆菌才可用于侵染菊花叶片 B. 过程①②③所使用的培养基中植物激素的浓度和配比可以相同 C. I是一团具有一定组织结构、松散的薄壁细胞团，具有较强的分裂和分化能力 D. 诱导出芽和根的试管苗要先炼苗以适应外界的低湿强光环境才可进行移栽 29. 心肌细胞与神经细胞类似，均具有生物电现象。两者静息电位的形成机制相似，但动作电位明显不同，心肌细胞的动作电位分为0~4五个时期，其膜电位变化及形成机制如图所示，下列叙述中正确的是（ ） A. 若适当增大细胞外溶液的浓度，则静息电位的绝对值将变大 B. 神经递质作用于心肌后，即可引起通道介导的内流，出现0期 C. 在2期中，内流量和外流量相等，所以膜电位变化非常平缓 D. 3期中，钙离子通道关闭，钾离子外流，膜电位恢复至静息电位 30. 利用基因工程技术培育出油脂高产的四尾栅藻，是获取生物柴油的新途径。科学家欲从紫苏中提取DGAT1基因（催化油脂合成的关键酶基因），导入到四尾栅藻细胞，获得转基因油脂高产的四尾栅藻，质粒pCAMBIA与PCR扩增出的DGAT1酶切位点如图所示。现有BamHⅠ、BglⅡ、EcoRⅠ三种限制酶，它们识别并切割的碱基序列分别为BamHI：5'—G↓GATCC—3'，BglⅡ：5'—A↓GATCT—3'，EcoR I：5'—G↓AATTC—3'。已知启动子往往具有物种特异性，质粒pCAMBIA中EcoRI酶切位点与BamHⅠ酶切位点间的最短距离为600bp。用BglⅡ酶切割DGAT1，BamHⅠ酶切割质粒，下列叙述正确的是（ ） A. 过程②进行PCR时，需要在两种引物的3'端添加限制酶Bgl Ⅱ的识别序列 B. 在载体pCAMBIA 质粒中插入紫苏DGAT1基因，其上游启动子应选择紫苏的启动子 C. 重组质粒若只考虑两两连接，可得到4种大小不同的连接产物 D. 用EcoR I酶对不同的重组质粒进行酶切鉴定，正确连接的重组质粒酶切产物长度为2400bp和800bp 二、非选择题（本大题共4小题，共40分） 31. 紫杉醇是红豆杉属植物产生的次生代谢产物，能促进微管聚合并使之稳定，从而阻碍了肿瘤细胞的分裂，直至死亡。从36棵60年树龄的树皮中才能提取到1g紫杉醇，治疗一个癌症患者。利用植物细胞工程是生产紫杉醇的重要途径，如图是两条技术路线。请回答下列问题： （1）甲路线运用的原理是______。启动b过程的关键激素是______。其浓度以及______都会影响植物细胞发育的方向。 （2）甲路线生成完整植株通过两种途径，其中经由虚线的属于______途径，实线属于______途径。 （3）甲和乙路线中所用的外植体最好选取春季新长出来的______，接种前常用75%酒精、______对外植体进行消毒。其中甲的a、乙的①过程______（需要/不需要）光照。 （4）乙的过程②需更换为液体培养基进行______培养。悬浮培养时发现，即使营养条件充足，红豆杉细胞继代培养一段时间也会停止增殖，结合材料分析其原因可能是_______。 32. 巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）是一种在进化中高度保守的蛋白质，具有重要的生物学功能。研究发现，MIF在哺乳类动物生殖系统各器官和母胎界面均有表达，参与了生殖过程的多个环节，包括胚胎早期发育、胚胎植入、胎盘发育和妊娠维持。为进一步阐明MIF蛋白在哺乳动物早期胚胎发育中的作用提供理论支持，通过现代生物技术对MIF在牛胚胎早期发育中的表达模式和功能进行初探。回答下列问题： （1）根据研究目标，要获得特定的牛胚胎细胞，先通过______技术大量收集牛卵母细胞，培养至成熟阶段后与解冻并______处理的精子结合，完成体外受精。 （2）受精卵培养过程中需维持的气体条件中包含5%的CO2，其作用是______。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和______，早期胚胎一般培养到______阶段才能进行移植。 （3）在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是______。 A. 卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达 B. 卵细胞含有的营养物质多 C. 卵细胞大，便于操作 D. 重组细胞才具有全能性 （4）为探究MIF对牛胚胎早期发育率的影响，常采用注射MIF抗体的方法来干扰MIF的表达。研究人员通过以下技术路线制备特异性强、纯度高的MIF单克隆抗体。 a．用______免疫小鼠，然后经过图中的①②③④等步骤，获得大量单克隆抗体。 b．步骤②通常使用HAT选择培养基，主要目的是筛选出______。 c．步骤③主要需要经过克隆化培养及______的两项操作，并经多次筛选，最终获得______。 33. 普通玉米缺乏人体生长发育必需赖氨酸。科研人员利用基因工程技术将高赖氨酸蛋白基因SBgLR转入玉米细胞获得高赖氨酸玉米新品种，操作流程如图所示，其中强启动子能驱动基因在植物细胞中持续转录，T-DNA区段中的基因在农杆菌中不表达。 （1）获取目的基因：检索生物信息数据库，获取SBgLR基因的编码序列，用______方法制备得到。 （2）构建重组质粒：优先选用______两种限制酶分别酶切SBgLR基因和Ti质粒，其优点是______、______等。 （3）转化农杆菌：将重组质粒导入氯化钙处理过、处于______的农杆菌，以提高转化效率。为筛选转化了的农杆菌，需要在培养基中加入______。 （4）转化愈伤组织：将转化了的农杆菌与愈伤组织共同培养一段时间，农杆菌Ti质粒中的______能够将目的基因导入并整合到受体细胞的染色体上。筛选转化的受体细胞时，培养基中需要加入______。 （5）培养转基因植株：愈伤组织培养形成植株的过程称为______，此过程需要在培养基上添加______调控其生长发育。 34. 天然微生物来源的内切葡聚糖酶产量低，极大地制约了其生产和应用。内切葡聚糖酶高效异源表达是解决这一问题的有效途径。科研人员从绿色木霉中获得了纤维素内切葡聚糖酶基因EgⅢ，并将其导入毕赤酵母中，成功构建了工程菌（如图），实现了高效降解固体废物中纤维素的目的。 回答下列问题： （1）在构建基因表达载体时，应选择的限制酶是______，以避免目的基因与质粒反向连接。启动子通常具有物种及组织特异性，应选择来源于______的启动子。 （2）将重组质粒导入大肠杆菌的目的是______，此外还可查询______并设计引物，提取绿色木霉______为模板，采用逆转录PCR技术达到此目的。筛选含有重组质粒的大肠杆菌应使用的抗生素是______，理由是______。 （3）科学家为调整纤维素内切葡聚糖酶的最适pH，欲对酶分子结构进行改造，设计了酶分子的氨基酸序列，进而利用基因工程技术改变EgIII基因中______的核苷酸序列，最终显著地改变了该酶的最适pH，这属于______工程。 （4）农作物秸秆富含纤维素，利用纤维素生产燃料乙醇避免了与人争粮的问题，实现了纤维素类固体废物的减量化、无害化和______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $