内容正文:
课题1 菊花的组织培养
菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物,是我国的传统名花。
长期以来菊花采用分株、扦插等无性繁殖方法进行繁殖。但是传统的繁殖方法易受环境影响,繁殖周期长。
植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度快等特点,可以用较短的时间和较少的空间生产出大量的试管苗。
一、项目介绍
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是指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。
1、组织培养
(一)植物的组织培养的基本过程
一、基础知识
2、植物组织培养的原理
植物细胞具有全能性。(即生物体的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的能力)
(一)植物的组织培养的基本过程
一、基础知识
3、细胞分化
个体发育中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
4、植物组织培养需要哪些条件?
离体、营养物质、激素和其他外界条件。
(一)植物的组织培养的基本过程
离体组织或细胞
植物体
愈伤组织
芽
根
脱分化
再分化
③愈伤组织是通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。
②脱分化(去分化):由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
④再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫再分化。
①外植体:离体的植物器官或组织片段。
相关名词:
(一)植物的组织培养的基本过程
离体组织或细胞
植物体
愈伤组织
芽
根
(一)植物的组织培养的基本过程
营养物质、激素、pH、温度
营养物质、激素、pH、温度、光照
脱分化
再分化
(二)影响植物组织培养的因素
1、外植体的选取
2、培养基的配制(MS培养基)
3、不同植物激素浓度、使用顺序和使用量
4、pH、温度、光照等条件
(二)影响植物组织培养的因素
不同植物的组织培养难度不同
同一种植物的不同组织培养难度不同
大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S
微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等
1、外植体的选取
2、培养基的配制(MS培养基)
讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?
微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;
蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;
甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养。
3、不同植物激素浓度、使用顺序和使用量
(二)影响植物组织培养的因素
生长素细胞分裂素比值 结果
比值高时 促根分化,
抑芽形成
比值低时 促芽分化,
抑根形成
比值适中 促进愈伤组织生长
使用顺序 实验结果
先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但不利分化
先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞既分裂也分化
同时使用 分化频率提高
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总结植物组织培养过程:
离体组织或细胞
植物体
细胞分裂素≈生长素
愈伤组织
芽
根
细胞分裂素>生长素
细胞分裂素<生长素
脱分化
再分化
植物组织培养过程示意图
上面的示意图中还有什么地方不够完善的?
没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。
①细菌污染:菌斑呈粘液状,界限比较明显,一般接种后1-2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌。
植物组织培养的污染
②真菌污染:菌斑呈绒毛状、絮状,界限不明显,伴有不同颜色的孢子接种后3-10天才能发现。主要是霉菌污染。
植物组织培养的污染
1、外植体带菌
2、培养基及接种器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
污染途径
4、消毒:在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境
影响植物组织培养的因素
5、pH、温度、光照
菊花: pH=5.8、温度控制在18—22℃、每日光照12h
作业:完成必修一练习试卷
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菊花的组织培养
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制备MS固体培养基
外植体消毒
接种
培养
栽培
实验具体操作过程
移栽
实验具体操作过程
(一)制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备。
1、配置各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液
③用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量
实验具体操作过程
2、配置培养基
①定容
②调PH
③培养基的分装
实验具体操作过程
实验具体操作过程
3、灭菌
分装好的培养基连同其他