1.1 发酵工程的培养基 （课件）-【步步高】2023-2024学年高二生物学选择性必修3 生物技术与工程（苏教版）

第一节 发酵工程的培养基 第一章　发酵工程 学习目标 1.概述培养基的成分和类型。 2.掌握配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的方法。 教材梳理 1.培养基的类型 (1)培养基：主要是指为人工培养微生物等而制备的，适合微生物等 、______或积累代谢产物的营养基质。 生长 繁殖 (2)类型 组织 微生物 提取物 牛肉膏蛋白胨 取材 营养 配制 营养成分 重复性 准确 蒸馏水 成分 含量 可重复性 繁琐 较高 琼脂 基础 特殊 2.基础培养基 (1)概念：各种培养基的配方虽然不同，但其成分一般都含有 、 、______和 等最基本的物质，这些最基本的物质是大多数微生物对营养条件的 需求，提供这些基本需求的培养基就是基础培养基。 水 碳源 氮源 无机盐 基本 (2)培养基的成分 能量 蔗糖 淀粉 蛋白质 核酸 铵盐 牛肉膏 蛋白胨 3.特殊培养基 (1)概念：以 为基础，进一步配制的具有 用途的培养基。 (2)选择培养基 ①概念：是一种能将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中 出来的特殊培养基。 基础培养基 特殊 分离 纤维素 氮源 抑制或杀死 酚 放线菌 亚硫酸铋 细菌 放线菌 酵母菌 (3)鉴别培养基 ①用于快速分类 不同类型微生物的特殊培养基，也可用于________ _____产生某种代谢产物的微生物菌种。 ②实例 a.在添加可溶性淀粉的培养基中，如果菌落周围形成淀粉 ，说明是能产生 的菌株。 b.在添加 的培养基中，如果培养基的颜色由 ，说明是产酸微生物。 鉴定 分离和 筛选 水解圈 淀粉酶 溴甲酚紫 紫色转为黄色 (4)加富培养基 ①概念：也称 培养基，即在培养基中加入 某些微生物生长和繁殖所需的特殊物质，如血液、 、酵母浸膏、动植物 。 ②实例：培养百日咳博德氏菌需要含有 成分的加富培养基。 ③加富培养基与选择培养基的比较 a.加富培养基类似于 培养基。 b.采用加富培养基的目的，是 所需分离的微生物的数量，使其形成_________，以分离出该种微生物。 c.采用选择培养基的目的，一般是 不需要的微生物生长和繁殖，而使所需要的微生物 ，再分离出所需微生物。 营养 有利于 血清 组织液 血液 选择 增加 生长优势 抑制 增殖 (5)常用培养基 ①牛肉膏蛋白胨培养基 a.应用：培养细菌。 b.配方：牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g、 15～20 g、水1 000 mL。 ②高氏Ⅰ号培养基 a.应用：分离和培养 。 b.配方：可溶性淀粉20 g、KNO3 1 g、NaCl 0.5 g、 0.5 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、 0.01 g、琼脂15～20 g、水1 000 mL。 ③配制培养基需要根据培养目的调节培养基的 。 ④对培养基进行 是获得纯净的微生物培养物的前提。实验室一般用_______________进行灭菌。 琼脂 放线菌 K2HPO4·3H2O FeSO4·7H2O pH 灭菌 高压蒸汽灭菌锅 4.配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (1)实验目的 学会配制培养基，如培养 的培养基。 (2)实验原理 酵母菌生长繁殖需要的营养物质有 、 、 和无机盐等。马铃薯葡萄糖琼脂培养基具有酵母菌生长所需的碳元素、氮元素和其他营养物质。 酵母菌 水 碳源 氮源 (3)实验步骤 培养皿底部 过滤 加热 补水 5.5 污染 1/5 灭菌 自然倾斜 试管壁 121 名称 高压蒸汽灭菌锅 103 kPa (1)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源(　　) (2)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源(　　) (3)培养不同微生物的培养基成分完全一样(　　) (4)以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基(　　) (5)淀粉是一种能被所有微生物利用的碳源(　　) (6)在选择培养基中滴加一定浓度的酚溶液可以抑制细菌的生长(　　) × × × √ × √ 判断正误 16 任务一：培养基的成分的分析 1.所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源吗？请举例说明。 核心探讨 提示　并不是所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源。自养微生物能利用无机碳源(比如空气中的CO2)，其培养基中不需要加入碳源；固氮微生物可利用N2作为氮源，其培养基中不需要加入氮源。 2.如表是牛肉膏蛋白胨培养基的配方，分析回答下列问题： 材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水 用量 3 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL (1)该培养基中主要提供碳源和氮源的物质分别是什么？属于有机物还是无机物？ 提示　牛肉膏主要提供碳源，蛋白胨主要提供氮源。二者均属于有机物。 (2)该培养基培养的微生物同化作用类型是什么？请说明理由。 提示　该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型。该微生物的碳源和氮源来自有机物。 核心归纳 1.培养基的成分及功能 营养要素 来源 功能 碳源(提供碳元素的物质) 无机碳源 CO2、NaHCO3等含碳无机物 ①构成微生物体的重要成分； ②有机碳既是碳源又是能源 有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等 氮源(提供氮元素的物质) 无机氮源 铵盐、硝酸盐等 合成含氮的代谢产物 有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、豆饼粉、酵母粉等 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 核心归纳 水 外界摄入 ①良好的溶剂；②维持生物大分子结构的稳定 无机盐 无机物 是微生物生长繁殖所必需的，也是合成多种代谢产物所必需的 核心归纳 2.几种微生物的营养和能量来源 微生物 碳源 氮源 能源 蓝细菌 CO2 光能 硝化细菌 CO2 NH3 NH3的氧化 根瘤菌 糖类等有机物 N2 有机物 大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物 蛋白质等 有机物 1.关于微生物的营养，下列说法正确的是 A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮源也可能提供能量 √ 跟踪训练 对一些微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物可以既作碳源，又作氮源，A错误； 无机碳源不能提供能量，B错误； 除水以外的无机物种类繁多、功能多样，如CO2可作自养型微生物的碳源，C错误； 硝化细菌所利用的氮源是无机氮源——氨，同时氨的氧化过程也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源，D正确。 2.(2022·徐州高二检测)下列有关以CO2为唯一碳源的自养微生物所需营养物质的叙述，错误的是 A.铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮元素 B.碳源物质不是该微生物的能源物质 C.水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质 D.琼脂是该微生物的营养要素之一 √ 以CO2为唯一碳源的自养微生物，CO2不是该微生物的能源物质，B正确； 水、无机盐、碳源、氮源等最基本的物质是大多数微生物对营养条件的基本需求，C正确； 琼脂是凝固剂，不是该微生物的营养要素之一，D错误。 任务二：培养基的种类的探讨 1.微生物的培养离不开培养基，根据下面某微生物培养基的配方，回答下列问题： KH2PO4　 1.4 g Na2HPO4　 2.1 g MgSO4·7H2O　 0.2 g 葡萄糖　　 10.0 g 尿素　　　 1.0 g 琼脂　　　 15.0 g 将上述物质溶解后，用自来水定容到1 000 mL。 提示　该培养基属于固体培养基；因为该培养基的配方中含有凝固剂琼脂。 (1)根据培养基的物理性质，该培养基属于哪种培养基，并说明理由。 (2)此配方能否筛选出产生脲酶(脲酶的作用是催化尿素水解为氨和二氧化碳)的细菌？为什么？从此角度该培养基是什么类型？ 提示　能筛选出产脲酶的细菌；因为该培养基中尿素为唯一氮源，只有产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮源而生存；该培养基是选择培养基。 2.若有些培养基中加入了青霉素，培养的微生物可能是什么？ 提示　可能是真菌类微生物，如酵母菌或霉菌。 3.大肠杆菌的代谢产物(有机酸)能与伊红—亚甲蓝结合，从而形成深紫色、并带有金属光泽的菌落，据此配制的伊红—亚甲蓝琼脂培养基应为_____培养基。 鉴别 核心归纳 1.几种选择培养基的设计 特性 主要用途 设计原理 加入青霉素、四环素等 分离酵母菌或霉菌等真菌 能抑制某些细菌和放线菌的生长，对真菌无作用 不加氮源 分离固氮微生物 固氮微生物能利用空气中的氮气 不加碳源 分离自养型微生物 自养型微生物能利用无机碳源 核心归纳 2.几种常用的鉴别培养基 名称 主要用途 主要化学物质 特征性变化 伊红—亚甲蓝琼脂培养基 鉴别大肠杆菌 伊红、亚甲蓝 出现带金属光泽的深紫色菌落 刚果红培养基 鉴别纤维素分解菌 刚果红、纤维素 纤维素被分解后出现透明圈 核心归纳 油脂培养基 鉴别产脂肪酶菌株 食用油、吐温、中性红指示剂 由淡红色变成深红色 淀粉培养基 鉴别产淀粉酶菌株 可溶性淀粉 淀粉被水解后出现淀粉水解圈 溴甲酚紫培养基 鉴别产酸微生物 溴甲酚紫 培养基颜色由紫色转为黄色 3.(2023·南通高二检测)马铃薯葡萄糖琼脂培养基常用于真菌的筛选，其配制过程如下：将马铃薯去皮切成小块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯滤液。在马铃薯滤液中加入一定量的琼脂，用水定容后灭菌。下列相关叙述错误的是 A.应在培养基中加入青霉素，以抑制细菌的生长 B.除碳源外，马铃薯滤液还提供氮源和无机盐 C.氮源进入细胞后，可参与合成磷脂、核苷酸等物质 D.加入稀碘液后，周围为蓝色的菌落，一般能产生淀粉酶 √ 跟踪训练 青霉素能抑制某些细菌的生长，因此在培养基中加入青霉素后可以筛选真菌，A正确； 各种培养基的配方虽然不同，但其成分一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的物质，因此培养基中的马铃薯滤液除了为微生物生长提供碳源外，还可提供氮源和无机盐，B正确； 磷脂和核苷酸中都含有氮元素，因此氮源进入细胞后，可参与合成磷脂、核苷酸等物质，C正确； 淀粉遇稀碘液显蓝色，产生淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，因此会形成透明圈，D错误。 4.(多选)下列对各种培养基的分析和实际相符的是 A.利用缺乏氮源的培养基，能分离出固氮微生物 B.在培养基中添加青霉素、四环素等，可以选择培养出酵母菌等真菌 C.产酸微生物能使添加了溴甲酚紫的培养基由紫色转为黄色 D.加富培养基和选择培养基都能抑制不需要的微生物的生长和繁殖 √ 加富培养基是通过增加所需分离的微生物的数量，使其形成生长优势，从而达到分离该微生物的目的。 √ √ 网络构建 课时对点练 36 题组一　培养基的成分及功能 1.培养自养型微生物与异养型微生物的培养基，主要差别在于 A.碳源 B.氮源 C.无机盐 D.生长因子 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 16 17 2.(2023·南京高二检测)某杆菌只有在含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和微量维生素的培养基中才能生长，此时微量维生素对该菌的培养而言属于 A.碳源 B.氮源 C.激素 D.特殊营养物质 √ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 3.(2023·淮安高二调研)下列关于培养微生物所需营养物质的描述，正确的是 A.所有碳源都能为微生物生长提供能源 B.蛋白胨可为微生物生长提供碳源和氮源 C.硝酸钾只能为微生物生长提供无机盐 D.培养基中营养物质浓度越高，微生物生长繁殖越快 √ 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 有机碳源能为大多数微生物生长提供碳源和能源，无机碳源能为自养微生物生长提供碳源，但不能提供能源，A错误； 蛋白胨能为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源和维生素等，B正确； 硝酸钾能为微生物生长提供无机盐和氮源等，C错误； 培养基中的营养物质需要控制一定的浓度和比例，营养物质浓度太高会导致培养基渗透压过高，从而抑制微生物的生长，D错误。 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 题组二　培养基的类型 4.选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物，通过不加碳源的培养基、不加氮源的培养基、以尿素为唯一氮源的培养基，可从土壤中分离出的微生物依次是 A.硝化细菌、放线菌、根瘤菌 B.根瘤菌、青霉菌、固氮菌 C.异养型细菌、放线菌、硝化细菌 D.自养型细菌、固氮菌、分解尿素的细菌 √ 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 制备选择培养基时可以根据不同微生物的代谢特点改变培养基的成分，以达到选择某种微生物的目的。不加碳源的培养基可以分离出自养型微生物；不加氮源的培养基可以分离出固氮微生物；以尿素为唯一氮源的培养基可以分离出能分解尿素的微生物，D符合题意。 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 5.天然培养基是利用营养成分难以控制的天然物质配制而成的，合成培养基则是采用成分已知的化学试剂加蒸馏水配制而成的。下列说法正确的是 A.用合成培养基进行实验时，可重复性好 B.天然培养基的营养不如合成培养基丰富 C.微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快 D.合成培养基中不含有机物 √ 16 17 合成培养基中化学成分及其含量明确、实验的可重复性好，A正确； 天然培养基的营养成分一般比合成培养基丰富，B错误； 微生物生长的快慢除了与培养基的成分有关外，还受其他因素的影响，因此不能单一认为微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快，C错误； 合成培养基中也含有机物，D错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 6.获得某种特定的微生物一般需要用鉴别培养基进行鉴定，下列属于鉴别培养基的是 A.加入纤维素粉的培养基 B.加入青霉素的培养基 C.加入溴甲酚紫的培养基 D.加入血液成分的培养基 √ 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 加入纤维素粉的培养基可以分离出能分解纤维素的微生物，加入青霉素的培养基可以选择培养出酵母菌或霉菌等真菌，因此二者均属于选择培养基，A、B不符合题意； 加入溴甲酚紫的培养基可用于鉴别产酸微生物，属于鉴别培养基，C符合题意； 加入血液成分的培养基可用于培养百日咳博德氏菌，属于加富培养基，D不符合题意。 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 7.下列关于微生物培养基种类划分的叙述，错误的是 A.培养基按其物理性质可以分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基 B.培养基按其化学成分可以分为天然培养基、合成培养基 C.培养基按其用途可以分为基础培养基和特殊培养基 D.培养基按其营养构成可以分为含水培养基和无水培养基 √ 水是微生物必需的营养要素之一，培养基中必须含有水，D错误。 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 8.下列不属于选择培养基的是 A.培养金黄色葡萄球菌所用的加高浓度食盐的培养基 B.分离自养型细菌所用的不含碳源的培养基 C.用于检测大肠杆菌的伊红—亚甲蓝培养基 D.抑制乳酸菌生长而不抑制酵母菌生长的含抗生素的培养基 √ 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 对点训练 15 培养金黄色葡萄球菌的培养基中加入了高浓度食盐，在该培养基中只有金黄色葡萄球菌能够耐盐生存，其他微生物的生存受抑制，所以该培养基属于选择培养基，A不符合题意； 不含碳源的培养基中只有自养型细菌能够生存，其他微生物的生存受抑制，所以该培养基属于选择培养基，B不符合题意； 检测大肠杆菌的伊红—亚甲蓝培养基属于鉴别培养基，C符合题意； 含抗生素的培养基可以抑制乳酸菌的生长，而不能抑制酵母菌的生长，所以该培养基属于选择培养基，D不符合题意。 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 题组三　培养基的制备 9.下列关于培养基的配制的说法，不正确的是 A.配制培养基时要注意各种营养物质的浓度和比例 B.合适的培养基可实现分离、鉴定微生物等不同目的 C.不同微生物培养基的pH相同，都在7.0左右 D.不同培养基的配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐 √ 对点训练 16 17 配制培养基时，营养物质的浓度及比例应恰当，A正确； 培养基通过调整各种营养物质的组成等可实现分离、鉴定微生物等不同目的，B正确； 不同微生物生长所需要的最适pH不同，C错误。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 对点训练 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 10.下列关于配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的叙述，错误的是 A.分装时注意不要污染试管口 B.配制培养基时，待其中琼脂溶化后需补足水至1 000 mL C.制作斜面培养基时，倒入试管中的培养基高度约为试管高度的1/2 D.应采用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌 √ 对点训练 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 11.下列有关微生物培养基的成分与配制过程的相关说法，错误的是 A.培养基的成分需根据培养微生物的目的进行适当调整 B.固体培养基与液体培养基相比，其中含有琼脂成分 C.对培养基进行灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提 D.配制培养基过程中应先进行高压蒸汽灭菌再调节pH √ 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 12.(多选)下列关于四种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的叙述，正确的是 项目 硝化细菌 乳酸菌 酵母菌 衣藻 能源 氧化NH3 分解乳酸 固定N2 利用光能 碳源 CO2 糖类 糖类 CO2 氮源 NH3 N2 N2 代谢类型 自养需氧型 异养需氧型 异养需氧型 自养需氧型 A.硝化细菌 　　　 B.乳酸菌 　　　 C.酵母菌 　　　D.衣藻 √ √ 16 17 硝化细菌能利用氮源NH3，且能利用氧化NH3释放的化学能进行化能合成作用合成有机物，属于自养需氧型微生物，A正确； 乳酸菌是异养厌氧型微生物，不能直接利用N2，且能量来源为糖类，B错误； 酵母菌不能固定N2，能分解糖类等有机物，其代谢类型为异养兼性厌氧型，C错误； 衣藻是低等植物，能利用光能进行光合作用制造有机物，属于自养需氧型微生物，D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 13.(多选)(2023·泰州高二月考)如图4支试管分别代表4种微生物(固氮菌、 产甲烷菌、酵母菌、幽门螺杆菌)在半固体培养基中的生长状态，其中乙试管代表幽门螺杆菌的生长状态，如表为某培养基的成分及其含量。 成分 含量 成分 含量 葡萄糖 10 g CaSO4 0.2 g KH2PO4 0.2 g CaCO3 5 g MgSO4 0.2 g 琼脂 3.5 g NaCl 0.2 g 蒸馏水 1 L 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 下列叙述正确的是 A.甲、丙、丁三个试管中的微生物分 　别是固氮菌、产甲烷菌、酵母菌 B.将幽门螺杆菌转移到题表所示培养 　基继续培养，由于培养基营养充足而更有利于它的生长 C.幽门螺杆菌的代谢类型可能是微厌氧异养型 D.丁试管中的微生物在题表所示培养基上不能正常生长，但与圆褐固氮 　菌同时接种在题表所示培养基上可以正常生长 √ √ √ 16 17 分析题图4支试管中微生物对空气的依赖程度，甲试管中微生物在试管上部空气充足的条件下生长，其对应固氮菌；乙试管中幽 门螺杆菌在试管中部生长，其代谢类型可能是微厌氧异养型，在空气充足或绝对无氧的环境中不能生长；丁试管中微生物在培养基中均匀分布，是兼性厌氧型微生物，其对应酵母菌；丙试管中微生物集中在试管底部生长，是严格厌氧型微生物，其对应产甲烷菌，A、C正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 16 17 由题表所示培养基的成分及其含量可知，该培养基缺少氮源，故将幽门螺杆菌转移到该培养基上不能正常生长；丁试管中的微生物酵母菌在该培养基上也不能正常生长，但与圆褐固氮菌同时接种在该培养基上可以正常生长，因为圆褐固氮菌能固定空气中的N2，为酵母菌的生长提供氮源，B错误，D正确。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 成分 含量 成分 含量 葡萄糖 10 g CaSO4 0.2 g KH2PO4 0.2 g CaCO3 5 g MgSO4 0.2 g 琼脂 3.5 g NaCl 0.2 g 蒸馏水 1 L 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 14.(多选)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，得到如图所示的两个菌落，培养平板经稀碘液处理，出现了以菌落为中心的透明圈。下列相关叙述正确的是 A.培养基中的淀粉也可为微生物提供氮源 B.两个菌落中的微生物为同一种微生物 C.两个菌落中的微生物均能将淀粉酶分泌至细胞外 D.透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越强 √ √ 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 淀粉只含有C、H、O三种元素，因此培养基 中的淀粉不能为微生物提供氮源，A错误； 两个菌落的周围均有透明圈，说明两个菌落 中的微生物均能产生淀粉酶并将淀粉酶分泌至细胞外，但不一定为同一种微生物，B错误，C正确； 透明圈是由于培养基中的淀粉被微生物产生的淀粉酶分解后而产生的，因此透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越强，D正确。 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 15.(多选)下列关于配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的叙述，正确的是 A.培养基应先调pH再进行灭菌 B.培养基应先灭菌再分装到培养皿 C.溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦 D.分装要待培养基冷却到50 ℃左右时进行 √ 配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的实验步骤为：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌，即培养基应先调pH再分装，分装后再灭菌，以避免分装用的培养皿上有杂菌，造成污染，A正确，B错误。 √ √ 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 16.人们按照各种生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，即液体培养基或固体培养基。如表为一种培养基的配方，试根据表中的成分回答下列问题： 16 17 成分 Ca(NO3)2 KH2PO4 KCl MgSO4 Fe(NO3)2 Mo 蒸馏水 含量 1 g 0.25 g 0.12 g 0.30 g 0.30 g 极少 1 000 mL (1)若上述培养基用于植物培养，在培养的初期植物出现萎蔫现象，最可能的原因是_______________，可采用的最简单的有效措施是_________。若培养一段时间后，检测到培养基中留存的 较少而Ca2＋等离子较多，这一现象与细胞质膜的___________功能有关。 加水稀释 培养基浓度过高 选择透过性 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 (2)各种培养基的具体配方不同，但一般都含有______________________ 及特殊生长因子。 (3)分析表中成分发现，此培养基若用于培养微生物，则只能培养的微生物代谢类型是________。培养基中含有的营养物质有_____类，分别是_________________。如果不慎将过量的NaCl加入培养基中，还不想浪费此培养基，则可加入___________，用于培养金黄色葡萄球菌。 16 17 成分 Ca(NO3)2 KH2PO4 KCl MgSO4 Fe(NO3)2 Mo 蒸馏水 含量 1 g 0.25 g 0.12 g 0.30 g 0.30 g 极少 1 000 mL 水、无机盐、碳源、氮源 自养型 无机盐、水和氮源 三 含碳有机物 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 (4)若此培养基用于菌种的鉴定，应该增加的成分是______。若表中除去Ca(NO3)2、Fe(NO3)2成分，该培养基则可用于培养____________。 16 17 琼脂 固氮微生物 成分 Ca(NO3)2 KH2PO4 KCl MgSO4 Fe(NO3)2 Mo 蒸馏水 含量 1 g 0.25 g 0.12 g 0.30 g 0.30 g 极少 1 000 mL 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 17.已知有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。 Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。 Ⅱ号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(15 g/L)。 Ⅲ号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(45 g/L)。 回答下列问题： (1)Ⅰ号培养基中为微生物提供氮源的是________________。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_____。 16 17 牛肉膏、蛋白胨 X 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源。Ⅱ号、Ⅲ号培养基中能为微生物提供碳源的有机物是X。 16 17 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 (2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_______，其原因是______________________________ _______________________________。 Ⅱ号培养基是以有机物X为唯一碳源的选择培养基，只有能降解X的细菌才能增殖，而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。 16 17 下降 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能 增殖，而能降解X的细菌能够增殖 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 综合强化 15 (3)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X分解为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供________和___________________________________。 在有氧条件下，丙酮酸参与细菌的有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。 16 17 能量 合成其他物质的原料(两空顺序可颠倒) NH、NO等 NO NO $$