第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数-【状元桥·优质课堂】2024-2025学年高中生物学选择性必修第三册（人教版2024）

3.D解析巴氏消毒法可以杀死牛奶中绝大多数微生物，并且 (5)X不同的微生物生长需要的pH是不同的，如培养霉 不破坏牛奶的营养成分，因此牛奶的消毒常采用巴氏消毒 菌时需将培养基调至酸性。 法，A项正确：密闭空间内的空气常采用紫外线照射消毒，B 关键能力·合作探究 项正确：玻璃实验器具可以放入干热灭菌箱中进行干热灭 教材边角 菌，C项正确：水厂供应的自来水通常经过氣气消毒，D项 1.提员(1)到富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌。因为 错误。 根据生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中， 4.A解析步骤②接种环经灼烧灭酋后，应在酒精灯火格旁冷 纤维素分解菌的含量相对较高，因此从这种土样中获得目的 却后再蘸取菌液（避免烫死菌种），B项错误：③到④过程中， 微生物的概率要高于普通环境。 每次划线前以及最后一次划线后都需要对接种环进行灼烧 (2)①富含纤维素②选择培养选择增加纤维素分解菌 灭菌，C项错误：完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将 的浓度③梯度鉴别纤维素分解菌④纤维素酶不 接种后的平板和一个未接种的平板倒置放入恒温培养箱中 能纤维素分解菌产生透明圈 培养，D项错误。 探究点1 5.解析(1)蛋白陈主要为细菌提供氨源、碳源和维生素等。(2)将 情境探究 含有一定求度A酋的少量培养基领倒在固体培养平板上， 1.提示该培养基与普通培养基相比较，共同点是营养组成大 凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊，表明A菌能 致相同，都包含碳源，氨源、水和无机盐等：不同点是该培养 在该固体培养平板上生长繁殖。(3)将含菌量较高的湖泊水 基以尿素为唯一氨源，使仅能以尿素为氮源的微生物生长。 样稀释后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时 2.提示由于水生栖热菌能在70~80℃高温条件下生存，而绝 间后，能溶解A菌的菌落周国会出现溶菌圆。(4)根据实验 大多数做生物在该条件下不能生存，故水生栖热菌能从热泉 实验材料和设备，圆形滤纸小片可用于吸收某种物质，离心 中被箭选出来。 机可用于分离菌体和细菌分泌物，为探究P菌溶解破坏A 3.提示(1)判断培养基是否被污染：设置未接种的培养基作为 菌的方式，可假设P菌通过分泌某种化学物质溶解破坏 空白对照一若培养基上无菌落生长，说明培养基未被污 A菌。 染。判断选择培养基是否起到了选择作用：设置接种相同接 答系(1)氮源，碳源(2)A菌能在固体培养平板上生长繁 种物的全营养培养基（牛肉背蛋白胨培养基）作为条件对 殖(3)稀释溶菌圈(4)假设P菌通过分泌某种化学物 照若对照培养基上长出的南落明显多于选择培养基上 质溶解破坏A菌 长出的菌落，则说明选择培养基起到了选择作用。 例1]D解析研究目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃 第2课时微生物的选择培养和计数 物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够高效降解 教材梳理·新知全解 角蛋白，所以应℃点取样，并且用角蛋白氨源培养基进行选 知识点1 择培养，D项正确。 1.(1)目的菌营养抑制或阻止(2)①抑制或阻止②尿 探究点2 素唯一氨源 情境探究 2.(1)菌液选择(2)①a.无菌水b.10②培养基酒精 提示(1)依据题图分析，图示为用稀释涂布平板法进行活菌 冷却菌液(3)倒置30~37℃单菌落 计数。这一方法主要包括“依次等比稀释”操作和“涂布平 辨正误 板”操作。 (1)/ (2)/ (2)该方法的原理是当样品稀释度足够高时，培养基表面生 (3)X筛选分解尿素的细菌必须以尿素为唯一氣源，不能 长的单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。一般选择菌 使用牛肉膏蛋白胨培养基。 落数在30一300的平板进行计数。 (4)X涂布器必须经过灼烧灭菌。 (3)细菌中性或弱碱性30~37℃ 知识点2 (4)目的是设置重复组一一统计某一稀释度下平板上菌落数 L.稀释涂布平板显微镜直接计数 时应至少涂布3个平板作为重复组，以增强实弥结果的说服 2.(1)一个活菌菌落(2)①30一300②3平均值(3)少 力与准确性。计数时应对该稀释度下的各平板菌落分别统 一个菌落菌落活菌 计并取平均值。 3.细菌活菌数和死菌数的总和 [例2]解析(1)由题图信息可知，步骤①②③为稀释涂布平板 4.(1)3~8cm尿素牛肉膏蛋白胨1×1030~300 法：稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目。为了 30~37稳定(2)①做好标记稀释度②稳定颜色 保证结果准确，一般选择菌落数为30一300的平板进行计 辨正误 数。实脸统计的菌落数往往比细菌的实际数目低，这是因 (1)×平板划线法可用于分离微生物，不可用来统计样品 为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一 中的活菌数目。 个葡落。(2)用记号笔在皿底上标明培养微生物名称、平板 (2)×在样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单 上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及培养基种类 菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，而当两个或多个细 等信息：纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法 胞连在一起时，也可形成一个菌落。 是平板划线法和稀释涂布平板法。(3)由于培养基中只有 (3)×统计菌落数目时，为保证结果准确，一般选择菌落数 尿素这一唯一氨源，而凡不能分解尿素的微生物均不能在 为30~300的平板进行统计。 该培养基中生存，故图中平板内培养基能对尿素分解菌起 (4) 到筛选作用。(4)如果实验中出现重复实验的结果差别很 ·149 大的情况，应分析实验过程中可能的影响因素，找出差异的 时将死细胞一起计数，菌落计数法当2个细胞或多个细胞连 原因，而不能简单地将结采舍弃后进行计数。用稀释涂布 在一起时，在平板上只观察到一个菌落(2)5×103(3)杀 平板法统计细菌数量时，当两个或多个细胞连在一起时，平 死涂布器上的微生物，防止杂菌污染避免温度过高杀死细菌 板上观察到的只是一个菌落，所以用此方法测得的活菌数 (4)A与B,C消毒液相比，A消毒液在相同处理时间下，活 较少，而且显微镜直接计数法统计的一般是活菌数和死菌 细菌减少量最多，且杀菌最快完成，杀菌速度快、效果好 数的总和。选取菌落数目稳定时记录结果，可防止因培养 (5)深紫 时间不足导致遗漏菌落数目。为判断培养基是否起到了选 择作用，应增设接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。(5) 第3节发酵工程及其应用 对分离的菌种还可以依据菌落的形状、大小，隆起程度等特 教材梳理·新知全解 征，对细菌作初步鉴定。 知识点1 答案(1)稀释涂布平板活菌30一300当两个或多个 1.微生物现代工程 细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 2.①诱变有种②扩大培养③配制培养基④反复试验 (2)培养基种类平板划线法和稀释涂布平板法 ⑤单一⑥杂菌污染⑦发酵设备⑧接种⑨中心 (3)由于该培养基以尿素为唯一氨源，凡是不能分解尿素的 四微生物数量①营养成分②温度、pH和溶解氧⑧细 微生物均不能生存，只有能分解尿素的微生物才能生存。 胞本身☑过滤，沉淀⑤提取、分离和纯化 即可筛选得到尿素分解菌。 辨正误 (4)不合理可能的影响因素少培养时间不足导致遗 (1)W (2)/ 漏菌落数目接种了的牛肉膏蛋白陈培养基 (3)× 发酵工程与传统发酵技术都要利用微生物来进行发酵。 (5)形状、大小，隆起程度和颜色 (4)/(5)/ 随堂演练·即时巩固 知识点2 1.A解折纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用平板划线法 1.温和丰富专一污染小医药 和稀释涂布平板法，A顶错误：无前技术要求实验操作应在 2.(1)(1)①a大豆蛋白酶b.水果②营养口味保存 酒精灯火培附近进行，以避免周国环境中微生物的污染，B 期a.黑曲霉b.谷氨酸棒状杆菌③3-淀粉酶氨基肽 项正确：在筛选过程中应选用选择培养基，即将土壤样品稀 酶生产工艺品质产量 释液接种到以原油为唯一碳源的固体培养基上，从而提高该 (2)①多种氨基酸免疫调节剂②蛋白质 菌的筛选率，C项正确：在微生物培养过程中，实验室常用的 (3)①a有机酸生物活性物质结构病原微生物b.根 灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌，D项正确。 瘤菌固氮菌②a.其代谢物b.80白僵菌井冈霉素 2.D解插应该设置对照以排徐非测试因素（如杂菌）对实验 ③a.菌体b.保鲜免疫力 结果的干扰，提高可信度，A项正确：分离不同的微生物要采 (4)①乙娇②嗜热菌嗜盐菌嗜低温菌 取不同的稀释度，因为微生物在土壤中的含量有较大差距， 辨正误 B项正确：如果得到了3个菌落数目在30~300的平板，则 (1)X单细胞蛋白是通过发酵工程获得的大量的做生物 说明稀择操作比较成功，并能够进行菌落的计数，C项正确： 菌体。 若牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显大于选择培养基的 (2)X食品工业中使用的酶制剂绝大多数是通过发酵工程 数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，D项错误。 生产的，但也有少数是由动植物生产的。 3.B解析依据题图分析，图甲是平板划线法，图乙是稀释涂 (3)/ 布平板法，这两种方法所用的接种工具分别是接种环和涂布 (4)×乳酸菌无氧呼吸的产物是乳酸，没有乙醇，不能代替 器，B项错误。 酵母菌用于乙醇的生产。 4.B解杨根据题意，脲酶被去徐镍后失去活性，说明镍是组 (5)×嗜低温菌有助于提高热缴性产品的产量。 成脲酶的重要元素，A项正确：脲酶催化尿素水解的机理为 关键能力·合作探究 降低化学反应所需的活化能，镍作为豚酶的重要组成元素， 教材边角 应该与降低尿素水解反应的活化能有关，B项错误：产脲酶 1.①选育菌种②灭菌 ③接种④分离、提纯产物 细菌可利用NH,C里的氨源进行代谢活动，因此产脲酶细 2.(1)①⑥②③⑦④⑤⑧ 菌可在以NH,C为唯一氨源的培养基生长繁殖，C项正确； 产脲酶细菌能利用脲酶催化尿素分解产生NH,NH可作 (2生产环 作川分析 为细菌生长的氨源，不能产脉酶的细菌则无法分解尿素获得 a杀死申洒的大多数微生物，延长 氨源，因此以尿素为唯一氨源的培养基可用于韩选产脲酶细 ①发芽、 保存期 茵，D项正确。 ②培烤 h产风味组分，终止科的进一步作 5.解析（」）微生物计数有显微镜直接计数法和葡落计数法，前 3恭点 用，并对糖浆火肉 者计数值比实际值偏大，后者计数值比实际值偏小。(2)由 c.大友种子发牙，释放淀粉前 ①消毒 题可知，细胞原液中细菌浓度为100÷0.2ml(平板涂布体 加热杀跳种了怀但不使淀粉？火活 积)×10（稀释倍数）=5×10个mL。(5)伊红美蓝培养基 探究点1 可用来鉴别大肠杆菌，生长在此培养基上的大肠杆蔺菌落呈 情境探究 深紫色，并有金属光泽。 提示(1)用于发酵的具有优良性状的菌种可以从自然界中 答系1)显微镜直接计数法无法区分死细胞和活细胞，计数 筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程有种获得。 150·null