精品解析：山东省菏泽市巨野县第二中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题

巨野二中高二3月生物月考 本试卷满分100分，分为第I卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分，试题答案请用2B铅笔和0.5mm签字笔填涂到答题卡规定位置上，书写在试题上的答案无效。考试时间90分钟。 第I卷（共45分） 一、单项选择题（本题包括15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题意) 1. 生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列相关叙述错误的是（ ） A. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 B. 用稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际值偏小 C. 获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH D. 对10mL土样样液稀释106倍后，取0.1mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、260，则该10mL土样样液中目的菌数为2.48×1010个 2. 用马铃薯琼脂培养基可以进行酵母菌的纯培养，酵母菌培养基的配方如下表所示。下列关于酵母菌的纯培养的说法，正确的是（ ） 组分 马铃薯滤液 葡萄糖 琼脂 加水定容至 含量 200g 20g 15g 1000mL A. 该培养基的碳源来自马铃薯、葡萄糖和琼脂 B. 纯培养物是由单一酵母菌繁殖所获得的酵母菌群体分泌的代谢物 C. 在配制固体培养基时需要先进行灭菌，再对pH进行调节 D. 为了检验培养基灭菌是否合格，应设置一个未接种的培养皿作为对照一起放至恒温培养箱中培养 3. 几丁质酶可以水解几丁质获得水溶性的几丁寡糖或乙酰葡萄糖胺。科研人员用透明圈法，以胶体几丁质为唯一碳源筛选出高产几丁质酶的无色杆菌菌株ZWW8，并进行了进一步的优化实验（酶活力指标可以反映产酶量）。据以下图表分析，相关说法错误的是（ ） 氮源 酶活力(U/L) 氯化铵 20. 7土1.2 硫酸铵 17.8土1.5 硝酸钠 6.4士1.9 尿素 13.3士1.0 蛋白胨 12.1土1.8 硝酸铵 19.2土0.2 不同氮源对ZWW8菌株产几丁质酶的影响 A. pH=8时几丁质酶的活力最小 B. 利用发酵工程可以实现几丁质酶的大量生产 C. 以氯化铵为氮源时ZWW8菌株的产酶量最高 D. 筛选高产菌株时应选择透明圈与菌落直径比值大的菌落 4. 下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ） ①生产谷氨酸需将pH调至中性偏碱 ②发酵工程具有生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉等特点 ③发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身 ④利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物农药可以促进植物生长 ⑤啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成 ⑥日常生活中食用酱油的制作以大豆为主要原料，利用产蛋白酶的霉菌的作用，将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸 ⑦用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 5. 科学家利用马铃薯和西红柿叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。有关分析正确的是（ ） A. 过程①应将叶片上表皮向上，置于含纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液中 B. 过程②中的原生质体由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成 C. ④过程可用高Ca2+一低pH融合法，目的是促进原生质体融合 D. ⑤进行脱分化和再分化过程，该过程均需提供无菌、光照等培养条件 6. 研究人员采用体细胞核移植技术培育克隆羊，其操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 用电融合法使去核的卵母细胞与供体细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重组胚胎 B. 供体细胞体外培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C. 重组胚胎进行分裂和发育可用电刺激、Ca2+载体、乙醇或蛋白酶合成抑制剂等激活 D. 选用去核卵母细胞的主要原因是去核卵母细胞的细胞质可使体细胞核的全能性表达 7. 下图为我国科研人员利用大鼠、小鼠两个物种创造出异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）的过程，该细胞具有分化成各种细胞的潜能。下列叙述错误的是（ ） A. AdESCs具有全能性 B. AdESCs的性染色体组成为XX或XY C. 生殖细胞发育成囊胚过程中发生了细胞分化 D. 图示过程中不可使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶 8. 下列关于卵裂的叙述，正确的是（ ） A. 卵裂时期细胞不断分裂，胚胎体积不断增大 B. 卵裂处于囊胚形成的过程中，每个细胞的体积不断增大 C. 卵裂过程进行有丝分裂，胚胎中DNA总量不断增加 D. 卵裂需要消耗能量，有机物总量和种类都不断减少 9. 我国科学家首次进行了大熊猫异种克隆的科学研究工作。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细胞之中，并使其成功发育成囊胚，标志着异种核质相容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”；然后至关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。下图是该研究的理论流程图。下列说法正确的是（ ） A. 囊胚的内细胞团细胞属于iPS细胞 B. 步骤甲的供体和步骤乙的受体需要同期发情处理 C. 诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞 D. 步骤甲、乙分别是指大熊猫体细胞核移植、胚胎收集 10. 抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. ADC中的抗体主要是发挥治疗效应，杀伤靶细胞 B. 制备ADC中的抗体应用了体细胞核移植、动物细胞培养等技术 C. ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的选择透过性 D. 可以将ADC中的药物换成放射性同位素，标记单克隆抗体进行靶向放疗 11. 甲型H1N1流感病毒表面的神经氨酸酶有4个抗原决定簇，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）。由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体。如图为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 多克隆抗体的产生需要多种B细胞参与 B. 诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合只能用灭活病毒诱导法 C. ①②都要在96孔板上用相同的选择培养基培养，用相同的方法筛选 D. 甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现多抗失效而单抗有效的情况 12. 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小肉质鲜嫩营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种，以下说法错误的是（ ） A. 用外源促性腺激素处理，可使供体母牛超数排卵 B. 批量培育和牛的过程中用到的技术有体外受精、早期胚胎培养、胚胎分割和胚胎移植等 C. 为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 13. 如图为某同学构建的细胞工程知识框架。以下相关说法正确的是（ ） A. 图中①指植物体细胞杂交，该过程常用灭活的病毒处理两种原生质体 B. 图中②指动物细胞核移植，属于细胞水平上的生物工程技术 C. 植物组织培养和动物细胞培养依据的原理都是细胞的全能性 D. 制备单克隆抗体的过程中运用到了动物细胞培养、动物细胞融合和②等技术 14. 培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述正确的是 A. 甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使用其超数排卵 B. 乙过程的目的之，是促进卵母细胞和精子的成熟 C. 丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液 D. 丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内 二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分) 15. 下图表示探究高效耐低温原油降解菌YF28—1（8）降解原油的最适温度实验的结果，5组实验中的温度t1～t5逐渐递增。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 对本实验中使用的接种工具——接种环采用灼烧灭菌法灭菌 B. 实验中应注意控制温度、接种的菌液量等无关变量 C. 温度为t3的培养皿为对照组，其他4组均为实验组 D. 若要确定更精确的最适温度，应在t2～t4内设置更小的温度梯度 16. 为了分离和鉴别土壤中分解纤维素的菌株，配制培养基如下，下列说法正确的是（ ） 纤维素分解菌选择培养基：纤维素粉 酵母膏 无机盐 纤维素分解菌鉴别培养基：纤维素粉 酵母膏 无机盐 土豆汁 X物质 刚果红 A. 培养基的配制过程应该先进行高压蒸汽灭菌再调pH B. X物质是琼脂，在鉴别培养基上选取周围有透明圈的菌落进行后续实验 C 用平板划线法对纤维素分解菌进行计数，统计结果与实际活菌数相同 D. 土壤采样时应选择落叶丰富土壤区域进行采样 17. 亲缘关系较远的两种植物体细胞杂交时会造成某些染色体因被排出而丢失。现有甲（2n=20）、乙（2n=18）两种亲缘关系较远的植物，甲植物细胞的染色体在原生质体融合前出现断裂，个别染色体片段在原生质体融合时移接到乙植物细胞的染色体上。下列分析正确的是（ ） A. 将甲、乙两种生物的细胞经PEG诱导后可获得杂种细胞 B. 杂种细胞中的染色体数为38条，培育的植株属于四倍体 C. 由杂种细胞发育为杂种植株体现了植物生殖细胞的全能性 D. 培育甲—乙杂种植物的过程发生了染色体结构和数目的变异 18. 让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断下列说法正确的是（ ） A. 图中涉及的细胞工程技术有动物体细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等 B. 进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚 C. 若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状 D. 依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊—牛” 19. 以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾细胞及骨髓瘤细胞（2n=62-68），筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体（mAb），相关检测结果如图A、B所示。有关说法正确的是（ ） 图A 杂交瘤细胞染色体数目 图B不同浓度mAb对RecQ蛋白结合DNA活性的影响 A. 重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化 B. 单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和2次抗原检测 C. 杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失 D. 该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为1/800时可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合 第Ⅱ卷（非选择题，共55分） 三、非选择题（本题包括4小题，共55分） 20. 苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而成的饮品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起来非常爽口。苹果醋能保健养生、改善疲劳、美容养颜，是目前大众非常喜爱的饮品。如图是苹果醋的制作简图，请据图回答： （1）过程①中使用到的微生物是____，在适宜条件下进行____生殖。若要检测是否产生了苹果酒，可用____试剂进行检测，如果有苹果酒产生能观察到溶液变为____ 色。 （2）过程②和过程③中起作用的微生物都是____，但该微生物在过程②和③中分解的碳源不同，过程②和③中的碳源分别是____和糖类。 （3）生产果醋时，发酵所需微生物可从食醋中分离纯化获得，具体方法是： 第一步：配制培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的基本营养成分。 第二步：对培养基用____法进行灭菌。 第三步：接种。常用的微生物接种方法有：____法和稀释涂布平板法。 第四步：培养。温度控制在____℃，培养时____（填“需要”或“不需要”） 提供氧气。 第五步：挑选符合要求的菌落。 第六步：菌种的保存。对于频繁使用的菌种可以接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的条件下培养 一段时间，然后置于4℃冰箱中保存。 21. 番茄灰霉病菌严重影响番茄生产，枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者设计了相关实验。回答下列问题： （1）检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时，取适量_______菌液涂布于固体培养基上，将无菌滤纸片（直径5mm）在________菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心，数秒后取出滤纸片，培养皿倒置培养后测量_______大小以判定抑菌效果。 （2）枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培养时应采用“摇床震荡”培养，“摇床震荡”的目的是_______、_______。培养过程中抽样检测活菌数量时，应采用_______（填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”），其原因是_______。 22. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 （1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其______（填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用_______（填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 （2）过程①通过酶解法去除_______获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带_______的杂种原生质体。 （3）科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由图2可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在_______种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为_______。 （4）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组的实验处理补充完整_____。 ②若实验结果为______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 23. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： （1）如图1所示，杂交瘤杂交法是________细胞与______细胞进行了融合，目的是为了获得_______的抗体。 （2）对③筛选出杂交瘤细胞，还需进行______和______，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。图1中方框内需要经过______次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。 （3）与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是________。 （4）体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为_______而导致分裂受阻，需进行传代培养。 （5）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是______，体现的是双特异性单克隆抗体在_________方面的用途。 24. 如图是科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠的流程。回答下列有关问题： （1）图中黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的________过程类似。该过程结束后，细胞的全能性_________（填“提高”或“降低”）。 （2）从黑鼠体内获得体细胞培养时，必须保证环境是__________的，培养液需定期更换，原因是_________。将它们置于含有_________的混合气体的CO2培养箱中进行培养 （3）将重组囊胚移入白鼠子宫内技术为_________，克隆鼠X的体色为_________。科学家又利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不完全相同，若不考虑环境因素的影响，造成该现象的原因可能是________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 巨野二中高二3月生物月考 本试卷满分100分，分为第I卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分，试题答案请用2B铅笔和0.5mm签字笔填涂到答题卡规定位置上，书写在试题上的答案无效。考试时间90分钟。 第I卷（共45分） 一、单项选择题（本题包括15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题意) 1. 生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列相关叙述错误的是（ ） A. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 B. 用稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际值偏小 C. 获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH D. 对10mL土样样液稀释106倍后，取0.1mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、260，则该10mL土样样液中目的菌数为2.48×1010个 【答案】D 【解析】 【分析】接种微生物常用的两种方法：（1）平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。（2）稀释涂布平板法则是菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 【详解】A、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，因此两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度，A正确； B、因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所得数据往往比实际数据偏小，B正确； C、因为不同的微生物所需的最适pH条件不同，因此，在获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH，C正确； D、纯培养的培养基没有选择性，故对10mL土样样液稀释106倍后，取0.1mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、260，则该10mL土样样液中目的菌数应小于（218+266+260）÷3÷0.1×106×10=2.48×1010个，D错误。 故选D。 2. 用马铃薯琼脂培养基可以进行酵母菌的纯培养，酵母菌培养基的配方如下表所示。下列关于酵母菌的纯培养的说法，正确的是（ ） 组分 马铃薯滤液 葡萄糖 琼脂 加水定容至 含量 200g 20g 15g 1000mL A. 该培养基的碳源来自马铃薯、葡萄糖和琼脂 B. 纯培养物是由单一酵母菌繁殖所获得的酵母菌群体分泌的代谢物 C. 在配制固体培养基时需要先进行灭菌，再对pH进行调节 D. 为了检验培养基灭菌是否合格，应设置一个未接种的培养皿作为对照一起放至恒温培养箱中培养 【答案】D 【解析】 【分析】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、琼脂本身不能作为微生物的碳源，而是作为凝固剂起作用，A错误； B、纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，B错误； C、为实现无菌操作，在配制固体培养基时需要先对pH进行调节，再进行灭菌，C错误； D、为了检验培养基灭菌是否合格，应设置一个未接种的培养皿作为对照一起放至恒温培养箱中培养：若空白培养基长出菌落，证明灭菌不合格，D正确。 故选D。 3. 几丁质酶可以水解几丁质获得水溶性的几丁寡糖或乙酰葡萄糖胺。科研人员用透明圈法，以胶体几丁质为唯一碳源筛选出高产几丁质酶的无色杆菌菌株ZWW8，并进行了进一步的优化实验（酶活力指标可以反映产酶量）。据以下图表分析，相关说法错误的是（ ） 氮源 酶活力(U/L) 氯化铵 20. 7土1.2 硫酸铵 17.8土1.5 硝酸钠 6.4士1.9 尿素 13.3士1.0 蛋白胨 12.1土1.8 硝酸铵 19.2土0.2 不同氮源对ZWW8菌株产几丁质酶的影响 A. pH=8时几丁质酶的活力最小 B. 利用发酵工程可以实现几丁质酶的大量生产 C. 以氯化铵为氮源时ZWW8菌株的产酶量最高 D. 筛选高产菌株时应选择透明圈与菌落直径比值大的菌落 【答案】A 【解析】 【分析】据图表分析：以氯化铵为氮源时ZWW8菌株产几丁质酶的酶活力最高，产酶量最高。PH为6时ZWW8菌株产几丁质酶的酶活力最高。 【详解】A、pH=8时ZWW8菌株产几丁质酶的酶活力最低，不是几丁质酶的活力最小，A错误； B、发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，发酵工程通过扩大培养获得大量菌种，可以实现对几丁质酶的大量生产，B正确； C、据表格可知，以氯化铵为氮源时ZWW8菌株产几丁质酶的酶活力最高，产酶量最高，C正确； D、筛选高产菌株时应选择透明圈大、菌落直径小的菌落，所以筛选高产菌株时应选择透明圈与菌落直径比值大的菌落，D正确。 故选A。 4. 下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ） ①生产谷氨酸需将pH调至中性偏碱 ②发酵工程具有生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉等特点 ③发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身 ④利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物农药可以促进植物生长 ⑤啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成 ⑥日常生活中食用酱油的制作以大豆为主要原料，利用产蛋白酶的霉菌的作用，将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸 ⑦用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 【答案】C 【解析】 【分析】1、细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长。2、微生物含有丰富的蛋白质。以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白，用单细胞蛋白制成的微生物饲料，能使家畜、家禽增重快，产奶或产蛋量显著提高。3、微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长。 【详解】①谷氨酸是由谷氨酸棒状杆菌生产的，而谷氨酸棒状杆菌属于细菌，通常要求在中性偏碱的环境中生长，①正确； ②发酵工程以其生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、产物专一、废弃物对环境的污染小和容易处理等特点，而得到广泛应用，②正确； ③发酵工程的产品可以是微生物的代谢物、酶以及菌体本身，③正确； ④根瘤菌肥作为微生物肥料，可以通过根瘤菌固氮作用，增加土壤中的氮肥量，促进植物生长，④错误； ⑤啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵， 因此酒精主要在主发酵阶段的产生积累，⑤错误； ⑥产蛋白酶的霉菌的作用，将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，赋予酱油特有的风味，⑥正确； ⑦单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，⑦错误。 故选C。 5. 科学家利用马铃薯和西红柿叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如图所示。有关分析正确的是（ ） A. 过程①应将叶片上表皮向上，置于含纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液中 B. 过程②中的原生质体由细胞膜、液泡膜及两层膜之间的细胞质构成 C. ④过程可用高Ca2+一低pH融合法，目的是促进原生质体融合 D. ⑤进行脱分化和再分化过程，该过程均需提供无菌、光照等培养条件 【答案】A 【解析】 【分析】植物体细胞杂交要将不同种的植物细胞诱导融合成一个杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成植株，体现的生物学原理为细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。在融合之前需先用纤维素酶和果胶酶去除植物的细胞壁获得原生质体，杂种细胞再生出新的细胞壁是细胞融合完成的标志。 【详解】A、①应将叶片下表皮的一面朝下（能与溶液接触），原生质体没有细胞壁，为避免原生质体吸水涨破，将叶片置于等渗或略高渗溶液中，A正确； B、原生质层的结构是由细胞膜、液泡膜以及这两层膜之间的细胞质组成，而原生质体是植物细胞去除细胞壁的结构，B错误； C、诱导原生质体融合的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法等，④过程可用高Ca2＋—高pH融合法，目的是促进原生质体融合，C错误； D、脱分化一般不需要光照，D错误。 故选A。 6. 研究人员采用体细胞核移植技术培育克隆羊，其操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 用电融合法使去核的卵母细胞与供体细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重组胚胎 B. 供体细胞体外培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C. 重组胚胎进行分裂和发育可用电刺激、Ca2+载体、乙醇或蛋白酶合成抑制剂等激活 D. 选用去核卵母细胞的主要原因是去核卵母细胞的细胞质可使体细胞核的全能性表达 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】AC、去核的卵母细胞与供体细胞可以通过电刺激融合，供体核进入受体卵母细胞，构建成重组胚胎，融合后的重组胚胎，需要用物理（如电刺激）或化学（Ca2+载体、乙醇或蛋白酶合成抑制剂）的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程，AC正确； B、供体细胞体外培养应在95%空气加5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是维持培养液的pH，B错误； D、在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，因为卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达，D正确。 故选B。 7. 下图为我国科研人员利用大鼠、小鼠两个物种创造出异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）的过程，该细胞具有分化成各种细胞的潜能。下列叙述错误的是（ ） A. AdESCs具有全能性 B. AdESCs的性染色体组成为XX或XY C. 生殖细胞发育成囊胚过程中发生了细胞分化 D. 图示过程中不可使用胰蛋白酶、胶原蛋白酶 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）。 【详解】A、AdESCs细胞为胚胎干细胞，具有分化成各种细胞的潜能，即有全能性，A正确； B、AdESCs的两条性染色体分别来自大鼠的精子（X或Y）和小鼠的卵细胞（X），故AdESCs的性染色体组成为XX或XY，B正确； C、囊胚期已经分化成滋养层细胞和内细胞团，C正确； D、孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞需通过机械方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞后才能进行细胞融合，D错误。 故选D。 8. 下列关于卵裂的叙述，正确的是（ ） A. 卵裂时期细胞不断分裂，胚胎体积不断增大 B. 卵裂处于囊胚形成的过程中，每个细胞的体积不断增大 C 卵裂过程进行有丝分裂，胚胎中DNA总量不断增加 D. 卵裂需要消耗能量，有机物总量和种类都不断减少 【答案】C 【解析】 【分析】从受精卵到桑椹胚阶段的有丝分裂称为卵裂，在卵裂过程中，细胞的总体积基本不变或略有缩小，而单个细胞的体积不断减小；细胞中的有机物总量减少，而种类增加；细胞数目不断增多，并且单个细胞中的DNA含量维持不变。 【详解】A、卵裂期细胞不断分裂，而胚胎体积不变甚至略微减小，则细胞体积减小，A错误； B、受精卵到囊胚形成的过程中，主要发生了卵裂，卵裂过程中，每个细胞的体积不断缩小，胚胎的总体积基本不变或略有缩小，B错误； C、卵裂期的细胞进行有丝分裂，细胞数目在增加，但每个细胞的DNA含量不变，胚胎中DNA的总量增加，C正确； D、随着新陈代谢的进行，营养物质在减少，因此卵裂需要消耗能量，有机物总量不断在减少，但种类增加，D错误； 故选C。 9. 我国科学家首次进行了大熊猫异种克隆的科学研究工作。他们将大熊猫的体细胞核放入兔子的去核卵母细胞之中，并使其成功发育成囊胚，标志着异种核质相容的问题得到解决，异种克隆大熊猫迈过了第一道“坎”；然后至关重要的是选择一种合适的“代孕母体”。下图是该研究的理论流程图。下列说法正确的是（ ） A. 囊胚的内细胞团细胞属于iPS细胞 B. 步骤甲的供体和步骤乙的受体需要同期发情处理 C. 诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞 D. 步骤甲、乙分别是指大熊猫体细胞核移植、胚胎收集 【答案】C 【解析】 【分析】分析题图:步骤甲为核移植，步骤乙为胚胎移植，其中诱导超数排卵用的是促性腺激素。 【详解】A、囊胚的内细胞团细胞是早期干细胞的来源之一，全能性高于iPS细胞，故囊胚的内细胞团细胞不属于iPS细胞，A错误； B、步骤乙需要进行同期发情处理，甲不需要，B错误； C、诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素，只能作用于性腺，C正确； D、步骤甲和步骤乙分别是指核移植技术和胚胎移植，D错误。 故选C。 10. 抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. ADC中的抗体主要是发挥治疗效应，杀伤靶细胞 B. 制备ADC中的抗体应用了体细胞核移植、动物细胞培养等技术 C. ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的选择透过性 D. 可以将ADC中的药物换成放射性同位素，标记单克隆抗体进行靶向放疗 【答案】D 【解析】 【分析】据图分析，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把药物（细胞毒素）一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。 【详解】A、由题干信息可知，抗体药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，ADC中的抗体在选择性杀伤肿瘤细胞中起识别作用，A错误； B、制备单克隆抗体用到的动物细胞工程技术有：动物细胞融合、动物细胞培养，B错误； C、ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞体现了细胞膜的流动性，C错误； D、特异性抗体能特异性识别肿瘤抗原，所以利用同位素标记的单克隆抗体，可用于定位诊断肿瘤，进行靶向放疗，D正确。 故选D。 11. 甲型H1N1流感病毒表面的神经氨酸酶有4个抗原决定簇，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）。由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体。如图为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　） A. 多克隆抗体的产生需要多种B细胞参与 B. 诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合只能用灭活病毒诱导法 C. ①②都要在96孔板上用相同的选择培养基培养，用相同的方法筛选 D. 甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现多抗失效而单抗有效的情况 【答案】A 【解析】 【分析】根据题干信息“一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体”， 每个抗原决定簇刺激产生的抗体是单抗。 【详解】A、一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体，因此需要多种B细胞参与，A正确； B、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合可用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，B错误； C、筛选①是在选择培养基上进行筛选的，在该培养基上未融合的细胞和同种融合的细胞均死亡，只有杂交瘤细胞能存活，筛选②筛选的是能产生特定抗体的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，因此①②所用的选择培养基种类和筛选方法都不同，C错误； D、甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现原单抗失效，而对没有改变的其他抗原多抗仍有效，D错误。 故选A。 12. 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小肉质鲜嫩营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种，以下说法错误的是（ ） A. 用外源促性腺激素处理，可使供体母牛超数排卵 B. 批量培育和牛的过程中用到的技术有体外受精、早期胚胎培养、胚胎分割和胚胎移植等 C. 为提高体外受精成功率，新采集的精子应直接用于体外受精 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 【答案】C 【解析】 【分析】1、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作； 2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份，4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。胚胎分割可以提高胚胎利用率，但是要注意胚胎分割次数不能过多，过多易导致分割后胚胎成活概率低； 3、动物的胚胎发育过程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体。 【详解】A、给供体母牛注射促性腺激素，诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟的卵子，即超数排卵，A正确； B、胚胎工程包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术，B正确； C、新采集的精子不具备受精的能力，需要在体外进行获能处理，使其获得受精的能力，C错误； D、胚胎工程的许多技术实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作，胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。 故选C。 13. 如图为某同学构建的细胞工程知识框架。以下相关说法正确的是（ ） A. 图中①指植物体细胞杂交，该过程常用灭活的病毒处理两种原生质体 B. 图中②指动物细胞核移植，属于细胞水平上的生物工程技术 C. 植物组织培养和动物细胞培养依据的原理都是细胞的全能性 D. 制备单克隆抗体的过程中运用到了动物细胞培养、动物细胞融合和②等技术 【答案】B 【解析】 【分析】题图分析：细胞工程包括植物细胞工程和动物细胞工程，其中前者包括植物组织培养、植物体细胞杂交和植物细胞工程的应用三个方面；因此，图中①表示植物体细胞杂交，该技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。动物细胞工程包括动物细胞培养、动物细胞融合和核移植技术、还包括动物细胞工程的应用，如单克隆抗体的制备；因此，②表示核移植技术克隆动物，该技术的原理是动物细胞核的全能性。 【详解】A、动物细胞融合常用灭活的病毒处理两种细胞，A错误； B、动物细胞工程包括动物细胞培养、核移植技术、动物细胞融合及其应用，据图可知，图中②指动物细胞核移植，这项技术操作对象是细胞，属于细胞水平上的生物工程技术，B正确； C、植物组织培养依据的原理是细胞的全能性，而动物细胞培养依据的原理是细胞增殖，因为动物细胞培养的结果不是个体，C错误； D、据图可知，图中②指动物细胞核移植，制备单克隆抗体的过程中不要用到核移植技术，D错误。 故选B。 14. 培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。若要培育成功，下列叙述正确的是 A. 甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使用其超数排卵 B. 乙过程的目的之，是促进卵母细胞和精子的成熟 C. 丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液 D. 丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内 【答案】A 【解析】 【分析】(1)试管动物生殖实质是正常的有性生殖，只不过受精、早期胚胎发育是在试管中(体外)进行。 (2)克隆动物生殖的实质是无性生殖，依赖动物细胞核(高度分化的体细胞的细胞核)具有全能性；特有的操作程序是核移植。 【详解】A、甲过程中可通过给母山羊注射促性腺激素使其超数排卵，A正确； B、乙过程的目的是促进精子和卵子融合形成受精卵，B错误； C、丙是早期胚胎发育过程，在发育培养液中完成，而乙是受精作用过程，在获能溶液或专门的受精溶液中完成，C错误； D、胚胎移植时要保证受体和供体的生理状态相同，而不是性状相同，D错误。 故选A。 二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分) 15. 下图表示探究高效耐低温原油降解菌YF28—1（8）降解原油的最适温度实验的结果，5组实验中的温度t1～t5逐渐递增。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 对本实验中使用的接种工具——接种环采用灼烧灭菌法灭菌 B. 实验中应注意控制温度、接种的菌液量等无关变量 C. 温度为t3的培养皿为对照组，其他4组均为实验组 D. 若要确定更精确的最适温度，应在t2～t4内设置更小的温度梯度 【答案】ABC 【解析】 【分析】分析题文和图形：本实验的自变量为不同温度，因变量为菌落的数目。 【详解】A、图中平板上的菌落均匀分布，说明使用的接种方法是稀释涂布平板法，使用的接种工具是涂布器而非接种环，A错误； B、该实验探究原油降解菌降解原油的最适温度，因此温度在本实验中为自变量，接种的菌液量为无关变量，B错误； C、实验中五组的温度都不同，该五组均为实验组，不同实验组之间相互对照，C错误； D、图中t3培养皿中的菌落最多，即最接近最适温度，因此若要确定更准确的最适温度，应该在t2～t4组所对应的温度范围内设置更小的温度梯度，D正确。 故选ABC。 16. 为了分离和鉴别土壤中分解纤维素的菌株，配制培养基如下，下列说法正确的是（ ） 纤维素分解菌选择培养基：纤维素粉 酵母膏 无机盐 纤维素分解菌鉴别培养基：纤维素粉 酵母膏 无机盐 土豆汁 X物质 刚果红 A. 培养基的配制过程应该先进行高压蒸汽灭菌再调pH B. X物质是琼脂，在鉴别培养基上选取周围有透明圈的菌落进行后续实验 C. 用平板划线法对纤维素分解菌进行计数，统计结果与实际活菌数相同 D. 土壤采样时应选择落叶丰富的土壤区域进行采样 【答案】BD 【解析】 【分析】选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。纤维素分解菌能够产生纤维素酶，可以把纤维素分解为纤维二糖和葡萄糖，纤维素可以与刚果红染液结合呈红色，含有纤维素分解菌因为产纤维素酶可以分解纤维素而使平板上的菌落周围出现无色的透明圈。 【详解】A、培养基的配制过程应该先调pH再进行高压蒸汽灭菌，A错误； B、纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基，因此需要加入的X物质是琼脂，纤维素分解菌能够产生纤维素酶，可以把纤维素分解为纤维二糖和葡萄糖，纤维素可以与刚果红染液结合呈红色，含有纤维素分解菌因为产纤维素酶可以分解纤维素而使平板上的菌落周围出现无色的透明圈，在鉴别培养基上选取周围有透明圈的菌落进行后续实验选择纤维素分解能力强的菌株，B正确； C、用平板划线法不能对纤维素分解菌进行计数，只起到分离作用；用稀释涂布平板法可以对纤维素分解菌进行计数，由于有两个或两个以上活菌连在一起，长成一个菌落，统计结果比实际活菌数偏小，C错误； D、土壤采样时应选择落叶丰富的土壤区域进行采样可以增加纤维素分解菌的浓度，D正确。 故选BD。 17. 亲缘关系较远的两种植物体细胞杂交时会造成某些染色体因被排出而丢失。现有甲（2n=20）、乙（2n=18）两种亲缘关系较远的植物，甲植物细胞的染色体在原生质体融合前出现断裂，个别染色体片段在原生质体融合时移接到乙植物细胞的染色体上。下列分析正确的是（ ） A. 将甲、乙两种生物的细胞经PEG诱导后可获得杂种细胞 B. 杂种细胞中的染色体数为38条，培育的植株属于四倍体 C. 由杂种细胞发育为杂种植株体现了植物生殖细胞的全能性 D. 培育甲—乙杂种植物的过程发生了染色体结构和数目的变异 【答案】D 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、甲、乙两种生物的细胞在杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，再经PEG诱导后方可获得杂种细胞，A错误； B、由于亲缘关系较远的两种植物体细胞杂交时会造成某些染色体因被排出而丢失，导致染色体数目减小，因此杂种细胞中的染色体数小于38条，B错误； C、由杂种细胞发育为杂种植株体现了植物体细胞的全能性，C错误； D、由于亲缘关系较远的两种植物体细胞杂交时会造成某些染色体因被排出而丢失，导致染色体数目减小，且甲植物细胞的染色体在原生质体融合前出现断裂，个别染色体片段在原生质体融合时移接到乙植物细胞的染色体上，会导致染色体结构变异，因此培育甲-乙杂种植物的过程发生了染色体结构和数目的变异，D正确。 故选D。 18. 让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断下列说法正确的是（ ） A. 图中涉及的细胞工程技术有动物体细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等 B. 进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚 C. 若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状 D. 依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊—牛” 【答案】AD 【解析】 【分析】分析图解：图中A表示将目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示从羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞去核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行胚胎分割、再通过胚胎移植获得小羊ab。 【详解】A、由分析可知，图中涉及的细胞工程技术有动物体细胞核移植，胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养，A正确； B、过程G是胚胎分割，进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚，因囊胚期的内细胞团未分化，而原肠胚已经分化，不能用于胚胎分割移植，B错误； C、小羊a的细胞核基因来自羊N，而线粒体基因（细胞质基因）来自羊O，因此羊N的线粒体基因控制的产奶率高的性状不会传给小羊a，C错误； D、生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控，相互影响的，所以依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊—牛”，D正确。 故选AD。 19. 以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾细胞及骨髓瘤细胞（2n=62-68），筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体（mAb），相关检测结果如图A、B所示。有关说法正确的是（ ） 图A 杂交瘤细胞染色体数目 图B不同浓度mAb对RecQ蛋白结合DNA活性的影响 A. 重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化 B. 单克隆抗体制备过程中需要进行2次筛选和2次抗原检测 C. 杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失 D. 该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为1/800时可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合 【答案】ACD 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞(体内培养和体外培养)，最后获取单克隆抗体。 【详解】A、重组大肠杆菌RecQ解旋酶相当于抗原，能刺激机体产生相应的体液免疫应答，则在人体内可刺激B细胞增殖分化为浆细胞和记忆B细胞，A正确； B、单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和1次抗原检测，第一次是用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞；第二次是通过克隆化培养和抗体检测，进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、据图1分析，染色体数目有为80-93的细胞，免疫小鼠中B淋巴细胞染色体数目为40，骨髓瘤细胞染色体数目为62-68，两者之和大于80-93，故杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失，C正确； D、据图2分析，单抗稀释度为1/800时RecQ解旋酶结合DNA活性最低，可知mAb能特异性与RecQ解旋酶结合可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合，D正确。 故选ACD。 第Ⅱ卷（非选择题，共55分） 三、非选择题（本题包括4小题，共55分） 20. 苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而成的饮品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起来非常爽口。苹果醋能保健养生、改善疲劳、美容养颜，是目前大众非常喜爱的饮品。如图是苹果醋的制作简图，请据图回答： （1）过程①中使用到的微生物是____，在适宜条件下进行____生殖。若要检测是否产生了苹果酒，可用____试剂进行检测，如果有苹果酒产生能观察到溶液变为____ 色。 （2）过程②和过程③中起作用的微生物都是____，但该微生物在过程②和③中分解的碳源不同，过程②和③中的碳源分别是____和糖类。 （3）生产果醋时，发酵所需微生物可从食醋中分离纯化获得，具体方法是： 第一步：配制培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的基本营养成分。 第二步：对培养基用____法进行灭菌。 第三步：接种。常用的微生物接种方法有：____法和稀释涂布平板法。 第四步：培养。温度控制在____℃，培养时____（填“需要”或“不需要”） 提供氧气。 第五步：挑选符合要求的菌落。 第六步：菌种的保存。对于频繁使用的菌种可以接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的条件下培养 一段时间，然后置于4℃冰箱中保存。 【答案】（1） ①. 酵母菌 ②. 出芽（无性） ③. （酸性）重铬酸钾 ④. 灰绿 （2） ①. 醋酸菌 ②. 酒精 （3） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 平板划线 ③. 30~35 ④. 需要 【解析】 【分析】1、果酒制作的菌种是酵母菌，代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧；果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30～35℃、一直需氧； 2、据图分析，图中过程①为酒精发酵，过程②和过程③都为醋酸发酵。 【小问1详解】 过程①为酒精发酵，利用的菌种是酵母菌，其在适宜的条件下进行出芽生殖；产生的苹果酒中的酒精可以用酸性重铬酸钾进行检测，如果有苹果酒产生能观察到溶液由橙色变为灰绿色； 【小问2详解】 过程②和过程③都为醋酸发酵，使用的菌种都是醋酸菌，但是两个过程中醋酸菌分解的碳源是不同的，前者是酒精，后者糖类； 【小问3详解】 微生物培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；醋酸发酵的适宜温度为30～35℃；醋酸菌的代谢类型是异养需氧型，因此培养时需要提供氧气；对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的条件下培养一段时间，然后置于4℃冰箱中保存。 21. 番茄灰霉病菌严重影响番茄生产，枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者设计了相关实验。回答下列问题： （1）检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时，取适量_______菌液涂布于固体培养基上，将无菌滤纸片（直径5mm）在________菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心，数秒后取出滤纸片，培养皿倒置培养后测量_______大小以判定抑菌效果。 （2）枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培养时应采用“摇床震荡”培养，“摇床震荡”的目的是_______、_______。培养过程中抽样检测活菌数量时，应采用_______（填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”），其原因是_______。 【答案】（1） ①. 番茄灰霉病菌 ②. 枯草芽孢杆菌 ③. 透明圈##抑菌圈 （2） ①. 增加溶氧量 ②. 使菌种与培养液充分接触，提高原料的利用率 ③. 稀释涂布平板法 ④. 用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜直接计数法会将死亡的酵母菌也计算在内 【解析】 【分析】已知枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。若枯草芽孢杆菌能用于番茄灰霉病的生物防治，则在枯草芽孢杆菌生存的地方没有番茄灰霉病菌的生长。 【小问1详解】 检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用，先把适量的番茄灰霉病菌菌液涂布于固体培养基上，将无菌滤纸片在枯草芽孢杆菌菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心，若对番茄灰霉病菌有抑制作用，被覆盖位置的番茄灰霉病菌就会被杀死，培养皿倒置培养后会出现透明圈或抑菌圈，测量透明圈或抑菌圈大小可判定抑菌效果强弱。 【小问2详解】 枯草芽孢杆菌为好氧微生物，采用摇床振荡培养可增大培养液的溶氧量及使菌种与培养液充分接触，提高原料的利用率，有利于枯草芽孢杆菌的生长繁殖。培养过程中抽样检测活菌数量，应该采用稀释涂布平板法，原因是稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜直接计数法会将死菌也计算在内。 22. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 （1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其______（填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用_______（填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 （2）过程①通过酶解法去除_______获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带_______的杂种原生质体。 （3）科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由图2可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在_______种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为_______。 （4）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组实验处理补充完整_____。 ②若实验结果为______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 【答案】（1） ①. 消毒 ②. 无菌水 （2） ①. 细胞壁 ②. PEG ③. 红、绿荧光色素 （3） ①. 2 ②. 1×106个·mL-1 （4） ①. 等量的蒸馏水 ②. A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组 【解析】 【分析】分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。图2柱形图中，随着原生质体密度增大，双核异核融合体比例先升高后降低，其中在1×106个/mL-1时， 比例最高。 【小问1详解】 为防止微生物污染，应取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其消毒；为防止杂菌污染，每次处理后用无菌水冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂。 【小问2详解】 据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，需要用纤维素酶、果胶酶处理破坏细胞壁；过程②诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（聚乙二醇）诱导融合；由于三百草细胞酶解液中加入了红荧光色素，鱼腥草细胞酶解液中加入了绿荧光色素，所以杂种原生质体应该带红、绿荧光色素。 【小问3详解】 双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在2种类型的双核融合体（即三白草-三白草、鱼腥草-鱼腥草）；由图2柱形图可知，在密度为1×106个/mL时， 双核异核融合体比例最高，说明促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为1×106个/mL。 【小问4详解】 ①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。 ②若实验结果为A、B两组胸腺重量相同且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 23. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： （1）如图1所示，杂交瘤杂交法是________细胞与______细胞进行了融合，目的是为了获得_______的抗体。 （2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行______和______，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。图1中方框内需要经过______次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。 （3）与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是________。 （4）体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为_______而导致分裂受阻，需进行传代培养。 （5）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是______，体现的是双特异性单克隆抗体在_________方面的用途。 【答案】（1） ①. 单克隆杂交瘤 ②. 经长春碱免疫后的B淋巴 ③. 既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合 （2） ①. 克隆化培养 ②. （专一）抗体检测 ③. 2##两 （3）特异性强、灵敏度高、可大量制备 （4）营养物质缺乏、有害代谢物的积累等因素 （5） ①. 双特异性单克隆抗体能将长春碱定向带到癌细胞所在位置 ②. 运载药物（靶向治疗） 【解析】 【分析】根据题图分析，双特异性抗体制备流程为，先给小鼠注射特定癌胚抗原使之发生免疫反应，然后获取已经免疫的B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获得的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交—杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体。 【小问1详解】 为了获得既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合的抗体，需要将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合获得杂交瘤细胞。 【小问2详解】 为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞，进行克隆化培养，共进行了2雌筛选。 【小问3详解】 单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，并且可大量制备的优点。 【小问4详解】 体外培养单克隆杂交—杂交瘤细胞，由于营养物质缺乏、有害代谢物的积累等因素，导致分裂受阻，需进行传代培养。 【小问5详解】 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，对人体的副作用更小，这是利用单克隆抗体治疗疾病，体现的是双特异性单克隆抗体在治疗疾病（运载药物和治疗击疾病）方面的用途。 24. 如图是科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠的流程。回答下列有关问题： （1）图中黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的________过程类似。该过程结束后，细胞的全能性_________（填“提高”或“降低”）。 （2）从黑鼠体内获得体细胞培养时，必须保证环境是__________的，培养液需定期更换，原因是_________。将它们置于含有_________的混合气体的CO2培养箱中进行培养 （3）将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为_________，克隆鼠X的体色为_________。科学家又利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不完全相同，若不考虑环境因素的影响，造成该现象的原因可能是________。 【答案】（1） ①. 脱分化 ②. 提高 （2） ①. 无菌、无毒 ②. 细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 ③. 95%空气+5%CO2 （3） ①. 胚胎移植 ②. 黑鼠 ③. 核移植技术需要卵细胞，卵细胞的细胞质基因对性状有一定影响 【解析】 【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。 2、胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 【小问1详解】 黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似，是组织细胞恢复分裂能力的过程。iPS细胞与小鼠内细胞团一样，具有全能性，该过程结束后，细胞的全能性提高。 【小问2详解】 细胞培养过程中首先要保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境中，培养液中除了营养物质外还要添加一定量的血清、血浆等天然成分；培养过程中，培养液需定期更换，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，细胞培养时，将其置于含有95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。 【小问3详解】 将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为胚胎移植，克隆属于无性繁殖，iPS细胞来自黑鼠，克隆鼠X的体色为黑色，上述技术流程中提供胚胎的灰鼠和代孕白鼠都是雌鼠，可以是雄鼠的是体细胞供体黑鼠和克隆鼠X，其颜色都是黑色。若要利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，不考虑环境因素的影响，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不是完全相同，因为克隆鼠X的细胞质基因来源于黑鼠的卵细胞，克隆鼠Y的细胞质基因来源于灰鼠的卵细胞，卵细胞的细胞质基因对性状有一定影响。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$