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高中生物学 选择性必修3
课堂小练(二) 微生物的基本培养技术
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一、单项选择题
1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含 ( )
A.碳源、磷酸盐和维生素
B.氮源和维生素
C.水、碳源、氮源和无机盐
D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素
答案与解析
解析 培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。
答案 C
2.获得纯净培养物的关键是 ( )
A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
B.接种纯种细菌
C.适宜环境条件下培养
D.防止外来杂菌的入侵
答案与解析
解析 获得纯净培养物的关键是防止外来微生物的污染。
答案 D
3.下列对灭菌和消毒的理解不正确的是 ( )
A.接种环用灼烧法灭菌
B.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、湿热灭菌法
C.消毒是指用较为温和的物理或化学方法杀死所有微生物
D.灭菌是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子
答案与解析
解析 接种环是金属工具,可以用灼烧灭菌或干热灭菌,A项正确;由分析可知,常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、湿热灭菌法,B项正确;消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部的一部分微生物的过程,C项错误;灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子的过程,D项正确。
答案 C
4.培养基、培养皿、接种针、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是 ( )
①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤湿热灭菌 ⑥巴氏消毒法
A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥
C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤
答案与解析
解析 ①培养基用湿热灭菌;②培养皿能耐高温,需用干热灭菌;③接种针可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;④实验操作者的双手用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;⑤空气可用紫外线消毒;⑥巴氏消毒法用于牛奶等不耐高温的液体的消毒;综合以上分析,正确的顺序为⑤③②①④⑥,A项正确。
答案 A
5.有关倒平板的操作错误的是 ( )
A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上
B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰
C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上
D.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置
答案与解析
解析 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,防止杂菌污染,A项正确;使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰,对瓶口进行灭菌处理,B项正确;倒平板时培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不能将培养皿完全打开,C项错误;等待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,D项正确。
答案 C
6.下列叙述错误的是 ( )
A.右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞,为避免污染需放在酒精灯火焰附近
B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行
C.打开培养皿的皿盖,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖
D.为避免水滴滴入培养基,平板应倒过来放置
答案与解析
解析 C项应是用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是完全打开,以防杂菌污染。
答案 C
7.在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基,在培养皿中培养36小时后计算细菌的克隆数(如表所示)。下列培养皿的结果中,能说明大肠杆菌生长需要碳源的是 ( )
在不同条件下大肠杆菌的生长量
培养皿
培养基
培养皿上的细菌克隆数
Ⅰ
琼脂、糖类
35
Ⅱ
琼脂、糖类和维生素
250
Ⅲ
琼脂和维生素
0
A.培养皿Ⅰ和Ⅲ B.培养皿Ⅰ和Ⅱ
C.培养皿Ⅱ和Ⅲ D.培养皿Ⅲ
答案与解析
解析 培养皿Ⅰ和Ⅲ这两个组别的自变量并不唯一,培养皿Ⅰ中添加了糖类,没有维生素,但培养皿Ⅲ没有糖类但是有维生素,两组实验数据上的差别不能判断是由谁导致的,A项不符合题意;培养皿Ⅰ和Ⅱ相互对比,自变量为维生素的有无,可以证明维生素有利于大肠杆菌的生长,B项不符合题意;培养皿Ⅱ和Ⅲ相互对比,自变量为糖类的有无,通过观察实验结果可知,没有糖类大肠杆菌无法生存,所以可证明大肠杆菌的生长需要碳源,C项符合题意;单一的培养皿Ⅲ上没有长出菌落,不能判断到底是何原因导致的,无法证明实验结论,D项不符合题意。
答案 C
二、多项选择题
8.下列微生物培养的实验操作中,错误的是 ( )
A.配制固体平板培养基的基本步骤是:计算→称量→溶化→倒平板→灭菌
B.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
C.等待平板冷却凝固后要将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上
D.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
答案与解析
解析 配制固体平板培养基的基本步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,A项错误;高压灭菌加热结束,等待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开放气阀使压力表指针回到零,B项错误;等待平板冷却凝固后要将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上,C项正确;为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应冷却后挑取菌落,以免接种温度太高,杀死微生物,D项错误。
答案 ABD
9.下面是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是 ( )
A.在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌
B.划线操作时完全打开皿盖,划完立即盖上
C.接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的
D.第1区和第5区的划线不能连接起来,以便比较前后的菌落数
答案与解析
解析 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,培养基只在接种前进行灭菌即可;进行划线操作时,左手将培养皿的皿盖打开一条缝隙,右手将蘸有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖;注意接种时不能划破培养基,否则难以达到分离单菌落的目的;第1区和第5区的划线不能相连。
答案 CD
10.科学家通过实验发现了细菌的快速进化过程。人们发现,用肉汤培养假单胞杆菌,如果肉汤保持不动,不久后,在肉汤的不同部位,如表面、底部或其他部位,细菌的形态发生了如图所示的变化,出现一定数量的变异株。下列有关说法正确的是 ( )
A.这个实验说明了细菌在不同的小环境中发生了进化
B.细菌的生命周期短,繁殖速度快,容易受到外界环境影响而发生变化
C.用静置的肉汤培养FS细菌,其菌落形状将趋于一致
D.用不断摇动的肉汤培养SM细菌,不会出现FS细菌和WS细菌
答案与解析
解析 分析题干信息可知,最初的SM细菌在静置的肉汤表面繁殖,一段时间后,有一部分在肉汤底部繁殖,这部分可能向厌氧方向进化,故细菌在不同的小环境下可发生进化。细菌生命周期短,繁殖速度快,容易受外界环境因素(如温度、氧气)的影响。用静置的肉汤培养FS细菌,该细菌也有可能向不同方向进化,如进化成WS细菌。不断摇动,肉汤中的溶氧会抑制厌氧型的FS细菌;不断摇动,容器与肉汤无固定接触面,WS细菌无法附着生长繁殖。
答案 ABD
调整pH
三、简答题
11.下面为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答下列问题:
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
H2O
含量
0.5 g
1 g
0.5 g
100 mL
(1)蛋白胨在培养基中的作用是__________________________。
(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基,还需添加的成分是______________。
(3)确定表中各成分含量依据的原则是___________________________________。
(4)培养基配制好后,分装前应进行的工作是__________。
提供碳源、氮源等营养物质
琼脂(凝固剂)
所培养微生物对各营养成分的需要量
(5)从配制培养基直到培养完成,所采用的预防杂菌污染的方法有
________________________________________________________________________。
(6)在培养基凝固前要搁置斜面,其目的是_______________。
解析 (1)蛋白胨中含有大量的蛋白质降解而成的多肽类物质等,因而在培养基中提供碳源、氮源等营养物质。(2)细菌菌落是在固体培养基上形成的。(3)确定各营养成分含量要依据所培养的微生物对各营养成分的需要量。(4)培养基配制好后,首先要调整pH,然后再分装。(5)整个操作过程都要保证无杂菌污染。(6)在培养基凝固前搁置斜面的目的是扩大接种面积。
对培养基进行湿热灭菌、灼烧接种环、酒精棉擦手、在火焰旁接种、在火焰旁迅速用棉塞塞住试管口
扩大接种面积
倒置
12.苹果干腐病是一种由茶蔍子葡萄座腔菌引起的疾病。病菌通常由枝条伤口入侵引起感染,在伤口处形成溃疡。某中学的科研小组计划分离出该真菌,并进行药物防治实验,为苹果干腐病的防治提供合理的建议。经过查阅资料,确定了分离时所用的PDA培养基配方,如表所示:
物质
马铃薯
葡萄糖
自来水
氯霉素
含量
200 g
20 g
1 000 mL
0.3 g
该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征:辐射状白色匍匐菌丝,绒毛状。
(1)要获得菌落,则上表中还应添加的成分是_______________,氯霉素的作用是______________________。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、__________、倒平板。待平板冷却凝固后,将平板__________,以防止冷凝水污染培养基。
琼脂(或凝固剂)
抑制细菌等杂菌的生长
灭菌
(2)用剪刀从染病枝条溃疡处剪取1×1 cm2的患病组织,并用质量分数为0.1%的氯化汞进行消毒,置于培养基中心,在合适条件下进行培养,共培养五组。待菌落形态特征稳定后,用__________法将该致病菌分别转移至含有等量0.5%苦水碱剂、40%福美砷、清水的上述PDA培养基中进行抗药性实验,并每隔24 h记录一次最后划线区域的菌落数目:
①选取______________的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致的菌落数目遗漏。
平板划线
菌落数目稳定
②记录结果如下:
小组
0.5%苦水碱剂
40%福美砷
清水
菌落数目(个)
2
8
17
从结果分析可知,______________能很好地抑制该真菌的生长,适合防治苹果干腐病。
0.5%苦水碱剂
解析 (1)要获得菌落,需要使用固体培养基,所以培养基中需加入琼脂。氯霉素是抗生素,可抑制细菌等杂菌生长。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。待平板冷却凝固后,将平板倒置,以防止冷凝水污染培养基。(2)进行抗药性实验时,可用平板划线法将致病菌转移到实验培养基上。应选取菌落数目稳定时的记录作为结果,从而防止在统计菌落数目时因培养时间不足而出现遗漏。由表格可知,含0.5%苦水碱剂的平板上菌落数最少,表明该浓度的苦水碱剂能很好地抑制该真菌生长。
$$