高二生物月考卷（沪科2020选择性必修3第1～2章）-学易金卷：2024-2025学年高中下学期第一次月考

2024-2025学年第二学期高二生物第一次月考卷 生物 1．研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，研究发现堆肥温度随时间变化的曲线如图1，从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌的流程如图2      (1)为筛选高效降解角蛋白的嗜热菌，将堆肥样品处理后接种至以 （填“尿素”、“角蛋白”或“蛋白胨”）为唯一氮源的培养基上进行培养。 (2)根据图1分析可知，堆肥样品在 （填“a”、“b”或“c”）点取样，最可能筛选到目标菌。根据接种培养后得到的结果判断，步骤③的接种方法为 。该方法步骤中，不需要用到的是 （单选）。 A．酒精灯B．涂布棒    C．培养皿D．显微镜 (3)步骤③接种培养后，发现培养基上出现两种菌落，甲菌落周围无透明圈，乙菌落周围出现透明圈，为筛选目标菌，应该选择 菌落进一步纯化，选择的理由为 。 (4)有人推测，甲菌可能利用了空气中的氮气作为氮源。若要进一步确定甲菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路和预期结果，即 。 (5)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的角蛋白超过某一浓度时，某菌株对角蛋白的降解量反而下降，可能的原因为 （答一点）。某学校多个研究小组按图2所示操作步骤筛选出降解角蛋白能力较高的菌株1和2。下表为某一小组配制的过程③和过程④培养基的成分表。 成分 过程③ 过程④ 葡萄糖 + + (NH4)2SO4 + - NaCl + + KH2PO4 + + 微量生长因子 + + 角蛋白 - + 琼脂 + + “+”添加；“-”未添加 (6)表中过程③和过程④中的培养基成分配制的不合理之处有__________。 A．过程③中没有添加角蛋白 B．过程③中不应添加(NH4)2SO4 C．过程④中不应添加角蛋白 D．过程④中应添加(NH4)2SO4 E．过程④中不应添加琼脂 【答案】(1)角蛋白 (2) c 稀释涂布平板法 D (3) 乙 乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解角蛋白 (4)将甲菌接种在无氮源培养基上，若甲菌能生长，则说明甲菌能利用空气中的氮气作为氮源；若甲菌不能生长，则说明甲菌不能利用空气中的氮气作为氮源 (5)培养基中角蛋白浓度过高，可能会导致细胞失水，进而抑制菌株的生长 (6)ABE 【分析】稀释涂布平板法：先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1:10、1:100 、1:1000、1:10000 …)，然后分别取不同稀释液，与已溶化并冷却至45℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倒入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散。 【详解】（1）题中从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌，所以用角蛋白为唯一氮源的培养基培养，可筛选出高效降解角蛋白的嗜热菌。 （2）分析题及图1可知，筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，即筛选的目标菌要满足两个条件，既要耐高温又要能够高效降解角蛋白，所以在c点取样，最可能达到目的。步骤③接种后在培养基上形成了分布均匀的菌落，因此为稀释涂布平板法接种。该接种方法需要用涂布棒在酒精灯火焰旁将培养皿中的菌液涂布均匀，通过观察菌落数来计数活菌数，因此不需要用显微镜，D符合题意，ABC不符合题意。 （3）该研究的目标菌是高效降解角蛋白的嗜热菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说明乙菌能够降解角蛋白，甲菌落周围无透明圈，说明甲菌不能分解角蛋白。 （4）若甲菌可能利用了空气中的氮气作为氮源，则培养基中不需要加氮源。故将甲菌接种在无氮源培养基上，若甲菌能生长，则说明甲菌能利用空气中的氮气作为氮源；若甲菌不能生长，则说明甲菌不能利用空气中的氮气作为氮源。 （5）在筛选过程中，若培养基中角蛋白浓度过高，可能会导致细胞失水，进而抑制菌株的生长。 （6）本实验是筛选出降解角蛋白能力较高的菌株1和2，因此过程③的培养基中应添加角蛋白为唯一氮源，不应该添加其它氮源，过程④是扩大培养，应选用液体培养基，不应加入琼脂，故ABE符合题意。 2．链霉菌是一类高等放线菌，以能够产生丰富的次级代谢产物而著称。聚酮类药物是链霉菌产生的一类重要次级代谢产物，包括四环素等多种抗生素。研究人员为了探究某一类营养成分对某种链霉菌产生四环素的影响，进行了如表所示的实验，在链霉菌菌落无显著差异的前提下，统计抑菌圈直径分析对大肠杆菌的抑制作用，抑菌圈如图所示。 组号 探究的营养成分（40g） 抑菌圈直径（mm） 1 KNO34.0g；黄豆粉36.0g 12.10 2 NH4NO34.0g；黄豆粉36.0g 20.40 3 KNO34.0g；蛋白胨36.0g 11.40 4 NH4NO34.0g；蛋白胨36.0g 18.40 (1)显微镜观察链霉菌时发现其遗传物质聚集在无膜包被的某一区域，由此推测链霉菌最有可能属于_____。 A．真核生物 B．原核生物 C．DNA病毒 D．RNA病毒 (2)培养基中加入的黄豆粉可以为链霉菌的生长提供的营养成分有_____。 A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．生长因子 (3)根据表判断，最有利于实验室培养链霉菌产生抗生素的是_____。 A．组1 B．组2 C．组3 D．组4 (4)从成分来源上分类该培养基属于 培养基，为了获得较清晰的抑菌圈而便于测量直径，大肠杆菌菌液接种到培养基中的接种工具为 。测量抑菌圈直径时，是否可以进行菌落计数进而评估大肠杆菌的生长状况，具体原因为 。 (5)下列对该探究实验结果的分析正确的_____。 A．该实验探究的营养成分是碳源 B．该实验探究的营养成分是氮源 C．链霉菌对KNO3的利用效率高于NH4NO3 D．链霉菌对蛋白胨的利用效率低于黄豆粉 为了利用优化的营养成分大量培养链霉菌并提取其次级代谢产物，研究人员利用如图所示发酵罐进行培养。 (6)从加料口输入的培养基必须经过严格的灭菌处理，最佳的灭菌方式为_____。 A．高压蒸汽灭菌 B．过滤除菌 C．辐射灭菌 D．火焰灼烧灭菌 (7)根据图示可知，发酵过程除严格控制3的搅拌速度外还必须满足的条件为_____。） A．将发酵罐置于无菌室中避免杂菌污染 B．持续通入无菌空气以保证适宜的溶氧量 C．利用消泡剂去泡沫避免营养及发酵产物的浪费 D．利用1和2保持适宜的温度以维持链霉菌代谢稳定 (8)如要配制图发酵罐中培养基，下列过程请选择正确的编号并排序 。 ①调pH            ②定容            ③灭菌            ④溶解            ⑤称量            ⑥倒平板 (9)如图所示的发酵罐可以连续培养提高生产效率，具体做法是以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基。该工艺流程可以提高生产效率的原因为 。 【答案】(1)B (2)ABCD (3)B (4) 天然 涂布棒 否，因大肠杆菌生长太过密集，无法形成单菌落。 (5)BD (6)A (7)BCD (8)⑤④①②③ (9)保证微生物对营养物质的需求、排出部分代谢物，使微生物保持较长时间的快速生长 【分析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。 【详解】（1）显微镜观察链霉菌时发现其遗传物质聚集在无膜包被的某一区域，即原核生物的拟核区，为病毒在显微镜下观察不到，故B正确。 故选B。 （2）黄豆粉可为链霉菌生长提供碳源（提供碳元素）、氮源（提供氮元素）、无机盐、生长因子（是一类调节微生物正常生长代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的 有机物）。 故选ABCD。 （3）组2抑菌圈的直径最大，最有利于实验室培养链霉菌产生抗生素。 故选B。 （4）该培养基含有黄豆粉等成分不确定的物质，属于天然培养基；为了获得较清晰的抑菌圈而便于测量直径，大肠杆菌菌液接种到培养基中的接种工具为涂布棒（器）；因大肠杆菌生长太过密集，无法形成单菌落，因此不可以进行菌落计数进而评估大肠杆菌的生长状况。 （5）A、该实验探究的是某一类应用成分，如组1和组3对比探究的是黄豆粉和蛋白胨的差异，而这两者主要为生物提供氮源，A错误； B、该实验探究的营养成分是氮源，如黄豆粉和蛋白胨为生物提供有机氮源，而NH4NO3为生物提供无机氮源，B正确； C、结合组3和组4（或组1和组2）可知，组3抑菌圈的直径小于组4（组1的直径小于组2），因此链霉菌对KNO3的利用效率低于NH4NO3，C错误； D、组2和组4可知（或组1和组3），组4的抑菌圈直径小于组2，因此链霉菌对蛋白胨的利用效率低于黄豆粉，D正确。 故选BD。 （6）高压蒸汽灭菌，用高温加高压 灭菌 ，不仅可杀死一般的细菌、真菌等微生物，对芽孢、孢子也有杀灭效果，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法，对培养基灭菌常采用高压蒸汽灭菌法，A正确。 故选A。 （7）A、发酵罐不需要放在无菌室，里面是无菌环境，A错误； B、持续通入无菌空气以保证适宜的溶氧量，B正确； C、在发酵过程中，如果不及时消除泡沫，会导致产品的质量下降，利用消泡剂去泡沫避免营养及发酵产物的浪费，C正确； D、温度是无关变量，利用1和2保持适宜的温度以维持链霉菌代谢稳定，D正确。 故选BCD。 （8）配制培养基，首先按计算好的比例进行称量，然后加水溶解，调节pH，定容至预期的体积，最后进行灭菌。故选⑤④①②③。 （9）以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基，该工艺保证微生物对营养物质的需求、排出部分代谢物，使微生物保持较长时间的快速生长。 3．ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验（1~V表示过程，①~③表示菌落），已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。    (1)实验中需注意无菌操作，下列需要灭菌处理的是___。 A．土样 B．培养基 C．接种环 D．涂布棒 (2)图中第I步最常用的接种方法是 。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，则应在第I步之前 ，再进行接种。 (3)第Ⅲ步接种，应挑选 （①/②/③）号菌落。 (4)下列所示操作，发生在图中哪个过程 （填图中过程编号）    (5)下列关于实验中用到的4种培养基的分析，正确的是______。 A．甲培养基是液体培养基，能提供目的菌所需的全部营养 B．乙培养基是固体培养基，用于选择产ε-PL的菌种 C．丙培养基是固体培养基，用于分离产ε-PL的菌种 D．丁培养基是液体培养基，用于目的菌的增殖、生产ε-PL 为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区的宽度，得到了表所示的结果。 ε-PL浓度/mg·L-1 清晰区宽度/mm 微生物 20 30 40 50 60 70 大肠杆菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3 沙门氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0 酿酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 - 红曲霉 + + + + + 6.3 注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。 (6)下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是_____。 A．结果显示ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强 B．ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关 C．用于实验的培养基应该用液体的选择培养基 D．接种过程需在超净工作台火焰周围进行 (7)该实验在设置ε-PL浓度梯度方面还有不完善之处，请提出2条修改建议： 。 (8)经实验筛选到的菌种通过大规模发酵可大量生产ε-聚赖氨酸（ε-PL），以下关于发酵工程说法正确的是____。 A．发酵过程中培养基和设备均采用相同方式灭菌 B．选育出的菌种可直接用于大型发酵 C．发酵过程需严格控制温度、Ph和溶解氧等培养条件 D．发酵产物ε-聚赖氨酸（ε-PL）需从微生物体内分离提纯 (9)发酵过程中要随时取样检测培养液中微生物数量，若要确切统计活菌数量，可采用 （显微镜计数法/稀释涂布平板法）。 【答案】(1)BCD (2) 稀释涂布平板法 稀释 (3)① (4)Ⅲ (5)ABCD (6)ABD (7)增加空白对照组；增加ε-PL浓度大于70mgL-1的实验组；增加ε-PL浓度小于20mgL- 1的实验组 (8)C (9)显微镜计数法 【分析】1、微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。 2、选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。鉴别培养基是依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计的培养基。 【详解】（1）A、土样中含有目的菌，灭菌会杀灭所有微生物，故土样不能灭菌，A错误； B、培养基需要进行高压蒸汽灭菌，B正确； C、接种环需要进行灼烧灭菌，C正确； D、玻璃刮铲需要用酒精引燃灭菌，D正确。 故选BCD。 （2）据图可知，第I步为接种，结合第Ⅱ步结果的均匀分布可知，所用接种方法是稀释涂布平板法；若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，说明密度过大，故则应在第I步之前先稀释，再进行接种。 （3）培养过程中由于ε-PL可使亚甲基蓝褪色，故能分泌ε-PL的微生物周围会形成透明圈，透明圈直径越大，分泌ε-PL的量越多，因此应挑选透明圈直径大的菌落继续培养，故选①。 （4）该操作为平板划线法中，用接种环在培养基划线过程，图中Ⅳ为平板划线的结果，故该操作发生在图中过程Ⅲ。 （5）A、甲培养基是液体培养基，能提供目的菌所需的全部营养，以保证目的菌的正常生长，A正确； B、乙培养基是固体培养基，用于选择产生ε- -PL的菌种，通常需要添加琼脂等凝固剂，B正确； C、丙培养基是固体培养基，用于分离、产生ε-PL的菌种的纯培养物，即可对目的菌进行扩大培养，C正确； D、丁培养基是液体培养基，用于增殖培养目的菌，让目的菌增殖、生产ε-PL， D正确。 故选ABCD。 （6）A、表中结果显示，不同浓度的ε-PL处理下，酿酒酵母清晰区的宽度最大，说明ε-PL 对酿酒酵母的抑制作用最强，A正确； B、表中数据显示随浓度增加，清晰区的宽度越大，即ε- PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关，B正确； C、培养后需要测量清晰区的宽度，故用于实验的培养基应该用固体的选择培养基，C错误； D、为了避免周围环境中微生物的污染，接种过程需在超净工作台火焰周围进行，D正确。 故选 ABD。 （7）该实验缺乏空白对照组，应增加空白对照组；同时增加ε-PL浓度大于70mgL-1的实验组、增加ε-PL浓度小于20mgL-1的实验组，这样结果更具有说服力。 （8）A、发酵过程中培养基用湿热灭菌 ，设备用培养皿用干热灭菌，故采用不同方式灭菌，A错误； B、选育出的菌种不一定能用于大型发酵，还需要进行发酵试验，B错误； C、温度、Ph和溶解氧都会对发酵过程产生影响，故发酵过程需严格控制温度、Ph和溶解氧等培养条件，C正确； D、发酵产物ε-聚赖氨酸（ε-PL）是微生物的分泌物，不需从微生物体内分离提纯，D错误。 故选C。 （9）稀释涂布平板法是微生物纯培养的方法，不能用于计数，故发酵过程中要随时取样检测培养液中微生物数量，若要确切统计活菌数量，可采用显微镜计数法。 4．下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： (1)利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是 。 (2)植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有 。人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法， 其中化学法包括 、 ，植物体细胞融合完成的标志是 。 (3)“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含 条染色体， 属于 倍体植株。 Ⅱ.银杏的次生代谢产物， 如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖， 扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片。中取得， 但传统载植方法周期长、成本高、受环境影响大， 无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取， 具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关问题： (4)研究表明， 选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成 的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛， 但在 时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用 多次冲洗也不易清除， 导致细胞易失活甚至破裂。 (5)外植体愈伤组织试管苗植株 为获得银杏阳次生代谢产物， （填A“需要”或B：“不需要”） 走完如上述流程图的全过程。有关做法是： 可以将 转入到 培养基中， 进一步扩大培养， 以提取有益次生代谢物，在此过程中需要做到 操作。与固体培养基培养愈伤组织相比， 此做法的优点有哪两项 A． 与培养基的结合更加充分          B． 受培养基中成分差异的影响较小 C．对环境不敏感                      D． 对营养物质的吸收更容易 (6)此外， 研究表明， 用通气较为不良的介质封口， 如塑料膜或玻璃纸， 可以提升黄酮和内酯的产量， 可能原因是 胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 (7)学习了植物组培技术后， 同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养， 结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时， 忘记添加NAA （NAA： 萘乙酸， 为尘长素类似物），结果与添加NAA 的生根培养基中的菊花幼苗相比， 无添加NAA 培养基中的菊花幼苗也育生根ₖ、其原因可能是 。不过其生根数量较少且根长较短， 可能的原因是 。 (8)请例举植物组织培养技术的应用 （至少两项， 上述中提到的除外）。 【答案】(1)矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质 (2) 细胞膜的流动性 PEG(或聚乙二醇)促融 高Ca2+-高pH融合法 杂种细胞再生出细胞壁 (3) 38 四 (4) 愈伤组织 消毒 无菌水 (5) B 愈伤组织 液体 无菌 AD (6)低氧 (7) 植物体内可以产生内源生长素 植物体内可以产生的内源生长素较少 (8)基因工程育种、单倍体育种等育种 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】（1）由于矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质，所以在特定条件下其可发育为完整的植株。 （2）植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性，人工诱导原生质体融合的方法很多，基本可分为两大类物理法和化学法，其中化学法主要用PEG(或聚乙二醇)促融、高Ca2+-高pH融合法等，杂种细胞再生出细胞壁是植物体细胞融合完成的标志。 （3）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含有的染色体数目是矮牵牛和粉蓝烟草的体细胞中染色体数目之和，为14+24=38，属于四倍体植株。 （4）选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成愈伤组织的难度较大。外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在消毒时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用无菌水多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。 （5）为获得银杏的次生代谢产物，A（不需要）走完如上述流程图的全过程。可以将愈伤组织转入到液体培养基中，进一步扩大培养，以提取有益次生代谢物，在此过程中需要做到无菌操作。与固体培养基培养愈伤组织相比，液体培养基培养愈伤组织的优点有：与培养基的结合更加充分、对营养物质的吸收更容易。 故选AD。 （6）研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是低氧胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 （7）与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也有生根，其原因可能是植物体内可以产生内源生长素。不过其生根数量较少且根长较短，可能的原因是内源生长素较少。 （8）植物组织培养技术的应用花卉和果树的快速大量繁殖以及脱毒植株的获取，还广泛用于基因工程育种、单倍体育种等育种过程中。 5．细胞工程在育种和药物生产领域应用十分广泛，阅读材料回答下列问题。 材料一：花椰菜（2n=18）是人们喜爱的蔬菜，种植时容易遭受病菌侵害，形成病斑。紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种。 (1)科研人员分别取紫罗兰叶肉细胞和黑暗处发芽的花椰菜胚轴细胞，经过一定处理，得到两种原生质体，下列适合用于制备原生质体的是____。 A．蛋白酶 B．纤维素酶 C．果胶酶 D．机械分离 (2)过程②诱导两种原生质体融合的方法有 （编号选填）。 ①酶解法  ②PEG促融  ③灭活病毒  ④电融合⑤机械促融法  ⑥农杆菌介导法  ⑦胰蛋白酶 (3)通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图1（右）所示。据图判断， 号为杂种植株。 融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度促溶剂诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，获得结果如表。 促溶剂质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% (4)当促融剂质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象，原因是 。若想确定促融剂溶液诱导原生质体融合的最适浓度，需在 范围内缩小浓度梯度继续实验。 (5)PEG诱导后需要筛选。筛选时用光学显微镜挑选出含 （填细胞器）且形态为哑铃型的原生质体，在黑暗的环境中进一步培养获得 的细胞团，即愈伤组织，之后再分化，并进一步发育成完整植株，此技术称为 。 愈伤组织再分化所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，愈伤组织的变化情况如图2所示。    (6)据图2中信息和所学知识判断，植物激素X和Y分别是 和 。（编号选填） ①生长激素 ②细胞分裂素 ③生长素 ④赤霉素 ⑤脱落酸 ⑥乙烯 ⑦2，4-D 材料二：科学家利用细胞工程成功制备了单克隆抗体，这一技术在医药领域发挥了极其重要的作用。在此基础上制备的抗体—药物偶联物（ADC）更是为癌症的治疗开辟了崭新的路径，其作用机制如图3所示，请回答。 (7)单克隆抗体制备中所用到的生物技术有 （写两种）。 (8)新冠肺炎康复者捐献的血浆中含有抗体，可用于重症患者的治疗。我国科研工作者提出，也可以利用康复者血液中的记忆B细胞制备单克隆抗体，比血浆注射疗法更为有效，其依据在于____。 A．单克隆抗体特异性高 B．记忆B细胞可无限增殖 C．细胞融合技术更安全 D．血浆中的抗体种类更多 (9)结合图3及已有知识，描述在ADC作用过程中，ADC中抗体、药物的作用分别是什么？与直接使用药物进行化疗杀伤肿瘤细胞相比，ADC在临床应用上有何优势？ 。 【答案】(1)BCD (2)②④ (3)4、5号 (4) 促溶剂浓度过高导致原生质体失水皱缩 25%-35% (5) 叶绿体 无组织结构的松散的 植物组织培养技术 (6) ② ③ (7)动物细胞融合技术、动物细胞培养技术 (8)A (9)ADC中抗体与肿瘤细胞特异性结合，将药物带到肿瘤细胞，药物诱发肿瘤细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞。优势：由于抗体药物偶联物只针对癌细胞，因此副作用相对于传统的化疗药物来说，可以大大减少 【分析】植物体细胞杂交要将不同种的植物细胞诱导融合成一个杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成植株，依据的生物学原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】（1）科研人员分别取紫罗兰叶肉细胞和黑暗处发芽的花椰菜胚轴细胞，经过纤维素酶、果胶酶、机械分离处理，得到两种原生质体，A错误，BCD正确。 故选BCD。 （2）过程②为原生质体融合过程，诱导两种原生质体融合的方法有 ②PEG促融 、④电融合。 （3）据图1（右）可知，4号和5号个体同时含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，说明4号和5号为杂种植株。 （4）原生质层具有选择透性，PEG浓度过高导致原生质体失水皱缩，因此当PEG质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象;30%时形态正常，说明原生质体既不吸水也不失水，有助于维持其正常形态，该浓度诱导原生质体融合效果最好；25%时有破碎现象，说明25%浓度较小，原生质体有的吸水涨破，35%时原生质体出现缩小现象，说明35%浓度较大，原生质体失水皱缩，因此需要在质量分数为25%-35%之间的PEG溶液重复上述实验。 （5）叶肉细胞原生质体含有叶绿体，光学显微镜下可见，可挑选出含叶绿体且形态为哑铃型的原生质体。在黑暗的环境中进一步培养获得无组织结构的松散的细胞团，即愈伤组织，之后再分化，并进一步发育成完整植株，此技术称为植物组织培养技术。 （6）据图2中信息和所学知识判断，生长素与细胞分裂素比值大于1时诱导根的分化，故植物激素X是细胞分裂素②、Y是生长素③。 （7）单克隆抗体制备中所用到的生物技术有动物细胞融合技术、动物细胞培养技术。 （8）A、利用康复者血液中的记忆B细胞制备单克隆抗体，比血浆注射疗法更为有效。其依据在于单克隆抗体特异性高，A正确； B、记忆B细胞不能无限增殖，B错误； C、利用康复者血液中的记忆B细胞制备单克隆抗体，比血浆注射疗法更为有效。与细胞融合技术 更安全关系不大，C错误； D、利用康复者血液中的记忆B细胞制备单克隆抗体，比血浆注射疗法更为有效，血浆中的抗体产量低、纯度低、特异性差，D错误。 故选A。 （9）抗体能与抗原发生特异性结合，ADC中，抗体的作用是与肿瘤细胞特异性结合，将药物带到肿瘤细胞。由图可知，ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞。直接使用药物进行化疗杀伤肿瘤细胞没有选择性，正常的细胞也会遭到杀伤，而ADC依靠单克隆抗体，靶点清楚，将药物靶向运输到肿瘤细胞，毒副作用小。 6．植物体细胞杂交技术可将不同种植物的优势集中在一个个体上，培育人们生产所需 的优良杂种植株。如图为利用某种耐酸植物甲(4N) 和高产植物乙(2N)，培育高产耐酸植物丙的过程。回答下列问题；    (1)图中①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是 ,进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行 (选填“消毒”或“灭菌”)处理，以防止杂菌污染。 (2)PEG诱导后，除了“甲’+乙′”,还存在 ， (3)图中过程②称为 ，由杂种细胞发育为植物丙的原因是 (4)在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素X 和植物激素Y, 逐渐改变培养基这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示，植物激素X的名称是 ，植物激素Y的名称是 。当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时， 。    2017年11月-12月，中科院神经科学研究团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”,该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。 (5)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是 。 (6)刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部首先会出现细胞贴壁现象。传代培养时，常利用 酶，制成细胞悬液后转入新的培养瓶中。需要控制的培养条件包括 ①无菌②适宜的温度③5％的CO2 ④充足的溶解氧⑤充足的光照   ⑥合适的渗透压  ⑦充足的营养物质 (7)图所示过程涉及的生物技术有 （答出两点） 以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自称猴胚胎成纤维细胞的细胞核。图中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到MII期后进行去核操作，而后用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育。 (8)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中kdm4dmRNA翻译产生的酶的作用是 ,kdm4dmRNA导入重组细胞的技术是 。 【答案】(1) 纤维素酶和果胶酶 消毒 (2) 甲′+甲′ 乙′+乙′ (3) 脱分化 植物细胞具有全能性 (4) 细胞分裂素 生长素 诱导愈伤组织分化为芽 (5)胚胎成纤维细胞增殖能力更强，分化程度低，全能性高，易于培养 (6) 胰蛋白酶（胶原蛋白酶） ① ② ③ ④ (7)细胞核移植技术，动物细胞培养技术 (8) 催化组蛋白去甲基化 转基因技术 【分析】1、利用细胞工程技术培养杂交植株时，①首先利用纤维素酶和果胶酶处理细胞去除其细胞壁；甲乙两细胞的原生质体经诱导产生“甲'+乙'”，即融合的原生质体，其再生新的细胞壁，形成杂种细胞，杂种细胞经过②脱分化过程形成愈伤组织，再经过再分化过程形成植株丙'，该植株经过图中③过程的选择作用培养出高产耐酸植物丙。 2、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，这是胚胎工程的最后一道工序，胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【详解】（1）由植物细胞变成原生质体，需要去掉细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，所以应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁；为了防止杂菌污染，进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行消毒处理。 （2）PEG诱导后，任何两个细胞都可以融合，因此除了“甲'+乙'”，还存在甲′+甲′、乙′+乙′。 （3）脱分化指由分化状态变为未分化状态，据图1可知，过程②表示杂种细胞形成分化程度较低的愈伤组织，表示脱分化。由杂种细胞发育为植物丙的原因是植物细胞具有全能性。 （4）植物组织培养时植物激素处理的不同处理：生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成；生长素/细胞分裂素比例升高，利于根的分化；生长素/细胞分裂素比例降低，利于芽的分化。仔细分析所给示意图，可知植物激素X与植物激素Y浓度比为1时，利于愈伤组织的形成；大于1时利于诱导未分化细胞群分化出芽；小于1时利于诱导未分化细胞群分化出根，因此植物X是细胞分裂素，植物Y是生长素。 （5）由于胚胎成纤维细胞增殖能力更强，更易于培养，因此在进行核移植时，通常选择胚胎期的成纤维细胞进行培养； （6）进行传代培养时，常利用胰蛋白酶处理，制成细胞悬液后转入到新的培养瓶中。需要控制的培养条件包括无菌、适宜的温度、5％的CO2、充足的溶解氧，所以选① ② ③ ④ （7）图示过程表示体细胞克隆猴的技术流程，动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，涉及的主要技术有动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术（或动物细胞培养技术）、胚胎移植技术。 （8）由于胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关，为了使胚胎顺利发育，需要对组蛋白进行去甲基化操作，因此可推知图中kdm4dmRNA翻译产生的酶的作用是催化组蛋白去甲基化的。kdm4dmRNA导入重组细胞的技术是转基因技术。 1 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024-2025学年第二学期高二生物第一次月考卷 生物 1.【答案】(1)角蛋白 (2) c 稀释涂布平板法 D (3) 乙 乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解角蛋白 (4)将甲菌接种在无氮源培养基上，若甲菌能生长，则说明甲菌能利用空气中的氮气作为氮源；若甲菌不能生长，则说明甲菌不能利用空气中的氮气作为氮源 (5)培养基中角蛋白浓度过高，可能会导致细胞失水，进而抑制菌株的生长 (6)ABE 2.【答案】(1)B (2)ABCD (3)B (4) 天然 涂布棒 否，因大肠杆菌生长太过密集，无法形成单菌落。 (5)BD (6)A (7)BCD (8)⑤④①②③ (9)保证微生物对营养物质的需求、排出部分代谢物，使微生物保持较长时间的快速生长 3.【答案】(1)BCD (2) 稀释涂布平板法 稀释 (3)① (4)Ⅲ (5)ABCD (6)ABD (7)增加空白对照组；增加ε-PL浓度大于70mgL-1的实验组；增加ε-PL浓度小于20mgL- 1的实验组 (8)C (9)显微镜计数法 4.【答案】(1)矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质 (2) 细胞膜的流动性 PEG(或聚乙二醇)促融 高Ca2+-高pH融合法 杂种细胞再生出细胞壁 (3) 38 四 (4) 愈伤组织 消毒 无菌水 (5) B 愈伤组织 液体 无菌 AD (6)低氧 (7) 植物体内可以产生内源生长素 植物体内可以产生的内源生长素较少 (8)基因工程育种、单倍体育种等育种 5.【答案】(1)BCD (2)②④ (3)4、5号 (4) 促溶剂浓度过高导致原生质体失水皱缩 25%-35% (5) 叶绿体 无组织结构的松散的 植物组织培养技术 (6) ② ③ (7)动物细胞融合技术、动物细胞培养技术 (8)A (9)ADC中抗体与肿瘤细胞特异性结合，将药物带到肿瘤细胞，药物诱发肿瘤细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞。优势：由于抗体药物偶联物只针对癌细胞，因此副作用相对于传统的化疗药物来说，可以大大减少 6.【答案】(1) 纤维素酶和果胶酶 消毒 (2) 甲′+甲′ 乙′+乙′ (3) 脱分化 植物细胞具有全能性 (4) 细胞分裂素 生长素 诱导愈伤组织分化为芽 (5)胚胎成纤维细胞增殖能力更强，分化程度低，全能性高，易于培养 (6) 胰蛋白酶（胶原蛋白酶） ① ② ③ ④ (7)细胞核移植技术，动物细胞培养技术 (8) 催化组蛋白去甲基化 转基因技术 2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 11 2024-2025学年高二生物下学期第一次月考卷 生物·答题卡 贴条形码区 考生禁填： 缺考标记 违纪标记 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 选择题填涂样例： 正确填涂 错误填涂 [×] [√] [／] 1．答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 2．选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题必须用0.5 mm黑色签字笔答题，不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清晰。 3．请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 4．保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 注意事项 姓 名：__________________________ 准考证号： 一、 二 三、 四、 五、 六、 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… 此卷只装订不密封 ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… … 学校：______________姓名：_____________班级：_______________考号：______________________ 2024-2025学年第二学期高一生物第一次月考 生物 考生注意： 1．试卷满分100分，考试时间60分钟。 2．本试卷分设试卷和答题纸。试卷题型全部为综合分析题。 3．答题前，务必在答题纸贴条形码并填写姓名、班级和考号。作答必须涂或写在答题纸上，在试卷上作答一律不得分。 1．研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，研究发现堆肥温度随时间变化的曲线如图1，从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌的流程如图2      (1)为筛选高效降解角蛋白的嗜热菌，将堆肥样品处理后接种至以 （填“尿素”、“角蛋白”或“蛋白胨”）为唯一氮源的培养基上进行培养。 (2)根据图1分析可知，堆肥样品在 （填“a”、“b”或“c”）点取样，最可能筛选到目标菌。根据接种培养后得到的结果判断，步骤③的接种方法为 。该方法步骤中，不需要用到的是 （单选）。 A．酒精灯B．涂布棒    C．培养皿D．显微镜 (3)步骤③接种培养后，发现培养基上出现两种菌落，甲菌落周围无透明圈，乙菌落周围出现透明圈，为筛选目标菌，应该选择 菌落进一步纯化，选择的理由为 。 (4)有人推测，甲菌可能利用了空气中的氮气作为氮源。若要进一步确定甲菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路和预期结果，即 。 (5)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的角蛋白超过某一浓度时，某菌株对角蛋白的降解量反而下降，可能的原因为 （答一点）。某学校多个研究小组按图2所示操作步骤筛选出降解角蛋白能力较高的菌株1和2。下表为某一小组配制的过程③和过程④培养基的成分表。 成分 过程③ 过程④ 葡萄糖 + + (NH4)2SO4 + - NaCl + + KH2PO4 + + 微量生长因子 + + 角蛋白 - + 琼脂 + + “+”添加；“-”未添加 (6)表中过程③和过程④中的培养基成分配制的不合理之处有__________。 A．过程③中没有添加角蛋白 B．过程③中不应添加(NH4)2SO4 C．过程④中不应添加角蛋白 D．过程④中应添加(NH4)2SO4 E．过程④中不应添加琼脂 2．链霉菌是一类高等放线菌，以能够产生丰富的次级代谢产物而著称。聚酮类药物是链霉菌产生的一类重要次级代谢产物，包括四环素等多种抗生素。研究人员为了探究某一类营养成分对某种链霉菌产生四环素的影响，进行了如表所示的实验，在链霉菌菌落无显著差异的前提下，统计抑菌圈直径分析对大肠杆菌的抑制作用，抑菌圈如图所示。 组号 探究的营养成分（40g） 抑菌圈直径（mm） 1 KNO34.0g；黄豆粉36.0g 12.10 2 NH4NO34.0g；黄豆粉36.0g 20.40 3 KNO34.0g；蛋白胨36.0g 11.40 4 NH4NO34.0g；蛋白胨36.0g 18.40 (1)显微镜观察链霉菌时发现其遗传物质聚集在无膜包被的某一区域，由此推测链霉菌最有可能属于_____。 A．真核生物 B．原核生物 C．DNA病毒 D．RNA病毒 (2)培养基中加入的黄豆粉可以为链霉菌的生长提供的营养成分有_____。 A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．生长因子 (3)根据表判断，最有利于实验室培养链霉菌产生抗生素的是_____。 A．组1 B．组2 C．组3 D．组4 (4)从成分来源上分类该培养基属于 培养基，为了获得较清晰的抑菌圈而便于测量直径，大肠杆菌菌液接种到培养基中的接种工具为 。测量抑菌圈直径时，是否可以进行菌落计数进而评估大肠杆菌的生长状况，具体原因为 。 (5)下列对该探究实验结果的分析正确的_____。 A．该实验探究的营养成分是碳源 B．该实验探究的营养成分是氮源 C．链霉菌对KNO3的利用效率高于NH4NO3 D．链霉菌对蛋白胨的利用效率低于黄豆粉 为了利用优化的营养成分大量培养链霉菌并提取其次级代谢产物，研究人员利用如图所示发酵罐进行培养。 (6)从加料口输入的培养基必须经过严格的灭菌处理，最佳的灭菌方式为_____。 A．高压蒸汽灭菌 B．过滤除菌 C．辐射灭菌 D．火焰灼烧灭菌 (7)根据图示可知，发酵过程除严格控制3的搅拌速度外还必须满足的条件为_____。） A．将发酵罐置于无菌室中避免杂菌污染 B．持续通入无菌空气以保证适宜的溶氧量 C．利用消泡剂去泡沫避免营养及发酵产物的浪费 D．利用1和2保持适宜的温度以维持链霉菌代谢稳定 (8)如要配制图发酵罐中培养基，下列过程请选择正确的编号并排序 。 ①调pH            ②定容            ③灭菌            ④溶解            ⑤称量            ⑥倒平板 (9)如图所示的发酵罐可以连续培养提高生产效率，具体做法是以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基。该工艺流程可以提高生产效率的原因为 。 3．ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验（1~V表示过程，①~③表示菌落），已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。    (1)实验中需注意无菌操作，下列需要灭菌处理的是___。 A．土样 B．培养基 C．接种环 D．涂布棒 (2)图中第I步最常用的接种方法是 。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，则应在第I步之前 ，再进行接种。 (3)第Ⅲ步接种，应挑选 （①/②/③）号菌落。 (4)下列所示操作，发生在图中哪个过程 （填图中过程编号）    (5)下列关于实验中用到的4种培养基的分析，正确的是______。 A．甲培养基是液体培养基，能提供目的菌所需的全部营养 B．乙培养基是固体培养基，用于选择产ε-PL的菌种 C．丙培养基是固体培养基，用于分离产ε-PL的菌种 D．丁培养基是液体培养基，用于目的菌的增殖、生产ε-PL 为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区的宽度，得到了表所示的结果。 ε-PL浓度/mg·L-1 清晰区宽度/mm 微生物 20 30 40 50 60 70 大肠杆菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3 沙门氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0 酿酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 - 红曲霉 + + + + + 6.3 注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。 (6)下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是_____。 A．结果显示ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强 B．ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关 C．用于实验的培养基应该用液体的选择培养基 D．接种过程需在超净工作台火焰周围进行 (7)该实验在设置ε-PL浓度梯度方面还有不完善之处，请提出2条修改建议： 。 (8)经实验筛选到的菌种通过大规模发酵可大量生产ε-聚赖氨酸（ε-PL），以下关于发酵工程说法正确的是____。 A．发酵过程中培养基和设备均采用相同方式灭菌 B．选育出的菌种可直接用于大型发酵 C．发酵过程需严格控制温度、Ph和溶解氧等培养条件 D．发酵产物ε-聚赖氨酸（ε-PL）需从微生物体内分离提纯 (9)发酵过程中要随时取样检测培养液中微生物数量，若要确切统计活菌数量，可采用 （显微镜计数法/稀释涂布平板法）。 4．下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： (1)利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是 。 (2)植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有 。人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法， 其中化学法包括 、 ，植物体细胞融合完成的标志是 。 (3)“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含 条染色体， 属于 倍体植株。 Ⅱ.银杏的次生代谢产物， 如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖， 扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片。中取得， 但传统载植方法周期长、成本高、受环境影响大， 无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取， 具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关问题： (4)研究表明， 选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成 的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛， 但在 时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用 多次冲洗也不易清除， 导致细胞易失活甚至破裂。 (5)外植体愈伤组织试管苗植株 为获得银杏阳次生代谢产物， （填A“需要”或B：“不需要”） 走完如上述流程图的全过程。有关做法是： 可以将 转入到 培养基中， 进一步扩大培养， 以提取有益次生代谢物，在此过程中需要做到 操作。与固体培养基培养愈伤组织相比， 此做法的优点有哪两项 A． 与培养基的结合更加充分          B． 受培养基中成分差异的影响较小 C．对环境不敏感                      D． 对营养物质的吸收更容易 (6)此外， 研究表明， 用通气较为不良的介质封口， 如塑料膜或玻璃纸， 可以提升黄酮和内酯的产量， 可能原因是 胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 (7)学习了植物组培技术后， 同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养， 结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时， 忘记添加NAA （NAA： 萘乙酸， 为尘长素类似物），结果与添加NAA 的生根培养基中的菊花幼苗相比， 无添加NAA 培养基中的菊花幼苗也育生根ₖ、其原因可能是 。不过其生根数量较少且根长较短， 可能的原因是 。 (8)请例举植物组织培养技术的应用 （至少两项， 上述中提到的除外）。 5．细胞工程在育种和药物生产领域应用十分广泛，阅读材料回答下列问题。 材料一：花椰菜（2n=18）是人们喜爱的蔬菜，种植时容易遭受病菌侵害，形成病斑。紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种。 (1)科研人员分别取紫罗兰叶肉细胞和黑暗处发芽的花椰菜胚轴细胞，经过一定处理，得到两种原生质体，下列适合用于制备原生质体的是____。 A．蛋白酶 B．纤维素酶 C．果胶酶 D．机械分离 (2)过程②诱导两种原生质体融合的方法有 （编号选填）。 ①酶解法  ②PEG促融  ③灭活病毒  ④电融合⑤机械促融法  ⑥农杆菌介导法  ⑦胰蛋白酶 (3)通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图1（右）所示。据图判断， 号为杂种植株。 融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度促溶剂诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，获得结果如表。 促溶剂质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% (4)当促融剂质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象，原因是 。若想确定促融剂溶液诱导原生质体融合的最适浓度，需在 范围内缩小浓度梯度继续实验。 (5)PEG诱导后需要筛选。筛选时用光学显微镜挑选出含 （填细胞器）且形态为哑铃型的原生质体，在黑暗的环境中进一步培养获得 的细胞团，即愈伤组织，之后再分化，并进一步发育成完整植株，此技术称为 。 愈伤组织再分化所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，愈伤组织的变化情况如图2所示。    (6)据图2中信息和所学知识判断，植物激素X和Y分别是 和 。（编号选填） ①生长激素 ②细胞分裂素 ③生长素 ④赤霉素 ⑤脱落酸 ⑥乙烯 ⑦2，4-D 材料二：科学家利用细胞工程成功制备了单克隆抗体，这一技术在医药领域发挥了极其重要的作用。在此基础上制备的抗体—药物偶联物（ADC）更是为癌症的治疗开辟了崭新的路径，其作用机制如图3所示，请回答。 (7)单克隆抗体制备中所用到的生物技术有 （写两种）。 (8)新冠肺炎康复者捐献的血浆中含有抗体，可用于重症患者的治疗。我国科研工作者提出，也可以利用康复者血液中的记忆B细胞制备单克隆抗体，比血浆注射疗法更为有效，其依据在于____。 A．单克隆抗体特异性高 B．记忆B细胞可无限增殖 C．细胞融合技术更安全 D．血浆中的抗体种类更多 (9)结合图3及已有知识，描述在ADC作用过程中，ADC中抗体、药物的作用分别是什么？与直接使用药物进行化疗杀伤肿瘤细胞相比，ADC在临床应用上有何优势？ 。 6．植物体细胞杂交技术可将不同种植物的优势集中在一个个体上，培育人们生产所需 的优良杂种植株。如图为利用某种耐酸植物甲(4N) 和高产植物乙(2N)，培育高产耐酸植物丙的过程。回答下列问题；    (1)图中①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是 ,进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行 (选填“消毒”或“灭菌”)处理，以防止杂菌污染。 (2)PEG诱导后，除了“甲’+乙′”,还存在 ， (3)图中过程②称为 ，由杂种细胞发育为植物丙的原因是 (4)在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素X 和植物激素Y, 逐渐改变培养基这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示，植物激素X的名称是 ，植物激素Y的名称是 。当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时， 。    2017年11月-12月，中科院神经科学研究团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”,该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。 (5)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是 。 (6)刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部首先会出现细胞贴壁现象。传代培养时，常利用 酶，制成细胞悬液后转入新的培养瓶中。需要控制的培养条件包括 ①无菌②适宜的温度③5％的CO2 ④充足的溶解氧⑤充足的光照   ⑥合适的渗透压  ⑦充足的营养物质 (7)图所示过程涉及的生物技术有 （答出两点） 以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自称猴胚胎成纤维细胞的细胞核。图中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到MII期后进行去核操作，而后用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育。 (8)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中kdm4dmRNA翻译产生的酶的作用是 ,kdm4dmRNA导入重组细胞的技术是 。 试题 第7页（共8页） 试题 第8页（共8页） 试题 第1页（共8页） 试题 第2页（共8页） 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 22024-2025学年第二学期高二生物第一次月考 生物 考生注意： 1．试卷满分100分，考试时间60分钟。 2．本试卷分设试卷和答题纸。试卷题型全部为综合分析题。 3．答题前，务必在答题纸贴条形码并填写姓名、班级和考号。作答必须涂或写在答题纸上，在试卷上作答一律不得分。 1．研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，研究发现堆肥温度随时间变化的曲线如图1，从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌的流程如图2      (1)为筛选高效降解角蛋白的嗜热菌，将堆肥样品处理后接种至以 （填“尿素”、“角蛋白”或“蛋白胨”）为唯一氮源的培养基上进行培养。 (2)根据图1分析可知，堆肥样品在 （填“a”、“b”或“c”）点取样，最可能筛选到目标菌。根据接种培养后得到的结果判断，步骤③的接种方法为 。该方法步骤中，不需要用到的是 （单选）。 A．酒精灯B．涂布棒    C．培养皿D．显微镜 (3)步骤③接种培养后，发现培养基上出现两种菌落，甲菌落周围无透明圈，乙菌落周围出现透明圈，为筛选目标菌，应该选择 菌落进一步纯化，选择的理由为 。 (4)有人推测，甲菌可能利用了空气中的氮气作为氮源。若要进一步确定甲菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路和预期结果，即 。 (5)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的角蛋白超过某一浓度时，某菌株对角蛋白的降解量反而下降，可能的原因为 （答一点）。某学校多个研究小组按图2所示操作步骤筛选出降解角蛋白能力较高的菌株1和2。下表为某一小组配制的过程③和过程④培养基的成分表。 成分 过程③ 过程④ 葡萄糖 + + (NH4)2SO4 + - NaCl + + KH2PO4 + + 微量生长因子 + + 角蛋白 - + 琼脂 + + “+”添加；“-”未添加 (6)表中过程③和过程④中的培养基成分配制的不合理之处有__________。 A．过程③中没有添加角蛋白 B．过程③中不应添加(NH4)2SO4 C．过程④中不应添加角蛋白 D．过程④中应添加(NH4)2SO4 E．过程④中不应添加琼脂 2．链霉菌是一类高等放线菌，以能够产生丰富的次级代谢产物而著称。聚酮类药物是链霉菌产生的一类重要次级代谢产物，包括四环素等多种抗生素。研究人员为了探究某一类营养成分对某种链霉菌产生四环素的影响，进行了如表所示的实验，在链霉菌菌落无显著差异的前提下，统计抑菌圈直径分析对大肠杆菌的抑制作用，抑菌圈如图所示。 组号 探究的营养成分（40g） 抑菌圈直径（mm） 1 KNO34.0g；黄豆粉36.0g 12.10 2 NH4NO34.0g；黄豆粉36.0g 20.40 3 KNO34.0g；蛋白胨36.0g 11.40 4 NH4NO34.0g；蛋白胨36.0g 18.40 (1)显微镜观察链霉菌时发现其遗传物质聚集在无膜包被的某一区域，由此推测链霉菌最有可能属于_____。 A．真核生物 B．原核生物 C．DNA病毒 D．RNA病毒 (2)培养基中加入的黄豆粉可以为链霉菌的生长提供的营养成分有_____。 A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．生长因子 (3)根据表判断，最有利于实验室培养链霉菌产生抗生素的是_____。 A．组1 B．组2 C．组3 D．组4 (4)从成分来源上分类该培养基属于 培养基，为了获得较清晰的抑菌圈而便于测量直径，大肠杆菌菌液接种到培养基中的接种工具为 。测量抑菌圈直径时，是否可以进行菌落计数进而评估大肠杆菌的生长状况，具体原因为 。 (5)下列对该探究实验结果的分析正确的_____。 A．该实验探究的营养成分是碳源 B．该实验探究的营养成分是氮源 C．链霉菌对KNO3的利用效率高于NH4NO3 D．链霉菌对蛋白胨的利用效率低于黄豆粉 为了利用优化的营养成分大量培养链霉菌并提取其次级代谢产物，研究人员利用如图所示发酵罐进行培养。 (6)从加料口输入的培养基必须经过严格的灭菌处理，最佳的灭菌方式为_____。 A．高压蒸汽灭菌 B．过滤除菌 C．辐射灭菌 D．火焰灼烧灭菌 (7)根据图示可知，发酵过程除严格控制3的搅拌速度外还必须满足的条件为_____。） A．将发酵罐置于无菌室中避免杂菌污染 B．持续通入无菌空气以保证适宜的溶氧量 C．利用消泡剂去泡沫避免营养及发酵产物的浪费 D．利用1和2保持适宜的温度以维持链霉菌代谢稳定 (8)如要配制图发酵罐中培养基，下列过程请选择正确的编号并排序 。 ①调pH            ②定容            ③灭菌            ④溶解            ⑤称量            ⑥倒平板 (9)如图所示的发酵罐可以连续培养提高生产效率，具体做法是以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出旧的培养基。该工艺流程可以提高生产效率的原因为 。 3．ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验（1~V表示过程，①~③表示菌落），已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。    (1)实验中需注意无菌操作，下列需要灭菌处理的是___。 A．土样 B．培养基 C．接种环 D．涂布棒 (2)图中第I步最常用的接种方法是 。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，则应在第I步之前 ，再进行接种。 (3)第Ⅲ步接种，应挑选 （①/②/③）号菌落。 (4)下列所示操作，发生在图中哪个过程 （填图中过程编号）    (5)下列关于实验中用到的4种培养基的分析，正确的是______。 A．甲培养基是液体培养基，能提供目的菌所需的全部营养 B．乙培养基是固体培养基，用于选择产ε-PL的菌种 C．丙培养基是固体培养基，用于分离产ε-PL的菌种 D．丁培养基是液体培养基，用于目的菌的增殖、生产ε-PL 为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区的宽度，得到了表所示的结果。 ε-PL浓度/mg·L-1 清晰区宽度/mm 微生物 20 30 40 50 60 70 大肠杆菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3 沙门氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0 酿酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 - 红曲霉 + + + + + 6.3 注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。 (6)下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是_____。 A．结果显示ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强 B．ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关 C．用于实验的培养基应该用液体的选择培养基 D．接种过程需在超净工作台火焰周围进行 (7)该实验在设置ε-PL浓度梯度方面还有不完善之处，请提出2条修改建议： 。 (8)经实验筛选到的菌种通过大规模发酵可大量生产ε-聚赖氨酸（ε-PL），以下关于发酵工程说法正确的是____。 A．发酵过程中培养基和设备均采用相同方式灭菌 B．选育出的菌种可直接用于大型发酵 C．发酵过程需严格控制温度、Ph和溶解氧等培养条件 D．发酵产物ε-聚赖氨酸（ε-PL）需从微生物体内分离提纯 (9)发酵过程中要随时取样检测培养液中微生物数量，若要确切统计活菌数量，可采用 （显微镜计数法/稀释涂布平板法）。 4．下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： (1)利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是 。 (2)植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有 。人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法， 其中化学法包括 、 ，植物体细胞融合完成的标志是 。 (3)“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含 条染色体， 属于 倍体植株。 Ⅱ.银杏的次生代谢产物， 如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖， 扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片。中取得， 但传统载植方法周期长、成本高、受环境影响大， 无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取， 具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关问题： (4)研究表明， 选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成 的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛， 但在 时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用 多次冲洗也不易清除， 导致细胞易失活甚至破裂。 (5)外植体愈伤组织试管苗植株 为获得银杏阳次生代谢产物， （填A“需要”或B：“不需要”） 走完如上述流程图的全过程。有关做法是： 可以将 转入到 培养基中， 进一步扩大培养， 以提取有益次生代谢物，在此过程中需要做到 操作。与固体培养基培养愈伤组织相比， 此做法的优点有哪两项 A． 与培养基的结合更加充分          B． 受培养基中成分差异的影响较小 C．对环境不敏感                      D． 对营养物质的吸收更容易 (6)此外， 研究表明， 用通气较为不良的介质封口， 如塑料膜或玻璃纸， 可以提升黄酮和内酯的产量， 可能原因是 胁迫细胞诱导产生次生代谢物。 (7)学习了植物组培技术后， 同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养， 结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时， 忘记添加NAA （NAA： 萘乙酸， 为尘长素类似物），结果与添加NAA 的生根培养基中的菊花幼苗相比， 无添加NAA 培养基中的菊花幼苗也育生根ₖ、其原因可能是 。不过其生根数量较少且根长较短， 可能的原因是 。 (8)请例举植物组织培养技术的应用 （至少两项， 上述中提到的除外）。 5．细胞工程在育种和药物生产领域应用十分广泛，阅读材料回答下列问题。 材料一：花椰菜（2n=18）是人们喜爱的蔬菜，种植时容易遭受病菌侵害，形成病斑。紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种。 (1)科研人员分别取紫罗兰叶肉细胞和黑暗处发芽的花椰菜胚轴细胞，经过一定处理，得到两种原生质体，下列适合用于制备原生质体的是____。 A．蛋白酶 B．纤维素酶 C．果胶酶 D．机械分离 (2)过程②诱导两种原生质体融合的方法有 （编号选填）。 ①酶解法  ②PEG促融  ③灭活病毒  ④电融合⑤机械促融法  ⑥农杆菌介导法  ⑦胰蛋白酶 (3)通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图1（右）所示。据图判断， 号为杂种植株。 融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度促溶剂诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，获得结果如表。 促溶剂质量分数 原生质体状态 25% 有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01% 30% 形态正常，哑铃型原生质体比例0.03% 35% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% 40% 原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02% (4)当促融剂质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象，原因是 。若想确定促融剂溶液诱导原生质体融合的最适浓度，需在 范围内缩小浓度梯度继续实验。 (5)PEG诱导后需要筛选。筛选时用光学显微镜挑选出含 （填细胞器）且形态为哑铃型的原生质体，在黑暗的环境中进一步培养获得 的细胞团，即愈伤组织，之后再分化，并进一步发育成完整植株，此技术称为 。 愈伤组织再分化所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，愈伤组织的变化情况如图2所示。    (6)据图2中信息和所学知识判断，植物激素X和Y分别是 和 。（编号选填） ①生长激素 ②细胞分裂素 ③生长素 ④赤霉素 ⑤脱落酸 ⑥乙烯 ⑦2，4-D 材料二：科学家利用细胞工程成功制备了单克隆抗体，这一技术在医药领域发挥了极其重要的作用。在此基础上制备的抗体—药物偶联物（ADC）更是为癌症的治疗开辟了崭新的路径，其作用机制如图3所示，请回答。 (7)单克隆抗体制备中所用到的生物技术有 （写两种）。 (8)新冠肺炎康复者捐献的血浆中含有抗体，可用于重症患者的治疗。我国科研工作者提出，也可以利用康复者血液中的记忆B细胞制备单克隆抗体，比血浆注射疗法更为有效，其依据在于____。 A．单克隆抗体特异性高 B．记忆B细胞可无限增殖 C．细胞融合技术更安全 D．血浆中的抗体种类更多 (9)结合图3及已有知识，描述在ADC作用过程中，ADC中抗体、药物的作用分别是什么？与直接使用药物进行化疗杀伤肿瘤细胞相比，ADC在临床应用上有何优势？ 。 6．植物体细胞杂交技术可将不同种植物的优势集中在一个个体上，培育人们生产所需 的优良杂种植株。如图为利用某种耐酸植物甲(4N) 和高产植物乙(2N)，培育高产耐酸植物丙的过程。回答下列问题；    (1)图中①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是 ,进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行 (选填“消毒”或“灭菌”)处理，以防止杂菌污染。 (2)PEG诱导后，除了“甲’+乙′”,还存在 ， (3)图中过程②称为 ，由杂种细胞发育为植物丙的原因是 (4)在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素X 和植物激素Y, 逐渐改变培养基这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示，植物激素X的名称是 ，植物激素Y的名称是 。当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时， 。    2017年11月-12月，中科院神经科学研究团队利用体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”,该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。 (5)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是 。 (6)刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部首先会出现细胞贴壁现象。传代培养时，常利用 酶，制成细胞悬液后转入新的培养瓶中。需要控制的培养条件包括 ①无菌②适宜的温度③5％的CO2 ④充足的溶解氧⑤充足的光照   ⑥合适的渗透压  ⑦充足的营养物质 (7)图所示过程涉及的生物技术有 （答出两点） 以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同一批克隆猴的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自称猴胚胎成纤维细胞的细胞核。图中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到MII期后进行去核操作，而后用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育。 (8)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中kdm4dmRNA翻译产生的酶的作用是 ,kdm4dmRNA导入重组细胞的技术是 。 1 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 1 一、 二 2024-2025 学年高二生物下学期第一次月考卷 生物·答题卡 姓 名：__________________________ 准考证号： 贴条形码区 考生禁填： 缺考标记 违纪标记 以上标志由监考人员用 2B 铅笔填涂 选择题填涂样例： 正确填涂 错误填涂 [×] [√] [／] 1．答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 2．选择题必须用 2B 铅笔填涂；非选择题必须用 0.5 mm 黑色签字笔 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清晰。 3．请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 4．保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 注意事项 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 三、 四、 五、 六、 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！