内容正文:
哈三中2025年高三学年第一次模拟考试
生物 答案
1、 单选题(每题只有一个选项符合题意,每题 2 分,共 30 分)
1~5.D B C C B 6~10.D C D C A 11~15.D C B B A
2、 不定项选择题(每题至少有一个选项符合题意。每题 3 分,全部选对的得 3 分,选对但不全的得 1 分,有错选的不得分,共 15 分)
16.BCD 17.ABC 18.AD 19.ABD 20.ABD
3、 非选择题(无特殊标记每空1分,共55分)
21. (10分)
(1)无水乙醇 干旱条件下沙蒿叶绿素含量下降,类胡萝卜素的颜色显现出来(答出前半句即可)
(2)暗反应 非气孔限制因素
(3)水的光解产生H+ NADPH的合成消耗H+ 协助扩散
(4)将生长状况相同的沙蒿均分成甲乙丙三组,分别在干旱胁迫、干旱胁迫+NO和适宜水分三种条件下培养(1分),其他条件相同且适宜,培养一段时间后,检测各组PSⅡ含量(或光合速率)(1分)。若实验结果为PSⅡ含量(或光合速率)丙组>乙组>甲组,则可以验证上述结论(1分)。(共3分)
22.(12分)
(1)交感 瞳孔扩张、心跳加快、胃肠蠕动减慢等
行为性调节 甲状腺激素和肾上腺素(2分)(答一点即可)
(2) 突触 性激素的本质也为类固醇(1分),当外源类固醇含量增多,会加强对下丘脑和垂体的负反馈作用,使得分泌的促性腺激素释放激素和促性腺激素含量减少(1分),影响生殖器官发育和功能(共2分)
(3) 辅助剂H 辅助剂H+药物K 一段时间后测量各组小鼠的血压变化 甲=乙>丙>丁
23.(13分)
(1)③ 直接和间接(2分)
(2)摇蚊幼虫作为分解者将有机物分解为无机物,加速物质从生物群落返还到无机环境(2分)
(3)不同水生植物占据不同垂直空间(1分),充分利用光照、营养等资源(1分) 自生、协调、整体(1分)(答一点即可)
(4)578.1 11.21%(2分)
(5)给予相应的物质能量投入,保证生态系统内部结构和功能的协调。(其他答案合理即可)(2分)
24. (10分)
(1)否
(2)50% 9/32 1/25
(3)实验思路:选择转入了基因R的F1植株进行自交,统计后代的表型及比例 (2分)
1 抗虫阔叶:抗虫窄叶:非抗虫阔叶:非抗虫窄叶=9:3:3:1 (2分)
2 抗虫阔叶:非抗虫窄叶=3:1或抗虫阔叶:抗虫窄叶:非抗虫阔叶=2:1:1(2分)(测交实验不给分)
25. (10分)
(1)1、4 变性、复性、延伸(3分) 2n-2n SacⅡ和EcoRI
脱水四环素 头孢霉素
(2)(琼脂糖凝胶)电泳 D
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哈三中2025年高三学年第一次模拟考试
生物 试卷
一、单选题(每题只有一个选项符合题意,每题 2 分,共 30 分)
1.科学家向豚鼠的外分泌细胞——胰腺腺泡细胞中注射 3H标记的亮氨酸后,通过检测
放射性来研究分泌蛋白的合成和运输。下列叙述正确的是( )
A.该实验用 3H标记亮氨酸的羧基可观察到蛋白质的加工路线
B.该过程产生的分泌蛋白可能是能降低血糖浓度的激素
C.该实验过程所需的能量主要来自线粒体和叶绿体
D.内质网加工后的蛋白质运输到高尔基体可体现生物膜系统的结构特性
2.亲代与子代间在遗传物质的组成上存在稳定性和差异性。下列叙述正确的是( )
A.父本和母本传至子代的遗传信息不同,但遗传物质的数量相同
B.遗传的多样性有利于生物适应多变的自然环境,体现了有性生殖的优越性
C.对亲、子代遗传稳定性起决定作用的主要是有丝分裂和减数分裂
D.同一双亲的后代呈现多样性与基因重组有关,与精子和卵细胞结合的随机性无关
3.节食减肥有很多危害,如引起骨质疏松、内分泌失调、情绪低落等,长期节食还会因
脂肪代谢缓慢在肝脏中堆积形成脂肪肝。下列叙述错误的是( )
A.过度节食可能使蛋白质摄入不足,对细胞的增殖和更新影响较大
B.钾离子有维持心肌舒张、保持心肌正常兴奋的作用
C.体内糖代谢障碍引起供能不足时脂肪可大量转化成糖类
D.情绪低落可能会影响神经递质的释放,进而使免疫系统功能下降
4. 下列研究成果应用“减法原理”控制自变量的是( )
A.根据大量化石等多种证据提出自然选择学说
B.根据大量动植物细胞的观察结果提出细胞学说
C.蝾螈受精卵横缢实验证明细胞核功能
D.人鼠细胞融合实验证明细胞膜流动性
5.使用发芽谷物将煮熟的米中的淀粉转化为麦芽糖可制成饴糖。下列叙述错误的是( )
A.淀粉是否被分解为还原糖,可用斐林试剂进行检测
B.麦芽糖、乳糖和蔗糖都属于二糖可被细胞直接吸收
C.糖尿病患者不宜食用饴糖,食用小麦制成的食物也要适量
D.煮熟的米中的淀粉可被发芽的小麦中的淀粉酶催化分解为麦芽糖
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6.关于利用乳酸菌制作传统发酵食品,下列叙述正确的是( )
A.制作泡菜的过程是无氧条件下乳酸菌单一菌种的发酵
B.制作酸奶的牛奶须经过高压蒸汽灭菌后再接种乳酸菌
C.腌制两天后,泡菜的风味逐渐显现应及时食用,此时泡菜中亚硝酸盐的含量较低
D.控制好发酵时间和温度,以避免过量乳酸影响酸奶或泡菜的口味和品质
7.过去离煤气路灯越近的树叶在秋末脱落越早,煤气中引起脱落的活性物质还可以催熟
果实。现在以电灯作为路灯,离路灯越近的树叶脱落却越晚,保持绿色的时间较长。对
上述现象解释错误的是( )
A.离煤气路灯近的树叶脱落早可能与煤气中的乙烯有关
B.保持绿色时间长的叶片内细胞分裂素可能含量较高
C.电灯延长光照时间可能会增加叶片内脱落酸含量
D.植物叶片内存在感受光照变化的蛋白质
8. 有一种 AI算法可以在声音记录中既快又准地检测到蓝鲸的 D-calls(D-calls是成年雌雄
蓝鲸在栖息地觅食时发出的“社交”叫声)。下列相关叙述正确的是( )
A.采用标记重捕法可估算蓝鲸种群数量,据此可预测蓝鲸种群未来的增长趋势
B.D-Calls具有高度的个体特异性,通常用于调查南极地区蓝鲸的种群密度
C.成年蓝鲸的 D-calls是觅食时的特殊行为,属于不同物种之间传递的物理信息
D.该算法有助于提高对蓝鲸种群动态的监测效率,便于人类了解蓝鲸的分布情况
9.在人体的 DNA 中有一种 i-Motif结构(如图),是同一条 DNA链上的胞嘧啶(C)
彼此结合形成的。大多数情况下,i-Motif通常形成在 DNA被积极“读取”时,倾向于出现
在细胞“启动子区域”。这些变形的 DNA 构象对细胞中蛋白质识别其同源 DNA 序列并发
挥其调节功能具有重要意义,下列有关说法错误的是( )
A.i-Motif的形成可能会影响基因的开关,从而影响基因被积极“读取”
B.DNA 被“读取”是以 DNA的一条链为模板合成 RNA 的过程
C.在 DNA 分子双螺旋区域和 i-Motif中,碱基都按 A—T或 G—C配对
D.温度和 pH的变化可能会影响 i-Motif结构的形成从而影响基因的表达
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10.胃酸可杀灭随食物进入消化道内的细菌,分泌过程如图所示。有两类药物可缓解胃
酸分泌过多,治疗反流性食管炎等疾病。药物 PPIs在酸性环境下与质子泵发生不可逆性
结合,从而抑制胃酸的分泌,当新的质子泵运输到胃壁细胞膜上才可解除抑制。药物
P-CAB竞争性结合质子泵上的 K+结合位点,可逆性抑制胃酸分泌。下列有关推测不合理
的是( )
A.药物 PPIs和药物 P-CAB 都会改变质子泵的
空间结构使其失去生物活性
B.药物 P-CAB会使 K+从胃壁细胞分泌到胃腔
的速度降低
C.长期使用药物 PPIs需要服用抗生素,防止
出现细菌感染性腹泻
D.胃壁细胞积累 Cl-需要与细胞底部膜的 Cl-
载体蛋白结合进入
11.某保护区地势较为平坦,植被类型属于热带稀树灌丛草原,生活着坡鹿、猛禽和蟒
蛇等动物。保护区工作人员有时在一定区域内采用火烧法加速牧草的更新繁盛,对坡鹿
在火烧地和非火烧地的采食与休息行为进行研究,结果如图 1。科研人员在野外调查的基
础上绘制了保护区食物网,部分结构如图 2。下列分析错误的是( )
A.火烧地牧草更新繁盛,坡鹿食物来源更丰富,导致采食次数增加,非火烧地提供遮蔽,
坡鹿休息次数较多
B.为了研究火烧法对植被的影响,科研人员采用样方法进行调查,群落结构越复杂,样
方面积应越大
C.图 2没有显示的生态系统组成成分是分解者和非生物的物质和能量
D.该生态系统的营养结构主要包括种间关系和种内关系,一种生物可以位于多个营养级
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12.感染人乳头瘤病毒(HPV)是女性患宫颈癌的主要诱因。与 HPV 疫苗不同,治疗性
HPV 疫苗主要针对已经感染 HPV 的人群,通过激发宿主的免疫系统来清除已感染的病毒
或控制 HPV 感染症状。药物 L是新研发的治疗宫颈癌的药物,为探究药物 L与治疗性
HPV 疫苗联合使用的疗效,实验人员进行了如表所示的实验。下列分析错误的是( )
组
别
处理方式
实验结果
肿瘤组织内细胞毒性 T 细胞占比 肿瘤体积
甲 宫颈癌模型小鼠+生理盐水 + ++++++
乙 宫颈癌模型小鼠+治疗性 HPV 疫苗 +++ ++++
丙 宫颈癌模型小鼠+药物 L +++ +++
丁 ? +++++ +
注:“+”越多,相对值越大。
A.丁组的处理方式是宫颈癌模型小鼠+治疗性 HPV 疫苗+药物 L
B.药物 L和治疗性 HPV 疫苗均具有一定的治疗宫颈癌的效果
C.治疗性 HPV 疫苗具有抑制细胞毒性 T细胞活化的功能
D.药物 L与治疗性 HPV 疫苗联合使用抑制肿瘤生长的效果更佳
13. 替代控制是一种主要针对外来植物的生态控制方法,其核心是根据植物群落演替的自
身规律用有经济或生态价值的本地植物取代外来入侵植物。下列说法错误的是( )
A. 人侵植物会导致众多本地植物的生境丧失
B. 入侵植物一般通过与本地植物的杂交而增加物种多样性
C. 替代植物应具有强大的竞争优势或对资源的需求很低等特点
D. 入侵植物会改变生态系统的营养结构和群落演替的速度和方向
14.内啡肽是机体产生的一种能缓解疼痛、振奋情绪的多肽类神经递质。吗啡是一种阿
片类毒品,也是常见的镇痛药。内啡肽和吗啡可与相同的受体结合,但吗啡等制剂与受
体结合后会抑制内啡肽的产生。下列有关分析错误的是( )
A.神经递质不都是小分子物质,经扩散通过突触间隙时不消耗 ATP
B.内啡肽与吗啡均可由突触前膜释放并与突触后膜上的受体相结合
C.吸食吗啡成瘾可能与机体中内啡肽分泌减少后依赖吗啡制剂有关
D.运动员忍耐伤痛、奋力拼搏可能与体内的内啡肽含量增加有关
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15. 将某油菜品种的大量种子置于太空环境中,返回地面后筛选出突变体 Ch1,突变体
Ch1油菜籽产量提高了约 3.6%。检测发现,该突变体内与油菜籽有关的酶基因 Ch1发生
了基因突变,导致蛋白 Ch1第 34位氨基酸发生变化,其他氨基酸序列未发生改变,Ch1
蛋白酶的活性因此增强,从而促进了油菜籽产量的提高。下列分析合理的是( )
A.上述育种过程利用了物理因素来处理油菜种子,使油菜种子发生基因突变
B.基因 Ch1发生了碱基对的增添、缺失或替换,该类变异类型是生物进化的根本来源
C.需要处理大量种子才可能得到产量提高的突变体,仅体现基因突变有不定向性
D.经太空环境处理的种子发育成突变体 Ch1植株体现了植物体细胞的全能性
二、不定项选择题(每题至少有一个选项符合题意。每题 3 分,全部选对的得 3 分,选
对但不全的得 1 分,有错选的不得分,共 15 分)
16. 下图为全球首例非人灵长类克隆动物的培育过程,为了调节相关基因的表达,提高胚
胎的发育率和妊娠率,研究人员将组蛋白去甲基化酶 Kdm4d 的 mRNA 注入了重构胚,
同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂 TSA处理了它。下列说法中错误的是( )
A. 非人灵长类克隆动物成功率低的原因之一为供体细胞的细胞核难以完全恢复分化前
的功能状态
B. 应将采集到的卵母细胞培养到 MⅡ期再通过显微操作去除其核膜包被的细胞核
C. 图中对于重构胚的处理使其中某些基因的甲基化程度和组蛋白的乙酰化程度增加,有
利于重构胚的正常发育
D. 在胚胎移植前,需要对代孕母猴注射糖皮质激素等免疫抑制剂,防止免疫排斥的发生
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17. 细胞周期可分为分裂间期(包括 G1期、S期和 G2期)和分裂期(M期),细胞周期
的进行受不同周期蛋白的影响,其中周期蛋白 cyclinB与蛋白激酶 CDK1结合形成复合物
MPF后,激活的 CDK1促进细胞由 G2期进入M期,已知胸苷(TdR)双阻断法可以使
细胞周期同步化,TdR使得处于 S期的细胞立刻被抑制,而其他时期的细胞不受影响,
且去掉 TdR细胞控制作用会消除,下图 1是某动物细胞(染色体数为 2n=12)的细胞周
期及时长示意图,图 2是测定的该动物体内细胞①~⑤中染色体数与核 DNA 分子数的关
系图。下列叙述错误的是( )
图 1 图 2
A.激活的 CDK1 可能参与 DNA聚合酶、解旋酶合成的调控
B.图 2中细胞内没有同源染色体的时期只有①②
C.加入 TdR约 15h后,所有细胞均停留在 G1/S交界处
D.第二次加入 TdR之前,需将细胞在无 TdR的环境中培养,时间需要大于 7h小于 15h
18. 在亚冬会短道速滑比赛场上,发令枪一响,运动员会像离弦的箭一样冲出。该行为涉
及机体的反射调节,其部分通路如图。下列说法错误的是( )
A. 短跑比赛规则规定,在枪响后 0.1s内起跑视为抢跑,
该行为属于条件反射
B. 兴奋传递经过②处会存在电信号→化学信号→电信
号的转变
C. 大脑皮层运动中枢发出的指令通过皮层下神经元④
和⑤控制脊髓中神经元②和③,进而精准调控肌肉收缩,
体现了神经系统对躯体运动的分级调节
D. 若中枢神经元④和⑤的兴奋均可引起 b结构收缩,
则在箭头处切断神经纤维,b结构收缩强度会加强
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19. 微小 RNA 是一类很短的 RNA分子,通常由 20-24个核苷酸组成,线虫体内就存在一
种特殊的 lin-4基因,它本身并不编码蛋白质,而是通过转录产生 microRNA与线虫体内
的 lin-14基因产生的 mRNA 不完全地相结合,从而对其蛋白质的合成产生影响。下列说
法错误的是( )
A. lin-4 基因在转录过程中不需要 RNA聚合酶的参与
B. microRNA影响了 lin-14基因的转录过程以影响其蛋白质的合成
C. microRNA与靶 mRNA 的结合过程中不存在 A与 T的配对
D. microRNA内的嘌呤数一定等于靶 mRNA 中的嘧啶数
20. 为协调渔业资源的开发和保护,实现可持续发展,研究者基于海渔业生态系统,构建
生态学模型,探究岩龙虾种群出生率和死亡率与其数量的动态关系。下列说法中正确的
是( )
A. 岩龙虾的种群密度除图中的因素外,还会受到迁入率和迁出率的直接影响
B. 对处于 B状态的岩龙虾种群进行捕捞时,为持续获得较大的岩龙虾产量,当年捕捞量
应为 9只
C. 处于 B状态时,为保证岩龙虾种群的延续,当年的最大捕捞量不能超过 34只
D. 该龙虾种群的环境容纳量会受到天敌数量,海洋污染等因素的影响
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三、非选择题(共 55分)
21. (10分)干旱胁迫会对生长过程中植物的形态产生显著影响,使植物的生长受到抑制。
沙蒿具有明显的旱生外部形态结构和水分生理特性,其叶具有较厚的角质层,可抑制蒸腾
失水,有特殊的组织增大叶绿体对光照和 CO2 的吸收面,提高光合活性。某研究所为研究沙
蒿抗旱生理机制和水分耐受极限,测得相关数据(如表),请回答下列问题:
处理
天数
/d
叶绿素含量/
(mg·g-1)
净光合速率/
(μmol·m-2· s-1)
气孔导度/
(mmol·m-2· s-1)
胞间 CO2 浓度/
(μmol·mol-1)
0 5.594 5.298 0.029 110.464
6 4.921 2.695 0.007 230.722
12 5.026 0.415 0.005 333.221
18 4.762 0.056 0.002 419.362
24 4.214 -0.546 0.001 528.135
表 1
(1)测定沙蒿叶肉细胞的叶绿素含量时用________提取色素,土壤含水率降低时观测到
的沙蒿叶色由绿色变为黄色的原因是 。
(2)若气孔导度下降,胞间 CO2浓度下降,光合速率降低,称为气孔限制因素;若气孔
导度下降,胞间 CO2浓度较高,则光合速率降低是受其他因素的影响,称为非气孔限制
因素。气孔限制因素主要通过影响___________(填“光反应”或“暗反应”),从而影响光
合速率。据表 1分析,在干旱胁迫条件下,导致沙蒿光合速率下降的为____________(填
“气孔限制因素”或“非气孔限制因素”)。
(3)下图是沙蒿叶肉细胞类囊体膜上发生的部分生理过程,反应中心 PSⅡ、PSⅠ中含有
特殊状态的叶绿素 a,它们能利用光能进行电子的传递。PQ、Cytbf、PC等是传递电子的
蛋白质。图中实线为电子的传递过程,虚线为 H+的运输过程。当条件适宜时,部位甲的
H+浓度大于部位乙,造成该 H+浓度差原因有电子(e-)传递过程中释放的能量促进 PQ
蛋白运输 H+和___________、___________等过程。H+通过 ATP合酶的运输方式
为 。
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图 1
(4)进一步研究发现,外源 NO还可缓解干旱胁迫下色素蛋白复合体 PSⅡ受到的破坏, 从
而增加光合速率。请以沙蒿为实验材料设计实验进行验证,请设计实验思路并预测实验
结果(PSⅡ的具体检测方法不做要求):
22.(12分)第九届亚洲冬季运动会于北京时间 2025年 2月 7日至 2月 14日在冰城哈尔
滨举行,这是继 2022年北京冬奥会后中国举办的又一重大国际综合性冰雪盛会。在赛场
上我国运动员努力拼搏,勇夺奖牌,为国争光。回答下列有关问题:
(1)运动员在比赛过程中会出现面部发红,呼吸急促的现象,这是 神经活
动占据优势的结果,请写出此时该神经控制的其他部位器官的变化
(写出一条即可)。在运动结束后运动员通常需要及时披上外衣来维持体温的相对稳定,
这属于 (填“行为性”或“生理性”)调节,除此以外还可以通过
等激素的释放以增强产热,维持体温正常。
(2)亚冬会严禁运动员使用兴奋剂,兴奋剂会对神经系统产生影响,大多是通过
(结构)发挥作用。促进蛋白质合成的类固醇是一种常见兴奋剂,服用过量类固醇药物
会影响运动员生殖器官的发育和功能,请用生物学术语从反馈的角度解释上述现象
。
(3)在热烈的气氛感染下,运动员和观众的血压往往会上升,但血压过高对人体健康有
显著影响。研究表明辅助剂 H不能直接降低血压但能加强药物 K的降压效果。为验证这
一结论,科研人员用小鼠进行实验研究,请完善表格中的实验方案并预测实验结果。
乙
甲
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组别 甲组 乙组 丙组 丁组
处理
方式
高血压模型鼠
+生理盐水
高血压模型鼠+
生理盐水+①
高血压模型鼠+生
理盐水+药物 K
高血压模型鼠+
生理盐水+②
检测 ③
预测结果: (横线上补全实验结果,并用“=”“<”“>”表示血压高低关系)。
23.(13分)武汉东湖是我国第二大城中湖,其面积大约为杭州西湖的五倍。东湖湖湿地
曾因围湖造田和工业废水排放导致生态恶化。近年来通过生态修复,芦苇等植物重新繁
茂,黑水鸡、白鹭等鸟类回归。研究人员发现湿地中底栖动物(如摇蚊幼虫)数量恢复
对生态系统平衡至关重要。图 1为东湖生态系统的部分碳循环示意图,甲~丁为生态系统
的组成成分。图 2 为东湖生态系统能量流动图(单位:J·km-2·a-1),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表
各个营养级请分析以下问题:
图 1 图 2
(1)图 1中表示食物链的过程为 (填序号)。东湖在旅游观光、养殖、农灌
以及涵养水源调节生态环境等方面发挥着巨大的作用,这体现了生物多样性的 价值。
(2)研究发现摇蚊幼虫可通过取食有机碎屑获取能量净化水质。请解释摇蚊幼虫在该生
态系统中的作用:__________________________。
(3)在修复过程中,工作人员同时引入沉水植物(如金鱼藻)和浮水植物(如睡莲)。
从群落结构角度分析这种做法的优势:__________________________。这也符合了生态
工程中的 原理。
(4)图 2中 X的值应为 J·km-2·a-1,第二营养级向第三营养级的能量传递效率约
为 %(百分号后保留两位小数)。
(5)为了更好的维持当地的生态平衡,提高生态系统的稳定性,除了可以控制对东湖生
态系统的干扰强度,合理的开发利用之外,你认为还可以采取何种措施
。
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24.(10分)观赏植物矮牵牛(2n)为两性花,其花色由 A/a 和B/b 两对等位基因控制,
A 基因控制红色素的合成,B基因控制蓝色素的合成,含A、B基因的植株开紫花,不含
A、B基因的植物开白花。现将红花与蓝花植株杂交,F1全为紫花,F1自交,F2中紫花:红
花:蓝花:白花=33:15:15:1。 不考虑基因突变和致死,回答下列问题。
(1)控制花色的基因 A/a 、B/b 的遗传 (填“是”或“否”)遵循基因的自由组合定
律。
(2)假设在形成配子时,初级精母细胞与初级卵母细胞互换的情况相同,根据 F2表型比
可推断 F1形成花粉时, (百分数)的初级精母细胞发生了互换。其中在 F2
中与 F1基因型且基因位置相同的个体占 。利用 F2的红花与蓝花杂交,子
代中白花植株占 。
(3)阔叶和窄叶是矮牵牛的另一对相对性状,受位于 3号染色体上的一对等位基因控制,
其中阔叶对窄叶是显性。科研人员先用纯合阔叶花和窄叶花进行杂交得到 F1,然后通过
基因工程将一个能表达抗虫特性的基因 R转入 F1植株中一条染色体上且不破坏叶形基因,
得到抗虫的矮牵牛植株。欲探究基因 R是否转入 3号染色体,请设计一个最简单的实验,
实验思路为
。
1 若后代的表型及比例为 ,
则基因 R没有转入 3号染色体;
2 若后代的表型及比例为 ,
则基因 R转入了 3号染色体。(没有 R基因表现为不抗虫性状)
25.(10分)金黄色葡萄球菌(简称 Sa)可能引发从轻微皮肤感染到严重的全身感染,尤
其对免疫力低下者危害更大。预防感染的关键在于良好的卫生习惯和合理使用抗生素。
但不规范使用抗生素易出现抗药性 Sa。推测 Sa 产生头孢霉素抗性与其 R基因有关。为
验证该推测,以下图中 R基因的上、下游片段及质粒 1共同构建质粒 2,然后通过同源
重组(质粒 2 中的上、下游片段分别与 Sa 基因组中 R基因上、下游片段配对,并发生交
换)敲除 Sa的 R基因。
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(1)操作步骤如下:
①根据图 1信息,质粒 2的构建过程中用引物 (填数字)进行 PCR 扩增,每次循
环一般可以分为 三步,n次循环后可以得到等长的目的基因 个。
然后选择限制酶 对扩增产物进行酶切,然后回收上、下游片段,再与 SacⅡ
酶切质粒 1所得大片段连接,获得质粒 2。
②用质粒 2转化临床分离的具有头孢霉素抗性、对氯霉素敏感的 Sa, 然后涂布在含氯霉
素的平板上,经培养获得含质粒 2的 Sa 单菌落。
③将步骤②获得的单菌落多次传代以增加同源重组敲除 R基因的概率,随后稀释涂布在
含 的平板上,筛选并获得不再含有质粒 2的菌落。从这些菌落中
分别挑取少许菌体,依次接种到含 的平板上,若无法增殖,则对应菌落
中细菌的 R 基因可能被敲除。
(2)以③获得的菌株基因组为模板,采用不同引物组合进行 PCR扩增,产物一般通过
(技术名称)来鉴定。检测结果如下图所示,表明 R基因已
被敲除的是 。