内容正文:
第2章 细胞工程
第1节 植物细胞工程
第2课时 植物体细胞杂交技术
高中生物学 | 人教版(2019)| 选择性必修3·生物技术与工程
20世纪60年代,科学家尝试将番茄和马铃薯杂交,希望培育出一种地上结番茄、地下长马铃薯的超级作物。
讨论:用传统的有性杂交方法能得到杂种后代吗?为什么?
【问题探讨】
不能;因为两种生物之间存在着生殖隔离。
有没有一种方法可以打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,获得“番茄-马铃薯杂种植株”呢?
植物细胞的全能性
1
植物组织培养技术
2
目录
CONTENTS
植物体细胞杂交技术
3
三、植物体细胞杂交技术
活动
任务:植物体细胞杂交技术
请同学们自主阅读教材P36~38,小组合作思考讨论完成问题:
1.你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合,遇到的第一个障碍是什么?
2.用什么方法可以温和地去除细胞壁而不伤害原生质体?
3.人工诱导原生质体间的融合方法有哪些?与细胞膜的什么特性有关?
4.细胞融合后,共有几种细胞类型?符合要求的是哪种?
5.如果两个来源不同的原生质体发生融合形成了杂种细胞,下一步如何将杂种细胞培育成杂种植株?
三、植物体细胞杂交技术
1.植物体细胞杂交的概念
将不同来源的植物细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新植物体的技术。
2.过程
植物细胞融合
植物组织培养
2.过程
三、植物体细胞杂交技术
去除细胞壁
诱导原生质体融合
再生细胞壁
组织培养
方法:
原理:
目的:
酶解法(用纤维素酶和果胶酶)
利用酶的专一性
去除细胞壁,获得原生质体。
B细胞
A原生质体
B原生质体
去壁
A细胞
注意
区分原生质体和原生质层
原生质体:指的是脱去细胞壁的细胞,包括细胞膜、细胞质、细胞核。
原生质层:成熟植物细胞的细胞膜、液泡膜和介于这两层膜之间的细胞质。
去壁
培养基中添加蔗糖且浓度略大于植物细胞质浓度,不仅为原生质体提供营养,而且能维持一定的渗透压,使原生质体保持正常形态。
三、植物体细胞杂交技术
2.过程
去除细胞壁
诱导原生质体融合
再生细胞壁
组织培养
关键环节
方法:
化学方法:①聚乙二醇(PEG)融合法
②高Ca2+-高pH融合法
原理:
物理方法:①电融合法
②离心法等
细胞膜具有流动性
正在融合的原生质体
诱导融合
思考
筛选融合细胞:
原生质体融合后,培养基中共有 种细胞类型。
融合类型:AA、BB、AB
未融合类型:A、B
因此要对融合细胞进行筛选,筛选出所需融合类型:AB。
5
诱导融合后获得的所有细胞一定是需要的杂交细胞吗?
不一定
7
2.过程
三、植物体细胞杂交技术
去除细胞壁
诱导原生质体融合
再生细胞壁
组织培养
正在融合的原生质体
诱导融合
再生出细胞壁
植物细胞融合完成的标志:
验证再生出新壁的实验:
质壁分离和质壁分离复原实验
再生出新的细胞壁
2.过程
三、植物体细胞杂交技术
去除细胞壁
诱导原生质体融合
再生细胞壁
组织培养
植物组织培养的原理:
植物体细胞杂交完成的标志:
植物细胞的全能性
培育成新植株
【实例】
白菜-甘蓝
2.过程
三、植物体细胞杂交技术
原 理:植物细胞的全能性、细胞膜具有一定的流动性。
生殖方式:无性生殖。
分裂方式:有丝分裂。
可遗传变异类型:染色体(数目)变异。
3.意义
三、植物体细胞杂交技术
植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种等方面展示出独特的优势。
仍有许多理论与技术问题没有解决,还不能让杂种植株表现出人们所需要的所有性状。
优点
打破远缘亲本杂交生殖隔离,扩展杂交亲本组合范围。
缺点
有可能杂交不成功,即使杂交成功也可能不产生人们想要的性状。
研究现状
三、植物体细胞杂交技术
思考
1.杂种植株包含两个物种的全部遗传物质,各种基因都包含在内,却未按照人们的要求表现出亲本所有的性状,例如“番茄-马铃薯”并没有地上结番茄,地下长马铃薯,这是为什么?
生物体内基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,杂种植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达相互干扰,它们不能像在原植株细胞内实现有序表达,因此不能按照人们的要求;表现出亲本所有的性状。
三、植物体细胞杂交技术
思考
2.A植物的染色体数目为2a,基因型为AaBb。B植物的染色体数目为2b,基因型为CcDd。根据植物体细胞杂交技术的相关原理完成表格。
生殖类型
变异类型
染色体数
染色体组数
基因组成
无性繁殖,育种过程中不遵循孟德尔定律
染色体数目变异
两亲本染色体数之和:2a+2b
两亲本染色体组数之和:2+2
两亲本基因型之和:AaBbCcDd
三、植物体细胞杂交技术
思考
3.通过植物体细胞杂交技术得到的杂种植株,理论上是可育的。请解释原因。
杂种植株含有两整套遗传物质,减数分裂时同源染色体能正常联会,形成正常配子。
随堂检测
科学家用植物体细胞杂交技术,将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合,成功地培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株,培育过程如下图所示,其中①~⑤表示过程,a~f表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题:
随堂检测
(1)在植物体细胞杂交技术中,过程①常用 酶处理植物细胞以除去细胞壁。
(2)过程②表示__________________,依据的生物学原理是
______________________。
(3)与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器是 。
纤维素酶和果胶
诱导原生质体融合
细胞膜具有流动性
高尔基体
随堂检测
(4)在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中,依据的原理是 ,其中过程④表示 过程,过程⑤涉及的细胞分裂方式为 。
(5)若番茄细胞内含m条染色体,马铃薯细胞内含n条染色体,则“番茄—马铃薯”杂种植株的体细胞内含 条染色体;若由杂种细胞培育成的“番茄—马铃薯”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株为几倍体?
。
植物细胞的全能性
脱分化
有丝分裂
m+n
单倍体
课堂小结
原理
基础概括
过程
植物体细胞杂交
细胞膜具有一定的流动性
概念
生殖方式
分裂方式
植物细胞融合
植物细胞的全能性
可遗传变异类型
意义
植物组织培养
去除细胞壁
原生质体间的融合
再生出新的细胞壁
脱分化
再分化
感谢聆听!
高中生物学 | 人教版(2019)| 选择性必修3·生物技术与工程
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