1.2.2 微生物的选择培养和计数-2024-2025学年高二生物同步高效教学课件（人教版2019选择性必修3）

【平板划线法注意事项】 ①接种环蘸取 次菌液，每次划线的菌液均来自 ，能使细菌数目随划线次数的 。 而逐渐 ，最终得到由 繁殖而来的菌落。 ②最后一区不可与 相连，不然将得不到单独的菌落； ③每次划线，均要 接种环，冷却的目的是 。划线后培养皿 培养。 上次划线的末端 增加 减少 单个细菌 第一区 灼烧并冷却 防止温度太高杀死菌种 一 倒置 灼烧时期 目的 第一次灼烧 每次划线 之前 划线结束 杀死接种环上原有的微生物，避免污染培养物 杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使每次划线的菌种源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少 杀死残存的菌种，避免污染环境、感染操作者 微生物的选择培养与计数 目录 Contents 选择培养基 一 微生物的选择培养 二 微生物的数量测定 三 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 四 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。 稀释涂布平板法 呈现的杂菌群 从社会中来 从社会中来 1. 科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 启示： 筛选原因：水生栖热菌能在高温条件下生存，而绝大多数微生物不能。 1966年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的Taq细菌，并分离到耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）。 耐高温的酶 耐高温生物体 高温环境（热泉、火山口） 寻找 寻找 PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温（950C）的DNA聚合酶。 一.选择培养基 美国黄石公园 寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 类型 条件 分离得到的菌种 改变培养条件 70～80℃的高温 添加某种化学物质 加入青霉素 高浓度食盐 特殊碳、氮源 石油是唯一碳源 营养缺陷 不加碳源 不加氮源 水生栖热菌 酵母菌、霉菌等真菌 金黄色葡萄球菌 能消除石油污染的微生物 自养型微生物 固氮菌 一、选择培养基 问题1：如果让你分离土壤中分解尿素的细菌，你应该怎么设计呢？ 思考讨论 选择培养基配方的设计 尿素[CO(NH2)2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。 尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，NH3再转化为NO3-、NH4＋等被植物吸收。 而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。 CO(NH2) 脲酶 + H2O + CO2 2NH3 NO3-、NH4＋ 被植物吸收 1.如果让你配置一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 用尿素作为唯一氮源 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 其他营养成分基本相同 P18右下角配方表 问题2：如果让你计数土壤中分解尿素的细菌，平板划线法可以吗？ 不能 ①平板划线法最开始的划线菌类会长成一片，无法计数， ②灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。 梯度稀释：将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。 取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 1×10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1×102 1×103 1×104 1×105 1×106 1×107 9 mL 无菌水 90mL无菌水 10g 在火焰旁将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。 稀释涂布平板法 稀释+涂布 最大的稀释倍数是多少？ 稀释度足够高时，定能形成由单个细菌繁殖而来的菌落 稀释10倍 二、微生物的选择培养与计数 稀释涂布平板法 取菌液滴加到培养基表面 涂布器消毒、灭菌 涂布平板 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 待涂布的菌液被____________后，将平板_____，放入___________中培养____d，在涂布有__________菌液的平板上就可以观察到分离的_______； 培养基吸收 倒置 恒温培养箱 1-2 合适浓度 单菌落 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 空白对照 恒温培养箱 未接种的培养基 比较 平板划线法 稀释涂布平板法 工具 主要 步骤 通过接种环在固体培养基的表面_________操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。 操作和 操作 特点 方法简单，只能分离，不能计数 既能分离，又可计数，但操作复杂 平板 示图 共同点 连续划线 系列梯度稀释 两种纯化方法的比较 涂布平板 接种环 涂布器 都能将微生物分散到固体培养基表面，以获得单细胞菌落， 达到分离纯化微生物的目的，也可以观察菌落特征。 三、微生物的数量测定 P18 ①原理： 1.统计的是细菌数还是菌落数？ 2.选择数目为多少的平板进行计数？ 3.同一稀释度至少取几个平板？ 4.为什么统计的菌落往往比活菌的实际数目低？ 5.如果其中有一个平板的计数结果与另2个相差较大（ 230、34、240 ），应该 如何处理？ ②计数原则和结果分析:（教材P18） 1.间接计数法 — 稀释涂布平板法 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 如实记录，求平均值时舍去。 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过计数平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 应找出原因并重新实验 C代表某一稀释度下平板上生长菌落数的平均值； V代表涂布平板时吸取的稀释液体积数值(mL)； M代表稀释倍数； 则每g样品中的菌数=__________ （C÷V）×M 例.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每g样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL) （ ） A. 2.34×108 B. 2.34×109 C. 234 D. 23.4 B = 平均值 体积 ×稀释倍数 ③ 稀释涂布平板法的计算 变式：4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为 个。 1.1×108 个体小的细菌在显微镜下难以观察 不能区分死菌与活菌； 2.直接计数——计数板计数法（做笔记） ①原理：快速直观。利用细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。 ②缺点： 问题：如何统计得到活菌数？ 台盼蓝染色，统计无色细胞。 每毫升原液含菌株数 ＝每小格平均菌株数×400×104×稀释倍数 （统计的数值偏大） 微生物的计数方法比较 内容 显微镜直接计数法 稀释涂布平板法 主要用具 显微镜、细菌计数板 或血细胞计数板 涂布器 计数依据 细菌个数 培养基上菌落数 优点 计数方便、操作简单 计数的是活菌 计算公式 每毫升原液含菌株数 ＝每小格平均菌株数×400×104×稀释倍数 每克样品中的菌株数=(C÷V)×M 　平均值÷体积 × 稀释倍数 缺点 不能区分死菌与活菌 当两个或多个菌体连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 结果 比实际值偏大 比实际值偏小 2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是(　 　) A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、蒸馏水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水 A (1)稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数(　　) (2)测定不同微生物数量时，接种的土壤稀释液的稀释度相同(　　) (3)菌落特征是鉴别菌种的重要依据(　　) (4)利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量(　　) 1.判断正误 √ × √ × 3. 葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣（皮渣）。目前这些皮渣主要用作饲料或肥料，同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。口答下列问题： （1）为了解皮渣中微生物数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将 0.1mL 稀释液接种于培养基上。104 倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为81、91和95，则每克皮渣中微生物数量大约为　　　个。 （2）皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的PH调至 ，为了达到初步筛选醋酸菌的目的，培养基中还需加入无菌白色碳酸钙粉末，在30℃培养48h。再挑取分离培养基上具有 的单菌落若干。在缺少糖原的液体培养基中可加入乙醇作为 ，。 （3）皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分平板上的醋酸菌和乳酸菌，写出简要步骤和预期结果很长横线 。 8.9x106 中性或弱碱性 透明圈 碳源 将平板置于无氧条件下继续培养，观察菌落形态和透明圈大小。 预期结果：若 则 ；若 则 。 4．(2023·广东汕头一模)热纤梭菌是一种能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌，可分泌一种多酶复合体将纤维素水解为可溶性糖，在农林废弃物的转化利用中具有应用价值。下图是筛选该菌的过程，相关叙述错误的是(　 　) A．从牛粪堆的深层取样比从表层取样更加合理 B．甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培养基 C．用平板乙统计菌落数可准确反映该菌的真实数量 D．丙中纤维素的残留量可反映该菌降解纤维素的能力 C 当两个细胞连在一起。。。。 习题巩固 Exercises to consolidate P20：2.地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中 40% ~ 60% 能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。已知刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈 (如下图所示)。请回答下列问题。 （1）现在要从土壤中分离纤维素分解菌，给出方案。 （2）你打算到什么环境中去寻找纤维素分解菌？为什么？ （3）有同学说,可以把滤纸埋在土壤中,经过一段时间后,再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。请你评价这一做法。 土壤取样 培养基的制备 样品稀释，涂布平板 培养、观察 富含纤维素的环境。 ①树林中多年落叶形成的腐殖土； ②埋有已腐烂的滤纸土壤。 ①培养基种类： 液体的选择培养基 （以纤维素为唯一碳源） ②目的：筛选出能够分解纤维素的细菌并富集培养。 等比稀释后，将样品涂布到鉴别纤维素菌的培养基上：鉴别培养基（选择培养基+刚果红染液） 高效降解菌株的筛选：挑选透明圈直径与菌落直径比值大的菌落。 思考：选择怎样的环境取样（在什么环境中寻找目的菌)？ （2019•浙江4月选考•32）通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其 原因是① ，② 。 腐烂水果中含产果胶酶的微生物较多 水果中果胶含量较高 探究实践：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ①原理： ②步骤： 土壤取样——配培养基——样品稀释、涂布——培养与观察 绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 1.土壤取样 1）取样的位置：土壤含有大量的微生物，是微生物的天然培养基。细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数的细菌分布距地表3∼8cm的土壤层。2）取样要求：先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。完成后洗手。 2.制备培养基 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基和完全培养基 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000ml 对照作用, 证明选择培养基有选择作用。 思考：一个稀释度下设置几个平板？ 选择培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 两 选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基， 以验证培养基中是否含有杂菌 ①实验组： 1、2、3组接种的选择培养基➯ 第4组接种的牛肉膏蛋白胨培养基➯ 用以分离并计数能分解尿素的细菌 用以判断选择培养基是否具有选择作用 ②对照组： 要有 个空白对照，即不涂布稀释液的 。 【实验结果】前3组实验组分离得到 菌落； 第4组得到 种菌落； 两个对照组正常情况下 菌落。 单 多 无 4.微生物的培养与观察 ①不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般 在 的温度下培养1-2d。 ③一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的 ，如形状、大小和颜色等。 ②每隔24h统计一次菌落数目，选取 时的记录作为结果，防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。 得到的菌落一定是分解尿素的细菌吗？ 不一定，还需要进一步的鉴定。因为有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物进行生长繁殖。 30-37℃ 菌落数目稳定 菌落特征 3.样品的稀释 细菌——1x104 、1x105 和1x106 （初次实验，范围适当放宽） CO（NH2）2+H2O CO2+2NH3 脲酶 原理： ①液体培养基可以直接看液体的变色情况； ②固体培养基上可以观察菌落周围是否出现红色环带，红色环带直径与菌落直径比值越大，说明分解能力越强。 进一步探究 呈碱性，遇酚酞指示剂呈 红 色。 用到鉴别培养基 A.在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后湿热灭菌 B.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单菌落 C.步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素 D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较不同种细菌分解尿素的能力 C 3 .下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，下列有关叙述错误的是( ) (情景探究)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析： (1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么？ (2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？ (3)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？ 图A：稀释涂布平板法，图B：平板划线法。 原因：菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌； 措施：增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。 火焰附近存在着无菌区域。 【思考讨论】 3.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，错误的是（ ） A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度 B.若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照 C.该实验应采用稀释涂布平板法 D.用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红 B 4.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果，其中正确的是（ ） A.涂布了1个平板，统计的菌落数是230 B.涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C.涂布了3个平板，统计的菌落数分别是13、234和254，取平均值167 D.涂布了3个平板，统计的菌落数分别为210、240和250，取平均值233 D 4.(2023·福建莆田模拟)某纺织厂为使牛仔布呈现“穿旧”效果，准备用纤维素分解菌处理代替传统的浮石擦洗。工作人员拟从土壤样品中分离该类微生物，并进行扩大培养，相关工艺流程如下图。请回答下列问题： (1)进行土样中细菌数量的测定，常用稀释涂布平板法(选用104～106倍的稀释液)统计样品中活菌的数量。当第一次用稀释涂布平板法测定土样中纤维素分解菌的数量时，所进行实验的一般基本思路是_______________________________ _____________________________________________________________________ ________________________________。 (2)在系列稀释操作前，选择培养的一般目的是___________________________ ________________________________________。 将稀释范围适当放宽的稀释液，采 用稀释涂布平板法分别接种到鉴别培养基(用刚果红染色)，以保证从中选择出菌落数在30～300的平板进行计数 以确保能够从样品中分离得到 所需要的微生物，增加纤维素分解菌的数量 5.(2022·广东卷，21)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对中国南海科考中，中国科学家采集了某海域1 146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。 (1)研究者先制备富集培养基，然后采用________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28 ℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯种培养，除了稀释涂布平板法，还可采用_________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以________为碳源时生长状况最好。 (2)研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是________________________________________ ________________________________________________(答一点即可)。 湿热灭菌 平板划线 纤维素 某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质 才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活)　 (3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是_________________________________________________________________________________________________________________。 (4)深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能还有________。 拟杆菌作为分解者，将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到无机环境中，有利于碳循环的顺利进行 耐低温 1.(2022·湖北卷，5)灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是(　　) A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行 B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌 D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌 D 3.(2022·山东卷，14)青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法错误的是(　　) A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖 B.可用深层通气液体发酵技术提高产量 C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中 D.青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌 D 拓展应用变形：“掌心对掌心，手心压手背，十指交叉摩，手握关节搓，拇指围轴转，指尖掌心揉，手腕别放过。”七步洗手法可以清除手部的污物和微生物，是预防新冠病毒感染的有效措施之一、某生物实验小组设计了“比较洗手前后手上细菌分布情况”的探究活动：各小组成员分别将拇指在甲组培养基上轻轻按一下，然后用肥皂将该手洗干净，再将洗净后的拇指在乙组培养基上轻轻按一下。将这两组培养基放入恒温培养箱中，在适宜温度下培养24小时后，统计两组培养基中菌落数目。 (1)该实验中用到的培养基中加入了牛肉膏、蛋白胨、NaCl和水，蛋白胨可以为微生物的生长提供_________________等营养物质，为了使配制的溶液呈固体状态，还需要加入_____。为了防止外来杂菌的入侵，可以将培养基放入盛有适量水的 内灭菌15～30min。 (2)实验中“将拇指在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养操作中的_____，该操作应该在酒精灯火焰附近进行，原因是 __________________________________。 琼脂 高压蒸汽灭菌锅 碳源、氮源和维生素 接种 避免周围环境中的微生物污染培养基 (3)统计甲乙两组培养皿中的菌落，乙组中菌落数比甲少得多，实验结果说明肥皂洗手不能彻底清除手上的微生物。为避免手上微生物在无菌操作中污染培养基，洗过的手还应进行__________________________________等处理（至少写出1种）。 (4)有同学认为乙中也有菌落产生，是因为培养过程受到杂菌污染，请你在本实验的基础上设计一个简单的方案验证他的猜想是否正确。_____。 酒精棉球擦拭双手、戴消毒手套 再加一个不接种的相同培养基（空白培养基），与甲、乙在相同条件下培养， 若该培养基上没有生长菌落，说明培养过程未被杂菌污染，猜想错误； 若该培养基上生长菌落，则猜想正确 1.(2023·江苏南京调研)下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是(　　) B A.步骤①后需将培养基灭菌并调节pH B.步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰附近进行 C.步骤③到④的过程中，接种环共灼烧处理了5次 D.图中步骤①结束后需倒置平板，④结束后不需要 2.(2023·河北衡水金卷)丁草胺是一种有机除草剂，主要用于水稻田杂草的防除，具有潜在的致畸变和致突变性。而在水稻种植过程中农田有一段很长的淹水期，淹水会导致水稻田深层土壤处于厌氧状态。因此研究丁草胺厌氧降解菌对于水稻田土壤中丁草胺的降解具有重要意义。研究人员要对丁草胺厌氧降解菌进行分离、鉴定和扩大培养(如图)，请回答下列问题： (1)你认为研究小组应该在哪里取样？________________________________ (2)配制选择培养基时，研究人员先加入了K2HPO4、KH2PO4、FeSO4、MgCl2、NH4Cl、CaCl2、NaCl、微量元素复合液、维生素复合液等，他们还需要加入一定量的________。对培养基灭菌通常采用______________法。灭菌结束后，应趁热将适量培养基分装于锥形瓶中，充入氮气，塞住胶塞并用铝帽固定，这样操作的目的是____________________。 频繁使用丁草胺的水稻田深层土壤 丁草胺 湿热灭菌　 创造无氧的培养环境 (3)步骤③中，应将平板放入厌氧罐中，置于培养箱中恒温培养，对长出的菌落进行初步鉴定。菌落是初步区分微生物类型的重要特征，这些特征包括_____________________________________________ (至少答出2点)等。 (4)步骤④中，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，其原因是_____________________________________________________________ ____________________________________________________________________ __________________。 菌落的形状、大小、颜色、隆起程度、边缘特征 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，从上一次划线的 末端开始，能使细菌的数目随划线次数的增加逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落 微生物的数量测定 选择培养基的作用 微生物选择培养获取纯培养物的方法-稀释涂布平板法 微 生 物 的 选 择 培 养 和 计 数 选择培养基 微生物的选择培养 科学实例 筛选原则 选择培养基的概念及举例 稀释涂布平板法的操作过程 间接计数法 — 稀释涂布平板法 直接计数 —计数板计数法 土壤中分解尿素的细菌 的分离与计数 培养基的制备 实验设计 （1）土壤取样 （2）样品的稀释 （3）稀释涂布平板法接种 （4）微生物的培养与观察 课堂总结 $$