内容正文:
第1章 发酵工程
第3节 发酵工程及其应用
青霉素是世界上第一个应用于临床的抗生素。早期科学家只能从青霉菌中提取少量青霉素,它的价格贵如金。随着高产菌种的选育、发酵技术的发展等,青霉素步入了产业化生产的道路。如今,1瓶规格160万单位的青霉素注射剂的价格只要1元左右。
那么,在工业上,青霉素究竟是怎样生产的呢?
亚历山大·弗莱明
从社会中来
那么,在工业上,青霉素究竟是怎样生产的呢?
发酵工程
发酵工程的概念:
利用微生物的特定功能,通过现代化工程技术,规模化生产对人类有用的产品。
①微生物:
自然界的微生物
诱变育种的微生物
基因重组的微生物
(常规菌)
(工程菌)
②产 品:
包括利用酵母菌发酵制造的啤酒、果酒,利用乳酸菌发酵制造的酸奶,及利用工程菌生产的人胰岛素。
③实 质:
利用微生物进行产品生产。
某镇特产一种美酒,以下是对该镇环境的描述:四面环山,地势低洼,气候炎热,具有独特的微生物种群,因为与外界的空气对流循环较缓慢,所以微生物种群较稳定。这对你理解发酵工程中菌种选育的重要性有什么启示?
我国幅员辽阔,地理生态环境多样,为各种微生物的生长繁殖提供了条件,这有利于发酵工程选育菌种。优良的菌种不仅具有健壮,不易退化,其发酵产品的产量高、质量稳定等优点,它往往还会赋予发酵产品独特的风味,因此菌种选育环节很大程度上決定了生产发酵产品的成败。
5
01
发酵工程的基本环节
一、发酵工程的基本环节
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
②②
①方法:
自然界直接筛选性状优良的常规菌种;
通过诱变育种或基因工程育种获得。
②实例:
选产酸量高的黑曲霉生产柠檬酸;
使用基因工程改造的啤酒酵母生产啤酒,加速发酵、缩短生产周期。
产柠檬酸量高的黑曲霉
基因工程改造的啤酒酵母
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
②②
扩大培养的原因:
工业发酵罐的体积一般为几十立方米到几百立方米,接入的菌种总体积需要几立方米到几十立方米。
怎样扩大培养?
将培养到增长速率最快时期的菌体分开,再进行培养。
一、发酵工程的基本环节
扩大培养的培养基类型?
液体培养基
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
②②
①配置培养基要遵循的原则:
即营养物质满足微生物的需要,营养物质的浓度及配比恰当,物理、化学条件适宜等。
②配置的培养基应包括微生物生长所需的碳源、氮源、水、无机盐及特殊营养要求。
③配置的培养基要经过反复试验才能大规模应用。
一、发酵工程的基本环节
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
②②
杂菌与菌种之间形成种间竞争关系使产量下降;
杂菌产生的代谢物抑制菌种的生长使产量下降。
实例:
在青霉素生产过程中如果污染了杂菌,杂菌分泌青霉素酶就会将青霉素分解掉。
一、发酵工程的基本环节
目的:
避免因杂菌污染而影响产品的品质和产量
发酵工程中所用的菌种大多数是单一菌种,一旦有杂菌污染,可能导致产量大大下降。因此,培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
一、发酵工程的基本环节
②②
将 的菌种投放到 中。
发酵罐
扩大培养后
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
一、发酵工程的基本环节
发酵工程的中心环节
②②
①了解发酵进程:
要在发酵过程中随时取样,检测培养液中的微生物数量、产物浓度等,以了解发酵进程;
及时添加必需的营养组分,严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条件。
②控制发酵条件:
原
因
环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且会影响微生物代谢物的形成。
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
一、发酵工程的基本环节
发酵工程的中心环节
②②
例如:谷氨酸的发酵生产在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。
谷氨酸棒状杆菌
选育菌种
扩大培养
配置培养基
灭菌
接种
发酵罐内发酵
分离、
提纯产物
获得产品
一、发酵工程的基本环节
②②
发酵产物类型 获得产品的方法
微生物细胞本身
代谢物
过滤、沉淀等方法
适当的提取、分离和纯化措施
分离、提纯产物的方法措施:
电动机
发酵液
冷却夹层
生物传感器
pH计
冷却水排出口
培养物或营养物质的加入口
观察孔
温度传感器和控制装置
阀门
放料管
搅拌叶轮
空气入口
排气管
取样管
冷却水进入口
抽取样本进行检测
调节罐压
控制冷水流速调节罐温
控制溶解氧含量
使微生物与发酵液混合均匀,加快O2的溶解以及散热
一、发酵工程的基本环节
微生物菌种资源丰富,选择发酵工程用的菌种时需要考虑哪些因素?
思考1
②产物方面
生产所需代谢物的产量高
④设备方面
发酵条件容易控制
③菌体方面
菌种不易变异、退化
①原料方面
在低成本的培养基上能迅速生长繁殖
思考∙讨论
发酵工程基本环节分析
16
思考∙讨论
发酵工程基本环节分析
怎么对发酵条件进行调控以满足微生物的生长需要?
思考2
要对温度、pH、溶解氧等发酵条件进行严格控制,使其最适合微生物的生长繁殖,同时及时添加必要的营养组分。
17
思考∙讨论
发酵工程基本环节分析
在产物分离和提纯方面,发酵工程与传统发酵技术相比有哪些改进之处?
思考3
传统发酵技术获得的产物一般不是单一的组分,而是成分复杂的混合物,很多时候不会再对产物进行分离和提纯处理,或者仅采用简单的沉淀、过滤等方法来分离和提纯产物。
发酵工程中使用的分离和提纯产物的方法较多。在产物的初分离阶段,常采用沉淀、萃取、膜分离、吸附和离子交换等方法;在进一步纯化阶段,会采用液相层析法、结晶法等方法。发酵工程产物无论是代谢物还是菌体本身,都需要进行质量检査,合格后才能成为正式产品。
18
思考∙讨论
发酵工程基本环节分析
在进行发酵生产时,排出的气体和废弃培养液等能直接排放到外界环境中吗?为什么?
思考4
不能。因为在进行发酵生产时,微生物及其代谢物中都可能含有危害环境的物质。为了减少或避免污染物的产生和排放,实现清洁生产,应该对排出的气体和废弃培养液进行二次清洁或灭菌处理。
19
02
发酵工程的应用
产物专一
生产条件温和
原料来源丰富且价格低廉
废弃物对环境污染小且容易处理
发酵工程的特点
在食品工业上的应用
在医药工业上的应用
在农牧业上的应用
在其他方面的应用
发酵工程的应用
二、发酵工程的应用
(1)酱油的生产
(2)各种酒类的生产
酱油
大豆
(主要原料)
黑曲霉
(蛋白酶)
小分子肽
和氨基酸
淋洗、调制
谷物或水果
酿酒酵母
各种酒类
(1)在食品工业上的应用
①生产传统的发酵产品
二、发酵工程的应用
思考∙讨论
啤酒的工业化生产流程
发芽
焙烤
碾磨
糖化
蒸煮
发酵
冷却
大麦种子发芽,释放淀粉酶。
加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活。
将干燥的麦芽碾磨成麦芽粉。
淀粉分解,形成糖浆。
产生风味组分,终止酶的进一步作用,并对糖浆灭菌。
酵母菌将糖转化为酒精和CO2
杀死啤酒中的大多数微生物,延长它的保存期。
消毒
终止
过滤
过滤、调节、分装啤酒进行出售。
思考∙讨论
啤酒的工业化生产流程
使啤酒具有清爽的芳香气、苦味和反腐剂
形成啤酒优良的泡沫
有利于麦芽汁的澄清
平衡麦芽汁的自然甜度并激发食欲
啤酒花
发芽
焙烤
碾磨
糖化
蒸煮
发酵
消毒
终止
加啤酒花
冷却
接种
过滤
主发酵
后发酵
酵母菌繁殖,大部分糖分解和代谢物生成。
在低温、密闭的环境下储存一段时间,形成澄清、成熟的啤酒。
思考∙讨论
啤酒的工业化生产流程
1.与传统的手工发酵相比,在啤酒的工厂化生产中,哪些工程手段使啤酒的产量和质量明显提高?
菌种的选育、对原材料的处理、发酵过程的控制,产品的消毒等,都有助于提高啤酒的产量和品质。
2.现在市面上流行一种“精酿”啤酒,它的制作工艺与普通啤酒有所不同,如一般不添加食品添加剂、不进行过滤和消毒处理等。有人认为饮用“精酿”啤酒比饮用“工业”啤酒更健康,你怎么看待这个问题?“精酿”啤酒是小规模酿造产品,发酵时间长、产量低和价格高,却依然有着市场需求,我们如何辩证地看待大规模生产与小规模制作?
应该辩证地看待这一产品。一方面,这类产品具有多样化的特点,能够满足一些人对独特口感的需求,或者满足一些人的时尚追求。另一方面,这类产品是手工作坊式生产的,存在啤酒品质不稳定、价格昂贵的问题。
思考∙讨论
啤酒的工业化生产流程
②生产各种各样的食品添加剂
增加食品的营养,改善食品的口味、色泽和品质,有时还可以延长食品的保存期
淀粉
淀粉酶
黑曲霉
葡萄糖
柠檬酸合成酶
柠檬酸
谷氨酸棒状杆菌
发酵
氧气
谷氨酸
处理
味精
(1)在食品工业上的应用
二、发酵工程的应用
作用:
实例:
添加剂类型 举例
酸度调节剂 L-苹果酸、柠檬酸、乳酸
增味剂 5'-肌苷酸二钠、谷氨酸钠
着色剂 β-胡萝卜素、红曲黄色素
增稠剂 黄原胶、β-环状糊精、结冷胶
防腐剂 乳酸链球菌素、溶菌酶
(1)在食品工业上的应用
③生产酶制剂
概念:
从生物体中提取的具有酶特性的一类化学物质。
来源:
少数由动植物生产
大多数通过发酵工程生产
应用:
用于食品的直接生产、改进生产工艺、简化生产过程、改善产品的品质和口味、延长食品储存期和提高产量等方面。
产品:
α-淀粉酶、β-淀粉酶、果胶酶、氨基酸肽酶和脂肪酶等。
二、发酵工程的应用
请你回忆一下自己做过的生物学实验,想一想曾经使用过哪些酶制剂。
探究温度对酶活性的影响实验中的淀粉酶
探究pH对酶活性的影响实验中的过氧化氢酶
二、发酵工程的应用
(2)在医药工业上的应用
(1)生产抗生素
例如应用产黄青霉生产青霉素,用于治疗脑膜炎、骨髓炎、肺炎等。
(2)生产多种氨基酸
许多微生物都能产生氨基酸,发酵工程可生产许多具有治疗作用的氨基酸。例如精氨酸可以治疗高氨血症(尿素合成障碍导致血氨浓度升高)等疾病。
二、发酵工程的应用
③生产激素:
利用工程菌生产生长激素释放抑制激素,用于肢端肥大症的治疗。
④生产免疫调节剂:
例如,利用工程菌生产乙肝疫苗。
(2)在医药工业上的应用
二、发酵工程的应用
【发酵工程生产药物的方法】
①利用基因工程将动植物基因转移至微生物细胞中,通过发酵技术大量生产所需产品。
②直接对菌种进行改造,通过发酵技术大量生产所需产品。
③利用基因工程,将病原体的某个或某几个抗原基因转移至微生物中,通过发酵技术大量获得疫苗。
(2)在医药工业上的应用
二、发酵工程的应用
(3)在农牧业上的应用
①生产微生物肥料
【原理】
1)利用微生物在代谢过程中产生的有机酸、生活活性物质等来增进土壤肥力,改良土壤结构,促进植株生长。
2)利用微生物代谢物抑制土壤中病原微生物的生长,从而减少病害的发生。
二、发酵工程的应用
微生物或代谢产物 防治病虫害种类
苏云金杆菌 80多种农林害虫
白僵菌 玉米螟、松毛虫
一种放线菌产生的抗生素
(井冈霉素) 水稻枯纹病
利用微生物或其代谢物来繁殖病虫害。
【原理】
(3)在农牧业上的应用
②生产微生物农药
二、发酵工程的应用
(3)在农牧业上的应用
③生产微生物饲料
微生物含有丰富的蛋白质,而且生长繁殖速度快。
单细胞蛋白:
以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料,通过发酵获得了大量的微生物菌体。
用酵母菌生产的单细胞蛋白可以作为食品添加剂;
单细胞蛋白制成微生物饲料,提高家禽增重快,产奶量或产蛋量高。
青贮饲料中添加乳酸菌,可以提高饲料的品质,使饲料保鲜,动物食用后还能提高免疫力。
二、发酵工程的应用
实例:
发酵工程正渗透到几乎所有的工农业领域,在助力解决粮食、环境、
健康和能源等方面的重大问题上,作出了越来越大的贡献。
1.解决资源短缺和环境污染问题
利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质
2.对极端微生物(生活在高温、高压、高盐和低温环境) 的 利用
利用嗜热菌、嗜盐菌生产洗涤剂,嗜低温菌有助于提高热敏性产品的产量。
(4)在其他方面的应用
二、发酵工程的应用
具体应用 成果
食品 传统的发酵产品 酱油(霉菌)、酒类(酵母)
医药
农牧业
食品添加剂
酶制剂
工程菌
改造菌种
柠檬酸(黑曲霉)、谷氨酸(谷氨酸棒状杆菌)
淀粉酶、果胶酶、脂肪酶和氨基肽酶等
生长激素释放抑制激素
青霉素
疫苗
乙型肝炎疫苗
根瘤菌肥、固氮菌肥(根瘤菌和固氮菌)
以菌治虫——生物防治:无污染、维持生态平衡
淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液通过发酵获得微生物菌体(单细胞蛋白)
微生物农药
微生物肥料
微生物饲料
二、发酵工程的应用
课堂小结
练一练 P28【练习与应用】
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