微生物计数方法 课件 2024—2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

微生物计数方法 教学目标： 1、了解高中阶段微生物数量测定的两种常用方法的原理及其应用。 2、掌握使用血球计数板进行微生物显微镜直接计数和平板菌落计数的方法。 3、了解微生物其他计数方法。 1 一、显微直接计数法： 利用血球计数板在显微镜下计数是常用的一种微生物计数法 注意： 1、操作时要先盖上盖玻片再滴酵母菌液，让菌液自行渗入。 2、需放置一会儿，让酵母菌沉入底部再观察。 3、计数规则：计上不计下，计左不计右。 4、计算出的数目一般比实际活菌数大（死菌数也统计在内）。 二、平板菌落计数法 最常用的活菌计数法。 把适度稀释的菌液涂布平板，经保温培养，一个活菌就可以形成一个菌落。以平板上的菌落数乘以稀释倍数就可以算出原菌液中的活菌数。 公式 ：C ÷ V×M C代表在一定稀释度下在平板上生长的菌落的平均数，V代表用于涂布平板的稀释液的体积（ML）。M代表稀释倍数。 注意： 1、涂布平板时每个稀释倍数至少涂面3个平板。 2、每个稀释倍数下选菌落数为30—300的平板求其平均数。 3、计算出的数目一般比实际活菌数小，因为两个或两个以上的活菌相隔太近形成一个菌落。 三、其他计数方法 比浊法： 在一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与混浊度与正比，即与吸光值成正比，菌数越多，吸光值越大。因此，借助于分光光度计，在一定波长下测定菌悬液的光密度，就可反应出菌液的浓度。 干重法： 将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来，然后烘干至恒重（干燥温度可采用105℃、100℃或80℃）、称重。一般干重为湿重的10%—20%。该法适合菌浓度较高的样品 滤膜法： 滤膜是一种微孔性薄膜。将水样注入已灭菌的放有滤膜的滤器中，经过抽滤，细菌即被截留在膜上，然后将滤膜贴于M-FC培养基上，44.5 ℃温度下进行培养，计数滤膜上生长的此特性的菌落数，计算出每升水样中含有的细菌菌群数。 $$