1.2.1 微生物的基本培养技术（分层作业）-【上好课】高二生物同步高效课堂（人教版2019选择性必修3）

1.2.1 微生物的基本培养技术 【三层刷题，基础+提升+真题，步步高升】 班级：___________ 姓名：___________ 用时：___________（建议用时：35min） 1．下表是某培养基配方，下列说法错误的是（　　） 成分 蔗糖 NaNO3 K2HPO4 KCl Fe2SO4 琼脂 含量（g/L） 30 3 1 0.5 0.01 15 A．蔗糖可为该微生物提供碳源 B．高浓度的NaNO3可抑制细菌的生长 C．该培养基可用于微生物的分离、鉴定和计数 D．K2HPO4既可以提供无机盐也可以调pH 【答案】C 【分析】菌落：是指由单个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞集团。各种微生物在一定条件下形成的菌落特征，如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等，具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。 【详解】A、蔗糖中含有碳元素，且为有机物，因而可为该微生物提供碳源，A正确； B、培养基中NaNO3的浓度高，为高渗培养基，会导致细菌细胞脱水，进而抑制细菌的生长，B正确； C、该培养基中加入了琼脂，为固体培养基，可用于微生物的分离和计数，但不可用于鉴定，因为鉴定培养基中需要加入特定的试剂，C错误； D、K2HPO4是弱酸强碱盐，可以提供无机盐也可以调pH，D正确。 故选C。 2．菜粕是畜禽养殖中的一种主要饲料资源，具有营养价值高、有益微量元素含量丰富等优点，但是菜粕中粗纤维含量过高，会影响动物身体健康。技术人员利用传统发酵技术生产菜粕，改良其品质，实验结果如下表所示。下列叙述正确的是（    ） 实验 发酵指标 菜粕中的纤维素含量（%） 1 添加10mg纤维素酶发酵 11.09±0.44 2 添加20mg纤维素酶发酵 9.90±0.36 3 添加40mg纤维素酶发酵 9.92±0.56 4 添加芬氏纤维微菌发酵 7.71±0.72 A．菜粕能够为芬氏纤维微菌生长和增殖提供无机碳源 B．添加纤维素酶或芬氏纤维微菌都能有效降低粗纤维含量 C．实验1、2、3组说明在发酵时可添加20—40mg纤维素酶 D．实验4通过优化菌液浓度和发酵温度等可确定最佳发酵条件 【答案】B 【分析】分析表中信息可知：提高添加的纤维素酶的量可以降低菜粕中的纤维素含量；添加芬氏纤维微菌，也能降低菜粕中的纤维素含量，说明芬氏纤维微菌能产生纤维素酶，进而利用菜粕中的有机碳源（纤维素）。 【详解】A、表中信息显示：添加芬氏纤维微菌后，菜粕中的纤维素含量最低，说明菜粕能够为芬氏纤维微菌生长和增殖提供有机碳源（纤维素），A错误； B、实验2、3、4组菜粕中的纤维素含量均低于实验1组，说明添加纤维素酶或芬氏纤维微菌都能有效降低粗纤维含量，B正确； C、与实验1组相比，实验2、3组菜粕中的纤维素含量均有所降低，但实验2、3组菜粕中的纤维素含量几乎无差异，说明在实验条件下，发酵时添加纤维素酶的适宜量在20—40mg 之间，C错误； D、在实验4组的基础上，可以通过探究芬氏纤维微菌的最佳菌液浓度和最适发酵温度等发酵条件来确定最佳发酵条件组合，D错误。 故选B。 3．下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是（    ） A．用完全营养马铃薯琼脂培养基筛选酵母菌 B．用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌 C．含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的细菌 D．利用高温条件筛选水生栖热菌 【答案】A 【分析】筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。 【详解】A、全营养马铃薯琼脂培养基常用于大肠杆菌的培养，该培养基对酵母菌无选择作用，A错误； B、用高浓度NaCl的培养基可筛选耐盐突变菌株，其它不耐盐的菌株在此培养基上不能生长，B正确； C、尿素分解菌可以将尿素分解成氨，使培养基pH升，导致酚红指示剂呈红色，因此用含酚红的尿素培养基筛选出能分解尿素的菌株，C正确； D、利用高温培养条件可筛选出耐热的水生栖热菌，其它不耐热的菌体无法在此环境下生存，D正确。 故选A。 4．下列关于微生物相关操作，正确的是（　　） A．为了有效防止杂菌的污染，可将土壤稀释液彻底灭菌后再接种到培养基上 B．培养基要维持正常的pH和渗透压，调pH一般应在灭菌后 C．灼烧、高压蒸汽灭菌、干热灭菌都属于无菌技术，紫外线照射不属于 D．根据培养基的物理状态可将其分为液体培养基和固体培养基 【答案】D 【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。 【详解】A、灭菌会杀死稀释液中所有微生物，得不到所需菌株，A错误； B、调pH一般应在灭菌前，B错误； C、灭菌和消毒都属于无菌技术，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，紫外线照射属于消毒，C错误； D、根据培养基的物理状态可将其分为液体培养基和固体培养基，D正确。 故选D。 5．某实验室期望用夹层培养法筛选到符合预期的酵母菌，具体操作如下：先在培养皿底部倒一薄层已灭菌的基本培养基；待冷凝后，再添加一层内含酵母菌液（经诱变剂处理）的基本培养基；冷凝后再加一薄层已灭菌的基本培养基。培养一段时间后，对出现的菌落做好标记；然后再加一层完全培养基，培养一段时间后会长出形态不一的菌落。已知微生物可透过薄层培养基形成菌落，且所有培养基均含有抗生素。下列说法错误的是（    ） A．该实验室预期想要得到是具有营养缺陷的酵母菌 B．培养基中添加抗生素主要是为了抑制细菌的生长，对酵母菌影响较小 C．最终应选取培养基上较大的菌落作为目标菌种进行后续实验 D．在用诱变剂处理从外界富集而来的酵母菌前需要对酵母菌进行纯培养 【答案】C 【分析】选择培养是利用培养基或培养条件针对性地促进或抑制某类微生物的生长，从而使目标微生物数目增加的一种培养方法。 【详解】A、 在夹层培养法中，中间层含诱变处理后的酵母菌液，基本培养基不含特定营养成分，若有菌落能在基本培养基上生长，后在完全培养基上长出形态不同的菌落，说明这些菌落可能是具有营养缺陷的酵母菌，A正确； B、 酵母菌是真菌，细菌是原核生物，抗生素对细菌抑制作用强，对酵母菌影响较小，在培养基中添加抗生素可抑制细菌生长，B正确； C、 营养缺陷型酵母菌在基本培养基上难以生长，在完全培养基上才可以繁殖形成菌落，最终应选取培养基上较小的菌落作为目标菌种进行后续实验，C错误； D、 在用诱变剂处理酵母菌前需要对酵母菌进行纯培养，这样才能保证处理后的结果是针对单一酵母菌种群的，D正确。 故选C。 6．研究者欲筛选出在高盐条件下仍具有较高脱氮能力的反硝化微生物，该异养微生物可将硝酸盐和亚硝酸盐还原成氮气。于是按照取样→选择培养→筛选菌种→鉴定菌种→富集培养这几个环节获得了大量的目的菌种。下列叙述错误的是（    ） A．选择培养基应为固体培养基，可用Na2CO3作为碳源，NaNO3作为氮源 B．挑取能够在选择培养基上生长的菌落，经多次划线分离后，得到纯培养物 C．为了鉴定所得的菌种是否为反硝化微生物，可以测定微生物的氮气产生率 D．欲获得高效耐盐的目的菌，可将纯化后的菌株接入NaCl浓度较高的液体培养基中进一步培养 【答案】A 【分析】1、实验室中筛选微生物的原理是：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 2、微生物培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。培养基按物理性质分为固体、半固体、液体培养基；按用途分为选择培养基和鉴别培养基。 【详解】A、反硝化微生物是异养微生物，选择培养基中的碳源应为有机碳源，A错误； B、使用平板划线法接种可得到单个菌落，也就是纯培养物，因此挑取能够在选择培养基上生长的菌落，经多次划线分离后，得到纯培养物，B正确； C、为了鉴定所得的菌种是否为反硝化微生物，可以测定微生物的氮气产生率，C正确； D、欲获得高效耐盐的目的菌株，可将纯化后的各菌株接入NaCl浓度比较高的液体富集培养基中进一步培养，D正确。 故选A。 7．人们在研究、利用微生物时，需获取纯种微生物并计数或保存。下列叙述正确的是（    ） A．培养基倒入培养皿后，需盖上皿盖并立即将培养皿倒置 B．对于牛奶等不耐高温的液体，可用63～65℃条件消毒30min C．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际值偏高 D．干热灭菌后，需要待压力表指针降至“0”后打开排气阀并开盖取物 【答案】B 【分析】1、稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。 【详解】A、将适量培养基倒入培养皿后，待冷凝后再将培养皿倒置，A错误； B、对于牛奶等不耐高温的液体，采用巴氏消毒法消毒，可用63～65℃条件消毒30min，该方法在消毒的同时保证营养成分不被破坏，B正确； C、用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于两个或多个细菌常形成一个菌落，因此结果往往比实际值低，C错误； D、高压蒸汽灭菌后，待压力表指针降至“0”后打开排气阀，开盖取物，D错误。 故选B。 8．检测空气微生物常采用沉降平板法，具体做法是将牛肉膏蛋白胨培养基的平板置于待测地点，打开皿盖暴露于空气中一段时间后，盖好皿盖置于培养箱中培养、观察并统计菌落数。下列叙述正确的是（    ） A．牛肉膏蛋白胨培养基在使用前应进行干热灭菌 B．采样平板和未采样的平板需在相同条件下培养 C．平板中每一个菌落数都是由一个活菌繁殖而来 D．该方法可以准确统计空气中微生物种类与数量 【答案】B 【分析】消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 【详解】A、培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌而非干热灭菌，A错误； B、采样平板和未采样的平板需在相同条件下培养，遵循实验设计的无关变量一致原则，B正确； C、当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故单菌落可能是由一个或多个细菌繁殖而来的，C错误； D、该方法只能估计空气中微生物种类数量，但不能准确统计，D错误。 故选B。 9．一些真菌产生的漆酶可分解油漆中的许多有机污染物，环境治理工作中常需要分离特定的真菌进行培养，已知漆酶可以氧化愈创木酚产生红棕色物质，根据真菌生长过程中培养基的颜色变化，可以挑选出具有潜在漆酶活性的土壤真菌。下列叙述错误的是（    ） A．培养中还可根据菌落的形状、大小、颜色等辅助鉴别 B．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法 C．在酒精灯火焰附近倒平板后，立即将培养皿进行倒置 D．倒置平板培养可避免培养基表面的水分过快地蒸发 【答案】C 【分析】菌落是指分散的微生物在适宜的固体培养基表面和内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。菌落具有种的特异性，据此可对微生物的种类做出判断。 【详解】A、菌落是指分散的微生物在适宜的固体培养基表面和内部形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，由于不同微生物形成的菌落形态有差异，因而可根据菌落的形状、大小、颜色等特征进行鉴别，A正确； B、对培养基进行灭菌时，通常采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，B正确； C、在酒精灯火焰附近倒平板后，需要待培养皿中的培养基冷却凝固后再进行倒置，C错误； D、平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，D正确。 故选C。 10．氟氯氰菊酯（分子式：C22H18Cl2FNO3）是应用广泛的菊酯类杀虫剂。科研人员筛选获取了能降解氟氯氰菊酯的降解菌，过程如图。下列叙述错误的是（    ） A．富集培养基中的酵母膏可以为降解菌生长提供丰富的有机物 B．选择培养基应以氟氯氰菊酯为唯一碳源 C．③所采用的接种方法只能用于分离微生物而不能用于菌落计数 D．获得的降解菌多次传代后其降解功能可能下降 【答案】C 【分析】分离菌株的思路：（1）自然界中目的菌株的筛选：①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。（2）实验室中目的菌株的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 【详解】A、富集培养基中的酵母膏可以为降解菌提供氨基酸、核苷酸等多种小分子有机物，获得大量含目的菌及其他杂菌的培养液，A正确； B、通过以氟氯氰菊酯为唯一碳源的选择培养基的筛选，获得能降解氟氯氰菊酯的降解菌，B正确； C、③的接种方法显示菌落分布均匀，为稀释涂布平板法，稀释涂布平板法既可用于分离微生物，也可用于微生物的计数，C错误； D、降解菌多次传代过程中可能会发生基因突变，其降解功能可能下降，D正确。 故选C。 11．枯草杆菌是一种无害微生物，在恶劣环境中能形成休眠体——芽孢，环境改善时芽孢萌发为菌体。研究者对枯草杆菌进行处理（如图），筛选出耐热性强的芽孢。在热塑性聚氨酯中掺入这种芽孢，不仅能提高热塑性聚氨酯的韧性，还能加快废弃热塑性聚氨酯的降解。相关叙述错误的是（    ） A．热处理的目的是促使菌体形成芽孢 B．在热处理之前菌群中已产生耐热性变异 C．筛出的芽孢能耐受热塑性聚氨酯制造中的高温 D．处理废弃热塑性聚氨酯时应为芽孢萌发提供适宜条件 【答案】A 【分析】影响微生物耐热性的因素： 1、菌种与菌株：不同菌种和菌株的耐热性存在差异，例如，嗜热菌的耐热性最强，产孢子菌的耐热性高于不产孢子菌，老龄菌的耐热性高于幼龄菌，球菌的耐热性高于无芽孢菌和霉菌，而霉菌的耐热性又强于细菌和酵母菌； 2、热处理前细菌芽孢的培育和经历：原始活菌数越多，全部死亡所需要的时间越长，耐热性越强，水分活度或加热环境的相对湿度对微生物的耐热性有显著影响，水分活度越低，微生物细胞的耐热性越强，另外，脂肪的存在可以增强细菌的耐热性。 【详解】A、根据题干的目的是筛选出耐热性强的芽孢，因此热处理是为了筛选出耐热性强的芽孢，而不是促使菌体形成芽孢，A错误； B、在进行热处理之前，枯草杆菌菌群中就已经存在一些变异的个体具有耐热性，这些个体在热处理的过程中能够生存下来并形成芽孢，B正确； C、因为要在热塑性聚氨酯中掺入这种芽孢，而在制造热塑性聚氨酯时会有高温环境，所以筛出的芽孢必须能耐受热塑性聚氨酯制造中的高温，C正确； D、在热塑性聚氨酯中掺入芽孢是为了利用芽孢提高热塑性聚氨酯的韧性并加快其降解，应为芽孢萌发提供适宜条件，D正确。 故选A。 12．某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖，而其突变株则不能。将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-（仅图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的I、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后发现I区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述错误的是（　　） A．该培养基中含有少量色氨酸，酸碱度为中性或弱碱性 B．3种突变菌株均能将积累的中间产物分泌到细胞外 C．TrpC-菌株继续生长增殖的一端为靠近I区域的一端 D．TrpE-菌株不再生长是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶 【答案】C 【分析】基因通过中心法则控制性状，包括两种方式： （1）通过控制酶的合成控制代谢过程，间接控制生物体的性状； （2）可通过控制蛋白质的结构直接控制生物的性状。 【详解】A、依据题干信息“培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，推断培养基中存在少量色氨酸，培养细菌一般将pH调至中性或弱碱性，A正确； B、根据题干信息“继续培养后发现I区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖”，说明培养基中3种突变菌株均能将积累的中间产物分泌到细胞外，使其他突变体得以生存，B正确； C、依据题图及题干信息“突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，“继续培养一段时间后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的细菌继续生长增殖”；分析得知：突变株TrpB-，将分支酸转化为邻氨基苯甲酸受阻，但可将邻氨基苯甲酸转化为吲哚，并进一步转化为色氨酸；突变株TrpC-对应Ⅱ区域，将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，也可以将吲哚转化为色氨酸；突变株TrpE-对应Ⅲ区域，将吲哚转化为色氨酸受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，并进一步转化为吲哚。Ⅰ区域的TrpB-划线上端与Ⅱ区域临近，可利用Ⅱ区域TrpC-合成的邻氨基苯甲酸进一步合成吲哚及色氨酸生长增殖；Ⅰ区域的TrpB-划线下端与Ⅲ区域临近，可利用Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖；Ⅱ区域的TrpC-划线上端自身不能合成吲哚，临近的Ⅰ区域TrpB-可利用Ⅱ区域合成的邻氨基苯甲酸合成吲哚并进一步合成色氨酸，无多余的吲哚反馈给Ⅱ区域上端，所以Ⅱ区域的TrpC-划线上端不生长；Ⅱ区域的TrpC-划线下端，可利用临近Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖；Ⅲ区域TrpE-由于不能将吲哚转化为色氨酸，所以Ⅲ区域两端不生长增殖，所以Ⅱ区域的TrpC-划线下端靠近Ⅲ区域，可利用临近Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖，而不是靠近Ⅰ区域的一端，C错误； D、根据C项分析，TrpE-菌株不再生长是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶，导致不能合成吲哚，因此缺乏色氨酸，D正确。 故选C。 13．某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种到1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上操作。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．大肠杆菌抗链霉素的突变是发生在与链霉素接触之后 B．在操作规范的情况下，5中观察到的菌落数可能大于初始接种到该培养基上的活菌数 C．4号和8号培养液中，大肠杆菌抗链霉素菌株的比例逐渐增大 D．该实验缺乏对照实验，无法确定抗链霉素性状属于可遗传变异 【答案】C 【分析】影印培养法实质上是使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法。通过影印培养法，可以从在非选择性条件下生长的细菌群体中，分离出各种类型的突变种。 【详解】A、大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的，该突变发生在与链霉素接触之前，链霉素是对其起选择作用，A错误； B、采用稀释涂布平板法将菌种接种在5号培养基上，由于两个或多个细菌可能会形成一个菌落，在操作规范的情况下，5中观察到的菌落数可能小于初始接种到该培养基上的活菌数，B错误； C、3号与2号、7号与6号培养基中的菌落数的比值，是抗性菌落占全部菌落的比例，观察实验结果可知，4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例在逐渐增大，C正确； D、本实验有对照实验，无链霉素的培养基为对照，可以确定抗链霉素性状属于可遗传的变异，D错误。 故选C。 14．某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。下列选项不正确的是（　　） A．菌T可能产生分解纤维素的酶，能够高效催化纤维素分解 B．淋洗液中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是合成一些氨基酸、核苷酸等含氮物质 C．可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，在使用该方法时需要注意必须将冷空气充分排除再开始加压 D．将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。发酵过程中，要始终保持密封状态 【答案】D 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 【详解】A、菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，因此在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，A正确； B、培养基的主要成分：水、碳源、氮源、无机盐，其中氮源主要为合成微生物的细胞结构提供原料（微生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂），B正确； C、高压蒸汽灭菌法的注意要把锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除后，将锅密闭，如果高压锅内的空气未排除或未完全排除，则蒸汽不能达到饱和，蒸汽的温度未达到要求的高度，结果导致灭菌的失败，C正确； D、果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，将酵母菌接种到灭菌后的培养基中进行酒精发酵，酒精发酵需要在无氧的条件下进行，此时拧紧瓶盖的主要目的是制造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，在发酵过程中密闭，所以需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳，D错误。 故选D。 1．（2024·海南·高考真题）某小组为检测1株粗糙脉孢霉突变株的氨基酸缺陷类型，在相同培养温度和时间的条件下进行实验，结果见表。下列有关叙述错误的是（    ） 组别 培养条件 实验结果 ① 基础培养基 无法生长 ② 基础培养基+甲、乙、丙3种氨基酸 正常生长 ③ 基础培养基+甲、乙2种氨基酸 无法生长 ④ 基础培养基+甲、丙2种氨基酸 正常生长 ⑤ 基础培养基+乙、丙2种氨基酸 正常生长 A．组别①是②③④⑤的对照组 B．培养温度和时间属于无关变量 C．①②结果表明，甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸 D．①~⑤结果表明，该突变株为氨基酸甲缺陷型 【答案】D 【分析】实验的自变量为培养条件（基础培养基中是否添加氨基酸及添加氨基酸的种类），因变量为粗糙脉孢霉突变株的生长状况，其他的培养条件为无关变量，应该保持相同且适宜。 【详解】A、由表可知：除了组别①之外，其他组别的基础培养基中都添加了氨基酸，因此组别①是②③④⑤的对照组，A正确； B、由题意表中信息可知：实验的自变量为培养条件，各组别的培养温度和时间均相同，说明培养温度和时间均属于无关变量，B正确； C、由①②结果可知：粗糙脉孢霉突变株在基础培养基中无法生长，但在添加了甲、乙、丙3种氨基酸的基础培养基中能正常生长，这表明甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸，C正确； D、与组别①相比，在基础培养基中，若添加的氨基酸中含有丙种氨基酸，则粗糙脉孢霉突变株都能正常生长，但在只添加甲、乙2种氨基酸的基础培养基中无法生长，说明该突变株为氨基酸丙缺陷型，D错误。 故选D。 2．（2024·山东·高考真题）酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（　　） A．X→Y→Z B．Z→Y→X C．Y→X→Z D．Z→X→Y 【答案】A 【分析】由图可知，接种时，相当于在培养基表面划了一个三角形的三条边。左边那条边线是用trpY突变型菌液划线接种的，右边那个边是用trpX突变型菌液接种的，最下面那个边是用trpZ突变型菌液划线接种的。最终结果是，trpY那条接种线左下方出现了又黑又粗的明显的菌落，trpX那条接种线两头出现了明显的菌落，而trpZ那条接种线，没有长出明显的菌落，。 【详解】ABCD、添加少量色氨酸，突变体菌株可以生长，色氨酸合成途径的中间产物积累后可排出胞外，进入培养基后，通过扩散，从而给其他突变型提供代谢原料，帮助其长出明显的菌落。trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体，据图可知，trpX不能为trpY和trpZ提供原料，trpY不能为trpZ提供原料，trpZ可以为trpX、trpY的生长提供原料，推测3种酶在该合成途径中的作用顺序为X→Y→Z。 故选A。 3．（2024·江苏·高考真题）酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（    ） A．酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B．酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C．可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D．该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 【答案】C 【分析】 微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。 （2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 【详解】A、酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌和真菌，A错误； B、将含有酵母菌的培养基放置在28℃恒温培养箱中进行培养，B错误； C、稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，由此可知，可用稀释涂布平板法对酵母菌计数，C正确； D、酵母菌是真核细胞，具有高尔基体和内质网，可以对合成的蛋白质进行加工和修饰，D错误。 故选C。 4．（2024·江苏·高考真题）某同学进行下列实验时，相关操作合理的是（    ） A．从试管取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌 B．观察黑藻的细胞质流动时，在高倍镜下先调粗准焦螺旋，再调细准焦螺旋 C．探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理 D．鉴定脂肪时，子叶临时切片先用体积分数为50%的乙醇浸泡，再用苏丹Ⅲ染液染色 【答案】A 【分析】在进行实验操作时，需要遵循正确的操作规范和原则，以保证实验的准确性和安全性。 【详解】 A 、从试管取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰，这样可以避免菌种被污染，A正确； B、在高倍镜下观察时，只能调节细准焦螺旋，B错误； C、探究温度对酶活性的影响时，应先将酶和底物分别在不同温度下处理，然后再混合，若先将酶与底物混合，再在不同温度下水浴处理，会在达到设定温度前就发生反应，影响实验结果，C错误； D、鉴定脂肪时，子叶临时切片先用苏丹Ⅲ染液染色，然后用体积分数为50%的乙醇洗去浮色，D错误。 故选A。 5．（2023·重庆·高考真题）垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（    ）    A．压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品 B．添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源 C．X中需要添加合适的菌种，才能产生沼气 D．为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动 【答案】D 【分析】生态系统的功能包括能量流动、物质循环和信息传递，三者缺一不可；物质循环是生态系统的基础，能量流动是生态系统的动力，信息传递则决定着能量流动和物质循环的方向和状态；信息传递是双向的，能量流动是单向的，物质循环具有全球性。 【详解】A、压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品，有利于实现物质的循环再生和能量的多级利用，A正确； B、添加的木屑有利于堆肥体通气，木屑也可作为某些微生物的碳源，B正确； C、X中需要添加合适的菌种，通过分解有机物才能产生沼气，C正确； D、为保证堆肥体中微生物的活性，可以对堆肥体进行翻动，D错误。 故选D。 二、非选择题 6．（2023·北京·高考真题）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。 (1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供 和维生素等。 (2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明 。 (3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样 后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现 。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。 (4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱） 。 【答案】(1)氮源、碳源 (2)A菌能在培养平板中生长繁殖 (3) 稀释 溶菌圈 (4)假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂 【分析】微生物的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等。微生物的培养基按其特殊用途可分为选择性培养基和鉴别培养基，培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。 【详解】（1）蛋白胨主要为细菌提供氮源、碳源和维生素等。 （2）将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊，表明A菌能在培养平板中生长繁殖。 （3）将含菌量较高的湖泊水样稀释后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现溶菌圈。　 （4）根据实验实验材料和设备，圆形滤纸小片可用于吸收某种物质，离心机可用于分离菌体和细菌分泌物，为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。 7．（2023·全国·高考真题）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。    回答下列问题。 (1)在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是 。 (2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是 （答出1点即可）。通常，可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有 （答出2点即可）。 (3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是 。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是 。发酵液中的乙醇可用 溶液检测。 (4)本实验收集的淋洗液中的 可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是 。 【答案】(1)菌T能够分泌纤维素酶 (2) 为合成微生物细胞结构提供原料（微生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂） ①把锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除；②为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15~30 min；③无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央，有利于蒸汽流通；④灭菌完成后，应使锅内蒸气压力缓慢降低，排气时间不少于10一12分钟。 (3) 制造无氧环境 排出二氧化碳 酸性的重铬酸钾溶液 (4) 葡萄糖 节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 【详解】（1）菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，因此在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解。 （2）培养基的主要成分：水、碳源、氮源、无机盐，其中氮源主要为合成微生物的细胞结构提供原料（微生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂）。 高压蒸汽灭菌法的注意的事项有①把锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除后，将锅密闭，如果高压锅内的空气未排除或未完全排除，则蒸汽不能达到饱和，蒸汽的温度未达到要求的高度，结果导致灭菌的失败；②为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15~30 min；③无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央，有利于蒸汽流通；④灭菌完成后，应使锅内蒸气压力缓慢降低，排气时间不少于10一12分钟，否则锅内蒸气压力突然降低，液体突然沸腾，冲走瓶盖，使液体喷出或使容器破裂。 （3）果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，将酵母菌接种到灭菌后的培养基中进行酒精发酵，酒精发酵需要在无氧的条件下进行，此时拧紧瓶盖的主要目的是制造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，在发酵过程中密闭，所以需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳，酒精可用酸性重铬酸钾溶液来检测，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 （4）与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，利用纤维素为原料生产乙醇具有节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广等优点。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！2 18 / 18 学科网（北京）股份有限公司 $$ 1.2.1 微生物的基本培养技术 【三层刷题，基础+提升+真题，步步高升】 班级：___________ 姓名：___________ 用时：___________（建议用时：35min） 1．下表是某培养基配方，下列说法错误的是（　　） 成分 蔗糖 NaNO3 K2HPO4 KCl Fe2SO4 琼脂 含量（g/L） 30 3 1 0.5 0.01 15 A．蔗糖可为该微生物提供碳源 B．高浓度的NaNO3可抑制细菌的生长 C．该培养基可用于微生物的分离、鉴定和计数 D．K2HPO4既可以提供无机盐也可以调pH 2．菜粕是畜禽养殖中的一种主要饲料资源，具有营养价值高、有益微量元素含量丰富等优点，但是菜粕中粗纤维含量过高，会影响动物身体健康。技术人员利用传统发酵技术生产菜粕，改良其品质，实验结果如下表所示。下列叙述正确的是（    ） 实验 发酵指标 菜粕中的纤维素含量（%） 1 添加10mg纤维素酶发酵 11.09±0.44 2 添加20mg纤维素酶发酵 9.90±0.36 3 添加40mg纤维素酶发酵 9.92±0.56 4 添加芬氏纤维微菌发酵 7.71±0.72 A．菜粕能够为芬氏纤维微菌生长和增殖提供无机碳源 B．添加纤维素酶或芬氏纤维微菌都能有效降低粗纤维含量 C．实验1、2、3组说明在发酵时可添加20—40mg纤维素酶 D．实验4通过优化菌液浓度和发酵温度等可确定最佳发酵条件 3．下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是（    ） A．用完全营养马铃薯琼脂培养基筛选酵母菌 B．用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌 C．含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的细菌 D．利用高温条件筛选水生栖热菌 4．下列关于微生物相关操作，正确的是（　　） A．为了有效防止杂菌的污染，可将土壤稀释液彻底灭菌后再接种到培养基上 B．培养基要维持正常的pH和渗透压，调pH一般应在灭菌后 C．灼烧、高压蒸汽灭菌、干热灭菌都属于无菌技术，紫外线照射不属于 D．根据培养基的物理状态可将其分为液体培养基和固体培养基 5．某实验室期望用夹层培养法筛选到符合预期的酵母菌，具体操作如下：先在培养皿底部倒一薄层已灭菌的基本培养基；待冷凝后，再添加一层内含酵母菌液（经诱变剂处理）的基本培养基；冷凝后再加一薄层已灭菌的基本培养基。培养一段时间后，对出现的菌落做好标记；然后再加一层完全培养基，培养一段时间后会长出形态不一的菌落。已知微生物可透过薄层培养基形成菌落，且所有培养基均含有抗生素。下列说法错误的是（    ） A．该实验室预期想要得到是具有营养缺陷的酵母菌 B．培养基中添加抗生素主要是为了抑制细菌的生长，对酵母菌影响较小 C．最终应选取培养基上较大的菌落作为目标菌种进行后续实验 D．在用诱变剂处理从外界富集而来的酵母菌前需要对酵母菌进行纯培养 6．研究者欲筛选出在高盐条件下仍具有较高脱氮能力的反硝化微生物，该异养微生物可将硝酸盐和亚硝酸盐还原成氮气。于是按照取样→选择培养→筛选菌种→鉴定菌种→富集培养这几个环节获得了大量的目的菌种。下列叙述错误的是（    ） A．选择培养基应为固体培养基，可用Na2CO3作为碳源，NaNO3作为氮源 B．挑取能够在选择培养基上生长的菌落，经多次划线分离后，得到纯培养物 C．为了鉴定所得的菌种是否为反硝化微生物，可以测定微生物的氮气产生率 D．欲获得高效耐盐的目的菌，可将纯化后的菌株接入NaCl浓度较高的液体培养基中进一步培养 7．人们在研究、利用微生物时，需获取纯种微生物并计数或保存。下列叙述正确的是（    ） A．培养基倒入培养皿后，需盖上皿盖并立即将培养皿倒置 B．对于牛奶等不耐高温的液体，可用63～65℃条件消毒30min C．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际值偏高 D．干热灭菌后，需要待压力表指针降至“0”后打开排气阀并开盖取物 8．检测空气微生物常采用沉降平板法，具体做法是将牛肉膏蛋白胨培养基的平板置于待测地点，打开皿盖暴露于空气中一段时间后，盖好皿盖置于培养箱中培养、观察并统计菌落数。下列叙述正确的是（    ） A．牛肉膏蛋白胨培养基在使用前应进行干热灭菌 B．采样平板和未采样的平板需在相同条件下培养 C．平板中每一个菌落数都是由一个活菌繁殖而来 D．该方法可以准确统计空气中微生物种类与数量 9．一些真菌产生的漆酶可分解油漆中的许多有机污染物，环境治理工作中常需要分离特定的真菌进行培养，已知漆酶可以氧化愈创木酚产生红棕色物质，根据真菌生长过程中培养基的颜色变化，可以挑选出具有潜在漆酶活性的土壤真菌。下列叙述错误的是（    ） A．培养中还可根据菌落的形状、大小、颜色等辅助鉴别 B．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法 C．在酒精灯火焰附近倒平板后，立即将培养皿进行倒置 D．倒置平板培养可避免培养基表面的水分过快地蒸发 10．氟氯氰菊酯（分子式：C22H18Cl2FNO3）是应用广泛的菊酯类杀虫剂。科研人员筛选获取了能降解氟氯氰菊酯的降解菌，过程如图。下列叙述错误的是（    ） A．富集培养基中的酵母膏可以为降解菌生长提供丰富的有机物 B．选择培养基应以氟氯氰菊酯为唯一碳源 C．③所采用的接种方法只能用于分离微生物而不能用于菌落计数 D．获得的降解菌多次传代后其降解功能可能下降 11．枯草杆菌是一种无害微生物，在恶劣环境中能形成休眠体——芽孢，环境改善时芽孢萌发为菌体。研究者对枯草杆菌进行处理（如图），筛选出耐热性强的芽孢。在热塑性聚氨酯中掺入这种芽孢，不仅能提高热塑性聚氨酯的韧性，还能加快废弃热塑性聚氨酯的降解。相关叙述错误的是（    ） A．热处理的目的是促使菌体形成芽孢 B．在热处理之前菌群中已产生耐热性变异 C．筛出的芽孢能耐受热塑性聚氨酯制造中的高温 D．处理废弃热塑性聚氨酯时应为芽孢萌发提供适宜条件 12．某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖，而其突变株则不能。将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-（仅图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的I、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后发现I区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述错误的是（　　） A．该培养基中含有少量色氨酸，酸碱度为中性或弱碱性 B．3种突变菌株均能将积累的中间产物分泌到细胞外 C．TrpC-菌株继续生长增殖的一端为靠近I区域的一端 D．TrpE-菌株不再生长是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶 13．某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种到1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上操作。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．大肠杆菌抗链霉素的突变是发生在与链霉素接触之后 B．在操作规范的情况下，5中观察到的菌落数可能大于初始接种到该培养基上的活菌数 C．4号和8号培养液中，大肠杆菌抗链霉素菌株的比例逐渐增大 D．该实验缺乏对照实验，无法确定抗链霉素性状属于可遗传变异 14．某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。下列选项不正确的是（　　） A．菌T可能产生分解纤维素的酶，能够高效催化纤维素分解 B．淋洗液中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是合成一些氨基酸、核苷酸等含氮物质 C．可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，在使用该方法时需要注意必须将冷空气充分排除再开始加压 D．将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。发酵过程中，要始终保持密封状态 1．（2024·海南·高考真题）某小组为检测1株粗糙脉孢霉突变株的氨基酸缺陷类型，在相同培养温度和时间的条件下进行实验，结果见表。下列有关叙述错误的是（    ） 组别 培养条件 实验结果 ① 基础培养基 无法生长 ② 基础培养基+甲、乙、丙3种氨基酸 正常生长 ③ 基础培养基+甲、乙2种氨基酸 无法生长 ④ 基础培养基+甲、丙2种氨基酸 正常生长 ⑤ 基础培养基+乙、丙2种氨基酸 正常生长 A．组别①是②③④⑤的对照组 B．培养温度和时间属于无关变量 C．①②结果表明，甲、乙、丙3种氨基酸中有该突变株正常生长所必需的氨基酸 D．①~⑤结果表明，该突变株为氨基酸甲缺陷型 2．（2024·山东·高考真题）酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（　　） A．X→Y→Z B．Z→Y→X C．Y→X→Z D．Z→X→Y 3．（2024·江苏·高考真题）酵母菌是基因工程中常用的表达系统。下列相关叙述正确的是（    ） A．酵母菌培养液使用前要灭活所有细菌，但不能灭活真菌 B．酵母菌是真核细胞，需放置在CO2培养箱中进行培养 C．可用稀释涂布平板法对酵母菌计数 D．该表达系统不能对合成的蛋白质进行加工和修饰 4．（2024·江苏·高考真题）某同学进行下列实验时，相关操作合理的是（    ） A．从试管取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌 B．观察黑藻的细胞质流动时，在高倍镜下先调粗准焦螺旋，再调细准焦螺旋 C．探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理 D．鉴定脂肪时，子叶临时切片先用体积分数为50%的乙醇浸泡，再用苏丹Ⅲ染液染色 5．（2023·重庆·高考真题）垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（    ）    A．压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品 B．添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源 C．X中需要添加合适的菌种，才能产生沼气 D．为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动 二、非选择题 6．（2023·北京·高考真题）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。 (1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供 和维生素等。 (2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明 。 (3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样 后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现 。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。 (4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱） 。 7．（2023·全国·高考真题）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。    回答下列问题。 (1)在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是 。 (2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是 （答出1点即可）。通常，可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有 （答出2点即可）。 (3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是 。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是 。发酵液中的乙醇可用 溶液检测。 (4)本实验收集的淋洗液中的 可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是 。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！2 / 学科网（北京）股份有限公司 $$