第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数(课件PPT)-【勤径学升】2024-2025学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程同步练测（人教版2019）

单击此处添加文本具体内容 第1章　发酵工程 第2节　微生物的培养技术及应用 第2课时　微生物的选择培养和计数 [学习目标] 1.能够运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理。 2.学会通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微生物。 3.掌握测定微生物数量的常用方法。 第2课时　微生物的选择培养和计数 [对应学生用书第13页] 一、选择培养基 1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 　目的菌　⁠生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时 　抑制　⁠或 　阻止　⁠其他微生物的生长。 目的菌　 抑制　 阻止　 第2课时　微生物的选择培养和计数 2.方法：利用 　选择培养基　⁠分离。 （1）选择培养基：在微生物学中，允许 　特定种类　⁠的微生物生长，同时 　抑制或阻止　⁠其他种类微生物生长的培养基。 （2）选择培养基的设计原理：根据某种微生物对某种 　营养物质　⁠的特殊要求或对某些特殊理化因素的 　抗性　⁠进行设计。 （3）典型实例：利用以 　尿素　⁠为唯一 　氮源　⁠的选择培养基分离土壤中分解尿素的细菌。 选择培养基　 特定种类　 抑制或阻 止　 营养物质　 抗性　 尿素　 氮源　 第2课时　微生物的选择培养和计数 二、微生物的选择培养 1.方法：对样品进行充分稀释，然后将 　菌液　⁠涂布到制备好的 　选择　⁠培养基上。 2.稀释涂布平板法的操作过程 （1）系列梯度稀释操作： 菌液　 选择　 第2课时　微生物的选择培养和计数 ①取菌液：取 　0.1 mL　⁠菌液，添加到 　培养基表面　⁠。  ②涂布器灭菌：取出浸在 　酒精　⁠中的涂布器，放在 　火焰　⁠上燃烧，酒精燃尽后， 　冷却　⁠涂布器。 ③涂布过程：用涂布器将菌液 　均匀　⁠地涂布在培养基表面，涂布时可 　转动　⁠培养皿，使菌液分布 　均匀　⁠。 0.1 mL　 培养基表面　 酒精　 火焰　 冷却　 均匀　 转动　 均匀　 （2）涂布平板操作： 3.培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板 　倒置　⁠，放入 　恒温培养箱　⁠中培养，观察。 倒置　 恒温培养箱　 第2课时　微生物的选择培养和计数 三、微生物的数量测定 1.稀释涂布平板法 （1）原理：当样品的 　稀释度　⁠足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个 　活菌　⁠。通过统计平板上的 　菌落数　⁠，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 （2）计数原则：平板上菌落数应在 　30～300　⁠，同一稀释度下，应至少对 　3　⁠个平板进行重复计数，然后求出 　平均数　⁠。 （3）不足：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 　1　⁠个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目 　少　⁠。 稀释度　 活菌　 菌落数　 30～300　 3　 平均数　 1　 少　 第2课时　微生物的选择培养和计数 2.显微镜直接计数法 （1）计数工具：显微镜、细菌计数板或血细胞计数板。 （2）不足：由于计数结果是活菌数和死菌数的总和，所以一般比活菌的实际数目 　多　⁠。 多　 第2课时　微生物的选择培养和计数 四、探究·实践——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.提出问题：如何 　分离　⁠土壤中分解尿素的细菌？每克土壤样品中含有多少分解尿素的细菌？ 2.基础知识： 分离　 组分 含量 提供的主要营养 KH2PO4 1.4 g  　无机盐　⁠ Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 无机盐　 第2课时　微生物的选择培养和计数 组分 含量 提供的主要营养 葡萄糖 10.0 g  　碳源　⁠ 尿素 1.0 g  　氮源　⁠ 琼脂 15.0 g  　凝固剂　⁠ H2O 定容至1 000 mL 水 碳源　 氮源　 凝固剂 第2课时　微生物的选择培养和计数 3.实验设计 （1）土壤取样：先铲去 　表层土　⁠，取距地表 　3～8　⁠ cm的土壤，将样品装入 　纸袋　⁠中。 （2）样品稀释：一般选用 　1×104、1×105、1×106　⁠倍稀释的稀释液进行平板培养。 （3）微生物的培养与观察：一般在 　30～37 ℃　⁠的温度下培养1～2 d，每隔 　24 h　⁠统计一次菌落数目，选取 　菌落数目稳定　⁠时的记录作为结果。  表层土　 3～8　 纸 袋　 1×104、1×105、1×106　 30～37 ℃　 24 h　 菌落数目稳定　 第2课时　微生物的选择培养和计数 4.操作提示 选一选：基于对土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作的理解，选出下列关于实验操作的正确说法： 　①②⑤　⁠。 ①本实验耗时长，应提前制订好计划，提高效率 ②本实验用到的器材比较多，应该对试管和平板做好标记 ③取土样的铁铲和取样纸袋使用前都要经过消毒 ④为了防止杂菌污染，从酒精中取出的涂布器应该直接在酒精灯火焰上充分燃烧灭菌 ⑤过热的涂布器不能直接放在盛有酒精的烧杯中 ①②⑤　 第2课时　微生物的选择培养和计数 5.结果分析与评价 判一判：基于对实验过程的理解，判断下列实验分析的正误。 （1）由于使用了选择培养基，因此本实验不需要设置对照组。（　×　） （2）在同一稀释度下，至少要涂布3个平板。（　√　） （3）当菌落数目稳定时，选取菌落数在30～300的平板进行计数。（　√　） × √ √ 第2课时　微生物的选择培养和计数 （4）应该仔细观察培养基上菌落的形状、大小、颜色等特征，并要做好记录。 （　√　） （5）统计的分解尿素的细菌菌落数目就是样品中分解尿素的活菌数目。（　×　） √ × 第2课时　微生物的选择培养和计数 × × × 第2课时　微生物的选择培养和计数 √ × × 第2课时　微生物的选择培养和计数 [对应学生用书第15页] 知识点一　选择培养基 　　尿素是一种重要的农业氮肥，尿素不能直接被农作物吸收，土壤中的某些细菌将尿素分解成NH3，NH3再转化为N、N等被植物吸收。细菌利用尿素的原理：土壤中分解尿素的细菌合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。 第2课时　微生物的选择培养和计数 　　H2O＋CO（NH2）2 2NH3＋CO2 第2课时　微生物的选择培养和计数 （1）如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 提示：设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。 （2）为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长？ 提示：分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物提供氮源。 第2课时　微生物的选择培养和计数 （3）设计对照实验：如何验证所用的选择培养基没有受到污染？该培养基与普通培养基有哪些相同点和不同点？ 提示：将未接种的选择培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。选择培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。 第2课时　微生物的选择培养和计数 1.选择培养基与鉴别培养基的比较 选择培养基 鉴别培养基 原理 加入不影响甚至促进目标微生物生长，而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质 加入某种指示剂或化学药品（不影响微生物正常生长），使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应 第2课时　微生物的选择培养和计数 选择培养基 鉴别培养基 用途 培养、分离出目标微生物 鉴别目标微生物 举例 培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌 可用伊红—亚甲蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌（若有，则菌落呈紫黑色） 第2课时　微生物的选择培养和计数 2.筛选微生物的三种方法的特点及举例 方法 特点 举例 利用微生物的营养特点进行选择培养 通过控制培养基的营养成分，使某种微生物能生长，其他微生物不能生长 利用只含有尿素一种氮源的培养基，可筛选出分解尿素的细菌 第2课时　微生物的选择培养和计数 方法 特点 举例 利用某种化学物质进行选择培养 在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质对微生物产生的影响，抑制某些微生物，同时选择所需的微生物 加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌 利用培养条件进行选择培养 改变微生物的培养条件 将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物 第2课时　微生物的选择培养和计数 1.原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是 （　　） A.应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用 B.配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基 C.将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上 D.在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种 第2课时　微生物的选择培养和计数 解析　为了筛选、获取能利用多环芳烃为碳源的菌种，首先是取材，应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用，A正确；其次配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基，B正确；然后进行接种，在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，在适宜的条件下进行培养，若将土壤稀释液进行灭菌，就不能筛选出能高效降解原油的菌株，C错误；在选择培养基上形成的菌落，若该菌落周围有分解圈，即为所需菌种，D正确。 答案　C 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 知识点二　微生物的选择培养 　　为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题： （1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是什么？ 提示：检测培养基平板灭菌是否合格。 第2课时　微生物的选择培养和计数 （2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，说出这样操作的目的。 提示：将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。 第2课时　微生物的选择培养和计数 （3）图A和图B中，哪一个表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果？稀释涂布平板法较平板划线法的优点是什么？ 提示：B为稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。稀释涂布平板法还可以用于计数。 第2课时　微生物的选择培养和计数 1.稀释涂布平板法操作注意问题 （1）稀释操作时：每支试管及移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。 第2课时　微生物的选择培养和计数 ③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不接触任何物体。 （3）同一稀释度的样液加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。 （2）涂布平板时 ①涂布器浸在体积分数为70%的酒精中，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后放在火焰上灼烧。 ②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。 第2课时　微生物的选择培养和计数 2.常用微生物分离方法比较 平板划线法 稀释涂布平板法 工具 接种环 涂布器 原理 在数次划线后培养，可以分离到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的群体，即菌落 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个细菌，从而能在培养基表面形成单个细菌发育而来的菌落 特点 方法简单，但不适宜计数 单菌落更易分开，可以计数，但操作复杂 第2课时　微生物的选择培养和计数 平板划线法 稀释涂布平板法 结果 共同点 使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体——菌落 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 知识点三　微生物的数量测定 　　结合教材第18页“探究·实践”中“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”，回答下列问题。 第2课时　微生物的选择培养和计数 （1）据图分析，每克土壤中的菌株数约为多少？ 提示：每克土壤中的菌株数约为1.7×109个。 （2）计数方法有哪些？ 提示：显微镜直接计数法和稀释涂布平板法。 第2课时　微生物的选择培养和计数 （3）结合对照组，分析如何判断培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基怎样筛选出一些菌落。 提示：如果没有接种的培养基上没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。如果接种后的完全培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，说明选择培养基筛选出了一些尿素分解菌。 第2课时　微生物的选择培养和计数 （4）你统计的每克土样中能分解尿素的细菌的菌落数与其他同学统计的结果接近吗？如果差异很大，可能是什么原因引起的？ 提示：不一定。如果是用同一土样进行的操作，数据应该比较接近。如果差异很大，就需要从操作是否规范、培养基配制是否合理等方面查找原因。 第2课时　微生物的选择培养和计数 1.直接计数法和间接计数法的比较 比较内容 直接计数法 间接计数法 原理 利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定体积的样品中微生物的数量 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌 第2课时　微生物的选择培养和计数 比较内容 直接计数法 间接计数法 主要用具 显微镜、细菌计数板或血细胞计数板 培养基 计数数据 菌体本身 培养基上菌落数 优点 计数方便、操作简单 计数的是活菌 缺点 死菌、活菌都计算在内 操作较复杂，有一定误差 第2课时　微生物的选择培养和计数 比较内容 直接计数法 间接计数法 计算公式 每毫升原液含菌数＝每小格平均菌体数×400×10 000×稀释倍数 每毫升原液含菌数＝培养基上平均菌落数×稀释倍数÷涂布液体积 第2课时　微生物的选择培养和计数 2.结果分析与评价 内容 现象 结论 有无杂菌污染的判断 对照的培养皿中无菌落生长 未被杂菌污染 培养皿中菌落数偏高 被杂菌污染 菌落形态多样，菌落数偏高 培养皿中混入其他杂菌 选择培养基的筛选作用 牛肉膏培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目 选择培养基具筛选作用 第2课时　微生物的选择培养和计数 内容 现象 结论 样品的稀释操作 得到3个或3个以上菌落为30～300的平板 操作成功 重复组的结果 若选取同一种土样，统计结果应接近 第2课时　微生物的选择培养和计数 5.在做“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验时，A同学从对应1×106倍的培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述不正确的是 （　　） 第2课时　微生物的选择培养和计数 A.A同学出现这种结果的原因是土样不同 B.可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以验证培养基是否受到污染 C.让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误 D.B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，C选项也有对照实验 第2课时　微生物的选择培养和计数 解析　A同学出现这种结果的原因可能是土样不同，也可能是操作中污染造成的，A错误；A同学的实验结果可能是培养基污染造成的，可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以验证培养基是否受到污染，B正确；让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误，C正确；B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则，D正确。 答案　A 答案　A 第2课时　微生物的选择培养和计数 6.某同学对1×101、1×102、1×103倍稀释液计数的平均菌落数分别是2 760、295和16，则菌落总数为（所用稀释液体积为0.1 mL） （　　） A.2.76×104个/mL B.2.95×105个/mL C.4.6×104个/mL D.3.775×104个/mL 第2课时　微生物的选择培养和计数 解析　为保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数，因此只有295符合要求。其稀释倍数为1×102，所用稀释液体积为0.1 mL，菌落总数为2.95×105个/mL。 答案　B 第2课时　微生物的选择培养和计数 　　　　　　　　　　　　　⁠素养发展　探究应用 　　　　　　　　　　　　　  [情境] 幽门螺杆菌（Hp）感染是急、慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。图中4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基（琼脂含量3.5 g/L）中的生长状况。 第2课时　微生物的选择培养和计数 [探究] （1）②号试管代表Hp的生长状态，由图判断，Hp在什么条件下不能生长？ 提示：在氧气浓度过高或过低时不能正常生长。 第2课时　微生物的选择培养和计数 （2）将Hp接种到pH适宜的培养基中（如表所示），置于37 ℃下培养一段时间后，该培养基中Hp的数量比刚接种时多还是少？主要原因是什么？ 成分 葡萄糖 KH2PO4 MgSO4 NaCl 含量 10 g 0.2 g 0.2 g 0.2 g 成分 CaSO4 CaCO3 琼脂 蒸馏水 含量 0.2 g 5 g 3.5 g 定容至1 L 提示：少。缺少氮源。 第2课时　微生物的选择培养和计数 第2课时　微生物的选择培养和计数 [对应学生用书第20页] 1.判断正误，正确的打“√”，错误的打“×”。 （1）因为土壤中各类微生物的数量不同，所以要获得不同类型的微生物就要按不同的稀释倍数进行分离。（　√　） （2）转换划线角度后需要灼烧接种环再进行划线。（　√　） （3）只要培养基中有尿素就可筛选出分解尿素的细菌。（　×　） √ √ × （4）分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的pH降低。（　×　） × 第2课时　微生物的选择培养和计数 2.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是 （　　） ①加尿素　 ②不加尿素　 ③加琼脂　 ④不加琼脂　 ⑤加葡萄糖　 ⑥不加葡萄糖　 ⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐 A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧ C.①③⑤⑧ D.①④⑥⑦ 第2课时　微生物的选择培养和计数 解析　尿素和硝酸盐都能作为氮源，而培养尿素分解菌的培养基应是以尿素为唯一氮源的固体培养基。因此培养基中应不加硝酸盐，加入尿素和琼脂。葡萄糖作为碳源，也需要加入。 答案　C 第2课时　微生物的选择培养和计数 3.平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是 （　　） A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释 B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划线，接种在固体培养基表面 C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养 D.都能在培养基表面形成单个的菌落 第2课时　微生物的选择培养和计数 解析　平板划线法不需要进行梯度稀释，平板划线法是将菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线进而稀释菌液，A、B错误；稀释涂布平板法先进行梯度稀释，再将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面，C错误；平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落，D正确。 答案　D 第2课时　微生物的选择培养和计数 4.下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是 （　　） A.采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数 B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌往往会形成一个菌落 C.为了保证结果准确，一般采用菌落密度较大的平板进行计数 D.在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果 第2课时　微生物的选择培养和计数 解析　采用稀释涂布平板法获得的菌落有可能是由多个细菌形成的，所以往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数为30～300间的平板进行计数，C错误；设计实验时，一定要至少用三个平板做重复实验，才能增强实验的说服力和准确性；分析结果时，一定要考虑所设置的重复实验的结果是否一致，差别不大时，取平均值作为统计结果，D正确。 答案　C 第2课时　微生物的选择培养和计数 5.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。 第2课时　微生物的选择培养和计数 （1）若取土样6 g，应加入 　　　　⁠mL的无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液。将103～107倍的稀释液分别吸取 0.2 mL加入固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为 　　　　　　　　⁠。将接种的培养皿放置在37 ℃恒温培养箱中培养24～48 h，观察并统计菌落数，结果如下表，其中 　　　　⁠倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为 　　　　　　⁠。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目 　　　　⁠（填“低”或“高”）。  第2课时　微生物的选择培养和计数 稀释倍数 103 104 105 106 107 菌落 数/个 1号平板 478 367 277 26 5 2号平板 496 354 261 20 8 3号平板 509 332 254 29 3 第2课时　微生物的选择培养和计数 （2）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　⁠。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1 mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设5个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为 　　　　　　　　⁠个/mL。  第2课时　微生物的选择培养和计数 解析　（1）根据题意分析，需要稀释10倍的土壤溶液，因此应该将6 g土样加入54 mL的无菌水进行配制；将103～107倍的稀释液分别吸取0.2 mL加入固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上；估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30到300之间的平板，分析表格中数据可知，稀释倍数为105的平板菌落数在这一范围；每克土壤中的菌落数为（277＋261＋254）÷3×105÷0.2÷6＝2.2×107个。稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于菌落之间会相互重叠，因此测定的菌落数往往比活菌的实际数目低。 第2课时　微生物的选择培养和计数 解析　（2）用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌时，为了将聚集的菌体逐步稀释以便获得（不连续）单个菌落，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。若以一个大方格（体积为0.1 mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设5个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度＝45×5÷0.1÷10－3×102＝2.25×108个/mL。 答案　（1）54　稀释涂布平板法　105　 2.2×107个　低 （2）将聚集的菌体逐步稀释以便获得（不连续）单个菌落 2.25×108 第2课时　微生物的选择培养和计数 判断正误，正确的打“√”，错误的打“×”。 (1)选择分解尿素的细菌的培养基为液体培养基。( ) (2)用平板划线法培养计数，应选择菌落数在10～100的平板。( ) (3)统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数目。( ) (4)统计菌落数目的理论依据是一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。( ) (5)基本培养基中可能不含有氮源，但一定含有碳源。( ) (6)在用涂布器涂布平板时，为了操作方便可完全打开培养皿盖。( ) 2．(吉林实验中学月考)现有两种培养基配制时所加的成分及含量(如下表)，下列有关判断正确的是(　　) 成分 甲培养基 乙培养基 KH2PO4 0.02% 0.02% MgSO4·7H2O 0.02% 0.02% NaCl 0.02% 0.02% Na2SO4·2H2O 0.01% 0.01% CaCO3 0.5% 0.5% 葡萄糖 0.5% － 纯淀粉 2% － 水 ＋ ＋ A．甲培养基适于分离酵母菌，乙培养基适于分离真菌 B．甲培养基适于分离异养型固氮菌，乙培养基适于分离自养型固氮菌 C．甲培养基适于分离自养型固氮菌，乙培养基适于分离异养型固氮菌 D．甲、乙培养基都不适于分离固氮菌 解析　分析题表中培养基的成分可得到下表，即B正确。 培养基 成分特点 可以生长的微生物 甲 含有碳源、不含氮源 异养型固氮菌 乙 不含碳源、不含氮源 自养型固氮菌 答案　B 3．(湖北武汉期中)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液做显色处理，结果如图2所示。下列选项错误的是(　　) A．过程①②合称为稀释涂布平板法 B．甲、乙试管中的液体均为选择培养基 C．Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法 D．图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种 解析　根据Ⅰ号培养基上的菌落均匀分布可知，过程①②为稀释涂布平板法，A正确；甲、乙试管中的液体用于样品稀释，应为无菌水，B错误；由Ⅱ号培养基上的划线区域可知，Ⅱ号培养基上的接种方法是平板划线法，C正确；淀粉与碘液反应呈蓝色，能产生高温淀粉酶的嗜热菌产生的淀粉酶催化淀粉水解，使其周围不显蓝色，因此，周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，D正确。 答案　B 4．(广东卷)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是(　　) A．a点时取样、尿素氮源培养基 B．b点时取样、角蛋白氮源培养基 C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基 D．c点时取样、角蛋白氮源培养基 解析　研究目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够高效降解角蛋白，所以在c点取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养，所以D正确，A、B、C错误。 答案　D $$