内容正文:
第三章基因工程
第1节重组DNA技术的基本工具
1、基因工程又称为】
操作对象是
原理是
优
点
2、不同生物是DNA可以连接的原因是
布
同的基因在不同生物细胞内的表达出的蛋白质
(相同/不同),原因是
3、基因工程的基本工具是
(1)限制性内切核酸酶简称
作用是
(主要/全
部)是从
生物中分离纯化出来的。它们的特点是①只能识别
分子的
序列,该序列为
序列,并使该序列中每一条链」
的
脱氧核苷酸之间的
键断开;②大多数限制酶的识别序列由
个核苷酸组成:③切割的结果是产生
末端和
末端。
(2)DNA连接酶的作用是将
连接起来,恢复」
键。
来源有①
称为
:②
称为」
它们的不同点是
相同点是
(3)载体的作用是
种类有
常用的载体是
其化学本质是
分子,
它们存在于
细胞的
中(细胞结构)。质粒适合做载体的原因是:
①具有
位点,供
②具有
,便于
③在受体细胞中能
或
随受体
DNA同步复制。天然质粒
(能不能)直接使用,
(需要/不需要)经过人工改
造。载体对受体细胞不能对受体细胞有害,或
(进入/不进入)到除受体细胞外的其
他生物细胞中。
4、比较与DNA有关的酶
项目
DNA连接酶
限制酶
DNA聚合酶
解旋酶
DNA酶
作用部位
作用对象
作用结果
5、限制酶不切割细菌本身DNA的原因是
实验:DNA的粗提取与鉴定
1、DNA粗提取的原理
:DNA的鉴定原理
2、实验步骤及注意事项
第一步:研磨释放DNA。研磨液的作用是
研磨的作用是
研磨时间不宜
,加入
酶,有助于充分研磨。
第二步:获取含DNA的上清液。方法一:用
过滤,将滤液放在
(温度)冰箱
中几分钟,取
:方法二:将滤液
,取
低温放置几分钟的作用
第三步:析出DNA。在上清液中加入体积相等的、体积分数为
的
溶
液。
(该溶液的作用是
几分钟,取
或
后,取
第四步:鉴定DNA。
(需要/不需要)设置对照组,对照组中加入的溶液是
2mol/LNaCl的作用是
二苯胺的作用是
使用时应
并用
瓶存放。鉴定结果的蓝色深浅与
有关。
3、实验结果不明显的原因:①
②
4、该实验
(能/不能)用哺乳动物成熟的红细胞作材料,原因是
(能/不能)用鸡的红细胞作材料。
5、用动物细胞作材料,
(需要/不需要)研磨,可以用
方法,使
细胞破裂。
6、DNA在
mol/LNaCl中溶解度最低,反复利用不同浓度的NaCl溶液来溶解、析出DNA
的目的是
我的笔记:
第二节基因工程的基本操作程序
基因工程的操作步骤包括
其中的核心步骤是
第一步
1、目的基因主要是指
的基因。抗虫棉的目的基因
是
基因,简称
基因,是从
(生物)中获取的,破
坏磷翅目昆虫的
杀死棉铃虫。原理是:当
被分解为多肽后,与害虫肠
上皮细胞的
结合,导致
穿孔,使害虫死亡。这种蛋白只有
在某类昆虫肠道的
环境中才能表现出毒性,对人和牲畜不会产生影响的原因是
2、筛选目的基因较为有效的方法是从
中进行筛选。
3、获取目的基因的方法有(1)
(2)
(3)
(4)
4、PCR的全称
、
原理
操作环境:PCR扩增仪中需
有含」
伤
液,该离子的作用是
该液体的作用是
5、PCR的结果是
优点是
6、PCR与体内DNA复制都需要的五大条件
子链的延伸方向都是
原因是
7、PCR的过程分为
三步。
(1)变性:温度
含义
(2)复性:温度
含义
(3)延伸:温度
含义
8、引物是指
,一般含」
个核苷酸。设计引物时的要求有①】
②
:③
PCR所需的引物有
种,分别与两条模板链的
端结合。
9、PCR与DNA体内复制的比较
DNA体内复制
PCR
场所
解旋方式
酶
特点
是否需要ATP
温度条件
结果
10、PCR对目的基因以
形式扩增。
11、用」
方法对PCR的扩增产物进行鉴定。
第二步
12、构建基因表达载体的目的
13、一个基因表达载体的组成包括(1)
、(2)
(3)
(4)
(5)
受体细胞不同,基因表达载体构建方法
14、启动子是
片段,位于
,作用是
15、终止子是
片段,位于
作用是
一个
(基因/DNA)有一个启动子和终止子。
16、人工构建诱导型启动子的作用是
17、基因表达载体的构建过程:(1)先用
切割
:(2)用
或
切割
(3)用
将
拼接到
处
第三步
18、转化是指
19、将基因表达载体导入植物细胞方法有①
,②
必
用的方法是
。使用农杆菌可以实现转化的原理是
导入动物细胞的方法有①
②
导入微生物常用的手段是
使细胞处
于一种
状态,称为
细胞。
第四步
20、检测目的基因是否导入受体细胞是
水平上的,包括:
(1)
检测方法有①
原理是
②
原理是
(2)
检测方法有①
②
(3)
检测方法是
,原理是
21、鉴定是
水平上的。方法是
我的笔记: