1.2微生物的培养技术及应用第1课时课件-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

微生物的培养技术与应用 1 微生物 细菌 真菌 微生物的基本培养技术 确保其它微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来 培养基 无菌技术 提供合适的营养和环境条件 培养基的配制 按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。 注：（1）固体培养基中加入琼脂，琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。 指微生物生存的环境和营养物质 培养基 1.定义 2.分类 注：（2）琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一。 2.用途 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物营养。 培养基的配制 培养基 3.营养物质 （1）基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 ①碳源： 无机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 有机碳源： 葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ②氮源： 无机氮源： NH4＋、NO3-、NH3等 有机氮源： 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等 注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 ③无机盐： Ca、K 、Mg为大量元素 Zn、Cu、Mn、Co、Mo等微量元素 培养基的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。 培养基的配制 培养基 3.营养物质 （2）还需满足微生物对 pH、特殊营养物质、氧气的需求 微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊条件 添加维生素 PH调至酸性 PH调至中性或微碱性 无氧 培养基的配制 培养基 组分 含量 提供的主要营养物质 牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等 蛋白胨 10g 氮源和维生素等 NaCl 5g 无机盐 水 定容至1000mL 水 注：1.对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源。即有些化合物作为营养要素成分时并非单一方面的作用。 注：2.并非所有微生物都需添加特殊营养物质 灭菌技术 项目 条件 结果 常用方法 应用范围 消毒 较为温和的物理、化学或生物等方法 仅杀死物体表面或内部一部分微生物 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源 灭菌 强烈的理化方法 杀死物体内外所有的微生物 灼烧灭菌法 接种工具 干热灭菌法 玻璃器皿、金属用具 湿热灭菌法 培养基及容器 微生物的纯培养 由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。 1.概念： 2.步骤 （1）配制培养基 （2）灭菌（培养基和器具） （3）微生物接种 （4）分离 （5）恒温箱中培养 酵母菌的纯培养 菌落： 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。 微生物群 分散或稀释 单个细胞 单个菌落 繁殖 方法： 平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面。 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。 接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次。 酵母菌的纯培养 酵母菌的纯培养 步骤 1.制备培养基 2.灭菌 什么时候调PH? 先调PH，再灭菌 酵母菌的纯培养 步骤 3.倒平板 冷却至50℃左右 平板倒置 既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，又可避免培养基中的水分过快的蒸发 灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基 用手触摸，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手 倒平板 不能，空气中的微生物可能在皿盖、皿底之间的培养基上滋生 纯化大肠杆菌 火焰旁冷却接种环，打开菌液试管的棉塞。 将菌种试管口通过火焰 将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。 接种环在火焰上灼烧直至烧红 将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。 将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。 将平板倒置放在培养箱中培养。 平板划线法 避免接种环上可能存在的微生物污染菌种 杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 酵母菌的纯培养 酵母菌的纯培养 探究 •实践 P13 【答案】在未接种的培养基表面应该没有菌落生长，如果有，说明培养基被杂菌污染。 【提示】如果观察到不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因造成的。 在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明了什么？ 2. 在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了单菌落？这些菌落的颜色、形状和大小是否一致？如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？ $$